Summary
Intracavernosal לחץ הקלטה (ICP) היא שיטה חשוב להעריך את הפונקציה זיקפה של חיות ניסוי. כאן, פרוטוקול מפורט מומחש על ההליך הקלטה של ICP catheterizing הפין crura, ואז חשמלית גירוי העצבים חלול בחולדות.
Abstract
אין-אונות (אד) מוגדר כחוסר היכולת להגיע או לשמור על זיקפה הפין, וזה הפך הפרעה שכיחה המיני הגברי. מכרסמים הם מועסקים על ידי מחקרים רבים לחקור הפיזיולוגיה/הפתולוגיה של תפקוד זיקפה. ניתן להעריך תפקוד זיקפה אצל מכרסמים על ידי מדידת הלחץ intracavernosal (ICP). בפועל, ICP ניתן לנטר בעקבות גירוי חשמלי של העצבים חלול (CNs). לחץ עורקי העורק הראשי (לחץ עורקי מרושע) משמש כהפניה ICP. באמצעות הקלטת פרוטוקולי ICP, ניתן למדוד פרמטרים מרכזיים רבים של תפקוד זיקפה של עקומת התגובה של ICP. המדידה של ICP מספק יותר מידע מאשר הבדיקה apomorphine-induced זיקפה הפין, הוא זול יותר מאשר ניטור telemetric corpus spongiosum הפין, הופך שיטה זו האחת הפופולרי ביותר להערכת תפקוד זיקפה. עם זאת, לעומת הבדיקה שבוצעה בקלות APO-induced בפונקציה זיקפה, הקלטות של ICP מוצלחת דורשים תשומת לב לכל פרט, תרגול, ההקפדה שיטת הפעולה. בעבודה זאת, מבוא ICP הקלטה בחולדות מסופק כדי להשלים את ההליך בצורה יעילה.
Introduction
אד מוגדר כחוסר יכולת להשיג או לשמור על זיקפה הפין, הפך להיות הפרעת מיניות גברית נפוצה1. חיות ניסוי משמשים ומספקים מודלים לשחזור לחקור בפונקציה זיקפה2. במשך זמן רב, מספר דגמים בעלי חיים גדולים יש כבר מועסקים על חקירת תפקוד זיקפה-3,-4,-5. למרות מכרסמים קטנים יחסית לעומת שאר בעלי החיים, הם משמשים גם לצורך המחקר של זכר זיקפה עקב מציג יתרונות מספר6. ראשית, המאפיינים המיניים פונקציונלי מורפולוגיים של בני האדם הם recapitulated בחולדות. שנית, לעומת חיות גדולות ששימשו מחקרים אד, מכרסמים אינם חסכוני יותר לרכוש, בית, ולשמור. שלישית, מהונדסים מודלים מכרסמים מספקים יתרונות במחקרים הבאים הדירים התנהגותיים, כמו גם neurophysiological. לכן, מכרסמים הפכו במהירות החיות הראשי המשמש במחקר של אונות גברית.
נהנה רקע גנטי טהור ותנאים תרבות עקבית, מודלים מכרסמים סיפקו נתונים באופן עקבי לשחזור5,6,7,8. בין המחקרים זמינים רבים הקשורים בהיבטים רבים של פונקציות זיקפה, apomorphine (APO)-מבחן התגובה המזורזת זיקפה, במבחן התגובה של ICP חשמליים-לגירוי-induced הן השיטות הנפוצה ביותר המשקפים באופן אמין זיקפה הפונקציה9,10,11,12. המבחן APO-induced בפונקציה זיקפה, שפותחה על ידי היטון. et al. 13, הוא ביו-assay אשר מנצל את התופעה כי מינהל apomorphine חולדות מעורר זקפה, שפתיים. כמו קלה, לא פולשנית, יציב ביו-assay להעריך תפקוד זיקפה, הבדיקה APO-induced בפונקציה זיקפה נעשה שימוש נרחב במחקרים רבים. עם זאת, assay הזה אינו משקף במידה מספקת איכות הזקפה או השינויים הדינמיים בזרימת הדם הקשורים של זיקפה בתגובה14. מדידות של ICP פותחו בתחילה על ידי קווינלן. et al. 15. בשיטה זו, קטטר ימוקם את העורק הראשי כדי למדוד לחץ דם סיסטמי, עוד קטטר מוכנס לתוך הקורפוס מנ להקליט את ICP. לפני או במהלך של ICP הקלטה, הסוכן vasoactive ו/או שדה חשמלי גירוי של גנגליון האגן הגדולות (MPG) או CN ניתנו לעתים קרובות חולדות14. Assay הזה היה כלי אמין עבור הערכת של טיפולים ותרופות עבור אד, צפוי לשמש כשיטת ההערכה חיוניים ב בעתיד6.
