Waiting
Login processing...

Trial ends in Request Full Access Tell Your Colleague About Jove
Click here for the English version

Medicine

Повторно Arterialized крысы частично трансплантации печени в естественных условиях судно-ориентированный 70% гепатектомии

Published: April 8, 2018 doi: 10.3791/56392
* These authors contributed equally

Summary

Здесь представлен протокол с участием вновь arterialized крысы частично трансплантации печени. В частности 70% печени был резецированный в естественных условиях , используя обновленный технику судна ориентированной гепатектомии. Печеночной артерии был реконструирован в духе конец в бок. Манжета техника была изменена, чтобы сократить время анастомоза infrahepatic верхней полой вены.

Abstract

Сплит трансплантации печени и трансплантации печени донорской печени жизни были разработаны в клинике использовать печени органов в более эффективной манере. Чтобы лучше понять механизм позади этих хирургических процедур, крысы модель частичной трансплантации печени (PLTx) была создана для хирургических исследований. Из-за сложности модели PLTx крыса требуется протокол с подробными описаниями. Протокол, в котором ex vivo гепатектомии использовался для достижения 50% крыса PLTx сообщалось ранее опубликованной статьи. В отличие от этого протокола мы ввели заново arterialized PLTx с 70% в vivo гепатектомии. Обновлено судна ориентированный гепатектомии была включена в крыса PLTx для уточнения микрохирургическая процедура. Портал вен и печёночной артерии левого бокового лепестка и средний лепесток индивидуально были расчленены и лигируют до удаления паренхимы печени, тем самым уменьшая вероятность кровотечения в печени остатки пней. Кроме того судно конец в бок анастомоза между общим печеночной артерии и расширенного надлежащего печеночной артерии была введена для повторного arterialize печёночной артерии. Используя эту технику наложения анастомоза конец в сторону судна, диаметр анастомоз был расширен, тем самым уменьшается сложность ручной шов и поддерживать высокий уровень проходимости анастомоза. Кроме того манжета анастомоза infrahepatic полой вены был слегка изменен. Раздел продольных паренхимы печени вокруг верхней полой вены получателя была сохранена во время анастомоза манжеты для поддержания трехмерной формы просвета сосудов. Этот раздел паренхимы печени был удален после завершения анастомоза. С этой модификации был пропущен шаг с участием размещение пребывания швы, тем самым еще больше сократить время анастомоза манжеты. Используя этот протокол крыса PLTx, уровень низкий ферментов печени, нетронутыми печени лобулярного архитектуры и высокую выживаемость были достигнуты после микрохирургии.

Introduction

В настоящее время существует большое расхождение между числом донорской печени органов и количество пациентов, ожидающих донорской печени. Нехватка органов, печени является глобальной проблемой. Чтобы расширить круг доноров, разделять трансплантации печени (LTx) и живого донора LTx были разработаны для использования частичного печени в качестве трансплантата1.

Для дальнейшего расследования механизм за частичное трансплантации печени (PLTx), соответствующих животных моделей были установленным2,3,4,5. В крыса PLTx печени долей являются резецированный в естественных условиях и ex vivo имитировать условия живого донора LTx и разделить LTx, соответственно, в человека. Статье, опубликованной в Журнале визуализировать эксперименты представил подробный протокол с участием 50% крыс с помощью ex vivo гепатектомии5PLTx. Однако крыса PLTx с гепатектомии в естественных условиях в визуализированных литературе еще не сообщалось.

Помимо различий между in vivo и ex vivo hepatectomies техника выполнения гепатектомии, сама также играет важную роль в определении результата PLTx. в настоящее время во многих хирургических исследованиях с использованием крыса PTLx модель, печени, которую мочки были резецируется после размещения простой перевязкой на ножке печени доли2,3,6,,78,9. Однако размещение простой перевязкой, прежде чем резекции подходит не для всех долей печени, как различных долей печени имеют различные формы и размеры. Простая перевязка на базе средней доли сопряжена с высоким риском причинения сужения верхней полой вены, который в конечном итоге может повлиять на отток частичной печени трансплантата10,11. Таким образом в области крыса PTLx требуется обновление гепатектомии метод, основанный на знании анатомии печени крыс.

В протоколе, описанные в данном исследовании обновленный гепатектомии судна ориентированный 70% был включен в процедуру крыса PLTx. Портал вен и печёночной артерии левого бокового лепестка (LLL) и средний лепесток (мл) были расчленены и разделили индивидуально до удаления паренхимы печени. Затем, пирсинг швы были лигируют печеночных вен LLL и мл. С помощью нескольких пирсинг швов и отдельными перешнуровок, а не размещение простой перевязкой, остатки пней мл был в состоянии распространить над верхней полой вены. Таким образом удалось избежать сужения верхней полой вены infrahepatic, вызванных хирургического лигирования. Кроме того непроходимость кровоснабжение LLL и ML, отдельными перешнуровок до удаления паренхимы печени снизилась интенсивность кровотечения в пень остатки печени, таким образом минимизируя влияние потери крови на эксперименты11.

Для микрохирургов она является важной задачей для восстановления надлежащего печеночной артерии (ФГА) печени трансплантата из-за крайне малого диаметра этого судна. Хотя вопрос о необходимости повторного arterialization в LTx действительно находится в стадии обсуждения12,13,14, многочисленные микрохирургические методы реконструкции печеночной артерии были предлагаемые14 . Здесь мы представляем Роман технику для повторного arterialization печени лоскута, который анастомозов общей печёночной артерии (CHA) расширенного PHA образом конец в бок. С помощью этого метода end-to-side, два печёночной артерии связаны с анастомоза большего диаметра. Чем больше диаметр анастомоза, легче рук сшивания — выполнить а чем больше становится улучшение проходимости анастомоза.

Subscription Required. Please recommend JoVE to your librarian.

Protocol

Все процедуры руководящими грызунов хирургии, утвержденным Вэньчжоу медицинского университета животных политики и Комитет по социальному обеспечению 15.

1. Животные

  1. Используйте Льюис самцах массой 250-350 г как доноры и получатели помощи.

2. оперативное окружающей среды

  1. Выполните все микрохирургические процедуры под микроскопом хирургического с увеличением до 20 X 7 X. Стерилизуйте всех хирургических инструментов перед использованием в операции.
    Примечание: Операционной комнате и операционный стол чистым, но не стерильные.

