Summary
Hier presenteren we gedeeltelijke gal duct afbinding als een chirurgische model van lever schade en regeneratie van knaagdieren.
Abstract
Bij knaagdieren is volledige gal duct afbinding (cBDL) van de Galgang een gevestigde chirurgische techniek voor het bestuderen van obstructieve cholestase en gal duct proliferatie. Maar, op lange termijn experimenten kunnen leiden tot hogere morbiditeit en mortaliteit. Bij select muis stammen met onderliggende leveraandoening, kunnen zinvolle vergelijkingen worden gemaakt zelfs met Afbinding van een enkele kwab van de lever, waardoor dieren schaden en kosten kan verminderen. Hier beschrijven we gedeeltelijke gal duct afbinding (pBDL) in de muis, waarin alleen de linker hepatische koker van de gal is afgebonden, biliaire obstructie in de linker kwab, maar niet de resterende lobben veroorzaken. Met zorgvuldige microchirurgische techniek kunnen pBDL experimenten kosteneffectief, aangezien de unligated kwab als een interne controle op de ligaturen lobben, dient wanneer onderworpen aan dezelfde voorwaarden in hetzelfde dier. In tegenstelling tot cBDL is een aparte sham bediende controlegroep niet nodig. pBDL is zeer nuttig om direct vergelijken gelokaliseerd versus systemische effecten van cholestase en andere componenten van de ingehouden Gal. pBDL andere doelen kan ook worden gebruikt als een nieuwe methode te onderzoeken van de mechanismen gerelateerd aan medicijnen en cel migratie.
Introduction
Chirurgische modellen van acute lever schade en herstel, zoals gedeeltelijke hepatectomy of Galgang afbinding (cBDL), hebben gebruikt voor decennia in knaagdieren lever regeneratie en pathobiology1,2te gaan studeren. In cBDL, is de Galgang (die wegloopt alle gal in de lever wordt geproduceerd) afgebonden, resulterend in obstructieve cholestase, ontsteking en fibrose in de eerste 2-3 weken na de operatie, met eventuele progressie naar cirrose3. Gal duct proliferatie, transdifferentiatie en inductie van resident lever voorlopercellen zijn ook kenmerken van cBDL4,5. Hoewel cBDL specifieke mechanismen van obstructieve cholangiopathy, die goed gekarakteriseerd met reproduceerbare resultaten in wild-type muizen en in deze stammen met normale levers6,7,8 belicht, de procedure kan technisch veeleisende in sommige transgene muismodellen van leverziekten, vereisen meer dieren dan verwacht als gevolg van de hogere morbiditeit en mortaliteit van biliaire obstructie na verloop van tijd. Deze techniek is ook gunstig voor de studie van transgene muizen met onderliggende lever ziekte, die de stress langdurig cursus experimenten na cBDL anders niet zou kunnen tolereren.
pBDL bieden een redelijk alternatief om te helpen overwinnen sommige van deze uitdagingen. Eerste pBDL studies in wild-type muizen gericht te onderscheiden van lokaal optreden en systemische bemiddelaars van ontsteking9. In pBDL, de belangrijkste biliaire samenvloeiing van de rechter en linker hepatische galwegen boven de Galgang is zorgvuldig gevisualiseerd op de Hilus en alleen de linker hepatische koker van de gal is afgebonden voor het genereren van een gelokaliseerde obstructieve cholestase. pBDL biedt verschillende voordelen aan het cBDL. In pBDL fungeert de unligated rechter kwab als een identiek gecompenseerde interne controle voor de ligaturen linker kwab, onderworpen aan dezelfde systemische effecten, zoals voedingstoestand of circulerende factoren. Hoewel systemische pro-inflammatoire mediatoren aanwezig waren, Osawa et al. waargenomen minder fibrose en necrose in de lobben van de unligated, maar meer ontstekingscellen en transformerende groeifactor-β expressie in de ligaturen kwab9.
