Waiting
Login processing...

Trial ends in Request Full Access Tell Your Colleague About Jove
JoVE Journal Medicine
Click here for the English version

Medicine

Re Arterialized råtta delvis lever Transplantation med i vivo fartyget-orienterade 70% Hepatectomy

Published: April 8, 2018 doi: 10.3791/56392
Automatic Translation
1, 2, 3, 3, 4, *1, *3
1Department of Surgery, The First Affiliated Hospital of Wenzhou Medical University, 2Reproductive Center, The First Affiliated Hospital of Wenzhou Medical University, 3Department of Transplantation, The First Affiliated Hospital of Wenzhou Medical University, 4Department of Surgery, Perelman School of Medicine at the University of Pennsylvania
* These authors contributed equally

Summary

Här presenteras ett protokoll som omfattar åter arterialized råtta partiell levertransplantation. Närmare bestämt var 70% levern opererande i vivo med hjälp av en uppdaterad teknik av fartyg-orienterade hepatectomy. Den hepatiska artären rekonstruerades i ett slutet-till-sida-sätt. Manschetten tekniken ändrades för att förkorta anastomos av infrahepatic vena cava.

Abstract

Split levertransplantation och levande lever givare lever transplantation utvecklades i kliniken för att utnyttja lever organ på ett effektivare sätt. För att bättre förstå mekanismen bakom dessa kirurgiska ingrepp, inrättades en råtta partiell levertransplantation (PLTx) modell för relevanta kirurgiska studier. På grund av komplexiteten av råtta PLTx modell krävs ett protokoll med detaljerade beskrivningar. En artikel publicerad tidigare rapporterat ett protokoll där ex vivo hepatectomy användes för att uppnå 50% råtta PLTx. I motsats till detta protokoll infört vi ett nytt arterialized PLTx med en i vivo 70% hepatectomy. En uppdaterad fartyget-orienterade hepatectomy införlivades råtta PLTx att förfina den mikrokirurgisk proceduren. Portal vener och nedsatt artärer av den vänstra laterala loben och den median LOB var individuellt dissekeras och sammanskrivna innan borttagning av levern parenkymet, vilket minskar sannolikheten för blödning i kvarleva lever stubben. Dessutom infördes en slut-till-sida fartyget anastomos mellan den gemensamma levern artären och utvidgade rätt levern artär för att åter arterialize den hepatiska artären. Genom att använda denna slut-till-sida fartyget anastomos teknik, utvidgades diameter anastomos, därmed minska svårigheten att hand suturen och upprätthålla en hög frekvens av anastomotic patency. Dessutom ändrades något manschetten anastomos av infrahepatic vena cava. En del av omkretsriktningen lever parenkymet runt vena cava av en mottagare bevarades under manschetten anastomos att bibehålla tredimensionella formen av vaskulär lumen. Detta avsnitt av levern parenkymet togs bort efter avslutad anastomos. Med denna ändring utelämnades det steget som inbegriper placering av vistelse suturer, vilket ytterligare förkorta manschetten anastomos tiden. Med hjälp av detta protokoll av råtta PLTx, uppnåddes en låg leverenzym nivå, en intakt lever lobulär arkitektur och en hög överlevnad efter mikrokirurgi.

Introduction

För närvarande finns det en stor diskrepans mellan antalet donerade levern organ och antalet patienter som väntar på en donerade levern. Lever organbristen är ett globalt problem. Att expandera givarpool, split levertransplantation (LTx) och levande givare LTx utvecklades för att använda en partiell lever som en transplantat1.

För att ytterligare undersöka mekanismen bakom partiell levertransplantation (PLTx), varit relevanta djurmodeller etablerade2,3,4,5. I råtta PLTx är levern loberna opererande i vivo och ex vivo att efterliknar villkoren för den levande givaren LTx och split LTx, respektive i mänskliga. En artikel publicerad i Journal om visualiseras experiment presenteras ett detaljerade protokoll som omfattar en 50% råtta PLTx använder en-5 ex vivo hepatectomy. Dock har en råtta PLTx med en i vivo hepatectomy ännu inte rapporterats i den visualiserade litteraturen.

Förutom skillnaden mellan in-vivo och ex vivo hepatectomies spelar tekniken att utföra en hepatectomy själv också en viktig roll i att fastställa resultatet av PLTx. för närvarande i många kirurgiska studier med råttan PTLx modell, levern loberna var resected efter att placera en enkel ligatur på BLOMSTJÄLK av levern LOB2,3,6,7,8,9. Men att placera en enkel ligatur innan resektion inte är lämplig för alla lever lober, som olika levern lober har olika former och storlekar. En enkel ligatur vid basen av median LOB innebär en hög risk för att orsaka en förträngning av vena cava, vilket så småningom kan påverka utflödet av partiell lever transplantat10,11. Därför krävs en uppdatering hepatectomy teknik baserad på kunskap om råtta nedsatt anatomi i fältet av råtta PTLx.

I protokollet beskrivs i denna studie, införlivades en uppdaterad fartyget-orienterade 70% hepatectomy tillvägagångssättet av råtta PLTx. Portal vener och nedsatt artärer av vänster laterala loben (LLL) och median lob (ML) var dissekeras och uppdelat individuellt före borttagning av levern parenkymet. Sedan var nedsatt venerna av LLL och ML sammanskrivna av piercing suturer. Genom att använda enskilda nering och flera piercing suturer i stället för att placera en enkel ligatur, kunde kvarleva stubben ml att sprida över vena cava. Därmed undveks constrictionen av infrahepatic vena cava orsakas av en kirurgisk ligation. Dessutom ocklusion av blodtillförseln av LLL och ML av enskilda nering före borttagning av levern parenkymet minskade frekvensen av blödningar i kvarleva lever stubben, vilket minimerar påverkan av blodförlust på experiment11.

För microsurgeons är det en betydande utmaning att rekonstruera rätt levern artär (PHA) av en lever transplantat på grund av den extremt små diametern av detta fartyg. Även om frågan om huruvida re arterialization i LTx krävs verkligen är fortfarande under debatt12,13,14, har många mikrokirurgiska tekniker för att rekonstruera den hepatiska artären varit föreslagna14 . Här, introducerar vi en ny teknik för re arterialization av levern transplantat, som anastomoser den gemensamma levern artären (CHA) till den utvidgade PHA i ett slutet-till-sida-sätt. Genom att använda denna slut-till-sida-teknik, är två nedsatt artärer anslutna med en anastomos med en större diameter. Ju större diameter anastomos är, den lättare hand suturering är att utföra och desto större förbättring i patency av anastomos blir.

