Summary
Reproducable deneysel hayvan modelleri intrakranial anevrizma (IA) Endovasküler tıkanıklığı tedavisi için tasarlanmış roman embolizasyon malzemelerin test etmek için ihtiyaç vardır. Bir sıçan hayvan modelinde saccular Anevrizmalarının destekli stent embolizasyon için güvenli ve standart cerrahi tekniği geliştirmek mevcut çalışma amaçlamaktadır.
Abstract
Armamentarium teknikleri kafa içi Anevrizmalarının Endovasküler tedavisinde kullanılabilir sabit progess stent ve akış diverters gibi roman embolizasyon malzemeler test etmek için uygun fiyatlı ve reproducable deneysel hayvan modelleri gerektirir. Mevcut projenin amacı güvenli, hızlı, tasarımı oldu ve stent için standart Cerrahi teknik saccular Anevrizmalarının embolizasyon bir sıçan hayvan modelinde yardımcı oldu.
Saccular anevrizma inen aorta gelen bir arter greft dan oluşturulmuştur. Anevrizma microsurgically uç-yan anastomoz için bir syngenic erkek Wistar sıçan tartma infrarenal abdominal aort yoluyla nakledilen > 500 g. Anevrizma anastomoz, anevrizma embolizasyon balon Genişletilebilir magnezyum stent (2.5 mm x 6 mm) kullanılarak gerçekleştirildi. Stent sistem retrograd değiştirilmiş Seldinger tekniği kullanarak alt karın aortu tanıtıldı.
6 hayvanlar pilot bir dizi Toplam 67 sıçan kurulan standart işletim yordamlar göre ameliyat. Ameliyat süresi, ortalama anastomoz zaman ve ortalama arter ponksiyon sitesinin saat 22 dk, 26 ± edildi 167 ± dikiş demek 6 dk ve 11 ± 5 dk, anılan sıraya göre. Mortalite oranı % 6 oldu (n = 4). Hastalık oranı % 7.5 yapıldı (n = 5), ve -stent trombozu 4 durumlarda bulundu (n = 2 erken, n = 2 stent trombozu sonlarında).
Standart stent tıkanıklığı saccular kenarındaki Anevrizmalarının fareler - düşük oranda morbidite ve mortalite ile fizibilite sonuçları göstermektedir. Bu stent embolizasyon yordamı stent roman kavramlarını çalışma fırsatı birleştirir veya aygıt hem hem şifa moleküler yönlerini akışı yönlendirici tabanlı.
Introduction
Subaraknoid kanama nedeniyle bir rüptüre intrakranial anevrizma yüksek ölüm oranı ve birçok ölüm yoksul nörolojik sonucu ile ilişkilidir. Şu anda IA doldurmak için iki genel yaklaşım vardır: (anevrizma operatif pozlama gerektirir) her iki mikrocerrahi alınma, veya Endovasküler tıkanıklığı. Daha az invaziv Endovasküler bobin tedavi dar boyunlu IA (özellikle de posterior sirkülasyon1,2) biraz daha düşük morbidite ile ilişkilendirilecek gösterildiği gibi Endovasküler tedavi seçenekleri olmuştur birçok Nöroşirürji merkezlerinin tercih edilen yöntemidir. Çok sayıda aygıt Endovasküler Tedavisi belirtileri genişletmek ve hasas sonra IA Rekürrens ana sınırlamayı aşmak amacıyla geliştirilmiştir. Kafa içi restenoz gibi onlar neo-endothelization için bir iskele olarak hizmet ve fıtığı önleme, Kangal yanı sıra ana arter korumak ve geliştirmek intraluminal intraaneurysmal trombozu nedeniyle bu sınırlamalarının üstesinden gelir özellikle umut verici giriş kan akımı azalması. Düşük maliyetli bir hayvan modelinde roman kafa içi restenoz çalışmaya gerek yoktur; makroskopik ve moleküler düzeyde.
Bu çalışmada güvenli, hızlı tasarımı oldu ve Cerrahi teknik stent uygulaması zaten kurulmuş saccular anevrizma modelinde fareler3,4,5için standart. Mevcut projesinde, biyolojik olarak parçalanabilen magnezyum stent rolü değerlendirildi.
Subscription Required. Please recommend JoVE to your librarian.
Protocol
Erkek Wistar 592 g (±50 SD) ortalama ağırlığı ve 20 hafta yaş ortalaması ile rats, 22-24 ° C ve on iki saat açık/koyu döngüsü, oda sıcaklığında hayvan imkanları ile yer ücretsiz musluk suyu ve cips diyet giriş. Hayvanlar insanlar kurumsal yönergelere uygun olarak bakım aldı. Deneyler hayvan Canton Bern, İsviçre (olmak 102/13) Bakımı Komitesi tarafından kabul edildi. Biz kesinlikle hayvan araştırma önerilerini takip: In Vivo deneyler (varış yönergeleri) raporlama.
1. laboratuar malzemeleri, sarf malzemeleri, cerrahi aletler
- Sessiz, aseptik ameliyathane kullanmak ve korumak 23 ± sıcaklık 3 ° C.
- Cerrahi masa temiz ve dezenfekte kolay bir yüzeyle kullanın ve bu ameliyat örtüsü ile kapsar. Masa üstü cerrahi mikroskop bir kamera ile ameliyat ve öncesi ve ameliyat sonrası hayvan ısıtmak için bir kızılötesi ışık kaydetmek için kullanın.
- Duvardan anevrizma oluşturmak ve stent implant için aşağıdaki tüketim malzemeleri alın.
