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Terapia regenerativa por autoinjerto Suprachoroidal célula en Degeneración Macular seca relacionada con la edad: informe preliminar en Vivo

Published: February 12, 2018 doi: 10.3791/56469
Automatic Translation
1, 2, 1, 3, 4
1Low Vision Research Centre of Milan, 2Department of Ophthalmology, A. Fiorini Hospital, Sapienza University of Rome, 3Glaucoma and Low Vision Study Center, Department of General Surgery and Organ Transplants, University of Bologna, 4Department of Sense Organs, Faculty of Medicine and Odontology, Sapienza University of Rome

Summary

El objetivo de este estudio es evaluar si el injerto suprachoroidal espontánea de células madre procedentes de adiposo dentro de la fracción vascular estromal y plaquetas derivadas de plasma rico en plaquetas mediante la técnica de restauración Limoli retiniana puede mejorar la agudeza visual y respuestas de sensibilidad retiniana en los ojos afectados por degeneración macular seca relacionada con la edad.

Abstract

Este estudio pretende examinar si un injerto de suprachoroidal espontánea de células autólogas puede mejorar mejor agudeza visual corregida (BCVA) y respuestas a microperimetry (mi) en los ojos afectados por Degeneración Macular relacionada con la edad (DMAE) en seco con el tiempo a través de la producción y secreción de factores de crecimiento (GFs) en el tejido circundante. Los pacientes fueron asignados aleatoriamente a cada grupo de estudio. Todos los pacientes fueron diagnosticados con DME seca y BCVA igual o mayor que 1 logaritmo del mínimo ángulo de resolución (logMAR). Un injerto autólogo de suprachoroidal por Limoli retiniana restauración técnica (LRRT) se llevó a cabo en el grupo A, que incluyó 11 ojos de 11 pacientes. La técnica fue realizada por implantación de adipocitos, células madre procedentes de adiposo obtenidas de la fracción vascular estromal y plaquetas del plasma rico en plaquetas en el espacio Supracoroideo. Por el contrario, el grupo B, incluyendo 14 ojos de 14 pacientes, se utilizó como grupo control. Para cada paciente, el diagnóstico fue verificado por oftalmoscopio confocal de láser exploración y tomografía de coherencia óptica de dominio espectral (SD-OCT). En el grupo A, BCVA mejora por 0.581 a 0.504 en 90 días y logMAR 0.376 en 180 días (+32.20%) después de la operación. Además, mi prueba aumentaron 11,44 dB a dB 12,59 en 180 días. Los diferentes tipos de células injertados detrás coroides fueron capaces de asegurar la constante secreción de GF en el flujo de la coroides. En consecuencia, los resultados indican que puede aumentar la agudeza visual (AV) en el grupo de injerto más que en el grupo de control después de seis meses.

Introduction

Terapia celular, que consiste en la inyección local o sistémica de células madre/progenitoras en la zona lesionada para tratar múltiples trastornos crónicos, ha dibujado mucha atención en la última década1. Desde la década de 1990, se han estudiado factores de crecimiento (GFs) para su papel potencialmente terapéutico en atrofia retiniana2. De hecho, muchas de las células humanas pueden producir GFs, que son proteínas específicas que son capaces de bloquear o retrasar la apoptosis, es decir, la muerte programada de las células3.

Se sabe que seca degeneración macular relacionada con la edad (DMAE) es una enfermedad retiniana atrófica donde muerte gradual e irreversible de la célula implica daño a la capa de fotorreceptores y, por consiguiente, la pérdida de función visual central4. AMD es la causa principal de ceguera en personas mayores de 55 años de edad en los países desarrollados y representa el 80% de todas degeneraciones maculares, que carecen de un tratamiento eficaz hasta la fecha.

Varios estudios han demostrado que existen varias fuentes de que pueden obtenerse GFs autólogos. Estos incluyen diferentes tipos de células, incluyendo células del estroma adiposas derivadas de grasa orbital, plaquetas derivadas de plasma rico en plaquetas (PRP) y adiposo células madre derivadas (ADSCs) incluidas en la fracción vascular estromal (SVF) del tejido adiposo5 ,6,7. El conjunto actual de GF asegura neuroenhancement retiniana y la investigación llevada a cabo por Filatov, Meduri, Pelaez y Limoli ha demostrado que el transplante de grasa autólogo (AFT) es efectiva8,9,10.

