Waiting
Login processing...

Trial ends in Request Full Access Tell Your Colleague About Jove
Click here for the English version

Chemistry

Real-time adem analyse met behulp van secundaire Nanoelectrospray ionisatie gekoppeld aan massaspectrometrie voor hoge resolutie

Published: March 9, 2018 doi: 10.3791/56465
* These authors contributed equally

Summary

Een protocol voor het karakteriseren van de chemische samenstelling van uitgeademde adem in real-time met behulp van ionisatie van de secundaire nanoelectrospray gekoppeld aan hoge resolutie massa spectrometrie wordt aangetoond.

Abstract

Uitgeademde vluchtige organische stoffen (VOS) hebben gewekt belangstelling, omdat ze als biomarkers voor diagnose van de ziekte en de milieublootstelling in een niet-invasieve wijze dienen kunnen. In dit werk presenteren wij een protocol karakteriseren de uitgeademde vos in real-time met behulp van secundaire nanoelectrospray ionisatie gekoppeld aan massaspectrometrie voor hoge resolutie (Sec-nanoESI-HRMS). De zelfgemaakte Sec-nanoESI bron gemakkelijk opgericht op basis van een commerciële nanoESI bron. Honderden pieken werden waargenomen in de achtergrond-afgetrokken massaspectra van uitgeademde adem, en de massale nauwkeurigheid waarden zijn-4.0-13.5 ppm en-20.3-1.3 ppm in de positieve en negatieve ion detectie modi, respectievelijk. De toppen zijn toegewezen met nauwkeurige elemental samengesteld al naar gelang de nauwkeurige massa en isotopische patroon. Minder dan 30 s wordt gebruikt voor een uitademing meting, en het duurt ongeveer 7 minuten voor zes gerepliceerde metingen.

Introduction

Met de snelle ontwikkeling van moderne analytische technieken, zijn honderden van vluchtige organische stoffen (VOS) geïdentificeerd in menselijke uitgeademde adem1. Deze Vos voornamelijk voortvloeien uit de alveolaire lucht (~ 350 mL voor een gezonde volwassene) en anatomische dode ruimte air (~ 150 mL)2, die worden beïnvloed door lichaam metabolisme3,4,5,6,7 ,8 en milieuvervuiling9, respectievelijk. Dientengevolge, als geïdentificeerd, zijn deze Vos veelbelovend om te worden gebruikt als biomarkers voor diagnose van de ziekte en de milieublootstelling in een niet-invasieve wijze.

Hoewel gaschromatografie-massaspectrometrie (GC-MS) de meest gebruikte techniek voor kwalitatieve en kwantitatieve analyse van uitgeademde Vos2 is, hebben directe MS-technieken, die zijn ontwikkeld voor real-time adem analyse, de voordelen van hoog tijd resolutie en eenvoudige pre monstervoorbereiding. Directe MS-technieken, zoals proton overdracht reactie MS (PTR-MS)10, geselecteerd ion stroom buis MS (SIFT-MS)11, secundaire electrospray ionisatie MS (sessie-MS)12,13 (ook wel genoemd als de extractieve electrospray ionisatie MS, EESI-MS14,15), trace atmosferische gas analyzer (TAGA)16 en plasma ionisatie MS (PI-MS)17 zijn onderzocht de afgelopen jaren.

Onder alle de directe MS technieken staat sessie bekend als een universele zachte ionisatie techniek19,20,21; en de bron is gemakkelijk te worden aangepast en gekoppeld aan verschillende soorten massaspectrometers, bijvoorbeeld, het tijdstip van vlucht massaspectrometer8,15, ion trap massa spectrometer14 en orbitrap massaspectrometer12 ,18. Tot nu toe sessie-MS is met succes gebruikt in de diagnose van aandoeningen van de luchtwegen22, ijken van circadiane ritme3,6,23, farmacokinetiek7,8, en onthullend stofwisselingsroutes4, enz. Onlangs, een commerciële sessie bron beschikbaar is gekomen.