Subscription Required. Please recommend JoVE to your librarian.

Protocol

Alla förfaranden följde riktlinjerna av gnagare kirurgi som godkänts av de Wenzhou Medical University djur politik och välfärd kommittén 15.

1. djur

  1. Använd Lewis hanråttor väger 250-350 g som givare och mottagare.

2. operativ miljö

  1. Utför alla mikrokirurgiska procedurer i kirurgiska Mikroskop med en förstoring som sträcker sig från 7 X 20 X. Sterilisera alla kirurgiska instrument före användning i drift.
    Obs: De operationssalen och operationsbordet är ren men inte steril.

3. grundläggande mikrokirurgisk manövrar

  1. Gratis, dissekera och mobilisera fartyget.
    1. Använd först raka mikro-pincett för att lyfta den omgivande vävnaden på fartyget.
    2. Andra, upprepade gånger och försiktigt öppna och Stäng tips av böjda mikro-tången så att de fina tips kan skära öppna och skala den omgivande vävnaden på den främre väggen av fartyget.
    3. Tredje, använda raka mikro-pincett klämma och lyfta fartyget för att exponera det bakre utrymmet. Använd sedan tips av böjda mikro-tången för att skala den omgivande vävnaden på den bakre väggen i fartyget. Slutligen bör en skallig fartyg utan någon omgivande vävnad ansluten presenteras.
  2. Dela eller dubbla ligera och dela ett fartyg eller vävnad.
    1. Först knyta två square knutar på fartyget eller vävnad med hjälp av två micro-peang16. För det andra, avskurna fartyg eller vävnad mellan två square knutarna med mikro-sax.

4. beredning av manschetten och biliär Stent

  1. Muddar av portalen ven och infrahepatic vena cava med 12-gauge och 14 gauge intravenösa katetrar, respektive, medan biliär stent används är en 22 gauge intravenös kateter. Ärmslut består av en kropp och handtag del. Använd en cylindrisk på kroppsdel för att säkra kärlväggen på manschetten (figur 1).

5. anestesi och fixering av råttor

  1. Placera försiktigt Lewis råtta i en induktion box med 5% isofluran blandas med 0,5 L/min syre att inducera inandning anestesi. Övervaka den respiratorisk frekvensen av råttan att förhindra oväntade dödsfall som orsakas av en överdos av isofluran. Minska koncentrationen av isofluran till 2% att underhålla anestesi När råttan inte reagerar på smärta stimulering.
  2. Flytta råtta till en 30 x 30 cm ek planka omfattas av en steriliserad kirurgiska matta handduk och placera råtta i ryggläge. Knyt på råtta med mediala tejp fyra lemmar, och därefter fixa tejpen med fyra häftstift. Desinficera huden med 70% alkohol en tid och iodophors tre gånger.