Por otra parte, un estudio anterior mostraron mejoras significativas en los datos de electroretinograma (ERGIO), registró post suprachoroidal injerto autólogo, en ojos afectados por AMD seco11. El tejido injertado quirúrgicamente en el espacio Supracoroideo modula la secreción paracrina de las células retinales, retrasando su apoptosis6,7,12. Considerando el espesor de la capa nuclear externa, la examinación histológica de la retina de conejillos de Indias ha demostrado que los GFs podrían tener un efecto trófico sobre la retina. Por lo tanto, la utilización directa o indirecta de los GFs potencialmente puede traer beneficios terapéuticos a través de una relación equilibrada entre inductores moleculares y los inhibidores de la6,7,12.

El propósito de este método es determinar si el injerto suprachoroidal de adipocitos, ADSCs en SVF y PRP puede mejorar mejor corregida la agudeza visual (BCVA) microperimetry (MY) respuestas y en resequedad en los ojos afectados por AMD. Este estudio pretende demostrar el efecto terapéutico del autoinjerto sobre la base de su producción de GF, según la literatura citada6,7,12,13.

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Protocol

El protocolo de estudio fue aprobado por el Comité de ética de la Academia de visión baja y todos los sujetos firmaron un consentimiento escrito conforme a la declaración de Helsinki. Este estudio de investigación ha recibido aprobación ética de Loughborough y Sheffield universidades.

Nota: Los criterios de inclusión y exclusión de pacientes de la degeneración macular seca relacionada con la edad para recibir el injerto autólogo de suprachoroidal por Limoli retiniana restauración técnica (LRRT) se describe en la tabla 1.

1. diagnóstico de los pacientes de la Degeneración Macular seca relacionada con la edad

  1. Determinar el diagnóstico con oftalmoscopio confocal de láser exploración, SD-OCT y mi.
  2. Evaluar BCVA de cada grupo para lejos y cerca distancia. Medida VA para visión de cerca (Close-up) en puntos (Pts). Medir la BCVA a tiempo 0 (T0), 90 (T90), y 180 días (T180) en comparación con el estudio de la retinopatía diabética tratamiento temprano cartas (EDTRS) en 4 metros de logMAR.
  3. Registro mesópica escotópica, eléctrico y actividad celular fotópica o flash ERG, según las normas establecidas en el año 2009 por la sociedad internacional para la electrofisiología clínica de la visión (ISCEV)11.

2. anestesia

Nota: El estándar de oro para anestesia durante LRRT es anestesia tópica, por infiltración de sub-tenon de anestesia y sedación. En casos concretos, se prefiere anestesia general.

  1. Obtener corneal y conjuntival anestesia mediante la aplicación de anestésicos locales tópicos inculcada gota a gota 15-20 min antes de la cirugía con lidocaína al 4% y ropivacaína al 1%.
  2. Inyectar la anestesia por infiltración directamente en sub-conjuntival y espacios del subtenon.
  3. Uso de infiltración local en la región abdominal, antes de que se extrae el tejido adiposo y en el sub-conjuntival y espacios de sub-tenon 12 mm desde el limbo. Adoptar el anestésico local de carbocaine o marcain mezclado con 1.200 IU epinefrina.
  4. Proporcionan sedación intraoperatoria a través de la anestesia, que puede realizarse correctamente utilizando fentanilo como un analgésico narcótico con boli pequeño repetido. La dosificación generalmente es 0,025 mg de fentanilo con 1 mg de midazolam por bolo.

3. Limoli retiniana restauración técnica preparación

Nota: Esta técnica representa una variante de la intervención de Pelaez por el cual se trasplanta grasa autóloga orbital en el subscleral espacio1,6,7,12. Las células injertadas quirúrgico pueden producir muchos GFs con propiedades neurotrófico y angiotrophic en el tejido circundante, la coroides y la retina18,19,20,21,22 ,23,24,25. En LRRT, la distancia entre células autólogas injertadas y la coroides se reduce mediante sclerectomy profundo y el área de contacto entre el tallo y la coroides se expande para promover la secreción de células autólogas paracrina en el coroides flujo9, 10,14.

