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Medicine

Une thérapie régénératrice par autogreffe de cellules Suprachoroidal à sec Age-related Macular Degeneration : préliminaire In Vivo rapport

doi: 10.3791/56469 Published: February 12, 2018

Summary

L’objectif de cette étude est d’évaluer si la greffe de suprachoroidal des cellules souches dérivées d’adipeux inclus dans la fraction stroma vasculaire et plaquettes dérivés du plasma riche en plaquettes par la Technique de restauration Leblond rétinienne peut améliorer l’acuité visuelle et réponses de sensibilité rétinienne chez les yeux affectés par la dégénérescence maculaire sèche liée à l’âge.

Abstract

Cette étude vise à examiner si une greffe de suprachoroidal de cellules autologues peut améliorer mieux l’acuité visuelle corrigée (MAvC) et réponses aux microperimetry (MY) yeux affectés par sécher la dégénérescence maculaire liée à l’âge (DMLA) au fil du temps grâce à la la production et la sécrétion de facteurs de croissance (GFs) sur les tissus environnants. Les patients ont été assignés au hasard à chaque groupe d’étude. Tous les patients ont été diagnostiqués avec la DMLA sèche et MAVC égale ou supérieure à 1 logarithme de l’angle minimal de résolution (logMAR). Une greffe autologue de suprachoroidal par Leblond rétinienne restauration Technique (LRRT) a été réalisée sur un groupe, qui comprenait 11 eyes de 11 patients. La technique a été réalisée par l’implantation des adipocytes, les cellules souches dérivées d’adipeux obtenus au stroma vasculaire fraction et de plaquettes, de plasma riche en plaquettes dans l’espace suprachoroidal. À l’inverse, groupe B, y compris les 14 yeux 14 patients, a été utilisé comme un groupe de contrôle. Pour chaque patient, diagnostic a été vérifiée par l’ophtalmoscope de laser scanning confocal et tomographie en cohérence optique domaine spectral (SD-OCT). Groupe a, MAVC améliorée par 0.581 à 0,504 à 90 jours et à 0.376 logMAR à 180 jours (+32.20 %) après l’opération. En outre, mon test augmenté de 11,44 dB à 12,59 dB à 180 jours. Les différents types de cellules greffées derrière la choroïde ont été en mesure d’assurer la sécrétion GF constante dans la circulation choroïdienne. Par conséquent, les résultats indiquent que l’acuité visuelle (VA) dans le groupe greffé peut augmenter plus que dans le groupe témoin après six mois.

Introduction

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Thérapie cellulaire, consistant en l’injection systémique ou locale des souches/progénitrices dans la zone lésée pour traiter des troubles chroniques multiples, a attiré une grande attention dans la dernière décennie1. Depuis les années 1990, les facteurs de croissance (GFs) ont été étudiés pour leur rôle potentiellement thérapeutique à l’atrophie de la rétine2. En fait, beaucoup de cellules humaines peuvent produire des GFs, qui sont des protéines spécifiques qui sont en mesure de bloquer ou ralentir l’apoptose, c'est-à-dire, la mort programmée de cellules3.

On sait que sec dégénérescence maculaire liée à l’âge (DMLA) est une maladie de la rétine atrophique où la mort cellulaire progressive et irréversible implique un dommage à la couche des photorécepteurs et, par conséquent, la perte de la fonction visuelle centrale4. La DMLA est la principale cause de cécité chez les plus de 55 ans dans les pays développés et représente 80 % de toutes les dégénérescences maculaires, qui n’ont pas un traitement efficace à ce jour.

Plusieurs études ont montré qu’il existe diverses sources d'où peuvent provenir les GFs autologues. Elles composent de différents types de cellules, y compris les cellules stromales adipeuses dérivés de graisse orbitale, des plaquettes provenant de plasma riche en plaquettes (PRP) et adipeux dérivées des cellules souches (ADSCs) inclus dans la fraction stroma vasculaire (SVF) du tissu adipeux5 ,6,7. L’ensemble actuel de GF assure neuroenhancement rétinienne et les recherches menées par Filatov, Montana, Pelaez et Leblond a démontré que l’autogreffe de graisse (AFT) est efficace8,9,10.