Meer recentelijk, pBDL heeft is opnieuw gedefinieerd om te studeren lever parenchymal effecten van ingehouden gal10. Met behulp van hetzelfde dier voor interne controle (unligated "sham") en experimentele groepen, helften pBDL effectief het aantal dieren per experiment, dat op zijn beurt rendabeler is nodig. De muizen tolereren de effecten van pBDL veel beter, zodat het ideale moment cursus experimenteren (≥2 weken) kunnen worden bereikt in de ligaturen kwab. Bovenal pBDL directe Intrahepatische effecten van obstructieve cholestase kan onderscheiden en behouden van gal componenten in de ligaturen kwab, in vergelijking met de unligated controle kwab. PBDL is over het algemeen een aantrekkelijke methode kwab-specifieke effecten van gelokaliseerde cholestase in de lever te bestuderen.
Subscription Required. Please recommend JoVE to your librarian.
Protocol
Alle procedures werden uitgevoerd overeenkomstig ethische richtlijnen van institutionele Animal Care en gebruik van het Comité van de Universiteit van Pittsburgh.
1. de basistechnieken en gemeenschappelijke Procedures
- Autoclaaf alle microchirurgische apparatuur voor gebruik.
- Om te voorkomen dat het doden van de muis door anesthesie, haar ademhaling patroon nauwkeurig te controleren.
- Touch organen en darmen zo min mogelijk om te voorkomen beschadiging van organen en veroorzaakt bloeden. Druk op bloeden punten met NAT katoenen wissers of gaas sponzen.
- Gebruik natte katoenen wissers voor zachte manipulatie van organen. Natte, niet-geweven gaas sponzen worden gebruikt in twee maten, 3.5 x 3.5 cm en 6.0 × 6.0 cm. Gebruik kleinere degene te trekken van de hele lever. Gebruik de grotere laten teruglopen van de kleine en grote darmen.
2. prechirurgische voorbereiding
- Gebruik mannelijke c57/b6 muizen, 8-12 weken leeftijd (bij lichaamsgewicht is ongeveer 20-35 g) voor de gedeeltelijke gal duct afbinding.
- Laat de muizen vrije toegang tot water en voedsel tot inductie van de anesthesie.
3. gedeeltelijke gal Duct afbinding operatie
- Anesthetize de muis door de invoering van het dier in een inductie-kamer met een mix van 1,5-2,0% Isofluraan en 1 L/min zuurstof. Het dier nauwgezet volgen door het observeren van de ademhalingsfrequentie. Wanneer de ademhalingsfrequentie van het dier één adem per seconde is, is de muis goed narcose. Omdat de voorste ledematen terugtrekking reflex verdwijnt sneller, knijpen de hind-limb voet alsook om te bevestigen de volledige afwezigheid van de terugtrekking reflex. Ogen moeten worden gesmeerd met een oogheelkundige smerende agent om te voorkomen dat de cornea ulcera. Opmerking dat eerste dosis van de pijnstiller kan pre-operatively worden gegeven om te voorkomen dat de stimulatie van pijnreceptoren.
- Scheren van de buikwand met Tondeuses en plaatst u de muisaanwijzer op de chirurgische tafel onder de chirurgische Microscoop. Herstellen van alle ledematen aan de tabel met de tape. Isofluraan inhalatie gebruiken om de muis onder algemene verdoving.
- Aanpassen van de vaporizer Isofluraan en gebruiken van 2.0-3.0% Isofluraan voor inductie.
- Met behulp van steriele wissers, het desinfecteren van de buikwand eerst met 0.3-0,5 mL Povidon-jodium toegepast topicaal, gevolgd door 70% ethanol. Dier moet worden bedekt met een steriele draperen.
- Maak een lange middellijn abdominale insnijding van de xiphoid aan het schaambeen met de schaar en pincet Adson. Na het maken van de abdominale incisie, verminderen Isofluraan aan 0.8-1.0% voor onderhoud.
- Bloot de buikholte met behulp van een Micro-oprolmechanisme. Houd de xiphoid met een mug Tang en trekken naar de kop van de muis. Corrigeer de verlostang mosquito in plaats met behulp van zachte klei.
- 1-2 mL verwarmde (37 ° C) inboezemen gesteriliseerde-fosfaatgebufferde zoutoplossing (PBS) in de buikholte te voorkomen verwonden van de buikorganen. Houd de dunne darmen met NAT katoenen wissers en zachtjes trekken ze naar het hoofd van de muis. Snijd de ligamenten tussen de dunne darmen en het retroperitoneum te voorkomen verwonden van de dunne darmen (figuur 1A).