לעומת הבדיקה שבוצעה בקלות APO-induced בפונקציה זיקפה, הקלטות של ICP מוצלחת דורשים תשומת לב לכל פרט, תרגול, ההקפדה שיטת הפעולה. לכן, אנו מספקים תיאור מפורט של איך לבצע הקלטה של ICP.
Subscription Required. Please recommend JoVE to your librarian.
Protocol
בן שלושה חודשים ואני בת 18 בחודש ספראג-Dawley חולדות שימשו את המחקר הנוכחי. כל החיות שטופלו בהתאם להנחיות NIH על טיפוח ועל שימוש של חיות מעבדה. הליכים הכוללים נושאים בעלי חיים אושרו על-ידי חיה מוסדיים מקומיים אכפת, ועדת האתיקה, במאמץ לצמצם את סבלם של בעלי החיים. הפרוטוקולים אושרו על ידי טיפול בעלי חיים מוסדיים ועל שימוש הוועדה (IACUC) באוניברסיטת טק נאנג'ינג (Nanjing, סין).
העכברושים היו מחולקים לשתי קבוצות בהתאם לגיל שלהם ביצועים ראשוני במבחן APO-induced בפונקציה זיקפה לפני ההקלטה של ICP: קבוצת צעירים נורמלי (YN קבוצה) ואת זיקפה בגיל העמידה הקבוצה (קבוצת AE)10.
1. הכנה לפני הניתוח
- באופן ידני לבצע זוג אלקטרודות דו קוטבית עבור ההקלטה של ICP (איור 1). קצת לכופף את הקצוות של אלקטרודות, להתאים את המרחק בין שתי אלקטרודות ל 1-2 מ מ רחב, כפי שמוצג באיור 1A.
- להתחבר האלקטרודות ממריץ באמצעות שני תופסנים תנין (איור 1 א'ב').
- להרכיב מערכת קטטר: ראשית, להתחבר מחט hypodermic 23 גרם צימוד 3-way עם אבובים, ולאחר מכן לחבר את צימוד מתמר לחץ. לאחר מכן, צרף מזרק 10-mL עד הסוף השלישי של צימוד לספק תמיסת הפרין.
- בזהירות לבדוק נזילה לאחר מילוי כל המערכת עם תמיסת הפרין (200 U/mL). ופנו את צימוד 3-דרך לסגור את הערוץ מזרק או בערוץ מתמר לחץ (איור 1C).
- הרם את המחט 20 ס מ הרמה של משטח עץ. ואז לכייל את הלחץ הקלטה למערכת 20 ס מ H2O. לאחר מכן, העבר את הגובה של המחט כדי לאמת את הדיוק של מערכת הקלטה. חזור על הכיול עד לדיוק אושר.
- להעביר את החולדות מהמתקן בעלי חיים לחדר הניתוח ולאחר לאפשר להם להיות מורגל לחדר הניתוח במשך לפחות 30 דקות.
- כלי הנגינה בלוק ריססו עם 70% אתנול רק לפני הניתוח
2. ניתוח נוהל
- עזים ומתנגד העכברוש עם זריקה בקרום הבטן של סודיום פנטוברביטל במינון של 45 מ"ג/ק"ג משקל גוף, לחכות 5-10 דקות לצבוט את האצבעות כדי לאשר של ההרדמה המתאים.
- לגלח את הפרווה של הבטן והצוואר עם מכונת גילוח חשמלית, ולמקם את החולדה על גבו על כרית החימום.