- Küçük ve büyük steril selüloz ve gazlı bez bezlerden, 18 G ve 26 G içi boş iğne ile şırıngalar ve künt uçlu iğne sulama/hacim değişimi için elde edilir.
- Absorbe olmayan 10-0 ve 9-0 mikro dikiş, absorbe olmayan 6-0 ve 5-0 dikiş ve absorbe 3-0 dikiş gibi suture malzemeleri alın.
- % 0.9 izotonik Sodyum Klorür çözüm sulama/hacim değişimi için ve ameliyat sırasında aletlerin temizliği sağlamak için elde
- Stent implant cihazlar elde etmek: ponksiyon iğne 19G, hidrofobik kılavuz tel, 4 Fogaty kılıf ve balon dilatasyonu için bir şişirme şırınga.
- Aşağıdaki tüketim malzemeleri anevrizma duvar decellularization için elde edilir:
- Mikrotüpler anevrizma depolama-24 ° c ve kimlik için etiketleri yanı sıra tam kimyasal arıtma anevrizması emin olmak için bir laboratuvar shaker alın.
- % 0.1 Sodyum Lauryl Sülfat (SDS) ve fosfat tamponlu tuz (PBS) uygun decellularization işlem için elde edilir.
- Standart cerrahi cihazlar edinin:
- Kaba cerrahi aletler elde etmek: Cerrahi makas, yumuşak doku forseps, yumuşak doku yayıcı, düzgün ve eğimli forseps, üç sivrisinek kelepçeler, iğne bağı.
- Mikro cerrahi aletler elde etmek: düz ve eğri mikro-makas, düz ve eğri mikro-forseps ve dört geçici damar mini kliple ilgili damar klip uygulayıcıları.
2. anestezi
- Fareyi bir gaz odasına yerleştirin ve isoflurane ve oksijen (%4 isoflurane) karışımı ile anestezi. Hayvan bilincini kaybeder kadar inhalasyon korumak.
- İmzalat hayvan gaz odasından kaldırın ve medetomidine hidroklorid (0.5 mg/kg) ve ketamin hidroklorür (50 mg/kg) ağırlık adapte karışımı intraperitoneally oluşan kesin anestezi enjekte (sağdaki enjekte edilerek veya sol alt karin).
- Anestezi derinliği ile fare yanıt vermiyor ve tamamen imzalat olduğunu doğrulamak için zararlı bir ayak çimdik ameliyat sırasında tanımlanmış aralıklarla izlemek. Anestezi ketamin ve medetomidine ağırlık adapte mayi enjeksiyon ile ayak-çimdik refleks, readminster ise. Yeterli anestezi karın boşluğu açarak ve uç-yan anastomoz ve stent ekleme gerçekleştirerek önce gereklidir.
- Mayi anestezi yürürlüğe kadar etkili bir şekilde ameliyat öncesi ısınma geniş ameliyat sırasında soğutma önler kızılötesi Isıtma lambası altında fare yerleştirin.
3. cerrahi hazırlık ve fare konumlandırma
- Tartmak iri fare, üst solunum yolları güvenliğini sağlamak için dil ayıklamak ve kornea kuruma önlemek için göz merhem uygulamak.
- Küçük bir yıkanabilir kurulu fare düzeltmek ve herhangi bir baskı ya da belgili tanımlık paws çekiş gücü önlemek için yapışkan bant kullanın.
- Küçük bir hayvan tıraş makinesi ile operasyonel alan köstebeğiyle tıraş ve cerrahi bölge dezenfekte.
- İki kalın işaretleri koyun 2-3 cm kadar bel ve thoraco-lomber lordoz mümkün olduğunca neden hayvan arkası altında ayrı. Bu retroperitoneum daha iyi Fuar ve stent daha kolay uygulama sağlar.
- Fareyi bir steril diyafram örtüsü ile kapak ve çalışma mikroskop altında yerleştirin. Hayvan yanında iki destekler deneyci'nın eller için a daha rahat durum kolaylaştırmak için ayarlayın.
- Yıkama ve ellerini dezenfekte ve steril eldiven takmışım. Özellikle stent implantasyonu için mevcut bir yardımcınız olabilir yararlıdır.
- Laboratuvar hayvanları6,7için öneriler göre aseptik koşullar altında ameliyat.
4. anevrizma greft hasat
- Genel anestezi altında karın xiphoid işleminin altında açın. İlk olarak, deriyi midventral satırda keskin makas ile kesme ve cilt kas ayrı. Sonra karın kas kesmek ve diyafram göğüs boşluğuna ekleme noktasında karaciğer yukarıda tanımlar.
- Göğüs boşluğuna erişmek ve kaburga ile kesmek için keskin makas ile diyafram ve bağ dokusu kesmek büyük bir buçuk santimetre sağ ve sol tarafındaki sternum makas.
- Göğüs kafesi açık olduğunda, ketamin hidroklorür (120 mg/kg) İntrakardiyak aşırı dozda fareyle kurban.
- Sol akciğer seferber ve sağ tarafına bir selüloz bez yardımı ile düzeltebilirim.
- Uygun pozlama aortik ark azygos ve sol beyin caval damarlar aort yukarıda iki sivrisinek kelepçeler ile kelepçe ve arasında kesin. Kelepçeler retrograd Venöz kanama önlemek için kesme gemi sonlar bırakın. Kelepçeler kalp ve damarlar aortik ark daha iyi erişmesi ve aort azalan yan taşımak için kullanın.
- Mikro-makas ve mikro-Forseps ile mikrocerrahi tekniği kullanarak aort incelemek.