- Wikkel de kleine en grote darmen met een spons nat, niet-geweven gaas. Plaats ze op de caudal kant van de buikholte. Darmen verpakt in steriele gaas kunnen worden geplaatst op het steriele gedrapeerd veld om verontreiniging te voorkomen.
- Zachtjes de hele lever naar de xiphoid intrekken met behulp van een kleine natte nonwoven gaas spons bloot de hepatische Hilus en hepato-duodenale ligament (figuur 1B).
- Controleer om te bevestigen de anatomie van de hepatische Hilus. De Galgang ligt aan de ventrale zijde van de ader van de portal. Locaties van het recht en de linker hepatische gal buis, die in de belangrijkste biliaire samenvloeiing op de hepatische Hilus afwateren bevestigen.
- Identificeren van de linker hepatische gal koker die wegloopt van de linker kwab, en het omringen met een 10-0 nylon hechtdraad met de botte kant van een hechtdraad naald (figuur 2A). Voorkomen verwonden het portal vein, hepatische slagader en lever oppervlak.
- De linker gal-duct met 10-0 nylon afbinden. (Figuur 2B).
- Plaats de kleine en grote darmen in dezelfde positie als voor de operatie met behulp van NAT katoenen wissers.
- Bevestigen, er is geen intestinale torsie en intra-abdominale bloeding en sluit de spieren en de huid in twee lagen met 4-0 vicryl. Gevlochten hechtdraad (Vicryl) werd gebruikt voor de sluiting van de huid, maar monofilamenten is de voorkeur aan het verminderen van de kans op infectie.
Opmerking: Sluit fascia door voortdurende hechtdraad van xiphoid aan pubis, en sluit de huid door voortdurende hechtdraad vanaf pubis aan xiphoid. - Verdoving na het sluiten van de incisie stoppen.
4. postoperatieve behandeling en Follow-Up
- Net na de operatie, knijp de dorsale huid van de muis en injecteren Buprenex (0,1 mg/kg) en Cefazolin (100 mg/kg) subcutaan, gevolgd door Buprenex injectie elke 12 h voor 3 dagen, en Cefazolin elke 24 h gedurende 3 dagen respectievelijk11,12 ,,13. Opmerking dat eerste dosis van de pijnstiller kan pre-operatively worden gegeven om te voorkomen dat de stimulatie van pijnreceptoren. Cefazolin en andere peri-operatieve antibiotica zijn alleen nodig voor immuun-onderdrukt dieren, zoals die welke worden gebruikt in studies van de transplantatie.
Opmerking: Als de operatie is succesvol uitgevoerd, de muis meestal herstelt binnen 30 min. activiteit van de muizen zal bijna hetzelfde als de preoperatieve conditie. - Controleer de muizen dagelijks op tekenen van nood.
- Offeren de muizen door de cervicale dislocatie onder narcose te bevoorraden levers, kuit en andere weefselsteekproeven op bepaalde tijdstippen (dat wil zeggen, 7, 14, 21 dagen) na pBDL.
Subscription Required. Please recommend JoVE to your librarian.
Representative Results
Voor dit typische experiment, werd pBDL uitgevoerd in drievoudige PiZ transgene muizen, die de lever ziekten bij de mens gevonden in alpha-1 antitrypsin (A1AT) deficiëntie recapituleren. De PiZ muis overexpresses een transgenic bestaande uit meerdere genomic fragmenten van DNA die de codering regio's van de mutant menselijk A1AT-gen en de promotor, samen met de introns en ~ 2 kilobases van upstream- en downstream flankerende gebieden14, bevatten 15. Normaal A1AT is een secreted serumeiwit geproduceerd in de lever. De gemuteerde vorm van A1AT genereert onoplosbaar eiwit-aggregaten die spontaan zich ophopen in de lever toxische stress veroorzaken. De experimenten gebruikt 3 - maanden oude mannelijke PiZ muizen, die de meest ernstige fenotype van deze ziekte, kenbaar te maken wanneer de aggregatie van eiwitten16 pieken.