3. Основные микрохирургическое маневров

  1. Бесплатно, препарировать и мобилизовать судна.
    1. Во-первых используйте прямые микро пинцет поднять на окружающие ткани на судне.
    2. Во-вторых, неоднократно и осторожно открывать и закрывать советы изогнутые микро щипцы такие, что прекрасные советы можно разрезать и пил окружающие ткани на передней стенке сосуда.
    3. В-третьих используйте прямые микро пинцет зажим и поднять судно подвергать задней пространство. Затем используйте советы изогнутые микро щипцы для пил окружающие ткани на задней стенке сосуда. Наконец должен быть представлен лысый судна без каких-либо окружающие ткани связаны.
  2. Разделите или двойной перевязать и разделить судна или ткани.
    1. Во-первых Свяжите два квадратные узлы на судно или ткани с помощью двух микро пинцет16. Во-вторых Отрежьте судна или ткани между двумя узлов площади с помощью микро ножницы.

4. Подготовка манжеты и желчных стента

  1. Сделать манжеты воротной вены и infrahepatic верхней полой вены с помощью 12-го калибра и 14-го калибра внутривенные катетеры, соответственно, в то время как желчных стента используется является 22-го калибра внутривенного катетера. Манжеты состоят из части тела и части ручки. Использование fillister на части тела для обеспечения стенке сосуда на манжете (рис. 1).

5. анестезия и фиксации крыс

  1. Осторожно поместите Льюис крыса в поле индукции с 5% изофлюрановая смешать с 0,5 Л/мин кислорода, чтобы вызвать ингаляционной анестезии. Контролировать частота дыхания крысы для предотвращения неожиданного смерть от передозировки изофлюрановая. Снижения концентрации изофлюрановая до 2% для поддержания анестезии, когда крысы не реагировать на боль стимуляции.
  2. Переместить крысы в 30 см x 30 см дубовые доски, охватываемых стерилизовать хирургические коврик полотенце и место крыса в лежачем положении. Связать четыре конечности крыса, использование медиального ленты и впоследствии исправить ленты с четырьмя чертёжных. Дезинфекция кожи с помощью 70% спирта, один раз и iodophors три раза.

6. доноров операции

  1. Разоблачение операционного поля
    1. Вырежьте небольшой поперечный разрез на верхней части живота к створу двусторонних нижней эпигастральной судов, с использованием электрического коагулятор.
    2. Расширить поперечный разрез рядом реберную маржа на верхней части живота, используя Ножницы хирургические.
    3. Изменить и исправить верхней брюшной стенки и мечевидного отростка, соответственно, на краниальной стороне.
    4. Переместите кишечника из брюшной полости с двумя влажные ватные палочки. Обложка кишечника с помощью мокрой кусок Марли.
  2. Отрезав связок и обрезки suprahepatic полой вены (SHVC)
    1. Отрезать falciformal связки, коронарная связка и треугольной связки в последовательности.
    2. Бесплатный левой диафрагмальной Вены от диафрагмы с помощью микро пинцет. Затем двойной перевязать его с помощью 6-0 шелковыми швами.
      Примечание: Не делят этот вен в этом шаге.
    3. Отрежьте gastrohepatic связки с помощью микро ножницы освободить уступает хвостатого мочку и hepatoesophageal связки и артерии.
  3. Поглощения кровоснабжение LLL и мл перед резекция (рис. 2)
    1. Во-первых Используйте щипцы изогнутые тщательно анализировать задней стенки общего ствола П.В., поставляющем LLL и левый средний лепесток (любовь моей жизни) из паренхимы. Во-вторых двойной перевязать и разделить его с соответствующей желчных протоков и печеночная артерия вместе.
    2. Вскрыть и разделить PV RML осторожно, потому что этот вен тесно придерживается паренхимы печени.
      Примечание: рекомендуется 14 крат. Не травмировать PV право Улучшенный лепесток, который находится недалеко от PV RML.
    3. Определить печеночной артерии и желчных протоков RML, расположенный между PVs RML и любовь моей жизни. Двойной перевязать и разделить печеночной артерии и желчных протоков с помощью 6-0 шелковыми швами RML.
      Примечание: Изменение цвета LLL и мл от красного до темно-красного является показателем успешной окклюзии кровоснабжения. Доскональное знание сосудистой анатомии имеет существенно важное значение для выявления и рассекает соответствующих судов. Предыдущие исследования крыс четко иллюстрируется коррозии слепки10печеночная анатомии.
  4. Resecting LLL
    1. Перевязать ножке LLL, с помощью продольных Шелковый шов 3-0 чтобы загородить поток крови из левого бокового печеночной вены. С помощью микро ножницами, вырезать печени непосредственно над перевязки для удаления массы печени.
  5. Resecting любовь моей жизни
    1. Зажмите левый средний печеночная Вена от комаров гемостатический пинцет, расположенных вдоль срединного трещины (Рисунок 3А). Удалите все паренхимы печени любви моей жизни сразу выше с помощью микро ножницы пинцет.