  1. Realizar la desinfección adecuada de cada ojo antes de la cirugía con injerto celular entre la coroides y la esclera, un procedimiento llamado Limoli retiniana restauración técnica (LRRT)15,16,17.
  2. Injerto ADSCs, obtenidos por Coleman et al. y técnica de Lawrence (figura 1) de la grasa abdominal, en el SVF en el sovrachoroidal espacio15,16,17.
  3. Pedículo adiposo infiltra con plaquetas derivados de gel PRP obtenido a través de los siguientes pasos.
  4. Centrifugar sangre6,12 y recoger el plasma rico en plaquetas (PRP). El estímulo a la degranulación plaquetaria provoca liberación GF en el pedículo adiposo6,12.

4. estrategia y especificaciones técnicas

Nota: El tejido adiposo es recogido y purificado de la capa subcutánea abdominal de los pacientes, según Lawrence y Coleman técnica17(Tabla de materiales).

  1. Manualmente la cosecha 10 mL de tejido graso de la capa subcutánea abdominal de cada paciente, mediante una cánula Roma de 3 mm conectada a una jeringa de bloqueo, según Lawrence y Coleman técnica17 (figuras 2A/2B).
  2. Separar puro SVF de tejido graso de la sangre, grasa, aceite y líquido por centrifugación durante 5 min a 1.500 x g a 20 ° C (figura 2C). El SVF es muy rico de ADSCs17.
  3. Recoger 8 mL de sangre periférica con una aguja de 22 G y en un tubo separado para la preparación del PRP.
  4. Centrifugar la sangre recogida por 5 min a 1.500 x g a 20 ° C (figura 2D). En LRRT, el resultado de cambios subsiguientes en la mejor supervivencia de los injertos autólogos de grasa, proliferación ADSC, que favorece el aumento de la perfusión coroides, y una modulación más completa de la acción de los factores que son secretadas por grasa7, 11,17.
  5. Construir el bolsillo suprachoroidal (más detalles en el paso 4, en particular 4.4 y 4.5) para acomodar el injerto Obtenido de la grasa orbital y saturar el volumen residual de esta bolsa con una mezcla de ADSCs SVF y PRP, obtenida según el Lorenzo y Coleman técnica17.

5. Suprachoroidal autoinjerto por LRRT (técnica de restauración Limoli retiniana): procedimiento quirúrgico y detalles técnicos

  1. Ancla la esclerótica con sutura de seda 6-0, cerca del limbus temporal inferior.
  2. Abrir el espacio subconjuntival y subtenonian a 11 mm desde el limbo inferior temporal, con 5.5" Westcott Tenetomy tijeras curvas.
  3. Inserte el retractor conjuntival Limoli-Basile en este espacio para hacer un campo quirúrgico escleral.
  4. Usando un bisel de ángulo cuchillo media luna de 5 mm, corte antes una aleta en la parte en la esclera a 8 mm, del limbus. La bisagra de la tapa es siempre radial y a la izquierda del cirujano.
  5. En el cuadrante temporal inferior a 8 mm desde el limbo, abrir una puerta escleral profundo de aproximadamente 5 mm en el lado radial bisagra utilizando un cuchillo de media luna, ángulo bisel hacia arriba. Llevar a cabo sclerectomy a una profundidad adecuada para ver el color de la pizarra de la coroides.
  6. Crear un espacio quitando el opérculo un poco en la parte distal del colgajo, para facilitar la circulación sanguínea en el autoinjerto de suprachoroidal posterior.
  7. Extraer con pinza oftalmológica la grasa orbital un espacio encima del músculo oblicuo inferior. Asegúrese de que la grasa extraída es suficientemente vascularizada para poder sobrevivir después de su implantación.
  8. Coloque con cuidado la tapa de grasa autóloga en la coroides y la sutura con la coroides fibra de Poliglactina 6/0 en el borde proximal de la puerta.
  9. Suturar el colgajo escleral para evitar la compresión en el pedículo de grasa o en los vasos nutrientes.
  10. Infiltrarse en el tejido conectador del pedicle grasa con 1 mL de gel PRP (obtenido por centrifugación de los materiales de la sangre, separación de los componentes y degranulación de plaquetas26) mediante una cánula de ángulo (30 º) 30 G.
  11. Prepara los lados de la conjuntiva de la sutura. Luego, retire el retractor conjuntival.
  12. Sutura de la conjuntiva, usando fibra del polyglactin 6/0.
  13. Antes de cerrar, dejar un espacio para insertar en el espacio subscleral, entre la aleta y la coroides coroides autoinjerto, un pequeño tubo de plástico flexible con el injerto de grasa autólogo.
  14. Saturar el espacio residual entre el injerto de grasa autólogo, coroides y colgajos esclerales con 0.5 cc de SVF (rico de ADSCs), previamente preparada en el paso 3.2, por un pequeño tubo de plástico flexible, insertada en el bolsillo escleral.
  15. Después de saturar el espacio residual, cerca de la sutura.
  16. Después de la cirugía, administrar tres días de la terapia antibiótica con azithromycin 500 mg. También, proporcionar terapia de gota del ojo con una combinación de antibióticos y esteroides, tales como cloranfenicol y betametasona, para unos 15-20 días.
    Nota: Un autoinjerto de células de grasa, ADSCs SVF y PRP se ahora ha obtenido26. Reducir la distancia entre el injerto de células autólogas y coroides sclerectomy profunda para estimular la secreción paracrina de las células autólogas en el flujo de la coroides. Para el mismo propósito, ampliar el área de contacto entre el tallo y la coroides.

