Waiting
Login processing...

Trial ends in Request Full Access Tell Your Colleague About Jove
Click here for the English version

Medicine

מחדש Arterialized השתלת הכבד חלקית עכברוש עם ויוו מונחה כלי 70% Hepatectomy

Published: April 8, 2018 doi: 10.3791/56392
* These authors contributed equally

Summary

כאן, מוצג פרוטוקול מעורבים השתלת כבד חלקית עכברוש arterialized מחדש. באופן ספציפי, 70% הכבד היה resected ויוו באמצעות טכניקת מעודכן של hepatectomy מונחה כלי השיט. עורק הכבד שוחזר בצורה הקצה לצד. הטכניקה השרוול שונה כדי לקצר את זמן השקה של infrahepatic את הווריד הנבוב.

Abstract

לפצל השתלת כבד והשתלות כבד כבד תורם חי פותחו במרפאה כדי לנצל את האיברים כבד באופן יעיל יותר. כדי להבין טוב יותר את המנגנון מאחורי ניתוחים אלה, מודל עכברוש השתלת כבד חלקית (PLTx) הוקמה ללימודי כירורגי הרלוונטיים. בגלל המורכבות של המודל PLTx חולדה, נדרש פרוטוקול עם תיאורים מפורטים. במאמר שפורסם קודם לכן דיווח פרוטוקול שבו שמחוץ hepatectomy נעשה שימוש כדי להשיג 50% עכברוש PLTx. בניגוד פרוטוקול זה, הצגנו PLTx arterialized מחדש עם hepatectomy 70% ויוו . Hepatectomy מונחה כלי מעודכן סופחה העכברוש PLTx כדי לחדד את ההליך השתלה. הפורטל ורידים, עורקים הכבד של האונה השמאלית לרוחב, האונה החציוני היו בנפרד גזור, מאתרים לפני הסרת parenchyma הכבד, ובכך להקטין את ההסתברות של דימום כבד שריד הגדם. יתר על כן, כלי הקצה לצד לחיבור תעלות בין עורק הכבד נפוץ עורק הכבד תקין מוגדלת הוצג מחדש arterialize של עורק הכבד. באמצעות טכניקה זו השקה סוף לצד כלי, הוגדל הקוטר של ההשקה, ובכך להקטין את הקושי של יד תפר, שמירה על שיעור גבוה של anastomotic patency. יתר על כן, והחיבור השרוול של infrahepatic את הווריד הנבוב היה שונה במקצת. קטע של במבניו הכבד parenchyma סביב הווריד הנבוב של נמען השתמר במהלך השקה השרוול כדי לשמור על צורה תלת מימדי של לומן כלי הדם. קטע זה של parenchyma הכבד הוסר לאחר השלמת ההשקה. עם שינוי זה, השלב לערב השמה של התפרים הושמט, ובכך יותר קיצור הזמן השקה השרוול. באמצעות פרוטוקול זה של עכברוש PLTx, רמה נמוכה אנזים בכבד, ארכיטקטורה lobular הכבד ללא פגע, סיכויי הישרדות גבוהים הושגו לאחר תיאום.

Introduction

כיום, יש פער גדול בין מספר כבד ביום גשום, מספר החולים מחכים שנתרמו כבד. בעיית המחסור באיברים כבד הינה בעיה עולמית. כדי להרחיב את המאגר התורם, לפצל השתלת כבד (LTx) החיים התורם LTx פותחו לשימוש כבד חלקית שתל1.

להמשיך לחקור את המנגנון מאחורי השתלת כבד חלקית (PLTx), מודלים בעלי חיים רלוונטי כבר הוקמה2,3,4,5. בשנת העכברוש PLTx, האונות בכבד הם resected ויוו שמחוץ לחקות את התנאים של התורם החי LTx ולהתחלק LTx, בהתאמה, בן אנוש. מאמר שפורסם היומן של ניסויים דמיינו הציגה פרוטוקול נתונים היסטוריים המערבים חולדה 50% PLTx משתמש של ex-vivo hepatectomy5. עם זאת, חולדה PLTx עם hepatectomy ויוו לא עוד דווח בספרות מטמיעים.

בנוסף, ההבדל בין hepatectomies ויוו , שמחוץ הטכניקה של ביצוע hepatectomy עצמו גם ממלא תפקיד חשוב בקביעת התוצאה של PLTx. כיום במחקרים כירורגי רבים לשימוש בחולדה PTLx מודל, הכבד אונות היו resected לאחר הנחת מצדו פשוטה-pedicle של האונה כבד2,3,6,7,8,9. אולם, הצבת מצדו פשוטה לפני כריתה אינו מתאים כל אונות הכבד, כמו אונות הכבד שונים יש בצורות ובגדלים שונים. מצדו פשוטה בבסיס של האונה החציוני סיכון גבוה של גרימת כיווץ של הווריד הנבוב, דבר שעשוי בסופו של דבר להשפיע על זרימה יוצאת של השתלת כבד חלקי10,11. לכן, שיטת hepatectomy עדכון המבוססים על ידע של האנטומיה הכבד עכברוש נדרש בשדה של עכברוש PTLx.

בפרוטוקול המתוארים במחקר זה, מעודכן מונחה כלי 70% hepatectomy סופחה ההליך של העכברוש PLTx. הפורטל ורידים, עורקים הכבד של האונה השמאלית לרוחב (LLL), חציון האונה (ML) היו גזור, מחולקים בנפרד לפני הסרת parenchyma בכבד. לאחר מכן, הורידים הכבד של LLL ו- ML היו מאתרים על ידי פירסינג התפרים. על-ידי שימוש ligations בודדים מרובים התפרים פירסינג במקום הצבת מצדו פשוט, הגדם שריד של ML היה מסוגל להתפשט על-פני הווריד הנבוב. לפיכך, הכיווץ של הווריד הנבוב infrahepatic הנגרמת על ידי מצדו כירורגי היה נמנע. בנוסף, סגר אספקת הדם של LLL ו- ML מאת ligations בודדים לפני הסרת parenchyma כבד ירד שיעור של דימום כבד שריד הגדם, ובכך למזער את ההשפעה של איבוד דם על ניסויים11.

עבור microsurgeons, זהו אתגר משמעותי לשחזר עורק הכבד תקין (פא) של השתלה כבד בגלל קוטר קטן מאוד של כלי השיט הזה. אמנם השאלה של arterialization מחדש ב- LTx הוא אכן נחוץ עדיין תחת הדיון12,13,14, רבות בטכניקה מיקרוכירורגית לשחזור עורק הכבד היה המוצע14 . כאן, אנו להכיר טכניקה חדשנית עבור arterialization מחדש של השתל הכבד, אשר anastomoses את עורק הכבד נפוץ (צ'ה) פא מוגדלת בצורה הקצה לצד. באמצעות טכניקה זו הקצה לצד, קשורים שני העורקים הכבד לחיבור תעלות של קוטר גדול יותר. הקוטר של ההשקה הוא גדול יותר, תפירת יד קל יותר הוא לבצע והופכת יותר לשיפור patency של ההשקה.

Subscription Required. Please recommend JoVE to your librarian.

Protocol

בעקבות כל הנהלים המנחים של ניתוח מכרסמים אושרה על ידי ה וונג'ואו לרפואה אוניברסיטת חיה מדיניות וועדת הרווחה 15.

1. בעלי חיים

  1. השתמש חולדות לואיס זכר במשקל של 250-350 גר' כמו תורמים ומקבלים.

