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Neuroscience

Microcoil एक प्रकार का रोग के साथ हल्के अंतर्गर्भाशयी Hypoperfusion के एक चूहे मॉडल

Published: January 7, 2018 doi: 10.3791/56723

Summary

हल्के अंतर्गर्भाशयी hypoperfusion धातु microcoils के साथ धमनी का रोग द्वारा उत्पादित किया गया था भ्रूण में गर्भाशय और डिम्बग्रंथि धमनियों के आसपास लिपटे 17 दिन । इस प्रक्रिया के जंम के पूर्व hypoperfusion और अंतर्गर्भाशयी वृद्धि प्रतिबंध का उत्पादन किया ।

Abstract

अंतर्गर्भाशयी hypoperfusion/ischemia अंतर्गर्भाशयी/भ्रूण विकास प्रतिबंध, अपरिपक्व जंम, और कम जंम के वजन के प्रमुख कारणों में से एक है । इस घटना के अधिकांश अध्ययन गंभीर अंतर्गर्भाशयी ischemia या अंतर्गर्भाशयी hypoperfusion के ढाल की डिग्री के साथ मॉडलों के साथ या तो मॉडल में प्रदर्शन किया गया है । कोई अध्ययन वर्दी हल्के अंतर्गर्भाशयी hypoperfusion (MIUH) पर एक मॉडल में प्रदर्शन किया गया है । दो मॉडलों MIUH के अध्ययन के लिए इस्तेमाल किया गया है: एक धमनी गर्भाशय और डिम्बग्रंथि धमनियों के साथ गठन आर्केड के दोनों ओर की सीवन बंधाव पर आधारित मॉडल, और एक क्षणिक मॉडल द्विपक्षीय डिंबग्रंथि धमनियों और महाधमनी होने प्रत्यक्षता कतरन पर आधारित है । MIUH के उन दो कुतर मॉडल कुछ सीमाएं हैं, उदाहरण के लिए, नहीं सभी भ्रूण MIUH के अधीन हैं, गर्भाशय सींग में उनकी स्थिति पर निर्भर करता है । हमारे MIUH मॉडल में, सभी भ्रूण अंतर्गर्भाशयी hypoperfusion के तुलनीय स्तर के अधीन हैं । MIUH सभी चार गर्भाशय, यानी, द्विपक्षीय गर्भाशय और डिम्बग्रंथि धमनियों खिला धमनियों के हल्के प्रकार का रोग से प्राप्त किया गया था ।

धमनी एक प्रकार का रोग के लिए खिला धमनियों के आसपास लिपटे धातु microcoils द्वारा प्रेरित किया गया था । microcoils के साथ धमनी प्रकार का रोग उत्पादन हमें नियंत्रण, अनुकूलन, और बहुत कम अंतर-पशु परिवर्तनशीलता और एक कम मृत्यु दर, इस प्रकार सटीक मूल्यांकन को सक्षम करने के साथ कमी रक्त प्रवाह को पुन: पेश करने की अनुमति दी । जब ०.२४ मिमी के एक भीतरी व्यास के साथ microcoils का उपयोग किया गया था, दोनों अपरा और भ्रूण में रक्त का प्रवाह हल्का (अपरा में पूर्व-रोग के स्तर से लगभग 30%) की कमी थी । हमारे MIUH मॉडल के वंश स्पष्ट रूप से मस्तिष्क संबंधी, neuroanatomical और व्यवहार परीक्षा परिणामों में लंबे समय से स्थाई परिवर्तन को दर्शाता है ।