Par ailleurs, une étude antérieure a montré des améliorations significatives dans les données de l’électrorétinogramme (ERG), enregistré post greffe autologue de suprachoroidal, dans les yeux secs touchés par AMD11. Le tissu greffé chirurgicalement dans l’espace suprachoroidal modulé la sécrétion paracrine des cellules rétiniennes, retardant leur apoptose6,7,12. Compte tenu de l’épaisseur de la couche nucléaire externe, l’examen histologique de la rétine des cochons d’Inde a montré que GFs pourraient avoir un effet trophique sur la rétine. Par conséquent, l’utilisation directe ou indirecte de GFs peut apporter potentiellement des bienfaits thérapeutiques grâce à une relation équilibrée entre moléculaires inducteurs et inhibiteurs6,7,12.

Le but de cette méthode est d’évaluer si le greffon suprachoroidal des adipocytes, ADSCs de SVF et PRP peut améliorer mieux corrigé l’acuité visuelle (MAvC) et microperimetry (MY) réponses chez AMD touchés par la sécheresse des yeux. Cette étude vise à démontrer l’effet thérapeutique de l’autogreffe, sur la base de sa production de GF, selon la littérature citée6,7,12,13.

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Protocol

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Le protocole de l’étude a été approuvé par le Comité d’éthique de l’Académie de Vision faible et tous les sujets ont signé un consentement écrit conformément à la déclaration d’Helsinki. Cette étude a reçu l’approbation éthique de Loughborough et universités de Sheffield.

Remarque : Les critères d’inclusion et d’exclusion des patients sèche de la dégénérescence maculaire liée à l’âge de recevoir suprachoroidal greffe autologue de Leblond rétinienne restauration Technique (LRRT) est décrit dans le tableau 1.

1. le diagnostic des Patients sec Age-related Macular Degeneration

  1. Établir le diagnostic avec l’ophtalmoscope de laser scanning confocal, SD-OCT et MY.
  2. Évaluer MAVC chaque groupe de loin et de près de distance. Mesure VA pour la vision de près (gros plan) en points (Pts). Mesurer la MAVC au temps 0 (T0), 90 (T90), et 180 jours (T180) par rapport aux premières études de la rétinopathie diabétique traitement graphiques (EDTRS) à 4 mètres en logMAR.
  3. Record mésopique scotopique, électrique et l’activité des cellules photopique ou ERG flash, conformément aux normes établies en 2009 par la société internationale d’électrophysiologie clinique de la Vision (ISCEV)11.

2. anesthetization

Remarque : L’étalon-or en anesthésie au cours de la LRRT est anesthésie topique, renforcée par l’infiltration de sub-tenon d’anesthésie et de sédation. Dans certains cas, l’anesthésie générale est préférable.

  1. Obtenir cornée et conjonctive anesthésie en appliquant les anesthésiques topiques locaux instillée goutte à goutte 15-20 min avant la chirurgie avec lidocaïne à 4 % et de ropivacaïne à 1 %.
  2. Injecter l’anesthésie par infiltration directement en sub-conjonctivale et espaces de subtenon.
  3. Utilisez une infiltration locale dans la région abdominale, avant que le tissu adipeux est extraite, tant dans le sub-conjonctivale et des espaces de sub-tenon, 12 mm à partir du limbe. Adopter un anesthésique local de carbocaïne ou marcain mélangé avec 1 200 IU épinéphrine.
  4. Fournir peropératoire sédation par le biais de l’anesthésie, qui peut être effectuée correctement à l’aide de fentanyl comme un analgésique narcotique par boli petit répétée. La posologie est généralement de 0,025 mg de fentanyl avec 1 mg de midazolam par bolus.