In deze studie werd een facile en compacte secundaire nanoelectrospray ionisatie bron (Sec-nanoESI) instellen en gekoppeld aan een hoge-resolutie massa spectrometer. Real-time metingen van uitgeademde vos in adem werden gepresenteerd.

Subscription Required. Please recommend JoVE to your librarian.

Protocol

Let op: Raadpleeg alle relevante veiligheidsinformatiebladen (MSDS) vóór gebruik. Gebruik adequate persoonlijke beschermingsmiddelen, bijvoorbeeld, laboratoriumjas, handschoenen, bril, volledige lengte broek en gesloten-teen schoenen).

1. instellen van de Sec-nanoESI-bron

  1. Instellen van een bron van de Sec-nanoESI volgens het sessie-proces, dat wil zeggen, is de adem gas ingevoerd om te snijden een electrospray pluim en geïoniseerd door de geladen druppels (Figuur 1). De bronnen in afzonderlijke labs gebouwd, is afhankelijk van de interface van de massaspectrometer gebruikt24,25. Hier, aan de bron van de Sec-nanoESI op basis van een commerciële nanoESI bron (Figuur 2) instellen en implementeren om een benchtop vierpolige orbitrap massaspectrometer.
    Opmerking: De hoofdmacht van de bron is een kubieke roestvrij stalen kamer (lengte 25 mm, I.D. 13 mm) (Figuur 2b) met een inham (I.D. 4 mm) om het capillair nanoESI in de kamer. De kamer is dus niet volledig verzegeld (Figuur 2b).
  2. Installeer twee roestvrij stalen buizen (OD 5 mm, lengte 8 mm, I.D. 3 mm) aan elke kant van de kamer voor de levering van gas.
  3. Twee kwarts Vensters (I.D. 14 mm) rusten op de bovenkant en de bodem van de kamer om te controleren de positie van het topje van de capillaire nanoESI en nanoESI spray met ogen of een digitale Microscoop.
  4. De zaal aan de sweep kegel van de massaspectrometer lassen.
    Noot: Het ontwerp kan veranderen afhankelijk van de specifieke geometrie van de atmosferische druk-interface van de massaspectrometer gebruikt in afzonderlijke labs.