Introduction

अंतर्गर्भाशयी वृद्धि प्रतिबंध (IUGR) (भ्रूण विकास प्रतिबंध के रूप में भी जाना जाता है) के साथ शिशुओं (जन्म वजन < 10वाँ शतमक गर्भावधि उम्र के लिए), अपरिपक्व जन्म (का जन्म < ३७ सप्ताह के गर्भ में), और/या कम जन्म भार (< २५०० g) खाते के लिए सभी नवजात शिशुओं 2,3के लगभग 10% । इन मस्तिष्क संबंधी पक्षाघात और विकासात्मक विकारों (जैसे, ध्यान घाटे/सक्रियता विकार (एडीएचडी) और अधिगम विकारों के रूप में स्नायविक समस्याओं के साथ वर्तमान शिशुओं के कई) 3,4,5। उन स्थितियों में समानताएं और उनके एटियलजि और परिणामों में अंतर है । IUGR की एटियलजि multifactorial है, और अंतर्गर्भाशयी hypoperfusion के साथ जुड़े अपरा कमी गैर-विषम भ्रूण में सबसे आम कारण माना जाता है 7. एटियलजि के रूप में अच्छी तरह से multifactorial है, और chorioamnionitis सबसे लगातार कारण है 8

विकासशील मस्तिष्क पर हल्के अंतर्गर्भाशयी hypoperfusion (MIUH) का प्रभाव अस्पष्ट है । अंतर्गर्भाशयी hypoperfusion/ischemia के वर्तमान में उपलब्ध पशु मॉडल मुख्य रूप से या तो गंभीर hypoperfusion या hypoperfusion के साथ या बिना reperfusion के ढाल की डिग्री शामिल है 9,10,11। नैदानिक सेटिंग्स में, तथापि, MIUH के मामलों में ऐसी गंभीर परिस्थितियों को शामिल करने वालों की तुलना में कहीं अधिक बार माना जाता है । MIUH के वर्तमान में उपलब्ध मॉडल एक चूहे या तो गर्भाशय या डिम्बग्रंथि धमनी और एक कुतर द्विपक्षीय डिंबग्रंथि धमनियों और महाधमनी होने प्रत्यक्षता की कतरन शामिल मॉडल की सीवन बंधाव शामिल मॉडल रहे है 12,13, 14,15,16,17. इन मॉडलों के नुकसान में से एक व्यापक अंतर भ्रूण परिवर्तनशीलता, लगभग बरकरार छिड़काव के साथ भ्रूण के लिए गहरा hypoperfusion के साथ भ्रूण से लेकर, गर्भाशय के धमनी आर्केड के भीतर भ्रूण की स्थिति पर निर्भर करता है और डिम्बग्रंथि धमनियों । इन मॉडलों का एक और नुकसान उनके जन्म के बाद प्रत्येक भ्रूण की स्थिति को भेद करने में असमर्थता है; इसलिए, शोधकर्ताओं ने अपने जंम के बाद एक व्यक्ति के पिल्ला द्वारा अनुभवी अंतर्गर्भाशयी hypoperfusion की गंभीरता को भेद नहीं कर सकते ।

हम MIUH के एक चूहे के मॉडल को विकसित किया है एकाधिक धमनी प्रकार का रोग 1शामिल । लपेटन धातु सूक्ष्म-डिम्बग्रंथि और गर्भाशय धमनियों के आसपास ०.२४ मिमी के एक भीतरी व्यास के साथ कुंडलियों एक प्रकार का रोग का कारण बनता है, लेकिन रुकावट नहीं, रक्त वाहिकाओं के (चित्रा 1) । गर्भाशय की आपूर्ति धमनियों के सभी के समीपस्थ भागों में इन microcoils को लागू करने, यानी, द्विपक्षीय गर्भाशय और डिंबग्रंथि धमनियों, भ्रूण दिवस 17 पर (भ्रूण सप्ताह 20-25 के बराबर मनुष्यों में 18) में एक महत्वपूर्ण लेकिन हल्के कमी लाती है अपरा और भ्रूण के लिए रक्त का प्रवाह । तार के बाद रक्त के प्रवाह में कमी सभी चार गर्भाशय को खिला धमनियों को लागू कर रहे है मोटे तौर पर प्रत्येक अपरा और भ्रूण भर में एक ही हैं । भ्रूण मृत्यु दर 20% से कम है । पिल्ले के माध्यम से पैदा कर रहे है सहज श्रम 1-2 दिन पहले (भ्रूण दिन 21-22) सामांय से । लगभग सभी पिल्ले काफी कम जंम वजन 1प्रदर्शन पैदा कर रहे हैं । ग्रे और सफेद बात मात्रा स्पष्ट ऊतक नुकसान के बिना कम कर रहे हैं 1. नवजात सजगता, मांसपेशियों की कमजोरी, और बदल सहज गतिविधि 1के देरी से अधिग्रहण के साथ मौजूद पिल्ले । इस मॉडल के नैदानिक लक्षण और समय से पहले या IUGR के साथ पैदा हुए बच्चों के लक्षणों की नकल; बच्चों की अवधि के प्रदर्शन के साथ या सफेद बात चोट के बिना ग्रे और सफेद बात की मात्रा में कमी हुई 6, वर्तमान में स्नायविक विकास के मील के पत्थर, और इस तरह के एडीएचडी के रूप में उपस्थित व्यवहार समस्याओं 3,5; IUGR के साथ बच्चों को ंयूनतम neuroanatomical परिवर्तन प्रदर्शन, और ऐसे मोटर और संज्ञानात्मक देरी 4,7के रूप में बिगड़ा स्नायविक विकास का खतरा बढ़ गया है । अपरिपक्व जन्म और IUGR विभिन्न स्थितियाँ हैं, लेकिन दो शर्तें बुनियादी तंत्र को बाँटती हैं, यानी पूर्ण कालिक गर्भावधि उम्र से पहले अपरिपक्व दिमागों को अपमान.

