Summary
Här presenterar vi delvis gallgången ligering som kirurgiska modell av leverskada och förnyelse i gnagare.
Abstract
Hos gnagare är komplett gallgången ligatur (cBDL) av gallgången en etablerad kirurgisk teknik för att studera obstruktiv kolestas och gallgången spridning. Långsiktiga experiment kan dock leda till ökad sjuklighet och dödlighet. I Välj mus stammar med underliggande leversjukdom, kan meningsfulla jämförelser göras även med ligering av en enstaka LOB i levern, vilket kan minska animaliskt förluster och kostnader. Här beskriver vi delvis gallgången ligatur (pBDL) i musen, där endast den vänstra nedsatt gallgången är sammanskrivna, orsakar biliär obstruktion i den vänstra loben men inte återstående loberna. Med försiktig mikrokirurgisk teknik, kan pBDL experiment vara kostnadseffektiv, eftersom den unligated LOB fungerar som en intern kontroll till att ligated lober, när de utsätts för samma villkor på samma djur. Till skillnad från cBDL är en separat sham manövrerade kontrollgrupp inte nödvändigt. pBDL är mycket användbart att direkt jämföra lokaliserade kontra systemiska effekter av kolestas och andra balanserade galla komponenter. pBDL kan också vara repurposed som en ny metod för att undersöka mekanismer relaterade till mediciner och cellmigration.
Introduction
Kirurgiska modeller för akut leverskada och reparation, såsom partiell hepatectomy eller gallgången ligatur (cBDL), har använts i årtionden i gnagare för att studera lever regenerering och patobiologi1,2. I cBDL, är den gemensamma gallgången (som dränerar alla galla produceras i levern) sammanskrivna, vilket resulterar i obstruktiv kolestas, inflammation och fibros i de första 2-3 veckorna efter operation, med eventuell progression till cirros3. Gallgången spridning, transdifferentiation och induktion av bosatta lever stamceller är också inslag av cBDL4,5. Även om cBDL belyser särskilda mekanismer av obstruktiv cholangiopathy, som är välkarakteriserad med reproducerbara resultat i vildtyp möss och i dessa stammar med normal lever6,7,8, den förfarandet kan vara tekniskt krävande i vissa transgena musmodeller av leversjukdomar, som kräver fler djur än väntat på grund av högre sjuklighet och dödlighet av biliär obstruktion över tid. Denna teknik är också fördelaktigt för att studera transgena möss med underliggande lever sjukdom, som inte kanske annars tål stress av långvarig tid kursen experiment efter cBDL.
pBDL kan ge ett rimligt alternativ för att övervinna några av dessa utmaningar. Inledande pBDL studier i vildtyp möss syftar till att skilja lokalt verkande och systemisk mediatorer av inflammation9. Huvudsakliga biliär sammanflödet av höger och vänster nedsatt gallgångarna ovan gallgången visualiseras noggrant vid hilum i pBDL, och endast den vänstra nedsatt gallgången är sammanskrivna för att generera en lokaliserad obstruktiv kolestas. pBDL erbjuder flera fördelar till cBDL. I pBDL serverar unligated höger lob som identiskt matchade intern kontroll för den ligated vänster LOB, utsätts för samma systemiska effekter, såsom näringsstatus eller cirkulerande faktorer. Systemiska proinflammatoriska mediatorer var närvarande, Osawa et al. observerats mindre fibros och nekros i unligated loberna, men ökade inflammatoriska celler och omvandla tillväxt factor-β uttryck i sammanskrivna LOB9.
Mer nyligen, pBDL har omdefinierats för att studera lever parenkymal effekterna av balanserade galla10. Genom att använda samma djur för intern kontroll (unligated ”bluff”) och experimentella grupper, halverar pBDL effektivt antalet djur behövs per experiment, som i sin tur är mer kostnadseffektivt. Mössen tolerera effekterna av pBDL mycket bättre, så att en idealisk tid kursen experimentera (≥ 2 veckor) kan uppnås i de ligated LOB. Viktigast av allt, pBDL kan skilja direkta intrahepatisk effekterna av obstruktiv kolestas och behållit galla komponenter i den ligated LOB, jämfört med den unligated kontroll loben. Övergripande, pBDL är en attraktiv metod att studera LOB-specifika effekter av lokaliserade kolestas i levern.