- נגב את אזור הניתוח עם כדורי צמר גפן ספוג פתרון 10% povidone-יוד ואחריו כדורי צמר גפן ספוג אתנול 70%. בנוסף, להחיל משחה אופטלמולוגיות כדי למנוע את העיניים מתייבשת.
- Catheterize העורק השמאלי הראשי.
- לתפוס את עור הצוואר עם מלקחיים, עושים חתך אופקי באמצע בצוואר. תחתכי את השרירים בקפידה לחשוף את העורק השמאלי הראשי, לבודד מקטע 5 מ מ של כלי השיט.
- בזהירות להפריד את העורק הראשי העצב התועה באמצעות מלקחיים, לצייר בתפר משי תחת העורק הראשי, לשים עניבה משוחררת בקצה סימטרית של כלי השיט ולאחר מכן ליצור קשר הדוק אחר בקצה הגולגולת של כלי השיט.
- . הקליפה תהדק את הכלי עם מלחציים בולדוג מעל התפר כדי לעצור את זרימת הדם.
- בזהירות אעשה חתך על הספינה עם מספריים המיקרוכירורגית והוסף את צנתר עורקי לכיוון הלב בסיועם של לנתח מיקרו הוק, מלקחיים.
- הדקו את הקשירה סימטרית חופשי סביב הקטטר לאבטח אותו. הסר את המלחציים בולדוג לשחזר את זרימת הדם.
-
לבודד את CN ומניחים האלקטרודה
- הרם את העור והשרירים של הבטן עם זוג מלקחיים. עם המספריים ויבתר, לחתוך הבטן התחתונה אל הפין עושים חתך קו האמצע.
- לדחוף בעדינות את המעי עם ספוגית לתוך החלק העליון של חלל הבטן.
- שלפוחית השתן עם זוג מלקחיים ומשוך את שלפוחית השתן של חלל הבטן. חושפים את האונות הגחון של הערמונית, אשר ממוקם בחלק הבטני של השופכה.
- משוך החוצה האונות הגחון של ערמונית, שלפוחית הזרע, צינור הזרע כדי לחשוף את האונה הגבי של הערמונית. למצוא את הנקודה של הידבקות של צינור הזרע, הערמונית.
- הפרד את החלל שבין הערמונית צינור הזרע. בזהירות חושפים את הקפסולה הסיבית, אשר ממוקם האחורי אל נקודת צומת של הערמונית, צינור הזרע. אז למצוא גנגליון האגן הגדולות (איור 2).
הערה: גנגליון האגן הגדולות ועצבים חלול ניתן לראות על פני השטח של הערמונית. - אזור CN יבש בזהירות עם מקלון סטרילי. בזהירות לבודד לעשוק את החוצפה ממש חלול עם הפרעה דו קוטבית האלקטרודות.
-
Catheterize Crura השמאלי
- לחתוך חתך קטן בעור של הפין עם מספריים ויבתר ולאחר מכן בקפידה מערטל את העור של הפיר הפין.
- לנתח את מערכת השרירים הפין תילומית. למצוא את הענף העליון של עצם לעצם האגן.
- חושפים את השריר bulbospongiosus, אשר מכסה את הנורה spongious.
- לחלק השריר bulbospongiosus של השריר ischiocavernosus באמצעות מלקחיים מעוקל.
- בזהירות לבודד את השריר ischiocavernosus עם מלקחיים המעוקל, ולאחר מכן לחתוך את השריר ischiocavernosus לחשוף את מעטה לבן albuginea של הקורפוס מנ.
- בעקבות הכיוון האנטומי של מנ הקורפוס, בזהירות את המחט לתוך הקורפוס בכל דרך albuginea tunica לבן.
הערה: זהו שלב חיוני עבור צנתור מוצלחת. כמות קטנה של מלוחים heparinized יכול להיות מוזרק, הפין נפוח להתייחס, אם המחט הוכנס כראוי. - בזהירות לשחרר את המחט ולהימנע כל הזזה של מחט או שיבוש של הצינור המחבר. לפקח על דליפה כלשהי.