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Protocol

सभी प्रयोगों प्रायोगिक पशु देखभाल और राष्ट्रीय मस्तिष्क और हृदय केंद्र, बंदू, जापान की उपयोग समिति द्वारा अनुमोदित प्रोटोकॉल के अनुसार प्रदर्शन किया गया ।

1. MIUH सर्जरी के लिए निम्नलिखित पशु और सामग्री तैयार करें

  1. गर्भावधि दिन 17, यानी, भ्रूण 17 दिन (E17) में समय पर गर्भवती Sprague-Dawley चूहों तैयार. बांधों ' औसत शरीर के वजन ३०७.० ± ४०.७ जी (± एसडी मतलब, n = 9) हैं ।
  2. धातु microcoils तैयार; भीतरी व्यास ०.२४ मिमी, सोने से लेपित इस्पात बनाया ।
  3. सामग्री की तालिका के अनुसार सभी सामग्रियों को तैयार करें ।

2. MIUH सर्जरी के लिए तैयार

  1. चूहा प्लेसमेंट के लिए ३७ डिग्री सेल्सियस पर एक हीटिंग पैड गर्म
  2. हीटिंग पैड पर एक बाँझ डायपर प्लेस
  3. एक पानी में स्नान ३७ डिग्री सेल्सियस पर गर्म बाँझ खारा