Subscription Required. Please recommend JoVE to your librarian.
Protocol
Alla förfaranden genomfördes i enlighet med etiska riktlinjer från institutionella djur vård och användning kommittén vid University of Pittsburgh.
1. Grundläggande tekniker och gemensamma förfaranden
- Autoklav alla mikrokirurgisk utrustning före användning.
- För att undvika att döda musen av anestesi, kontrollera dess andningsmönster noggrant.
- Tryck på organ och tarmar så lite som möjligt för att undvika skada organ och orsakar blödningar. Tryck på blödande punkter med våt bomull svabb eller gasväv svampar.
- Använd våt bomull svabb för varsam manipulering av organ. Våt, non-woven kompress svampar används i två storlekar, 3,5 × 3,5 cm och 6.0 × 6,0 cm. Använd den mindre en att dra tillbaka hela levern. Använda den större för att Linda i tunntarm och tjocktarm.
2. presurgical beredning
- Använd c57/b6 hanmöss, 8-12 veckors ålder (när kroppsvikten är ca 20-35 g) för partiell gallgången ligering.
- Tillåta mössen fri tillgång till vatten och mat fram till induktion av anestesi.
3. partiell gallgången Ligation drift
- Söva musen genom att sätta djuret i en induktion kammare med en blandning av 1,5-2,0% isofluran och 1 L/min syre. Noggrant övervaka djuret genom att observera respirationshastighet. När djuret andning är ett andetag per sekund, är musen väl sövda. Eftersom främre extremiteterna tillbakadragande reflexen försvinner snabbare, nyp bakbenen foten samt för att bekräfta total avsaknad av tillbakadragande reflexen. Ögonen bör smörjas med ett oftalmologiska smörjande medel att förebygga korneal sår. Observera att första dosen av smärtstillande medel kan ges preoperativt att förhindra stimulering av smärtreceptorer.
- Raka bukväggen med hårklippningsmaskiner, och Placera musen på tabellen kirurgiska under kirurgiska Mikroskop. Fixa alla lemmar till tabellen med tejp. Använd isofluran inandning för att underhålla musen under narkos.
- Justera den isofluran spridare och använda 2,0-3,0% isofluran för induktion.
- Med hjälp av sterila kompresser, desinficera den buk-väggen först med 0,3-0,5 mL povidonjod appliceras lokalt, följt av 70% etanol. Djur bör täckas med en steril draperi.
- Gör en lång mittlinjen buk snitt från xiphoid till pubis med hjälp av sax och Adson pincett. Efter att buken snittet, minska isofluran till 0,8-1,0% för underhåll.
- Exponera bukhålan genom att använda en Micro-upprullare. Håll xiphoid med mygga peang och dra in mot huvudet av musen. Fixa mygga tången på plats med mjuk lera.
- Ingjuta 1-2 mL uppvärmd (37 ° C) steriliserad fosfatbuffrad saltlösning (PBS) i bukhålan att undvika skadade bukorganen. Håll de små tarmarna med våt bomull svabb och försiktigt dra dem mot huvudet av musen. Skär ligament mellan tunntarmen och retroperitoneum att undvika skadar tunntarmen (figur 1A).
- Linda i tunntarm och tjocktarm med en våt, non-woven kompress svamp. Placera dem på den kaudala delen av bukhålan. Tarmarna insvept i steril gasbinda kan placeras på fältet för sterila draperad för att undvika kontaminering.
- Dra försiktigt tillbaka hela levern mot xiphoid med hjälp av en liten våt non-woven kompress svamp för att exponera den nedsatt hilum och hepato-duodenal ligament (figur 1B).