Serum lever biochemistries werden vergeleken in pBDL en cBDL PiZ muizen (tabel 1)10. De leverenzymen alanineaminotransferase (ALT) en aspartaataminotransferase (AST) zijn biomarkers van hepatocellulaire verwonding, terwijl de totale serum bilirubine (TSB) meet de mate van cholestase. Over het geheel genomen vertonen muizen onderworpen aan pBDL geen symptomen van ernstige lever letsel of cholestase, zoals hun serum waarden gelijk aan de basislijn10 waren. Het is belangrijk op te merken dat muizen met mislukte pBDL (als gevolg van technische problemen, zoals gal duct of vasculaire letsels) serum waarden vergelijkbaar met cBDL muizen, met aanzienlijk verhoogde leverenzymen en TSB zal tonen. Klinisch, muizen met mislukte pBDL noodlijdende, met bevindingen van gal lekken, ascites, peritonitis, en/of hematoom en meer jaundiced zal verschijnen, en zal uiteindelijk moeten worden opgeofferd.
Aangezien muizen onderworpen aan pBDL kwab-specifieke obstructieve cholestase ontwikkelen, doen ze niet verkrijgt de opgezwollen, donkere, gal gevulde galblaas gezien in cBDL. Er verschijnt alleen de ligaturen kwab bleker van kleur, terwijl de unligated lobben hun normale, donkere, roodbruine verkleuring (Figuur 3 houden zal). Er zijn belangrijke verschillen in de lever histologie, met verhoogde gal duct proliferatie en fibrose in de ligaturen kwab (Figuur 4). 10
Tabel 1: Representatieve serum lever biochemistries van gedeeltelijke gal duct afbinding (pBDL) in vergelijking met het voltooien van de gal duct afbinding (cBDL) 10 . Elk tijdstip vertegenwoordigt 3-4 muizen. Opmerking PiZ transgene muizen worden op een achtergrond c57/bl6. Lab referentie bereiken krijgen ook haakjes. (WT, wild-type zijn; TSB, bilirubine totaal serum; ALT, alanineaminotransferase; ALP, alkalische fosfatase).
Figuur 1:blootstelling van abdominale Holte- en galaandoeningen. (A) dunne darmen zijn voorzichtig ingetrokken om te voorkomen fecale letsel, en de aansluitende ligamenten vrij van retroperitoneum worden gesneden. (B) lever wordt zachtjes teruggetrokken om maximale visualisatie van de gal boom op de hepatische Hilus (pijl). Klik hier voor een grotere versie van dit cijfer.
Figuur 2 : Gedeeltelijke gal duct afbinding. (A) het botte uiteinde van de chirurgische naald wordt gebruikt om te omringen zorgvuldig de nylon hechtdraad rond de linker hepatische gal duct, boven de samenvloeiing met de Galgang (oorspronkelijke vergroting 40 x). (B) succesvol ligatuur van de linker hepatische gal buis, die normaal gesproken de linker lever kwab voert. De resterende galwegen zijn unligated (oorspronkelijke vergroting 40 X). Klik hier voor een grotere versie van dit cijfer.
Figuur 3: bruto uiterlijk van de WT (c57/b6) muis lever 14 dagen na pBDL. Merk op dat de ligaturen linker kwab bleker in kleur (pijlen), lijkt terwijl de unligated lobben hun normale, donkere, roodbruine kleuring behouden. Klik hier voor een grotere versie van dit cijfer.
Figuur 4 : Kwab-specifieke veranderingen in representatieve lever weefselsecties van dag 14 pBDL unligated recht (R) kwab voor ligaturen linker (L) kwab in WT (c57/b6) muizen vergelijken. (A) de haematoxyline en eosine (H & E) kleuring weergegeven: verhoogd gal duct proliferatie (pijlen) in de ligaturen kwab. (B) Sirius rode vlek weergegeven: "passerelle" fibrose begeleidende gal duct proliferatie in de ligaturen kwab. Histologie voor de PiZ muis al eerder gemeld10. Klik hier voor een grotere versie van dit cijfer.
Subscription Required. Please recommend JoVE to your librarian.
