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Medicine

Terapia regenerativa pela célula Suprachoroidal Autograft em seco Degeneration Macular Age-related: relatório preliminar na Vivo

doi: 10.3791/56469 Published: February 12, 2018

Summary

O objetivo deste estudo é avaliar se o enxerto de suprachoroidal de células-tronco derivadas adiposo incluídas na fração do estroma vascular e plaquetas derivadas de plasma rico em plaquetas através da técnica de restauração Limoli Retinal pode melhorar a acuidade visual e respostas de sensibilidade da retina nos olhos afetados pela seca degeneration macular age-related.

Abstract

Este estudo visa examinar se um enxerto de suprachoroidal das células autólogas pode melhorar melhor acuidade visual corrigida (BCVA) e respostas para microperimetry (MY) nos olhos afetados pela seca Degeneração Macular relacionada à idade (DMRI) ao longo do tempo através do produção e secreção de fatores de crescimento (GFs) no tecido circundante. Os pacientes foram aleatoriamente para cada grupo de estudo. Todos os pacientes foram diagnosticados com DMRI seca e com BCVA igual ou maior que 1 logaritmo do ângulo mínimo de resolução (logMAR). Um enxerto autólogo de suprachoroidal por Limoli Retinal restauração técnica (LRRT) foi realizado no grupo A, que incluiu 11 olhos de 11 pacientes. A técnica foi realizada pela implantação de adipócitos, células-tronco adiposo-derivados obtidos a partir da fração vascular do estroma e plaquetas de plasma rico em plaquetas no espaço suprachoroidal. Por outro lado, grupo B, incluindo 14 olhos de 14 pacientes, utilizou-se como um grupo de controle. Para cada paciente, o diagnóstico foi verificado por oftalmoscópio de laser confocal digitalização e tomografia de coerência óptica-domínio espectral (SD-OCT). No grupo A, BCVA melhorado por 0.581 para 0.504 em 90 dias e a 0.376 logm em 180 dias (+32.20%) no pós-operatório. Além disso, o meu teste aumentou 11,44 dB dB 12,59 em 180 dias. Os diferentes tipos de células enxertados para trás a coroide foram capazes de assegurar a constante secreção de GF no fluxo da coroide. Consequentemente, os resultados indicam que a acuidade visual (VA) no grupo transplantado pode aumentar mais do que no grupo controle após seis meses.

Introduction

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Terapia celular, que consiste da injeção de células tronco/progenitoras na área lesada para tratar várias doenças crônicas, sistêmica ou local atraiu muita atenção na última década1. Desde a década de 1990, fatores de crescimento (GFs) têm sido estudados por seu papel potencial terapêutico na atrofia da retina2. Na verdade, muitas células de origem humanas podem produzir GFs, que são proteínas específicas que são capazes de bloquear ou retardar a apoptose, ou seja, a morte programada de células3.

É conhecido que o degeneration macular age-related seco (AMD) é uma doença da retina atrófica, onde a morte celular gradual e irreversível envolve prejuízo para a camada de fotoreceptor e, consequentemente, a perda da função visual central4. AMD é a principal causa de cegueira em pessoas de mais de 55 anos de idade em países desenvolvidos e responsável por 80% de todos os degenerations maculares, que carecem de um tratamento eficaz até à data.

Vários estudos têm demonstrado que existem várias fontes das quais autólogos GFs podem ser obtidas. Estas incluem diferentes tipos de células, incluindo células do estroma adiposas derivadas de gordura orbital, plaquetas derivadas de plasma rico em plaquetas (PRP) e derivados adiposo as células-tronco (ADSCs) incluídas na fração do estroma vascular (SVF) do tecido adiposo5 ,6,7. O atual conjunto GF garante neuroenhancement da retina e a investigação conduzida por Filatov, Meduri, Pelaez, e Limoli tem demonstrado que o transplante de gordura autóloga (popa) é eficaz8,9,10.

Além disso, um estudo prévio mostrou melhorias significativas nos dados electroretinogram (ERG), gravado post suprachoroidal enxerto autólogo, em olhos secos afetadas AMD11. O tecido enxertado cirurgicamente no espaço suprachoroidal modulada a secreção parácrina de células da retina, atrasando sua apoptose6,7,12. Tendo em conta a espessura da camada nuclear exterior, o exame histológico da retina de cobaias mostrou que o GFs poderiam ter um efeito trófico sobre a retina. Portanto, a utilização directa ou indirecta de GFs potencialmente pode trazer benefícios terapêuticos através de uma relação equilibrada entre moleculares indutores e inibidores6,7,12.