2. instrument optimalisatie

  1. Kalibreer de massaspectrometer in beide standen voor positieve en negatieve ion detectie volgens de instructies van de fabrikant. Door het toepassen van kalibratie, zijn massaspectrometer parameters, zoals de lens mogelijkheden en detectie voorwaarden, geoptimaliseerd voor goede vingergevoeligheid en piek vorm geven bij een waarde van de opgegeven resolutie. De resolutie van de massa van 70000 wordt hier gebruikt.
    1. Volledige Q Exactive kalibraties uitvoeren met behulp van de commerciële ESI bron; massa kalibratie kan echter worden uitgevoerd met alle compatibele bronnen, met inbegrip van aangepaste.
  2. Stel de temperatuur van de ion verbindingsleiding (ITT) van de massaspectrometer > 100 ° C. Hoewel de hoogste temperatuur kan worden ingesteld bij 350 ° C, kan dit resulteren in de ontleding van sommige verbindingen. Dus wordt 150° C gebruikt in dit experiment.
    Opmerking: Voor de massaspectrometers met een opening van de bemonstering in plaats van ITT, de temperatuur van de opening van de bemonstering wordt ingesteld > 100 ° C.
  3. Selecteer het juiste ESI oplosmiddel op basis van eigenschappen van oplosmiddel (b.v., polariteit en volatiliteit) en gerichte verbindingen (bijvoorbeeld, proton affiniteit) voor de ESI oplosmiddel en stroom prijs krijgt. Een mengsel van water en het methanol in verschillende verhoudingen is vaak gebruikt als oplosmiddel ESI-25. In dit experiment, gebruik van water bevattende 0,1% (v/v) mierenzuur, hoge ionisatie efficiëntie geweest dit oplosmiddel13,19,23gemeld. Instellen van het debiet van ESI oplosmiddel in het bereik 0-1,5 l/min en 200 nL/min.
    Opmerking: Degas ESI oplosmiddel voor 30 min vóór gebruik.
  4. Sec-nanoESI bron parameters, voornamelijk nanoESI spanning en nanoESI capillaire tip positie te optimaliseren. Het voltage varieert meestal van 2.0 naar 4.5 kV. Gebruik 2,5 kV hier.
    Opmerking: Hogere ESI spanning wordt toegepast aangezien de stroom tarief stijgt. De afstand tussen de tip en de massaspectrometer opening kan worden aangepast van 1 tot 5 mm. Na optimalisatie, moet de genormaliseerde intensiteitsniveau (NL) waargenomen in een massaspectrum > 1 x 106 en de variatie van totale ion chromatografische (TIC) moet < 10% in beide standen voor de detectie van positieve en negatieve ion. De massaspectrum en TIC worden verkregen in de massale cellenbereik m/z 50-750.
  5. Zuiver gas toepassen op de bron. Dit is een optionele stap, gericht op het verminderen van de invloed van vluchtige organische stoffen van binnenlucht. Hoge zuiverheid, stikstofgas (N2, 99,99%) of zuivere lucht kan worden gebruikt. Met de aanwezigheid van zuiver gas, moet de waargenomen in een massaspectrum NL > 1 x 105 en de variatie van de TIC moeten < 10% in beide standen voor de detectie van positieve en negatieve ion. Hoge zuiverheid N2 is hier gebruikt en geleverd op 0.8 L/min.
    Opmerking: Het totale debiet van zuiver gas en gas adem moet hoger zijn dan het debiet door de opening van de massa spectrometer.

3. meting van de uitgeademde adem

  1. Inademen van de lucht en het uitvoeren van een normale uitademing te ademen uit alle lucht in de longen op een constant debiet. Controleren van het debiet van de uitademing door een manometer of een debietmeter zichtbaar is voor het onderwerp. Teflon (PTFE) buizen gebruiken om de adem gas23.
    1. Om te voorkomen dat de condensatie van waterdamp in de buis, Verwarm de buis bij een temperatuur van 80-100 oC7,23,27 of gebruik een Nafion droger28,29. In dit experiment uitgeademde het onderwerp op 0.4 L/min gecontroleerd door een debietmeter.
    2. De inlaat van de flowmeter voor een Nafion buis (lengte 60 cm) te verwijderen van de waterdamp in de uitgeademde adem en verbinden van de uitlaat van de flowmeter verbinden met een PTFE-buis (lengte 13 cm, I.D. 4 mm). Duurt het < 30 s voor een meting van de uitademing.
    3. 4-6 gerepliceerde metingen28,29uitvoeren
    4. Hebben om te minimaliseren van storende effecten, deelnemers uit eten, drinken, en poetsen hun tanden minstens 30 min voordat de metingen23.
      Opmerking: Om te minimaliseren van de invloed van vluchtige organische stoffen van binnenlucht, het is gemeld om in te ademen zuiver gas in plaats van binnenlucht26. Wanneer een Nafion-buis wordt gebruikt, kunnen sommige polaire verbindingen verloren gaan.
    5. Houd de controle als de intensiteit van het ion groter is dan de lineaire detectiegrens van het instrument of niet tijdens de meting. De verzadiging van het signaal kan leiden tot een piek van artefact dat praktisch niet afkomstig is van de compound in de steekproef. Door het inademen door de neus, zou deel van de vluchtige organische stoffen en deeltjes worden weggenomen; het is echter opmerkelijk dat de verbindingen in de neuspassages kunnen ook worden gedetecteerd.