    2. Место пирсинг шовный материал, который проникает паренхимы печени непосредственно под щипцы, окружающих левый средний печеночной вены. Затем завязывайте узел площади чтобы перевязать перед выпуском щипцы.
    3. Место еще два пирсинг швов под щипцы вокруг остальной части открытого разреза любовь моей жизни. Затем свяжите две квадратные узлы закрыть остальной части разреза. Релиз комаров гемостатический пинцет для проверки кровотечения.
  6. Resecting RML (рис. 4)
    1. Место комаров гемостатический пинцет окружить база RML на расстоянии 0,5 см в SHVC (рис. 4В). Затем кросс зажим базу, используя комаров гемостатический пинцет для загородить право средний печеночной вены.
    2. С помощью микро ножницы, удалите все паренхимы печени RML вдоль верхней поверхности щипцы. Убедитесь, что работать очень близко к поверхности щипцы, оставив простой и тонкий пень мл.
    3. Место первый пирсинг шов, проникая паренхимы печени под щипцы для окружают средней медианы печеночных вен. Затем завязывайте узел площади чтобы перевязать средний средний печеночной вены. Место второй пирсинг шовный материал, чтобы перевязать право средний печеночная Вена, используя тот же метод. Место еще два пирсинг швы недалеко от остальной части разреза следующее описание в пункте 6.5.2.
  7. Тримминг infrahepatic полой вены (IHVC)
    1. Разрежьте retroperitoneum подвергать IHVC. Используйте изогнутые микро щипцы для освобождения IHVC и право почечной Вены от окружающих тканей. Вскрыть и перевязать право надпочечниковой Вены, который стекает в IHVC сзади.
    2. Выполните правый нефрэктомия после безлигатурные право почечных вен и право почечной артерии сохранить достаточно сосудистой длины для установки манжет на IHVC на более позднем этапе.
  8. Установка стентов желчных
    1. Мобилизовать общего желчного протока (КБР) от первого рубчика печени с помощью микро щипцы. Перевязать КБР в кросс точке пилорического вен и КБР, с использованием шелковой шва 6-0.
    2. Вырежьте поперечный разрез на передней стенке КБР на проксимальной стороне перевязки. Вставьте желчных стента, сделанные из 22-го калибра внутривенного катетера, в просвете КБР через разрез. Закрепите желчных стент с продольных Шелкового шва 6-0. Разрез КБР между двумя шелковые швы 6-0.
  9. Обрезка П.В.
    1. Перевязать пилорического вен с помощью 6-0 Шелковый шов, дистальнее П.В. Далее перевязать пилорического ключе, с помощью 7-0 полипропилен шовные недалеко от PV. Разрез пилорического связи между этими двумя перешнуровок. Двойной перевязать и разделить селезеночной вены таким же образом.
      Примечание: Используйте 7-0 полипропилен швом чтобы перевязать судно сделать меньше узел перевязки, по сравнению с 6-0 Шелковый шов. Большой узел может мешать установке манжеты на последнем шаге. Тонкий, сосудистой стенки вен привратника и селезеночной вены настолько нежные манипуляции необходимы во время вскрытия. До операции17следует читать ранее опубликованной статьи с более технические описания и иллюстрации о рассечения и деления пилорического вен и селезеночной вены.
  10. Обрезка общей печёночной артерии (CHA)
    1. Тщательно бесплатно CHA и его двух бифуркации, PHA и гастродуоденальной артерии (GDA), от окружающих тканей, с использованием двух микро пинцет. Двойной перевязать GDA, используя 6-0 шелковыми швами на бифуркации CHA в GDA.
  11. Гепаринизации и perfusing печени трансплантата
    1. Придать 50 ед гепарина в 1 мл физиологического раствора через Вену пениса. Подождите 5 мин для достижения системных Гепаринизация.
    2. Кросс Зажим ПВ, IHVC и CHA, используя три изогнутых микро serrefines чтобы загородить печеночный кровоток. Выполните небольшой надрез на передней стенке П.В. чтобы вставить катетер 22-го калибра. Perfuse частичная печени лоскута с saline на 4 ° C через катетер под давлением 20 КМЗ2O.
    3. Быстро вырезать открыть грудной полости и внутригрудных верхней полой вены, используя Ножницы хирургические стечь крови и perfusate. Не остановить перфузии, до тех пор, пока цвет всего частичное печени трансплантата становится равномерно желтый.
  12. Explanting частичная печени трансплантата
    1. Разрез левой диафрагмальной Вены между двумя перешнуровок (описано в разделе 6.2.2) с помощью микро ножницы.
    2. Далее разрез SHVC недалеко от диафрагмы держать сосудистой длина как можно дольше. Разрез PV на уровне селезеночной вены с помощью микро ножницы. Разделите GDA между двойной перешнуровок и разрез CHA рядом брюшнополостной ствол.
    3. Разрез коры надпочечников судов на дистальной части 6-0, шелковые лигирование помещены в 6.7.2. Разрез IHVC на уровне левой почечной Вены, используя Ножницы хирургические.
    4. Акцизный и передачу частичной печени к обратно таблицы блюдо (30 мм культуры блюдо) заполнены соленой при 4 ° C.