3. Leblond rétinienne restauration Technique préparation

NOTE : Cette technique représente une variante de l’intervention de Pelaez par lequel orbitale graisse autologue est transplantée dans le subscleral espace1,6,7,12. Cellules greffées chirurgicalement peuvent produire de nombreux GFs avec propriétés neurotrophiques et angiotrophic dans le tissus environnants, la choroïde et la rétine18,19,20,21,22 ,23,24,25. Par LRRT, la distance entre les cellules autologues greffées et choroïde est réduite au moyen de la sclérectomie profonde, et la zone de contact entre la tige et la choroïde est développée pour favoriser la sécrétion de cellules autologues paracrine dans la circulation choroïdienne9, 10,14.

  1. Effectuer une désinfection appropriée de chaque œil avant la chirurgie avec greffe cellulaire entre la choroïde et la sclérotique, une procédure appelée Technique de restauration pour le rétinal Leblond (LRRT)15,16,17.
  2. Greffer les ADSCs, obtenus par Coleman et al. et une technique de Lawrence (Figure 1) de la graisse abdominale, dans le SVF dans le sovrachoroidal espace15,16,17.
  3. Infiltration adipeuse pédicule avec plaquettes dérivées de PRP gel obtenue par les étapes suivantes.
  4. Centrifuger le sang6,12 et recueillir le plasma riche en plaquettes (PRP). Le stimulus à la dégranulation des plaquettes provoque GF libération dans le tissu adipeux pédicule6,12.

4. spécifications techniques et la stratégie

Remarque : Le tissu adipeux est recueilli et purifié à partir de la couche sous-cutanée abdominale des patients, selon le Lawrence et Coleman technique17(Table des matières).

  1. Récolte 10 mL de tissu graisseux de la couche sous-cutanée abdominale de chaque patient, en utilisant une canule émoussée 3 mm connecté manuellement une verrouillage seringue, selon le Lawrence et Coleman technique17 (Figures 2 a/2 b).
  2. Séparer le SVF pure du tissu graisseux de sang, graisse, huile et liquide par centrifugation pendant 5 min à 1 500 g à 20 ° C (Figure 2C). Le SVF est très riche en ADSCs17.
  3. Recueillir 8 mL de sang périphérique humain avec une aiguille de 22 G et dans une éprouvette pour préparation de PRP.
  4. Centrifuger le sang collecté pendant 5 min à 1 500 g à 20 ° C (Figure 2D). Dans LRRT, le résultat de changements qui ont suivi dans une survie de la greffe de graisse autologue, prolifération ADSC, qui favorise une perfusion choroïdienne accrue, et une modulation plus globale de l’action de ces facteurs qui sont sécrétées qu’en matières grasses7, 11,17.
  5. Construire la poche suprachoroidal (plus de détails à l’étape 4, en particulier 4.4 et 4.5) pour accueillir la greffe provenant de graisse orbitale et saturer le volume résiduel de cette poche avec un mélange de ADSCs de SVF et PRP, obtenu selon le Lawrence et Technique de Coleman17.

5. Suprachoroidal autogreffe de LRRT (Technique de restauration Leblond rétinienne) : intervention chirurgicale et détails techniques