- Yukarı doğru azalan bölümünden aort aort için izleme ve sol subklavyan arter ve aort bırakarak ilk interkostal arter tanımlayın.
- Bir sigara-absorbe 6-0 dikiş sadece ilk interkostal arter kafatası yerleştirin ve bağla şunu. Proksimal sonunda aort sağ sol subklavyan arter kökeni sonra kesilmiş. Tek bir dik usulsüzlük vasküler greft kesme kenarında olasılığını düşürür gibi kesmek kullanmak önemlidir. Son olarak, bir kesim hemen altındaki bağ ile yeni oluşturulan anevrizma kaldırın.
- Anevrizma ölçme sonra hemen alıcı fare içine greft nakli.
5. anevrizma oluşturma ve stent uygulaması
- Cerrahi yaklaşım
- Cilt kesi distal karın keskin makas ile başlarsınız ve bir midventral kesim ilâ 1 cm xiphoid süreci distal konumlandırın. Dikkatlice deri ve subkutan doku kas ayırın. Linea boyunca karın kasları açmak için aynı makas kullanın alba. Forseps intraabdominal organlar zarar görmesini önlemek için kesme sırasında kas artırmak için kullanın.
- Laparotomi, küçük bağırsak, caecum ve iki nokta üst üste sağa taşır. Kendini tutan bir Retraktörü karın boşluğu açık tutmak ve organları gidermek için kullanın. Cerrahi alanından kaldırmak ve Retroperitonal pozlama geliştirmek için karaciğer altında bir bez koyun.
Not: yağ kitlesi görünümü kapatıyor, o karın boşluğuna yerleştirilen olabilir ve o kapsamlı sıvı tükenmesi önlemek için ıslak gazlı bez ile kaplı. - Mesane infrarenal abdominal aort maksimal pozlama elde etmek için boş. Bu mesane duvar için hafif basınç yoluyla da başarılı veya mesane boşalması 26 G içi boş iğne kullanarak olabilir.
- Mesane ve testis dehidratasyon ve kapsamlı düzenleme ameliyat sırasında bir ıslak steril selüloz bez ile kapsayan tarafından korumak.
- İki kör Forseps ile aort kapsayan parietal Periton açın. Hemen hemen saydam üreter, testis damarlarının ve superior Mezenterik arter ile ilgilen. Parietal Periton açık olduğunda, abdominal aort bu altında bulunur. Bu kez Yağ dokusundan ince bir tabaka ile kaplıdır.
- Geminin uzun bir uzunluğu görünene kadar çevredeki Retroperitonal FAT'tan serbest bırakmak için iki mikro-forseps kullanarak abdominal aort bir künt diseksiyon ile başlayın. Mikro-makas ve mikro-forseps kullanarak keskin diseksiyon ile devam edin. Sadece adventitia gemi duvara zarar görmemesi için bu yordamı sırasında kavramak.
- Abdominal aort
Not: cerrahi strateji açıklaması kolaylaştırmak için biz karın aortu üç farklı kesimleri (şekil 1) içine bölünmüş.- Diseksiyon teknik olarak daha zordur distal kesiminde - başlatın.
Not: Distal segment iliyak çatallanma ve iliolumbar ven ve Arter arasında bölünmüştür. Bu segment için distal abdominal aort ponksiyon ve stent ekleme noktası olarak hizmet vermektedir.- Mikro-makas ve mikro-forseps üzerinden V. cava ile aort Arteryel adventitial katman iki gemi arasında yanında keserek parçalara.
Not: Küçük bel arterlerin seyrek gelen bir segmental damarları abdominal aort dorsal yüzeyinden ortaya ve yordamı ile müdahale. Koagülasyon ve kesme damarlarının damar dikiş sırasında retrograd sızmaya önlemek için gereklidir. - Doğru iliolumbar arter tanımlamak; Aslına bu segmentte önemli ölçüde değişebilir ama en sık sol meslektaşı daha Kaudal bulunur.
Not: Bu durum nadiren planlı stent ekleme ponksiyon site arter ile müdahale, ancak bir delik noktası daha uzağa kaldırılan veya - en uç anatomik değişkenlik için - bir damar ligasyonu değil iliolumbar arter gerektirebilir. - Bu segmentteki aort hazırladıktan sonra bir küçük renkli lastik pedi Arteryel ponksiyon yapılacağı yeri belirtmek için taşıyıcıyı koyun. Gemi bu segmentteki germe kaçının. Damar duvarındaki gerilme streç sırayla son yeniden engel Arteryel ponksiyon takip kontrolsüz gemi kopmalara neden. Bu nedenle tüm yapışıklıklar arter ponksiyon sitesinde üzerinden aort serbest bırakmak ve gazlı bez bezlerden aort altında herhangi bir yerleşimin önlemek önemlidir.
- Mikro-makas ve mikro-forseps üzerinden V. cava ile aort Arteryel adventitial katman iki gemi arasında yanında keserek parçalara.
- Aort V. cava orta segmentteki üzerinden daha önce açıklandığı gibi aynı şekilde incelemek.
Not: Orta sınıftaki iliolumbar ven ve Arter ve renal ven arasında bölünmüştür. Bu segment anevrizma implantasyon ve stent konumlandırma için kullanılır.- Superior Mezenterik arter abdominal aort üzerinden Aslına, tanımlamak ve tüm işlemler sırasında onu korumak.
- Ligate veya bu bölümde de aort dorsal yüzeyinden arterler koagüle. Lumbosakral pleksus hasarı önlemek için yeterli kızarma emin olun ve kısa koagülasyon zaman dikkatli olun.