6. givare drift

  1. Utsätta det operativa fältet
    1. Skär ett litet tvärgående snitt på övre delen av buken att transekt de bilaterala sämre epigastrisk fartyg som använder en elektrisk coagulator.
    2. Utöka det tvärgående snittet nära den revbens marginalen på övre delen av buken med kirurgisk sax.
    3. Omvänd och fixa den övre delen av buken vägg och xiphoid process, respektive kraniala sida.
    4. Flytta tarmen ur bukhålan med två våt bomull pinnar. Täcka tarmen med hjälp av en våt bit gasbinda.
  2. Skära av ligament och trimning suprahepatic vena cava (SHVC)
    1. Skära av den falciformal ligament, koronar ligament och triangulära ligamentet i sekvens.
    2. Gratis vänster diafragma venen från membranet med mikro-pincett. Sedan, dubbel ligera det med 6-0 silk suturer.
      Obs: Dela inte denna ven i detta steg.
    3. Avskurna bukhåla ligament med mikro-sax som gratis på sämre caudatus LOB och hepatoesophageal ligament och artär.
  3. Occluding blodtillförseln av LLL och ML innan resektion (figur 2)
    1. Använd först böjd pincett att noggrant dissekera den bakre väggen i den gemensamma stammen av PV som förser LLL och vänster median lob (älskar mitt liv) från parenkymet. Andra dubbel ligera och dela det med motsvarande gallgången och levern artär tillsammans.
    2. Dissekera och dela PV av RML försiktigt eftersom denna ven följer nära levern parenkymet.
      Obs: 14 X förstoring rekommenderas. Inte skada PV av rätt överlägsna LOB, som ligger nära PV av RML.
    3. Identifiera de hepatiska artären och gallgången av den RML som ligger mellan PVs av RML och älskar mitt liv. Dubbelrum ligera och dela levern artär och gallgången av den RML med 6-0 silk suturer.
      Obs: En förändring i den LLL och ML färg från rött till mörkt rött är en indikator på lyckad ocklusion av blodtillförseln. Fördjupade kunskaper i den vaskulära anatomin är nödvändigt att identifiera och dissekera de motsvarande fartyg. En tidigare studie på råtta illustreras tydligt nedsatt anatomi av korrosion kastar10.
  4. Resecting LLL
    1. Ligera BLOMSTJÄLK av den LLL använder en omkretsriktningen 3-0 silk sutur för att Täpp blodflödet i den vänstra laterala nedsatt ven. Med hjälp av mikro-sax, skär levern omedelbart ovanför den ligering ta bort levern massan.
  5. Resecting kärlek mitt liv
    1. Klämma den vänstra median nedsatt ven av mygga hemostatiska tången placeras längs den median sprickan (figur 3A). Ta bort alla lever parenkymet kärlek mitt liv omedelbart ovan tången med mikro-sax.
    2. Plats en piercing sutur som penetrerar levern parenkymet omedelbart under tången kring vänster medianen nedsatt ven. Sedan knyta en square knut för att ligera det innan du släpper tången.
    3. Placera en annan två piercing suturer under tången att omge resten av öppna snittet kärlek mitt liv. Sedan, knyta två kvadrat knop för att stänga resten av snittet. Släppa mygga hemostatiska tången att kontrollera blödning.
  6. Resecting RML (figur 4)
    1. Placera mygga hemostatiska pincett för att omger basen av RML på ett avstånd av 0,5 cm till SHVC (figur 4B). Sedan, cross-klämma i base med mygga hemostatiska tången till Täpp rätt median nedsatt venen.
    2. Med hjälp av mikro-sax, ta bort alla lever parenkymet av RML längs den övre ytan av tången. Var noga med att arbeta mycket nära ytan av tången, lämnar en slät och tunn stubbe i ML.
    3. Plats första piercing suturen genomträngande lever parenkymet under tången att omge mellersta medianen nedsatt ven. Sedan knyta en square knut för att ligera den mellersta median nedsatt ven. Plats andra piercing suturen att ligera rätt median nedsatt venen med samma metod. Placera en annan två piercing suturer nära resten av snittet efter beskrivningen i 6.5.2.
  7. Trimma infrahepatic vena cava (IHVC)
    1. Uppskuren i retroperitoneum för att exponera IHVC. Använda böjda mikro-tången som gratis på IHVC och höger nedsatt ven från den omgivande vävnaden. Dissekera och ligera höger binjure venen, som rinner ut i IHVC bakifrån.
    2. Utföra en rätt nefrektomi efter ligating den rätt njurvenen och just nedsatt artär att spara tillräckligt vaskulär längd om du vill installera manschetten på IHVC i ett senare steg.
  8. Installera den biliära stenten
    1. Mobilisera den gemensamma gallgången (CBD) från första nedsatt hilum använder mikro-pincett. Ligera CBD på cross-peka av pyloric ven och CBD med en 6-0 silk sutur.
    2. Skär en tvärgående snitt på den främre väggen av CBD på proximala sida av ligering. Infoga en biliär stent, gjord av en 22 gauge intravenös kateter, in i lumen av CBD via snittet. Säkra den biliära stenten med en omkretsriktningen 6-0 silk suturen. Transekt CBD mellan de två 6-0 silk suturerna.
  9. Trimma PV
    1. Ligera pyloric venen med en 6-0 silk sutur distalt PV. Nästa, ligera pyloric venen med en 7-0 polypropylen sutur nära PV. Transekt pyloric venen mellan dessa två nering. Dubbla ligera och dividera den mjälten ven på samma sätt.
      Obs: Använd en 7-0 polypropylen sutur för att ligera fartyget för att göra en mindre ligering Knut jämfört med 6-0 silk suturen. En stor Knut kan störa manschetten installationen i det sista steget. Kärlväggen pyloric ven och mjälten ven är tunna, så mild manipulationer är nödvändiga under dissektion. En tidigare publicerad artikel med mer tekniska beskrivningar och illustrationer om dissekera och dividera pyloric venen och mjälten ven bör läsas innan operation17.
  10. Trimma den gemensamma levern artären (CHA)
    1. Noggrant gratis CHA och dess två bifurkationer, PHA och den gastrointestinala artären (GDA), från den omgivande vävnaden med hjälp av två micro-pincett. Dubbla ligera GDA med 6-0 silk suturer vid bifurkation av CHA att GDA.
  11. Heparinizing och startas lever transplantat
    1. Injicera 50 IE av heparin i 1 mL koksaltlösning via penis venen. Vänta 5 min att uppnå systemiska heparinization.
    2. Cross-clamp PV, IHVC och CHA använder tre böjda mikro-serrefines till Täpp hepatiska blodflödet. Utföra ett litet snitt på den främre väggen i PV att infoga en 22 gauge kateter. BEGJUTA delvis lever graften med saltlösning vid 4 ° C via katetern under ett tryck på 20 cmH2O.
    3. Snabbt öppna cut brösthålan och intratorakalt vena cava med kirurgisk sax rinna ut blod och perfusatet. Sluta inte perfusionen tills färgen på hela delvis lever graften blir enhetligt gul.
  12. Explanting partiell lever transplantat
    1. Transekt vänster diafragma venen mellan de två nering (beskrivs i 6.2.2) med hjälp av mikro-sax.
    2. Nästa, transekt SHVC nära membranet för att hålla den vaskulära längden så länge som möjligt. Transekt PV på nivån av mjälten ven med mikro-sax. Dela GDA mellan de dubbla nering och transekt CHA nära den celiaki stammen.
    3. Transekt adrenal fartygen på distala sida av 6-0 silk ligering placeras i 6.7.2. Transekt IHVC i nivå med den vänster nedsatt ven med kirurgisk sax.
    4. Punktskatter och överföring delvis levern till en tillbaka-tabell maträtt (30 mm kultur maträtt) fylld med koksaltlösning vid 4 ° C.

7. back-tabell drift (transplantat förberedelse)

  1. Installera de vaskulära muddarna (figur 5)
    1. Dra PV genom lumen av en manschett med en 12-gauge intravenös kateter med mikro-pincett. Tillfälligt fastställa manschetten handtag och PV tillsammans med en klämma som fartyget. Evert PV kärlväggen att täcka utsidan av manschetten. Säkra kärlväggen och manschett i position med en omkretsriktningen 6-0 silk sutur.
      Obs: Vrid inte fartyget. Manschetten handtaget bör hållas i riktning klockan 12.
    2. Installera IHVC manschetten efter beskrivningarna i 7.1.1.
  2. Förinställa två vistelse suturerna på SHVC
    1. Tränga igenom kärlväggen av SHVC från utanför till inomhus med två 7-0 polypropylen suturer längs klockan 3 och klockan 9 riktningar, respektive.
      Obs: Inte knyt en knut.
  3. Bevara transplantat
    1. Fördjupa delvis lever transplantat i saltlösning vid 4 ° C för bevarande efter åtgärden tillbaka-tabell.