3. לעורר את CN
- פתח את התוכנית תוכנה להקלטה אות לחץ, להתחיל את ההקלטה אות לחץ.
- קבע את הפרמטרים של הגירוי: הרץ 15, רוחב של 5 אלפיות השנייה, 5 וולט, ומשך s 60. לעורר CN בתדר של הרץ 15 עם רוחב הדופק של 5 אלפיות השנייה.
הערה: עלייה חדה של ICP יכול להיות שנצפו תוך יישום של גירוי חשמלי. - לאפשר מרווח זמן של 30 דקות מנוחה בין stimulations. המספר המרבי של גירוי ברציפות בכל בעל חיים הוא שלוש פעמים.
4. סיום ההליך
- לאחר ההקלטה, לנהל המתת חסד על-ידי הזרקת מנת יתר של סודיום פנטוברביטל במינון של 150 מ"ג/ק"ג משקל גוף. לאשר את מותו של חולדות באמצעות בדיקת לחץ עורקי שלהם. הסר את החולדות, ולנקות את כלי הניתוח.
5. ניתוח נתונים
- לשמור, לייצא את הנתונים מתוך התוכנה. התגובה בדרך כלל מבוטא כיחס של ICP ללחץ מערכתי כלומר עורקי (מפה). היחס של שיא ICP/מפה מחושב כדי להעריך את תפקוד זיקפה.
- מאגר נתונים של חולדות לפחות חמישה, ולנתח בתוכנות סטטיסטיות. ההבדלים נחשבים משמעותיים מבחינה סטטיסטית כאשר p < 0.05, באמצעות מבחן t של סטודנט.
Subscription Required. Please recommend JoVE to your librarian.
Representative Results
מחקרים רבים הראו כי אין-אונות, יישון זכרים הופך להיות בעיה נפוצה. עם זאת, טיפול רפואי מוגבל בניהול של זיקנה אד16. דגמים מכרסם של אד זיקנה, טיפולים רבים נבחנים על פונקציה זיקפה של חולדות בגיל העמידה. כפי הצגנו לעיל, ניתן להשתמש במבחן הקלטה של ICP לבידול החיות אד מכלל האוכלוסייה של חיות ניסוי, שהוא גם יקר כדי לכמת את ההשפעה של טיפול פוטנציאלי או סמים על תפקוד זיקפה.
כמופיע ב איור 3A, עקומת התגובה של ICP טיפוסי של קבוצת אד (אד בגילאי חולדות, AE, חודש בת 18) היה נמוך בהרבה מאשר עקומת של קבוצת הביקורת (חולדות נורמלי צעיר, YN, 3 בן חודש). בדרך כלל, ICP הגבוהה נבחר לשם ניתוח סטטיסטי. לאחר חישוב היחס של ICP/מפה, הנתונים במאגר מ-5 עכברושים הראה כי היחס של ICP/מפה בקבוצה AE גם ירידה משמעותית לעומת זאת בקבוצות הבקרה (איור 3B). מלבד אלה שני פרמטרים מרכזיים, הפסגה של ICP, הרמה של ICP, הזמן detumescence ', ' משך התגובה, השטח מתחת לעקומה בכולן ירד בחולדות אד בגילאי (טבלה 1). אלה נתונים הקלטה של ICP מספקות שיטה מדידה כמותיים כדי לשקף תפקוד זיקפה.
איור 1: באופן ידני עשו קטטר, אלקטרודות דו קוטבי, ואת ממריץ אות למערכת הקלטה של ICP ההקלטה. קטטר והן אלקטרודות מחוברים ממריץ ושידור מערכת ציוד ההקלטה. הקצוות קטטר מוכנסים שמאל בעורק או מנ הקורפוס להקליט את הלחץ. האלקטרודות ממוקמות מתחת העצבים חלול (CNs). (א) קצות האלקטרודות כפופות מעט. (B) ממריץ ושידור מערכת ציוד ההקלטה. (ג) התאספו ידנית קטטר. אנא לחץ כאן כדי להציג גירסה גדולה יותר של הדמות הזאת.