- Kontrollera att bekräfta anatomi av nedsatt hilum. Gallgången ligger på ventrala sida i portalen ven. Bekräfta platser för höger och vänster nedsatt gallgången, som avrinningen in i huvudsakliga biliär sammanflödet på nedsatt hilum.
- Identifiera den vänstra nedsatt gallgången som dränerar den vänstra loben, och omsluta det med en 10-0 nylon sutur med den trubbiga sidan av en sutur nål (figur 2A). Undvik skadade i portvenen, hepatiska artären och leverns yta.
- Ligera vänster gallgången med 10-0 nylon. (Figur 2B).
- Placera i tunntarm och tjocktarm i samma position som före operationen med hjälp av våt bomull svabb.
- Bekräfta det finns ingen intestinal vridning och intraabdominell blödning, och stäng sedan muskeln och huden i två lager med 4-0 vicryl. Flätad sutur (Vicryl) användes för huden stängning, men monofilament föredras att minska sannolikheten för infektion.
Obs: Stäng fascia av fortsatt suturen från xiphoid till pubis, och huden av fortsatt suturen från pubis till xiphoid. - Stoppa anestesi efter stängning snittet.
4. postoperativ behandling och uppföljning
- Bara efter operationen, nyp i dorsala huden av musen och injicera Buprenex (0,1 mg/kg) och Cefazolin (100 mg/kg) subkutant, följt av Buprenex injektion varje 12 h för 3 dagar, och Cefazolin varje 24 h 3 dagar respektive11,12 ,13. Observera att första dosen av smärtstillande medel kan ges preoperativt att förhindra stimulering av smärtreceptorer. Cefazolin och andra perioperativ antibiotika behövs endast för immun-undertryckta djur, såsom de som används i transplantation studier.
Obs: Om operationen utförs framgångsrikt, musen oftast återhämtar sig inom 30 min. aktiviteten hos mössen kommer att vara nästan samma som det preoperativa tillståndet. - Kontrollera möss dagligen för tecken på ångest.
- Offra möss av de cervikal dislokation under narkos att upphandla lever och andra vävnadsprover vid definierade tidpunkter (dvs, 7, 14, 21 dagar) efter pBDL.
Subscription Required. Please recommend JoVE to your librarian.
Representative Results
Detta typiska experiment utfördes pBDL i tre exemplar PiZ transgena möss, som recapitulate det mänskliga leversjukdom finns i alfa-1 antitrypsinbrist (A1AT). PiZ musen overexpresses en transgenens bestående av flera genomisk fragment av DNA som innehåller Regionkommittén kodning av muterade mänskliga A1AT genen och promotorn, tillsammans med introner och ~ 2 kilobases av uppströms och nedströms angränsande regioner14, 15. Normal A1AT är en utsöndrade serumprotein som produceras i levern. Den muterade formen av A1AT genererar olösligt protein aggregat som spontant ansamlas i levern orsakar giftiga stress. Experimenten används 3 - månader gammal hanmöss PiZ, som uttrycker den allvarligaste fenotypen av denna sjukdom, när protein sammanläggning toppar16.
Levervärden i serum levervärden jämfördes i pBDL och cBDL PiZ möss (tabell 1)10. De leverenzymvärden alaninaminotransferas (ALAT) och aspartataminotransferas (ASAT) är biomarkörer för hepatocellulär skada, medan totalt serumbilirubin (TSB) mäter graden av kolestas. Möss som utsätts för pBDL sammantaget inte visar tecken på allvarlig leverskada eller kolestas, som deras serum var likartade till originalplan10. Det är viktigt att notera att möss med misslyckade pBDL (på grund av tekniska problem, såsom gallgången eller vaskulära skador) kommer att Visa serum värden liknar cBDL möss, med signifikant förhöjda leverenzymer och TSB. Kliniskt, möss med misslyckade pBDL visas mer fördomsfull och bedrövad, med fynd av galla läckor, ascites, peritonit eller hematom och kommer i slutändan att behöva offras.