8. mottagarens drift

  1. Upprepa procedurerna i 6.1-6.2 och 6.7, utom den högra nefrektomi, i mottagaren att exponera operativa fältet transekt ligament och trimma fartygen.
  2. Förbereda IHVC, gallgången, hepatiska artären och portalen ven i mottagaren
    1. Först mobilisera avsnittet i IHVC ner till den rätt njurvenen. För det andra, ligera höger binjure fartyg med en 6-0 silk sutur. För det tredje, mobilisera CBD från första nedsatt hilum använder mikro-pincett.
      Obs: Inte trimma bort fettvävnaden runt CBD.
    2. Transekt CBD vid första bifurkation i nedsatt hilum efter dubbel ligering med en 6-0 silk sutur. Sedan transekt den PHA med mikro-sax efter den dubbla ligering med en 6-0 silk sutur. Mobilisera avsnittet i PV från nedsatt hilum till pyloric ven.
  3. Mobilisera den bakre delen av levern
    1. Dra tillbaka mottagaren lever på vänster sida med två bomull-minnen. Sedan, avskuren på ligament i den bakre delen av levern från SHVC till höger binjure ven som beskrivs i en tidigare visualiserade artikel18. Efter detta, införa ett gummiband genom det baksida utrymmet i SHVC.
  4. Förbereda de instrument och material under den anhepatic fasen
    1. Kontrollera tillgängligheten av alla instrument och material som krävs i den anhepatic fasen, till exempel en 5 mL spruta med en böjd nål, mikro-sax, mikro-nål innehavaren, mikro-pincett, två micro-hemostatiska pincett, två 7-0 polypropylen suturer och 6-0 Silk sutur material.
      Obs: Söka efter material eller instrument kan förlänga den anhepatic fasen.
  5. Excising levern i mottagaren
    1. Cross-klämma IHVC omedelbart ovanför den njurvenen använder en fartyget klämma och PV omedelbart ovanför pyloric venen. Spela in varaktigheten av den anhepatic fasen från denna stund tills klämman på PV släpps.
    2. Minska koncentrationen av isofluran till 0,5% omedelbart.
    3. Dra i SHVC och membran ner av förinställda gummibandet. Klämma delar av membranet tillsammans med intratorakalt vena cava med en Bulldog klämma, ett avstånd av 0,5 cm till SHVC.
      Obs: Inte klämma lungan av råtta.
    4. Med hjälp av mikro-sax, klippa kärlväggen av SHVC noga längs den övre kanten av levern parenkymet att hålla kärlväggen så länge som möjligt.
    5. Transekt PV vid första bifurkation i nedsatt hilum med mikro-sax. Sedan transekt den sämre vena cava i parenkymet av just underlägsen LOB, snarare än i kärlväggen, lämnar omkretsriktningen lever parenkymet runt vena cava. Tänk på just underlägsen LOB på ett avstånd av 4 mm skäreggen till IHVC. Efter transecting fartyg, flytta hela levern ut ur bukhålan.
  6. Rekonstruera SHVC
    1. Placera delvis lever transplantat i det buk-hålet orthotopically. Pierce kärlväggen av SHVC från inne till utanför längs de klockan 3 och klockan 9 riktningarna med två förinställda vistelse suturer. Dra de två vistelse suturerna till höger och vänster när de är bundna till en knut med sina egna syften.
    2. Pierce SHVC kärlväggen från utanför till släpper nära Knut i riktning klockan 3 för att föra in nålen på rätt vistelse suturen i vaskulär lumen.
    3. Anastomose den bakre väggen i SHVC av en rinnande sutur inuti vaskulär lumen från 3 klockan riktningen till klockan 9 riktning.
    4. I hörnet av klockan 9 riktning, pierce kärlväggen från inne till utanför nära Knut att införa ut nålen ur vaskulär lumen.
    5. Använd denna sutur för att anastomose främre väggen med en rinnande sutur utanför vaskulär lumen från klockan 9 riktning till 3 den klockan riktning. Slutligen knyta suturen med egen slutet 3 gånger (figur 6).
      Obs: Injicera 3-5 mL koksaltlösning i lumen av den rekonstruerade SHVC att tvinga ut luftbubblor innan sista 2-3 stygn. En mer detaljerad beskrivning av SHVC anastomos kan hittas i artikeln av Delriviere et al. 19.
  7. Rekonstruera PV
    1. Placera två 7-0 polypropylen vistelse suturer i slutet av PV mottagarens följer beskrivningen i 7.2. Dra två vistelse suturer i motsatt riktning för att förlänga kärlväggen. Fixa två vistelse suturer med två micro-mygga hemostatiska pincett.
    2. Injicera ungefär 1 mL koksaltlösning i vaskulär lumen av PV i mottagaren att tvinga ut luftbubblor. Snabbt in portalen ven manschetten vaskulär lumen av PV i mottagaren att tvinga när det öppnas med hjälp av mikro-pincett. Säkra manschetten anastomos med en omkretsriktningen 6-0 silk sutur. Cross-clamp CHA.
  8. Reperfusion till levern transplantat
    1. Släppa klämmorna på SHVC och PV i sekvens för att reperfuse lever graften. Registrera tiden för den anhepatic fasen. Kontrollera blödning av anastomos. Öka koncentrationen av isofluran till 1-2% enligt råtta reaktion på smärta stimulering.
  9. Rekonstruera IHVC
    1. Injicera 1 mL koksaltlösning i vaskulär lumen av IHVC i mottagaren att tvinga ut luftbubblorna. Infoga manschetten i cylindriska vaskulär lumen av den IHVC, som stöds av omkretsriktningen lever parenkymet (figur 7). Införa en 6-0 silk sutur genom det baksida utrymmet i IHVC. Snabbt säkra manschetten anastomos med en 6-0 silk sutur.
    2. Släpp två fartyg klämmorna i IHVC till starta om perfusionen. Trimma bort omgivande levern parenkymet noggrant ovanför omkretsriktningen silk suturen med mikro-sax.
  10. Rekonstruera den hepatiska artären
    1. Tränga igenom kärlväggen av CHA i levern transplantat från utanför till inomhus med två 11-0 polypropylen suturer i klockan 3 och klockan 9 riktningar, respektive. Täpp blodflödet av CHA och GDA i mottagaren använder två böjda mikro-serrefines.
    2. Transekt PHA mottagarens vid dess rot att avslöja vaskulära lumen med mikro-sax. Förstora vaskulär lumen av PHA i mottagaren av skärande del av kärlväggen längsled för att rymma diametern på CHA i levern graften.
    3. Anastomose CHA av levern graften till det utvidgade PHA i en slut-till-sida sätt använder den rinnande sutur teknik som beskrivs för SHVC anastomos (8.6.2-8.6.7).
      Obs: Detaljerade illustrationer kan hittas i artikeln av Huang et al14.
  11. Rekonstruera CBD
    1. Flytta tarmen tillbaka i bukhålan att minska avståndet mellan de två ändarna av gallgången. Utföra en tvärgående snitt på den främre väggen i gallgången i mottagaren.
    2. Dra biliär stent i delvis lever graften ner för att infoga det i lumen av gallgången i mottagaren via tvärgående snitt. Säkra stenten använder en 6-0 omkretsriktningen silk sutur.
    3. Knyt två 6-0 omkretsriktningen silk suturerna i gallgången till varandra för att minska spänningen i anastomos.
  12. Utgående buken
    1. Nära buken i två lager med 3-0 silk suturen i mönstret kör suturen.

9. postoperativa behandlingar (analgesi och antibiotika)

  1. Behandla alla mottagare med buprenorfin 0,1 mg/kg subkutant. Administrera cefuroxim (16 mg/kg) subkutant förutom smärtstillande läkemedlet. Erbjuda kranvatten och standard laboratorium djur chow att de råttor ad libitum.

Subscription Required. Please recommend JoVE to your librarian.