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Representative Results

Utilizando el procedimiento presentado aquí, dos grupos de pacientes afectados por AMD seco, con BCVA igual o mayor que 1 logaritmo del mínimo ángulo de resolución (logMAR), se incluyeron en el estudio. Grupo A, incluyendo 11 ojos de 11 pacientes, injerto autólogo de suprachoroidal recibido Limoli retiniana restauración técnica (LRRT) mientras que del grupo B, incluyendo 14 ojos de 14 pacientes, se utilizó como grupo control.

Prueba t de Student y la prueba de chi cuadrado se usaron para comparar, respectivamente, media distribución edad y sexo entre los dos grupos de estudio (tabla 2). Se realizaron análisis estadísticos y visualización de datos antes y después de la cirugía LRRT.

Se realizó una prueba espesa firmada Wilcoxon-Mann-Whitney para determinar si las diferencias previas y post tratamiento fueron significativas. Se aplicó esta prueba de hipótesis estadística no paramétrica para comparar dos muestras dependientes, cuando la población no puede ser asumida para ser distribuido normalmente, como en este caso. Se midieron valores de VA en cada paso del análisis. Significación estadística se fijó en un valor de p <0.05.

11 ojos (6 ojos derecha y 5 izquierdos) de 11 pacientes (7 hombres y 4 mujeres) con la diagnosis clínica de la DMAE seca se analizaron en este estudio. Edad del paciente varió de 62 a 84 años, con una edad media de 71,5 años (SD ± 3.8).

La tabla 2 proporciona un resumen de los perfiles clínicos de los pacientes tratados con LRRT y los valores promedio registrados en 0 (T0), 90 (T90) y 180 (T180) días después de la cirugía. Siempre se informaron efectos adversos para garantizar la máxima seguridad. Valores promedio de la presión intraocular grabado en 0 (T0), 90 (T90) y 180 (T180) días después de la cirugía no registró cambios significativos.

Resultados después de la cirugía LRRT fueron los siguientes:
En el grupo A, BCVA cambió de 0.581 (T0) preoperatively 0.504 a los 90 días (T90) y logMAR 0.376 en 180 días (T180) con un aumento significativo del 35.20% (p < 0.01). En el control del grupo B, incluyendo 14 ojos de 14 pacientes, 7 hombres y 7 mujeres, con una edad media de 80,4 años, SD ± 2.3, BCVA cambiada de 0.573 (T0) a 0.587 (T90) y a 0.601 logMAR (T180) con una media no significativa disminución del 4,72% (tabla 2) (figura 3 ). En el grupo A, mi prueba aumentó significativamente de 11,44 dB (T0) a 12,59 dB (T180) (+9.58%) (Figura 4), mientras que hubo una mejoría significativa en valores postoperatorias en el grupo B.

Figure 1
Figura 1 : Representación de injerto autólogo suprachoroidal. Factores de crecimiento (GFs) producida por las células adiposas, plasma rico en plaquetas (PRP), y células madre procedentes de adiposo (ADSCs) llegar a los tejidos de coroides y retinales con el epitelio retiniano del pigmento (RPE). Haga clic aquí para ver una versión más grande de esta figura.

Figure 2
Figura 2 : Procedimiento técnico. Cánula y posterior retirada del tejido adiposo de la zona abdominal (Panel A). La cánula mueve grasa subcutánea con aspiración suave aspirando las células de grasa en su propia luz (Panel B). Después de la centrifugación, hay tres capas de tejido adiposo: (alta capa) de aceite, grasa homogénea (capa intermedia) y sangre fluidos (capa inferior) (Panel C). Observar el tubo con la sangre inmediatamente después de la centrifugación. Hay tres capas: plasma pobre de plaquetas (PPP), plasma rico en plaquetas (PRP) y eritrocitos (Panel D). Haga clic aquí para ver una versión más grande de esta figura.

