Summary
نحن تقرير طريقة جراحية لإدارة المخدرات بالإذن الداخلية من الرئيسيات غير البشرية، مرموز المشتركة (جاكتشوس كاليثريكس)، عبر غشاء النافذة جولة.
Abstract
الاستماع للبحث منذ فترة طويلة قد تيسر نماذج القوارض، على الرغم من أن في بعض الأمراض، لا يمكن لخص أعراض البشرية. هو مرموز المشتركة (جاكتشوس كاليثريكس) الصغيرة، ومن السهل التعامل مع عالم الجديد قرد الذي لديه تشريح مماثل من العظم الصدغي، بما في ذلك سلاسل أوسيكولار الإذن الوسطى والإذن الداخلية للبشر، مما بالمقارنة مع القوارض. هنا، نحن التقرير نهجاً جراحية استنساخه وآمنة، ورشيد لمكانة نافذة جولة cochlear لإيصال المخدرات إلى الإذن الداخلية مرموز المشتركة. لقد اعتمدنا الخلفي تيمبانوتومي، إجراء المستخدمة سريرياً في الجراحة البشرية، لتجنب التلاعب بغشاء الطبل التي قد تتسبب في فقدان السمع التوصيلي. لا يؤدي هذا الإجراء الجراحي إلى أي فقدان السمع كبيرة. هذا النهج أن كان ممكناً بسبب هيكل الفقاعة الكبيرة مرموز المشتركة، جانبية نصف دائري القناة والجزء العمودي للعصب الوجهي ينبغي النظر بعناية. هذا الأسلوب الجراحي يسمح لنا بأداء الإدارة الآمنة ودقيقة للمخدرات دون فقدان السمع، الذي يتسم بأهمية كبيرة في الحصول على دليل قبل الإكلينيكية لمفهوم للبحوث متعدية الجنسيات.
Introduction
فقدان السمع الحسي (سنهل) تنشأ أساسا من ضرر أو نقص في القوقعة. تتضمن الأسباب الشائعة سنهل الشيخوخة (مثل presbycusis)، العيوب الوراثية، والتعرض للضوضاء الصاخبة والعدوى والعقاقير السامة1. وتقدر منظمة الصحة العالمية (WHO) أن ما يزيد على 360 مليون شخص، يمثلون 5.3 في المائة سكان العالم، يعانون من الاستماع إلى خسارة2. ويقدر أيضا أن 1 في 900 لحديثي الولادة 1 في 2,500، المعتدل والشديد، وفقدان السمع الدائم خلقية عميقة، وحوالي واحد من بين كل ثلاثة بالغين تزيد أعمارهم عن 65 سنة لديهم درجة ما من فقدان السمع3. ومع ذلك، هناك لا فعالية العلاج السريري لفقدان السمع لهؤلاء المرضى.
جلسة استماع للبحث منذ فترة طويلة تم أداؤه باستخدام نماذج خنزير غينيا أو مكافحة القوارض، وقد اقترحت العديد من النهج، مثل العلاج الجيني والعلاج بالتجدد، كعلاج جديد لفقدان السمع. ومع ذلك، هناك فرق كبير بين البشر والقوارض من حيث النظام السمعي، ومن الصعب جداً ترجمة نماذج حيوانية للتطبيقات البشرية. مرموز المشتركة (C. جاكتشوس)، قرد عالم الجديد الناشئ من الأمازون، وأصبحت نموذجا الرئيسيات غير البشرية جذابة للبحوث الأساسية والدراسات المختلفة لعدة أسباب. أولاً، علم التشريح وعلم وظائف الأعضاء أكثر مماثلة لتلك التي للبشر بدلاً من القوارض. ثانيا، والمعلومات البيولوجية الأساسية حول هذه الأنواع، بما في ذلك الأمراض والشبكات العصبية، والسلوك، والجينوم، يتسم جيدا. المعالجة السمعية والصوتية، والترميز القشرية لتواترها، والتمثيل من الملعب، وتفاعلات سمعي صوتي والمراميز المشتركة تم أيضا الإبلاغ عن4،5،،من67 , 8 , 9 , 10-في دراسات نسيجية حديثة، الباحثين التعرف على أنماط التعبير مميزة 20 الصمم الجينات ومبادلات شاردة في القوقعة مرموز المشترك، ووجد أن خمسة الجينات التي سببية الصمم تدريجيا، وثلاثة وكان صيارفة شاردة، أنماط التعبير مختلفة عن تلك الخاصة بالقوارض11،12. هذه التشكيلات يؤدي بنا إلى الاعتقاد بأن مرموز المشترك أداة قوية لأبحاث السمع.