3. प्रदर्शन MIUH सर्जरी

  1. बाँझ हालत के तहत शल्य चिकित्सा प्रक्रियाओं प्रदर्शन. उपयोग करने से पहले ७०% इथेनॉल के साथ कुंडल, संदंश, सुई निष्फल । बाँझ दस्ताने का प्रयोग करें, और कभी कभार इथेनॉल स्प्रे लागू करने से संक्रमित ।
  2. इस चूहे को संज्ञाहरण प्रेरण बॉक्स में रखें । बॉक्स में 4% isoflurane परिचय (लगभग 5 मिनट) ।
  3. पशु पूरी तरह से प्रेरण बॉक्स में anesthetized है के बाद एक लापरवाह स्थिति में हीटिंग पैड पर एक बाँझ डायपर पर चूहे प्लेस । एक पैर की अंगुली चुटकी के लिए एक प्रतिक्रिया की कमी से संज्ञाहरण की गहराई के लिए जाँच करें । नाक शंकु के साथ 1.5-2.0% isoflurane बनाए रखें ।
  4. पेट पर नाभि से नीचे श्रोणि मेहराब के क्षेत्र के लिए लोमनाशक फोम लागू करें । कई मिनट के बाद, एक कागज तौलिया के साथ बंद लोमनाशक फोम पोंछ । एक शेविंग लोमनाशक फोम के लिए एक विकल्प के रूप में इस्तेमाल किया जा सकता है ।
  5. त्वचा के depilated क्षेत्र के लिए आयोडीन संक्रमित समाधान में लथपथ धुंध लागू करें ।
  6. शल्य चीरा के क्षेत्र के अलावा अन्य पेट को कवर करने के लिए एक दौर खोलने के साथ एक शल्य कपड़ा प्लेस । धुंध के कई टुकड़े कपड़े के लिए एक विकल्प के रूप में इस्तेमाल किया जा सकता है ।
  7. एक शल्य स्केलपेल का उपयोग करना, एक चीरा लगभग २.५ सेमी लंबे जघन हड्डी के ऊपरी किनारे से निचले पेट पर लंबी नाभि की ओर । फिर, नीचे मांसपेशी परत के माध्यम से एक चीरा बनाते हैं ।
  8. कपड़े के उद्घाटन के आसपास बाँझ धुंध के कई टुकड़े प्लेस, और गर्म खारा के साथ धुंध गीला ।
  9. धीरे पेट के दोनों पार्श्व पक्षों पुश, ताकि गर्भाशय सींग का एक हिस्सा चीरा से उभर रहे हैं ।
  10. ७०% इथेनॉल के साथ सर्जन के हाथों को संक्रमित ।
  11. धीरे उदर गुहा से संदंश का उपयोग कर के बिना मैंयुअल रूप से पूरे गर्भाशय सींग खींच । सर्जिकल संदंश का उपयोग करना उचित नहीं है, क्योंकि वे आसानी से नाजुक गर्भाशय, भ्रूण, और रक्त वाहिकाओं को उन्हें जोरदार और असमान रूप से संपीड़ित करके नुकसान पहुंचा सकते हैं ।
  12. गीला धुंध पर गर्भाशय सींग प्लेस ।
  13. अंय गर्भाशय हॉर्न के लिए एक ही प्रक्रिया करते हैं ।
  14. भ्रूण की संख्या गिनती ।
  15. लागू गर्म खारा अक्सर गर्भाशय गर्म और सर्जरी भर में गीला रखने के लिए ।
    1. जब यह बहुत खारा अवशोषित कर लिया है डायपर बदलें । स्थिरता बनाए रखने के लिए, दोहराएं ७०% इथेनॉल और आयोडीन के साथ साधन के सुझावों के साथ संक्रमण दस्ताने । गैर बाँझ उंगलियों को साधन के बाँझ सुझावों से दूर रखते हुए महत्वपूर्ण है.
  16. एक stereomicroscope के तहत डिम्बग्रंथि और गर्भाशय धमनियों के मुख्य आर्केड के समीपस्थ भाग की पहचान करें ।
    नोट: यह मुख्य आर्केड शाखाओं से अपरा करने के लिए अलग करने के लिए महत्वपूर्ण है । ध्यान दें कि शल्य चिकित्सा आपरेशन आसान हो सकता है जब गर्भाशय सींग से फ़्लिप किया जाता है । कभी-कभार, आर्केड के बहुत समीपस्थ भाग पर एक कुंडल लागू करना मुश्किल है, क्योंकि यह उदर गुहा और नाल के धमनियों के भीतर गहरी स्थित है आर्केड के समीपस्थ भाग के बहुत करीब है । इस मामले में, एक कुंडल पहले शाखा कांटे के बाद आर्केड के एक भाग के लिए लागू किया जा सकता है ।
  17. संदंश के साथ इसके समानांतर चलने वाली नस से धमनी को अलग करें और उन दोनों के बीच जगह बनाएं ।
  18. स्ट्रिंग का एक टुकड़ा (रेशम टांका ४.०, 5 सेमी लंबे) धमनी के नीचे रखें ।
  19. संदंश के साथ स्ट्रिंग के दोनों सिरों को ऊपर उठाएं ताकि धमनी को उठा लिया जाए और नाजुक नस से अलग किया जाए ।
  20. दूसरे हाथ में ठीक संदंश के साथ microcoil के किनारे होल्डिंग, लिफ्ट धमनी के बगल में एक microcoil जगह (चित्रा 2.1) ।
  21. microcoil के आसपास के तार का उपयोग करके उठाया धमनी घुमाने के लिए धमनी के आसपास microcoil लपेटो । यह आसान है के लिए तार के आसपास धमनी घुमाना से धमनी के चारों ओर कुंडल बारी बारी से (चित्रा 2.2) ।
  22. 3 या 4 मुड़ता धमनी घूर्णन के बाद (कुंडल 5 बदल जाता है), साइट है जिस पर कुंडल दूसरे किनारे पर आयोजित किया जाता है बदल जाते हैं । संदंश के साथ धमनी के आसपास लपेटा गया है कि कुंडल के किनारे पकड़ो । साइट है जिस पर स्ट्रिंग तार के दूसरे पक्ष को धमनी लिफ्टों बदलें । कुंडल के आसपास धमनी घुमाएं ताकि कुंडल पूरी तरह से (5 बदल जाता है) धमनी wraps (चित्रा 2.3, २.४) ।
  23. स्ट्रिंग को निकालें ।
  24. अंय तीन धमनियों के लिए एक ही प्रक्रिया प्रदर्शन करते हैं ।
  25. ध्यान दें कि अक्सर गर्भाशय के लिए गर्म खारा लागू करने के लिए महत्वपूर्ण है; अंयथा, भ्रूण की मृत्यु दर बढ़ जाती है, और हाइपोथर्मिया न्यूरोप्रोटेक्टिव हो सकता है ।
  26. धीरे उदर गुहा में गर्भाशय सींग वापस । संदंश के साथ पेट की दीवार चीरा के एक किनारे उठाने इस प्रक्रिया को आसान बना सकते हैं ।
  27. पेट की मांसपेशी सिलाई, और फिर सिलाई (रेशम टांका ४.०) के साथ उदर त्वचा । प्रत्येक सिलाई, यानी बाधित एकल टांके के बाद सीवन टाई ।
  28. पर और सर्जिकल चीरा के आसपास आयोडीन संक्रमित समाधान में लथपथ धुंध लागू करें ।
  29. प्रशासन ०.५ मिलीग्राम/किलोग्राम शरीर के वजन में चमड़े के नीचे पर एनाल्जेसिक meloxicam ।
  30. एक गर्म पिंजरे में वसूली के 30 मिनट के लिए अनुमति दें । जानवरों की जांच करें अगर पूरी तरह से जाग और पिंजरे के आसपास घूम रहा है, घर पिंजरे में वापस ।