2. פעיל סביבה

  1. ביצוע כל ההליכים המיקרוכירורגית תחת מיקרוסקופ כירורגי עם הגדלה ועד 7 X 20 X. לעקר כל מכשירי ניתוח לפני השימוש בפעולה.
    הערה: חדר הניתוח ואת שולחן הניתוחים הם נקיים אך לא סטרילי.

3. תמרונים המיקרוכירורגית בסיסי

  1. חינם, לנתח, ולגייס את הספינה.
    1. תחילה, השתמש ישר מיקרו-מלקחיים להרים את הרקמה שמסביב על הספינה.
    2. שנית, שוב ושוב, בעדינות לפתוח ולסגור את קצות המלקחיים-המיקרו מעוקל כך הטיפים בסדר ניתן לגזור פתוח, לקלף את הרקמה שמסביב על הקיר הקדמי של כלי השיט.
    3. שלישית, להשתמש ישר מיקרו-מלקחיים מלחציים ולהרים את הכלי כדי לחשוף את החלל האחורי. לאחר מכן, השתמש בעצות של המיקרו-המלקחיים מעוקל לקלף את הרקמה שמסביב על הקיר האחורי של כלי השיט. לבסוף, קיבול קירח ללא כל הרקמה הסובבת מחובר צריכה להיות מוצגת.
  2. לחלק או כפול מאתרים ומפסיקים ולא לחלק של כלי השיט או רקמה.
    1. ראשית, קשרים כיכר שני לקשור על כלי השיט או רקמות באמצעות מיקרו-מלקחיים שני16. שנית, חתוך או רקמות בין שני הקשרים ריבוע באמצעות מיקרו-מספריים.

4. הכנת השרוול, סטנטים לדרכי המרה

  1. להפוך את האזיקים של וריד שער הכבד, infrahepatic הנבוב באמצעות ציד ו-14 קטטרים תוך ורידי, בהתאמה, ואילו סטנט בכיס המרה בשימוש צנתר תוך ורידי 22-מד. האזיקים מורכבות של חלק הגוף וכן חלק אחיזה. השתמש fillister על החלק הגוף כדי לאבטח את הקיר כלי על גבי שהקפל (איור 1).

5. קיבוע של החולדות והרדמה

  1. הנח בעדינות את החולדה לואיס בתיבת אינדוקציה עם 5% איזופלוריין מעורבב עם חצי ליטר/דקה חמצן כדי לגרום הרדמה אינהלציה. נטר את תדירות הנשימה של העכברוש כדי למנוע מוות לא צפוי שנגרם ממנת יתר של איזופלוריין. להפחית את ריכוז איזופלוריין ל-2% כדי לשמור על הרדמה כאשר העכברוש אינו מגיב לגירוי כאב.
  2. לעבור את החולדה קרש עץ אלון 30 ס"מ על 30 ס"מ מכוסה על ידי מגבת סטיריליים mat כירורגי, ולמקם את החולדה במצב פרקדן. לקשור את ארבעת הגפיים של העכברוש באמצעות הקלטת המדיאלי ולאחר מכן לתקן את הקלטת עם נעצים ארבע. לחטא את העור באמצעות אלכוהול 70% אחד וזמן iodophors שלוש פעמים.