Figure 3
Figura 3 : Mejor agudeza visual corregida (BCVA) seca degeneración macular relacionada con la edad (AMD). Cambio en el grupo A después de suprachoroidal injerto autólogo por Limoli retiniana restauración técnica (LRRT) y en el grupo de control (Check), medido en el tiempo 0 (T0), 90 (T90) y 180 (T180) días. Haga clic aquí para ver una versión más grande de esta figura.

Figure 4
Figura 4 : Microperimetry (mi) en un paciente del grupo A. de Seca degeneración macular senil (DMS) seis meses después de la técnica de restauración Limoli retiniana (LRRT). MI incremento de 11,44 dB (T0) a 12,59 dB (T180) (+9.58%). Escala de color de 0 a 36 dB. Estabilidad de la fijación: estable, relativamente inestables, inestables. Haga clic aquí para ver una versión más grande de esta figura.

Criterios de inclusión Criterios de exclusión
Sujetos caucásicos Errores refractivos con equivalente esférico > 6 D
Participantes bien alimentados Signos de DMAE exudativa por SD-OCT y FA
Diagnóstico de SD-OCT, AFI y FA Trastornos oculares: CT, GL, en, MP, VM, CRD, etcetera.
VA medible Trauma ocular
BCVA ≥1 logMAR Enfermedades sistémicas: MS; PD; DM; RD; HD; vasculitis
IOP normal Hipertensión, cáncer y otras enfermedades sistémicas
Áreas de almacenamiento bien extrafoveal
LogMAR: logaritmo del mínimo ángulo de resolución; SD-OCT: tomografía de coherencia óptica de dominio espectral; AFI: imágenes de Autofluorescencia; FA: angiografía de la fluoresceína; VA: la agudeza visual; Pio: la presión intraocular; D: dioptrías; CT: catarata; GL: glaucoma; ON: neuritis óptica; MP: pucker macular; VM: las membranas neovascular; CRD: enfermedad coriorretinal; EM: esclerosis; PD: Enfermedad de Parkinson; DM: diabetes mellitus; RD: enfermedades renales; HD: enfermedades hepáticas.

Tabla 1: Criterios de inclusión y exclusión de pacientes seca degeneración macular relacionada con la edad (DMAE).

PARÁMETROS LRRT (n = 11) Control (n = 14)
Edad (promedio) ±3.8SD 71,5 ±2.3SD 80.4
Edad (rango) 62 - 84 73 - 79
Sexo F:4 M:7 F:7 M:7
BCVA T0 logMAR 0.581 logMAR 0.573
(promedio)
BCVA T0 (gama) 0.301 - 1.0 0.0 - 1.0
BCVA T90 (promedio) logMAR 0.504 logMAR 0.587
BCVA T90 (gama) 0.222 - 1 0.0 - 1
BCVA T180 (promedio) logMAR 0.376 0.601 logMAR
BCVA T180 (gama) 0.046 - 0.699 0.0 - 1.0
Porcentaje 35.19 4.72
cambio
valor de p < 0,01 > 0.5
Edad en años; n = pacientes y controles; SD = desviación estándar. F = Mujer; M = macho; BCVA = mejor agudeza visual corregida en logMAR; T0 = línea de base antes de la cirugía autoinjerto; T90 = 90 días post quirúrgicos autoinjerto; T180 = 180 días post quirúrgicos autoinjerto.

Tabla 2: perfiles clínicos de los pacientes examinados en el estudio. Promedio los valores registrados antes (T0), 90 (T90) y 180 días (T180) después del autoinjerto de la célula por Limoli retiniana restauración técnica (LRRT) en todos los pacientes.

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Discussion

El propósito principal de este estudio fue evaluar si suprachoroidal injerto de adipocitos, ADSCs en SVF y PRP podría mejorar la sensibilidad retiniana en resequedad en los ojos afectados por AMD y VA con el tiempo. Otro objetivo fue demostrar los efectos terapéuticos de estas células, basados en la literatura reciente, ya que varios estudios preclínicos han sugerido que la terapia basada en GF podría ser útil para la atención de pacientes en varias enfermedades.