4. het verkrijgen van een vingerafdruk van adem en een spoor van de tijd van een compound

  1. Verkrijgen chromatogrammen en massaspectra. Software (bijvoorbeeld Xcalibur) record chromatogrammen en massaspectra gebruiken. Omdat dit directe MS analyse en geen chromatografische scheiding wordt uitgevoerd, het totale ion chromatogram (TIC) geeft eigenlijk aan het spoor van de tijd van alle signalen gedetecteerd in de massaspectra en het uitgepakte ion chromatogram (EIC) het spoor van de tijd van toont een opgegeven compound.
    Opmerking: Voor andere commerciële massaspectrometers, de chromatogrammen en massaspectra kunnen worden verkregen door de overeenkomstige data acquisitie software.
  2. Het verkrijgen van een vingerafdruk uitgeademde adem door te selecteren van een aantal scans in het TIC uitgeademde adem wordt gemeten. Een massaspectrum vertegenwoordigen een gemiddelde van deze scans door de software te verkrijgen.
    1. Om te elimineren achtergrond pieken van de vingerafdruk van de adem, gebruik het aftrekken achtergrond in de software. Raadpleeg de gebruikershandleiding die is geleverd door de fabrikant. Kortom, selecteer precies evenveel van scans wanneer geen enkel monster adem wordt ingevoerd en aftrekken van de achtergrond massaspectrum van de vingerafdruk van de adem.
      Opmerking: Bij deze methode wordt de drempel tot het omgaan met de functies in de adem vingerafdruk wordt gedefinieerd als drie maal de standaardafwijking van het signaal van de achtergrond. Voor andere commerciële massaspectrometers, kan aftrekken van de achtergrond worden uitgevoerd door de overeenkomstige data acquisitie software.
  3. Het verkrijgen van een spoor van de tijd van een bepaalde stof. Selecteer het hoogtepunt van een gerichte compound in de vingerafdruk van de adem en het spoor van de tijd van de compound is vervolgens overgenomen door de software.

Subscription Required. Please recommend JoVE to your librarian.

Representative Results

Figuur 3 toont de adem vingerafdrukken in de massale cellenbereik m/z 50-750 opgenomen onder beide standen voor de detectie van positieve en negatieve ion. 291 pieken (piek intensiteit > 5.0x104) en 173 toppen (piek intensiteit > 3.0x104) zijn waargenomen in de achtergrond-afgetrokken adem vingerafdrukken in de positieve en negatieve ion detectie modi, respectievelijk. Raadpleeg voorafgaande publicaties voor details12,18,24,29om te pieken in de massaspectra identificeren. Kortom, hebben zowel de vluchtige metabolieten en de Vos uit binnenlucht geconstateerd. Bijvoorbeeld, resultaten de piek op m/z 74.0606 (Figuur 3a) van uitgeademde N, N-dimethylformamide of aminoactone volgens de menselijke Metabolome Database (HMDB); pieken bij m/z 462.1447 en m/z 536.1638 (Figuur 3a) zijn uit de adducten van uitgeademde ammoniak en polysiloxanes (laboratorium verontreinigingen)12. De waarden van de gemiddelde massa nauwkeurigheid in positieve en negatieve ion detectie modi zijn-4.0-13.5 ppm en-20.3-1.3 ppm, respectievelijk. Figuur 4 geeft de tijd-trace van indool, een typische endogene omheind gebied, die is gedetecteerd door zes gerepliceerde metingen van uitgeademde adem uit één onderwerp. Het duurt minder dan 7 min. voor alle zes metingen.

Figure 1
Figuur 1. Schema voor sessie-MS analyse van vluchtige organische stoffen in de uitgeademde adem. Klik hier voor een grotere versie van dit cijfer.

Figure 2
Figuur 2. (a) een schematisch diagram en (b) een foto van de bron van de Sec-nanoESI gebruikt in dit experiment. Klik hier voor een grotere versie van dit cijfer.

Figure 3
Figuur 3. Achtergrond-afgetrokken adem vingerafdrukken verkregen in positieve (a) en (b) negatief ion detectie modi in de massale cellenbereik m/z 50-750. Klik hier voor een grotere versie van dit cijfer.

