Summary
Hier, wordt een protocol met betrekking tot de gedeeltelijke levertransplantatie opnieuw arterialized rat gepresenteerd. 70% lever was precies gereseceerd in vivo met behulp van een bijgewerkte techniek van het vaartuig georiënteerde hepatectomy. De hepatische slagader werd gereconstrueerd op een end-to-side wijze. De manchet techniek was aangepast zodat het verkorten van de infrahepatic vena cava anastomose.
Abstract
Split lever transplantatie en levende lever donor lever transplantatie werden ontwikkeld in de kliniek te lever organen op een efficiëntere manier te gebruiken. Het mechanisme achter deze chirurgische ingrepen beter te begrijpen, werd een rat gedeeltelijke lever transplantatie (PLTx) model opgericht voor de relevante chirurgische studies. Vanwege de complexiteit van de rat PLTx model heeft is een protocol met gedetailleerde beschrijvingen vereist. Een artikel gepubliceerd eerder gemeld een protocol waarin ex vivo hepatectomy gewend was 50% rat PLTx bereiken. In tegenstelling tot dit protocol introduceerden we een opnieuw arterialized PLTx met een in vivo 70% hepatectomy. Een bijgewerkte vaartuig georiënteerde hepatectomy werd opgenomen in de rat PLTx om de microchirurgische procedure te verfijnen. De portal veins hepatische slagaders van de linker kwab van laterale en de mediane kwab werden individueel ontleed en afgebonden voordat zij zijn afgehaald van de lever parenchym, daardoor verminderend de kans op bloedingen in de lever restant stomp. Bovendien is een end-to-side vaartuig wapendrager tussen de gemeenschappelijke hepatische slagader en de uitgebreide juiste hepatische slagader werd ingevoerd om opnieuw arterialize de hepatische slagader. Met behulp van deze end-to-side vaartuig wapendrager techniek, werd de diameter van de anastomose uitgebreid, daardoor daalt de moeilijkheid van hand hechtdraad en onderhouden van een hoge mate van anastomotic bij. Bovendien is de manchet wapendrager de infrahepatic vena cava enigszins bewerkt. Een deel van ze lever parenchym rond de vena cava van een ontvanger werd bewaard tijdens manchet wapendrager te handhaven van de driedimensionale vorm van de vasculaire lumen. Dit gedeelte van de lever parenchym werd verwijderd na de voltooiing van de anastomose. Met deze wijziging, was de stap waarbij plaatsing van verblijf hechtingen weggelaten, waardoor verder verkorten van de tijd van de anastomose manchet. Met behulp van dit protocol van rat PLTx, werden een lage leverenzym-niveau, een intact lever lobulair architectuur en een hoog overlevingspercentage bereikt na microchirurgie.
Introduction
Momenteel, is er een grote discrepantie tussen het aantal gedoneerde lever organen en het aantal patiënten die wachten op een gedoneerde lever. Het tekort aan lever organen is een wereldwijd probleem. Uit te breiden het donorbestand, split lever transplantatie (LTx) en levende donor LTx werden ontwikkeld om het gebruik van een gedeeltelijke lever als een prothese1.
Verder onderzoek doen naar het mechanisme is erachter gedeeltelijke lever transplantatie (PLTx), zijn de relevante diermodellen gevestigde2,3,4,5geweest. In rat PLTx zijn de lever lobben gereseceerd in vivo en ex vivo nabootsen van de voorwaarden van de levende donor LTx te splitsen LTx, respectievelijk in de mens. Een paper gepubliceerd in het Journal of gevisualiseerd Experiments gepresenteerd een gedetailleerd protocol waarbij een 50% rat met behulp van een ex vivo hepatectomy5PLTx. Echter, een rat PLTx met een hepatectomy in vivo heeft nog niet is gerapporteerd in de gevisualiseerde literatuur.
Naast het verschil tussen de in vivo en ex vivo hepatectomies speelt de techniek van het uitvoeren van een hepatectomy zelf ook een belangrijke rol bij de bepaling van het resultaat van PLTx. op dit moment in veel chirurgische studies met behulp van de rat PTLx model, de lever kwabben waren gereseceerd na het plaatsen van een eenvoudige afbinding op de uitloper van de lever kwab2,3,6,7,8,9. Het plaatsen van een eenvoudige afbinding voordat resectie niet geschikt voor alle lever lobben is, als verschillende lever lobben hebben echter verschillende vormen en maten. Een eenvoudige afbinding aan de voet van de mediane kwab draagt een hoog risico veroorzaakt door een vernauwing van de vena cava, die uiteindelijk van invloed kunnen zijn op de uitstroom van de gedeeltelijke lever graft10,11. Daarom is een update hepatectomy techniek gebaseerd op kennis van de rat hepatische anatomie vereist op het gebied van rat PTLx.
In het protocol beschreven in deze studie, werd een bijgewerkte vaartuig georiënteerde 70% hepatectomy opgenomen in de procedure voor de rat PLTx. De portal veins hepatische slagaders van de linker laterale kwab (LLL) en de mediane kwab (ML) werden ontleed en individueel verdeeld voordat zij zijn afgehaald van de lever parenchym. Vervolgens werden de hepatische aderen van de LLL en ML afgebonden door piercing hechtingen. Door met behulp van individuele ligations en meerdere doordringende hechtingen in plaats van een eenvoudige afbinding plaatsen, kon de stronk overblijfsel van de ML verspreid over de vena cava. Vandaar, de vernauwing van de infrahepatic vena cava veroorzaakt door een chirurgische afbinding werd vermeden. Bovendien, occlusie van de bloedvoorziening van de LLL en ML door individuele ligations voordat de verwijdering van de lever parenchym daalde het aantal bloeden in de restant lever stomp, aldus het minimaliseren van de invloed van bloedverlies op de experimenten11.
Voor microsurgeons is het een grote uitdaging om te reconstrueren de juiste hepatische slagader (PHA) van een lever graft wegens de uiterst kleine diameter van dit vaartuig. Hoewel de vraag of opnieuw arterialization in LTx werkelijk noodzakelijk is is nog steeds onder debat12,13,14, talrijke microchirurgische technieken voor de wederopbouw van de hepatische slagader geweest voorgestelde14 . Hier, kennismaken we met een nieuwe techniek voor het opnieuw arterialization van de lever prothese, die de gemeenschappelijke hepatische slagader (CHA) anastomoses de uitgebreide PHA in een end-to-side-manier. Met behulp van deze techniek van de end-to-side, zijn twee hepatische slagaders verbonden met een anastomose met een grotere diameter. Hoe groter de diameter van de anastomose is, is het gemakkelijker wordt van de hand uit te voeren en hoe groter de verbetering van de bij van de anastomose wordt.
Subscription Required. Please recommend JoVE to your librarian.
Protocol
Alle procedures gevolgd de richtsnoeren van knaagdier chirurgie goedgekeurd door de Wenzhou medische universiteit dier beleid en welzijn Comité 15.
1. dieren
- Gebruik mannelijke Lewis ratten met een gewicht van 250-350 g als donoren en ontvangers.
2. operationele omgeving
- Voer alle microchirurgische procedures onder een chirurgische Microscoop met een variërend van 7 X tot 20 X vergroting. Steriliseren alle chirurgische instrumenten vóór gebruik in werking.