A finalidade desse método é avaliar se o enxerto de suprachoroidal dos adipócitos, ADSCs em SVF e PRP pode melhorar melhor corrigida a acuidade visual (BCVA) e microperimetry (MY) respostas nos olhos afetados AMD secos. Este estudo tem como objetivo demonstrar o efeito terapêutico do auto-enxerto com base na sua produção de GF, de acordo com a literatura citada6,7,12,13.

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Protocol

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O protocolo de estudo foi aprovado pelo Comitê de ética da Academia de baixa visão e todos os sujeitos assinaram um consentimento por escrito em conformidade com a declaração de Helsínquia. Este estudo de investigação recebeu aprovação ética de Loughborough e universidades de Sheffield.

Nota: Os critérios de inclusão e exclusão de pacientes de degeneration macular age-related seca para receber o enxerto autólogo de suprachoroidal por Limoli Retinal restauração técnica (LRRT) é descrita na tabela 1.

1. diagnóstico de pacientes de Degeneration Macular Age-related seco

  1. Apurar o diagnóstico com o oftalmoscópio de laser scanning confocal, SD-OCT e MY.
  2. Avalie BCVA cada grupo para longe e perto de distância. Medida VA para visão de perto (close-up) nos pontos (Pts). Medir a BCVA no tempo 0 (T0), 90 (T90), e 180 dias (T180) em relação ao estudo de retinopatia diabética tratamento inicial dos gráficos (EDTRS) 4 metros em logm.
  3. Registro mesópica escotópica, elétrica e atividade de célula fotópica ou flash ERG, de acordo com as normas estabelecidas em 2009 pela sociedade internacional de eletrofisiologia clínica da visão (ISCEV)11.

2. anesthetization

Nota: O padrão-ouro em anestesia durante LRRT é anestesia tópica, reforçada pela infiltração do subespiga de anestesia e sedação. Em casos específicos, a anestesia geral é preferencial.

  1. Obter corneal e conjuntival anestesia através da aplicação tópica de anestésicos locais instilado gota a gota 15-20 min antes da cirurgia com lidocaína a 4% e ropivacaína a 1%.
  2. Injetar a anestesia por infiltração diretamente no subconjuntival e espaços do subtenon.
  3. Uso de infiltração local, tanto na região abdominal, antes que o tecido adiposo é extraído e o subconjuntival e espaços do subespiga, 12 mm do limbo. Adote o anestésico local de carbocaine ou marcain misturado com 1.200 IU epinefrina.
  4. Fornece a sedação intra-operatória através do anestésico, que pode ser executada corretamente usando fentanil como um analgésico narcótico através de repetidas boli pequeno. A dosagem geralmente é 0,025 mg de fentanil com 1 mg de midazolam por bólus.

3. Limoli Retinal restauração técnica preparação

Nota: Esta técnica representa uma variante da intervenção do Pelaez, pelo qual a gordura autóloga orbital é transplantada no espaço subscleral1,6,7,12. Células transplantadas cirurgicamente podem produzir muitos GFs com propriedades neurotrophic e angiotrophic no tecido circundante, coroide e retina18,19,20,21,22 ,23,24,25. Em LRRT, a distância entre células autólogas enxertadas e coroide é reduzida por meio de sclerectomy profundo, e a área de contato entre a haste e a coroide é expandida para promover a secreção de células autólogas parácrina para o fluxo da coroide9, 10,14.

  1. Realize a desinfecção adequada de cada olho antes da cirurgia com enxerto celular entre a coroide e esclera, um procedimento chamado Limoli Retinal restauração técnica (LRRT)15,16,17.
  2. Enxerto da ADSCs, obtidos por Coleman et al e técnica de Lawrence (Figura 1) da gordura abdominal, no SVF no espaço de sovrachoroidal15,16,17.
  3. Pedículo de tecido adiposo infiltrado com plaquetas derivadas de gel de PRP obtida através dos seguintes passos.
  4. Centrifugar o sangue6,12 e coleta de plasma rico em plaquetas (PRP). O estímulo a degranulação plaquetária provoca liberação GF no pedículo adiposa6,12.