  1. La sclérotique avec suture de soie de 6-0, près du limbe inférieure-temporelle de l’ancre.
  2. Ouvrir l’espace sous-conjonctivale et subtenonian à 11 mm de la limbe inférieure-temporelle, à l’aide de 5.5" Westcott Tenetomy ciseaux courbés.
  3. Insérer le rétracteur conjonctival Leblond-Basile dans cet espace pour faire un champ opératoire scléral.
  4. À l’aide d’un biseau angle 5 mm couteau croissant vers le haut, Prédécoupez un rabat sur le côté dans la sclérotique à 8 mm, à partir du limbe. La charnière de Rabat est toujours radiales et vers la gauche du chirurgien.
  5. Dans le quadrant inférieur-temporelle, à 8 mm du limbe, ouvrir une porte sclérale profond d’environ 5 mm sur le côté de charnière radiale à l’aide d’un couteau du Croissant-Rouge, l’angle en biseau vers le haut. Réaliser la sclérectomie à une profondeur suffisante pour afficher la couleur ardoise de la choroïde.
  6. Créer un espace en enlevant un petit opercule dans la partie distale de la poitrine, afin de faciliter la circulation sanguine dans l’autogreffe suprachoroidal ultérieure.
  7. Extraire avec une pince ophtalmologique la graisse orbitale d’un écart au-dessus du muscle oblique inférieur. Veillez à ce que la matière grasse extraite est suffisamment vascularisée pour lui permettre de survivre après son implantation.
  8. Placez délicatement le rabat graisse autologue sur les hôtes choroïdienne suture avec choroïdienne fibre de polyglactin 6/0 au bord proximal de la porte.
  9. Suture le rabat scléral pour éviter la compression sur le pédicule fat ou sur ses navires en éléments nutritifs.
  10. S’infiltrer dans le stroma du pédicule gras avec 1 mL de gel PRP (obtenu par centrifugation de la matière de sang, la séparation de la composante et plaquettes dégranulation26) à l’aide d’une canule d’angle (30 °) de 30 G.
  11. Préparer les côtés de la conjonctive à la suture. Ensuite, retirez le rétracteur conjonctival.
  12. Suture de la conjonctive, à l’aide de fibre de polyglactin 6/0.
  13. Avant de terminer, laisser un espace pour insérer dans l’espace de subscleral, entre le clapet, la choroïde et l’autogreffe choroïdienne, un petit tube de plastique flexible avec la greffe de graisse autologue.
  14. Saturer l’espace de survie entre la greffe de graisse autologue, choroïde et rabats sclérales avec 0,5 cc de SVF (riche de ADSCs), préalablement préparé à l’étape 3.2, par un petit tube de plastique souple, insérée dans le renfoncement scléral.
  15. Après saturant l’espace résiduel, fermer la suture.
  16. Après la chirurgie, administrer trois jours de traitement antibiotique azithromycine 500 mg. En outre, fournir collyre thérapie avec une combinaison aux antibiotiques et de stéroïdes, comme le chloramphénicol et la bétaméthasone, pour environ 15-20 jours.
    Remarque : Une autogreffe constitué de cellules adipeuses, ADSCs de SVF et PRP a maintenant obtenu26. Réduire la distance entre les greffes de cellules autologues et de la choroïde par sclérectomie profonde afin de stimuler la sécrétion paracrine de cellules autologues dans la circulation choroïdienne. Dans le même but, étendre la zone de contact entre la tige et la choroïde.

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Representative Results

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À l’aide de la procédure présentée ici, deux groupes de secs patients touchés par AMD, avec MAVC égale ou supérieure à 1 logarithme de l’angle minimal de résolution (logMAR), ont participé à l’étude. Groupe A, dont les 11 yeux de 11 patients, greffe autologue suprachoroidal reçus par Leblond rétinienne restauration Technique (LRRT), alors que le groupe B, y compris les 14 yeux 14 patients, a été utilisé comme un groupe de contrôle.

Test t de Student et le test de chi carré ont été utilisés pour comparer, respectivement, moyenne distribution âge et le sexe entre les deux groupes (tableau 2). Des analyses statistiques et visualisation de données ont été effectuées avant et après la chirurgie LRRT.

Un test de Mann-Whitney-Wilcoxon signé a été réalisée afin de déterminer si les différences avant et après le traitement sont significatives. Ce test d’hypothèse statistique non paramétrique a été appliqué pour comparer deux échantillons dépendants lorsque la population ne peut pas être censée être normalement distribué, comme en l’espèce. VA valeurs ont été mesurées à chaque étape de l’analyse. Signification statistique a été fixée à une valeur de p <0,05.

11 eyes (yeux gauche droite et 5 6) de 11 patients (7 garçons et 4 filles) avec le diagnostic clinique de la DMLA sèche ont été examinées dans cette étude. Âge du patient varie de 62 à 84 ans, avec un âge moyen de 71,5 ans (SD ± 3,8).