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Representative Results

गर्भाशय, यानी, द्विपक्षीय गर्भाशय और डिंबग्रंथि धमनियों खिला धमनियों के सभी के लिए microcoils लगाने के बाद, सभी भ्रूण hypoperfusion के तुलनीय स्तर के अधीन हैं । ०.२४ मिमी के एक भीतरी व्यास के साथ microcoils के आवेदन उन धमनियों के हल्के प्रकार का रोग का कारण बनता है, जिससे नाल और भ्रूण के लिए रक्त के प्रवाह में एक हल्के कमी के कारण (चित्रा 3, अपरा में पूर्व-रोग के स्तर से लगभग 30%, देखें संदर्भ 1 विवरण के लिए) । बांध से पैदा पिल्ले का प्रदर्शन IUGR (तालिका 1) ।

बांधों में कुछ दिनों के बाद सर्जरी के दौरान hypoactive होने लगती है । इसके अलावा, बांधों किसी भी नजर जटिलताओं मौजूद नहीं है, और पूरी तरह से सर्जरी के बाद एक सप्ताह में ठीक हो । बांधों (मृत्यु अवलोकन अवधि के लिए 0% है) प्रसव के बाद एक लंबे समय के लिए जीने के लिए सक्षम हैं, और नर्स पिल्ले के लिए । कुंडलियाँ इसी स्थान पर रहती हैं.