איור 2: מיקום אנטומי גנגליון האגן הגדולות ועצבים חלול. כפי שמוצג באיור, גנגליון האגן העיקרי הינו ממוקם על הגבול הלטראלי של הערמונית. העצב חלול ב עכברוש הוא העצב ברורים שמשתרע גנגליון האגן הגדולות. אנא לחץ כאן כדי להציג גירסה גדולה יותר של הדמות הזאת.
איור 3: ICP נציג הקלטה של חולדות בגילאי אחרת. (א) ייצוג של ICP שינויים במהלך גירוי עצבי חלול. קבוצת הביקורת (צעיר נורמלי העכברושים, YN, חולדות בת 3 חודשים); אד קבוצה (בני אד חולדות, AE, החודש בת 18). הבר תחת עקומת בתגובה ICP מייצג את התזמון של גירוי חשמלי. (B) מוצג מדד תפקוד זיקפה (לחץ עורקי ממוצע/לחץ תרופתי) בקבוצת הניסוי השונים. נתונים חולדות לפחות חמישה מוצגות כחלק ±standard כלומר סטייה; ההבדלים נחשבים משמעותיים מבחינה סטטיסטית מתי *p < 0.05, באמצעות מבחן t של סטודנט. אנא לחץ כאן כדי להציג גירסה גדולה יותר של הדמות הזאת.
| צעיר נורמלי (YN) | אין-אונות בגילאי (AE) | |
| (Mean±SD) | (Mean±SD) | |
| הבסיס של ICP | 22.3±3.7 (מ מ כספית) | 21.9±5.2 (מ מ כספית) |
| שיא של ICP | 172.8±7.6 (מ מ כספית) | 105.4±4.9 (מ מ כספית) * |
| הרמה של ICP | 165.4±2.5 (מ מ כספית) | 86.5±4.1 (מ מ כספית) * * |
| זמן השהיה כדי זקפה | 10.3±1.6 (s) | 15.1±2.3 (s) |
| detumescence זמן | 46.7±2.6 (s) | 11.8±3.3 (s) * |
| משך התגובה | 107.2±3.7 (s) | 71.7±4.2 (s) * |
| השטח מתחת לעקומה | 17436.9±736.4 | 6426±428.3 * * |
| מספר זקפות | 3±0.0 | 3±0.0 |
טבלה 1: הפרמטרים של תפקוד זיקפה אצל חולדות, בגיל צעיר אין-אונות. הלחץ תרופתי הבזליים (ICP), שיא ICP, הרמה של ICP, השהיה זקפה, detumescence הזמן, משך התגובה, אזור תחת עקומת תגובת הזמן ICP, ואת המספר של זקפות שנצפתה 30 דקות מחושב, המבוטא ±standard רשע סטייה (n = 5). ההבדלים נחשבים משמעותיים מבחינה סטטיסטית מתי * 0.05 <p או * *p < 0.01, באמצעות מבחן t של סטודנט.
| הסימפטומים של פתרון בעיות | סיבות אפשריות והצעות |
| אין לחץ של ICP או מפה | בעיית ציוד: בדוק את המצב של ציוד |
| בעיית זליגת: לבדוק את הצינור, ודא כי החיבור הוא שלם ולאחר מכן בדוק את צימוד, והאם היא התנוחה המתאימה | |
| לחץ נמוך גדל לאחר גירוי חשמלי | לקוי או אין גירוי: בדוק את החיבור של החקירה של ממריץ CN, נסה למקם מחדש את האלקטרודות |
| נזק CN: נסה מגרה contralateral CN | |
| זליגת: לבדוק את אתר ההכנסה של ICP צנתור, כמו זליגות הכניסה באתר יקטן של ICP | |
| דימום | בדוק את האתר המדמם; אם העורק הוא מחורר, לסיים את הניסוי. במקרה הרבייה באתר ההכנסה ICP, מחדש לנקב זה מסובך מאוד, ואולי אף בלתי אפשרית |
בטבלה 2: פתרון בעיות לקבלת ההליך הקלטה של ICP. שלושה תסמינים שכיחים ב ICP ניתוח גורמים אפשריים, הצעות.
Subscription Required. Please recommend JoVE to your librarian.