4. estratégia e especificações técnicas

Nota: Tecido adiposo é recolhido e purificado a partir da camada subcutânea abdominal de pacientes, de acordo com o Lawrence e Coleman técnica17(Tabela de materiais).

  1. Manualmente colheita 10 mL de tecido adiposo da camada subcutânea abdominal de cada paciente, usando uma cânula romba 3 mm ligado a uma seringa de bloqueio, de acordo com o Lawrence e Coleman técnica17 (figuras 2A/2B).
  2. Separe puro SVF do tecido gordo do sangue, gordura, óleo e líquido por centrifugação por 5 min a 1.500 x g a 20 ° C (Figura 2C). O SVF é muito rica em ADSCs17.
  3. Colete 8 mL de sangue periférico humano com uma agulha de 22 G e num tubo separado para a preparação do PRP.
  4. Centrifugar o sangue coletado por 5 min a 1.500 x g a 20 ° C (Figura 2D). Em LRRT, o resultado de mudanças que se seguiu no melhor sobrevivência do enxerto gordura autóloga, proliferação ADSC, que favorece o aumento da perfusão da coroide, e uma modulação mais abrangente da ação desses fatores que são secretadas apenas pela gordura7, 11,17.
  5. Construir o bolso de suprachoroidal (mais detalhes na etapa 4, em particular 4.4 e 4.5) para acomodar o enxerto obtido de gordura orbital e saturar o volume residual de bolso com uma mistura de ADSCs de SVF e PRP, obtidos de acordo com o Lawrence e Coleman técnica17.

5. Suprachoroidal Autograft por LRRT (técnica de restauração Limoli Retinal): procedimento cirúrgico e detalhes técnicos

  1. Ancore a esclera com sutura seda 6-0, próximo ao limbo inferior-temporal.
  2. Abra o espaço subconjuntival e subtenonian a 11 mm do limbo inferior-temporal, usando curva tesoura Westcott Tenetomy 5.5".
  3. Inserir o retractor conjuntival Limoli-Basile neste espaço para fazer um campo cirúrgico scleral.
  4. Usando um bisel Ângulo crescente faca de 5 mm, corte previamente uma aba no lado na esclera em 8 milímetros, do limbo. A dobradiça flap é sempre radial e para a esquerda do cirurgião.
  5. No quadrante inferior-temporal, a 8 mm do limbo, abra uma porta profunda scleral de cerca de 5 mm no lado por dobradiça radial, usando uma faca crescente, bisel ângulo acima. Realize sclerectomy a uma profundidade adequada para exibir a cor de ardósia da coroide.
  6. Crie uma lacuna, removendo o opérculo um pouco na parte distal do retalho, para facilitar a circulação de sangue no auto-enxerto suprachoroidal subsequentes.
  7. Extrai com fórceps oftalmológico a gordura orbital de uma lacuna acima do músculo oblíquo inferior. Certifique-se que a gordura extraída é vascularizada suficientemente para permitir a sobrevivência após sua implantação.
  8. Coloque delicadamente o flap de gordura autólogo na cama da coroide e sutura com fibra de Poliglactina 6/0 da coroide na borda proximal da porta.
  9. Suture o retalho escleral para evitar compressão no pedículo gordo ou em seus vasos nutrientes.
  10. Infiltrar o estroma do pedículo gordo com 1 mL de gel PRP (obtido por centrifugação do material sangue, separação do componente e plaquetas degranulação26) usando uma cânula angulada (30 °) de 30 G.
  11. Prepare os lados da conjuntiva para a sutura. Em seguida, remova o retractor conjuntival.
  12. Sutura de conjuntiva, usando fibra de Poliglactina 6/0.
  13. Antes de fechar, deixe um espaço para inserir-se no espaço subscleral, entre o retalho, a coroide e o autoenxerto da coroide, um pequeno tubo de plástico flexível com o enxerto autólogo de gordura.
  14. Saturar o espaço residual entre o enxerto autólogo de gordura, coroide e retalhos scleral com 0,5 cc de SVF (rico de ADSCs), previamente preparado no passo 3.2, por um pequeno tubo de plástico flexível, inserido no bolso scleral.
  15. Depois de saturar o espaço residual, feche a sutura.
  16. Após a cirurgia, administre três dias de antibioticoterapia com 500 mg de azitromicina. Além disso, fornece colírio terapia com uma antibiótica e esteroide combinação, tais como cloranfenicol e betametasona, por cerca de 15-20 dias.
    Nota: Um auto-enxerto constituído por células de gordura, ADSCs de SVF e PRP agora se obteve26. Reduza a distância entre as células autólogas enxertadas e coroide por profunda sclerectomy para estimular a secreção parácrina de células autólogas no fluxo da coroide. Para a mesma finalidade, expanda a área de contato entre a haste e a coroide.