7. таблицы обратной операции (подготовка трансплантата)

  1. Установка сосудистой манжеты (рис. 5)
    1. Вытяните PV через просвет манжеты сделаны с 12-го калибра внутривенного катетера с помощью микро пинцет. Временно закрепляют манжеты ручки и PV вместе с помощью струбциной судна. Эверт стенке сосуда PV для покрытия внешней поверхности манжеты. Закрепите стенки сосуда и манжеты в положении с шелковой швом продольных 6-0.
      Примечание: Не перекручивайте судна. Манжета ручки должны храниться в направлении 12 часов.
    2. Установите IHVC манжету после описания в 7.1.1.
  2. Занесение в память двух пребывания швы на SHVC
    1. Проникнуть в стенке сосуда SHVC от снаружи к внутри с помощью двух 7-0 полипропилен зашивает вдоль 3 часов и 9 часов направлениях, соответственно.
      Примечание: Не завязывайте узел.
  3. Сохранение трансплантата
    1. Погружайте частичного печени трансплантата в солевой раствор на 4 ° C для сохранения после операции обратно таблицы.

8. получателей операция

  1. Повторите процедуры в 6.1-6.2 и 6.7, за исключением правой почки получателя предоставлять операционного поля, разрез связок и отделка судов.
  2. Подготовка IHVC, желчных протоков, печеночной артерии и воротной вены в получателя
    1. Во-первых мобилизовать секции IHVC вниз право почечных вен. Во-вторых перевязать право надпочечников судов с использованием шелковой шва 6-0. В-третьих мобилизация КБР от первого рубчика печени с помощью микро щипцы.
      Примечание: Не обрезать жировой ткани вокруг КБР.
    2. Разрез КБР на первый бифуркации в печени рубчика после двойной маточных труб с помощью 6-0 Шелковый шов. Затем разрез ФГА, с помощью микро ножницы после двойной маточных труб с помощью 6-0 Шелковый шов. Мобилизовать раздел PV от печеночной рубчика пилорического Вены.
  3. Мобилизация в задней части печени
    1. Убрать получателя печени с левой стороны, с использованием двух ватные палочки. Затем отрезали связки в задней части печени от SHVC право надпочечниковой Вены как описано в предыдущих визуализированных статьи18. После этого ввести резинкой через заднюю пространство SHVC.
  4. Подготовка документов и материалов на этапе anhepatic
    1. Проверьте наличие всех документов и материалов, необходимых на этапе anhepatic, таких как шприц 5 мл с изогнутой иглой, микро ножницы, микро иглы держателя, микро щипцы, двух микро кровоостанавливающие щипцы, два 7-0 полипропилен швы и 6-0 шелковые шовный материал.
      Примечание: Для поиска материалов или документов могут продлить на anhepatic этапе.
  5. Вырезание печени в получателя
    1. Кросс зажим IHVC непосредственно над почечных вен, с использованием судна зажим и PV непосредственно над пилорического вен. Рекорд продолжительности этапа anhepatic с этого момента до выпуска зажим на PV.
    2. Немедленно сократить концентрацию изофлюрановая до 0,5%.
    3. Опустите SHVC и диафрагмы, предустановленных резинкой. Зажима частей диафрагмы вместе с внутригрудного верхней полой вены с помощью струбциной бульдог, поддержание на расстоянии 0,5 см на SHVC.
      Примечание: Не зажимайте легких крыс.
    4. Микро-ножницами, вырежьте стенке сосуда SHVC тщательно вдоль верхнего края паренхимы печени держать сосудистой стенки, как можно дольше.
    5. Разрез PV на первом бифуркации в печени с помощью микро ножницы рубчика. Затем разрез нижней полой вены в паренхиме правой нижней доли, а не в стенке сосуда, оставляя продольных паренхимы печени вокруг верхней полой вены. Держите передний край в правой нижней доле на расстоянии 4 мм для IHVC. После transecting сосуды, переместите весь печени из брюшной полости.
  6. Восстановление SHVC
    1. Место частичное печени трансплантата в брюшной полости orthotopically. Проткнуть стенку емкости SHVC от внутри к вне в 3 часов и 9 часов направлениях, с использованием двух заданных пребывания швы. Потяните две пребывание швы вправо и влево после того, как они связаны в узел с их собственных целей.
    2. Пирс SHVC судно стены от снаружи к внутри рядом с узлом в направлении 3 часов, чтобы ввести иглой шов право пребывания в просвет сосудов.
    3. Анастомозируют задней стенки SHVC, идущий шовный материал внутри сосудов люмен от 3 часов направления в сторону 9 часов.
    4. В углу направление 9 часов проколоть судно стены от внутри вне рядом узел ввести иглу из просвета сосудов.
    5. Используйте этот шов для анастомозируют передней стенки с использованием работает шовные вне сосудистой люмен от направления 9 часов до 3 часов направление. Наконец, галстук шовный материал с свой собственный конец 3 раза (рис. 6).
      Примечание: Inject 3-5 мл физиологического раствора в Люмене реконструированный SHVC вытеснить пузырьки воздуха до последних 2-3 строчки. Более подробное описание SHVC анастомоза можно найти в статье, Delriviere и др. 19.
  7. Реконструировать П.В.
    1. Место два 7-0 полипропилена остаются швы в конце PV получателя после описания в 7.2. Потяните два пребывания швы в противоположном направлении для расширения стенке сосуда. Прикрепите два пребывания швы с помощью двух микро комаров гемостатический пинцет.
    2. Inject примерно 1 мл физиологического раствора в сосудистой люмен PV в получателя вытеснить пузырьков воздуха. Быстро Вставьте манжеты воротной вены в сосудистой люмен PV в получателя силы когда он открывается с помощью микро пинцет. Закрепите манжету анастомоза с помощью продольных 6-0 Шелковый шов. Кросс зажим CHA.
  8. Реперфузии в печени трансплантата
    1. Отпустите зажимы на SHVC и PV в последовательности, чтобы reperfuse печени трансплантата. Рекордное время этапа anhepatic. Проверьте наличие кровотечения анастомоза. Увеличивают концентрацию изофлюрановая до 1-2% согласно реакции крысы боль стимуляции.
  9. Восстановление IHVC
    1. Inject 1 мл физиологического раствора в сосудистой просвет IHVC в получателя вытеснить пузырьки воздуха. Вставьте манжеты в цилиндрических сосудов просвет IHVC, который поддерживается продольных паренхимы печени (рис. 7). Ввести 6-0 Шелковый шов через заднюю пространство IHVC. Быстро Закрепите манжету анастомоза с помощью 6-0 Шелковый шов.
    2. Отпустите зажимы два судна в IHVC для перезагрузки перфузии. Обрежьте окружающих паренхимы печени тщательно выше продольных Шелковый шов с помощью микро ножницы.
  10. Реконструировать печеночная артерия
    1. Проникнуть в стенке сосуда CHA в печени трансплантата от снаружи к внутри с помощью двух 11-0 полипропилен зашивает в 3 часов и 9 часов направлениях, соответственно. Загородить поток крови и CHA GDA в получателю, используя две изогнутые микро serrefines.
    2. Разрез PHA получателя на корню подвергать сосудистой люмен, с помощью микро ножницы. Увеличьте сосудистой люмен PHA получателя, режущая часть стенки сосуда продольно, чтобы вместить диаметр CHA в печени трансплантата.
    3. Анастомозируют CHA печени трансплантата для расширенного PHA образом конец в бок с помощью работает шовный метод, описанный для SHVC анастомоза (8.6.2-8.6.7).
      Примечание: Подробные иллюстрации можно найти в статье14Хуан и др.
  11. Реконструировать КБР
    1. Переместите кишечника обратно в брюшную полость для уменьшения расстояния между двумя концами желчных протоков. Выполните поперечный разрез на передней стенке желчного протока в получателя.
    2. Чтобы вставить его в просвете желчного протока в получателя через поперечный разрез выпадающее желчных стента в частичной печени трансплантата. Закрепите стент с помощью 6-0 продольных Шелковый шов.
    3. Свяжите два продольных швов шелка 6-0 в желчных протоков друг к другу, чтобы уменьшить напряженность анастомоза.
  12. Закрытие брюшной полости
    1. Закройте живота в два слоя с помощью шелкового шва 3-0 в шаблоне работает швов.

9. послеоперационное лечение (обезболивание и антибиотиков)

  1. Лечить всех получателей с бупренорфином 0,1 мг/кг подкожно. Администрировать подкожно Цефуроксим (16 мг/кг) в дополнение к обезболивающий препарат. Предлагаем водопроводной воды и стандартных лабораторных животных Чоу для крыс ad libitum.

Subscription Required. Please recommend JoVE to your librarian.