- Bu segmentteki aort diseksiyon takiben stent konumunu oluşturmak. Stent mümkün etkileşimler karın gemiler ile anevrizma ve stent son konumu tanımlamadan önce tahmin.
- Anevrizma ve stent konumunu kurulduktan sonra gazlı bez ve renkli lastik pedi aort daha iyi maruz altında küçük bir parça yerleştirin.
- Son olarak, abdominal aort proksimal segmentin incelemek. Bu teknik olarak distal ve orta kesimleri aynı yordamı daha kolaydır.
Not: Proksimal segmentin proksimal renal ven bulunur. En proksimal geçici küçük uygulama Seldinger tekniği stent implantasyonu sırasında kullanılır.- Parietal Periton açtıktan sonra gemilerin iki künt Forseps ile ayırın.
- Dorsal etrafını dolaşma kavisli, künt Forseps ile aort renkli lastik pedi altına o daha sonra proksimal küçük uygulama kolaylaştırmak için küçük bir parça yerleştirin.
- Diseksiyon teknik olarak daha zordur distal kesiminde - başlatın.
- Anevrizma oluşturma
- Proksimal tarafından gemi sağlam bir dolgu emin olmak için takip distal klempi uygulayarak orta segmentte aorta pens ve sonraki arteriotomy kolaylaştırır.
- Planlanan anastomoz sitesinde adventitia kaldırın. Adventitia mikro-Forseps ile kavramak ve damar duvar yaralanmasına olmadan mikro makasla dikkatle kesin.
- Küçük bir parça damar duvarının mikro-Forseps ile Asansör ve mikro-makas ile doğrusal bir kesi gerçekleştirmek. Arteriotomy anevrizma üs olarak aynı boyutta olması gerekir.
- Her iki yönde arter künt uçlu iğne salin ile yıkayın.
- Absorbe 9-0 sütür ile gerçekleştirilir, uç-yan anastomoz ilk iki dikiş arteriotomy proksimal ve distal sonuna yerleştirin. Dikiş sırasında mümkün olduğu kadar az damar duvar kavramak ve dikiş damar duvar her katmanı geçmek emin olun. Onlar sadece daralma arter önlemek için aort ventral parçası yakalamak gerekir; hangi stent uygulaması sırasında gemi kopmalara neden.
- Belgili tanımlık kesme kesintiye uğramış dikiş ile kapatın. Dikişi sol taraftaki başlatın ve diğer tarafı devam etmeden önce bitirelim. Arka duvarına sona erdiğinde, anastomoz yanlış yerleştirilen dikiş için endoluminal bölümüne göz atın.
Not: Bu noktada, bobin uygulaması gibi farklı içi aneurysmal tedavi tanıttı. - Anastomoz bitirdikten sonra distal klempi önce kaldırın. Büyük geri tepme kanama durumunda ilave bir dikiş yerleştirin. Küçük kanama kaynağına gazlı bez küçük bir parça yavaşça basarak sızmaya yönetin. Yağ dokusu veya daha önce elde edilen bir adventitial katman de yararlı olabilir. Şimdi proksimal kelepçe çıkarın.
- Anastomoz sitesi durulayın ve bağ kalan uçları anevrizma kubbe kesti.
- Distal abdominal aort a_ılabilinirse doğrudan sağım testi ile gözlemlemek.
- Aort tüm kesimlerinin yaklaşık stent ekleme önce aynı yükseklikte olması gerektiği gibi renkli lastik pedi altında küçük gazlı bez çıkarın. Stent struts stent yeni oluşturulan anevrizma altında konumlandırma görünür olması gerekir gibi yağ dokusu ile anastomoz dikiş hatları kapsayan kaçının.
- Uzamış iskemi zarar önlemek için reperfüzyon proksimal aort sıkma ve stent ekleme ile devam etmeden önce 10 dakika için izin verir.
- Mesane stent implantasyonu önce boş.
- Stent implantasyonu
Not: Aşağıdaki adımları, özellikle son stent enflasyon için yandan bir yardımcınız olabilir yararlıdır.- Küçük arter ponksiyon sitesi distal segmentinde ilk. Distal klempi ile başlar ve proksimal ile izleyin. Gevşek bağ dokusu ve (kısmen) mikro-makas ile kesme delik sitesinde adventitia kaldırın.
- Büyük bir geçici kelepçe büyük atardamar ponksiyon sırasında kanama önlemek için proksimal segmentin yerleştirin.
- Arteryel ponksiyon distal kesiminde bir 18 G ponksiyon iğnesi gerçekleştirin. Küçük bir parça gemi duvardaki delik kolaylaştırmak ve her iki aort damar duvarları piercing riskini azaltmak için mikro-Forseps ile kaldırın.
- Sifonu iyice ponksiyon künt uçlu iğne kullanarak her iki yönde salin ile takip arter.
- Hidrofobik kılavuz tel ponksiyon siteye ekleyebilir veya proksimal klemp distal kesiminde kaldırabilir.
- Proksimal segmentinde kelepçe düzeyine kadar kılavuz tel ileri itin. Teflon uygulayıcıya göre önceden eklenmiş rehber tel kullanarak Seldinger tekniği yerleştirin.
Not: onlar var bir üstün kavrama ve daha iyi manuel kontrol sağlamak hidrofobik kılavuz teller hidrofilik olanlardan daha daha uygundur. Teflon Intoducer polipropilen Intoducer eklemek daha kolay olduğu için onlar ponksiyon sitesinde kontrolsüz rüptürü riskini azaltır. - DİLATÖR yukarı sadece Proksimal Anastomoz sitesine itmek, kılıf yaklaşık yarım santimetre aşağıda yer almaktadır.