ملحوظة أهم سمات مرموز المشتركة كالحيوانات تجريبية كما يلي:
- سهولة التعامل مع حجم جسم صغيرة مقارنة ببعض الأنواع القديمة القرود العالم: والمراميز الكبار تزن 300-400 جرام وهي حوالي 60 سم في الارتفاع، ومماثل للفئران.
- الرئيسيات الإنجابية عالية: والمراميز بلوغ مرحلة النضج الجنسي في سن 18 شهرا، وهي قادرة على تحمل مرتين في سنة، وإنجاب 4 إلى 6 سنوياً.
- التعديلات الوراثية متاحة: ه ساساكي et al. نجحت في خلق وراثيا13 و14 من المغلوب الرئيسات باستخدام والمراميز بالتعديلات الوراثية المتورطين في الاضطرابات العصبية (مثل باركنسون في المرض ومرض الزهايمر).
- وكانت الخلايا الجذعية الجنينية (ES) والخلايا الجذعية (iPS) المستحثة pluripotent المنشأة15،16. على الرغم من أنها صعبة للحفاظ على نفس العدد من والمراميز بالمقارنة مع القوارض، الخلايا الجذعية أو خلايا iPS توفر فحوصات في المختبر الذي سيقلل العدد في فيفو الاختبارات المطلوبة.
لتسهيل أفضل متعدية البحوث في مجال الصمم والعلاج المحتملة لها، أنشأنا على بروتوكول دراسة تصوير باستخدام الأشعة المقطعية والتصوير بالرنين المغناطيسي، التخدير العام واختبارات السمع باستخدام الاستجابات السمعية جذع الدماغ (Abr). هذه النظم التجريبية قد توفر لنا فرص أفضل للحصول على دليل قبل الإكلينيكية لمفهوم الدراسات التي تعتبر ضرورية لسد الثغرات بين القوارض من الدراسات والتجارب السريرية. هنا، نحن تقرير طريقة جراحية لإدارة المخدرات بالإذن الداخلية مرموز المشتركة عبر غشاء النافذة جولة. للحصول على رؤية واضحة حول الإطار جولة، دون التلاعب غشاء الطبل الذي قد يتسبب في فقدان السمع التوصيلي، أنها مفيدة لنهج من تجويف الخشاء. سريرياً، وهذا النهج، يشار إلى راسخة "الخلفي تيمبانوتومي" وتستخدم عادة لجراحة زرع و cholesteatoma cochlear. ونحن نعتقد أن تيمبانوتومي الخلفي يسمح لنا بأداء الإدارة الدقيقة للمخدرات دون حمل فقدان السمع.
Subscription Required. Please recommend JoVE to your librarian.
Protocol
وأجريت جميع الإجراءات التجريبية في جامعة جيكي، طوكيو اليابان. وقد أقر التعامل مع الحيوانات وإجراءات تجريبية "رعاية الحيوان المؤسسية" و "استخدام اللجنة" "جامعة جيكي" (الموافقة على لا: 26-060) وتنفيذها وفقا للمبادئ التوجيهية المؤسسية لاستخدام الحيوانات المختبرية في جيكي الجامعة، التي تتفق مع المبادئ التوجيهية "مناسبة إجراء للحيوان تجارب مجلس العلم ل" اليابان (2006). وأجرى رعاية الحيوان وفقا لتوصيات الدليل لرعاية واستخدام الحيوانات المختبرية (معهد مختبر الموارد الحيوانية، 1996).
1-قبل الجراحة الفحص
- أن تفحص حسبت التصوير المقطعي (CT) الجمجمة من الحيوانات (والمراميز الموحد) بغية تيسير تحديد الهياكل التشريحية كل شهر واحد على الأقل قبل الجراحة.
- القيام بإجراء اختبار السمع شهر واحد على الأقل قبل الجراحة.
ملاحظة: هنا، استخدمنا العبر لتقييم حالة السمع. بإيجاز، وضعت تحت الجلد قطب إيجابية في الذروة وقطب إشارة سلبية في قاعدة الإذن حفز الظهرية. القطب الأرضي وضعت تحت الجلد في الجزء الظهري من الرقبة. 17 , 18 وقد أثارت Abr مع اندفاع نغمة (لهجة 1.0 ms انفجر المدة مع ارتفاع 0.1 مللي وسقوط الوقت). ثم تم تخفيض مستوى الصوت في الخطوات 10 dB من السعة القصوى لها. كل مستوى الصوت، كان متوسط استجابات 512 (مع الحافز استقطابية تناوبت). تم تعريف عتبة ABR كأدنى مستوى ضغط الصوت (SPL) في الذي يمكن أن يتم الكشف عن أي موجه.
