Waiting
Login processing...

Trial ends in Request Full Access Tell Your Colleague About Jove
Click here for the English version

Neuroscience

Diffuse Reflektionsgraden spektroskopi: Kom kapillær Refill Test Under sin tommelfinger

Published: December 2, 2017 doi: 10.3791/56737

Summary

Denne protokol beskriver, hvordan brugen af diffuse polarisering spektroskopi kan forbedre den kliniske nytten af kapillar refill test. Vi foreslår en mere detaljeret analyse af forløbet af den kapillære refill i raske frivillige ved hjælp af diffuse Reflektionsgraden spektroskopi videoer og nye it slutpunkter.

Abstract

Kapillar refill testen blev indført i 1947 at hjælpe vurdere kredsløbet status hos kritisk syge patienter. Retningslinjer almindeligt, at opfyldning skal ske inden for 2 s efter frigivelse 5 s af fast tryk (f.eks.af lægens finger) i den normale sunde liggende patienten. Gangen langsommere refill indikerer dårlig hud perfusion, som kan være forårsaget af forhold, herunder sepsis, blodtab, hypoperfusion og hypotermi. Siden sin indførelse, er blevet drøftet den kliniske anvendelighed af testen. Fortalere påpege dens gennemførlighed og enkelhed og hævder, at det kan indikere ændringer i vaskulære status tidligere end ændringer i vitale tegn såsom puls. Kritikere, på den anden side understrege, at manglen standardisering i hvordan prøven udføres og den stærkt subjektive natur af den blotte øje vurdering samt testens følsomhed over for omgivende faktorer, markant sænker den kliniske værdi. Formålet med den nuværende arbejde er at beskrive i detaljer løbet af hændelsen refill og foreslå potentielt mere objektiv og nøjagtige slutpunkt værdier for kapillar refill test ved hjælp af diffuse polarisering spektroskopi.

Introduction

Vurdering og triage af de kritisk syge patient Centre på klassisk vitale tegn blodtryk (BP), puls (HR), respirationsfrekvens (RR), iltmætning og krop temperatur1. Ændringer i disse parametre vises relativt sent i løbet af kredsløbssygdomme forringelse. For eksempel, i blødning, vil et fald i BP ikke forekomme indtil blodtab bliver moderat til svær2, og HR stigning kan også være en ufølsom og uspecifik markør3.

Kapillar refill test (CR test) kan tilbyde tidligere angivelse af begyndende kredsløbskollaps, som refill tid menes at ændre før vitale tegn samt kliniske udseende af kold, klam og skjoldet hud1,4 , 5. kapillær refill test udføres typisk af ansøgning og derefter udgivelse af en fast blanchering pres på huden med tidspunktet (i sekunder) for returnering af blod til området blancheret. Ifølge retningslinjerne, bør refill ske inden for 2 sekunder efter udgivelsen af 5 sekunder af fast tryk (f.eks.af lægens finger) i den normale sunde liggende patient6. Begrundelsen for testen er, at en langsommere refill tid tyder på dårlig hud perfusion, muligt forårsaget af en af en række kritiske begivenheder såsom sepsis, blodtab, akut hjertesvigt eller hypotermi.

I øjeblikket er der ikke enighed om en topmoderne metode for at udføre CR test6,7,8,9,10. Stridsspørgsmål omfatter mangel på standardisering af de faktiske blanchering manøvre og afhængigheden af subjektive (dvs., blotte øje) vurderinger af refill slutpunkt7,9,11. Desuden er der tegn på at køn påvirker CR tid12,13. Temperatur, ambient og hud, er kendt for at påvirke kapillær refill tid, men i hvilket omfang er ikke klart. Endelig er brugen af forskellige måling sites, perifere eller centrale, sandsynligvis en yderligere årsag til variation i resultaterne med få undersøgelser på dette område14,15.