- Çıkarmak belgili tanımlık kılavuz tel ve DİLATÖR ve 3'lü stopcock gereksiz kan kaybını önlemek için kapalı olun.
- Balon sistem vakumlama sonra 4 Fogarty uygulayıcıya kullanarak absorbe magnezyum stent yerleştirin. Daraltılmış damar endotel strut kaynaklı zararlardan korumak ve yürüyüşü daha önce yerleştirilmiş intraaneurysmal dolaşmış olma riskini azaltmak için uygulayıcıya aygıtı çıkarmadan önce baskı bir bar ile balon şişirmek malzeme (Şekil 2).
- Stent son konumunda olduğunda dikkatle 8-9 Çubuklu balon şişirmek. Sürekli olarak mümkün almak için uç-yan anastomoz dikiş kontrol edin.
- Sonra yeterli stent genişleme ve aort damarı duvara yapışma, havasını boşaltmak ve balon kaldırın.
- Retrograd proksimal patent arterler sızmaya-ebilmek var olmak önemli gibi uygulayıcıya kaldırırken, hemen uygulama ponksiyon siteye proksimal için Eldeki geçici bir klibi var.
- Geçici kelepçe proksimal segmentinde proksimal klip distal kesiminde koyduktan sonra kaldırın. İntra-aortik tansiyon distal kırpma nedeniyle herhangi bir artış dikiş sitesinde kanamaya neden olarak uç-yan anastomoz gözlemlemek.
- Serum fizyolojik ile delik site üzerinden her iki yönde künt uçlu iğne sifonu çek. O zaman kesintiye uğramış bir tekniği ile absorbe olmayan 10-0 iş parçacığı kullanarak dikiş. Mümkünse, gemi duvar mikro-Forseps ile açgözlü önlemek ve her dikiş damar duvarının tüm katmanından geçer emin olmak. Dikiş dıştaki gemi, gemi stenoz önlemek için site delik.
- Büyük kanama sonucu olarak geri tepme oluşursa ilave dikiş ekleyin. Küçük sızmaya durumunda, hemostazın hafif basınç kanama sitesine bir gazlı bez ya da adventitia daha önce korunmuş bir parçasını kullanarak aracılığıyla güvenli. Küçük parçalar halinde yağ dokusu de yararlı olabilir.
- Renkli lastik pedi ponksiyon site altında kaldırın. Aortta nabız açıkça görülebilir proksimal ve distal anastomoz sitesine. Distal arter açıklık için doğrudan sağım testi ile kontrol edin.
6. kapatma
- Tüm gazlı bez temizleme bezi kaldırmak ve yavaşça karın boşluğuna herhangi bir enkaz temizlemek ve cilt ikame teşvik için isotone serum fizyolojik ile yıkayın.
- Yumuşak doku yayıcı kaldırmak ve küçük bağırsak, çekum ve yağ kitlesi onların doğru anatomik konumuna geri dönün.
- Absorbe olmayan 5-0 dikiş karın kasları katılmak için kullanın. Cilt traksiyon azaltmak için bazı cilt altı dikiş bir absorbe 3-0 dikiş kullanarak yerleştirin. Aynı 3-0 dikiş cilt kapatmak için kullanın.
- Kapatma sonra cilt dezenfekte ve sıcaklık ile sağlamak için kızılötesi ışık altında hayvan yer.
Subscription Required. Please recommend JoVE to your librarian.
Representative Results
Ameliyat süresi ortalama 167 (± 22) min, 26 (± 6) dk olan anevrizma oluşturma ve daha fazla 23 (± 7) için ihtiyaç olduğunu stent uygulaması ve arteriotomy (şekil 3) yeniden inşası için gerekli min.
Mortalite, morbidite ve makroskopik-stent trombozu çalışmanın birincil bitiş noktaları vardı. Düzenli takip dönemleri 7 gün vardı (n = 28) ve 21 gün (n = 32) anılan sıraya göre. Ölüm ya da olaylı morbidite neden çalışma erken bir fesih için. Ameliyat sırasında ölüm yok edildi. İlk üç gün erken-stent trombozu nedeniyle ameliyat sonrası içinde dört hayvan (% 6) öldü. Beş fareler (% 7.5) iki şiir felç için liderliğindeki erken-stent trombozu nedeni ile ameliyat sonrası komplikasyonlar Ģunları deneyimli. Bu hayvanlar onların ağır nörolojik eksiklik nedeniyle euthanized. Deney sona ermişti sonra iki diğer durumlarda, gün 21, geç-stent trombozu görüldü. Bu hayvanlar bu noktaya kadar hiçbir nörolojik açıkları göstermişti. Bir fare tüm karın duvarı katmanları üst üste hacim kaybı ile yara yırtılması ikinci ameliyat sonrası gün acı ve sonuç olarak euthanized. Kombine mortalite ve morbidite oranı % 13.4 (şekil 4 ve şekil 5) oldu.
Resim 1 : Abdominal aort üç farklı kesimlerinin Illustration.
Abdominal aort ve onların elden çıkarmaları kırmızı boyalı ise vena kava ve onların elden çıkarmaları mavi, renkte görünür. * Abdominal aort ponksiyon ve stent ekleme yapılır distal segment işaretler. ** Anevrizma implantasyon ve son stent konumlandırma gerçekleştiği orta sınıftaki işaretler. En proksimal geçici küçük uygulamanın stent implantasyonu sırasında kullanılan proksimal segmentin işaretler. Bu rakam daha büyük bir versiyonunu görüntülemek için buraya tıklayınız.