Discussion
כאמצעי ישיר של תפקוד זיקפה, ICP היא שיטה אמינה14. זה מאפשר הרכישה של נתונים ב- ICP הבזליים, שיא ICP, הרמה של ICP, וכמובן, detumescence הזמן, משך התגובה, וכו '. מלבד אלה ישיר נמדדו פרמטרים, ישנם מספר פרמטרים אינדקס אחרים: (1) "T80", הפעם כדי להגיע 80% לשיא של ICP; (2) "D20", הפעם כדי להקטין עד 20% של שיא ICP; (3) "ΔT80", קצב הגידול בלחץ (לשניה) ב T80; (4) "ΔD20", הקצב של ירידה בלחץ (לשניה) ב D20. פרמטרים אלה מאפשרים כימות של כל שלב ואת איכות התגובה של ICP, אשר ניתן לשקף את ההשפעה של המחלה, לבחון את היעילות של תרופות ה-14,17. שיטה זו הקלטה של ICP נעשה שימוש נרחב במודלים חייתיים אד. ב פרוטוקול זה, השווינו את התגובה של ICP בחולדות אד, בגיל צעיר. אם הממשל של תרופות באמצעות קטטר תרופתי יש צורך, זה יכול להיעשות על ידי הצבת עוד תרופתי קטטר לתוך ה מנ contralateral קורפוס cavernosum17. הנפח הכולל של הזרקת צריך להיות פחות מ 0.1 מ"ל. שיטתית והתרופות האמריקני יכול להתבצע באמצעות הזרקת בקרום הבטן או תת עורית. אם נדרש עירוי לוריד, ומוחלף על נכון יכול להיחשב.
למרות הניתוח ICP הוא מאתגר מעט טכנית, דורש הבנה מעמיקה של האנטומיה איברי הבטן, האגן התחתון, עם מאמץ וזמן אחד יכול לשלוט בפרוטוקול. מאז קטטרים ואלקטרודות נעשים באופן ידני על-ידי הנסיין, מתמר לחץ צריך להיות מסומן מכויל בכל פעם לפני תחילת הניסוי. האלקטרודות צריך להיות דק, המרחק בין שתי אלקטרודות קטן מספיק כדי לעורר את העצב ביעילות. חשוב למנוע נזק מתיחה או אחר העצב תוך הצבת האלקטרודות. . זה קריטי. בדיוק להוסיף את המחט לתוך crura שמאל, ללא כל הזזה או מוריד שלושה תסמינים מפורטים בטבלה 2, אשר יכול להיחשב מתרחשים כמה תסמינים.
שיטה זו הקלטה של ICP הינו גם להעברה לעכברים. למרות זאת, הגופים של עכברים קטנים חולדות, ביצוע הקלטה של ICP עכברים קשה יותר. אם ICP הקלטות נערכו בעכברים, hypodermic מחטים בגודל קטן יותר יכול לשמש.
הקלטה של ICP גם יש מגבלות משלו, שיטות אחרות עשויים להיחשב. בדרך כלל, הניתוח ICP הקלטה מתבצע על חיות מרדימים, החיות מוקרבים לאחר המדידה של ICP לטווח קצר, שאינה מתאימה עבור ניטור האורך של ICP. שיפור משמעותי לשיטת הקלטה ישירה של ICP מבצע הקלטות של ICP על חולדות בהכרה, נעה בחופשיות, אשר מתואר היטב ב הפרוטוקולים נכתב על ידי הדלונד ואח. 17 שיטה זו מספקת הזדמנות להקליט את הלחץ intracavernosal עבור תקופות זמן ארוכות יותר. לאחרונה, הפיתוחים נעשו כדי לכלול בגישה telemetric יושמו בהכרה, נעה בחופשיות חיות18,19,20. למרות הגישה telemetric יש יתרונות רבים על פני ICP מסורתי הקלטה, זה דורש ציוד יקר כדי להמיר ולקבל את האותות לחץ המומר. להתגברות על שיטת צנתור, Adachi. et al. תאר דרך לבחון תגובות זיקפה על ידי מדידה רציפה של הקוטר של חולדות21פינים. בשיטה זו, זוג של גבישים פיזואלקטריים הוא ממוקם מימין ציר הפין שלו cavernosum קורפוס. שני פרמטרים מוגדרים כדי להעריך את התגובה זיקפה: (1) "D-max": מרבית פיתחה קוטר הפין במהלך המדידה; ו- (2) "T50%": מעת התגובה מקסימום 50% התאוששות של התגובה המרבית בחולדות מורדם. עם פרוטוקול זה, השינויים של הקוטר של הפין משקפת גם בנאמנות את האיכות של התגובה זיקפה; יתר על כן, הרקמה לא נפגע במהלך המדידה כולו. עם זאת, כמו הגישה telemetric, שיטה sonomicrometry זו מחייבת גם ציוד ספציפי ויקרה יחסית כדי להמיר ולקבל את השינויים בקוטר של הפין.