तालिका 1. जंम के समय शरीर के वजन (प्रसव दिवस 0, P0) और भ्रूण दिवस 29 (E29), जो P6-8 था के बराबर दिन । नहीं सर्जरी नियंत्रण समूह में पिल्ले E23 पर पैदा हुए थे, जबकि उन में अन्तर्वासना-सर्जरी समूह 1 दिन पहले पैदा हुए थे (E22); हल्के अंतर्गर्भाशयी hypoperfusion (MIUH) समूह में उन 1-2 दिन पहले पैदा हुए थे (E21-22) सहज परिश्रम के द्वारा । इसलिए, E29 समकक्ष को पिल्ला गर्भावधि अवधि के आधार पर P8 करने के लिए P6 थे । (n = प्रत्येक समूह में 8-14, प्रत्येक सेक्स और प्रत्येक समय बिंदु के लिए) *P < ०.०१ vs. a no-सर्जरी नियंत्रण समूह और साथ ही एक अन्तर्वासना-सर्जरी समूह । एक तरफ़ ANOVA, जिसके बाद एक Tukey-क्रेमर का टेस्ट हुआ.

Figure 1
चित्र 1. गर्भाशय में शारीरिक धमनी प्रणाली की स्कीमा । चार microcoils को द्विपक्षीय डिम्बग्रंथि और गर्भाशय धमनियों के ऊपर धमनियों के आसपास स्थापित किया गया था । बिंदीदार तीर धमनी रक्त प्रवाह की दिशा का संकेत है । यह आंकड़ा हमारे पिछले प्रकाशन 1में से एक से संशोधित किया गया है । कृपया यहां क्लिक करें इस आंकड़े का एक बड़ा संस्करण को देखने के लिए ।

Figure 2
चित्र 2. एक धमनी के लिए एक कुंडल के आवेदन का चित्रण । 1. एक स्ट्रिंग के साथ ऊपर धमनी लिफ्ट । धमनी के बगल में एक microcoil रखें । 2. microcoil के आसपास की धमनी को घुमाकर microcoil को धमनी के आसपास लपेटा जाता है । 3. धमनी 3 या 4 मुड़ता घूर्णन के बाद (कुंडल 5 बदल जाता है), साइट है जिस पर कुंडल अंय बढ़त के लिए आयोजित किया जाता है बदल जाते हैं । संदंश का उपयोग कर धमनी के साथ साथ कुंडल के किनारे पकड़ो । जिस पर स्ट्रिंग के तार के दूसरे पक्ष को धमनी लिफ्टों साइट बदलें । 4. कुंडल के चारों ओर धमनी घुमाएं ताकि कुंडल पूरी तरह से (5 बदल जाता है) धमनी में लिपट जाए । कृपया यहां क्लिक करें इस आंकड़े का एक बड़ा संस्करण को देखने के लिए ।

Figure 3
चित्र 3. एक लेजर के साथ उत्पादित गर्भाशय की एक प्रतिनिधि छवि बिंदु flowmetry1 इस छवि को दर्शाता है बाएं गर्भाशय के सींग लेकिन सही नहीं में रक्त के प्रवाह में कमी आई, कुंडल के बाद एक प्रकार का रोग छोड़ डिम्बग्रंथि और गर्भाशय धमनियों में प्रदर्शन किया गया था । *: डिम्बग्रंथि और गर्भाशय धमनियों के आर्केड में कुंडल रोग के स्थानों; ऊपरी तारांकन डिम्बग्रंथि धमनी के समीपस्थ भाग से मेल खाती है, और कम एक गर्भाशय धमनी के समीपस्थ भाग से मेल खाती है । बिंदीदार रेखा छोड़ दिया गर्भाशय सींग में डिंबग्रंथि और गर्भाशय धमनियों का आर्केड इंगित करता है । लाल रंग अधिक रक्त प्रवाह को इंगित करता है, जबकि नन्हीं रंग कम रक्त प्रवाह को इंगित करती है । कृपया यहां क्लिक करें इस आंकड़े का एक बड़ा संस्करण को देखने के लिए ।