6. התורם המבצע

  1. חשיפת השדה פעיל
    1. חותכים חתך רוחבי קטן על הבטן העליונה כדי transect בכלי הדם הדו-צדדיים הצפק נחות באמצעות של coagulator חשמלי.
    2. להרחיב את החתך רוחבי קרוב השוליים costal על הבטן העליונה באמצעות מספריים כירורגיים.
    3. הפוך ולתקן את קיר הבטן העליונה ואת תהליך מצאתי, בהתאמה, לצד הגולגולת.
    4. תעבור המעי הבטני עם שני מקלות צמר גפן רטוב. מכסים את המעי באמצעות פיסת גזה רטוב.
  2. לחתוך את הרצועות, זמירה את הווריד הנבוב suprahepatic (SHVC)
    1. לחתוך את falciformal רצועה, רצועה כלילית, רצועה משולש ברצף.
    2. חינם את הווריד השמאלי סרעפתית מהסרעפת באמצעות מיקרו-מלקחיים. ואז, כפול מאתרים ומפסיקים אותו באמצעות תפרים משי 6-0.
      הערה: אין לחלק את הווריד בשלב זה.
    3. לחתוך רצועה gastrohepatic באמצעות מיקרו-מספריים לשחרר באונה המזונבת נחות ואת hepatoesophageal רצועה העורק.
  3. Occluding את אספקת הדם של LLL ו- ML לפני כריתה (איור 2)
    1. תחילה, השתמש מעוקל מלקחיים לנתח בזהירות את הקיר האחורי של המטען נפוצות של PV המספק את LLL ואת האונה השמאלית החציוני (לאהוב את. החיים שלי) מ- parenchyma. שנית, כפול מאתרים ומפסיקים, ומחלקים אותו עם צינור המרה המתאים, עורק הכבד ביחד.
    2. לנתח, לחלק PV של RML בעדינות כי הוריד הזה מקרוב לאנאפוליס parenchyma בכבד.
      הערה: מומלץ 14 X הגדלה. שלא פוגעים PV של האונה ממש מעולה, אשר קרוב PV של RML.
    3. לזהות את עורק הכבד ואת צינור המרה של RML ממוקם בין PVs של RML, אוהב את החיים שלי. כפול מאתרים ומפסיקים ולחלק את עורק הכבד ואת צינור המרה של RML בעזרת תפרים משי 6-0.
      הערה: שינוי צבע של LLL ו מ ל אדום אדום כהה הוא מצביע על חסימה מוצלחת אספקת הדם. ידע מעמיק של האנטומיה כלי הדם חיונית לזיהוי, לנתח את כלי המתאים. מחקר קודם של עכברוש בבירור שממחישים את האנטומיה הכבד קורוזיה הטלות10.
  4. Resecting את LLL
    1. מאתרים ומפסיקים pedicle של LLL באמצעות במבניו תפר משי 3-0 כדי occlude את זרימת הדם וריד הכבד הלטראלי השמאלי. באמצעות מיקרו-מספריים, חותכים את הכבד מיד מעל מצדו כדי להסיר את הגידול בכבד.
  5. Resecting אהבת חיי
    1. תהדק את וריד הכבד השמאלי החציוני על ידי יתוש hemostatic מלקחיים שהוצבו על פיסורה החציוני (איור 3 א). להסיר את כל parenchyma הכבד של אהבת חיי שמעליה המלקחיים באמצעות מיקרו-מספריים.
    2. מקום suture פירסינג החודר parenchyma כבד מיד תחת המלקחיים סביב החציון הימני הכבד הווריד. לאחר מכן, לקשור קשר מרובע כדי מאתרים ומפסיקים את זה לפני שחרור המלקחיים.
    3. מניחים עוד שני תפרים פירסינג תחת המלקחיים להקיף שאר החתך פתוח של אהבת חיי. לאחר מכן, לקשור קשרים ריבוע שני כדי לסגור את שאר החתך. שחרור יתושים המלקחיים hemostatic כדי לבדוק אם הדימום.
  6. Resecting RML (איור 4)
    1. במקום יתושים מלקחיים hemostatic להקיף את בסיס RML במרחק של 0.5 ס מ SHVC (איור 4B). לאחר מכן, מלחציים צולבים הבסיס עם המלקחיים יתוש hemostatic כדי occlude את וריד הכבד נכון החציוני.
    2. באמצעות מיקרו-מספריים, להסיר את כל parenchyma הכבד של RML לאורך פני השטח העליון של המלקחיים. הקפד לעבוד מאוד קרוב לפני השטח של המלקחיים, עוזב גזע דק ורגיל של ML.
    3. המקום התפר פירסינג הראשון חודר parenchyma כבד תחת המלקחיים להקיף את החציון האמצעי הכבד הווריד. לאחר מכן, לקשור קשר מרובע כדי מאתרים ומפסיקים את וריד הכבד החציוני האמצעי. מקם את התפר פירסינג השני כדי מאתרים ומפסיקים את וריד הכבד החציוני בדיוק באותה שיטה. מניחים עוד שני תפרים פירסינג קרוב שאר החתך בעקבות את תיאור 6.5.2.
  7. זמירה את הווריד הנבוב infrahepatic (IHVC)
    1. לחתוך את מקבץ לחשוף את IHVC. שימוש מעוקל מיקרו-מלקחיים כדי לשחרר את IHVC ואת וריד הכליה נכון מן הרקמה שמסביב. לנתח, מאתרים ומפסיקים את הווריד יותרת הכליה, אשר מנקז לתוך IHVC מאחור.
    2. ביצוע של כריתת כליה נכון לאחר נבדק וריד הכליה נכון של עורק הכליה נכון לשמור מספיק אורך כלי הדם כדי להתקין את השרוול על גבי IHVC בשלב מאוחר יותר.
  8. התקנת סטנט בכיס המרה
    1. לגייס את צינור המרה (המע ר) מ hilum הכבד הראשון באמצעות מיקרו-מלקחיים. מאתרים ומפסיקים CBD בנקודת-הצלב של הווריד של מולדת, CBD באמצעות 6-0 בתפר משי.
    2. חותכים חתך רוחבי על הקיר הקדמי של CBD בצד הפרוקסימלית של מצדו. הכנס סטנט בכיס המרה, עשויים של קטטר תוך ורידי 22-מד, לתוך לומן של CBD דרך החתך. לאבטח סטנט בכיס המרה עם במבניו 6-0 בתפר משי. Transect CBD בין התפרים משי 6-0 שני.
  9. זמירה PV
    1. מאתרים ומפסיקים את הווריד מולדת שימוש של 6-0 בתפר משי דיסטלי כדי PV. בשלב הבא, מאתרים ומפסיקים את הווריד מולדת באמצעות 7-0 בתפר פוליפרופילן קרוב PV. Transect את הווריד מולדת בין אלה ligations שני. כפול מאתרים ומפסיקים ולחלק את וריד הטחול באותה דרך.
      הערה: השתמש בתפר פוליפרופילן 7-0 כדי מאתרים ומפסיקים את הכלי כדי קשר מצדו קטן יותר בהשוואה לזה של 6-0 את התפר משי. קשר גדול עלולים להפריע ההתקנה השרוול בשלב האחרון. הקיר כלי הדם של מולדת עורק, וריד הטחול הוא דק, כך ומניפולציות עדינות חיוניים בזמן. יש לקרוא מאמר שפורסם בעבר עם טכני יותר תיאורים ואיורים לנתח ועל חלוקת וריד מולדת של וריד הטחול לפני המבצע17.
  10. זמירה עורק הכבד נפוץ (צ'ה)
    1. בזהירות חינם את צ'ה ואת פלוקה שני שלה, פא את העורק gastroduodenal (GDA), מן הרקמה שמסביב באמצעות מיקרו שני-מלקחיים. כפול מאתרים ומפסיקים את GDA בעזרת תפרים משי 6-0 על ההסתעפות של צ'ה כדי GDA.
  11. Heparinizing, פרפוזיה השתל כבד
    1. להזריק 50 IU של הפארין ב 1 מ"ל של תמיסת מלח דרך הווריד של הפין. המתן 5 דקות כדי להשיג heparinization מערכתית.
    2. . מלחציים צולבים PV, IHVC ומאתגר באמצעות שלושה מעוקל מיקרו-serrefines כדי occlude זרימת דם הכבד. לבצע חתך קטן על הקיר הקדמי של PV להכניס צנתר 22-מד. Perfuse השתל כבד חלקית עם תמיסת מלח ב 4 ° C דרך הקטטר תחת לחץ של 20 cmH2O.
    3. במהירות רבה חתך לפתוח את חלל בית החזה ואת intrathoracic הנבוב באמצעות מספריים כירורגיים כדי לנקז את הדם, perfusate. לא מפסיקים את זלוף עד הצבע של כל חלקי השתל הכבד הופך צהוב בצורה אחידה.
  12. Explanting השתל כבד חלקית
    1. Transect את הווריד סרעפתית שמאל בין ligations שני (שמתואר 6.2.2) באמצעות מיקרו-מספריים.
    2. לאחר מכן, transect את SHVC קרוב הסרעפת כדי לשמור על כלי הדם לאורך כמה שיותר זמן. Transect PV ברמה של הווריד של הטחול באמצעות מיקרו-מספריים. לחלק את GDA בין ligations זוגי, transect את צ'ה קרוב המטען צליאק.
    3. Transect בכלי הדם האדרנל בצד דיסטלי של 6-0 משי מצדו ממוקם ב- 6.7.2. Transect את IHVC ברמה של הווריד השמאלי של הכליות באמצעות מספריים כירורגיים.
    4. בלו והעברת הכבד חלקית על צלחת הגב-טבלה (תבשיל תרבות 30 מ מ) מלא עם תמיסת מלח ב 4 º C.

7. חזרה טבלה מבצע (שתל הכנה)

  1. התקנת את האזיקים כלי הדם (איור 5)
    1. משוך את PV דרך לומן של מגבון עשה עם צנתר תוך ורידי ציד באמצעות מיקרו-מלקחיים. באופן זמני לתקן את השרוול ידית ואת PV יחד באמצעות מלחציים כלי. אוורט הקיר כלי PV כדי לכסות את המשטח החיצוני של השרוול. לאבטח כלי לקיר, השרוול בעמדה בתפר משי במבניו 6-0.
      הערה: אל תסובבו את כלי הקיבול. הידית השרוול צריך להישמר בכיוון בשעה 12.
    2. התקן שהקפל IHVC בעקבות התיאורים ב 7.1.1.
  2. לקבוע מראש את התפרים שני על גבי SHVC
    1. לחדור את הקיר כלי של SHVC מ מחוץ ל בתוך משתמשת בשני 7-0 פוליפרופילן תפרים לאורך בשעה 3, בשעה 9 כיוונים, בהתאמה.
      הערה: לא לקשור קשר.
  3. שמירה על השתל
    1. לטבול השתל כבד חלקית בתוך תמיסת מלח ב 4 ° C לשימור לאחר הניתוח חזרה-טבלה.