2-التخدير
- سرعة الحيوانات من الليل قبل الجراحة تحت التخدير العام.
- إدارة إيسوفلوراني 4% والهواء المحيط في 5-6 مل/دقيقة مع التهوية قناع للوجه أو في تشكيل غرفة التعريفي لتحريض بطيء (الشكل 1A). التأكد من أن الحيوان لا يستجيب للمحفزات مؤلمة، مثل قرصه أخمص القدمين.
- أنيسثيستيزي والمراميز المشتركة مع الحقن العضلي (في عضلة الفخذ) من مزيج من ميديتوميديني (0.04 مغ/كغ) والميدازولام (0.4 مغ/كغ) وبوتورفانول (0.4 مغ/كغ).
- حقن الأمبيسلّين (0.08 mg/g) تحت الجلد 30 دقيقة أو أكثر قبل شق الجلد كالمضادات الحيوية قبل الجراحة.
- ضع مرموز في موقف ضعيف برأسه نحو الأعلى، وتمديد الرأس والرقبة. إصلاح الفك إلى الجدول باستخدام خيط نايلون، وسحب ما يصل اللسان للحصول على عرض جيد، أو استخدام المنظار إلى تصور ابيجلوتيس ودخول الحنجرة بدلاً من ذلك (الشكل 1B).
- إدراج أنبوب داخل رغامى على طول سطح الحنجرة ابيجلوتيس.
ملاحظة: من الممكن استخدام قسطرة الوريدية 16-قياس، أو قياس 6-الفرنسية أنبوب تغذية، كأنبوب داخل رغامى (الشكل 1). - تحقق اتكو2 من أنبوب داخل الرغامى بغية التأكد من أنها وضعت بشكل صحيح في القصبة الهوائية. بعد أن تم وضع الأنبوب وتم فحص حركة الغازات التنفسية، إصلاح أنبوب داخل الرغامى للوجه مرموز مع الشريط.
- المحافظة على التخدير بين إيسوفلوراني 1-3% خلال العملية.
- رصد SpO2، اتكو2، ودرجة حرارة الجسم ودرجة حرارة المستقيم أثناء عمليات. تنفيذ كافة الإجراءات على حصيرة تدفئة للحيلولة دون انخفاض في درجة حرارة الجسم.
3-قبل الجراحة إعداد
- إعداد مرموز في موقف ضعيف، وانحدر الرأس بزاوية 30-45 درجة للجانب غير المنطوق (الشكل 2A).
- حلق المنطقة بعد إذني الجانب المنطوق.
- تطهير منطقة الجراحي مع اليود الكحول والبوفيدون، في منطقة ما بعد إذني والقناة السمعية الخارجية على حد سواء.
- ضع ورقة ثني جراحية مع وجود ثقب جولة على مرموز (الشكل 2).
4-العمليات الجراحية
- حقن 1% ليدوكائين هيدروكلوريد (مع أدرينالين 1: 100.000، 0.1-0.2 مل) تحت الجلد في موقع شق الجلد. إجراء شق في الجلد بوستاوريكولار بشفرة على شكل المائدة المستديرة رقم 15.
- للارقاء، تطبيق الضغط على منطقة النزيف باستخدام شاش غارقة في أدرينالين 1:5,000 المخفف. الكي القطبين أيضا فعالة (الشكل 2).
- فتح الأنسجة الرخوة للمنطقة بعد إذني حتى أن غضروف إذني (ج) ويمكن التعرف على العضلات بعد إذني (m). كشف العظام القناة السمعية الخارجية التي يجب أن تكون مرئية العميق في الغضروف (الشكل 3A).
- لتأكيد عمق غشاء الطبل، يعرض جزء عظمى من حافة tympanic التي يمكن الاعتراف بها كالتصاق الجلد والعظام في أعمق جزء من قناة الإذن اللاحق.
ملاحظة: هذه الخطوة يتيح لنا أن ندرك مدى عمق الجزء الجانبي من تجويف الإذن الوسطى هو (الشكل 3A). - قشر العضلات بعد إذني (العضلات الترقوية والعضلات سبلينيوس الرأس والبطن الخلفي للعضلة ديجاستريك) نحو الجانب والذيلية، فصل من العظم الصدغي. ثم يعرض السطح جانبية من العظم الصدغي (العلامة النجمية في الشكل 3).