Representative Results

В общей сложности были завершены 31 случая сингенных arterialized крыса PLTx, используя этот протокол. Все получатели дожили до конца времени наблюдения. Вес тела получателей начал восстанавливаться после послеоперационные сутки (POD) 4. Наклон веса тела была близка к нормальной Льюис крыса после POD 6 (рис. 8), что косвенно подразумевает восстановление получателя. Гистологически в получателей было отмечено незначительное увеличение числа желчных протоков, и печени лобулярного архитектура получателей была цела. Не некроза или очевидные синусоидального дилатации было отмечено (рис. 9). Уровень сыворотки аланинаминотрансферазы (АЛТ) был в пределах нормального диапазона в POD 30 (Рисунок 10). Никаких случаев желтой мочи, вызванных желтухи были замечены в этих получателей, которых было указано, проверяя Кейдж, постельного белья ежедневно, указывающее проходимость желчных стента. Нормальной сыворотке крови уровня билирубина POD 30 подтверждается успешной реконструкции желчных протоков (рис. 11). Проходимость печеночная артерия была проверена transecting PHA в проксимальной части анастомоза во время жертвоприношения. Кровотечение из PHA наблюдалось во всех получателей, подразумевая проходимости анастомоза. Все эти результаты предложили, что печень графтов функционировала хорошо.

Средняя продолжительность этапа anhepatic был 23.03 ± 2.3 мин. Манжета анастомоза PV взял 4.68 ± 0.77 мин, в то время как манжеты анастомоза IHVC только взял 2.05 ± 0,71 мин по сравнению с манжеты анастомоза П.В., манжета анастомоза IHVC, спас шаг размещения пребывания швы и тем самым еще больше сокращен Анас время tomosis (Таблица 1).

Два случая кровотечения в остатки пней мл 70% гепатектомии наблюдались среди 31 случая судна ориентированной гепатектомии. В предыдущем эксперименте кровотечение в остатки пней мл было отмечено в 8 из 18 случаев сохранения паренхимы гепатектомии судна ориентированных (Рисунок 12). Этот результат указывается более низкую ставку кровотечения в печени остатки пней мл после использования судна ориентированный гепатектомии 70%.

Figure 1
Рисунок 1 . Манжеты и желчных стента.
(A, C) Размер манжеты. (B fillister на манжете. (D часть тела и дескриптор частью манжету. (E) () IHVC манжеты; (b) PV манжеты. (F) желчных стента. Шкалы бар = 5 mm. пожалуйста, нажмите здесь, чтобы посмотреть большую версию этой фигуры.

Figure 2
Рисунок 2 . Чтобы загородить кровоснабжение LLL и мл.
(A) Общий ствол PV, печеночной артерии и желчь воздуховодов из LLL и любовь моей жизни.
(B) Обесцвечивание LLL и любовь моя жизнь после transecting общего ствола.
(C) Воротной вены RML.
(D) Были перерезанных гори все PVs, печеночной артерии и желчных LLL и мл.
Шкалы бар = 5 мм. аббревиатуры: LLL левой боковых лепестков, мл средний лепесток, любовь моей жизни левый средний лепесток, RML право средний лепесток, RSL правой Улучшенный лепесток, RIL правой нижней доли, Улучшенный хвостатого доли вероятности нежелательной почты. Пожалуйста, нажмите здесь, чтобы посмотреть большую версию этой фигуры.

Figure 3
Рисунок 3 . Для иссечения левый средний лепесток.
(A) иссечения печени массы любовь моей жизни непосредственно над щипцы.
(B) место три пирсинг швов на разрезы. (Image 1)
Шкалы бар = 5 мм. аббревиатуры: RML право средний лепесток, RSL прямо Улучшенный лепесток, RIL правой нижней доли, Улучшенный хвостатого доли вероятности нежелательной почты. Пожалуйста, нажмите здесь, чтобы посмотреть большую версию этой фигуры.

Figure 4
Рисунок 4 . Для полное право средний лепесток (RML).
(A) База RML.
(B) Место комаров гемостаз щипцы вокруг основания RML.
(C) Иссечения печени паренхиме RML непосредственно над щипцы.
(D) Оставьте на SHVC равнине и тонкий слой ткани остатки печени.
Шкалы бар = 5 мм. аббревиатуры: мл средний лепесток, RSL правой Улучшенный лепестка. Пожалуйста, нажмите здесь, чтобы посмотреть большую версию этой фигуры.

Figure 5
Рисунок 5 . Для установки манжету.
(A) потяните PV через просвет манжеты.
(B) исправить манжеты ручки и PV вместе на струбцине судна.
(C) Эверт PV сосудистой стенки для покрытия внешней поверхности манжеты.
(D) обеспечить сосудистой стенки и манжеты в положении.
Шкалы бар = 5 mm. пожалуйста, нажмите здесь, чтобы посмотреть большую версию этой фигуры.

Figure 6
Рисунок 6 . Чтобы восстановить SHVC.
(A & B) Потяните две пребывания швы вправо и влево, соответственно.
(C) анастомозируют задней стенки SHVC на выполнение шва в просвете сосудов.
(D) анастомозируют передней стенки SHVC из просвета сосудов.
Шкалы бар = 5 mm. пожалуйста, нажмите здесь, чтобы посмотреть большую версию этой фигуры.

Figure 7
Рисунок 7 . Чтобы восстановить IHVC.
(A) цилиндрических сосудов просвет IHVC в получателя.
(B) Закрепите манжету анастомоза IHVC.
(C) начало реперфузии.
(D) обрежьте окружающих паренхимы печени выше продольных швов шелка.
Шкалы бар = 5 мм. аббревиатуры: PV воротной вены, IHVC infrahepatic нижней полой вены, RIL правой нижней доле. Пожалуйста, нажмите здесь, чтобы посмотреть большую версию этой фигуры.

Figure 8
Рисунок 8 . Послеоперационные тела вес восстановления.
Вес тела получателей начали восстанавливаться после послеоперационного дня 4. Наклон веса тела была близка к нормальной Льюис крыса после послеоперационного дня 6, которое косвенно подразумевает восстановление получателя.

Figure 9
Рисунок 9 . Гистологии печени трансплантата после 30 дней.
Гистология в получателей было отмечено незначительное увеличение числа желчных протоков, в печени лобулярного архитектура получателей была цела. Не некроза или очевидные синусоидального дилатации было отмечено (400 X). Шкалы бар = 20 мкм пожалуйста, нажмите здесь, чтобы посмотреть большую версию этой фигуры.

Figure 10
Рисунок 10 . Сывороточный уровень ALT.
Уровень в сыворотке крови АЛТ был в пределах нормального диапазона 30 POD. (**, P < 0,05).

Figure 11
Рисунок 11 . Сыворотке крови уровня билирубина.
Сыворотке крови уровня билирубина POD 30 была сравнима с обычной крыса Льюис (P > 0,05).