Discussion
Hoewel cBDL de meest voorkomende experimentele techniek voor obstructieve cholestase is, kan het meerdere uitdagingen presenteren in knaagdieren. Afhankelijk van het aantal postoperatieve dagen nodig om te bereiken van een eindpunt, kunnen de dieren ervaren significante morbiditeit en mortaliteit naarmate de tijd vordert. De mate van weefsel schade en biliaire necrose wordt verder verergerd wanneer u werkt met sommige transgene muismodellen van leverziekte, waaruit abnormale lever parenchym en functie op basislijn. In vergelijking met cBDL, verslagen van pBDL zijn beperkt, maar deze techniek kan worden toegepast als een alternatief in select experimenten om negatieve uitkomsten en dierlijke verliezen te verminderen.
Variaties in de methode van de pBDL zijn ook gemeld. In de methode die van Heinrich et al., is een externe gebogen naald grenzend aan de Galgang, gevolgd door ligatuur rond de Galgang zowel de naald17geplaatst. De naald wordt dan verwijderd vóór het sluiten van de buikwand, resulterend in beperkte gal stroom door een vernauwde lumen (d.w.z., subtotaal obstructie) van de gal buis17. Tijdens deze procedure, wordt ook de galblaas verwijderd om te voorkomen dat cholecystitis17. De auteurs concludeerden dat deze methode gunstiger te bestuderen van acute cholestase in plaats van chronische wijzigingen17was. In tegenstelling, is de pBDL-methode die we hier beschreven streng gecontroleerd, met zowel unligated als ligaturen ("sham") kwabben in hetzelfde dier, zodat minder dieren nodig per experiment zijn. Zelfs transgene muizen met ernstige onderliggende leverziekte kunnen worden gehandhaafd voor langere eindpunten (2-3 weken). Zorg moet men zich volledig bloot en identificeren van de gal boom met behulp van microdissection technieken, met beperkte manipulatie van vasculaire structuren en galwegen om verwonding te verhinderen.
De ideale experiment, zal weefsels uit de ligaturen (links) en unligated (rechts) lobben worden geoogst op hetzelfde moment, dus directe vergelijkingen van gal secretoire functie en transporteurs kunnen worden gemaakt met behulp van histologische en moleculaire technieken. Hoewel serum lever biochemistries niet bij ernstige cholestase aansluit zal, Demonstreer de ligaturen kwab histologische wijzigingen obstructieve cholestase10is gekoppeld. Dit model is nuttig zijn te onderzoeken van de directe microenvironmental effecten van ingehouden gal bestanddelen (bvgalzuren, lipiden, cholesterol) in de lever. Als een toekomstige studie, kunnen pBDL worden geacht te onderzoeken cholehepatic rangeren, waar bepaalde galzuren en drugs zijn convergentieperiode rechtstreeks vanaf cholangiocytes tot en met hepatocyten18,19. Endogene galzuren inefficiënt vervoegd door hepatocyten passief geabsorbeerd door biliaire epitheel cholehepatic evenals rangeren, wat leidt tot hypercholeresis en alkanlinization van de gal door verhoogde bicarbonaat secretie20ondergaan. Toepassing van de techniek van pBDL kan vergemakkelijken drugontdekking door het identificeren van farmacologische mechanismen voor roman gal zuur therapeutics onderzochte voor een leverziekte.
Extra toepassingen voor pBDL kunnen verder reiken dan de biliaire boom. Omkeerbaarheid van de cBDL en de bijbehorende gevolgen ervan is beschreven, en dit kan ook worden toegepast op pBDL met directe vergelijking tot aan de interne controle-21. Longitudinal in vivo bioimaging van fluorescerende verslaggever expressie in muis lever is ook bestudeerd na cBDL22, met krachtige gevolgen voor pBDL experimenten. Bovendien hebben knaagdier experimenten met behulp van de pBDL het potentieel te nemen lineage tracering of "homing" van circulerende cellen, zoals beenmerg-afgeleide mesenchymale cellen, op de site van lever schade, zodat ze kunnen worden bijgehouden in vivo met meer precisie23,24,25.