Representative Results

Sammanlagt avslutades 31 fall av syngena arterialized råtta PLTx använder detta protokoll. Alla mottagarnas överlevde fram till slutet av observationstiden. Kroppsvikt hos mottagarna började återhämta sig efter postoperativ dag (POD) 4. Lutningen på kroppsvikt var nära en normal Lewis råtta efter POD 6 (figur 8), som indirekt underförstådda återvinning av mottagaren. Histologiskt, en liten spridning av gallgången observerades hos mottagarna, och levern lobulär arkitekturen av mottagarna var intakt. Ingen nekros eller uppenbara sinusformad dilatation observerades (figur 9). Alaninaminotransferas (ALAT) låg serum inom det normala intervallet POD 30 (figur 10). Inga fall av gula urinen orsakas av gulsot hos dessa mottagare, som indikerades genom att kontrollera buren sängkläder dagligen, som anger patency av biliär stent. Den normala serum nivån av bilirubin på POD 30 bekräftade ytterligare framgångsrika återuppbyggnaden av gallgången (figur 11). Patency av nedsatt artär kontrollerades av transecting PHA på proximala sidan av anastomos under offer. Blödningar från PHA observerades i alla mottagarna, vilket innebär patency av anastomos. Alla dessa resultat föreslog att levern grafterna fungerade väl.

Den genomsnittliga löptiden för den anhepatic fasen var 23.03 ± 2.3 min. Manschetten anastomos av PV tog 4.68 ± 0.77 min, medan manschetten anastomos av IHVC tog bara 2,05 ± 0,71 min. jämfört med manschetten anastomos PV, manschetten anastomos av den IHVC Sparad steget att placera vistelse suturer och därmed ytterligare förkortas anas tomosis tid (tabell 1).

Två fall av blödning i kvarleva stubben ml under de 70% hepatectomy observerades bland de 31 fall av fartyg-orienterade hepatectomy. I en tidigare experiment observerades blödningar i kvarleva stubben ml hos 8 av 18 fall av parenkymet-bevara fartyget-orienterade hepatectomy (figur 12). Detta resultat visade en lägre skattesats blödning i kvarleva lever stubben ml efter använder fartyget-orienterade 70% hepatectomy.

Figure 1
Figur 1 . Ärmslut och biliär stent.
(A, C) Storleken på manschetter. B cylindrisk på manschetten. (D) kroppsdel och handtag del av manschetten. (E) (en) IHVC manschett; (b) PV manschetten. (F) biliär stent. Skalstapeln = 5 mm. vänligen klicka här för att visa en större version av denna siffra.

Figure 2
Figur 2 . Att absorbera blodtillförseln LLL och ML.
(A) Den gemensamma stammen av PV, hepatiska artären och galla kabelrör av LLL och älskar mitt liv.
(B) Missfärgning av LLL och älskar mitt liv efter transecting den gemensamma stammen.
(C) Portalen ven av RML.
(D) Alla PVs, nedsatt artärer och gallgångarna LLL och ML var transected.
Skalstapeln = 5 mm. förkortningar: LLL vänster laterala loben, ML median loben, älskar mitt liv vänster median LOB, RML rätt median loben, RSL rätt överlägsna loben, RIL just underlägsen LOB, SCL överlägsen caudatus LOB. Klicka här för att se en större version av denna siffra.

Figure 3
Figur 3 . Till resect den vänstra median loben.
(A) resect lever massa kärlek mitt liv omedelbart ovanför tången.
(B) Placera tre piercing suturer på snittet. (Image 1)
Skalstapeln = 5 mm. förkortningar: RML rätt median loben, RSL rätt överlägsna loben, RIL rätt underlägsen LOB, SCL överlägsen caudatus LOB. Klicka här för att se en större version av denna siffra.

Figure 4
Figur 4 . Till resect den rätt median lob (RML).
(A) Basen av RML.
(B) Placera mygga hemostas tången runt basen av RML.
(C) Resect lever parenkymet av RML omedelbart ovanför tången.
(D) Lämna ett slätt och tunt lager av kvarlevan lever vävnad på SHVC.
Skalstapeln = 5 mm. förkortningar: ML median loben, RSL rätt överlägsna LOB. Klicka här för att se en större version av denna siffra.

Figure 5
Figur 5 . Att installera manschetten.
(A) dra PV genom lumen av en manschett.
(B) fastställa manschetten handtag och PV tillsammans med en fartyget klämma.
(C) Evert PV kärlväggen att täcka utsidan av manschetten.
(D) säkra kärlväggen och manschetten i position.
Skalstapeln = 5 mm. vänligen klicka här för att visa en större version av denna siffra.

Figure 6
Figur 6 . Att rekonstruera SHVC.
(A & B) Dra två vistelse suturer till höger och vänster, respektive.
(C) anastomose den bakre väggen i SHVC av en rinnande sutur i vaskulär lumen.
(D) anastomose den främre väggen i SHVC av vaskulär lumen.
Skalstapeln = 5 mm. vänligen klicka här för att visa en större version av denna siffra.

Figure 7
Figur 7 . Att rekonstruera IHVC.
(A) en cylindrisk vaskulär lumen av IHVC i mottagaren.
(B) säkra manschetten anastomos av IHVC.
(C) Start reperfusion.
(D) trimma bort omgivande levern parenkymet ovan omkretsriktningen silk suturen.
Skalstapeln = 5 mm. förkortningar: PV portvenen, IHVC sämre infrahepatic vena cava, RIL rätt underlägsen LOB. Klicka här för att se en större version av denna siffra.

Figure 8
Figur 8 . Postoperativ kropp vikt återhämtning.
Mottagare kroppsvikt började återhämta sig efter postoperativ dag 4. Lutningen på kroppsvikt var nära en normal Lewis råtta efter postoperativ dag 6, vilket indirekt innebar återvinning av mottagaren.

Figure 9
Figur 9 . Histologi av levern transplantat efter 30 dagar.
En liten spridning av gallgången observerades hos mottagarna i histologi, och levern lobulär arkitekturen av mottagare var intakt. Ingen nekros eller uppenbara sinusformad dilatation observerades (X 400). Skalstapeln = 20 um vänligen klicka här för att visa en större version av denna siffra.

Figure 10
Figur 10 . Serumkoncentrationen av ALT.
ALT låg serum inom det normala intervallet på POD 30. (**, P < 0,05).

Figure 11
Figur 11 . Serumkoncentrationen av bilirubin.
Serum av bilirubin på POD 30 var jämförbar med en normal Lewis råtta (P > 0,05).

Figure 12
Figur 12 . Blödning priser av olika metoder för hepatectomy.
En lägre frekvens av blödning i kvarleva lever stubben ml observerades i metoden använder den fartyg-orienterade 70% hepatectomy.