Le tableau 2 donne un aperçu des profils cliniques des patients traités par LRRT et les valeurs moyennes enregistrées à 0 (T0), 90 (T90) et 180 (T180) jours après la chirurgie. Les effets indésirables auraient toujours garantir une sécurité maximale. Les valeurs moyennes de la pression intraoculaire enregistrement à 0 (T0), 90 (T90) et 180 jours (T180) après que chirurgie n’enregistrait pas de changement significatif.

Résultat après la chirurgie LRRT est comme suit :
Groupe a, MAVC passée 0.581 (T0) préopératoire à 0,504 à 90 jours (T90) et à 0.376 logMAR à 180 jours (T180) avec une augmentation significative de 35,20 % (p < 0,01). Dans le contrôle du groupe B, y compris les 14 yeux de 14 patients, 7 mâles et 7 femelles, avec un âge moyen de 80,4 ans au Canada, SD ± 2,3, MAVC passée sous 0.573 (T0) à 0,587 (T90) et à logMAR 0.601 (T180) avec une moyenne non significative diminution de 4,72 % (tableau 2) (Figure 3 ). Groupe a, mon test a augmenté significativement de 11,44 dB (T0) à 12,59 dB (T180) (+9.58 %) (Figure 4), alors qu’il n’y avait aucune amélioration significative des valeurs postopératoires dans le groupe B.

Figure 1
Figure 1 : Représentation de greffe autologue suprachoroidal. Facteurs de croissance (GFs) produites par les cellules adipeuses, plasma riche en plaquettes (PRP), et adipeux dérivées de cellules souches (ADSCs) atteignent les tissus choroïdes et la rétiniens par l’épithélium pigmentaire rétinien (RPE). S’il vous plaît cliquez ici pour visionner une version agrandie de cette figure.

Figure 2
Figure 2 : Procédure technique. Canule et retrait du tissu adipeux de la région abdominale (groupe A). La canule déplace la graisse sous-cutanée avec une légère aspiration en aspirant les cellules graisseuses dans sa propre lumière (groupe B). Après centrifugation, il y a trois couches de tissu adipeux : huile (niveau élevé), la graisse homogène (couche intermédiaire) et sang liquide (couche inférieure) (groupe C). Observer le tube de sang immédiatement après centrifugation. Il y a trois couches : plaquettes plasma pauvre (PPP), plasma riche plaquettes (PRP) et les érythrocytes (groupe D). S’il vous plaît cliquez ici pour visionner une version agrandie de cette figure.

Figure 3
Figure 3 : Best corrigé l’acuité visuelle (MAvC) à sec dégénérescence maculaire liée à l’âge (DMLA). Changer de groupe a après greffe autologue suprachoroidal par Leblond rétinienne restauration Technique (LRRT) et dans le groupe de contrôle (Check), mesurée au temps 0 (T0), 90 (T90) et 180 (T180) jours. S’il vous plaît cliquez ici pour visionner une version agrandie de cette figure.

Figure 4
Figure 4 : Microperimetry (MY) chez un patient du groupe A. Sécher la dégénérescence maculaire liée à l’âge (DMLA) six mois après la rétine de Leblond restauration Technique (LRRT). MON augmentation de 11,44 dB (T0) à 12,59 dB (T180) (+9.58 %). Couleur échelle de 0 à 36 dB. Stabilité de la fixation : stable, relativement instable, instable. S’il vous plaît cliquez ici pour visionner une version agrandie de cette figure.