Opmerking: De operatiekamer en de operatietafel zijn schoon, maar niet steriel.
3. fundamentele microchirurgische manoeuvres
- Gratis, ontleden en mobiliseren van het vaartuig.
- Gebruik rechte micro-pincet eerst op te heffen van het omringende weefsel op het schip.
- Tweede, herhaaldelijk en voorzichtig openen en sluiten van de toppen van de gebogen micro-Tang zodat de fijne tips kunnen opengesneden en schil van het omringende weefsel op de voorste muur van het vaartuig.
- Ten derde kunt rechte micro-pincet klem en til het vaartuig om de achterste ruimte bloot te stellen. Gebruik vervolgens de tips van de gebogen micro-verlostang te pellen van het omringende weefsel op de achterste muur van het vaartuig. Tot slot, een kale vaartuigen zonder een omringende weefsel verbonden dienen te worden gepresenteerd.
- Verdeel of dubbele afbinden en verdelen van een schip of weefsel.
- Eerst, knopen twee plein op het schip of van weefsel met behulp van twee micro-pincet16. Ten tweede, afgesneden van het schip of het weefsel tussen de twee square knopen met behulp van de micro-schaar.
4. voorbereiding van de manchet en biliaire Stent
- Maak de manchetten van de portal-ader en infrahepatic vena cava via 12-gauge en 14-gauge intraveneuze katheters, respectievelijk, terwijl de biliaire stent gebruikt is een 22-gauge intraveneuze katheter. De manchetten bestaan uit een lichaamsdeel en een deel van het handvat. Gebruik een fillister op het lichaamsdeel teneinde de vaatwand op de manchet (Figuur 1).
5. narcose en fixatie van de ratten
- Voorzichtig Schakel het Lewis-rat in een inductie met 5% Isofluraan gemengd met 0.5 L/min zuurstof voor het opwekken van inademing verdoving. Controleren van de respiratoire frequentie van de rat om te voorkomen dat onverwachte dood veroorzaakt door een overdosis van Isofluraan. De concentratie van Isofluraan tot 2% te handhaven van anesthesie, wanneer de rat niet op de stimulatie van pijn reageert verminderen.
- De rat op een 30 x 30 cm eiken plank vallende een gesteriliseerde chirurgische mat handdoek verplaatsen en plaats de rat in een liggende positie. Tie van de vier ledematen van de rat met behulp van de mediale band, en vervolgens het herstellen van de tape met de vier thumbtacks. Desinfecteren van de huid met 70% alcohol, een tijd en iodophors drie keer.
6. donor operatie
- Het operationele gebied bloot
- Snijd een kleine dwarse incisie op de bovenbuik aan het transect van het bilaterale inferieur epigastrische vaartuigen met behulp van een elektrische coagulator.
- De dwarse incisie dicht bij de ribben marge op de bovenbuik met behulp van chirurgische schaar uitbreiden
- Omdraaien en monteren van de bovenbuik muur en de xiphoid process, respectievelijk naar de craniale zijde.
- De darm verplaatsen uit de buikholte met twee natte katoen stokken. Dekking van de darm met behulp van een NAT stuk gaas.
- Het afsnijden van de ligamenten en het trimmen van de suprahepatic vena cava (SHVC)
- Afgesneden van het falciformal ligament, coronaire ligament en driehoekige ligament in volgorde.
- Gratis de linker diafragmatica ader van het diafragma met behulp van micro-pincet. Vervolgens, dubbele afbinden met 6-0 zijde hechtingen.
Opmerking: Deze ader in deze stap niet verdelen. - Afgesneden de hepatogastrische ligament met behulp van de micro-schaar te bevrijden van de inferieure Spiegelse kwab, het hepatoesophageal ligament en een slagader.
- Occluding van de bloedvoorziening van de LLL en ML voor resectie (Figuur 2)
- Gebruik gebogen pincet eerst zorgvuldig de achterste muur van de gemeenschappelijke stam van het PV waaruit de LLL en linker mediaan kwab (hou van mijn leven) vanuit het parenchym ontleden. Ten tweede, dubbele afbinden en verdeel het samen met de overeenkomstige gal duct en hepatische slagader.
- Ontleden en verdeel het PV van de RML voorzichtig omdat deze ader houdt zich nauwgezet aan de lever parenchym.
Opmerking: 14 X vergroting wordt aanbevolen. Niet verwonden het PV van de juiste superieure kwab, die dicht bij het PV van de RML. - Identificeer de hepatische slagader en gal buis van de RML gelegen tussen de PV's van de RML en liefde van mijn leven. Dubbele afbinden en verdeel de hepatische slagader en gal buis van de RML met 6-0 zijde hechtingen.
Opmerking: Een verandering in de kleur van de LLL en ML van rood naar donker rood is een indicator van succesvolle occlusie van de bloedtoevoer. Grondige kennis van de vasculaire anatomie is van essentieel belang te identificeren en de ontrafeling van de bijbehorende schepen. Een eerdere studie in rat is een goed voorbeeld van de hepatische anatomie door corrosie afgietsels10.
- Resecting de LLL
- De stam van de LLL met een ze 3-0 zijde hechtdraad occlude de doorbloeding van de linker laterale hepatische ader afbinden. Met behulp van de micro-schaar, sneed de lever direct boven de afbinding te verwijderen van de lever massa.
- Resecting de liefde van mijn leven
- Klem de linker mediaan hepatische ader door mug hemostatische pincet geplaatst langs de mediane horizontalis (figuur 3A). Verwijder alle de lever parenchym van de liefde mijn leven onmiddellijk boven de verlostang met behulp van de micro-schaar.
- Plaats een doordringende hechtdraad dat doordringt de lever parenchym onmiddellijk onder de verlostang rondom de linker mediaan hepatische ader. Vervolgens Leg een knoopje van de square om het voor het vrijgeven van de verlostang afbinden.
- Plaats een andere twee doordringende hechtingen onder de verlostang om te omringen de rest van de open insnijding van de liefde van mijn leven. Vervolgens knopen twee vierkant om te sluiten van de rest van de incisie. Laat de mug hemostatische verlostang om te controleren voor bloeden.
- Resecting RML (Figuur 4)
- Plaats de hemostatische pincet mosquito om te omringen de basis van de RML op een afstand van 0,5 cm tot de SHVC (figuur 4B). Vervolgens kruis-clamp de base met behulp van de mug hemostatische verlostang te occlude de juiste mediaan hepatische ader.
- Met behulp van micro-schaar, verwijdert u alle van de lever parenchym van de RML langs het bovenoppervlak van de verlostang. Moet zorgen dat u zeer dicht onder de oppervlakte van de verlostang, verlaten van een duidelijke en dunne stronk van de ML.
- Plaats de eerste piercing hechtdraad doordringing van de lever parenchym onder de verlostang om te omringen de middelste mediaan hepatische ader. Vervolgens Leg een knoopje van de square om het afbinden van de middelste mediaan hepatische ader. Plaats de tweede doordringende hechtdraad tot het afbinden van de juiste mediaan hepatische ader gebruikend de zelfde methode. Plaats een andere twee doordringende hechtingen dicht bij de rest van de incisie na de beschrijving in 6.5.2.