Förfaranden Borttagning av levern SHVC anastomos PV anastomos IHVC anastomos Anhepatic tid
Tid (minuter) 2.62±0.46 15.73±2.05 4.68±0.77 2.05±0.71 23.03±2.30
Data uttrycktes i Mean±SD

Tabell 1. Tid av enskilda kirurgiska ingrepp under den anhepatic fasen

Table 2
Tabell 2. Skillnaden mellan två visualiserade protokoll av råtta PLTx. Klicka här för att se en större version av denna tabell.


Kompletterande material

Subscription Required. Please recommend JoVE to your librarian.

Discussion

Rat PLTx är en sofistikerad mikrokirurgisk procedur med ett träningsprogram som är hög i kostnad och lång i längd20. Komplexiteten i råtta PLTx protokoll har hindrat forskare från att använda denna djurmodell. Jämfört med fullstor råtta LTx, presenterar råtta PLTx microsurgeon inte bara med utmaningen att en transplantation förfarande utan också utmaningen att levern resektion i ett litet djur. Ett visualiserat mikrokirurgisk protokoll som beskriver hela förfarandet i detalj är därför avgörande för att fastställa detta komplex modell. En tidigare visualiserade artikel som rapporterats av Nagai et al. fram ett protokoll av 50% delvis ortotop LTx med nedsatt arteriell rekonstruktion i råttor5 (tabell 2). Detta protokoll används en ex vivo hepatectomy, vilket är kliniskt liknar tillvägagångssättet av split LTx.

LTx, levande givare LTx jämfört med split och resects delvis lever transplantat från levande givare i stället för att dela levern i åtgärden tillbaka-tabell. Den i vivo lever resektion kan leda till fler kirurgiska manipulationer, längre portal hypertoni och ännu mer varm ischemi skador till partiell lever graften. Därför råtta flera PLTx modeller som utnyttjar i vivo hepatectomy har fastställts i relevanta studier6,8,21,22. Många protokoll innebär resektion av levern loberna efter enkel ligatur på BLOMSTJÄLK eller bas2,3,6,8,21,23. Olika levern lober är dock av olika former. ML av råtta har en bred bas att semi omger hålvenen10,24. Att placera en enkel ligatur vid basen av ML enkelt constricts den sämre vena. För att undvika constrictionen av vena cava, utvecklat Madrahimov et al. en parenkymet-bevara fartyget-orienterade hepatectomy ta bort ML i 2 steg efter fyra piercing suturer i parenkymet gjordes, lämnar kvarleva stubben ml platta 10. men PVs av levern loberna sammanskrivna av piercing suturerna gömdes i parenkymet. Blödning i kvarleva stubben orsakas av saknade eller skadade de små grenarna av PV kan inte helt undvikas 11. I våra protokoll, var de motsvarande PVs och nedsatt artärer ytterligare dissekeras först. Sedan, blodtillförseln av opererande lever loberna var individuellt ockluderas av nering innan resektion. Därför, frekvensen av blödningar i kvarleva stubben sänktes med våra protokoll (figur 10). Tekniken att placera fyra piercing suturer i stubben ml var också anställd i vårt protokoll att ligera nedsatt venerna men inte PV och nedsatt artärer. Med dessa ningsförbindelser som använder flera piercing suturer och en stegvis resektion, underhölls den platta formen av kvarlevan lever stubben, som undvek constrictionen av vena cava.

För IHVC återuppbyggnaden gjordes en smärre ändring av manschetten anastomos beskrivs av Kamada o.a. 25. den sämre vena cava mottagarens var transected i parenkymet av just underlägsen LOB, snarare än på IHVC fartyget, som lämnade en omkretsriktningen lever parenkymet runt vena cava. Lever parenkymet runt vena cava bidrog till att upprätthålla en cylindrisk form av vaskulär slutet av IHVC mottagarens snarare en platt form. Lumen av IHVC öppnades därför naturligt utan hjälp av vistelse suturer och pincett. Denna ändring hjälpt till att rädda steget att placera vistelse suturer och underlättas införandet av IHVC manschetten till vaskulär lumen av mottagaren. Dessutom långvarig denna modifiering vaskulär längden på den IHVC, därigenom minska spänningen mellan de två ändarna under manschetten anastomos.

Med fördelen av snabb vaskulär anastomos används två-manschett tekniken ofta i den råtta ortotop LTx för anastomosering av PV och IHVC. Miyata et al. föreslog även ett protokoll som omfattar en tre-manschett teknik för att anastomose av PV, IHVC och SHVC. Manschetten tekniken har dock sina nackdelar. Först, inte en manschett med en fast storlek passar perfekt storlek motsvarande fartyget. Dessutom stör manschetten tekniken blodflödet, vilket resulterar i en högre incidens av trombos och främmande kropp reaktion på manschetten26. SHVC, en huvudkärlet hos råtta, visar höga blodflödet. Varje sammandragning eller trombos i detta fartyg kan orsaka svår postoperativa komplikationer. Därför, i våra PLTx protokoll, vi väljer att använda hand sutur teknik för att rekonstruera den SHVC, som möjliggör justering av anastomos så nära som möjligt till fysiska inställning. Hög kvalitet SHVC anastomos färdig hand suture tekniken kräver dock hög mikrokirurgisk kompetens. För nybörjare rekommenderas Carrels triangulering teknik för anastomosering fartyg 27. Genom att använda denna teknik, är tre vistelse suturer placerade med jämna mellanrum runt omkretsen av SHVC. 3D formen på SHVC underhålls av Upprullningskraften dessa tre bo suturer längs tre riktningar, som kan förhindra SHVC från stenos under anastomos.

Re arterialization av levern transplantat är ett kontroversiellt ämne. Enligt vår mening åter arterialization är inte det viktigaste steget för att garantera en hög överlevnad av mottagaren, men det kan vara det viktigaste steget för att säkerställa en hög kvalitet lever transplantat. I traditionella protokollet råttans LTx som omfattar tekniken som två-manschett, rekonstruerades inte den hepatiska artären, som bristen på genomblödning av den hepatiska artären inte påverkade resultatet av råtta LTx12. Dessutom genomfördes en tidigare studie på mus LTx för att undersöka effekten av nytt arterialization på långsiktiga överlevnaden för njurtransplantaten, histologiska förändringarna, ischemisk leverskada och tidig immunologiska aktiveringen vägar13. Forskarna drog slutsatsen att de re arterialization av levern hårstrips inte hade stor inverkan på överlevnaden eller graden av immunologisk aktivering. En färsk studie som rapporteras av Huang et al. antyder dock att åter arterialization är viktigt för återhämtningen av levern parenkymet utsätts hepatectomy, särskilt med obstruktion av utflöde28. Icke-arterialization av partiell lever graften förvärrade leverskador och fördröjd återhämtning från fokal nekros. Re arterialization av partiell lever graften rekommenderas därför. Enligt illustrationen, användes en slut-till-sida anastomos teknik att rekonstruera den hepatiska artären, vilket beskrevs tidigare av en av våra författare 14. Fördelen med denna teknik är valet att anastomose två tjocka artärer, CHA och GDA, snarare än den tunna PHA, som minskar svårigheten att rekonstruera den hepatiska artären och upprätthåller en hög frekvens av patency av anastomos.