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Discussion

दोनों गर्भाशय सींग में दोनों डिम्बग्रंथि और गर्भाशय धमनियों के microcoil प्रकार का रोग सभी अपरा और भ्रूण में संगत और प्रतिलिपि अंतर्गर्भाशयी hypoperfusion पैदा करता है । hypoperfusion का स्तर अलग भीतरी व्यास के साथ microcoils का उपयोग करके संशोधित किया जा सकता है । चूहा एक बांध है जिस पर धमनी का रोग microcoils के साथ किया गया है इनर व्यास में ०.२४ mm IUGR और समय से पहले जंम का प्रदर्शन से पैदा पिल्ले (विवरण के लिए संदर्भ 1 देखें) । पिल्ले प्रदर्शन neuroanatomical और व्यवहार परिवर्तन है कि लक्षण और लक्षण के समान है अपरिपक्व बच्चों में मनाया । इन neuroanatomical परिवर्तन वेंट्रिकुलर इज़ाफ़ा शामिल, प्रांतस्था और कॉर्प्स महासंयोजिका के thinning, और मस्तिष्क वजन कम लेकिन कोई स्पष्ट कोशिका हानि या सिस्टिक घावों 1। व्यवहार परिवर्तन मनाया एक देरी नवजात पलटा शामिल हैं, मांसपेशियों की शक्ति और बदल सहज गतिविधि 1में कमी आई ।

अंतर्गर्भाशयी ischemia, पशु reperfusion के साथ एक छोटी सी अवधि में गंभीर ischemia पर आधारित मॉडल का अध्ययन करने के लिए अक्सर 10,11का इस्तेमाल कर रहे हैं । जब डिम्बग्रंथि और गर्भाशय धमनियों से गठित धमनी आर्केड के दोनों सिरों को कतरन द्वारा अवरुद्ध कर रहे हैं, गर्भाशय के सींग को रक्त की आपूर्ति (अपरा और भ्रूण सहित) पूरी तरह से रुक गया है । इसलिए, कतरन की अवधि कम होना चाहिए, या भ्रूण मर जाएगा । एक नैदानिक सेटिंग में, तथापि, हम सोचते है कि लंबे समय तक हल्के hypoperfusion अधिक बार के बजाय अचानक गर्भाशय और एक घंटे के भीतर अपनी पूरी वसूली के लिए रक्त के प्रवाह की नाकाबंदी का सामना करना पड़ा हो सकता है ।

एक या दोनों पक्ष (ओं) के गर्भाशय धमनी के आर्केड के टांका बंधाव शामिल है और उन कतरन कि द्विपक्षीय डिंबग्रंथि धमनियों और महाधमनी के बीच कुछ भीतरी जगह छोड़ देता है शामिल मॉडल कुतर हल्के लंबे समय तक की ही उपलब्ध मॉडल किया गया है अंतर्गर्भाशयी hypoperfusion १३,१४,१६,१९,२०. इन बंधाव और कतरन मॉडल कम reproducibility है, यानी, केवल कुछ भ्रूण जीवित है और hypoperfusion से पीड़ित हैं । जब डिम्बग्रंथि धमनी में रक्त का प्रवाह सीवन बंधाव द्वारा ब्लॉक किया गया है, भ्रूण अंडाशय के निकटतम स्थित, यानी, गर्भाशय सींग के शीर्ष पर, गहरा ischemia के अधीन है, जबकि गर्भाशय ग्रीवा और योनि के करीब स्थित भ्रूण के लिए कर रहे है कम या कोई रक्त की आपूर्ति में कम हो जाती है 12