Figure 12
Рисунок 12 . Кровотечение ставки различных методов гепатектомии.
В метод с использованием судна ориентированный гепатектомии 70% было отмечено более низкую ставку кровотечения в печени остатки пней мл.

Процедуры Удаление печени Анастомоз SHVC PV анастомоза Анастомоз IHVC Anhepatic время
Время (в минутах) 2.62±0.46 15.73±2.05 4.68±0.77 2.05±0.71 23.03±2.30
Данные были выражены в за

Таблица 1. Время индивидуальных хирургических процедур во время фазы anhepatic

Table 2
В таблице 2. Разница между двумя протоколами визуализированных крысы PLTx. Пожалуйста, нажмите здесь, чтобы посмотреть большую версию этой таблицы.


Дополнительные материалы

Subscription Required. Please recommend JoVE to your librarian.

Discussion

PLTx крыса-это сложные микрохирургическому процедура с программу обучения, которая является высокая стоимость и долго в продолжительность20. Исследователи помешало сложность крыса PLTx протокола с использованием этой модели на животных. По сравнению с полноразмерным крыса LTx, крыса PLTx представляет микрохирург, не только с проблемой процедуры трансплантации, но и с проблемой резекции печени в мелких животных. Таким образом визуализация микрохирургическое протокол, описывающие всю процедуру в деталях имеет важное значение для создания этой сложной модели. Ранее визуализированных статьи, сообщает Нагаи et al. представил протокол 50% частичное ортотопическая LTx с печёночной артерий реконструкции в крыс5 (Таблица 2). Этот протокол используется гепатектомии ex vivo , которая клинически похожа на процедуру Сплит LTx.

По сравнению с раздельным LTx, живущих доноров LTx resects частичного трансплантата печени от живого донора, а не расщепление печени в таблицы обратной операции. Резекция в vivo печени может привести к более хирургических манипуляций, больше портальной гипертензии и даже более теплых ишемии травм для частичного печени трансплантата. Следовательно несколько крысы PLTx были созданы модели, используя гепатектомии в естественных условиях в соответствующих исследований6,8,21,22. Многие протоколы включают резекцию печени долей после простой перевязкой на ножке или основание2,3,6,8,21,23. Однако различные печени лопастями, различной формы. МЛ крысы имеет широкий базы что полу окружает полой10,24. Размещение простой перевязкой на базе мл легко сжимает нижней полой. Чтобы избежать сужения верхней полой вены, Madrahimov et al. разработали паренхимы сохранение судна ориентированный гепатектомии чтобы удалить мл 2 шагах после того, как были сделаны четыре пирсинг швы в паренхиме, оставляя остатки пней мл плоский 10. Однако PVs печени лопастями, лигируют пирсинг швы были спрятаны в паренхиме. Кровотечение в остатки пней, вызванные отсутствует или ранив веточек PV не может быть полностью избегать 11. В нашем протокол соответствующий PVs и печёночной артерии далее были расчленены сначала. Затем кровоснабжение резекции печени долей индивидуально была закрыта перешнуровок перед резекции. Таким образом скорость кровотечения в остатки пней, был снижен с помощью нашего протокола (Рисунок 10). Также метод размещения четыре пирсинг швы в пень мл работал наш протокол чтобы перевязать печеночных вен, но не PV и печёночной артерии. С этими перешнуровок, используя несколько пирсинг швы и поэтапный резекции поддерживалась плоскую форму культи печени остатки, которые избежать сужения верхней полой вены.

Для восстановления IHVC небольшая модификация был сделан на манжету анастомоза, описываемого Камада et al. 25. нижней полой вены получателя был перерезанных гори в паренхиме правой нижней доли, а не на судно IHVC, который оставил продольных паренхимы печени вокруг верхней полой вены. Паренхимы печени вокруг верхней полой вены помогал поддерживать цилиндрическую форму сосудистой конца IHVC получателя, а не плоскую форму. Следовательно в просвет IHVC естественно был открыт без помощи пребывания швы и пинцет. Эта модификация помогли сохранить шаг размещения пребывания швы и способствовало включение IHVC манжеты в сосудистой просвета получателя. Кроме того эта модификация продлен сосудистой длина IHVC, тем самым снижая напряженность между двумя концами во время манжеты анастомоза.

С преимуществом быстрого сосудистого анастомоза два манжета техника часто используется в ортотопическая крыса LTx для разветвляющийся PV и IHVC. Мията et al. даже предложил протокол с участием трех манжета технику для анастомозируют PV, IHVC и SHVC. Однако метод манжета также имеет свои недостатки. Во-первых манжета с фиксированным размером не вписываются размер соответствующего судна. Кроме того метод манжеты нарушает поток крови, что приводит к более высокий уровень тромбоза и реакция инородного тела на манжету26. SHVC, главный сосуд в крыса, показывает поток крови. Любое сужение или тромбоза в этом сосуде может привести к тяжелых послеоперационных осложнений. Таким образом в нашем PLTx протокол, мы решили использовать технику ручной шов реконструировать SHVC, который позволяет для регулировки анастомоза как можно ближе к физической установки. Однако высокое качество SHVC анастомоза завершено методом ручной шов требует высокой квалификации микрохирургическое. Для начинающих метод триангуляции Carrel рекомендуется для разветвляющийся 27судов. Используя эту технику, три пребывания швы помещены на регулярной основе по окружности SHVC. 3D формы SHVC поддерживается втягивания что эти три остаются швы вдоль три направления, которые могут предотвратить SHVC от стеноз во время наложения анастомоза.

Повторное arterialization печени трансплантата является спорным. По нашему мнению, повторно arterialization не является ключевым шагом для обеспечения высокой выживаемости получателя, но это может быть ключевым шагом для обеспечения высокого качества печени трансплантата. В протоколе традиционных крысы LTx, с участием двух манжета технику печеночная артерия не был реконструирован, как отсутствие перфузии печёночной артерии не влияет на результат крыса LTx12. Кроме того было проведено предыдущее исследование по мыши LTx исследовать эффект повторного arterialization на долгосрочное выживание трансплантата, гистологические изменения, ишемического повреждения печени и начале иммунологической активации пути13. Исследователи пришли к выводу, что повторное arterialization печени графтов не имеют большое влияние на выживаемость или степень иммунологической активации. Однако недавнее исследование, сообщил Хуан et al. предполагает, что повторное arterialization имеет важное значение для восстановления паренхимы печени, подвергается гепатектомии, особенно с затруднении оттока28. Non-arterialization частичного печени трансплантата усугубили повреждение печени и задержки восстановления от некроз. Поэтому рекомендуется повторно arterialization частичного печени трансплантата. Как показано здесь, конец в бок анастомоза метод был использован для воссоздания печеночной артерии, который был описан ранее в одном из наших авторов 14. Преимуществом этого метода является выбор анастомозируют две толстые артерии, CHA и GDA, нежели тонкие ФГА, которая уменьшает сложность восстановления печеночной артерии и поддерживает высокий уровень проходимости анастомоза.