- Trimmen van de infrahepatic vena cava (IHVC)
- Opengesneden het retroperitoneum om de IHVC bloot te stellen. Gebruik gebogen micro-pincet voor het vrijmaken van de IHVC en de recht nier ader van het omringende weefsel. Ontleden en afbinden van de juiste bijnier ader, die in de IHVC van de achterzijde uitmondt.
- Een juiste Nefrectomie na ligating de recht nier ader en de recht nier slagader opslaan genoeg vasculaire lengte om te installeren van de manchet op de IHVC in een latere stap uitvoeren
- Installeren van de gal stent
- Het mobiliseren van de Galgang (CBD) van de eerste hepatische growrilla met behulp van micro-pincet. Het afbinden van de CBD op het Kruis-punt van de pyloric ader en CBD met behulp van een 6-0 zijde hechtdraad.
- Snijd een dwarse insnijding op de voorste muur van het CBD aan de proximale zijde van de afbinding. Plaats een biliaire stent, gemaakt van een intraveneuze katheter van 22-gauge, in het lumen van het VBD via de incisie. Beveilig de biliaire stent met een ze 6-0 zijde hechtdraad. Transect van het VBD tussen de twee zijden draadjes van de 6-0.
- Trimmen van de PV
- Afbinden de pyloric ader met een 6-0 zijde hechtdraad distale aan de PV. Vervolgens afbinden de pyloric ader met een 7-0 polypropyleen Sutuur (geologie) dicht bij het PV. Transect de pyloric ader tussen deze twee ligations. Dubbele afbinden en verdeel de milt ader op dezelfde manier.
Opmerking: Gebruik een 7-0 polypropyleen hechtdraad om het afbinden van het schip om een kleinere afbinding knoop vergeleken met die van de 6-0 zijde hechtdraad. Een grote knoop kan interfereren met de installatie van de manchet in de laatste stap. De vasculaire muur van de pyloric ader en de ader van de milt is dun, dus zacht manipulaties zijn van essentieel belang tijdens de dissectie. Een eerder gepubliceerd artikel met meer technische beschrijvingen en illustraties over ontleden en verdelen de pyloric ader en milt geest moet worden gelezen voordat operatie17.
- Afbinden de pyloric ader met een 6-0 zijde hechtdraad distale aan de PV. Vervolgens afbinden de pyloric ader met een 7-0 polypropyleen Sutuur (geologie) dicht bij het PV. Transect de pyloric ader tussen deze twee ligations. Dubbele afbinden en verdeel de milt ader op dezelfde manier.
- Trimmen van de gemeenschappelijke hepatische slagader (CHA)
- Gratis zorgvuldig de CHA en haar twee bifurcaties, de PHA en de gastroduodenal slagader (GDA), van het omringende weefsel met behulp van twee micro-pincet. Dubbele afbinden de GDA met 6-0 zijde hechtingen op de bifurcatie voor de CHA aan GDA.
- Heparinizing en de lever prothese zoogdierlevercellen
- Injecteren 50 IU heparine in 1 mL zoutoplossing via de penile ader. Wacht 5 minuten om de systemische heparinization.
- Cross-clamp de PV, IHVC en CHA drie gebogen micro-serrefines met occlude van hepatische bloedstroom. Het uitvoeren van een kleine incisie op de voorste muur van de PV invoegen een 22-gauge-katheter. De gedeeltelijke lever prothese met zoutoplossing bij 4 ° C via de katheter onder een druk van 20 cmH2O. perfuse
- Snel open knippen de borstholte en intrathoracale vena cava chirurgische schaar met afvoer uit het bloed en het perfusaat. Stop de perfusie niet totdat de kleur van de gehele lever gedeeltelijke prothese gelijkmatig geel wordt.
- Explanting van de gedeeltelijke lever prothese
- Transect de linker diafragmatica ader tussen de twee ligations (beschreven in 6.2.2) met behulp van de micro-schaar.
- Transect vervolgens de SHVC dicht bij het middenrif zodat de vasculaire lengte zo lang mogelijk. Transect van het PV op het niveau van de milt ader met behulp van de micro-schaar. Verdeel de GDA tussen de dubbele ligations, en de CHA dichtbij de coeliakie kofferbak transect.
- Transect de bijnier schepen op de distale zijde van de 6-0 zijde afbinding in 6.7.2 geplaatst. Transect de IHVC op het niveau van de linker nier ader met behulp van chirurgische scharen.
- Accijns- en overdracht de gedeeltelijke lever aan een rug-tabel dish (30 mm cultuur schotel) gevuld met zoutoplossing bij 4 ° C.
7. back-tabel operatie (Graft voorbereiding)
- Installeren van de vasculaire manchetten (Figuur 5)
- Trek de PV via de lumen van een manchet gemaakt met een 12-gauge intraveneuze katheter met behulp van micro-pincet. Tijdelijk de manchet handvat en PV samen met behulp van een vaartuig klem vast te stellen. Evert de PV vaatwand ter dekking van het buitenoppervlak van de manchet. Beveilig de vaatwand en manchet in positie met een zijde hechtdraad van ze 6-0.
Opmerking: Niet de draai van het vaartuig. De manchet greep moet worden gehouden in de richting van 12 uur. - Installeer de manchet van de IHVC na de beschrijvingen in 7.1.1.
- Trek de PV via de lumen van een manchet gemaakt met een 12-gauge intraveneuze katheter met behulp van micro-pincet. Tijdelijk de manchet handvat en PV samen met behulp van een vaartuig klem vast te stellen. Evert de PV vaatwand ter dekking van het buitenoppervlak van de manchet. Beveilig de vaatwand en manchet in positie met een zijde hechtdraad van ze 6-0.
- Voorinstelling van de twee verblijf hechtingen op de SHVC
- Doordringen van de vaatwand van de SHVC van buiten naar binnen met behulp van twee 7-0 polypropyleen hechtingen langs de 3 uur en 9 uur richtingen, respectievelijk.
Opmerking: Geen Leg een knoopje.
- Doordringen van de vaatwand van de SHVC van buiten naar binnen met behulp van twee 7-0 polypropyleen hechtingen langs de 3 uur en 9 uur richtingen, respectievelijk.
- Behoud van de prothese
- Dompel de gedeeltelijke lever prothese in een zoutoplossing bij 4 ° C voor behoud na de operatie terug-tabel.
8. geadresseerde operatie
- Herhaalt u de procedures in 6.1-6.2 en 6.7, met uitzondering van de juiste Nefrectomie, de ontvanger in het operationele gebied, bloot te stellen transect van de ligamenten en trim de schepen.
- Voorbereiding van de IHVC, gal duct, hepatische slagader en ader van de portal in de ontvanger
- Eerst, mobiliseren de sectie van de IHVC tot de recht nier ader. Ten tweede, afbinden rechts bijnier vaartuigen met behulp van een 6-0 zijde hechtdraad. Ten derde, het mobiliseren van het VBD uit de eerste hepatische growrilla met behulp van micro-pincet.
Opmerking: Geen trim uit het vetweefsel rond de CBD. - Transect van het VBD bij de eerste bifurcatie in de hepatische Hilus na dubbele afbinding met behulp van een 6-0 zijde hechtdraad. Vervolgens transect de PHA met behulp van de micro-schaar na de dubbele afbinding met behulp van een 6-0 zijde hechtdraad. De sectie van het PV van de hepatische Hilus aan de pyloric ader te mobiliseren.