De hecho, algunos estudios han demostrado que las células madre autólogas humanas pluripotentes inducidas (iPSC) podría representar una fuente celular para el injerto, a la regeneración del epitelio (RPE) de pigmento retiniano en terapia de reemplazo de tejido para AMD18, 19. estas hojas de la célula se generan como una monocapa que podría expresar marcadores típicos de RPE y exhiben polarización GF secreción, mostrando capacidad phagocytotic, así como patrones de expresión génica similares a los de nativos RPE18,19 . Sobre trasplante, hojas de células autólogas de primates no humanos iPSC-RPE demostraron ni inmune rechazo ni tumor formación18,19.

El presente estudio presenta unas características diferentes. Hemos analizado directamente en ojos humanos afectados por DMAE secos si la célula de autoinjerto suprachoroidal puede mejorar el rendimiento visual.

Además, sovrachoroidal de injerto de células autólogas según LRRT siempre ha demostrado para ser seguro. Nunca hemos registrado neovascularización sub-retinal, edema macular, desprendimiento de retina, u otros problemas de retinales en el primer año post intervención. Por otra parte, procedimientos quirúrgicos inadecuados pueden conducir teóricamente a la perforación de la coroides con sangrado posterior, pero en nuestra investigación ningún ojo fue dañado. Sin embargo, es posible que la hemorragia sub-conjuntival que normalmente es reabsorbida dentro de unos días y no presenta otra vez como una complicación.

Estudios recientes han proporcionado suficiente evidencia de un aumento significativo en los valores ERG escotópicos, MAVC y MY, a 90 y 180 días post injerto autólogo. Sin embargo, el aumento fue mayor si la media de grosor retiniano (RTA) grabada por SD-OCT fue mayor de11,26. Se cree que las células injertadas quirúrgico pueden producir GFs en el tejido circundante, coroides y retina, y que tienen propiedades neurotrófico y angiotrophic, como factor de crecimiento básico del fibroblasto (bFGF), factor de crecimiento endotelial vascular (VEGF) , factor derivado de epitelio del pigmento (PEDF), interleukin (IL), factor estimulante de colonias de macrófagos (M-CSF), factor estimulante de colonias de granulocitos-macrófagos (GM-CSF) y factor de crecimiento placentario (PlGF), mientras que las plaquetas producen derivado de las plaquetas crecerán factor (PDGF), derivado de las plaquetas factor de angiogénesis (PDAF), etc.6,7,12,13,21

Colocación de un injerto cerca de la coroides se cree para permitir que los GFs producidos entrar en el flujo de la coroides, para llegar a las células endothelial las células receptores, RPEs, Muller, fotorreceptores y finalmente a interactuar con ellos. En LRRT, los elementos autólogos injertados son útiles, cada uno a su manera, para la regeneración. Las células de grasa producen bFGF, factor de crecimiento epidérmico (EGF), factor de crecimiento insulínico-1 (IGF-1), IL, β factor de crecimiento transformante (TGF-β), PEDF y adiponectina21. El ADSCs producen bFGF, VEGF, M-CSF, GM-CSF, PlGF, TGF-β, factor de crecimiento de hepatocito (HGF), IGF-1, IL y angiogenina6,7. Las plaquetas producen PDGF, IGF-1, TGF-β, VEGF, bFGF, EGF, PDAF y thrombospondin (TSP)6,12.

Algunos factores promueven la regeneración endotelial, y algunos estimulan la proliferación de la ADSC, favoreciendo la grasa autóloga y supervivencia del adipocito, mientras que otros inhiben neovascular procesos22,23,24. PEDF y bFGF favorecen la supervivencia del fotorreceptor, mientras que el EGF ejerce su acción sobre las células de Müller activación transcripción endógena bFGF y estimulando ADSCs para aumentar su actividad secretora25,27. Aunque normalmente son secretadas GFs por RPEs, esto no ocurre en maculopatía atrófica como resultado de los complejos de RPE/choriocapillaris. La secreción por las células del injerto de Paracrine GF contribuye a favorecer la supervivencia de fotorreceptor y choriocapillaris28. Por otra parte, M-CSF, GM-CSF y IL tienen efectos antiinflamatorios y quimiotácticos de los macrófagos, que participan en la eliminación de restos de células intrarretiniana, una función que fisiológicamente se lleva a cabo por RPEs29,30.