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Representative Results

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Usando o procedimento apresentado aqui, dois grupos de pacientes afetados por AMD secos, com BCVA igual ou maior que 1 logaritmo do ângulo mínimo de resolução (logMAR), foram incluídos no estudo. Grupo A, incluindo 11 olhos de 11 pacientes, enxerto autólogo de suprachoroidal recebidos por Limoli Retinal restauração técnica (LRRT), Considerando que o grupo B, incluindo 14 olhos de 14 pacientes, utilizou-se como um grupo de controle.

O teste t de Student e o teste de chi quadrado foram usados para comparar, respectivamente, a má distribuição de idade e o sexo entre os grupos de estudo de dois (tabela 2). Visualização de dados e análises estatísticas foram realizadas antes e após a cirurgia LRRT.

Um teste de classificação assinado de Wilcoxon-Mann-Whitney foi realizado para determinar se as diferenças pré e pós-tratamento foram significativas. Este teste de hipótese estatística não-paramétrica foi aplicado para comparar duas amostras dependentes, quando a população não pode ser considerada para ser distribuído normalmente, como neste caso. VA valores foram medidos em cada etapa da análise. Significância estatística foi fixada em um valor de p <0,05.

Olhos de onze (6 olhos direito e 5 esquerdos) 11 pacientes (7 machos e 4 fêmeas) com o diagnóstico clínico da DMRI seca foram examinados neste estudo. Paciente idade variou de 62 a 84 anos, com uma idade média de 71,5 anos (SD ± 3,8).

A tabela 2 fornece uma visão geral dos perfis clínicos de pacientes tratados com LRRT e os valores médios registados no 0 (T0), 90 (T90) e 180 (T180) dias após a cirurgia. Os efeitos adversos foram relatados sempre para garantir a máxima segurança. Valores médios de pressão intraocular gravado no 0 (T0), 90 (T90) e 180 dias (T180) após cirurgia não gravou nenhuma mudança significativa.

Resultados após a cirurgia LRRT foram os seguintes:
No grupo A, BCVA alterado de 0.581 (T0) no pré-operatório para 0.504 em 90 dias (T90) e 0.376 logm em 180 dias (T180) com um aumento significativo de 35.20% (p < 0,01). No controle do grupo B, incluindo 14 olhos de 14 pacientes, 7 machos e 7 fêmeas, com média de idade de 80,4 anos, ± SD 2.3, BCVA mudado de 0.573 (T0) para 0.587 (T90) e de logm 0.601 (T180) com uma média não significante diminuição de 4,72% (tabela 2) (Figura 3 ). No grupo A, o meu teste aumentou significativamente de 11,44 dB (T0) para 12,59 dB (T180) (+9.58%) (Figura 4), Considerando que não havia nenhuma melhoria significativa nos valores pós-operatórios no grupo B.

Figure 1
Figura 1 : Representação do enxerto autólogo de suprachoroidal. Fatores de crescimento (GFs) produzido por células adiposas, plasma rico em plaquetas (PRP), e células-tronco adiposo-derivado (ADSCs) atingir os tecidos da coroide e da retina através do epithelium retinal do pigment (RPE). Clique aqui para ver uma versão maior desta figura.

Figure 2
Figura 2 : Procedimento técnico. Cânula e subsequente retirada do tecido adiposo da região abdominal (painel A). A cânula se move a gordura subcutânea com aspiração suave aspirando as células de gordura em seu próprio lúmen (painel B). Após a centrifugação, existem três camadas de tecido adiposo: óleo (alta camada), gordura homogênea (camada intermediária) e fluido de sangue (camada inferior) (painel C). Observe o tubo com sangue imediatamente após a centrifugação. Há três camadas: plasma pobre de plaquetas (PPP), plasma rico plaquetas (PRP) e hemácias (painel D). Clique aqui para ver uma versão maior desta figura.