- Eerst, mobiliseren de sectie van de IHVC tot de recht nier ader. Ten tweede, afbinden rechts bijnier vaartuigen met behulp van een 6-0 zijde hechtdraad. Ten derde, het mobiliseren van het VBD uit de eerste hepatische growrilla met behulp van micro-pincet.
- Mobiliseren van de achterkant van de lever
- Intrekken van de lever naar de linker kant met behulp van twee stokken van katoen ontvanger. Vervolgens afgesneden het ligament aan de achterzijde van de lever van de SHVC naar de juiste bijnier ader zoals beschreven in een vorige gevisualiseerde artikel18. Na dit, invoering van een elastiekje door de achterste ruimte van de SHVC.
- Voorbereiding van de instrumenten en materialen tijdens de anhepatic fase
- Controleer de beschikbaarheid van alle instrumenten en materialen die nodig zijn in de anhepatic fase, zoals een 5 mL-spuit met een kromme naald, houder van de micro-schaar, micro-naald, micro-pincet, twee micro-hemostaticum pincet, polypropyleen hechtingen twee 7-0 en 6-0 zijde hechtdraad materiaal.
Opmerking: Op zoek naar materialen of instrumenten de anhepatic fase kan verlengen.
- Controleer de beschikbaarheid van alle instrumenten en materialen die nodig zijn in de anhepatic fase, zoals een 5 mL-spuit met een kromme naald, houder van de micro-schaar, micro-naald, micro-pincet, twee micro-hemostaticum pincet, polypropyleen hechtingen twee 7-0 en 6-0 zijde hechtdraad materiaal.
- Middendoor de lever in de ontvanger
- Cross-clamp de IHVC direct boven de renale ader met behulp een vaartuig klem en de PV direct boven de pyloric ader. Record de duur van de fase van de anhepatic vanaf dit moment tot de klem op de PV wordt vrijgegeven.
- De concentratie van Isofluraan tot 0,5% onmiddellijk verminderen.
- Trek de SHVC en het middenrif naar beneden door de vooraf ingestelde rubberen band. Klem de delen van het middenrif samen met de intrathoracale vena cava met behulp van een Bulldog-klem, behoud van een afstand van 0,5 cm tot de SHVC.
Opmerking: Niet klem de longen van de rat. - Met behulp van micro-schaar, sneed de vaatwand van de SHVC zorgvuldig langs de bovenrand van de lever parenchym te houden van de vasculaire muur zo lang mogelijk.
- Transect van het PV op de eerste bifurcatie in de hepatische growrilla met behulp van de micro-schaar. Vervolgens transect de vena cava inferior in het parenchym van de juiste inferieur kwab, in plaats van in de vaatwand, verlaten de ze lever parenchym rond de vena cava. Houd de snijkant in de rechts inferieur kwab op een afstand van 4 mm aan de IHVC. Na transecting van de vaartuigen, verplaatst u de gehele lever uit de buikholte.
- Reconstructie van de SHVC
- Plaats de gedeeltelijke lever prothese in de buikholte orthotopically. Doorboren de vaatwand van de SHVC van binnen naar buiten langs de aanwijzingen van het 3 uur en 9 uur met behulp van de twee vooraf ingestelde verblijf hechtingen. Trek de twee verblijf hechtingen naar links en rechts nadat ze zijn gebonden in een knoop met hun eigen doeleinden.
- Doorboren de SHVC vaatwand van buiten naar binnen dichtbij de knoop in de 3 uur richting de naald van de juiste verblijf hechtdraad introduceren in de vasculaire lumen.
- Anastomose de achterste muur van de SHVC door een lopende hechtdraad binnen de vasculaire lumen uit de 3 uur richting op de richting die 9 uur.
- Op de hoek van de richting 9 uur, doorboren de vaatwand van binnen naar buiten dicht bij de knoop om de naald uit de vasculaire lumen.
- Deze hechtdraad kunt anastomose de voorste muur met behulp van een lopende hechtdraad buiten de vasculaire lumen uit de richting van 9 uur tot 3 de uur richting. Ten slotte, binden de hechtdraad met eigen einde 3 keer (Figuur 6).
Opmerking: 3-5 mL zoutoplossing injecteren in het lumen van de gereconstrueerde SHVC te dwingen uit luchtbellen voordat de laatste 2-3 steken. Een meer gedetailleerde beschrijving van SHVC anastomosis kan in het artikel worden gevonden door Delriviere et al. 19.
- Reconstructie van de PV
- Plaats twee 7-0 polypropyleen verblijf hechtingen aan het einde van het PV van de ontvanger na de beschrijving in 7.2. Trek twee verblijf hechtingen in de tegenovergestelde richting uit te breiden van de vaatwand. Bevestig twee verblijf hechtingen met behulp van twee micro-mug hemostatische pincet.
- Ongeveer 1 mL zoutoplossing injecteren de vasculaire lumen van de PV in de ontvanger te dwingen uit luchtbellen. Snel de portal vein manchet in de vasculaire lumen van de PV in de ontvanger te dwingen wanneer dit wordt geopend met behulp van micro-pincet invoegen. Beveilig de manchet wapendrager met behulp van een zijde hechtdraad van ze 6-0. Cross-clamp de CHA.
- Reperfusie aan lever graft
- Laat de klemmen op de SHVC en de PV in volgorde naar het reperfuse van de lever prothese. Registreren de tijd van de anhepatic fase. Controleer voor het verbloeden van de anastomose. Verhoging van de concentratie van Isofluraan tot 1-2% volgens de reactie van de rat op de stimulatie van pijn.
- Reconstructie van de IHVC
- 1 mL zoutoplossing injecteren de vasculaire lumen van de IHVC in de ontvanger te dwingen uit de luchtbellen. Plaats de manchet in de cilindrische vasculaire lumen van de IHVC, die wordt ondersteund door de ze lever parenchym (Figuur 7). Invoering van een 6-0 zijde Sutuur (geologie) via de achterkant ruimte van de IHVC. Handomdraai beveiligen de manchet wapendrager met behulp van een 6-0 zijde hechtdraad.
- Laat de twee vaartuig klemmen in de IHVC opnieuw op te starten van de perfusie. Trim uit de omliggende lever parenchym zorgvuldig boven de ze zijde Sutuur (geologie) met behulp van de micro-schaar.
- Reconstructie van de hepatische slagader
- Doordringen van de vaatwand van de CHA in de lever prothese van buiten naar binnen met behulp van twee 11-0 polypropyleen hechtingen in de 3 uur en 9 uur richtingen, respectievelijk. Occlude de doorbloeding van de CHA en GDA in de geadresseerde met twee gebogen micro-serrefines.
- Transect de PHA van de ontvanger bij de wortel aan het blootstellen van de vasculaire lumen met behulp van de micro-schaar. De vasculaire lumen van de PHA in de ontvanger vergroten door snijden deel van de vaatwand lengterichting aan de diameter van de CHA in de lever prothese.