Классическая крыса LTx протокола, предложенный Камада et al. предлагает управление на anhepatic этапе, таким образом, что это меньше, чем 26 мин, как ни одно животное не выжил, когда anhepatic этап длился дольше, чем 26 мин25. Наш опыт в соответствии с этим предложением, хотя мы ранее отмечено несколько случаев выживание с anhepatic этап времени дольше, чем 26 мин. По нашему мнению в фазу стабильного anhepatic имеет приоритет над короче anhepatic фазы в хирургических исследований. В нашей группе на anhepatic этапе точно контролируется, чтобы в течение определенного времени. Anhepatic фаза не останавливается до достижения заданной anhepatic время, хотя анастомоза SHVC и PV может быть завершено намного раньше. Однако в рамках подготовки проекта, поощряется короче фазы anhepatic.

Хотя многие были усовершенствованы сократить этап подготовки и устранить ненужные операции, крыса LTx и PLTx являются еще сложные микрохирургическому операции20. Таким образом в дополнение к визуализируемому протокол, протокол поэтапного обучения, основанный на план--Check-действий цикла имеет важное значение для достижения высокой выживаемости и высокая качество. Наш предварительный опыт использования этого протокола тренировки показал, что 40-73 операции были обязаны овладеть ортотопическая крыса LTx. Еще 9-13 операций должны были овладеть крыса заново arterialized PLTx. Подготовка протокола, предложенный Czigány et al. утверждает, что 50-60 LTxs достаточно освоить ортотопическая LTx и PLTx29.

В протоколе обучения наши план--Check-действий контроль качества на каждом этапе подготовки и на каждый отдельным манипуляции необходимо подчеркнуть, особенно в такой сложной модели. Высокая выживаемость не равносильно высокого качества процедуры. В результатах представителя, были перечислены несколько критериев для оценки качества микрохирургии, включая гистологию, ферментов печени, восстановления веса тела, желтуха (сывороточного билирубина и желтый мочи), продолжительность фазы anhepatic и проходимость печеночной артерии. Высокое качество достигается только тогда, когда соблюдены все критерии.

Subscription Required. Please recommend JoVE to your librarian.

Disclosures

Все авторы имеют не конфликтующие интересы раскрыть.

Acknowledgments

Это исследование было поддержано Национальный фонд естественных наук Китая (Грант № 81501382) и Чжэцзян провинции естественных наук фонд Китая (Грант № LQ13H100003 и LQ16H100002).

Materials

Name Company Catalog Number Comments
Surgical microscope Möller-Wedel, Germany 654359
Light source OSRAM (China) Lighting Co., Ltd 64627
Isoflurane Vaporizer MIDMARK Corporation VIP3000
Isoflurane Baxter Healthcare Corporation 40032609 For Inhalation anesthesia
Normal Saline Zhejiang Tianrui Pharmaceutical Co., Ltd. 716092103
Povidone Iodine Solution HANGZHOU MINSHENG PHARMACEUTICAL H33021567 For disinfection
Hemostatic forceps Shanghai Medical Instruments(Group) Ltd J31020
Surgical scissors Shanghai Medical Instruments(Group) Ltd JC2116
Needle-holder Shanghai Medical Instruments(Group) Ltd J32030
Dressing Forceps Shanghai Medical Instruments(Group) Ltd J42020
Mosquito hemostatic forceps Shanghai Medical Instruments(Group) Ltd W40340 For liver resection; For retracting the stay sutures. 
Micro-scissors Shanghai Medical Instruments(Group) Ltd WA1040
Micro needle-holder Shanghai Medical Instruments(Group) Ltd WA2060
Curved micro typing forceps Shanghai Medical Instruments(Group) Ltd WA3061
straight micro typing forceps Shanghai Medical Instruments(Group) Ltd WA3060
Micro hemostatic forceps Shanghai Medical Instruments(Group) Ltd WA3020
Bulldog clamp Shanghai Medical Instruments(Group) Ltd XEC350
Vessel clamps Shanghai Medical Instruments(Group) Ltd W40160
Micro Serrefine-curved  Fine Science Tools, Inc 18055-05
Dacryosyrinx Shi Zhuo medical instruments Co., Ltd. 5# curve Use as the curved needle for forcing out the air bubbles in the vascular lumen
Sterilized gauze swabs Fuqing Health & Integral Medical 20230R
5mL syringe Zhejiang Yusheng Medical Instrument Co.,Ltd 811932416
18G needles Shanghai Kindly Enterprise Development Group Co., Ltd 01-014 For fixing the upper abdomen wall
Intima II 22G intraveous catheter Becton Dickinson Medical Devices (Shanghai) Co Ltd. 383207y For making biliary stent; For infusing perfusate
7-0 polypropylene sutures Ningbo Medical Needle Co., Ltd 151026 For SHVC anastomsis
6-0 silk suture Shanghai Pudong Jinhuan Medical Products Co., Ltd 2650182 For ligation
Culture dish (100mm) Corning Incorporated 430165 used in back table for storage ice. The back table dish was placed on it. 
Culture dish (30 mm) Corning Incorporated 3296 As a vessel for organ preservation
Angiocath 12G intravenous catheter Becton Dickinson Medical Devices (Shanghai) Co Ltd. 382277 For making a IHVC cuff
Angiocath 14G intravenous catheter Becton Dickinson Medical Devices (Shanghai) Co Ltd. 382269 For making a PV cuff
Buprenorphine (hydrochloride) Tianjin Institute of Pharmaceutical Research Pharmaceutical Co., Ltd H12020275 For analgesic
Cefuroxime sodium for injection Esseti FarmaceuticiS.r.l H20160013 As an antibiotics