Er zijn duidelijk, wijdverbreide toepassingen voor pBDL alleen als een intern gecontroleerde en reproduceerbare techniek lever schade en reparatie, samen met biliaire fysiologie en drug metabolisme te studeren. Voor experimenten die erop gericht zijn om de progressie en de systemische effecten van chronische cholestase te evalueren, is cBDL nog steeds de meest aangewezen methode; pBDL wil echter nog aanvullende gegevens ter ondersteuning van deze bevindingen.
Subscription Required. Please recommend JoVE to your librarian.
Disclosures
De auteurs hebben geen informatieverschaffing.
Acknowledgments
Dr. Khan erkent subsidie ondersteuning van NIH/NICHD K12HD052892, de Alpha--1 Stichting, de Stichting Hillman en de Pittsburgh lever Research Center. Dr. Michalopoulos erkent subsidie ondersteuning van NIH/NIDDK P01DK096990. Wij waarderen de uitstekende en genereus technische bijstand van Anne Orr. Wij zijn ook dankbaar Dr David A. Geller voor het verstrekken van toegang tot de transplantatie/knaagdier microchirurgie lab.
Materials
| Name | Company | Catalog Number | Comments |
| Microscope-Leica Wild M650, 6–40× magnification | Leica Microsystems | n/a | |
| Tec 3 isoflurane funnel fill vaporizer | General Anesthetic Services | n/a | |
| Stevens Tenotomy Scissors | Accurate Surgical & Scientific Instruments Corporation | ASSI.9193 | |
| Adson Forceps | Fine science tools | 11006-12 | |
| Mosquito classic delicate hemostatic forceps | Codman | 30-4472 | |
| Micro-retractor | Murdock; Roboz Surgical Instrument | RS-6550 | |
| Nonwoven gauze sponges | Fisherband | 870-PC-DBL | |
| Puritan 6” Small Cotton Swab w/Wooden Handle | Puritan Medical Products Company | 868-WCS | |
| Dumont SS Forceps - Standard Tips/Straight/Inox/13.5cm | Fine science tools | 11203-23 | |
| Dumont SS Forceps - Standard Tips/Angled 45°/Inox/13.5cm | Fine science tools | 11203-25 | |
| Vannas Spring Scissors - 3mm Cutting Edge | Fine science tools | 15000-00 | |
| Microneedle holder | Aesculap Surgical Instruments | FD231R | |
| Micro AROSuture, sterile 10-0 nylon suture, 70 µm, TAP points | AROSurgical Instruments Corporation | T4A10N07 | |
| 4-0 Vicryl | Ethicon | J662H | |
| 5-ml Syringe | BD | 309646 | |
| Falcon tissue culture dish, 60 × 15 mm | Corning | 353002 | |
| Isoflurane, United States Pharmacopeia (USP) liquid for inhalation, 250 ml | Piramal Healthcare | NDC 66794-017-25 | |
| Buprenex injectable (buprenorphine hydrochloride) | Reckitt Benckiser Pharmaceuticals | NDC 12496-0757-1 | |
| Cefazolin for injection , USP | APP Pharmaceuticals | NDC 63323-238-61 | |
| PVP scrub solution (povidone–iodine 7.5%) | Medline | NDC 12496-0757-1 | |
| 70% Ethanol | Decon Labs | 2716 | |
| Phosphate Buffered Saline Without Calcium or Magnesium | LONZA | 17-516F | |
| Sirius Red | Sigma | 365548 | |
| Hematolxylin | Fisher (Richard-Allan Scientific) | 22-050-111 (7211) | |
| Eosin | Anatech (Fisher) | 832 (NC9686037) | |
| Formalin | Fisher | SF100-20 |
References
- Higgins, G. M., Anderson, R. Experimental pathology of the liver - Restoration of the liver of the white rat following partial surgical removal. Arch Pathol. 12, 186-202 (1931).
- Cameron, G. R., Oakley, C. L. Ligation of the common bile duct. The Journal of Pathology and Bacteriology. 35 (5), 769-798 (1932).
- Kountouras, J., Billing, B. H., Scheuer, P. J. Prolonged bile duct obstruction: a new experimental model for cirrhosis in the rat. Br J Exp Pathol. 65 (3), 305-311 (1984).
- Michalopoulos, G. K., Barua, L., Bowen, W. C. Transdifferentiation of rat hepatocytes into biliary cells after bile duct ligation and toxic biliary injury. Hepatology. 41 (3), 535-544 (2005).