8. הנמען מבצע

  1. חזור פי הפרוצדורות ב 6.1-6.2 6.7, למעט כריתת כליה נכון, של הנמען כדי לחשוף את שדה פעיל, transect הרצועות ולחיתוך בכלי הדם.
  2. הכנת IHVC, צינור המרה, עורק הכבד, וריד שער הכבד של הנמען
    1. ראשית, לגייס את המקטע של IHVC למטה הווריד כליות. שנית, מאתרים ומפסיקים את כלי נכון יותרת הכליה באמצעות 6-0 בתפר משי. שלישית, לגייס CBD מ hilum הכבד הראשון באמצעות מיקרו-מלקחיים.
      הערה: לא לקצץ את רקמת שומן סביב CBD.
    2. Transect CBD-ההסתעפות הראשון ב hilum הכבד לאחר מצדו כפול באמצעות 6-0 בתפר משי. לאחר מכן, transect את פא באמצעות מיקרו-מספריים מיד לאחר מצדו כפול באמצעות 6-0 בתפר משי. לגייס את המקטע של PV מ hilum הכבד לוריד מולדת.
  3. גיוס האחורי של הכבד
    1. . משכי הנמען כבד בצד שמאל באמצעות שני מקלות צמר גפן. לאחר מכן, מנותקת רצועה בחלק האחורי של הכבד SHVC לוריד הכליה נכון כפי שמתואר במאמר מטמיעים הקודם18. אחרי זה, מציגים גומייה בחלל האחורי של SHVC.
  4. הכנת את מכשירים וחומרים במהלך שלב anhepatic
    1. בדוק מחדש את הזמינות של כל הכלים הנדרשים בשלב anhepatic, כגון מזרק 5 מ עם מחט מעוקל, מחזיק מיקרו-מספריים, מיקרו מחט, מיקרו-מלקחיים, מלקחיים מיקרו-hemostatic שני, התפרים פוליפרופילן שני 7-0, 6-0 חומר תפרים משי.
      הערה: בחיפוש אחר חומרים או כלי נגינה עשויה להאריך את שלב anhepatic.
  5. Excising הכבד של הנמען
    1. . מלחציים צולבים IHVC מיד מעל וריד הכליה באמצעות מלחציים כלי ו- PV מיד מעל הווריד מולדת. להקליט את משך השלב anhepatic מרגע זה עד לפרסומו את המלחציים ב- PV.
    2. להפחית את ריכוז איזופלוריין ל- 0.5% באופן מיידי.
    3. למשוך את SHVC ואת הסרעפת למטה על ידי הלהקה גומי מראש. תהדק את החלקים של הסרעפת יחד עם intrathoracic הנבוב באמצעות מלחציים בולדוג, שמירה על מרחק של 0.5 ס מ כדי SHVC.
      הערה: לא תהדק את הריאות של העכברוש.
    4. באמצעות מיקרו-מספריים, חתך בדופן כלי SHVC בקפידה לאורך הקצה העליון של parenchyma כבד כדי לשמור על הקיר כלי הדם כמה שיותר זמן.
    5. Transect PV-ההסתעפות הראשון ב hilum הכבד באמצעות מיקרו-מספריים. לאחר מכן, transect הכלילי התחתון parenchyma של האונה נכון נחות, במקום הקיר כלי, עוזב parenchyma הכבד במבניו סביב הווריד הנבוב. לשמור את חוד החנית באונה נכון נחות ממרחק של 4 מ מ IHVC. לאחר transecting את כלי הדם, תעבור הכבד כל חלל הבטן.
  6. שיחזור של SHVC
    1. מקום השתל כבד חלקית orthotopically חלל הבטן. פירס בדופן הכלי SHVC מ פנימה כדי בחוץ לאורך ההוראות בשעה 3 ו-9 באמצעות שני התפרים מראש. הצמד את התפרים שני מימין לאחר שהם קשורות לתוך קשר עם קצוות משלהם.
    2. פירס SHVC הקיר כלי מ מחוץ ל בתוך קרוב הקשר בשעה 3 כיוון כדי להחדיר את המחט של התפר השהייה ב נכון לתוך לומן כלי הדם.
    3. Anastomose הקיר האחורי של SHVC מאת בתפר רץ לתוך לומן וסקולרית מהכיוון בשעה 3 לכיוון בשעה 9.
    4. בפינה של הכיוון בשעה 9, פירס הקיר כלי מ פנימה כדי מחוץ קרוב הקשר כדי להחדיר את המחט אל מחוץ לכלי הדם לומן.
    5. להשתמש את. התפר כדי anastomose הקיר הקדמי בתפר רץ מחוץ לומן וסקולרית מהכיוון בשעה 9 3 השעה כיוון. לבסוף, לקשור את התפר עם סוף משלו 3 פעמים (איור 6).
      הערה: להזריק 3-5 מ"ל של תמיסת מלח לתוך לומן של SHVC המשוחזרת כדי לאלץ את בועות האוויר לפני האחרון 2-3 תפרים. ניתן למצוא תיאור מפורט יותר של SHVC השקה המאמר על ידי. Delriviere et al. 19.
  7. שיחזור PV
    1. הצב התפרים פוליפרופילן שני של 7-0 בסוף PV של הנמען בעקבות התיאור ב- 7.2. משוך שתי התפרים בכיוון ההפוך כדי להאריך את הקיר כלי. לתקן את התפרים שני באמצעות מלקחיים hemostatic שני של מיקרו-יתושים.
    2. להזריק כ 1 מ"ל של תמיסת מלח לתוך לומן כלי הדם של PV של הנמען כדי לאלץ את בועות האוויר. להוסיף במהירות שהקפל וריד שער לתוך לומן כלי הדם של PV של הנמען לכפות כאשר הוא נפתח באמצעות מיקרו-מלקחיים. לאבטח ההשקה השרוול באמצעות בתפר משי במבניו 6-0. . מלחציים צולבים צ'ה.
  8. פגיעה reperfusion כדי השתלת כבד
    1. לשחרר את המלחציים על SHVC ועל PV ברצף כדי reperfuse השתל בכבד. רשום את הזמן של שלב anhepatic. בדוק אם יש דימום של ההשקה. להגדיל את ריכוז איזופלוריין ל- 1-2% לפי התגובה של העכברוש הגירוי לכאב.
  9. שיחזור של IHVC
    1. להזריק 1 מ"ל של תמיסת מלח לתוך לומן כלי הדם של IHVC של הנמען כדי לאלץ את הבועות אוויר. הכנס שהקפל לתוך לומן וסקולרית גליל של IHVC, אשר נתמך על ידי parenchyma כבד במבניו (איור 7). מציג 6-0 בתפר משי דרך החלל האחורי של IHVC. במהירות לאבטח ההשקה השרוול באמצעות 6-0 בתפר משי.
    2. שחרר את התפסים כלי שני ב IHVC כדי להפעיל מחדש את זלוף. חתוך את parenchyma הכבד שמסביב בזהירות מעל התפר משי במבניו באמצעות מיקרו-מספריים.
  10. שיחזור עורק הכבד
    1. לחדור את הקיר כלי של צ'ה של השתל כבד מן בחוץ כדי בתוך משתמשת בשני 11-0 פוליפרופילן תפרים בשעה 3 ו-9 כיוונים, בהתאמה. Occlude את זרימת הדם של צ'ה, GDA של הנמען באמצעות שני מעוקל מיקרו-serrefines.
    2. Transect את פא של הנמען מבסיסה לחשוף לומן כלי הדם באמצעות מיקרו-מספריים. להגדיל את לומן כלי הדם של פא של הנמען על ידי חיתוך חלק של הקיר כלי longitudinally כדי להכיל את הקוטר של צ'ה של השתל בכבד.
    3. Anastomose את צ'ה של השתל כבד פא מוגדל באופן הקצה לצד בטכניקה תפר פועל המתוארות עבור ההשקה SHVC (8.6.2-8.6.7).
      הערה: איורים מפורט ניתן למצוא במאמר מאת הואנג ואח14.
  11. שיחזור CBD
    1. להעביר את המעי חזרה לתוך חלל הבטן כדי לצמצם את המרחק בין שני הקצוות של המרה. לבצע חתך רוחבי על הקיר הקדמי של המרה של הנמען.
    2. לנתץ סטנט בכיס המרה של השתל כבד חלקית כדי להכניס אותו לתוך לומן של המרה של הנמען באמצעות חתך רוחבי. לאבטח סטנט באמצעות 6-0 בתפר משי במבניו.
    3. לקשור את התפרים 6-0 משי במבניו שני בצינור המרה אחד לשני כדי להפחית את המתח של ההשקה.
  12. סוגרים את הבטן
    1. סגור את הבטן בשתי שכבות באמצעות תפרים משי 3-0 בתבנית תפר פועל.