Figure 4
Figuur 4. Tijd trace van indool gedetecteerd door zes gerepliceerde metingen van uitgeademde adem van een onderwerp. Klik hier voor een grotere versie van dit cijfer.

Subscription Required. Please recommend JoVE to your librarian.

Discussion

Bouw van de bron van de Sec-nanoESI op basis van een commerciële nanoESI bron, is de ionisatie-efficiëntie hoger dan die van het gebruik van een ESI bron30. Bovendien, de ionisatie-efficiëntie is verbeterd in een gesloten kamer, zoals het isoleert het proces vanuit de achtergrond van de omringende lucht, en tegelijkertijd tijd vergemakkelijkt het mengen tussen het gasmonster en de pluim van de spray. Met behulp van een Sec-nanoESI, minder parameters moeten worden geoptimaliseerd in vergelijking met een bron van ESI, waardoor het makkelijker voor installatie, toepassingen en onderhoud.

Als geen signaal wordt waargenomen of gevoeligheid aanzienlijk vermindert bij het uitvoeren van adem analyse per Sec-nanoESI-MS, moet men controleren de positie van de capillaire spuittip en ook de vorming van druppels op het puntje van het capillair. Hiermee lijnt u de tip met de opening van de massa spectrometer. Omzetten in het capillair spray een nieuwe als het capillair spray is geblokkeerd of de tip is besmet. Anders, Controleer of de ITT van het instrument is geblokkeerd of besmet. Vervang of reinig de ITT indien nodig. Zet uit ESI spanning voordat het controleren van de spray capillaire. Stel de temperatuur van ITT bij kamertemperatuur en wacht totdat de temperatuur naar beneden daalt.

SESSIE-HRMS is aangetoond te worden een gevoelige en selectieve techniek voor real-time adem analyse4,6,12. In de afgelopen paar jaar, is deze techniek met succes toegepast op meten circadiane variatie3,6, toezicht farmacokinetiek7,8, identificerende stofwisselingsroutes5, enz . De laatste tijd hebben aminozuren in menselijke adem met succes gekwantificeerd door sessie-MS voor het eerst, wat opmerkelijke vooruitgang geboekt in kwantitatieve analyse5 is. Met verder onderzoek, kan de sessie-HRMS zelf vaststellen als een nuttige en efficiënte noninvasive klinische methode.

Subscription Required. Please recommend JoVE to your librarian.

Disclosures

De auteurs hebben niets te onthullen.

Acknowledgments

Dit werk is financieel ondersteund door nationale Natural Science Foundation of China (nr. 91543117).

Materials

Name Company Catalog Number Comments
Ultrapure water Merck Millipore, USA MPGP04001 Resistance >18.2 MΩ·cm
Formic acid Sigma-Aldrich, USA F0507 Corrosive to the respiratory tract.
Nitrogen gas Guangzhou Shiyuan Gas Co. Ltd., China N.A.a Purity >99.99%
Q Exactive hybrid quadrupole-orbitrap mass spectrometer Thermo Scientific, USA 02634L(S/N) Beware of high voltage and high temperature
NanoESI source Thermo Scientific, USA ES002373(S/N); ES071(P/N) Beware of high voltage and high temperature
Nano LC pump Thermo Scientific, USA 5041.0010A(P/N) /
Xcalibur software (Version 3.0) Thermo Scientific, USA BRE0008596 /
Dino-Lite Digital Microscope Tech Video System (SuZhou) Co.Ltd., China CQ401833R(S/N) /
Nafion tubing Perma Pure LLC, USA ME60 /
PTFE tubing (I.D. 4 mm) Dongguan Hongfu Insulating Material Co. Ltd., China N.A. Beware of the possible loss of polar compounds
Mass flow controller Line-Tech, Korea M15122007 (S/N) /
Flow meter Yuyao Industrial Automation Meter Factory, China 40784 /
aN.A.: not available.