Eftersom möss som utsätts för pBDL utveckla LOB-specifika obstruktiv kolestas, förvärvar de inte utspänd, mörk, galla-fyllda gallblåsan sett i cBDL. Endast den ligated LOB visas blekare i färgen, medan unligated loberna kommer att upprätthålla deras normala, mörk, rödbrun färg (figur 3). Det finns viktiga skillnader i levern histologi samt, med ökad gallgången spridning och fibros i de ligated lob (figur 4). 10
Tabell 1: Representativa serum lever levervärden från partiell gallgången ligatur (pBDL) jämfört med komplett gallgången ligatur (cBDL) 10 . Varje tidpunkt motsvarar 3-4 möss. Observera PiZ transgena möss på c57/bl6 bakgrund. Lab referensområden ges också inom parentes. (WT, vildtyp; TSB, totalt serumbilirubin; ALT, alaninaminotransferas; ALP, alkalisk fosfatas).
Figur 1:exponering av buken hålighet och hepatobiliära. (A) tunntarmen dras försiktigt för att undvika läkt skada, och de anslutande ligament skärs fri från retroperitoneum. (B) levern är försiktigt indraget för att tillåta maximal visualisering av biliär trädet vid nedsatt hilum (pil). Klicka här för att se en större version av denna siffra.
Figur 2 : Partiell gallgången ligering. (A) den trubbiga änden av kirurgiska nålen används för att noggrant omringa nylon sutur runt vänster nedsatt gallgången, ovanför sammanflödet till gallgången (ursprungliga förstoring 40 x). (B) framgångsrika ligatur av vänster nedsatt gallgången, som normalt dränerar den vänster LOB i levern. Återstående gallgångarna är unligated (ursprungliga förstoring 40 X). Klicka här för att se en större version av denna siffra.
Figur 3: brutto utseende i WT (c57/b6) mus levern 14 dagar efter pBDL. Observera att den ligated vänster LOB visas blekare i färgen (pilar), medan unligated loberna behåller deras normala, mörk, rödbrun färg. Klicka här för att se en större version av denna siffra.
Figur 4 : LOB-specifika förändringar i representativa levervävnad sektioner från dag 14 pBDL jämföra unligated höger (R) LOB sammanskrivna vänster (L) LOB i WT (c57/b6) möss. (A) Hematoxylin och eosin (H & E) färgning visar ökade gallgången proliferation (pilar) i den ligated LOB. (B) Sirius röda fläcken visar överbryggande fibros åtföljer gallgången spridning i den ligated LOB. Histologi för PiZ mus har varit tidigare rapporterade10. Klicka här för att se en större version av denna siffra.
Subscription Required. Please recommend JoVE to your librarian.
Discussion
Även om cBDL är den vanligaste experimentella tekniken för obstruktiv kolestas, kan den lägga fram flera utmaningar på gnagare. Beroende på antalet postoperativa dagarna krävs för att uppnå en slutpunkt, kan djuren upplever betydande sjuklighet och dödlighet allteftersom tiden går. Graden av vävnadsskada och biliär nekros förvärras ytterligare när du arbetar med vissa transgena musmodeller av leversjukdom, som visar onormala lever parenkymet och funktion vid baslinjen. Jämfört med cBDL, rapporter om pBDL är begränsad, men denna teknik kan tillämpas som alternativ i Välj experiment för att minska negativa resultat och djur förluster.