- De CHA van de lever prothese aan de uitgebreide PHA anastomose in een end-to-side wijze met de lopende hechtdraad techniek beschreven voor de SHVC anastomose (8.6.2-8.6.7).
Opmerking: Gedetailleerde illustraties kunnen worden gevonden in het artikel door Huang et al.14.
- Reconstructie van het VBD
- Verplaats de darm terug in de buikholte om de afstand tussen de twee uiteinden van de buis van de gal. Voer een dwarse insnijding op de voorste wand van de koker van de gal in de ontvanger.
- Trek de biliaire stent in de gedeeltelijke lever prothese naar beneden deze in het lumen van het kanaal van de gal in de ontvanger via de dwarse incisie te plaatsen. Beveilig de stent met behulp van een 6-0 ze zijde hechtdraad.
- Binden de twee 6-0 ze zijde hechtingen in de koker van de gal aan elkaar te verminderen van de spanning van de anastomose.
- Sluiten van de buik
- Sluit de buik in twee lagen met 3-0 zijde hechtdraad in het lopende hechtdraad patroon.
9. postoperatieve behandelingen (analgesie en antibiotica)
- Behandel alle ontvangers met buprenorfine 0,1 mg/kg subcutaan. Cefuroxim (16 mg/kg) subcutaan beheren naast de pijnstillende drug. Bieden leidingwater en standaard laboratorium dierlijke chow aan de ratten ad libitum.
Subscription Required. Please recommend JoVE to your librarian.
Representative Results
In totaal werden 31 gevallen van syngeneic arterialized rat PLTx voltooid met behulp van dit protocol. Alle geadresseerden overleefde tot het einde van de waarnemingsperiode. Het lichaamsgewicht van de ontvangers begon te herstellen na postoperatieve dag (POD) 4. De helling van het lichaamsgewicht was dicht bij die van een normale Lewis rat na POD 6 (Figuur 8), die niet indirect het herstel van de ontvanger impliciet. Histologisch, een lichte toename van de gal buis werd waargenomen in de ontvangers, en de lever lobulair architectuur van de ontvangers was intact. Geen necrose of duidelijk sinusvormige maagdilatatie werd waargenomen (Figuur 9). Het serum alanineaminotransferase (ALT) was binnen het normale bereik op POD 30 (Figuur 10). Geen gevallen van gele urine veroorzaakt door geelzucht werden waargenomen in deze ontvangers, die werd aangegeven door het controleren van de kooi beddengoed dagelijks, met vermelding van de bij van de gal stent. Het niveau van de normale serum van bilirubine op POD 30 verder bevestigd de succesvolle wederopbouw van de gal-buis (Figuur 11). De bij van de hepatische slagader werd gecontroleerd door de transecting van de PHA op de proximale zijde van de anastomose tijdens offer. Bloeden uit de PHA werd waargenomen in alle geadresseerden, impliceert de bij van de anastomose. Al deze resultaten voorgesteld dat de lever transplantaten goed functioneerde.
De gemiddelde duur van de anhepatic fase was 23.03 ± 2,3 min. De manchet wapendrager van de PV nam 4.68 ± 0.77 min, terwijl de anastomose manchet voor de IHVC slechts 2.05 ± 0.71 min. vergeleken met de manchet wapendrager van de PV, het manchet wapendrager van de IHVC de stap duurde van verblijf hechtingen plaatsen opgeslagen en daardoor verder de anas verkort tomosis tijd (tabel 1).
Twee gevallen van bloeden in de stronk overblijfsel van de ML tijdens de 70% hepatectomy werden waargenomen bij de 31 gevallen van schip georiënteerde hepatectomy. In een vorige experiment, werd bloeden in de stronk overblijfsel van de ML waargenomen in 8 van 18 gevallen van parenchym-bewarende vaartuig georiënteerde hepatectomy (Figuur 12). Dit resultaat aangegeven een lager tarief van bloeden in de stronk van de lever overblijfsel van de ML na het gebruik van schip georiënteerde 70% hepatectomy.
Figuur 1 . De manchetten en biliaire stent.
(A, C) De grootte van de manchetten. (B) de fillister op de manchet. (D) het lichaamsdeel en de greep deel van de manchet. (E) (een) IHVC manchet; (b) PV manchet. (F) biliaire stent. Schaal bar = 5 mm. Klik hier voor een grotere versie van dit cijfer.
Figuur 2 . Aan de occlude van de bloedtoevoer van LLL en ML.
(A) De gemeenschappelijke stam van de PV, hepatische slagader en gal duct van de LLL en liefde van mijn leven.
(B) De verkleuring van de LLL en hou mijn leven na het transecting van de gemeenschappelijke stam.
(C) De portal ader van de RML.
(D) Alle PVs, hepatische slagaders en galwegen van de LLL en de ML waren verbeelde.
Schaal bar = 5 mm. afkortingen: LLL links laterale lobe, ML mediaan lobe, hou van mijn leven links mediaan lobe, RML rechts mediaan lobe, RSL rechts superieure lobe, RIL rechts inferieur kwab, SCL superieure Spiegelse kwab. Klik hier voor een grotere versie van dit cijfer.
Figuur 3 . Om resect de linker mediaan kwab.
(A) resect de lever massa van de liefde mijn leven direct boven de verlostang.
(B) de plaats drie doordringende hechtingen op de snede. (
)
Schaal bar = 5 mm. afkortingen: RML rechts mediaan lobe, RSL rechts superieure lobe, RIL rechts inferieur lobe, SCL superieure Spiegelse kwab. Klik hier voor een grotere versie van dit cijfer.
Figuur 4 . Om resect de juiste mediaan kwab (RML).
(A) De basis van de RML.
(B) Plaats van mug hemostase pincet rond de basis van RML.
(C) Resect de lever parenchym van RML direct boven de verlostang.
(D) Laat een duidelijke en dunne laag van het restant lever weefsel op de SHVC.
Schaal bar = 5 mm. afkortingen: ML mediaan lobe, RSL rechts superieure kwab. Klik hier voor een grotere versie van dit cijfer.
Figuur 5 . Installeren van de manchet.
(A) Trek de PV via de lumen van een manchet.
(B) bepalen de manchet handvat en PV samen door de klem van een vaartuig.
(C) Evert de PV vasculaire muur ter dekking van het buitenoppervlak van de manchet.
(D) veilig de vasculaire muur en de manchet in positie.
Schaal bar = 5 mm. Klik hier voor een grotere versie van dit cijfer.
Figuur 6 . Voor de wederopbouw van de SHVC.
(A & B) Trek twee verblijf hechtingen naar rechts en naar links, respectievelijk.
(C) anastomose de achterste muur van de SHVC door een lopende hechtdraad in de vasculaire lumen.
(D) anastomose de voorste muur van de SHVC uit de vasculaire lumen.
Schaal bar = 5 mm. Klik hier voor een grotere versie van dit cijfer.
Figuur 7 . Voor de wederopbouw van de IHVC.
(A) een cilindervormige vasculaire lumen van de IHVC in de ontvanger.
(B) beveiligde de anastomose manchet voor de IHVC.
(C) start de reperfusie.
(D) trim uit de omliggende lever parenchym boven de ze zijde hechtdraad.
Schaal bar = 5 mm. afkortingen: PV portal vein, IHVC inferieur infrahepatic vena cava, RIL rechts inferieur kwab. Klik hier voor een grotere versie van dit cijfer.