- جعل حفرة حوالي 5 مم خلف القناة السمعية الخارجية مع bur. الماس 1.0 مم (الشكل 3). استخدام سرعة حفر من 1,000-8,000 في الدقيقة تبعاً لموقع الحفر.
ملاحظة: سرعة بطيئة كافية للتلاعب حساسة قرب القناة نصف دائري أو العصب الوجهي. التنقيط والمياه المالحة في حفر الموقع بشكل صحيح لمنع الضرر الحراري. - تكبير الحفرة من حفر وتأكيد موقف القناة نصف دائري أفقي (HSC)، التي الانتفاخات نحو الخشاء تجويف (3D الشكل).
- تأكيد موقف العصب الوجهي الجزء العمودي الذي يدير الأمامي من HSC. حفر وإزالة جميع سيبتا العظام، إذا كانت موجودة، للحصول على رؤية واضحة للعطلة الوجه، الذي يقع في وسط منطقة الثلاثي بين العصب الوجهي وحبل طبلة.
- جعل ثقب صغير بحفر ما بين الجزء العمودي للعصب الوجهي وتيمبانيك ريم (العلامة النجمية في الشكل 4A) مع بر الماس قطرها 0.6 مم 1,000 لفة في الدقيقة.
- الانتقال بر موازية للجدار الخلفي من القناة لمنع الأضرار بالعصب الوجهي، مما يمكن اعتباره خط وردي من خلال العظام ضعفت. إيقاف الحفر فورا قبل أن يتعرض العصب كهيكل خط أبيض (الشكل 4 باء).
- ضمان يمكن تصور مكانة نافذة جولة من خلال الثقب (الشكل 4). ثم، تول المخدرات في المكانة بإبرة 25-قياس أو أرق. من أجل الاحتفاظ بالأدوية في إطار جولة المتخصصة، ضع حلاً لزج في المكانة (الشكل 4).
- بعد التأكد من أن الأرقاء أمن تسيطر، أغلق الطبقات (طبقة البشرة وطبقة الجلد) مع خياطة توقف بسيطة باستخدام المواضيع ماصة 6-0.
- إصلاح الشاش على الجرح الجراحي وإلصاق ضمادة.
5-بعد العملية الجراحية الرعاية
- تول أتيباميزولي هيدروكلوريد (0.15 مغ/كغ) عضليا في عضلة الفخذ استعداء ميديتوميديني.
- عندما يبدأ في التنفس العفوي، إزالة أنبوب داخل الرغامى.
- الحفاظ على مرموز المشتركة في وحدة العناية المركزة في 30% O2، 29 ℃ حتى التخدير يلبس لإكمال الشهوة.
- تأكيد أن هناك نتائج لا توحي بخلل وظيفي الدهليزية مثل رأرأة، وإرجاع الحيوان إلى القفص تربية.
Subscription Required. Please recommend JoVE to your librarian.
Representative Results
وأجرى تيمبانوتومي الخلفي دون أي مضاعفات مثل الإصابة بموقع الجراحية، نزيف مع إصابة الأوعية الدموية أو خلل الدهليزية، التي تحدث في بعض الأحيان مع التلاعب بالإذن الوسطى. نحن تيمبانوتومي الخلفي على الإذن اليمنى مرموز المشتركة عمرها 7 سنوات وتدار 1 ميليلتر من الفوسفات مخزنة المالحة إلى مكانة نافذة جولة. وقيست Abr قبل وشهرين بعد الجراحة (الشكل 5أ-ب). الطول الموجي، وعتبات Abr قابلة للمقارنة إلى17،دراسة سابقة18، ولم يطرأ أي تغيير في هذه المعلمات قبل وبعد الجراحة (الشكل 5ج). وهكذا، خلصنا إلى أن تيمبانوتومي الخلفي إجراء آمنة ومفيدة لإدارة المخدرات بمكانة مرموز المشتركة إطار جولة.