I den nuværende arbejde brugte vi en optisk bioteknologi system til at optage kursus forrentning af blod og den efterfølgende hyperemic svar set under CR test. Systemet udnytter diffuse polarisering spektroskopi til at kvantificere og beskrive mere detaljeret end muligt med det blotte øje, den tid og forløb af den kapillære refill. Systemet består af et standard digitalkamera, monteret med en ekstern lys ring med 92 hvide lysdioder, og specielt udviklet software. Linsen og to polarisering filtre, vedlagt ortogonalt foran lysdioder, blokerer lys, der har været direkte reflekteres fra hudoverfladen tillader kun lys, der er blevet depolariseret i væv at nå frem til kameraet. Dette skaber en "sub-epidermal" billede af væv til en dybde af ca. 0,5 mm. Billedet er opdelt i sin farveniveauer og røde og grønne indholdet for hver pixel er beregnet, generere en værdi, der svarer til væv koncentrationen af røde blodlegemer16. I video-mode, systemet tidsmæssige opløsning er 0,02 s.

Subscription Required. Please recommend JoVE to your librarian.

Protocol

Undersøgelse beskrives her fulgt retningslinjerne for lokale etik og blev godkendt af den regionale etiske gennemgang bord i Linköping (tilladelse nummer 2015/99-31).

1. informeret samtykke og Screening

  1. Indhente informeret samtykke fra emnet.
  2. Skærmen efter inklusion/udelukkelse kriterier.
    Bemærk: Inklusionskriterierne var: (i) sund voksen > 18 år, (ii) formår at forstå skriftlige og mundtlige information, og (iii) giver mundtlige og skriftlige samtykke. Udelukkelseskriterier var: (i) ude af stand eller uvillige til at give informeret samtykke, (ii) løbende hudsygdomme, (iii) hjerte-kar-sygdom, (iv) medicin, der kan forstyrre vaskulær funktion. Piller er tilladt. Hvis emnet bruger p-piller bør dette være noteret på fagets protokol fil, (v) ar gratis og ikke-bruised hud af panden, (vi) ingen indtagelse af koffein eller tobak 2 h før igangsættelsen af test og (vii) ingen anstrengende fysisk aktivitet mindst 2 h pr IOR udbrud af testen.

2. akklimatisering og opsætning af udstyr

  1. Lad testpersonen akklimatisere i mindst 20 min. i en liggende stilling før igangsættelsen af testen.
    Bemærk: Rette positionering af emnet og udstyr er vist i supplerende figur 1.
  2. Opsætning af kamera optagelse af kapillar refill test ved hjælp af de udpegede software og digital kamera (se tabel af materialer).
    1. Tilslut USB-kablet til kameraet og computeren og justere kameraets indstillinger til videotilstand.
    2. Tænde kameraet og sørg for, at det forbinder til computeren.
    3. Start fjernstyrede kamera software (Se Tabel af materialer).
    4. Slå omgivende lys og slå computerskærmen fra området måling.

3. dataindsamling

  1. Klik på visningen"liv" (Sic) knappen, og tryk på "Start".
  2. Skifte mellem 'video' mode og 'TiVi' mode ved at klikke på alternativknapperne (dette påvirker ikke indspilningen, kun den på skærmen præsentation). Sikre, at en live video stream af fagets pande er synlige på skærmen på kameraet og på computerskærmen.
  3. Justere kameraet til en højde af ca 15 cm direkte over fagets pande.
  4. Sørg for, at fokus i kameraet er indstillet til "AF" (bil indstille).
  5. Spørg emne at holde sit hoved stadig for Proevens varighed og til at afstå fra at tale. Oplyse om, at det er OK at holde hans/hendes øjne lukket under prøvningen ved at sige: "Please, læg dit hoved på denne pude og holde dit hoved stadig for Proevens varighed. Venligst, tal ikke under de 20 sekunder, at testen vil vare. Du kan holde øjnene lukket for hele tiden, hvis du finder lyset for lyse ".
  6. Flyt ikke kameraet mens du optager.
  7. I vinduet "liv" finde og klik "HD record for" at starte en kontinuerlig optagelse for 20 s. Bemærk, at varigheden af optagelse (sekunder), kan ses udstillet kamera; de første 5 s af optagelsen er at erhverve den normale kapillære blodkoncentration af panden.
  8. I slutningen af 5 s af baseline optagelse, gælder en fast blanchering pres til området måling til 5 s. Brug pegefinger med en plastik tsk mellem fingre og panden til pres udligning og temperatur isolering.
  9. Trykket og hurtigt trække undersøgerens finger og plast tsk fra området måling.
  10. Fortsætte optagelsen for en anden 10 s til at fange den efterfølgende hyperemic svar.
  11. Stoppe optagelsen ved at klikke på "Stop" i vinduet "liv".
  12. Når optagelsen er stoppet, åbnes et vindue til at gemme og navngive filen (i .mov format); Vælg en mappe og et navn til videoen. Afbryd ikke kameraet fra computeren, mens videoen er downloadet til den angivne mappe på computeren.