לסיכום, ICP ההקלטה היא שיטה מדויקת, יחסית נוחה וזולה. אנו מאמינים שהקדמה זו עשויות לסייע בהרחבת השימוש בשיטה של ICP, ולא עוד מראש ידע של פתולוגיה ופיזיולוגיה של אין-אונות.
Subscription Required. Please recommend JoVE to your librarian.
Disclosures
המחברים אין לחשוף
Acknowledgments
עבודה זו נתמכה על ידי הכספים מחקר בסיסי עבור אוניברסיטאות המרכזי (020814380018, 020814380077), סין מלגת המועצה (CSC, מס 201606195024), מדעי הטבע קרן של מחוז ג'יאנגסו (BK20160138), Key Project. נתמך על ידי המדע, טכנולוגיה פיתוח קרן, נאנג'ינג הרפואי האוניברסיטאי (2014NJMUZD053).
Materials
| Name | Company | Catalog Number | Comments |
| Animal | |||
| Rats | Strain: Sprague-Dawley Age: 2-3 month | ||
| Rats | Strain: Sprague-Dawley Age: 15-18 month | ||
| Name | Company | Catalog Number | Comments |
| Reagents | |||
| Saline | Sigma-Aldrich, S7653 | dissolve 8.5 gram sodium chloride in distilled water | |
| Pentobarbital sodium solution | Sigma-Aldrich, P3761 | dissolve 1 gram in 100 ml saline | |
| Povidone-iodine | BTP Pharmaceutical Co. Limited | 10% (V/V) | |
| Ethanol | China National Pharmaceutical Group Corporation (SINOPHARM) | 70% (V/V) | |
| Heparin | Sigma-Aldrich, H3149 | dissolve 20000U heparin in 100 ml saline | |
| Name | Company | Catalog Number | Comments |
| Materials | |||
| Hypodermic needle | Shandong Weigao Group Medical Polymer Co., Ltd. | 23G | |
| Syringe | Shandong Weigao Group Medical Polymer Co., Ltd | 10 ml | |
| Three-way stopcock | Chengdu Instrument factory | TSK 01 | |
| Electrode | Chengdu Instrument factory | JST-1 | |
| Catheter tube | Chengdu Instrument factory | PE-10, PE-50 | |
| Operating scissors | Shanghai operation equipment factory | J22010, J22020 | |
| Ophthalmic operating scissors | Shanghai operation equipment factory | Y00010, Y00020 | |
| Ophthalmic forceps | Shanghai operation equipment factory | JD1010, JD1020 | |
| MicroScissors | World Precision Instruments | WAA260 | |
| silk suture | Shandong Weigao Group Medical Polymer Co., Ltd. | 5-0 | |
| Name | Company | Catalog Number | Comments |
| Equipment | |||
| Stimulator | Nanjing medease science and technology co. ltd (model 4C501H) | 15 Hz, 5 ms pulse, 5 V, 60 s duration and 5 minutes interval | |
| Multichannel signal collection processing system | Nanjing medease science and technology co. ltd (model 4C501H) | Blood pressure model | |
| Pressure transducer | Beijing Xin Hang Xing Ye Technology Trading Company Limited (model YP100) | 40KPa |
References
- NIH Consensus Conference. Impotence. NIH Consensus Development Panel on Impotence. JAMA. 270 (1), 83-90 (1993).