الشكل 1 : تنبيب الرغامى. (أ) تخدير مرموز مشتركة مع إيسوفلوراني 4% والهواء المحيط في التهوية قناع للوجه 5-6 مل/دقيقة. وبدلاً من ذلك، ضع مرموز المشتركة في دائرة التعريفي. (ب) وضع مرموز المشتركة في موقف ضعيف برأسه نحو الأعلى، وتمديد الرأس والرقبة. إصلاح في الفك الأعلى بخيوط النايلون للجدول وسحب ما يصل اللسان تصور ابيجلوتيس (رأس السهم) ودخول الحنجرة. (ج) إدراج أنبوب داخل رغامى على طول سطح الحنجرة ابيجلوتيس. 16-مقياس القسطرة الوريدية أو قياس 6-الفرنسية تغذية أنبوب يمكن استخدامها كأنبوب داخل رغامى. الرجاء انقر هنا لمشاهدة نسخة أكبر من هذا الرقم-
الشكل 2 : شق الجلد. (أ) وضع مرموز المشتركة في موقف ضعيف، وانحدر الرأس بزاوية 30-45 درجة للجانب غير المنطوق. حلاقة المنطقة بعد إذني الجانب العملية وتطهير مع اليود البوفيدون. الجمهورية التشيكية، الجمجمة الجانبية، كاليفورنيا، والذيلية الجانب، L، يسار، R، الجانب الأيمن. (ب) خط أسود يشير إلى خط شق الجلد. قبل شق الجلد، حقن 1% ليدوكائين هيدروكلوريد (مع أدرينالين 1: 100.000، 0.1-0.2 مل) تحت الجلد. (ج) فتح قص النسيج تحت الجلد حتى مرتفعة غضروف إذني (ج). الرجاء انقر هنا لمشاهدة نسخة أكبر من هذا الرقم-
الشكل 3 : الحفر في تجويف الخشاء. (أ) بعد إزالة الأنسجة اللينة، ستكون مرئية العضلات بعد إذني. م، والعضلات بعد إذني، غضروف ج، إذني. (ب) يتعرض سطح العظم الصدغي (العلامة النجمية) عندما هو مقشرة العضلات بعد إذني من العظام تجاه الجانب والذيلية. هيكل بنيوماتيزيد يمكن التعرف عليه بسهولة من خلال العظم الصدغي. وأدلى هول (ج) بالحفر مع بر الماس 1.0 مم حوالي 5 مم خلف عظم القناة السمعية الخارجية. (د) الخشاء تجويف مرموز المشتركة معظمها يتألف من تجويف واحد. من خلال توسيع ثقب حفر، يمكن التعرف تضخمات (HSC والخط المنقط) قناة نصف دائري أفقي نحو تجويف الخشاء بسهولة. الرجاء انقر هنا لمشاهدة نسخة أكبر من هذا الرقم-
الشكل 4 : تيمبانوتومي الخلفي. (أ) العصب الوجهي (FN) يمر عبر ممر عظمى تسمى القناة الوجه، وتشغيله بين الجدار الخلفي لعظم القناة السمعية الخارجية (PAC) وقناة نصف دائري أفقي (HSC). المنطقة الأمامية للعصب هو العطلة الوجه (العلامة النجمية). (ب) جعل حفرة من الحفر العطلة الوجه مع شريط الماس قطرها 0.6 مم. (ج) توسيع الحفرة، مكانة نافذة جولة (RWN) تصبح مرئية. (د) عن طريق الثقب في العطلة الوجه، فمن الممكن لإدارة الحل إلى RWN (السهم) مع إبرة 25-قياس أو أرق. الرجاء انقر هنا لمشاهدة نسخة أكبر من هذا الرقم-
الشكل 5 : تقييم استجابة (ABR) جذع الدماغ السمعية- أجرى تيمبانوتومي الخلفي على مرموز مشتركة عمرها 7 سنوات، وكانت تدار 1 ميليلتر من الفوسفات مخزنة المالحة إلى مكانة نافذة جولة. وقيست Abr قبل وبعد الجراحة، وترد على الطول الموجي الممثل في (أ) و (ب) على التوالي. الطول الموجي، وعتبات Abr، أثارت مع لهجة انفجر في ترددات الست، كانت مماثلة لدراسة سابقة17،18. (ج) لا يوجد ABR عتبة تغيير من قبل إلى بعد الجراحة. الرجاء انقر هنا لمشاهدة نسخة أكبر من هذا الرقم-
Subscription Required. Please recommend JoVE to your librarian.
Discussion
حجم تدفق الدم cochlear صغير للغاية، وتقدر بحدود 1/1,000,000 من إجمالي الإنتاج القلب في البشر، ووصول محدود بسبب وجود حاجز الدم-القوقعة التي تفصل الإذن الداخلية من التداول العام19 ،20. لهذه الأسباب، المخدرات أو إدارة ناقلات الأمراض الفيروسية في الإذن الداخلية مواتية، لا عن طريق الإدارة النظامية بل بالأحرى بالإدارة المباشرة. الماوس وتجارب خنزير غينيا، مختلف النهج أفيد فيها، مثل جولة عبر نافذة مع النهج بعد إذني أو نهج نهج البطني وكوتشليوستومي وتسليم endolymphatic sac ونصف دائري قناة21، 22،،من2324،،من2526.