4. dataanalyse

  1. Gå videre til at udføre image analyse og kurve konstruktion med en dedikeret analyse software (Se Tabel af materialer).
  2. Start analyse software ved at dobbeltklikke på desktop-ikonet.
  3. Når softwaren er startet, om hovedskærm, Vælg "Filmside."
  4. I vinduet "Filmside" Klik på "Indlæs film." Afvente softwaren til at uploade og analysere filmen. Dette kan tage til et par minutter afhængigt af størrelsen af videofilen.
  5. Når upload og analyse af filmen er færdig, klik på "Gem som billeder" og vente på softwaren til at analysere videoen.
    Bemærk: Dette vil automatisk oprette en ny mappe på den computer, der indeholder video-sekvens opdelt i individuelle jpeg-billeder.
  6. Når inddelingen af videoen i individuelle jpeg-billeder er færdig, find og vælg "Beskær billeder side" i vinduet hovedskærmen.
  7. "Beskær billeder side", klik på "Første foto" og Naviger til den mappe, der indeholder jpeg-fotos fra videoen og vælg det første billede skal analyseres; softwaren vil automatisk vælge de følgende billeder af dette parti.
  8. Klik på "Rediger" menuen og vælge mellem cirkulære eller rektangulære markører for det pågældende område.
  9. I vinduet "Vælg fotos" finde den "Faktiske foto" boks og skrive navnet på det første billede i det parti, hvor investigators fingeren er trukket helt tilbage fra området måling. Hvis du vil finde dette foto, ser gennem den mappe, der indeholder de enkelte billeder fra videoen.
  10. Vælg en region af interesse ved at klikke på og holde venstre museknap nede og tegne en cirkel eller rektangel i vinduet foto, der er inden for området blancheret grænser. Det valgte område af interesse anvendes automatisk til alle billeder af partiet.
  11. Klik på menuen "Filer" og vælg "Gem ROI" til at gemme placeringen af det valgte område af interesse for fremtidig reference.
  12. Klik på knappen "Kurve tracker" og vente på softwaren til at analysere det pågældende område.
  13. Når kurven tracker vindue åbnes, vises ændringen i røde blodlegemer koncentration for det valgte område af interesse for Proevens varighed som en kurve. Den on-screen præsentation kan ændres ved at klikke på de forskellige radio-knapper. Dette vil ikke påvirke de rå data.
  14. Klik på "Eksporter data" og gemme rå data udskriften for yderligere analyse.
  15. I rå data udskriften, navigere til den kolonne, der hedder "Betyde intensitet TiVi værdier." Generere tre nye kolonner ved siden af denne kolonne for "billede nummer," "samlede tid", og "kapillær refill tid" starter ved 1 s, 0 s, og 0 s og med en incrementation af 1 s, 0,02 s og 0,02 s, henholdsvis.
    Bemærk: "Kapillær refill tid" korrelerer til tidspunktet, hvor den efterfølgende reaktion på frigivelsen af blanchering presset og starter på den gennemsnitlige værdi, der repræsenterer den første foto hvor investigators fingeren er trukket helt tilbage fra området måling.
  16. Slet værdier mellem baseline og kapillær refill tid, da disse kun indeholder støj genereret af investigators pegefinger og plast tsk under den blanchering manøvre.
  17. Beregne en gennemsnitsværdi for basismåling (første 5 s af optagelsen).
  18. Find den første værdi, der svarer til eller overgår den beregnede gennemsnitlige baseline værdi og Bemærk tidspunkt i kolonnen "Kapillær refill tid". Dette tidspunkt repræsenterer "tid til at vende tilbage til baseline 1."
  19. Finde den højeste mener intensitet værdi af de værdier, der er genereret efter pres frigivelse og Bemærk tidspunkt i kolonnen "Kapillær refill tid". Dette tidspunkt repræsenterer "Gang hen til højdepunkt."
  20. Find andet værdi, som er mindre end eller lig med den beregnede gennemsnitlige værdi for basismåling og Bemærk tidspunkt i kolonnen "Kapillær refill tid". Dette tidspunkt repræsenterer "tid til at vende tilbage til baseline 2."