Resim 2 : Magnezyum stent şişirilmiş 1 çubuk Bu rakam daha büyük bir versiyonunu görüntülemek için buraya tıklayınız.
Şekil 3 : Cerrahi özellikleri.
Her nokta bir hayvan temsil eder; ortalama değerleri (uzun satırı); ve standart sapma Bu rakam daha büyük bir versiyonunu görüntülemek için buraya tıklayınız.
Şekil 4 : Akış şeması.
Çalışmada kullanılan hayvan sayısı; mortalite ve morbidite Bu rakam daha büyük bir versiyonunu görüntülemek için buraya tıklayınız.
Şekil 5 : Mg-stent makroskopik ve mikroskopik (10 x büyütme) bakış tedavi uç-yan implante anevrizma doku 21 gün hasat takip.
Re fotoğraf solda bir patent abdominal aort gösterir. Sağdaki fotoğraf boyuna açılan aorta stent ve stent arkasında insinuated anevrizma ostium kapsayan ince neointima ile gösterir. B: soldaki fotoğraf-stent trombozu abdominal aort gösterir. Sağdaki fotoğraf boyuna açılan aort damarı Lümen kapsayan bir trombüsü ile gösterir. Dejenere stent struts trombüsü tarafından neden oldu. C: bir mikroskobik genel bakış (Hematoksilen Eozin leke) A'da gösterildiği anevrizması Bu rakam daha büyük bir versiyonunu görüntülemek için buraya tıklayınız.
Subscription Required. Please recommend JoVE to your librarian.
Discussion
Bioabsorbable stent ve hayvan modelleri
Son yıllarda tıpta genel eğilim (ki hayatlarının geri kalanı için hastanın vücudunda kalır) kalıcı implantlar uzak biyo-absorbe malzeme olmuştur. Magnezyum restenoz, özellikle, zaten oldukça Kardiyoloji8,9' kurulur. Ne yazık ki bu restenoz henüz serebrovasküler hastalıklar gibi diğer uygulamalar için sınanmamıştır. Bu nedenle bioabsorbable stent saccular anevrizma tedavisinde kullanılabilirliği çalışmaya karar verdik. Çalışma gerçekleştirildi rats aynı derecede onlar - ile diğer küçük deney gibi hayvan - daha düşük ilgili satınalma ve yaşam giderleri nedeniyle uygundur. Ayrıca, araştırma genetik değişiklik10imkanı sayesinde farklı alanlarında kullanılabilir. Düşük maliyeti, kolay kullanım ve nispeten hızlı cerrahi işlemler çok sayıda hayvan ile yapılması çalışmalar izin verir. Yeni damar içi cihazlar değerlendirmek için sürekli görülmemelidir koşulları için izin veren bir standart anevrizma modeli kullanmak önemlidir; özellikle kan akımı, duvar kesme stres, gemi turtuosity, anevrizma konumu ve anevrizma boyutu ile ilgili olarak. Açıklanan sıçan kenarındaki anevrizma modeli tüm bu avantajları sağlar. Ayrıca model roman Endovasküler yaklaşımların farklı duvar koşullarında test sağlar. Anevrizma şifa ve tedavi uygulamaları - stent gibi-biyolojik kavramlarını çözümlenebilir en küçük olası hayvan modeli sunar. Boyutları sayesinde, daha sonra insanlarda klinik kullanım için test edilecek benzer ölçekli cihazlar sağlar. Ayrıntılı açıklamalar için avantajları/dezavantajları ve biyolojik farklılıkları çeşitli türler4,11preklinik extracranial anevrizma modelleri için daha önce yayımlanmış çalışma başvurun.
Morbidite ve mortalite
Önceki çalışmalar mortalite yüksek oranda karın stent implantasyonu göstermiştir. Değerleri 5,7-%5712,13,14,15farklı. En hayvanlar intima yaralanma sırasında stent implantasyonu16takip trombozu öldü. Bizim çalışmada ölüm oranı düşük olmasına rağmen stent ilişkili trombozu ameliyat sonrası komplikasyonlar ve kısmet (% 7.5 erken-stent trombozu, % 3 geç-stent trombozu) önemli bir neden kalır. Biz stent ve gemi arasında indirimli temas düşük mortalite oranı % 6 (dışarı-in 5 67 hayvanlar) için önemli bir neden olduğunu bizim çalışma öngörmekteyiz. Kişiyi Seldinger tekniği ve enflasyon uygulayıcıya çıkarmadan önce 1 bar balon sayesinde düşürüldü; balon gibi magnezyum stent keskin kenar kapsar. Bir kılavuz tel, dilatator ve kılıf ponksiyon sitesiyle sürekli, nazik dilatasyon, ponksiyon site hangi sırayla damar duvar inşası kolaylaştırır ve iyatrojenik arter daralma riskini azaltır küçük, tutulabilir. Fareler tartmak gerekir en az 500 g 4F uygulayıcıya bir rezervasyondan Seldinger tekniği ekleme için. Antiplatelet tedavi-stent trombozu stent yerleştirme12,17,18,19tarafından neden olduğu mekanik intima yaralanma ne olursa olsun azaltmak için gösterilmiştir. Ayrıca, ince güzel zamanında onu pazarlamak stent cihazlar önemli ölçüde damar darlığına stent tedavisi20takip azaltmak. Kova ve ark. 12 Sıçanlarda yukarıda açıklanan benzer bir operatif teknik kullanarak duvardan anevrizma akışı diverters ile tedavi. Onlar yok-stent trombozu onların serisi bildirdi. Bu çalışma için temel fark onlar ikili antiplatelet tedavi ve bizim magnezyum restenoz göre daha ince güzel zamanında onu pazarlamak stent cihazlar kullanılır. Anevrizma stent uygulaması sonra şifa Biyoloji keşfetmek için bizim çalışma amaçlı olarak, doğal intraaneurysmal koagülasyon ve proinflamatuar devlet etkisi olarak değil ilaçsız deney karar verdik. Bu nedenle daha yüksek tromboz riskini kabul ettik.