DOWNLOAD MATERIALS LIST

References

  1. De Lacy Costello, B., et al. A review of the volatiles from the healthy human body. J. Breath Res. 8 (1), 014001-014030 (2014).
  2. Phillips, M., Greenberg, J. Ion-trap detection of volatile organic compounds in alveolar breath. Clin. Chem. 38 (1), 60-65 (1992).
  3. Martínez-Lozano Sinues, P., et al. Circadian variation of the human metabolome captured by real-time breath analysis. PLoS One. 9 (12), 0114422-0114438 (2014).
  4. Garcia-Gomez, D., et al. Secondary electrospray ionization coupled to high-resolution mass spectrometry reveals tryptophan pathway metabolites in exhaled human breath. Chem. Common. 52 (55), 8526-8528 (2016).
  5. Garcia-Gomez, D., et al. Real-time quantification of amino acids in the exhalome by secondary electrospray ionization-mass spectrometry: A proof-of-principle Study. Clin. Chem. 62 (9), 1230-1237 (2016).
  6. Martínez-Lozano Sinues, P., Kohler, M., Brown, S. A., Zenobia, R., Dallmann, R. Gauging circadian variation in ketamine metabolism by real-time breath analysis. Chem. Common. 53 (14), 2264-2267 (2017).
  7. Gamez, G., et al. Real-time, in vivo monitoring and pharmacokinetics of valproic acid via a novel biomarker in exhaled breath. Chem. Common. 47 (17), 4884-4886 (2011).
  8. Li, X., et al. Drug pharmacokinetics determined by real-time analysis of mouse breath. Angew. Chem. Int. Ed. 54 (27), 7815-7818 (2015).
  9. Amorim, L. L. A., Cardeal, Z. L. Breath air analysis and its use as a biomarker in biological monitoring of occupational and environmental exposure to chemical agents. J. Chromatogr. B. 853 (1-2), 1-9 (2007).
  10. Bajtarevic, A., et al. Noninvasive detection of lung cancer by analysis of exhaled breath. BMC Cancer. 9, 348 (2009).
  11. Smith, D., Wang, T. S., Pysanenko, A., Španěl, P. A selected ion flow tube mass spectrometry study of ammonia in mouth- and nose-exhaled breath and in the oral cavity. Rapid Commun. Mass Spectrom. 22 (6), 783-789 (2008).
  12. Li, X., Huang, L., Zhu, H., Zhou, Z. Direct human breath analysis by secondary nano-electrospray ionization ultrahigh resolution mass spectrometry: Importance of high mass resolution and mass accuracy. Rapid Commun. Mass Spectrom. 31 (3), 301-308 (2017).
  13. Martínez-Lozano, P., Fernandez de la Mora, J. Electrospray ionization of volatiles in breath. Int. J. Mass Spectrom. 265 (1), 68-72 (2007).
  14. Zeng, Q., et al. Detection of creatinine in exhaled breath of humans with chronic kidney disease by extractive electrospray ionization mass spectrometry. J. Breath Res. 10 (1), 016008-016015 (2016).
  15. Chen, H. W., Wortmann, A., Zhang, W. H., Zenobi, R. Rapid in vivo fingerprinting of nonvolatile compounds in breath by extractive electrospray ionization quadrupole time-of-flight mass spectrometry. Angew. Chem. Int. Ed. 46 (4), 580-583 (2007).
  16. Benoi, F. M., Davldson, W. R., Lovett, A. M., Nacson, S., Ngo, A. Breath analysis by atmospheric pressure ionization mass spectrometry. Anal. Chem. 55 (4), 805-807 (1983).
  17. Bregy, L., Martínez-Lozano Sinues, P., Nudnova, M. M., Zenobi, R. Real-time breath analysis with active capillary plasma ionization-ambient mass spectrometry. J. Breath Res. 8 (2), 027102-027110 (2014).