في هذه الدراسة، كنا تيمبانوتومي الخلفي وإقامة إطار جولة كوسيلة محتملة للبحوث متعدية الجنسيات. تيمبانوتومي الخلفي هو نهج راسخ لإجراء العمليات جراحية سريرية وهو مناسبة للمشترك والمراميز لأنه يشبه الحرف التشريحية جوف الطبل من البشر، بينما الخشاء الطريق في معظمها يتألف من كبير تجويف واحد مع سيتا العظام رقيقة جداً. وفي الواقع، نحن أوفت بجميع الإجراء اللاحق تيمبانوتومي دون أي مضاعفات أو فقدان السمع في مرموز المشتركة. إذا كان يتم إجراء تيمبانوتومي الخلفي، إدارة المخدرات يمكن أن يؤديها تحت رؤية واضحة حول الأنسجة الهامة مثل القنوات نصف دائري، والعصب الوجهي، stapes، وجولة مكانة نافذة. من المذكرة، نحن إدارة الحل عن طريق تشغيل القاعدية القوقعة و HSC، الخلفي نصف دائري القناة، ومكانه نافذة جولة مع هذا النهج واحد. الإدارة في إطار جولة، وفقا لبحث استخدام الفئران، أقل الغازية ويوفر عملية توسيع حل أكثر توحيدا في القوقعة perilymph من كوتشليوستومي27. وأفيد أيضا أن الحقن المباشر من إتش عبر قناة نصف دائري نقل الجينات أظهرت توصيل الجينات أساسا في الجهاز الدهليزية26. تسليم endolymphatic sac يوفر الحقن المباشر للفضاء اندليمفاتيك ويقال النواقل الفيروسية بلغت الدهليزية نهاية الجهاز والقوقعة25. ولكن المعلومات حول الكفاءة يبدو غير كاف.
للقيام بعملية آمنة، معلومات تشريحية أمر حيوي. يشبه الحرف التشريحية الأساسية الطبل تجويف الإذن الوسطى والإذن الداخلية عند المقارنة بين البشر ووالمراميز المشتركة. الأجزاء التشريحية الهامة لتنفيذ العملية مثل مفترق الطرق بين تجويف الإذن الوسطى والتجويف الخشاء، وموقف العظيمات وموقف العصب الوجهي وحبل طبلة تشبه تماما للإنسان. ومع ذلك، توجد بعض الاختلافات. تجويف الخشاء البشرية يتكون من العديد من الخلايا في الهواء ونحن بحاجة إلى حفر هذه الخلايا الاقتراب من الإذن الداخلية. وهذا يسمى "قطع الخشاء" في إجراء العمليات الجراحية السريرية، ويستغرق وقتاً طويلاً ويدمر مورفولوجية الأصلي. من ناحية أخرى، مرموز المشتركة الخشاء تجويف تجويف واحد تقريبا مع سيتا العظام رقيقة جداً والقنوات نصف دائري أكبر والقوس بها في تجويف الخشاء عند مقارنة لجسم الإنسان. هذه الاختلافات مفيدة لإدارة المخدرات الإذن الداخلية. عند إدارة المخدرات اندولمف مباشرة، نهج القناة نصف دائري ممكن بجعل نافذة صغيرة HSC، كما سبق ذكره في الأنواع الأخرى26. على الرغم من أن هذا النهج لم يتم في هذه التجربة، يمكن أن يؤديها HSC مرموز المشتركة بسهولة نظراً لحجمه وسهلة الكشف. ومع ذلك، قبل اعتماد هذا النهج، ينبغي النظر في خطر ليمفورهيا، الذي يمكن أن يؤدي إلى ضعف السمع،. ونحن نفترض أن نهج القناة نصف دائري ليست مثالية نظام تجريبي لتقييم مستويات السمع بعد عملية. وبصفة عامة، لمنع ليمفورهيا، تعبئة الإطار بواسطة الأنسجة الدهنية والغراء فيبرينوجين فعالة.