Subscription Required. Please recommend JoVE to your librarian.

Representative Results

Filme forløbet af den kapillære genpåfyldning genererer store mængder af data ikke muligt at opnå ved at blotte øje vurdering. Vi foreslår her nye endepunkter for at yderligere at forbedre anvendeligheden af CR test som en tidlig indikator for forringelse af kredsløbssygdomme status. Vi kalder disse slutpunkter: "Baseline", "Blod nul" (eller "BZ"), "tid til at vende tilbage til Baseline 1" (eller "tRtB1"), "Tid til Peak" eller "TPK" Værdien "Baseline" er afledt ved at beregne en gennemsnitsværdi af alle de værdier, der er opnået i løbet af de 5 s basismåling. "Blod nul" er gennemsnitsværdien erfaringerne fra det første billede i området blancheret umiddelbart efter trykket er frigivet. Definitionen af "tRtB1" er tid i sekunder, efter udgivelsen af blanchering trykket indtil området blancheret er lig eller ovenfor "baseline" værdi. "Tpk" svarer til det tidspunkt, hvor den højeste værdi er registreret. Figur 1 viser et udvalg af regelmæssig fotografier og farvekodede billeder fra en test udført på panden af en sund mand frivillige ved stuetemperatur. Figur 2 viser en repræsentativ kurve fra en kapillær refill test fra den samme test som beskrevet ovenfor. Måleperioden i den afbillede test var 3 min, gangen ikke gældende i en klinisk situation, men illustrerer, hvor lang tid det tager, før værdien er tilbage til den oprindelige værdi.

Figure 1
Figur 1: kapillar refill svar i en sund volontøren. Et udvalg af regelmæssig fotografier (øverste række) og korreleret farvekodede billeder (nederste række) fra en kapillær refill test udført på panden af en sund mandlige frivillige. (A) viser pande forinden pres, området blancheret umiddelbart efter udgivelsen af pres (B) og hyperemic svaret (C). Venligst klik her for at se en større version af dette tal.

Figure 2
Figur 2: detaljeret profil af kapillar refill svar med foreslåede slutpunkter. Grafen viser forløbet af den kapillære genpåfyldning, som ændringen i røde blodlegemer koncentration over tid, på panden af en sund mand frivillige og den nye foreslog slutpunkter genereret af analyse af diffuse Reflektionsgraden spektroskopi videoer. Værdien "Baseline" er afledt ved at beregne en gennemsnitsværdi af alle de værdier, der er opnået i løbet af de 5 s basismåling. "Blod nul" er gennemsnitsværdien erfaringerne fra det første billede i området blancheret umiddelbart efter trykket er frigivet. Definitionen af "tRtB1" er tid i sekunder, efter udgivelsen af blanchering trykket indtil området blancheret er lig eller ovenfor "baseline" værdi. "Tpk" svarer til det tidspunkt, hvor den højeste værdi er registreret. Venligst klik her for at se en større version af dette tal.

Supplerende figur 1: måling opsætning og placering af emne. Figuren viser en repræsentativ setup for måling af CR svar på panden i en hvile, sund emne. Polarisering filtre og bly lysring er monteret på et standard digitalkamera. Kameraet er knyttet til et stabilt stativ med en fleksibel, 3-vejs justerbar hoved giver mulighed for korrekt positionering. Fast trykket er anvendt til området måling for 5 s ved hjælp af en standard, plastik teske. Venligst observere at omgivende lys bør være nedtonet for at undgå interferens med målingen. Venligst klik her for at downloade denne fil.

Subscription Required. Please recommend JoVE to your librarian.

Discussion

For at få de bedste resultat med et system, skal variation forårsaget af miljøfaktorer kontrolleres. Alle omgivende lys skal være slået fra. Kameraet skal være placeret lodret justering med området måling. For at sikre en konstant måling område, bør emner ikke bevæge sig eller tale under målingen. Af samme grund er kameraet fortrinsvis monteret til et stativ at undgå bevægelser og opretholde en konstant afstand til området måling. Testpersoner bør undgå koffein17, tobak18og hård motion19 i mindst to timer før testen og hvile i 20 min før start af måling, da disse faktorer er kendt for at påvirke mikrocirkulationen. Testpersoner bør være i en liggende stilling med målestedet på hjerte niveau at undgå positionelle omfordeling af blodvolumen. Stuetemperatur og hud temperatur bør overvåges, da temperaturen er kendt for at påvirke refill tid20,21.