  18. Gaugg, M. T., et al. Expanding metabolite coverage of real-time breath analysis by coupling a universal secondary electrospray ionization source and high resolution mass spectrometry-a pilot study on tobacco smokers. J. Breath Res. 10 (1), 016010-016020 (2016).
  19. Martínez-Lozano, P., Zingaro, L., Finiguerra, A., Cristoni, S. Secondary electrospray ionization-mass spectrometry: breath study on a control group. J. Breath Res. 5 (1), 016002-016012 (2011).
  20. Martínez-Lozano Sinues, P., Zenobi, R., Kohler, M. Analysis of the exhalome a diagnostic tool of the future. Chest. 144 (3), 746-749 (2013).
  21. Martínez-Lozano Sinues, P., Fernandez de la Mora, J. Direct analysis of fatty acid vapors in breath by electrospray ionization and atmospheric pressure Ionization-Mass Spectrometry. Anal. Chem. 80 (21), 8210-8215 (2008).
  22. Martínez-Lozano Sinues, P., et al. Breath analysis in real time by mass spectrometry in chronic obstructive pulmonary disease. Respiration. 87 (4), 301-310 (2014).
  23. Martínez-Lozano Sinues, P., Kohler, M., Zenobi, R. Monitoring diurnal changes in exhaled human breath. Anal. Chem. 85 (1), 369-373 (2013).
  24. Chen, H. W., Zenobi, R. Neutral desorption sampling of biological surfaces for rapid chemical characterization by extractive electropray ionization mass spectrometry. Nat. Protoc. 3 (9), 1467-1475 (2008).
  25. Li, X., Hu, B., Ding, J., Chen, H. W. Rapid characterization of complex viscous samples at molecular levels by neutral desorption extractive electrospray ionization mass spectrometry. Nat. Protoc. 7 (6), 1010-1025 (2011).
  26. Gordon, S. M., Szidon, J. P., Krotoszynski, B. K., Gibbons, R. D., O'Neill, H. J. Volatile organic compounds in exhaled air from patients with lung cancer. Clin. Chem. 31 (8), 1278-1282 (1985).
  27. Ding, J. H., et al. Development of extractive electrospray ionization ion trap mass spectrometry in vivo breath analysis. Analyst. 134 (10), 2040-2050 (2009).
  28. Basum, G., Dahnke, H., Halmer, D., Hering, P., Mürtz, M. Online recording of ethane trances in human breath via infrared laser spectroscopy. J. Appl. Physiol. 95 (6), 2583-2590 (2003).
  29. Tøien, Ø Automated open flow respirometry in continuous and long-term measurements: design and principles. J. Appl. Physiol. 114 (8), 1094-1107 (2013).
  30. Huang, L., Li, X., Xu, M., Huang, Z. X., Zhou, Z. Identification of relatively high molecular weight compounds in human breath using secondary nano electrospray ionization ultrahigh resolution mass spectrometry. Chem. J. Chinese U. 38 (5), 752-757 (2017).

Tags

Chemie kwestie 133 vluchtige organische stoffen adem analyse secundaire nanoelectrospray ionisatie hoge resolutie massa spectrometrie real-time
Real-time adem analyse met behulp van secundaire Nanoelectrospray ionisatie gekoppeld aan massaspectrometrie voor hoge resolutie
Play Video
PDF DOI DOWNLOAD MATERIALS LIST

Cite this Article

Li, X., Huang, D. D., Du, R., Zhang, More

Li, X., Huang, D. D., Du, R., Zhang, Z. J., Chan, C. K., Huang, Z. X., Zhou, Z. Real-time Breath Analysis by Using Secondary Nanoelectrospray Ionization Coupled to High Resolution Mass Spectrometry. J. Vis. Exp. (133), e56465, doi:10.3791/56465 (2018).

Less
Copy Citation Download Citation Reprints and Permissions
View Video

Get cutting-edge science videos from JoVE sent straight to your inbox every month.

Waiting X
Simple Hit Counter