في هذه الحالة، التركيز على عملية أقل الغازية، ووضع الحلول في إطار جولة الغشاء دون ثقب. ومع ذلك، لا يبدو إدارة واحدة فعالة على تقديم جرعة كافية من العقاقير أو النواقل الفيروسية perilymph. وهناك حل بسيط لهذه المشكلة هو جعل ثقب في غشاء النافذة جولة وحقن الحل مباشرة. كما هو موضح أعلاه، مما يجعل وجود ثقب في الإذن الداخلية يسبب بيد ليمفورهيا، الذي قد ربما حمل فقدان السمع، واختلال وظيفي الدهليزية في المرضى البشر، حتى هذا سيكون من الصعب تطبيق على إعداد سريرية. أيضا، خلافا للقوارض، والمراميز الأصل عاش في الأشجار، ونقل شاملة في قفص تربية، ذلك الخلل الدهليزية يمكن أيضا مضاعفات حرجة. ولذلك، في المستقبل، سيكون هاما لتحسين كفاءة انتشار المخدرات دون ثقب الغشاء نافذة جولة. أحد الاحتمالات هو استخدام مضخة ناضح والتحضير المستمر. مضخة ناضح ستوفر الإدارة مستمرة عبر قسطرة نصيحة الذين تمت تسوية في إطار جولة الغشاء. وفي الوقت الحاضر، يمكن استخدام الهلاميات المائية ploxamer407 والجيلاتين الاستعدادات متواصلة لإيصال الأدوية غشاء النافذة جولة. هذه الأجهزة وشركات تستخدم فعلا في تجارب سريرية28،29،،من3031.
باختصار، هذا الأسلوب الجراحي يسمح لنا بأداء الإدارة الآمنة والدقيقة من المخدرات إلى الإذن الداخلية دون فقدان السمع في الرئيسيات، الذي يتسم بأهمية كبيرة في الحصول على دليل قبل الإكلينيكية لمفهوم للبحوث متعدية الجنسيات.
Subscription Required. Please recommend JoVE to your librarian.
Disclosures
الكتاب ليس لها علاقة بالكشف عن.
Acknowledgments
العمل معتمد من قبل المنح إلى م. ف. من الحكومة اليابانية يأمرون كاكينهي (24592560، 15 ح 04991، و 15 ك 15624) ومؤسسة العلوم وتاكيدا على م. ف. وجيكي جامعة الاستراتيجية تحديد أولويات البحوث الصندوق إلى H.J.O.
Materials
| Name | Company | Catalog Number | Comments |
| common marmoset | CLEA Japan | EDM:C.Marmoset(Jic) | |
| isoflurane | Phizer | ||
| medetomidine | ZENOAQ | ||
| midazolam | astellas | ||
| butorphanol | Meiji Seika | ||
| ampicillin | Meiji Seika | ||
| lidocaine hydrochloride | AstraZeneca | ||
| 6-0 absorbent thread | ETHICON | RD-1 | |
| atipamezole hydrochloride | ZENOAQ | ||
| phosphate buffered saline | Wako | 045-29795 | |
| Surge Wave | Morita | TR-900-OR | |
| Diamond Bar 006 | Morita | 14070057 | |
| Diamond Bar 010 | Morita | 14070081 | |
| intensive care unit | Menix | P-100 |
References
- Liberman, M. C., Kujawa, S. G. Cochlear synaptopathy in acquired sensorineural hearing loss: Manifestations and mechanisms. Hear Res. 349, 138-147 (2017).
- World Health Organization. Deafness and hearing loss (Fact sheet N8300). , Available from: http://www.who.int/mediacentre/factsheets/fs300/en/ (2015).
- Thompson, D. C., et al. Universal newborn hearing screening: summary of evidence. JAMA. 286 (16), 2000-2010 (2001).
- Wang, X. Neural coding strategies in auditory cortex. Hear Res. 229 (1-2), 81-93 (2007).
- Wang, X. On cortical coding of vocal communication sounds in primates. Proc Natl Acad Sci U S A. 97 (22), 11843-11849 (2000).
- Bendor, D., Wang, X. The neuronal representation of pitch in primate auditory cortex. Nature. 436 (7054), 1161-1165 (2005).
- Bendor, D., Wang, X. Neural coding of periodicity in marmoset auditory cortex. J Neurophysiol. 103 (4), 1809-1822 (2010).
- Eliades, S. J., Wang, X. Sensory-motor interaction in the primate auditory cortex during self-initiated vocalizations. J Neurophysiol. 89 (4), 2194-2207 (2003).
- Eliades, S. J., Wang, X. Dynamics of auditory-vocal interaction in monkey auditory cortex. Cereb Cortex. 15 (10), 1510-1523 (2005).
- Eliades, S. J., Wang, X. Neural substrates of vocalization feedback monitoring in primate auditory cortex. Nature. 453 (7198), 1102-1106 (2008).