प्रोटोकॉल में तीन महत्वपूर्ण चरण हैं । डिम्बग्रंथि और गर्भाशय धमनियों के मुख्य आर्केड के समीपस्थ भाग की पहचान करना आवश्यक है. मुख्य धमनी आर्केड अपरा के लिए कई शाखाओं है । इन शाखा धमनियों में से कुछ व्यास में बड़े हैं, और कभी-कभार मुख्य धमनी के रूप में लगभग के रूप में बड़े हैं । इसलिए, कई अंय शाखाओं में बंटी धमनियों के बीच से मुख्य धमनी भेद भ्रमित किया जा सकता है । मुख्य धमनी आर्केड व्यास में बड़ा नहीं है कि ध्यान दें । आर्केड के बगल में चल रहे नस कई बार धमनी की तुलना में व्यास में बड़ा है । धमनियों भी संकरा हो सकता है, शल्य उत्तेजना के जवाब में कसना के कारण । इसके साथ चल रही नस से धमनी को अलग करना एक नाजुक काम है. धमनी के adventitia आर्केड के अधिकांश भर में नस के साथ निकट संपर्क में है । ध्यान रखें कि नस खून आसानी से जब संदंश द्वारा छुआ । गर्भाशय को गर्म और गीला रखना महत्वपूर्ण है; अंयथा, बांध और भ्रूण तनाव और निर्जलीकरण से पीड़ित हो सकता है, और कई भ्रूण वितरण से पहले खो सकता है । इस कुंडल एक प्रकार का रोग मॉडल तकनीक की सीमा लंबी शल्य अवधि की आवश्यकता है । चार कुंडलियों को लगाने से शल्यक्रिया पूरी करने के लिए लगभग ६० मिनट की अवधि की आवश्यकता होती है. इस लंबी शल्य अवधि भ्रूण और बांध के लिए अतिरिक्त तनाव पैदा कर सकता है ।

हमारा मानना है कि इस पेपर में प्रस्तुत मॉडल MIUH का सबसे नैदानिक रूप से प्रासंगिक और प्रतिलिपि मॉडल है । इस मॉडल IUGR पर MIUH के लौकिक और अनुदैर्ध्य प्रभाव के आकलन के लिए अनुमति देता है ।

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Disclosures

लेखकों का खुलासा करने के लिए कुछ नहीं है ।

Acknowledgments

इस कार्य को JSPS और CNRS, JSPS KAKENHI अनुदान संख्या २६८६०८५८, और Narishige तंत्रिका विज्ञान अनुसंधान फाउंडेशन के बीच वित्तीय वर्ष २०१३ अनुसंधान विनिमय कार्यक्रम द्वारा समर्थित किया गया. हम डीआरएस का शुक्रिया अदा करते हैं । उपयोगी विचार-विमर्श के लिए मारिको हरादा-Shiba और क्योको Shioya. हम धंयवाद मारी फ्रूटा, Mutsumi यू, Ritsuko माकी, और डॉ ईएमआई तनाका उत्कृष्ट तकनीकी सहायता के लिए ।

Materials

Name Company Catalog Number Comments
Stereomicroscope
Isoflurane anesthesia machine
Anesthesia induction box
Heating pad
Diaper 30x40 cm
Depilatory foam or shaver
Iodine disinfectant solution
Gauze 10x20 cm 
Surgical drape 45x45 cm with a round opening 5 cm in diameter
Spray bottle with ethanol for disinfection
Cotton swab
Forceps with large blunt tips
Forceps with angled fine tips
Scissors
Surgical scalpel, blade size is 27mm long (no.10, Axel, AS ONE Corporation, Osaka, Japan)
Surgical suture needle
Metal microcoils; inner diameter 0.24 mm, made from gold-coated steel (SAMINI Co. Ltd., Shizuoka, Japan)
Silk suture 4-0
Sterile saline (0.9% sodium chloride)
Heating water bath
Plastic syringes (50ml) and needles (18G)

DOWNLOAD MATERIALS LIST

References

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तंत्रिका विज्ञान मुद्दा १३१ अंतर्गर्भाशयी hypoperfusion microcoil धमनी का रोग गर्भाशय धमनी डिंबग्रंथि धमनी चूहा भ्रूण अपरिपक्वता जंम के पूर्व हाइपोक्सिया-ischemia भ्रूण विकास प्रतिबंध अंतर्गर्भाशयी विकास प्रतिबंध कम जंम वजन
Microcoil एक प्रकार का रोग के साथ हल्के अंतर्गर्भाशयी Hypoperfusion के एक चूहे मॉडल
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Tsuji, M., Coq, J. O., Ogawa, Y.,More

Tsuji, M., Coq, J. O., Ogawa, Y., Yamamoto, Y., Ohshima, M. A Rat Model of Mild Intrauterine Hypoperfusion with Microcoil Stenosis. J. Vis. Exp. (131), e56723, doi:10.3791/56723 (2018).

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