DOWNLOAD MATERIALS LIST

References

  1. Yan, J. Q., Becker, T., Peng, C. H., Li, H. W., Klempnauer, J. Split liver transplantation: a reliable approach to expand donor pool. Hepatobiliary Pancreat Dis Int. 4, 339-344 (2005).
  2. Xia, R., Emond, J. C. Orthotopic partial liver transplantation in the rat: a model of 70% hepatectomy and reduced size liver transplantation. Transplantation. 56, 1041-1043 (1993).
  3. Omura, T., Ascher, N. L., Emond, J. C. Fifty-percent partial liver transplantation in the rat. Transplantation. 62, 292-293 (1996).
  4. Foss, A., et al. Function of reduced-size liver transplant in the rat. Res Exp Med (Berl). 197, 91-99 (1997).
  5. Nagai, K., Yagi, S., Uemoto, S., Tolba, R. H. Surgical procedures for a rat model of partial orthotopic liver transplantation with hepatic arterial reconstruction. J Vis Exp. , e4376 (2013).
  6. Sun, J., Qin, G., Wu, L., Wang, C., Sheil, A. G. Antigenic load and peripheral chimeric levels in entire and partial liver allograft recipients. Microsurgery. 21, 183-187 (2001).
  7. Ninomiya, M., et al. Deceleration of regenerative response improves the outcome of rat with massive hepatectomy. Am J Transplant. 10, 1580-1587 (2010).
  8. Yamanaka, K., et al. Effect of olprinone on liver microstructure in rat partial liver transplantation. J Surg Res. 183, 391-396 (2013).
  9. Wang, W., et al. Mesenchymal stem cells promote liver regeneration and prolong survival in small-for-size liver grafts: involvement of C-Jun N-terminal kinase, cyclin D1, and NF-kappaB. PLoS One. 9, e112532 (2014).
  10. Madrahimov, N., Dirsch, O., Broelsch, C., Dahmen, U. Marginal hepatectomy in the rat: from anatomy to surgery. Ann. Surg. 244, 89-98 (2006).
  11. Martins, P. N., Theruvath, T. P., Neuhaus, P. Rodent models of partial hepatectomies. Liver Int. 28, 3-11 (2008).
  12. Kamada, N., Sumimoto, R., Kaneda, K. The value of hepatic artery reconstruction as a technique in rat liver transplantation. Surgery. 111, 195-200 (1992).
  13. Steger, U., Sawitzki, B., Gassel, A. M., Gassel, H. J., Wood, K. J. Impact of hepatic rearterialization on reperfusion injury and outcome after mouse liver transplantation. Transplantation. 76, 327-332 (2003).
  14. Huang, H., et al. A novel end-to-side anastomosis technique for hepatic rearterialization in rat orthotopic liver transplantation to accommodate size mismatches between vessels. Eur Surg Res. 47, 53-62 (2011).
  15. Bernal, J., et al. Guidelines for rodent survival surgery. J.Invest Surg. 22, 445-451 (2009).
  16. Johnson, A. J., Stulting, R. D. Ophthalmic Microsurgical Suturing Techniques. Macsai, M. S. , Springer. Berlin Heidelberg. 21-28 (2007).
  17. Delriviere, L., et al. Detailed modified technique for safer harvesting and preparation of liver graft in the rat. Microsurgery. 17, 690-696 (1996).
  18. Oldani, G., Lacotte, S., Morel, P., Mentha, G., Toso, C. Orthotopic liver transplantation in rats. J Vis Exp. , (2012).
  19. Delriviere, L., et al. Technical details for safer venous and biliary anastomoses for liver transplantation in the rat. Microsurgery. 18, 12-18 (1998).
  20. Jin, H., et al. Preliminary experience of a PDCA-cycle and quality management based training curriculum for rat liver transplantation. J Surg Res. 176, 409-422 (2012).
  21. Selzner, N., Selzner, M., Tian, Y., Kadry, Z., Clavien, P. A. Cold ischemia decreases liver regeneration after partial liver transplantation in the rat: A TNF-alpha/IL-6-dependent mechanism. Hepatology. 36, 812-818 (2002).
  22. Tanaka, H., Hashizume, K., Enosawa, S., Suzuki, S. Successful transplantation of a 20% partial liver graft in rats: a technical innovation. J Surg Res. 110, 409-412 (2003).
  23. Bockhorn, M., et al. Erythropoietin treatment improves liver regeneration and survival in rat models of extended liver resection and living donor liver transplantation. Transplantation. 86, 1578-1585 (2008).
  24. Martins, P. N., Neuhaus, P. Surgical anatomy of the liver, hepatic vasculature and bile ducts in the rat. Liver Int. 27, 384-392 (2007).
  25. Kamada, N., Calne, R. Y. Orthotopic liver transplantation in the rat. Technique using cuff for portal vein anastomosis and biliary drainage. Transplantation. 28, 47-50 (1979).
  26. Kashfi, A., et al. A review of various techniques of orthotopic liver transplantation in the rat. Transplant.Proc. 37, 185-188 (2005).
  27. Wain, R. A. J., Hammond, D., McPhillips, M., Whitty, J. P. M., Ahmed, W. Surgical Tools and Medical Devices. Ahmed, W., Jackson, M. J. , Springer International Publishing. 545-562 (2016).
  28. Huang, H., et al. Hepatic arterial perfusion is essential for the spontaneous recovery from focal hepatic venous outflow obstruction in rats. Am J Transplant. 11, 2342-2352 (2011).
  29. Czigany, Z., et al. Improving Research Practice in Rat Orthotopic and Partial Orthotopic Liver Transplantation: A Review, Recommendation, and Publication Guide. Eur Surg Res. 55, 119-138 (2015).

Tags

Медицина выпуск 134 трансплантация печени гепатектомии повторно arterialization крыса печеночная судна частичной печени трансплантата судна ориентированной манжеты анастомоза
Повторно Arterialized крысы частично трансплантации печени <em>в естественных условиях</em> судно-ориентированный 70% гепатектомии
Play Video
PDF DOI DOWNLOAD MATERIALS LIST

Cite this Article

Chen, X., Yu, R., Xu, Z.,More

Chen, X., Yu, R., Xu, Z., Zhang , Y., Liu, C., Chen, B., Jin, H. Re-Arterialized Rat Partial Liver Transplantation with an in vivo Vessel-Oriented 70% Hepatectomy. J. Vis. Exp. (134), e56392, doi:10.3791/56392 (2018).

Less
Copy Citation Download Citation Reprints and Permissions
View Video

Get cutting-edge science videos from JoVE sent straight to your inbox every month.

Waiting X
Simple Hit Counter