Klassiskt råtta LTx protokollet föreslås av Kamada et al. föreslår kontroll av den anhepatic fasen så att det är mindre än 26 min, som inget djur överlevde när fasen anhepatic varade längre än 26 min25. Vår erfarenhet är förenligt med detta förslag, även om vi tidigare observerade flera överlevnad fall med en anhepatic fas tid längre än 26 min. Enligt vår mening tar en stabil anhepatic fas prioritet över en kortare anhepatic fas i kirurgisk forskning. I vår grupp kontrolleras den anhepatic fasen exakt till inom en viss tid. Den anhepatic fasen kan inte stoppas tills den förinställda anhepatic tiden uppnåtts, även om anastomos SHVC och PV kunde slutföras mycket tidigare. I ett utbildningsprojekt uppmuntras dock en kortare anhepatic fas.

Även om många förbättringar gjorts att förkorta träningsfasen och eliminera onödiga operationer, är råtta LTx och PLTx fortfarande komplexa mikrokirurgisk operationer20. Därför, förutom ett visualiserat protokoll, ett stegvis utbildning protokoll baserat på Plan--Check-Action cykel är viktigt för att uppnå en hög överlevnad och hög drift kvalitet. Vår preliminära erfarenhet med denna utbildning protokollet visade att det var nödvändigt att behärska den råtta ortotop LTx att 40-73 verksamhet. Ytterligare 9-13 verksamhet var skyldiga att behärska råtta åter arterialized PLTx. Utbildning protokollet föreslås av Czigány et al. hävdar att 50-60 LTxs är tillräckliga för att behärska ortotop LTx och PLTx29.

I vår Plan--Check-Action utbildning protokollet, måste kvalitetskontroll vid varje utbildning steg och i varje enskild manipulation betonas, särskilt i en sådan komplicerad modell. En hög överlevnad är inte liktydigt med ett högkvalitativt förfarande. I representativa resultat noterades flera kriterier för att utvärdera kvaliteten på mikrokirurgi, inklusive histologi, leverenzym, kropp vikt återhämtning, gulsot (serum bilirubin och gul urin), varaktighet av den anhepatic fasen och patency av den nedsatt artär. Hög kvalitet uppnås endast när alla kriterier är uppfyllda.

Subscription Required. Please recommend JoVE to your librarian.

Disclosures

Alla författarna har inga motstridiga intressen att avslöja.

Acknowledgments

Denna forskning stöddes av National Natural Science Foundation Kina (Grant nr 81501382) och Zhejiang provinsiella naturvetenskap Foundation Kina (Grant nr. LQ13H100003 och LQ16H100002).

Materials

Name Company Catalog Number Comments
Surgical microscope Möller-Wedel, Germany 654359
Light source OSRAM (China) Lighting Co., Ltd 64627
Isoflurane Vaporizer MIDMARK Corporation VIP3000
Isoflurane Baxter Healthcare Corporation 40032609 For Inhalation anesthesia
Normal Saline Zhejiang Tianrui Pharmaceutical Co., Ltd. 716092103
Povidone Iodine Solution HANGZHOU MINSHENG PHARMACEUTICAL H33021567 For disinfection
Hemostatic forceps Shanghai Medical Instruments(Group) Ltd J31020
Surgical scissors Shanghai Medical Instruments(Group) Ltd JC2116
Needle-holder Shanghai Medical Instruments(Group) Ltd J32030
Dressing Forceps Shanghai Medical Instruments(Group) Ltd J42020
Mosquito hemostatic forceps Shanghai Medical Instruments(Group) Ltd W40340 For liver resection; For retracting the stay sutures. 
Micro-scissors Shanghai Medical Instruments(Group) Ltd WA1040
Micro needle-holder Shanghai Medical Instruments(Group) Ltd WA2060
Curved micro typing forceps Shanghai Medical Instruments(Group) Ltd WA3061
straight micro typing forceps Shanghai Medical Instruments(Group) Ltd WA3060
Micro hemostatic forceps Shanghai Medical Instruments(Group) Ltd WA3020
Bulldog clamp Shanghai Medical Instruments(Group) Ltd XEC350
Vessel clamps Shanghai Medical Instruments(Group) Ltd W40160
Micro Serrefine-curved  Fine Science Tools, Inc 18055-05
Dacryosyrinx Shi Zhuo medical instruments Co., Ltd. 5# curve Use as the curved needle for forcing out the air bubbles in the vascular lumen
Sterilized gauze swabs Fuqing Health & Integral Medical 20230R
5mL syringe Zhejiang Yusheng Medical Instrument Co.,Ltd 811932416
18G needles Shanghai Kindly Enterprise Development Group Co., Ltd 01-014 For fixing the upper abdomen wall
Intima II 22G intraveous catheter Becton Dickinson Medical Devices (Shanghai) Co Ltd. 383207y For making biliary stent; For infusing perfusate
7-0 polypropylene sutures Ningbo Medical Needle Co., Ltd 151026 For SHVC anastomsis
6-0 silk suture Shanghai Pudong Jinhuan Medical Products Co., Ltd 2650182 For ligation
Culture dish (100mm) Corning Incorporated 430165 used in back table for storage ice. The back table dish was placed on it. 
Culture dish (30 mm) Corning Incorporated 3296 As a vessel for organ preservation
Angiocath 12G intravenous catheter Becton Dickinson Medical Devices (Shanghai) Co Ltd. 382277 For making a IHVC cuff
Angiocath 14G intravenous catheter Becton Dickinson Medical Devices (Shanghai) Co Ltd. 382269 For making a PV cuff
Buprenorphine (hydrochloride) Tianjin Institute of Pharmaceutical Research Pharmaceutical Co., Ltd H12020275 For analgesic
Cefuroxime sodium for injection Esseti FarmaceuticiS.r.l H20160013 As an antibiotics