9. לאחר הניתוח טיפולים (שיכוך כאבים, אנטיביוטיקה)

  1. להתייחס לכל הנמענים עם 0.1 מ"ג/ק"ג. הבופרנורפין subcutaneously. לנהל הספורוקסים (16 מ"ג/ק"ג) subcutaneously בנוסף התרופה להרגעה. מציעים מי ברז, מעבדה סטנדרטיים צ'או בעלי חיים חולדות ad libitum.

Subscription Required. Please recommend JoVE to your librarian.

Representative Results

בסך הכל, 31 מקרים של עכברוש arterialized syngeneic PLTx הושלמו באמצעות פרוטוקול זה. כל הנמענים שרדו עד סוף הזמן תצפית. משקל הגוף של הנמענים החלה להתאושש לאחר יום לאחר הניתוח (POD) 4. השיפוע של משקל הגוף היה קרוב לזה של עכברוש לואיס נורמלי אחרי 6 POD (איור 8), ומזה משתמע בעקיפין את ההתאוששות של הנמען. בהיסטולוגיה, שגשוג קלה של המרה נצפתה ב הנמענים, הארכיטקטורה lobular הכבד של הנמענים היה תקין. אין נמק או הרחבה sinusoidal ברור נצפתה (איור 9). הרמה בסרום של אלנין aminotransferase (ALT) היה בטווח הנורמלי בגיל 30 POD (איור 10). אין מקרים של צהוב שתן הנגרמת על ידי צהבת זו נצפתה נמענים אלה, אשר צוינה על-ידי בדיקת הכלוב מצעים יומית, המציין patency של סטנט בכיס המרה. סרום נורמלי רמת בילירובין POD 30 אישר נוסף על שחזור מוצלח של המרה (איור 11). Patency של עורק הכבד שנבדקה על ידי transecting את פא בצד הפרוקסימלית של ההשקה במהלך הקרבה. הדימום מ פא נצפתה כל הנמענים, רומז patency של ההשקה. כל תוצאות אלה הציע השתלים הכבד תפקדה היטב.

משך הזמן הממוצע של שלב anhepatic היה 23.03 ± דקות 2.3. ההשקה השרוול של PV לקח 4.68 ± מין 0.77, בזמן ההשקה השרוול של IHVC לקח רק 2.05 ± מינימלית 0.71 Compared עם ההשקה השרוול של PV, והחיבור השרוול של IHVC הציל את השלב של הצבת התפרים ובכך נוספת מקוצר של חגי tomosis זמן (טבלה 1).

שני מקרים של דימום במהלך hepatectomy 70% הגדם שריד של ML נצפו בין התיקים 31 של hepatectomy מונחה כלי השיט. בניסוי הקודם, דימום הגדם שריד של ML נצפתה במקרים 8 מתוך 18 של שימור parenchyma hepatectomy מונחה קיבול (איור 12). תוצאה זו ציינו שיעור נמוך יותר של דימום כבד שריד הגדם של ML לאחר שימוש מונחה כלי hepatectomy 70%.

Figure 1
איור 1 . האזיקים ואת סטנטים לדרכי המרה.
(א, ג) הגודל של אזיקים. (B) fillister באשראי. (ד) חלק הגוף וחלק האחיזה של השרוול. (ה) (השרוול IHVC א); (ב) PV השרוול. (F) סטנט בכיס המרה. סרגל קנה מידה = 5 מ מ. אנא לחץ כאן כדי להציג גירסה גדולה יותר של הדמות הזאת.

Figure 2
איור 2 . כדי occlude את אספקת הדם של LLL, ML-
(א) המטען נפוצות של PV, עורק הכבד מרה צינור של LLL, אוהב את החיים שלי.
(B) שינוי צבע של LLL ואני אוהב את החיים שלי לאחר transecting המטען נפוצות.
(ג) וריד שער הכבד של RML.
(ד) כל PVs, עורקי הכבד של צינורות המרה של LLL ו- ML היו transected.
סרגל קנה מידה = 5 מ מ. קיצורים: LLL עזב האונה לרוחב, האונה החציוני ML, אוהב את החיים השמאלי החציוני התנוך שלי RML האונה חציון, RSL נכון האונה מעולה, RIL האונה נכון נחות, SCL באונה המזונבת מעולה. אנא לחץ כאן כדי להציג גירסה גדולה יותר של הדמות הזאת.

Figure 3
איור 3 . לכרות את האונה השמאלית החציוני.
(א) נכרות המסה הכבד של אהבת חיי מיד מעל המלקחיים.
(ב) במקום שלושה תפרים פירסינג על החתך. (Image 1)
סרגל קנה מידה = 5 מ מ. קיצורים: RML נכון האונה החציוני, RSL ממש מעולה האונה, RIL נכון האונה נחות, SCL באונה המזונבת מעולה. אנא לחץ כאן כדי להציג גירסה גדולה יותר של הדמות הזאת.

Figure 4
איור 4 . לכרות את האונה חציון (RML).
(א) הבסיס של RML.
(B) במקום יתושים מלקחיים hemostasis מסביב לבסיס של RML.
(ג) נכרות parenchyma הכבד של RML מיד מעל המלקחיים.
(ד) להשאיר שכבה פשוטה ורזה של רקמת כבד שריד SHVC.
סרגל קנה מידה = 5 מ מ. קיצורים: ML האונה החציוני, RSL נכון האונה מעולה. אנא לחץ כאן כדי להציג גירסה גדולה יותר של הדמות הזאת.

Figure 5
איור 5 . כדי להתקין את השרוול.
(א) למשוך PV דרך לומן של מגבון.
(ב) לתקן את השרוול ידית ואת PV יחד על-ידי מלחציים כלי השיט.
(ג), אוורט הקיר וסקולרית PV כדי לכסות את המשטח החיצוני של השרוול.
(ד) להבטיח את הקיר כלי הדם ואת שהקפל בעמדה.
סרגל קנה מידה = 5 מ מ. אנא לחץ כאן כדי להציג גירסה גדולה יותר של הדמות הזאת.

Figure 6
איור 6 . כדי לשחזר את SHVC.
(A & B) . תעצור שני התפרים לימין ולשמאל, בהתאמה.
(ג) דוגמה הקיר האחורי של SHVC על ידי בתפר רץ בלומן כלי הדם.
(ד) anastomose הקיר הקדמי של SHVC מחוץ לכלי הדם לומן.
סרגל קנה מידה = 5 מ מ. אנא לחץ כאן כדי להציג גירסה גדולה יותר של הדמות הזאת.

Figure 7
איור 7 . כדי לשחזר את IHVC.
(א) לומן וסקולרית גלילי של IHVC של הנמען.
(ב) לאבטח ההשקה השרוול של IHVC.
(ג) להתחיל את פגיעה reperfusion.
(ד) לקצץ את parenchyma הכבד שמסביב מעל התפר משי במבניו.
סרגל קנה מידה = 5 מ מ. קיצורים: PV וריד שער הכבד, IHVC infrahepatic נחות הנבוב, RIL נכון האונה נחות. אנא לחץ כאן כדי להציג גירסה גדולה יותר של הדמות הזאת.