Los tipos de células injertados detrás de la coroides pueden garantizar constante secreción de GF en el flujo de la coroides. GFs pueden llegar desde la coroides a las células de la retina, interactuar con sus receptores de membrana y finalmente activar una vía intracelular. Los datos presentados sugieren que LRRT puede aumentar la perfusión coroides y trofismo de fotorreceptores no sólo a través de interacciones de bFGF-receptor, sino también a través de la estimulación de las células de Müller, RPEs y fotorreceptores retinianos. Como resultado, cambios de expresión génica y el efecto antiapoptótico final podrían explicar la neuroenhancement. Este mecanismo celular es la base de la capacidad de aumentar el rendimiento visual, como se destaca en los resultados clínicos en el grupo de injertado. En Resumen, LRRT podría ser útil para preservar la función visual de los pacientes afectados por AMD seco a largo plazo.

Sin embargo, como hemos demostrado en estudios previos, ERG de la cono-barra y barra ERG muestran una correlación altamente significativa con RTA, aunque esto no es el caso del ERGIO del cono. Esto puede explicarse por el hecho de que la función de la fóvea parece verse comprometida, aunque los volúmenes maculares en la DME seca continúa a ser regular, al menos en las etapas iniciales26. En esta patología, trofismo retiniano residual medido por RTA puede ser un criterio pronóstico para el tratamiento de LRRT, puesto que son más frecuentes en pacientes con RTA igual o superior a 250 μm26mejores resultados. El conjunto GF disponible podría resultar en neuroenhancement, que es proporcional a la presencia de áreas con una mayor celularidad, como registrado por actividad eléctrica26. En una etapa posterior, la celularidad del tejido deficiente no daría el efecto terapéutico que es buscado con el procedimiento, debido a las escasas interacciones receptor de GF-membrana.

Los próximos pasos de esta investigación requiere de la contratación de un mayor número de sujetos con mayor VA y fijación central determinando estadísticamente todas las pruebas indispensables necesarias para confirmar que la técnica es válida y para el estudio de los efectos bioquímicos. Puede argumentarse que el aumento del trofismo celular se refleja en la actividad visual del celular, medida objetivamente por el ERG, MAVC y mi11. Terapia basada en la GF puede proporcionar un tratamiento actualizado, selectivo, seguro y razonable en enfermedades oftalmológicas.

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Disclosures

Presentaron en ARVO 2015, mayo 3-7-Denver, CO - Estados Unidos.

Acknowledgments

Los autores no tienen ninguna agradecimientos.

Materials

Name Company Catalog Number Comments
Blunt cannula, 3 mm.  Mentor, Santa Barbara, CA.
Luer-LokTM syringe.  BD Biosciences, Franklin Lakes, NJ.
Regen-BCT tube.  RegenKit; RegenLab, Le Mont-sur-Lausanne, CH.
Centrifuge  RegenPRP Centri. RegenLab, Le Mont-sur-Lausanne, CH.
BD Venflon Pro Safety 22G x 1.00 inch (0.9 mm x 25 mm).  BD Biosciences, Franklin Lakes, NJ.
SPSS Statistics Version 19.0 IBM Corp., Armonk, NY, USA.
Confocal scanning laser ophthalmoscope  Nidek Inc, Fremont, CA Nidek F10 
Cirrus 5000 Spectral Domain-Optical Coherence Tomography Carl Zeiss Meditec AG, Jena, Germany  SD-OCT 
Maia 100809 Microperimetry  CenterVue S.p.A., Padua, Italy
Ocular electrophysiology electromedical system, C.S.O., S.r.l., Scandicci, Italy  Retimax for ERG 

DOWNLOAD MATERIALS LIST

References

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Medicina número 132 relacionada con la edad degeneración macular mejor agudeza visual corregida (BCVA) autólogo de la célula del injerto electroretinograma factor de crecimiento (GF) técnica de restauración de retina (LRRT) Limoli Microperimetry terapia regenerativa Suprachoroidal autoinjerto
Terapia regenerativa por autoinjerto Suprachoroidal célula en Degeneración Macular seca relacionada con la edad: informe preliminar <em>en Vivo</em>
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Limoli, P. G., Vingolo, E. M., Limoli, C., Scalinci, S. Z., Nebbioso, M. Regenerative Therapy by Suprachoroidal Cell Autograft in Dry Age-related Macular Degeneration: Preliminary In Vivo Report. J. Vis. Exp. (132), e56469, doi:10.3791/56469 (2018).

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