Transaortic stent yerleştirme
Stent ekleme ile Şah damarı13,15,gemi, kurban21,22 aksine birincil inşası ponksiyon sitesi (ve gemi korunması) olabilir abdominal aorta veya iliyak arter14gibi büyük bir gemi ile stent ekleyerek elde. Doğrudan görsel doğru stent yerleştirilmesi için gerekli izleme sağlar ve zararı ilgili karın besleyiciler engeller transaortic Stent Uygulamaları başka bir avantajdır. Görsel denetim yanlış yerleştirme durumlarda21ilâ % 12 oluşur. Ayrıca, balon ve Arter boyutunu overexpansion damar duvarının önlemek için görülebilir. Anevrizma oluşturma ve stent uygulaması karın prevailingly decellularized duvarlar5anevrizmasında görülen rahatsız edilmeden büyümeye anevrizma sağlar. Bu anatomik pozisyonda tek dezavantajı gastrointestinal sistem ve anevrizma arasındaki olası hücresel ve moleküler etkileşim olmasıdır.
Şu anda insan intrakranial anevrizma subaraknoid boşluk yansıtan diğer çevirim, extracranial hayvan modeli yok.
Operatif farklılıklar
Kova ve ark.12 akışı diverters kullanarak bir sıçan modelinde kenarındaki anevrizma tedavisi için bir yöntem açıklanmıştır. Stent sokmak için gereken süreyi Dizimizin (24.5±6.4 vs. 26±6 dakika) benzer iken, onlar işletim süresi (126±23.0 vs. 167±22 dakika) ve anastomoz zaman (16.3±6.4 vs. 23±7 dakika) daha kısa toplam vardı. Bizim dizi ameliyat daha uzun daha genişletilmiş abdominal aort diseksiyonu tarafından açıklanabilir. İntimal yaralanmayı önlemek için önceden genişletilmiş balonu ile stent takılı gibi proksimal küçük renal arter daha üstün yerleştirmek için zorlandı. Bir daha distal uygulama proksimal gemi Clip, balonu erken engel kurşun ve potansiyel olarak anevrizma ostium stent tarafından kapsanmayan demek. İskemik saat 23 dk karşı garnülleri (40) hipoksik hasar riskini düşürmek için mevcut protokolünde oldu. Organları en az 10 dakika reperfüzyon aşamasında reoxygenated. Tek bir uzun iskemik kez ameliyat süresini kısaltır ancak herhangi sunulan durumlarda meydana gelmedi ameliyat sonrası çok organik hatası - riskini artırabilir. Gerekli öğrenim süresinden sonra sunulan yordamları önceki mikrocerrahi eğitim olmadan cerrahlar için bile yönetilebilir olması gerekir.
Sonuç
Sonuç olarak, bu stent uygulaması teknik bir sıçan karın yan-wall anevrizma modelindeki amaca uygun, standardizasyon, morbidite ve mortalite ve düşük maliyet oranı düşük bir yüksek dereceli ile kanıtladı. Bu özellikleri model stent destekli anevrizma embolizasyon için amaçlanan malzemelerin gelecekteki çalışma için uygun olun.
Subscription Required. Please recommend JoVE to your librarian.
Disclosures
Bu eser Araştırma Konseyi, Kantonsspital'da Aarau, Aarau, İsviçre araştırma fonu tarafından desteklenmiştir. Biyolojik olarak parçalanabilen magnezyum stent Biotronik AG, vasküler müdahale, Buelach, İsviçre için merkezi tarafından temin edildi. Yazarlar tasarım ve sunulan çalışma yürütülmesi için sorumlu ve hiçbir rakip ilgi bildirin.
Acknowledgments
Biz Eugen Hofmann ve Philine Zumstein kendi mükemmel teknik yardım ve stent başvuru işlemleri kendi uzmanlık paylaşımı için teşekkürler. Biz Majlinda Kalanderi anatomik çizim için teşekkür ederim.