Figure 8
איור 8 . שחזור משקל הגוף לאחר הניתוח.
משקל הגוף של נמענים החלה להתאושש לאחר יום לאחר הניתוח 4. השיפוע של משקל הגוף היה קרוב לזה של נורמלי לואיס חולדה לאחר יום לאחר הניתוח 6, ומזה משתמע בעקיפין את ההתאוששות של הנמען.

Figure 9
איור 9 . היסטולוגיה של השתלת הכבד לאחר 30 ימים-
בהיסטולוגיה, שגשוג קלה של המרה נצפתה ב נמענים, הארכיטקטורה lobular הכבד של נמענים היה תקין. אין נמק או הרחבה sinusoidal ברור נצפתה (400 X). סרגל קנה מידה = 20 אום אנא לחץ כאן כדי להציג גירסה גדולה יותר של הדמות הזאת.

Figure 10
איור 10 . סרום לרמת ב"רצועת
רמת ALT בסרום היה בטווח הנורמלי ב 30 פוד. (* *, P < 0.05).

Figure 11
איור 11 . רמת בילירובין בסרום.
סרום רמת בילירובין POD 30 היה דומה לזה של עכברוש לואיס נורמלי (P > 0.05).

Figure 12
איור 12 . דימום המחירים של שיטות שונות של hepatectomy.
שיעור נמוך יותר של דימום כבד שריד הגדם של ML נצפתה ב השיטה באמצעות את hepatectomy 70% מונחה כלי השיט.

נהלים הסרה של הכבד SHVC השקה PV השקה IHVC השקה Anhepatic זמן
הזמן (דקות) 2.62±0.46 15.73±2.05 4.68±0.77 2.05±0.71 23.03±2.30
הנתונים שבאו לידי ביטוי ב- Mean±SD

טבלה 1. הזמן של ניתוחים בודדים במהלך שלב anhepatic

Table 2
בטבלה 2. ההבדל בין שני פרוטוקולים מטמיעים של העכברוש PLTx. אנא לחץ כאן כדי להציג גירסה גדולה יותר של השולחן הזה.


חומרים משלימים

Subscription Required. Please recommend JoVE to your librarian.

Discussion

PLTx עכברוש הוא הליך המיקרוכירורגית מתוחכם עם תוכנית אימונים גבוה עלות, זמן משך20. המורכבות של העכברוש PLTx פרוטוקול מנעה חוקרים באמצעות מודל זה בעל חיים. לעומת עכברוש בגודל מלא LTx, עכברוש PLTx מציג את microsurgeon לא רק עם האתגר של הליך ההשתלה, אלא גם עם האתגר של הכבד כריתה של חיה קטנה. לכן, פרוטוקול המיקרוכירורגית מטמיעים המתארת את כל התהליך בפירוט חיוני לגיבוש מודל מורכב זה. כתבה בעבר מטמיעים שדווחו על-ידי נגאי. ואח הציגה פרוטוקול של 50% חלקי orthotopic LTx עם שחזור עורקי הכבד חולדות5 (טבלה 2). פרוטוקול זה משמש של ex-vivo hepatectomy, הדומה קלינית ההליך של פיצול LTx.

לעומת פיצול LTx, חיים התורם LTx resects השתל כבד חלקית של התורם החי ולא מפצל את הכבד בפעולת הגב-טבלה. ההסרה אין ויוו בכבד עלול להוביל עוד מניפולציות כירורגי, יתר לחץ דם פורטל יותר ו איסכמיה חמים יותר, פגיעה השתל כבד חלקית. לפיכך, מספר מלשין PLTx דגמי ניצול ויוו hepatectomy הוקמו מחקרים רלוונטיים6,8,21,22 פרוטוקולים רבים כרוכים כריתה של האונות הכבד לאחר מצדו פשוטה pedicle או בבסיס2,3,6,8,21,23. עם זאת, שונה אונות הכבד הן צורות שונות. ML של העכברוש יש רחב לבסס את המקיף למחצה את הווריד הנבוב10,24. הצבת מצדו פשוטה בבסיס של ML בקלות מכווץ את vena נחות. כדי למנוע את ההתכווצות של הווריד הנבוב, שפותחה Madrahimov. ואח של שימור parenchyma מונחה כלי hepatectomy להסיר ML בשלבים 2 לאחר ארבעה תפרים פירסינג ב- parenchyma נעשו, עוזב את הגדם שריד של ML שטוח 10. עם זאת, PVs של האונות הכבד מאתרים מאת התפרים פירסינג שהיו מוסתרים ב- parenchyma. דימום הגדם שריד נגרם חסר או ופצעו את ענפי PV קטן לא יכול להיות לגמרי נמנעה 11. בפרוטוקול שלנו, PVs המתאימה ואת עורקי הכבד היו עוד יותר גזור קודם. לאחר מכן, אספקת הדם של הכבד האונות resected היה בנפרד occluded על ידי ligations לפני ההסרה. לכן, הקצב של דימום הגדם שריד הונמך באמצעות פרוטוקול שלנו (איור 10). הטכניקה של הצבת ארבעה תפרים פירסינג הגדם של ML הועסק גם בפרוטוקול שלנו כדי מאתרים ומפסיקים את הורידים הכבד, אבל לא את PV ואת עורקי הכבד. עם ligations האלה באמצעות תפרים פירסינג מרובים של כריתה הדרגתיים, צורה שטוחה של הגדם שריד הכבד היה מתוחזק, אשר נמנע את הכיווץ של הווריד הנבוב.

את שיקומה IHVC, בוצע שינוי קל ההשקה השרוול מתוארת על ידי קמהדע. et al. 25. הכלילי התחתון של הנמען היה transected ב- parenchyma של האונה נכון נחות ולא על הספינה IHVC, אשר השאיר parenchyma של הכבד במבניו סביב הווריד הנבוב. Parenchyma הכבד סביב הווריד הנבוב עזרו לשמור על צורת גליל של כלי הדם סוף IHVC של הנמען ולא צורה שטוחה. לפיכך, לומן של IHVC נפתח באופן טבעי ללא העזרה של התפרים וחדים. שינוי זה עזרת להציל השלב של הצבת התפרים והנחה את ההוספה של השרוול IHVC לתוך לומן כלי הדם של הנמען. יתר על כן, שינוי זה ממושך לאורך כלי הדם IHVC, ובכך להפחית את המתח בין השניים במהלך ההשקה השרוול.

עם היתרון של השקה מהר וסקולרית, הטכניקה השני-השרוול משמש לעתים קרובות העכברוש orthotopic LTx על anastomosing PV של IHVC. . Miyata et al. , אף הציע פרוטוקול מעורבים טכניקה שלוש-השרוול anastomose PV, IHVC, SHVC. עם זאת, הטכניקה השרוול יש גם החסרונות. ראשית, מגבון עם גודל קבוע, לא בצורה מושלמת יתאים לגודל הכלי המתאים בנוסף, הטכניקה השרוול מפריע זרימת הדם, וכתוצאה מכך שכיחות גבוהה יותר של פקקת ותגובה גוף זר אל השרוול26. SHVC, הכלי העיקרי בחולדה, מציגה את זרימת הדם גבוהה. כל הכיווץ או פקקת בספינה עלולה לגרום סיבוכים חמורים לאחר הניתוח. לכן, בפרוטוקול PLTx שלנו, אנו בוחרים להשתמש בטכניקה תפר יד לשחזר את SHVC, מה שמאפשר עבור ההתאמה של ההשקה קרוב ככל האפשר אל ההגדרה הפיזי. עם זאת, באיכות גבוהה SHVC השקה הושלמה על ידי הטכניקה תפר יד דורש מיומנות גבוהה השתלה. למתחילים, טריאנגולציה טכניקה של קארל מומלצת anastomosing כלי 27. באמצעות טכניקה זו, שלושת התפרים ממוקמים במרווחים קבועים סביב היקף SHVC. הצורה התלת-ממדית של SHVC נשמר על ידי מפסק שלושת אלה להישאר תפרים לאורך משלושה כיוונים, אשר יכול למנוע את SHVC של היצרות במהלך ההשקה.