Figure 3
Figura 3 : Melhor corrigida a acuidade visual (BCVA) no degeneration macular age-related seco (AMD). Mudança no grupo A após enxerto autólogo de suprachoroidal por Limoli Retinal restauração técnica (LRRT) e no grupo controle (Check), medido em dias de tempo 0 (T0), 90 (T90) e 180 (T180). Clique aqui para ver uma versão maior desta figura.

Figure 4
Figura 4 : Microperimetry (MY) em um paciente do grupo r. Seque o degeneration macular age-related (AMD) seis meses após Limoli Retinal restauração técnica (LRRT). MEU aumento de 11,44 dB (T0) para 12,59 dB (T180) (+9.58%). Escala de cor de 0 a 36 dB. Estabilidade de fixação: estável, relativamente instável, instável. Clique aqui para ver uma versão maior desta figura.

Critérios de inclusão Critérios de exclusão
Assuntos caucasianos Erros refractivos com equivalente esférico > 6 D
Participantes bem nutridos Sinais da DMRI exsudativa por SD-OCT e FA
Diagnóstico por SD-OCT, AFI e FA Distúrbios oculares: CT, GL, ON, MP, VM, CRD, etc.
VA mensurável Trauma ocular
BCVA ≥ 1 logm Doenças sistêmicas: MS; PD; DM; ÁREA DE TRABALHO REMOTA; HD; Vasculite
IOP normal Hipertensão, câncer e outras doenças sistêmicas
Áreas de armazenamento bom extrafoveal
Logm: logaritmo do ângulo mínimo de resolução; SD-OCT: tomografia de coerência óptica-domínio espectral; AFI: imagem de autofluorescência; FA: angiografia da fluoresceína; VA: acuidade; IOP: pressão intra-ocular; D: dioptrias; CT: catarata; GL: glaucoma; ON: neurite óptica; MP: pucker macular; VM: membranas neovascular; CRD: doença choriorétiniennes; MS: esclerose múltipla; PD: Doença de Parkinson; DM: diabetes mellitus; RD: doenças renais; HD: doenças hepáticas.

Tabela 1: Critérios de inclusão e exclusão para os doentes de degeneration macular age-related seco (AMD).

PARÂMETROS LRRT (n = 11) Controle (n = 14)
Idade (média) 71,5 ±3.8SD ±2.3SD 80,4
Idade (gama) 62 - 84 73 - 79
Sexo F:4 M:7 F:7 M:7
BCVA T0 logMAR 0.581 0.573 logMAR
(média)
T0 BCVA (gama) 0.301 - 1.0 0.0 - 1.0
BCVA T90 (média) 0.504 logMAR 0.587 logMAR
BCVA T90 (gama) 0.222 - 1 0,0 - 1
BCVA T180 (média) logm 0.376 logMAR 0.601
BCVA T180 (gama) 0,046 - 0.699 0.0 - 1.0
Porcentagem 35.19 4.72
mudar
valor de p < 0,01 > 0,5
Idade em anos; n = pacientes e controles; SD = desvio padrão; F = feminino; M = masculino; BCVA = melhor acuidade visual corrigida em logm; T0 = linha de base antes de auto-enxerto de cirurgia; T90 = 90 dias autograft pós cirúrgicos; T180 = autograft pós cirúrgicos de 180 dias.

Tabela 2: perfis clínicos dos pacientes analisados no estudo. Média valores gravados antes (T0), 90 (T90) e 180 dias (T180) célula autograft por Limoli Retinal restauração técnica (LRRT) em todos os pacientes.

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Discussion

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O objetivo principal deste estudo foi avaliar se o enxerto de suprachoroidal dos adipócitos, ADSCs em SVF e PRP poderia melhorar VA e sensibilidade da retina nos olhos afetados AMD secos ao longo do tempo. Outro objetivo principal foi demonstrar possíveis efeitos terapêuticos dessas células, com base na literatura recente, uma vez que vários estudos pré-clínicos têm sugerido que a terapia baseada em GF poderia ser útil para o tratamento do paciente em várias doenças.