Der er andre bioteknologi alternativer til blotte øje vurdering og fremlagt teknikken, som kunne bruges til at måle CR test. De fleste af disse teknikker udnytte ændringer i polariserede eller unpolarized lys efter refleksion på huden22,23,24 . Andre teknikker måler ændringer i huden farve ved hjælp af et videokamera25, som er muligvis mest svarer til den kliniske situation. Yderligere, indirekte foranstaltninger af blodgennemstrømning kan opnås ved at sammenholde overfladetemperatur til ændringer i dermal blod flow26. Disse alternative teknikker er designet til at måle et begrænset område af huden eller er til brug kun i én anatomiske websted (f.eks., fingre)23,24,25.
Med dette nye system er det muligt at skifte mellem video og stadig fotografering og fange et stort område, for eksempel en legemsdel eller endda hele kroppen eventuelt med høj tidsmæssige og rumlige opløsning. Vi hævder derfor, at dette er en attraktiv teknik til yderligere fysiologiske og patofysiologiske karakterisering af kapillar refill svar.

Det skal bemærkes, at Kamerasystemet og huden blegning manøvre beskrevet og anvendt her er designet til forskningsformål og endnu ikke er optimeret til klinisk brug. For at være fuldt brugbar som en metode til overvågning af kritisk syge patienter, skal systemet være miniaturized og forenklet. Ideelt set bør Kamerasystemet integreres med en enhed, der leverer en standardiseret blanchering pres og præsenterer en fysiologisk relevante udlæsning øjeblikkeligt. Selv om vi er på et tidligt stadium at undersøge de grundlæggende fysiologi af CR svar, mener vi, at de fleste af disse udfordringer kan administreres af teknologisk udvikling.

Subscription Required. Please recommend JoVE to your librarian.

Disclosures

Ingen økonomisk støtte fra WheelsBridge AB var involveret i gennemførelsen af undersøgelsen. Forfatteren JH er ansat af Östergötland County Council, men har en royalty aftale med WheelsBridge AB. Den ledende forfatter CDA har en akademisk fuldtidsstilling men også begrænsede deltagelse i WheelsBridge AB.

Acknowledgments

Vi vil gerne udvide vores taknemmelighed over for Linköping personale af den svenske Defense agentur (FOI) og Center for katastrofemedicin og traumatologi (KMC) for deres venlige støtte.

Materials

Name Company Catalog Number Comments
TiVi701 Camera WheelsBridge AB TiVi701 Camera, version 1.5.1 Software
TiVi700 WheelsBridge AB TiVi700 Analysis, version 1.2.9 Software
Canon EOS 700D Canon U.S.A., inc. Canon EOS 700D Digital SLR Camera
Camera stand Manfrotto 681B Modified camera stand to hold the digital camera in position
Camera stand Disa Denmark 9020B Modified camera stand to hold the digital camera in position