Figuur 8 . De terugwinning van het gewicht van de postoperatieve lichaam.
Het lichaamsgewicht van geadresseerden begon te herstellen na postoperatieve dag 4. De helling van het lichaamsgewicht was dicht bij die van een normale Lewis rat na postoperatieve dag 6, die niet indirect het herstel van de ontvanger impliciet.
Figuur 9 . Histologie van de lever transplantaat na 30 dagen.
In de histologie, een lichte toename van de gal buis werd waargenomen in ontvangers, en de lever lobulair architectuur van geadresseerden was intact. Geen necrose of duidelijk sinusvormige maagdilatatie werd waargenomen (400 X). Schaal bar = 20 um Klik hier voor een grotere versie van dit cijfer.
Figuur 10 . Serum niveau van ALT.
Het niveau van de serum van ALT werd binnen het normale bereik op POD 30. (**, P < 0,05).
Figuur 11 . Serum niveau van bilirubine.
Het niveau van de serum van bilirubine op POD 30 was vergelijkbaar met die van een normale Lewis rat (P > 0,05).
Figuur 12 . Bloeden van de tarieven van verschillende methoden van hepatectomy.
Een lager tarief van bloeden in de stronk van de lever overblijfsel van de ML werd waargenomen in de methode met behulp van het vaartuig georiënteerde 70% hepatectomy.
| Procedures | Verwijdering van de lever | SHVC wapendrager | PV wapendrager | IHVC wapendrager | Anhepatic tijd |
| Tijd (minuten) | 2.62±0.46 | 15.73±2.05 | 4.68±0.77 | 2.05±0.71 | 23.03±2.30 |
| Gegevens werden uitgedrukt in Mean±SD | |||||
Tabel 1. Tijd van individuele chirurgische procedures tijdens de anhepatic fase
Tabel 2. Verschil tussen twee gevisualiseerde protocollen van de rat PLTx. Klik hier voor een grotere versie van deze tabel.
Aanvullende materialen
Subscription Required. Please recommend JoVE to your librarian.
Discussion
PLTx van de rat is een geavanceerde microchirurgische procedure met een trainingsprogramma dat is hoog in kosten en lange duur20. De complexiteit van de rat PLTx protocol heeft weerhouden onderzoekers met behulp van deze diermodel. Vergeleken met full-size rat LTx, presenteert rat PLTx de microsurgeon niet alleen met de uitdaging van een transplantatie-procedure, maar ook met de uitdaging van de lever resectie in een klein dier. Een gevisualiseerde microchirurgische protocol met een beschrijving van de hele procedure in detail is daarom essentieel voor de vaststelling van dit complexe model. Een eerder gevisualiseerde artikel gemeld door Nagai et al. wordt een protocol voor 50% gedeeltelijke orthotopic LTx voorgeschoteld door hepatische arteriële wederopbouw in ratten5 (tabel 2). Dit protocol gebruikt een ex vivo hepatectomy, die klinisch vergelijkbaar met de procedure van is LTx splitsen.
In vergelijking met split resects LTx, levende donor LTx de gedeeltelijke lever prothese uit de levende donor in plaats van de lever aan de operatie van de rug-tabel splitsen. De resectie in vivo lever kan leiden tot meer chirurgische manipulaties, langere portal hypertensie en zelfs meer warme ischemie verwondingen aan de gedeeltelijke lever prothese. Vandaar, rat verscheidene PLTx met behulp van in vivo hepatectomy modellen zijn vastgesteld in de relevante studies6,8,21,22. Vele protocollen betrekken resectie van de lobben van de lever na eenvoudige afbinding op de stam of base2,3,6,8,21,23. Echter, verschillende lever lobben zijn van verschillende vormen. De ML van de rat heeft een brede basis die halve omringt de vena cava10,24. Een eenvoudige afbinding plaatsen aan de voet van de ML gemakkelijk knelpunt het inferior vena. Om te voorkomen dat de vernauwing van de vena cava, ontwikkeld Madrahimov et al. een parenchym-bewarende vaartuig georiënteerde hepatectomy om te verwijderen van de ML in 2 stappen na vier doordringende hechtingen in de parenchym werden gemaakt, waardoor de stronk overblijfsel van de ML plat 10. echter de PVs van de lever kwabben afgebonden door de doordringende hechtingen waren verborgen in de parenchym. Bloeden in de stomp van de restant veroorzaakt door ontbrekende of verwonden van de kleine takken van de PV zou niet volledig vermeden 11. In ons protocol, werden de bijbehorende PVs en hepatische bloedvaten verder ontleed eerst. Vervolgens was de bloedtoevoer van de resected lever kwabben afzonderlijk geroteerd door ligations voordat de resectie. Daarom werd het tarief van bloeden in de restant stomp verlaagd met behulp van onze protocol (Figuur 10). De techniek van het plaatsen van vier doordringende hechtingen in de stronk van de ML werkte ook in ons protocol aan het afbinden van de hepatische aderen maar niet de PV en hepatische bloedvaten. Met deze ligations met behulp van meerdere doordringende hechtingen en een stapsgewijs resectie, werd de platte vorm van de stronk restant lever gehandhaafd, die de vernauwing van de vena cava vermeden.
Voor de wederopbouw van de IHVC, werd een lichte wijziging aangebracht aan de manchet wapendrager beschreven door Kamada et al. 25. de vena cava inferior van de ontvanger was verbeelde in het parenchym van de juiste inferieur kwab, in plaats van op het schip van de IHVC, die links een ze lever parenchym rond de vena cava. De lever parenchym rond de vena cava geholpen handhaven een cilindrische vorm van de vasculaire einde van de IHVC van de ontvanger in plaats van een platte vorm. Vandaar, de lumen van de IHVC werd natuurlijk geopend zonder de hulp van verblijf hechtingen en pincet. Deze wijziging hielp opslaan de stap van het plaatsen van verblijf hechtingen en vergemakkelijkt het inbrengen van de manchet IHVC in de vasculaire lumen van de ontvanger. Bovendien, deze wijziging verlengd de vasculaire lengte van de IHVC, waardoor de spanning tussen de twee uiteinden tijdens de manchet anastomose.
Met het voordeel van snel vasculaire anastomose, wordt de twee-manchet techniek vaak gebruikt in de rat orthotopic LTx voor anastomosing de PV en IHVC. Miyata et al. zelfs voorgesteld een protocol waarbij een drie-manchet techniek om anastomose de PV, IHVC en SHVC. De manchet techniek heeft echter ook zijn nadelen. Ten eerste, een manchet met een vaste grootte niet perfect past de grootte van het desbetreffende schip. Daarnaast verstoort de manchet techniek bloedstroom, wat resulteert in een hogere incidentie van trombose en vreemd lichaam reactie op de manchet26. De SHVC, een belangrijkste schip in de rat, toont hoge bloedstroom. Een vernauwing of trombose in dit schip kan ernstige postoperatieve complicaties veroorzaken. Daarom kiezen wij in ons PLTx-protocol, met de hand hechtdraad techniek te reconstrueren van de SHVC, die het mogelijk voor de aanpassing van de anastomose maakt zo dicht mogelijk bij de fysieke instelling. Kwalitatief hoogwaardige SHVC anastomosis voltooid door de hand hechtdraad techniek vereist echter hoge microchirurgische vaardigheid. Voor beginners, wordt Carrel van triangulatie techniek aanbevolen voor de schepen 27anastomosing. Met behulp van deze techniek, worden drie verblijf hechtingen geplaatst op gezette tijden de omtrek van de SHVC. De 3D-vorm van de SHVC wordt onderhouden door het keuzemenu dat deze drie hechtingen langs drie richtingen, waardoor de SHVC van stenose tijdens wapendrager kunnen blijven.