De fato, alguns estudos têm mostrado que as células-tronco pluripotentes induzidas humanas autólogas (iPSC) poderia representar uma fonte de celular para o enxerto, vista a regeneração de epitélio (RPE) pigmento da retina em terapia de reposição de tecido para AMD18, 19. estas folhas de célula são geradas como um monolayer que poderia expressar marcadores típicos de RPE e exibem polarizada GF secreção, apresentando capacidade de phagocytotic, bem como os padrões de expressão gênica semelhantes dos nativos RPE18,19 . Após transplante, autólogo de primatas não humanos folhas de célula de iPSC-RPE mostraram nem imune rejeição nem tumor formação18,19.

O presente estudo apresenta algumas características diferentes. Foram analisados diretamente no secos olhos humanos AMD afetados se a célula de auto-enxerto suprachoroidal pode melhorar o desempenho visual.

Além disso, sovrachoroidal enxerto de células autólogas segundo LRRT sempre tem provado para ser seguro. Nunca temos registrado neovascularização sub da retina, edema macular, descolamento de retina ou outros problemas da retina no primeiro ano pós intervenção. Por outro lado, procedimentos cirúrgicos inapropriados teoricamente podem levar à perfuração da coroide com sangramento posterior, mas em nossa pesquisa não olho foi danificado. No entanto, é possível ter hemorragia subconjuntival que normalmente é reabsorvida dentro de alguns dias e não apresentar novamente como uma complicação.

Estudos recentes têm fornecido amplas evidências de um aumento significativo nos valores ERG escotópica, BCVA e meu, em 90 e 180 dias pós enxerto autólogo. No entanto, o aumento foi maior, se a média de espessura da retina (RTA) gravada por SD-OCT foi superior11,26. Acredita-se que as células transplantadas cirurgicamente podem produzir GFs no tecido circundante, coroide e retina, e que têm propriedades neurotrophic e angiotrophic, como fator de crescimento fibroblástico básico (bFGF), fator de crescimento endotelial vascular (VEGF) , fator de pigmento-epitélio-derivado (PEDF), interleucina (IL), fator colônia-estimulando do macrófago (M-CSF), fator de colônia-estimulante de granulócitos macrófagos (GM-CSF) e fator de crescimento placentário (PlGF), enquanto as plaquetas produzem derivado de plaquetas crescem fator de angiogênese fator (PDGF), derivado de plaquetas (PDAF), etc.6,7,12,13,21

Colocação de enxerto perto a coroide é acreditada para permitir que o GFs produzido entrar o fluxo da coroide, para alcançar as células endoteliais, células de receptores, RPEs, Muller, fotorreceptores e finalmente para interagir com eles. LRRT, os elementos enxertados autólogos são úteis, cada um à sua maneira, para a regeneração. As células de gordura produzem bFGF, fator de crescimento epidérmico (EGF), fator de crescimento semelhante à insulina 1 (IGF-1), IL, transformadora de fator de crescimento β (TGF-β), PEDF e Adiponectina21. Os ADSCs produzem bFGF, VEGF, M-CSF, GM-CSF, PlGF, TGF-β, fator de crescimento de hepatócito (HGF), IGF-1, IL e angiogenin6,7. As plaquetas produzem PDGF, IGF-1, TGF-β, VEGF, bFGF, EGF, PDAF e thrombospondin (TSP)6,12.

Alguns fatores promovem regeneração endotelial, e alguns estimulam a proliferação de ADSC, favorecendo tanto a gordura autóloga e a sobrevivência dos adipócitos, enquanto outros inibem neovascular processos22,23,24. PEDF e bFGF favorecem a sobrevivência de fotoreceptor, enquanto EGF exerce sua ação sobre as células de Müller, provocando transcrição bFGF endógena e estimulando ADSCs para aumentar a sua atividade secretora25,27. Embora GFs normalmente são secretadas por RPEs, isto não ocorre em maculopathy atrófica como resultado o RPE/choriocapillaris complexo. Secreção Paracrine GF pelas células do enxerto contribui para favorecer fotoreceptor e choriocapillaris sobrevivência28. Além disso, M-CSF, GM-CSF e IL têm efeitos anti-inflamatórios e Quimiotáticos em macrófagos, que estão envolvidos na eliminação de detritos celulares intraretinal, uma função que é fisiologicamente realizado por,RPEs2930.