- Hosoya, M., Fujioka, M., Ogawa, K., Okano, H. Distinct Expression Patterns Of Causative Genes Responsible For Hereditary Progressive Hearing Loss In Non-Human Primate Cochlea. Sci Rep. 6, 22250 (2016).
- Hosoya, M., Fujioka, M., Kobayashi, R., Okano, H., Ogawa, K. Overlapping expression of anion exchangers in the cochlea of a non-human primate suggests functional compensation. Neurosci Res. 110, 1-10 (2016).
- Sasaki, E., et al. Generation of transgenic non-human primates with germline transmission. Nature. 459 (7246), 523-527 (2009).
- Sato, K., et al. Generation of a Nonhuman Primate Model of Severe Combined Immunodeficiency Using Highly Efficient Genome Editing. Cell Stem Cell. 19 (1), 127-138 (2016).
- Sasaki, E., et al. Establishment of novel embryonic stem cell lines derived from the common marmoset (Callithrix jacchus). Stem Cells. 23 (9), 1304-1313 (2005).
- Tomioka, I., et al. Generating induced pluripotent stem cells from common marmoset (Callithrix jacchus) fetal liver cells using defined factors, including Lin28. Genes Cells. 15 (9), 959-969 (2010).
- Harada, T., Tokuriki, M. Effects of click intensity and frequency on the brain-stem auditory evoked potentials in the common marmoset (Callithrix jacchus). J Vet Med Sci. 59 (7), 561-567 (1997).
- Harada, T., Tokuriki, M., Tanioka, Y. Age-related changes in the brainstem auditory evoked potentials of the marmoset. Hear Res. 128 (1-2), 119-124 (1999).
- Juhn, S. K., Hunter, B. A., Odland, R. M. Blood-labyrinth barrier and fluid dynamics of the inner ear. Int Tinnitus J. 7 (2), 72-83 (2001).
- Nakashima, T., et al. Disorders of cochlear blood flow. Brain Res Brain Res Rev. 43 (1), 17-28 (2003).
- Akil, O., Rouse, S. L., Chan, D. K., Lustig, L. R. Surgical method for virally mediated gene delivery to the mouse inner ear through the round window membrane. J Vis Exp. (97), (2015).
- Jero, J., Tseng, C. J., Mhatre, A. N., Lalwani, A. K. A surgical approach appropriate for targeted cochlear gene therapy in the mouse. Hear Res. 151 (1-2), 106-114 (2001).
- Iizuka, T., et al. Noninvasive in vivo delivery of transgene via adeno-associated virus into supporting cells of the neonatal mouse cochlea. Hum Gene Ther. 19 (4), 384-390 (2008).
- Kilpatrick, L. A., et al. Adeno-associated virus-mediated gene delivery into the scala media of the normal and deafened adult mouse ear. Gene Ther. 18 (6), 569-578 (2011).
- Yamasoba, T., Yagi, M., Roessler, B. J., Miller, J. M., Raphael, Y. Inner ear transgene expression after adenoviral vector inoculation in the endolymphatic sac. Hum Gene Ther. 10 (5), 769-774 (1999).
- Kawamoto, K., Oh, S. H., Kanzaki, S., Brown, N., Raphael, Y. The functional and structural outcome of inner ear gene transfer via the vestibular and cochlear fluids in mice. Mol Ther. 4 (6), 575-585 (2001).
- Praetorius, M., Baker, K., Weich, C. M., Plinkert, P. K., Staecker, H. Hearing preservation after inner ear gene therapy: the effect of vector and surgical approach. ORL J Otorhinolaryngol Relat Spec. 65 (4), 211-214 (2003).
- Nakagawa, T., et al. Topical insulin-like growth factor 1 treatment using gelatin hydrogels for glucocorticoid-resistant sudden sensorineural hearing loss: a prospective clinical trial. BMC Med. 8, 76 (2010).
- Piu, F., et al. OTO-104: a sustained-release dexamethasone hydrogel for the treatment of otic disorders. Otol Neurotol. 32 (1), 171-179 (2011).
- Plontke, S. K., et al. double blind, placebo controlled trial on the safety and efficacy of continuous intratympanic dexamethasone delivered via a round window catheter for severe to profound sudden idiopathic sensorineural hearing loss after failure of systemic therapy. Laryngoscope. 119 (2), 359-369 (2009).
- Wenzel, G. I., Warnecke, A., Stover, T., Lenarz, T. Effects of extracochlear gacyclidine perfusion on tinnitus in humans: a case series. Eur Arch Otorhinolaryngol. 267 (5), 691-699 (2010).