DOWNLOAD MATERIALS LIST

References

  1. Yan, J. Q., Becker, T., Peng, C. H., Li, H. W., Klempnauer, J. Split liver transplantation: a reliable approach to expand donor pool. Hepatobiliary Pancreat Dis Int. 4, 339-344 (2005).
  2. Xia, R., Emond, J. C. Orthotopic partial liver transplantation in the rat: a model of 70% hepatectomy and reduced size liver transplantation. Transplantation. 56, 1041-1043 (1993).
  3. Omura, T., Ascher, N. L., Emond, J. C. Fifty-percent partial liver transplantation in the rat. Transplantation. 62, 292-293 (1996).
  4. Foss, A., et al. Function of reduced-size liver transplant in the rat. Res Exp Med (Berl). 197, 91-99 (1997).
  5. Nagai, K., Yagi, S., Uemoto, S., Tolba, R. H. Surgical procedures for a rat model of partial orthotopic liver transplantation with hepatic arterial reconstruction. J Vis Exp. , e4376 (2013).
  6. Sun, J., Qin, G., Wu, L., Wang, C., Sheil, A. G. Antigenic load and peripheral chimeric levels in entire and partial liver allograft recipients. Microsurgery. 21, 183-187 (2001).
  7. Ninomiya, M., et al. Deceleration of regenerative response improves the outcome of rat with massive hepatectomy. Am J Transplant. 10, 1580-1587 (2010).
  8. Yamanaka, K., et al. Effect of olprinone on liver microstructure in rat partial liver transplantation. J Surg Res. 183, 391-396 (2013).
  9. Wang, W., et al. Mesenchymal stem cells promote liver regeneration and prolong survival in small-for-size liver grafts: involvement of C-Jun N-terminal kinase, cyclin D1, and NF-kappaB. PLoS One. 9, e112532 (2014).
  10. Madrahimov, N., Dirsch, O., Broelsch, C., Dahmen, U. Marginal hepatectomy in the rat: from anatomy to surgery. Ann. Surg. 244, 89-98 (2006).
  11. Martins, P. N., Theruvath, T. P., Neuhaus, P. Rodent models of partial hepatectomies. Liver Int. 28, 3-11 (2008).
  12. Kamada, N., Sumimoto, R., Kaneda, K. The value of hepatic artery reconstruction as a technique in rat liver transplantation. Surgery. 111, 195-200 (1992).
  13. Steger, U., Sawitzki, B., Gassel, A. M., Gassel, H. J., Wood, K. J. Impact of hepatic rearterialization on reperfusion injury and outcome after mouse liver transplantation. Transplantation. 76, 327-332 (2003).
  14. Huang, H., et al. A novel end-to-side anastomosis technique for hepatic rearterialization in rat orthotopic liver transplantation to accommodate size mismatches between vessels. Eur Surg Res. 47, 53-62 (2011).
  15. Bernal, J., et al. Guidelines for rodent survival surgery. J.Invest Surg. 22, 445-451 (2009).
  16. Johnson, A. J., Stulting, R. D. Ophthalmic Microsurgical Suturing Techniques. Macsai, M. S. , Springer. Berlin Heidelberg. 21-28 (2007).
  17. Delriviere, L., et al. Detailed modified technique for safer harvesting and preparation of liver graft in the rat. Microsurgery. 17, 690-696 (1996).
  18. Oldani, G., Lacotte, S., Morel, P., Mentha, G., Toso, C. Orthotopic liver transplantation in rats. J Vis Exp. , (2012).
  19. Delriviere, L., et al. Technical details for safer venous and biliary anastomoses for liver transplantation in the rat. Microsurgery. 18, 12-18 (1998).
  20. Jin, H., et al. Preliminary experience of a PDCA-cycle and quality management based training curriculum for rat liver transplantation. J Surg Res. 176, 409-422 (2012).
  21. Selzner, N., Selzner, M., Tian, Y., Kadry, Z., Clavien, P. A. Cold ischemia decreases liver regeneration after partial liver transplantation in the rat: A TNF-alpha/IL-6-dependent mechanism. Hepatology. 36, 812-818 (2002).
  22. Tanaka, H., Hashizume, K., Enosawa, S., Suzuki, S. Successful transplantation of a 20% partial liver graft in rats: a technical innovation. J Surg Res. 110, 409-412 (2003).
  23. Bockhorn, M., et al. Erythropoietin treatment improves liver regeneration and survival in rat models of extended liver resection and living donor liver transplantation. Transplantation. 86, 1578-1585 (2008).
  24. Martins, P. N., Neuhaus, P. Surgical anatomy of the liver, hepatic vasculature and bile ducts in the rat. Liver Int. 27, 384-392 (2007).
  25. Kamada, N., Calne, R. Y. Orthotopic liver transplantation in the rat. Technique using cuff for portal vein anastomosis and biliary drainage. Transplantation. 28, 47-50 (1979).
  26. Kashfi, A., et al. A review of various techniques of orthotopic liver transplantation in the rat. Transplant.Proc. 37, 185-188 (2005).
  27. Wain, R. A. J., Hammond, D., McPhillips, M., Whitty, J. P. M., Ahmed, W. Surgical Tools and Medical Devices. Ahmed, W., Jackson, M. J. , Springer International Publishing. 545-562 (2016).
  28. Huang, H., et al. Hepatic arterial perfusion is essential for the spontaneous recovery from focal hepatic venous outflow obstruction in rats. Am J Transplant. 11, 2342-2352 (2011).
  29. Czigany, Z., et al. Improving Research Practice in Rat Orthotopic and Partial Orthotopic Liver Transplantation: A Review, Recommendation, and Publication Guide. Eur Surg Res. 55, 119-138 (2015).

Tags

Medicin fråga 134 levertransplantation hepatectomy re arterialization råtta nedsatt fartyget delvis lever transplantat fartyg orienterade manschett anastomos
Re Arterialized råtta delvis lever Transplantation med <em>i vivo</em> fartyget-orienterade 70% Hepatectomy
Play Video
PDF DOI DOWNLOAD MATERIALS LIST

Cite this Article

Chen, X., Yu, R., Xu, Z.,… More

Chen, X., Yu, R., Xu, Z., Zhang , Y., Liu, C., Chen, B., Jin, H. Re-Arterialized Rat Partial Liver Transplantation with an in vivo Vessel-Oriented 70% Hepatectomy. J. Vis. Exp. (134), e56392, doi:10.3791/56392 (2018).

Less
Copy Citation Download Citation Reprints and Permissions
View Video

Get cutting-edge science videos from JoVE sent straight to your inbox every month.

Waiting X
Simple Hit Counter