Critères d’inclusion Critères d’exclusion
Sujets Caucasiens Erreurs de réfraction avec équivalent sphérique > 6D
Participants bien nourris Signes de la DMLA exsudative par SD-OCT et FA
Diagnostic par SD-OCT, AFI et FA Troubles oculaires : CT, GL, ON, MP, VM, CRD, etc..
Mesurable VA Traumatismes oculaires
MAVC ≥ 1 logMAR Maladies systémiques : MS ; PD ; GMX RD ; KDX Vascularite
Pio normale L’hypertension, le cancer et autres maladies systémiques
Bon rangements extrafoveal
LogMAR : logarithme de l’angle minimal de résolution ; SD-OCT : tomographie par cohérence optique domaine spectral ; AFI : imagerie d’autofluorescence ; FA : angiographie à la fluorescéine ; VA : l’acuité visuelle ; IOP : la pression intraoculaire ; D: dioptries ; CT : cataracte ; GL : glaucome ; ON : névrite optique ; MP : pucker maculaire ; VM : les membranes néovasculaire ; CRD : maladie Chorio-rétinienne ; MS : sclérose en plaques ; PD : La maladie de Parkinson ; DM : diabète sucré ; RD : maladies rénales ; HD : maladies hépatiques.

Tableau 1 : Critères d’Inclusion et d’exclusion pour les patients sec dégénérescence maculaire liée à l’âge (DMLA).

PARAMÈTRES LRRT (n = 11) Contrôle (n = 14)
Âge (moyenne) ±3.8SD 71,5 ±2.3SD 80,4
Âge (gamme) 62 - 84 73 - 79
Sexe F: 4 M:7 F:7 M:7
MAVC T0 logMAR 0.581 0.573 logMAR
(moyenne)
MAVC T0 (gamme) 0,301 - 1.0 0.0 - 1.0
MAVC T90 (moyenne) logMAR 0.504 0.587 logMAR
MAVC T90 (gamme) 0.222 - 1 0,0 - 1
MAVC T180 (moyenne) 0.376 logMAR logMAR 0.601
MAVC T180 (gamme) 0,046 - 0,699 0.0 - 1.0
Pourcentage 35,19 4.72
changer
valeur p < 0,01 > 0,5
Selon l’âge en années ; n = patients et témoins ; SD = écart-type ; F = femelle ; M = mâle ; MAVC = mieux l’acuité visuelle corrigée en logMAR ; T0 = départ avant autogreffe de chirurgie ; T90 = 90 jours post chirurgicale autogreffe ; T180 = 180 jours post chirurgicale autogreffe.

Tableau 2 : profils cliniques des patients examinés dans l’étude de. Moyenne des valeurs enregistrées avant (T0), 90 (T90) et 180 jours (T180) après autogreffe de cellule de la rétine de Leblond restauration Technique (LRRT) chez tous les patients.

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Discussion

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L’objectif principal de cette étude était d’évaluer si le greffon suprachoroidal des adipocytes, ADSCs de SVF et PRP pourrait améliorer la sensibilité rétinienne en AMD touchés par la sécheresse des yeux et VA au fil du temps. Un autre visait principalement à démontrer les effets thérapeutiques possibles de ces cellules, selon la littérature récente, puisque plusieurs études précliniques ont suggéré que la thérapie axée sur la GF pourrait être utile pour les soins aux patients dans plusieurs maladies.

En fait, certaines études ont montré que les cellules souches pluripotentes induites autologue (iPSC) pourrait représenter une source cellulaire pour la greffe, vise à la régénération (pre) de l’épithélium pigmentaire rétinien en thérapie de remplacement de tissus pour AMD18, 19. ces feuilles de cellule sont générés comme une monocouche qui pourrait exprimer des marqueurs typiques de RPE et pièce polarisée GF sécrétion, capacité de phagocytose montrant, ainsi que des modèles d’expression génique semblables à ceux des natifs RPE18,19 . Lors de la transplantation, feuilles de cellules autologues primate non humain iPSC-RPE ont montré ni abri rejet ni tumeur formation18,19.

Cette étude présente des caractéristiques différentes. Nous avons analysé directement dans la sécheresse des yeux humains touchés par AMD, si la cellule d’autogreffe suprachoroidal peut améliorer les performances visuelles.

En outre, sovrachoroidal greffe de cellules autologues selon LRRT a toujours prouvé pour être sûr. Nous n’avons jamais enregistré une néovascularisation rétinienne Sub, œdème maculaire, décollement de la rétine, ou autres problèmes rétiniens dans la première année post intervention. En revanche, interventions chirurgicales inappropriées peuvent conduire théoriquement à la perforation de la choroïde avec saignement ultérieur, mais dans nos recherches, aucun œil a été endommagé. Cependant, il est possible d’avoir une hémorragie sub-conjonctive qui est normalement réabsorbée dans les prochains jours et ne présente pas de nouveau comme une complication.