Os tipos de células enxertados para trás a coroide podem garantir constante secreção de GF no fluxo da coroide. GFs podem chegam de coroide para as células da retina, interagir com seus receptores de membrana e finalmente ativar um caminho intracelular. Os dados apresentados sugerem que LRRT pode aumentar perfusão da coroide e prevenção fotorreceptoras não só através de interações de bFGF-receptor, mas também através da estimulação por Müller células RPEs e fotorreceptores da retina. Como resultado, mudanças de expressão de gene e o efeito anti-apoptótico final poderiam explicar o neuroenhancement. Este mecanismo celular subjaz a capacidade de aumentar o desempenho visual, como destacado nos achados clínicos no grupo transplantado. Em resumo, LRRT poderia ser útil para preservar a função visual de pacientes afetados por AMD secos a longo prazo.

No entanto, como temos demonstrado em estudos anteriores, ERG de cone-haste e a haste ERG mostram uma correlação altamente significativa com RTA, enquanto este não é o caso de ERG de cone. Isto pode ser explicado pelo fato de que a função de fóvea aparenta ser comprometida, embora os volumes maculares em DMRI seca continua a ser regular, pelo menos em estágios iniciais26. Em desta patologia, prevenção da retina residual, medida pela RTA pode ser um critério prognóstico para tratamento LRRT, desde que melhores resultados são mais frequentes em pacientes com RTA igual ou superior a 250 µm26. O conjunto GF disponível pode resultar em neuroenhancement, na medida do que é proporcional à presença de áreas com maior celularidade, como registrado por atividade elétrica26. Numa fase posterior, a celularidade do tecido pobre não daria o efeito terapêutico que é procurado após o procedimento, devido à escassas interações GF-membrana do receptor.

Os próximos passos da pesquisa exigirá a contratação de um maior número de indivíduos com maior VA e fixação central, estatisticamente, avaliando todos os indispensáveis testes necessários para confirmar que a técnica é válida e para estudar os efeitos bioquímicos. Pode-se argumentar que o aumento da prevenção de célula é refletido na atividade visual célula, objectivamente medida pelo ERG, BCVA e minha11. Terapia baseada em GF poderia fornecer um tratamento atualizado, seletivo, seguro e razoável em doenças oftalmológicas.

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Disclosures

Apresentado no ARVO 2015, 3-7 de maio-Denver, CO - EUA.

Acknowledgments

Os autores têm sem agradecimentos.

Materials

Name Company Catalog Number Comments
Blunt cannula, 3 mm.  Mentor, Santa Barbara, CA.
Luer-LokTM syringe.  BD Biosciences, Franklin Lakes, NJ.
Regen-BCT tube.  RegenKit; RegenLab, Le Mont-sur-Lausanne, CH.
Centrifuge  RegenPRP Centri. RegenLab, Le Mont-sur-Lausanne, CH.
BD Venflon Pro Safety 22G x 1.00 inch (0.9 mm x 25 mm).  BD Biosciences, Franklin Lakes, NJ.
SPSS Statistics Version 19.0 IBM Corp., Armonk, NY, USA.
Confocal scanning laser ophthalmoscope  Nidek Inc, Fremont, CA Nidek F10 
Cirrus 5000 Spectral Domain-Optical Coherence Tomography Carl Zeiss Meditec AG, Jena, Germany  SD-OCT 
Maia 100809 Microperimetry  CenterVue S.p.A., Padua, Italy
Ocular electrophysiology electromedical system, C.S.O., S.r.l., Scandicci, Italy  Retimax for ERG 

DOWNLOAD MATERIALS LIST

References

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Terapia regenerativa pela célula Suprachoroidal Autograft em seco Degeneration Macular Age-related: relatório preliminar <em>na Vivo</em>
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Limoli, P. G., Vingolo, E. M., Limoli, C., Scalinci, S. Z., Nebbioso, M. Regenerative Therapy by Suprachoroidal Cell Autograft in Dry Age-related Macular Degeneration: Preliminary In Vivo Report. J. Vis. Exp. (132), e56469, doi:10.3791/56469 (2018).More

Limoli, P. G., Vingolo, E. M., Limoli, C., Scalinci, S. Z., Nebbioso, M. Regenerative Therapy by Suprachoroidal Cell Autograft in Dry Age-related Macular Degeneration: Preliminary In Vivo Report. J. Vis. Exp. (132), e56469, doi:10.3791/56469 (2018).

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