Materials
| Name | Company | Catalog Number | Comments |
| Medetomidine | any generic | ||
| Ketamin | any generic | ||
| Buprenorphine | any generic | ||
| Phosphate buffered saline | |||
| Sodium dodecyl sulfate (0.1%) | |||
| 3-0 resorbable suture | Ethicon Inc., USA | VCP428G | |
| 5-0 non absorbable suture | Ethicon Inc., USA | 8618G | |
| 6-0 non-absorbable suture | B. Braun, Germany | C0766070 | |
| 9-0 non-absorbable suture | B. Braun, Germany | G1111140 | |
| 10-0 non-absorbable suture | Covidien, USA | N2530 Monosof | |
| Operation microscope | Zeiss, Germany | ||
| Digital microscope camera | Sony, Japan | HXR-MC1P | |
| Standard surgical instruments | multiple | see protocol 7.a | |
| Microsurgical instruments | multiple | see protocol 7.b | |
| Vascular clip applicator | B. Braun, Germany | FT495T | |
| Temporary vascular clamps | B. Braun, Germany | ||
| 19G Puncture needle | Angiomed GmbH, Germany | 15820010 | |
| Hydrophobic guide wire | Cook Medical, USA | G00650 | |
| 4F sheat | Cordis Corporation, USA | 504-604A | |
| Inflation syringe | |||
| Laboratory shaker | Stuart | SRT6 | |
| Magnesium Stent 2.5/6 AMS with Polymer coating | Biotronik, Switzerland | ||
| Surgery drape | |||
| Sterile cellulose swabs | |||
| Syringes 1 ml and 2 ml | |||
| Hollow needles 18G and 26G | |||
| Isotonic sodium chloride | |||
| Microtubes | |||
| Eye ointment | Bausch + Lomb Inc, USA | Lacrinorm | any generic |
| Small animal shaver |
References
- Molyneux, A., et al. International Subarachnoid Aneurysm Trial (ISAT) of neurosurgical clipping versus endovascular coiling in 2143 patients with ruptured intracranial aneurysms: a randomised trial. Lancet. 360 (9342), 1267-1274 (2002).
- Molyneux, A. J., et al. International subarachnoid aneurysm trial (ISAT) of neurosurgical clipping versus endovascular coiling in 2143 patients with ruptured intracranial aneurysms: a randomised comparison of effects on survival, dependency, seizures, rebleeding, subgroups, and aneurysm occlusion. Lancet. 366 (9488), 809-817 (2005).
- Marbacher, S., et al. Intraluminal cell transplantation prevents growth and rupture in a model of rupture-prone saccular aneurysms. Stroke. 45 (12), 3684-3690 (2014).
- Marbacher, S., Marjamaa, J., Abdelhameed, E., Hernesniemi, J., Niemela, M., Frosen, J. The Helsinki rat microsurgical sidewall aneurysm model. J Vis Exp. (92), e51071 (2014).
- Marbacher, S., et al. Loss of mural cells leads to wall degeneration, aneurysm growth, and eventual rupture in a rat aneurysm model. Stroke. 45 (1), 248-254 (2014).
- Pritchett-Corning, K. R., Luo, Y., Mulder, G. B., White, W. J. Principles of rodent surgery for the new surgeon. J Vis Exp. (47), (2011).
- Bernal, J., et al. Guidelines for rodent survival surgery. J Invest Surg. 22 (6), 445-451 (2009).
- Flege, C., et al. Development and characterization of a coronary polylactic acid stent prototype generated by selective laser melting. J Mater Sci Mater Med. 24 (1), 241-255 (2013).
- Zartner, P., Cesnjevar, R., Singer, H., Weyand, M. First successful implantation of a biodegradable metal stent into the left pulmonary artery of a preterm baby. Catheter Cardiovasc Interv. 66 (4), 590-594 (2005).
- Hakamata, Y., et al. Green fluorescent protein-transgenic rat: a tool for organ transplantation research. Biochem Biophys Res Commun. 286 (4), 779-785 (2001).
- Bouzeghrane, F., Naggara, O., Kallmes, D. F., Berenstein, A., Raymond, J. International Consortium of Neuroendovascular C. In vivo experimental intracranial aneurysm models: a systematic review. AJNR Am J Neuroradiol. 31 (3), 418-423 (2010).
- Aquarius, R., Smits, D., Gounis, M. J., Leenders, W. P., De Vries, J. Flow diverter implantation in a rat model of sidewall aneurysm: a feasibility study. J Neurointerv Surg. , (2017).
- Indolfi, C., et al. A new rat model of small vessel stenting. Basic Res Cardiol. 95 (3), 179-185 (2000).
- Oyamada, S., et al. Trans-iliac rat aorta stenting: a novel high throughput preclinical stent model for restenosis and thrombosis. J Surg Res. 166 (1), e91-e95 (2011).
- Kwon, J. S., et al. Comparison of bare metal stent and paclitaxel-eluting stent using a novel rat aorta stent model. J Vet Sci. 12 (2), 143-149 (2011).
- Rouer, M., Meilhac, O., Delbosc, S., et al. A new murine model of endovascular aortic aneurysm repair. J Vis Exp. (77), e50740 (2013).
- Hardhammar, P. A., et al. Reduction in thrombotic events with heparin-coated Palmaz-Schatz stents in normal porcine coronary arteries. Circulation. 93 (3), 423-430 (1996).
- Guerrero, A., et al. Antioxidant effects of a single dose of acetylsalicylic acid and salicylic acid in rat brain slices subjected to oxygen-glucose deprivation in relation with its antiplatelet effect. Neurosci Lett. 358 (3), 153-156 (2004).
- Niitsu, Y., et al. Repeat oral dosing of prasugrel, a novel P2Y12 receptor inhibitor, results in cumulative and potent antiplatelet and antithrombotic activity in several animal species. Eur J Pharmacol. 579 (1-3), 276-282 (2008).
- Kastrati, A., et al. Intracoronary stenting and angiographic results: strut thickness effect on restenosis outcome (ISAR-STEREO) trial. Circulation. 103 (23), 2816-2821 (2001).
- Lowe, H. C., James, B., Khachigian, L. M. A novel model of in-stent restenosis: rat aortic stenting. Heart. 91 (3), 393-395 (2005).
- Finn, A. V., et al. A novel rat model of carotid artery stenting for the understanding of restenosis in metabolic diseases. J Vasc Res. 39 (5), 414-425 (2002).