Des études récentes ont fourni suffisamment de preuves d’une augmentation significative des valeurs ERG scotopiques, MAVC et MY, 90 et 180 jours post greffe autologue. Cependant, l’augmentation est plus importante si la moyenne épaisseur rétinienne (RTA) enregistrée par SD-OCT était supérieur de11,26. On croit que les cellules greffées chirurgicalement peuvent produire des GFs dans le tissu environnant, choroïde et la rétine, et qu’ils ont des propriétés neurotrophiques et angiotrophic, comme facteur de croissance basique des fibroblastes (bFGF), facteur de croissance endothélial vasculaire (VEGF) , facteur dérivé de l’épithélium-pigment (PEDF), interleukine (IL), and macrophage colony-stimulating factor (M-CSF), facteur de stimulation des colonies de granulocytes et macrophages (GM-CSF) et le facteur de croissance placentaire (PlGF), alors que les plaquettes produisent dérivé des plaquettes grandissent facteur d’angiogenèse Factor (PDGF), dérivé des plaquettes (PDAF), etc.6,7,12,13,21

Placement du greffon près de la choroïde est censé permettre le GFs produit d’entrer dans la circulation choroïdienne, pour atteindre la cellule endothéliale de cellules de récepteurs, RPE, Muller, photorécepteurs et enfin d’interagir avec eux. Dans LRRT, les éléments de greffes autologues sont utiles, chacun à leur manière, pour la régénération. Les cellules graisseuses produisent bFGF, facteur de croissance épidermique (EGF), facteur de croissance 1 analogue à l’insuline (IGF-1), IL, transformant β de facteur de croissance (TGF-β), PEDF et adiponectine21. Les ADSCs produisent bFGF, VEGF, M-CSF, GM-CSF, PlGF, TGF-β, facteur de croissance des hépatocytes (HGF), IGF-1, IL et angiogenin6,7. Les plaquettes produisent PDGF, IGF-1, TGF-β, VEGF, bFGF, EGF, PDAF et thrombospondine (TSP)6,12.

Certains facteurs de favoriser la régénération de l’endothélium, et certains stimulent la prolifération de l’ADSC, favorisant ainsi les graisse autologue et survie de l’adipocyte, alors que d’autres inhibent néovasculaire processus22,23,24. PEDF et bFGF favorisent la survie de photorécepteur, tandis que EGF exerce son action sur les cellules de Müller en déclenchant la transcription bFGF endogène et en stimulant les ADSCs afin d’augmenter leur activité sécrétoire25,27. GFs sont normalement sécrétées par RPE, cela ne survient pas dans maculopathie atrophique par suite de la RPE/choriocapillaire complexes. La sécrétion par les cellules du greffon Paracrine GF contribue à favorisant les photorécepteurs et choriocapillaire survie28. En outre, M-CSF, GM-CSF et IL ont des effets anti-inflammatoires et chimiotactiques sur les macrophages, qui sont impliqués dans l’élimination des débris de remaniements cellulaires, une fonction qui est physiologiquement réalisée par RPE29,30.

Les types de cellules greffées derrière la choroïde peuvent assurer la sécrétion GF constante dans la circulation choroïdienne. GFs peuvent arriver de la choroïde pour les cellules de la rétine, interagir avec leurs récepteurs membranaires et enfin activer une voie intracellulaire. Les données présentées suggèrent que LRRT peut augmenter la perfusion choroïdienne et trophisme photorécepteurs non seulement par le biais des interactions de protéine-récepteur, mais aussi grâce à la stimulation de cellules Müller, RPE et des photorécepteurs rétiniens. En conséquence, modifications de l’expression génique et l’effet final antiapoptotiques pourraient expliquer le neuroenhancement. Ce mécanisme cellulaire repose sur la capacité d’augmenter les performances visuelles, comme le souligne les résultats cliniques dans le groupe greffé. En résumé, LRRT pourrait être utile pour préserver la fonction visuelle de secs patients touchés par AMD à long terme.