Arterialization מחדש של השתל הכבד הוא נושא שנוי במחלוקת. לדעתנו, arterialization מחדש אינו הצעד מפתח להבטחת סיכויי הישרדות גבוהים של הנמען, אבל זה יכול להיות הצעד מפתח להבטחת השתלה כבד באיכות גבוהה. בפרוטוקול המסורתי של העכברוש LTx המערבים את הטכניקה השני-השרוול, עורק הכבד שוחזר לא, כמו חוסר זלוף של עורק הכבד לא השפיע על התוצאה של העכברוש LTx12. יתר על כן, נערך מחקר קודמות על העכבר LTx לחקור את השפעת arterialization מחדש על ההישרדות שתל לטווח ארוך, שינויים היסטולוגית, נזק איסכמי כבד אוטואימונית הפעלה מוקדמת מסלולים13. החוקרים הגיעו למסקנה כי arterialization מחדש שתלי הכבד לא היה בעל השפעה גדולה על שיעור ההישרדות או מידת ההפעלה אוטואימונית. עם זאת, מחקר שנערך לאחרונה שדווחו על-ידי הואנג. ואח עולה ש-arterialization מחדש זה חשוב עבור ההתאוששות של הכבד parenchyma נתון hepatectomy, במיוחד עם החסם של יצוא28. Non-arterialization של השתל כבד חלקית מחמירות נזק לכבד, עיכבה את ההתאוששות של מוקדי נמק. לכן, מומלץ arterialization מחדש של השתל כבד חלקית. כמופיע כאן, טכניקה הקצה לצד השקה שימש לשחזר את עורק הכבד, אשר תוארה בעבר על ידי אחד שלנו מחברים 14. היתרון של שיטה זו הוא הבחירה כדי anastomose שני העורקים עבות, את צ'ה, GDA, יותר מאשר את פא דק, אשר מפחית את הקושי של שיחזור עורק הכבד ושומר שיעור גבוה של patency של ההשקה.

העכברוש קלאסית פרוטוקול LTx המוצע על ידי קמהדע. ואח מציע שליטה השלב anhepatic כזה כי זה פחות מ 26 דקות, כמו שום חיה לא שרד כאשר השלב anhepatic מעמד יותר 26 דקות25. הניסיון שלנו הוא עקבי עם הצעה זו, למרות בעבר הבחנו בכמה מקרים הישרדות עם anhepatic שלב זמן ארוך יותר מזה 26 דקות. לדעתנו, שלב anhepatic יציב מקבלת עדיפות על שלב anhepatic קצר יותר במחקר כירורגי. בקבוצה שלנו, שלב anhepatic נשלטת בצורה מדויקת כדי בזמן מסוים. השלב anhepatic לא יעצרו עד הגיע הזמן anhepatic מראש, למרות ההשקה של SHVC, PV יכול להסתיים הרבה יותר מוקדם. עם זאת, בפרוייקט הכשרה, שלב anhepatic קצר יותר יתקבל בברכה.

למרות שיפורים רבים נעשו כדי לקצר את שלב ההכשרה למנוע פעולות מיותרות, עכברוש LTx ו- PLTx הן פעולות מורכבות עדיין המיקרוכירורגית20. לכן, בנוסף פרוטוקול מטמיעים, פרוטוקול אימונים הדרגתיים מבוסס על מחזור תוכנית-דו-סימון-פעולה חשוב להשגת שיעור הישרדות גבוהה ואיכות גבוהה המבצע. מניסיוננו ראשוני באמצעות פרוטוקול אימונים זה הראה כי פעולות 40-73 נדרשו מאסטר של עכברוש orthotopic LTx. 9-13 פעולות נדרשו להיות מאסטר העכברוש נוספים מחדש arterialized PLTx. פרוטוקול אימונים המוצע על ידי Czigány et al. טוען כי 50-60 LTxs מספיקים לשלוט על orthotopic LTx, PLTx29.

ב פרוטוקול אימונים שלנו תוכנית-דו-סימון-פעולה, בקרת איכות בכל שלב ההכשרה ובתוך כל מניפולציה בודדים יש להדגיש, בפרט כאלה מודל מורכב. סיכויי הישרדות גבוהים אינה בבחינת הליך באיכות גבוהה. בתוצאות נציג, נרשמו מספר קריטריונים להערכת איכות תיאום, כולל היסטולוגיה, האנזים בכבד, שחזור משקל הגוף, צהבת (סרום בילירובין וצהוב -שתן), משך השלב anhepatic, ו- patency של עורק הכבד. באיכות גבוהה מושגת רק כאשר מתקיימים כל הקריטריונים.

Subscription Required. Please recommend JoVE to your librarian.

Disclosures

כל המחברים יש אינטרסים סותרים לא לחשוף.

Acknowledgments

מחקר זה נתמך על ידי הלאומי מדעי הטבע קרן של סין (מענק מס 81501382) ג'ג'יאנג המחוז מדעי הטבע קרן של סין (מענק מס ' LQ13H100003, LQ16H100002).

Materials

Name Company Catalog Number Comments
Surgical microscope Möller-Wedel, Germany 654359
Light source OSRAM (China) Lighting Co., Ltd 64627
Isoflurane Vaporizer MIDMARK Corporation VIP3000
Isoflurane Baxter Healthcare Corporation 40032609 For Inhalation anesthesia
Normal Saline Zhejiang Tianrui Pharmaceutical Co., Ltd. 716092103
Povidone Iodine Solution HANGZHOU MINSHENG PHARMACEUTICAL H33021567 For disinfection
Hemostatic forceps Shanghai Medical Instruments(Group) Ltd J31020
Surgical scissors Shanghai Medical Instruments(Group) Ltd JC2116
Needle-holder Shanghai Medical Instruments(Group) Ltd J32030
Dressing Forceps Shanghai Medical Instruments(Group) Ltd J42020
Mosquito hemostatic forceps Shanghai Medical Instruments(Group) Ltd W40340 For liver resection; For retracting the stay sutures. 
Micro-scissors Shanghai Medical Instruments(Group) Ltd WA1040
Micro needle-holder Shanghai Medical Instruments(Group) Ltd WA2060
Curved micro typing forceps Shanghai Medical Instruments(Group) Ltd WA3061
straight micro typing forceps Shanghai Medical Instruments(Group) Ltd WA3060
Micro hemostatic forceps Shanghai Medical Instruments(Group) Ltd WA3020
Bulldog clamp Shanghai Medical Instruments(Group) Ltd XEC350
Vessel clamps Shanghai Medical Instruments(Group) Ltd W40160
Micro Serrefine-curved  Fine Science Tools, Inc 18055-05
Dacryosyrinx Shi Zhuo medical instruments Co., Ltd. 5# curve Use as the curved needle for forcing out the air bubbles in the vascular lumen
Sterilized gauze swabs Fuqing Health & Integral Medical 20230R
5mL syringe Zhejiang Yusheng Medical Instrument Co.,Ltd 811932416
18G needles Shanghai Kindly Enterprise Development Group Co., Ltd 01-014 For fixing the upper abdomen wall
Intima II 22G intraveous catheter Becton Dickinson Medical Devices (Shanghai) Co Ltd. 383207y For making biliary stent; For infusing perfusate
7-0 polypropylene sutures Ningbo Medical Needle Co., Ltd 151026 For SHVC anastomsis
6-0 silk suture Shanghai Pudong Jinhuan Medical Products Co., Ltd 2650182 For ligation
Culture dish (100mm) Corning Incorporated 430165 used in back table for storage ice. The back table dish was placed on it. 
Culture dish (30 mm) Corning Incorporated 3296 As a vessel for organ preservation
Angiocath 12G intravenous catheter Becton Dickinson Medical Devices (Shanghai) Co Ltd. 382277 For making a IHVC cuff
Angiocath 14G intravenous catheter Becton Dickinson Medical Devices (Shanghai) Co Ltd. 382269 For making a PV cuff
Buprenorphine (hydrochloride) Tianjin Institute of Pharmaceutical Research Pharmaceutical Co., Ltd H12020275 For analgesic
Cefuroxime sodium for injection Esseti FarmaceuticiS.r.l H20160013 As an antibiotics