DOWNLOAD MATERIALS LIST

References

  1. Strehlow, M. C. Early identification of shock in critically ill patients. Emerg Med Clin North Am. 28 (1), 57-66 (2010).
  2. Advanced Life Support, G. Acute Medical Emergencies. , Wiley-Blackwell. 67-84 (2010).
  3. Brasel, K. J., Guse, C., Gentilello, L. M., Nirula, R. Heart rate: is it truly a vital sign? J Trauma. 62 (4), 812-817 (2007).
  4. De Backer, D., Ortiz, J. A., Salgado, D. Coupling microcirculation to systemic hemodynamics. Curr Opin Crit Care. 16 (3), 250-254 (2010).
  5. Mrgan, M., Rytter, D., Brabrand, M. Capillary refill time is a predictor of short-term mortality for adult patients admitted to a medical department: an observational cohort study. Emerg Med J. 31 (12), 954-958 (2014).
  6. Advanced Life Support, G. Acute Medical Emergencies. , Wiley-Blackwell. 55-65 (2010).
  7. Lewin, J., Maconochie, I. Capillary refill time in adults. Emerg Med J. 25 (6), 325-326 (2008).
  8. Lobos, A. T., Menon, K. A multidisciplinary survey on capillary refill time: Inconsistent performance and interpretation of a common clinical test. Pediatr Crit Care Med. 9 (4), 386-391 (2008).
  9. Otieno, H., et al. Are bedside features of shock reproducible between different observers? Arch Dis Child. 89 (10), 977-979 (2004).
  10. Raju, N. V., Maisels, M. J., Kring, E., Schwarz-Warner, L. Capillary refill time in the hands and feet of normal newborn infants. Clin Pediatr (Phila). 38 (3), 139-144 (1999).
  11. Klupp, N. L., Keenan, A. M. An evaluation of the reliability and validity of capillary refill time test. The Foot. 17, 15-20 (2007).
  12. Gorelick, M. H., Shaw, K. N., Baker, M. D. Effect of ambient temperature on capillary refill in healthy children. Pediatrics. 92 (5), 699-702 (1993).
  13. Schriger, D. L., Baraff, L. Defining normal capillary refill: variation with age, sex, and temperature. Ann Emerg Med. 17 (9), 932-935 (1988).
  14. Pandey, A., John, B. M. Capillary refill time. Is it time to fill the gaps? Med J Armed Forces India. 69 (1), 97-98 (2013).
  15. Strozik, K. S., Pieper, C. H., Roller, J. Capillary refilling time in newborn babies: normal values. Arch Dis Child Fetal Neonatal Ed. 76 (3), F193-F196 (1997).
  16. Doherty, J., et al. Sub-epidermal imaging using polarized light spectroscopy for assessment of skin microcirculation. Skin Res Technol. 13 (4), 472-484 (2007).
  17. Noguchi, K., et al. Effect of caffeine contained in a cup of coffee on microvascular function in healthy subjects. J Pharmacol Sci. 127 (2), 217-222 (2015).
  18. Reus, W. F., Robson, M. C., Zachary, L., Heggers, J. P. Acute effects of tobacco smoking on blood flow in the cutaneous micro-circulation. Br J Plast Surg. 37 (2), 213-215 (1984).
  19. Lenasi, H., Strucl, M. Effect of regular physical training on cutaneous microvascular reactivity. Med Sci Sports Exerc. 36 (4), 606-612 (2004).
  20. Anderson, B., Kelly, A. M., Kerr, D., Clooney, M., Jolley, D. Impact of patient and environmental factors on capillary refill time in adults. Am J Emerg Med. 26 (1), 62-65 (2008).
  21. John, R. T., Henricson, J., Nilsson, G. E., Wilhelms, D., Anderson, C. D. Reflectance spectroscopy: to shed new light on the capillary refill test. J Biophotonics. , (2017).
  22. Blaxter, L. L. An automated quasi-continuous capillary refill timing device. Physiological measurement. 37, 83-99 (2016).
  23. Bordoley, A., Irwin, R., Kalyani, V., MacDonald, C., Standish, D. D1GIT: Automated, temperature-calibrated measurement of capillary refill time. , (2012).
  24. Kviesis-Kipge, E., Curkste, E., Spigulis, J., Eihvalde, L. Real-time analysis of skin capillary-refill processes using blue LED. Proc. of SPIE. 771523, (2010).
  25. Shavit, I., Brant, R., Nijssen-Jordan, C., Galbraith, R., Johnson, D. W. A novel imaging technique to measure capillary-refill time: improving diagnostic accuracy for dehydration in young children with gastroenteritis. Pediatrics. 118 (6), 2402-2408 (2006).
  26. Cohen, J., et al. Monitor to Measure Dermal Blood Flow in Critically Ill Patients: Study. International Scholarly Research Notices. 578316, e578316 (2013).

Tags

Neurovidenskab spørgsmålet 130 kapillær refill test chok triage diffuse Reflektionsgraden spektroskopi diffuse polarisering spektroskopi diffusion
Diffuse Reflektionsgraden spektroskopi: Kom kapillær Refill Test Under sin tommelfinger
Play Video
PDF DOI DOWNLOAD MATERIALS LIST

Cite this Article

Henricson, J., Toll John, R.,More

Henricson, J., Toll John, R., Anderson, C. D., Björk Wilhelms, D. Diffuse Reflectance Spectroscopy: Getting the Capillary Refill Test Under One's Thumb. J. Vis. Exp. (130), e56737, doi:10.3791/56737 (2017).

Less
Copy Citation Download Citation Reprints and Permissions
View Video

Get cutting-edge science videos from JoVE sent straight to your inbox every month.

Waiting X
Simple Hit Counter