Toutefois, comme nous l’avons démontré dans des études antérieures, les ERG cone-rod et tige ERG montrent une corrélation significative avec la RTA, d’alors que ce n’est pas le cas du cône ERG. Cela peut s’expliquer par le fait que la fonction fovéa semble être compromise, même si les volumes maculaires dans la DMLA sèche continue d’être régulier, au moins dans les premières étapes26. Dans cette pathologie, trophisme rétinien résiduel, mesuré par RTA peut être un critère pronostique pour le traitement de LRRT, étant donné les meilleurs résultats sont plus fréquentes chez les patients avec RTA égale ou supérieure à 250 µm26. Neuroenhancement, dont l’étendue est proportionnelle à la présence de zones avec une plus grande de la cellularité, telles qu’enregistrées par l’activité électrique26pourrait entraîner l’ensemble GF disponibles. À un stade ultérieur, la cellularité tissus pauvres ne donnerait pas l’effet thérapeutique est recherchée avec la procédure, en raison des interactions récepteurs GF-membrane rares.

Les prochaines étapes de cette recherche nécessitera le recrutement d’un plus grand nombre de sujets avec une plus grande VA et fixation centrale par évaluer statistiquement tous les tests indispensables nécessaires pour confirmer que la technique est valide et d’étudier les effets biochimiques. On peut affirmer que l’augmentation du trophisme cellulaire se reflète dans l’activité visuelle cellulaire, mesurée objectivement par l’ERG, MAVC et mon11. Traitement à base de GF pourrait fournir un traitement sélectif, à jour, sécuritaire et raisonnable dans les maladies ophtalmiques.

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Disclosures

Présenté à ARVO 2015, du 3 au 7 mai-Denver, Colorado - USA.

Acknowledgments

Les auteurs n’ont aucun remerciements.

Materials

Name Company Catalog Number Comments
Blunt cannula, 3 mm.  Mentor, Santa Barbara, CA.
Luer-LokTM syringe.  BD Biosciences, Franklin Lakes, NJ.
Regen-BCT tube.  RegenKit; RegenLab, Le Mont-sur-Lausanne, CH.
Centrifuge  RegenPRP Centri. RegenLab, Le Mont-sur-Lausanne, CH.
BD Venflon Pro Safety 22G x 1.00 inch (0.9 mm x 25 mm).  BD Biosciences, Franklin Lakes, NJ.
SPSS Statistics Version 19.0 IBM Corp., Armonk, NY, USA.
Confocal scanning laser ophthalmoscope  Nidek Inc, Fremont, CA Nidek F10 
Cirrus 5000 Spectral Domain-Optical Coherence Tomography Carl Zeiss Meditec AG, Jena, Germany  SD-OCT 
Maia 100809 Microperimetry  CenterVue S.p.A., Padua, Italy
Ocular electrophysiology electromedical system, C.S.O., S.r.l., Scandicci, Italy  Retimax for ERG 

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Une thérapie régénératrice par autogreffe de cellules Suprachoroidal à sec Age-related Macular Degeneration : préliminaire <em>In Vivo</em> rapport
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Limoli, P. G., Vingolo, E. M., Limoli, C., Scalinci, S. Z., Nebbioso, M. Regenerative Therapy by Suprachoroidal Cell Autograft in Dry Age-related Macular Degeneration: Preliminary In Vivo Report. J. Vis. Exp. (132), e56469, doi:10.3791/56469 (2018).More

Limoli, P. G., Vingolo, E. M., Limoli, C., Scalinci, S. Z., Nebbioso, M. Regenerative Therapy by Suprachoroidal Cell Autograft in Dry Age-related Macular Degeneration: Preliminary In Vivo Report. J. Vis. Exp. (132), e56469, doi:10.3791/56469 (2018).

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