DOWNLOAD MATERIALS LIST

References

  1. Yan, J. Q., Becker, T., Peng, C. H., Li, H. W., Klempnauer, J. Split liver transplantation: a reliable approach to expand donor pool. Hepatobiliary Pancreat Dis Int. 4, 339-344 (2005).
  2. Xia, R., Emond, J. C. Orthotopic partial liver transplantation in the rat: a model of 70% hepatectomy and reduced size liver transplantation. Transplantation. 56, 1041-1043 (1993).
  3. Omura, T., Ascher, N. L., Emond, J. C. Fifty-percent partial liver transplantation in the rat. Transplantation. 62, 292-293 (1996).
  4. Foss, A., et al. Function of reduced-size liver transplant in the rat. Res Exp Med (Berl). 197, 91-99 (1997).
  5. Nagai, K., Yagi, S., Uemoto, S., Tolba, R. H. Surgical procedures for a rat model of partial orthotopic liver transplantation with hepatic arterial reconstruction. J Vis Exp. , e4376 (2013).
  6. Sun, J., Qin, G., Wu, L., Wang, C., Sheil, A. G. Antigenic load and peripheral chimeric levels in entire and partial liver allograft recipients. Microsurgery. 21, 183-187 (2001).
  7. Ninomiya, M., et al. Deceleration of regenerative response improves the outcome of rat with massive hepatectomy. Am J Transplant. 10, 1580-1587 (2010).
  8. Yamanaka, K., et al. Effect of olprinone on liver microstructure in rat partial liver transplantation. J Surg Res. 183, 391-396 (2013).
  9. Wang, W., et al. Mesenchymal stem cells promote liver regeneration and prolong survival in small-for-size liver grafts: involvement of C-Jun N-terminal kinase, cyclin D1, and NF-kappaB. PLoS One. 9, e112532 (2014).
  10. Madrahimov, N., Dirsch, O., Broelsch, C., Dahmen, U. Marginal hepatectomy in the rat: from anatomy to surgery. Ann. Surg. 244, 89-98 (2006).
  11. Martins, P. N., Theruvath, T. P., Neuhaus, P. Rodent models of partial hepatectomies. Liver Int. 28, 3-11 (2008).
  12. Kamada, N., Sumimoto, R., Kaneda, K. The value of hepatic artery reconstruction as a technique in rat liver transplantation. Surgery. 111, 195-200 (1992).
  13. Steger, U., Sawitzki, B., Gassel, A. M., Gassel, H. J., Wood, K. J. Impact of hepatic rearterialization on reperfusion injury and outcome after mouse liver transplantation. Transplantation. 76, 327-332 (2003).
  14. Huang, H., et al. A novel end-to-side anastomosis technique for hepatic rearterialization in rat orthotopic liver transplantation to accommodate size mismatches between vessels. Eur Surg Res. 47, 53-62 (2011).
  15. Bernal, J., et al. Guidelines for rodent survival surgery. J.Invest Surg. 22, 445-451 (2009).
  16. Johnson, A. J., Stulting, R. D. Ophthalmic Microsurgical Suturing Techniques. Macsai, M. S. , Springer. Berlin Heidelberg. 21-28 (2007).
  17. Delriviere, L., et al. Detailed modified technique for safer harvesting and preparation of liver graft in the rat. Microsurgery. 17, 690-696 (1996).
  18. Oldani, G., Lacotte, S., Morel, P., Mentha, G., Toso, C. Orthotopic liver transplantation in rats. J Vis Exp. , (2012).
  19. Delriviere, L., et al. Technical details for safer venous and biliary anastomoses for liver transplantation in the rat. Microsurgery. 18, 12-18 (1998).
  20. Jin, H., et al. Preliminary experience of a PDCA-cycle and quality management based training curriculum for rat liver transplantation. J Surg Res. 176, 409-422 (2012).
  21. Selzner, N., Selzner, M., Tian, Y., Kadry, Z., Clavien, P. A. Cold ischemia decreases liver regeneration after partial liver transplantation in the rat: A TNF-alpha/IL-6-dependent mechanism. Hepatology. 36, 812-818 (2002).
  22. Tanaka, H., Hashizume, K., Enosawa, S., Suzuki, S. Successful transplantation of a 20% partial liver graft in rats: a technical innovation. J Surg Res. 110, 409-412 (2003).
  23. Bockhorn, M., et al. Erythropoietin treatment improves liver regeneration and survival in rat models of extended liver resection and living donor liver transplantation. Transplantation. 86, 1578-1585 (2008).
  24. Martins, P. N., Neuhaus, P. Surgical anatomy of the liver, hepatic vasculature and bile ducts in the rat. Liver Int. 27, 384-392 (2007).
  25. Kamada, N., Calne, R. Y. Orthotopic liver transplantation in the rat. Technique using cuff for portal vein anastomosis and biliary drainage. Transplantation. 28, 47-50 (1979).
  26. Kashfi, A., et al. A review of various techniques of orthotopic liver transplantation in the rat. Transplant.Proc. 37, 185-188 (2005).
  27. Wain, R. A. J., Hammond, D., McPhillips, M., Whitty, J. P. M., Ahmed, W. Surgical Tools and Medical Devices. Ahmed, W., Jackson, M. J. , Springer International Publishing. 545-562 (2016).
  28. Huang, H., et al. Hepatic arterial perfusion is essential for the spontaneous recovery from focal hepatic venous outflow obstruction in rats. Am J Transplant. 11, 2342-2352 (2011).
  29. Czigany, Z., et al. Improving Research Practice in Rat Orthotopic and Partial Orthotopic Liver Transplantation: A Review, Recommendation, and Publication Guide. Eur Surg Res. 55, 119-138 (2015).

Tags

רפואה בעיה 134 השתלת כבד hepatectomy arterialization מחדש עכברוש הכלי הכבד השתלת כבד חלקית כלי מונחה קאף השקה
מחדש Arterialized השתלת הכבד חלקית עכברוש עם <em>ויוו</em> מונחה כלי 70% Hepatectomy
Play Video
PDF DOI DOWNLOAD MATERIALS LIST

Cite this Article

Chen, X., Yu, R., Xu, Z.,More

Chen, X., Yu, R., Xu, Z., Zhang , Y., Liu, C., Chen, B., Jin, H. Re-Arterialized Rat Partial Liver Transplantation with an in vivo Vessel-Oriented 70% Hepatectomy. J. Vis. Exp. (134), e56392, doi:10.3791/56392 (2018).

Less
Copy Citation Download Citation Reprints and Permissions
View Video

Get cutting-edge science videos from JoVE sent straight to your inbox every month.

Waiting X
Simple Hit Counter