Nieuwe arterialization van de lever prothese is een controversieel onderwerp. Volgens ons nieuwe arterialization is niet de belangrijkste stap voor het waarborgen van een hoog overlevingspercentage van de ontvanger, maar het misschien wel de belangrijkste stap voor het waarborgen van een hoge kwaliteit lever graft. In de traditionele protocol van de rat LTx waarbij de twee-manchet-techniek, werd de hepatische slagader niet gereconstrueerd, zoals het ontbreken van perfusie van het hepatische slagader niet de uitkomst van de rat LTx12 beïnvloedde. Bovendien, een eerdere studie op muis LTx werd uitgevoerd om het effect van opnieuw arterialization op het voortbestaan van de graft, histologisch wijzigingen, ischemische leverschade en vroege immunologische activering trajecten13onderzoeken. De onderzoekers concludeerden dat de re arterialization van lever transplantaten niet een grote invloed op de overlevingskansen of de mate van immunologische activering hadden. Echter, een recente studie gerapporteerd door Huang et al. suggereert dat opnieuw arterialization is belangrijk voor het herstel van de lever parenchym onderworpen aan hepatectomy, vooral met de belemmering van de uitstroom28. Non-arterialization van de gedeeltelijke lever prothese verergerd leverschade en vertraagd het herstel van focale necrose. Nieuwe arterialization van de gedeeltelijke lever prothese wordt daarom aangeraden. Zoals hier wordt geïllustreerd, werd een end-to-side wapendrager techniek gebruikt voor de wederopbouw van de hepatische slagader, die eerder werd beschreven door één van onze auteurs 14. Het voordeel van deze techniek is de keuze voor twee dikke slagaders, de CHA en GDA, eerder dan het dunne PHA, die vermindert de moeilijkheid van de wederopbouw van de hepatische slagader en onderhoudt een hoog percentage bij van wapendrager anastomose.
De klassieke rat LTx protocol voorgesteld door Kamada et al. suggereert beheersing van de anhepatic fase, zodanig dat het minder dan 26 min, als geen enkel dier wanneer de anhepatic fase langer dan 26 min25 duurdeoverleefd. Onze ervaring is in overeenstemming met dit voorstel, hoewel we eerder waargenomen op verscheidene gevallen van de overleving met een anhepatic fase keer langer dan 26 min. Volgens ons heeft een stabiel anhepatic fase voorrang boven een kortere anhepatic fase in chirurgische onderzoek. In onze fractie, is de fase van de anhepatic precies geregeld van binnen een bepaalde tijd. De anhepatic fase is niet gestopt totdat de tijd van de vooraf ingestelde anhepatic is bereikt, hoewel de anastomose van de SHVC en PV kan veel eerder worden voltooid. Echter, in een opleidingsproject, een kortere anhepatic fase wordt aangemoedigd.
Hoewel veel verbeteringen zijn aangebracht om te verkorten de trainingsfase en elimineren van geen onnodige operaties, zijn rat LTx en PLTx nog complexe microchirurgische operaties20. Daarom, naast een gevisualiseerde protocol, een stapsgewijze training-protocol dat is gebaseerd op de Plan--Check-Action-cyclus is belangrijk voor het bereiken van een hoog overlevingspercentage en hoge kwaliteit. Onze eerste ervaring in het gebruik van deze opleiding protocol toonde aan dat 40-73 operaties nodig waren om de rat orthotopic LTx meester. Een extra die 9-13 operaties moesten beheersen de rat arterialized opnieuw PLTx. De opleiding protocol voorgesteld door Czigány et al. beweert dat 50-60 LTxs volstaan om de meester de orthotopic LTx en de PLTx29.
In ons Plan--Check-Action opleiding protocol, moet kwaliteitscontrole bij elke stap van de opleiding en in elke afzonderlijke manipulatie benadrukt worden, vooral in zo'n een complex model. Een hoge overlevingskans is niet neer op een kwalitatief hoogwaardige procedure. In de representatieve resultaten verschillende criteria voor de evaluatie van de kwaliteit van de microchirurgie werden vermeld, met inbegrip van histologie leverenzym, lichaam gewicht herstel, geelzucht (serum bilirubine en gele urine), de duur van de fase van de anhepatic en bij van de hepatische slagader. Hoge kwaliteit wordt bereikt alleen wanneer aan alle criteria is voldaan.
Subscription Required. Please recommend JoVE to your librarian.
Disclosures
Alle auteurs hebben geen tegenstrijdige belangen openbaar te maken.
Acknowledgments
Dit onderzoek werd gesteund door de National Natural Science Foundation of China (Grant nr. 81501382) en Zhejiang provinciale Natural Science Foundation van China (Grant nr. LQ13H100003 en LQ16H100002).