- Dipaola, F., et al. Identification of intramural epithelial networks linked to peribiliary glands that express progenitor cell markers and proliferate after injury in mice. Hepatology. 58 (4), 1486-1496 (2013).
- Guyot, C., Combe, C., Desmouliere, A. The common bile duct ligation in rat: A relevant in vivo model to study the role of mechanical stress on cell and matrix behaviour. Histochem Cell Biol. 126 (4), 517-523 (2006).
- Zhang, Y., et al. Effect of bile duct ligation on bile acid composition in mouse serum and liver. Liver Int. 32 (1), 58-69 (2012).
- Tag, C. G., et al. Bile duct ligation in mice: induction of inflammatory liver injury and fibrosis by obstructive cholestasis. J Vis Exp. (96), e52438 (2015).
- Osawa, Y., et al. Systemic mediators induce fibrogenic effects in normal liver after partial bile duct ligation. Liver Int. 26 (9), 1138-1147 (2006).
- Khan, Z., et al. Bile Duct Ligation Induces ATZ Globule Clearance in a Mouse Model of alpha-1 Antitrypsin Deficiency. Gene Expr. 17 (2), 115-127 (2017).
- Birkhead, H. A., Briggs, G. B., Saunders, L. Z. Toxicology of cefazolin in animals. J Infect Dis. 128, 378 (1973).
- Kunst, M. W., Mattie, H., van Furth, R. Antibacterial efficacy of cefazolin and cephradine in neutropenic mice. Infection. 7 (1), 30-34 (1979).
- Traul, K. A., et al. Safety studies of post-surgical buprenorphine therapy for mice. Lab Anim. 49 (2), 100-110 (2015).
- Carlson, J. A., et al. Accumulation of PiZ alpha 1-antitrypsin causes liver damage in transgenic mice. J Clin Invest. 83 (4), 1183-1190 (1989).
- Sifers, R. N., Finegold, M. J., Woo, S. L. Alpha-1-antitrypsin deficiency: accumulation or degradation of mutant variants within the hepatic endoplasmic reticulum. Am J Respir Cell Mol Biol. 1 (5), 341-345 (1989).
- Rudnick, D. A., Shikapwashya, O., Blomenkamp, K., Teckman, J. H. Indomethacin increases liver damage in a murine model of liver injury from alpha-1-antitrypsin deficiency. Hepatology. 44 (4), 976-982 (2006).
- Heinrich, S., et al. Partial bile duct ligation in mice: a novel model of acute cholestasis. Surgery. 149 (3), 445-451 (2011).
- Glaser, S. S., Alpini, G. Activation of the cholehepatic shunt as a potential therapy for primary sclerosing cholangitis. Hepatology. 49 (6), 1795-1797 (2009).
- Gurpinar, E., et al. A novel sulindac derivative inhibits lung adenocarcinoma cell growth through suppression of Akt/mTOR signaling and induction of autophagy. Mol Cancer Ther. 12 (5), 663-674 (2013).
- Alpini, G. G., Francis, H., Marzioni, M., Venter, J., Phinizy, J., LeSage, G. Madame Curie Bioscience Database. , Landes Bioscience. Austin, TX. (2013).
- Kirkland, J. G., et al. Reversible surgical model of biliary inflammation and obstructive jaundice in mice. J Surg Res. 164 (2), 221-227 (2010).
- Delhove, J. M., et al. Longitudinal in vivo bioimaging of hepatocyte transcription factor activity following cholestatic liver injury in mice. Sci Rep. 7, 41874 (2017).
- Li, C., et al. Homing of bone marrow mesenchymal stem cells mediated by sphingosine 1-phosphate contributes to liver fibrosis. J Hepatol. 50 (6), 1174-1183 (2009).
- Xu, J., et al. Factors released from cholestatic rat livers possibly involved in inducing bone marrow hepatic stem cell priming. Stem Cells Dev. 17 (1), 143-155 (2008).
- Sharma, S., et al. Propitious role of bone marrow-derived mononuclear cells in an experimental bile duct ligation model: potential clinical implications in obstructive cholangiopathy. Pediatr Surg Int. 29 (6), 623-632 (2013).