- Chung, E., De Young, L., Brock, G. B. Investigative models in erectile dysfunction: a state-of-the-art review of current animal models. J Sex Med. 8 (12), 3291-3305 (2011).
- Lue, T. F., Takamura, T., Schmidt, R. A. Hemodynamics of erection in the monkey. J Urol. 130 (6), 1237-1241 (1983).
- Carati, C. J., Creed, K. E., Keogh, E. J. Autonomic control of penile erection in the dog. J Physiol. 384, 525-538 (1987).
- Steers, W. D., Mallory, B., de Groat, W. C. Electrophysiological study of neural activity in penile nerve of the rat. Am J Physiol. 254 (6 Pt 2), R989-R1000 (1988).
- Kapoor, M. S., Khan, S. A., Gupta, S. K. Animal models of erectile dysfunction. J Pharmacol Toxicol Methods. 76, 43-54 (2015).
- Burnett, A. L., Lowenstein, C. J., Bredt, D. S. Nitric oxide: A physiologic mediator of penile erection. Science. 257 (5068), 401-403 (1992).
- Oh, T. Y., Kang, K. K., Ahn, B. O. Erectogenic effect of the selective phosphodiesterase type 5 inhibitor, DA-8159. Arch Pharm Res. 23 (5), 471-476 (2000).
- Ouyang, B., Sun, X., Han, D. Human urine-derived stem cells alone or genetically-modified with FGF2 Improve type 2 diabetic erectile dysfunction in a rat model. PLoS One. 9 (3), e92825 (2014).
- Pan, F., Xu, J., Zhang, Q. Identification and characterization of the MicroRNA profile in aging rats with erectile dysfunction. J Sex Med. 11 (7), 1646-1656 (2014).
- Cho, M. C., Park, K., Kim, S. W. Restoration of erectile function by suppression of corporal apoptosis, fibrosis and corporal veno-occlusive dysfunction with rho-kinase inhibitors in a rat model of cavernous nerve injury. J Urol. 193 (5), 1716-1723 (2015).
- Hannan, J. L., Matsui, H., Sopko, N. A. Caspase-3 dependent nitrergic neuronal apoptosis following cavernous nerve injury is mediated via RhoA and ROCK activation in major pelvic ganglion. Sci Rep. 6, 29416 (2016).
- Heaton, J. P., Varrin, S. J., Morales, A. The characterization of a bio-assay of erectile function in a rat model. J Urol. 145 (5), 1099-1102 (1991).
- Mehta, N., Sikka, S., Rajasekaran, M. Rat as an animal model for male erectile function evaluation in sexual medicine research. J Sex Med. 5 (6), 1278-1283 (2008).
- Quinlan, D. M., Nelson, R. J., Partin, A. W. The rat as a model for the study of penile erection. J Urol. 141 (3), 656-661 (1989).
- Albersen, M., Orabi, H., Lue, T. F. Evaluation and treatment of erectile dysfunction in the aging male: A mini-review. Gerontology. 58 (1), 3-14 (2012).
- Hedlund, P., Matsumoto, K., Andersson, K. -E. Animal Models of Erectile Dysfunction. Curr Prot Pharmacol. 29, 5.41.1-5.41.22 (2005).
- Giuliano, F., Bernabe, J., Rampin, O. Telemetric monitoring of intracavernous pressure in freely moving rats during copulation. J Urol. 152 (4), 1271-1274 (1994).
- Bernabe, J., Rampin, O., Giuliano, F. Intracavernous pressure changes during reflexive penile erections in the rat. Physiol Behav. 57 (5), 837-841 (1995).
- Bernabe, J., Rampin, O., Sachs, B. D. Intracavernous pressure during erection in rats: an integrative approach based on telemetric recording. Am J Physiol. 276 (2 Pt 2), R441-R449 (1999).
- Adachi, H., Kodama, K., Ishihara, H. Evaluation of erectile response by continuous measurement of penile diameter in rats. J Pharmacol Toxicol Methods. 41 (4), 147-152 (1999).