Materials
| Name | Company | Catalog Number | Comments |
| Surgical microscope | Möller-Wedel, Germany | 654359 | |
| Light source | OSRAM (China) Lighting Co., Ltd | 64627 | |
| Isoflurane Vaporizer | MIDMARK Corporation | VIP3000 | |
| Isoflurane | Baxter Healthcare Corporation | 40032609 | For Inhalation anesthesia |
| Normal Saline | Zhejiang Tianrui Pharmaceutical Co., Ltd. | 716092103 | |
| Povidone Iodine Solution | HANGZHOU MINSHENG PHARMACEUTICAL | H33021567 | For disinfection |
| Hemostatic forceps | Shanghai Medical Instruments(Group) Ltd | J31020 | |
| Surgical scissors | Shanghai Medical Instruments(Group) Ltd | JC2116 | |
| Needle-holder | Shanghai Medical Instruments(Group) Ltd | J32030 | |
| Dressing Forceps | Shanghai Medical Instruments(Group) Ltd | J42020 | |
| Mosquito hemostatic forceps | Shanghai Medical Instruments(Group) Ltd | W40340 | For liver resection; For retracting the stay sutures. |
| Micro-scissors | Shanghai Medical Instruments(Group) Ltd | WA1040 | |
| Micro needle-holder | Shanghai Medical Instruments(Group) Ltd | WA2060 | |
| Curved micro typing forceps | Shanghai Medical Instruments(Group) Ltd | WA3061 | |
| straight micro typing forceps | Shanghai Medical Instruments(Group) Ltd | WA3060 | |
| Micro hemostatic forceps | Shanghai Medical Instruments(Group) Ltd | WA3020 | |
| Bulldog clamp | Shanghai Medical Instruments(Group) Ltd | XEC350 | |
| Vessel clamps | Shanghai Medical Instruments(Group) Ltd | W40160 | |
| Micro Serrefine-curved | Fine Science Tools, Inc | 18055-05 | |
| Dacryosyrinx | Shi Zhuo medical instruments Co., Ltd. | 5# curve | Use as the curved needle for forcing out the air bubbles in the vascular lumen |
| Sterilized gauze swabs | Fuqing Health & Integral Medical | 20230R | |
| 5mL syringe | Zhejiang Yusheng Medical Instrument Co.,Ltd | 811932416 | |
| 18G needles | Shanghai Kindly Enterprise Development Group Co., Ltd | 01-014 | For fixing the upper abdomen wall |
| Intima II 22G intraveous catheter | Becton Dickinson Medical Devices (Shanghai) Co Ltd. | 383207y | For making biliary stent; For infusing perfusate |
| 7-0 polypropylene sutures | Ningbo Medical Needle Co., Ltd | 151026 | For SHVC anastomsis |
| 6-0 silk suture | Shanghai Pudong Jinhuan Medical Products Co., Ltd | 2650182 | For ligation |
| Culture dish (100mm) | Corning Incorporated | 430165 | used in back table for storage ice. The back table dish was placed on it. |
| Culture dish (30 mm) | Corning Incorporated | 3296 | As a vessel for organ preservation |
| Angiocath 12G intravenous catheter | Becton Dickinson Medical Devices (Shanghai) Co Ltd. | 382277 | For making a IHVC cuff |
| Angiocath 14G intravenous catheter | Becton Dickinson Medical Devices (Shanghai) Co Ltd. | 382269 | For making a PV cuff |
| Buprenorphine (hydrochloride) | Tianjin Institute of Pharmaceutical Research Pharmaceutical Co., Ltd | H12020275 | For analgesic |
| Cefuroxime sodium for injection | Esseti FarmaceuticiS.r.l | H20160013 | As an antibiotics |
References
- Yan, J. Q., Becker, T., Peng, C. H., Li, H. W., Klempnauer, J. Split liver transplantation: a reliable approach to expand donor pool. Hepatobiliary Pancreat Dis Int. 4, 339-344 (2005).
- Xia, R., Emond, J. C. Orthotopic partial liver transplantation in the rat: a model of 70% hepatectomy and reduced size liver transplantation. Transplantation. 56, 1041-1043 (1993).
- Omura, T., Ascher, N. L., Emond, J. C. Fifty-percent partial liver transplantation in the rat. Transplantation. 62, 292-293 (1996).
- Foss, A., et al. Function of reduced-size liver transplant in the rat. Res Exp Med (Berl). 197, 91-99 (1997).
- Nagai, K., Yagi, S., Uemoto, S., Tolba, R. H. Surgical procedures for a rat model of partial orthotopic liver transplantation with hepatic arterial reconstruction. J Vis Exp. , e4376 (2013).
- Sun, J., Qin, G., Wu, L., Wang, C., Sheil, A. G. Antigenic load and peripheral chimeric levels in entire and partial liver allograft recipients. Microsurgery. 21, 183-187 (2001).
- Ninomiya, M., et al. Deceleration of regenerative response improves the outcome of rat with massive hepatectomy. Am J Transplant. 10, 1580-1587 (2010).
- Yamanaka, K., et al. Effect of olprinone on liver microstructure in rat partial liver transplantation. J Surg Res. 183, 391-396 (2013).
- Wang, W., et al. Mesenchymal stem cells promote liver regeneration and prolong survival in small-for-size liver grafts: involvement of C-Jun N-terminal kinase, cyclin D1, and NF-kappaB. PLoS One. 9, e112532 (2014).
- Madrahimov, N., Dirsch, O., Broelsch, C., Dahmen, U. Marginal hepatectomy in the rat: from anatomy to surgery. Ann. Surg. 244, 89-98 (2006).
- Martins, P. N., Theruvath, T. P., Neuhaus, P. Rodent models of partial hepatectomies. Liver Int. 28, 3-11 (2008).
- Kamada, N., Sumimoto, R., Kaneda, K. The value of hepatic artery reconstruction as a technique in rat liver transplantation. Surgery. 111, 195-200 (1992).
- Steger, U., Sawitzki, B., Gassel, A. M., Gassel, H. J., Wood, K. J. Impact of hepatic rearterialization on reperfusion injury and outcome after mouse liver transplantation. Transplantation. 76, 327-332 (2003).
- Huang, H., et al. A novel end-to-side anastomosis technique for hepatic rearterialization in rat orthotopic liver transplantation to accommodate size mismatches between vessels. Eur Surg Res. 47, 53-62 (2011).
- Bernal, J., et al. Guidelines for rodent survival surgery. J.Invest Surg. 22, 445-451 (2009).
- Johnson, A. J., Stulting, R. D. Ophthalmic Microsurgical Suturing Techniques. Macsai, M. S. , Springer. Berlin Heidelberg. 21-28 (2007).
- Delriviere, L., et al. Detailed modified technique for safer harvesting and preparation of liver graft in the rat. Microsurgery. 17, 690-696 (1996).
- Oldani, G., Lacotte, S., Morel, P., Mentha, G., Toso, C. Orthotopic liver transplantation in rats. J Vis Exp. , (2012).
- Delriviere, L., et al. Technical details for safer venous and biliary anastomoses for liver transplantation in the rat. Microsurgery. 18, 12-18 (1998).
- Jin, H., et al. Preliminary experience of a PDCA-cycle and quality management based training curriculum for rat liver transplantation. J Surg Res. 176, 409-422 (2012).
- Selzner, N., Selzner, M., Tian, Y., Kadry, Z., Clavien, P. A. Cold ischemia decreases liver regeneration after partial liver transplantation in the rat: A TNF-alpha/IL-6-dependent mechanism. Hepatology. 36, 812-818 (2002).
- Tanaka, H., Hashizume, K., Enosawa, S., Suzuki, S. Successful transplantation of a 20% partial liver graft in rats: a technical innovation. J Surg Res. 110, 409-412 (2003).
- Bockhorn, M., et al. Erythropoietin treatment improves liver regeneration and survival in rat models of extended liver resection and living donor liver transplantation. Transplantation. 86, 1578-1585 (2008).
- Martins, P. N., Neuhaus, P. Surgical anatomy of the liver, hepatic vasculature and bile ducts in the rat. Liver Int. 27, 384-392 (2007).
- Kamada, N., Calne, R. Y. Orthotopic liver transplantation in the rat. Technique using cuff for portal vein anastomosis and biliary drainage. Transplantation. 28, 47-50 (1979).
- Kashfi, A., et al. A review of various techniques of orthotopic liver transplantation in the rat. Transplant.Proc. 37, 185-188 (2005).
- Wain, R. A. J., Hammond, D., McPhillips, M., Whitty, J. P. M., Ahmed, W. Surgical Tools and Medical Devices. Ahmed, W., Jackson, M. J. , Springer International Publishing. 545-562 (2016).
- Huang, H., et al. Hepatic arterial perfusion is essential for the spontaneous recovery from focal hepatic venous outflow obstruction in rats. Am J Transplant. 11, 2342-2352 (2011).
- Czigany, Z., et al. Improving Research Practice in Rat Orthotopic and Partial Orthotopic Liver Transplantation: A Review, Recommendation, and Publication Guide. Eur Surg Res. 55, 119-138 (2015).