Variationer i metoden pBDL har också rapporterats. I metoden i Heinrich et al.placeras en extern böjd nål i anslutning till den gemensamma gallgången, följt av ligatur runt både i gallgången och nål17. Nålen tas sedan bort innan bukväggen, vilket resulterar i begränsad galla flöde genom en trånga lumen (dvs, delsumma obstruktion) av gallgången17. Under detta förfarande, tas gallblåsan också bort för att förhindra kolecystit17. Författarna drog slutsatsen att denna metod var mer fördelaktigt att studera akut kolestas i stället för kroniska förändringar17. Däremot styrs metoden pBDL som vi beskrivit här tätt, med både sammanskrivna och unligated (”sham”) loberna på samma djur, så mindre djur krävs per experiment. Även transgena möss med allvarlig underliggande leversjukdom kan upprätthållas för längre slutet Poäng (2-3 veckor). Var noga med att helt avslöja och identifiera biliär trädet med lokalt tekniker, med begränsad manipulation av vaskulära strukturer och gallgångarna att förhindra skada.
I idealisk experimentet, kommer vävnader från sammanskrivna (vänster) och unligated (höger) loberna att skördas samtidigt, så direkta jämförelser av galla sekretoriska funktion och transportörer kan göras med hjälp av histologisk och molekylära tekniker. Även om levervärden i serum levervärden inte reflekterar svår kolestas, demonstrerar den ligated LOB histologiska förändringar i samband med obstruktiv kolestas10. Denna modell är användbart att studera direkta microenvironmental effekter av balanserade galla komponenter (t.ex., gallsyror, lipider, kolesterol) i levern. Som en framtida studie, bör pBDL övervägas att undersöka cholehepatic rangering, där vissa gallsyror och droger är återabsorberas direkt från cholangiocytes till hepatocyter18,19. Endogena gallsyror ineffektivt konjugerat av hepatocyter absorberas passivt av biliär epitel genomgå cholehepatic rangering samt, vilket leder till hypercholeresis och alkanlinization av gallan genom ökad bikarbonat sekretion20. Tillämpningen av pBDL tekniken kan underlätta läkemedelsutveckling genom att identifiera farmakologiska mekanismer för romanen gallsyra therapeutics under utredning för leversjukdom.
Ytterligare ansökningar om pBDL kan sträcka sig bortom biliär trädet. Reversibiliteten av cBDL och dess associerade effekter har beskrivits, och detta kan också tillämpas på pBDL med direkt jämförelse till den interna kontroll21. Likaså har längsgående i vivo bioimaging fluorescerande reporter uttryck i mus lever studerats efter cBDL22, med kraftfulla effekter för pBDL experiment. Dessutom har gnagare experiment med pBDL potential att införliva lineage tracing eller ”homing” av cirkulerande celler, såsom benmärg-derived mesenkymala celler, till platsen för leverskada, att låta dem vara spårade i vivo med mer Precision23,24,25.
Klart, det finns omfattande program för pBDL enbart som ett internt kontrollerade och reproducerbara teknik att studera leverskada och reparation, tillsammans med gallan fysiologi och drog metabolism. För experiment som syftar till att utvärdera progression och systemiska effekter av kronisk kolestas, är cBDL fortfarande den mest föredragna metoden; pBDL skulle dock fortfarande lägga till kompletterande data för att stödja sådana fynd.
Subscription Required. Please recommend JoVE to your librarian.
Disclosures
Författarna har inga upplysningar.
Acknowledgments
Dr Khan erkänner bidragsstöd från NIH/NICHD K12HD052892, alfa-1 Stiftelsen, Stiftelsen Hillman och Pittsburgh levern Research Center. Dr. Michalopoulos erkänner bidragsstöd från NIH/NIDDK P01DK096990. Vi uppskattar utmärkt och generösa tekniskt bistånd av Anne Orr. Vi är också tacksamma mot Dr David A. Geller för att ge åtkomst till transplantation/gnagare Microsurgery lab.
Materials
| Name | Company | Catalog Number | Comments |
| Microscope-Leica Wild M650, 6–40× magnification | Leica Microsystems | n/a | |
| Tec 3 isoflurane funnel fill vaporizer | General Anesthetic Services | n/a | |
| Stevens Tenotomy Scissors | Accurate Surgical & Scientific Instruments Corporation | ASSI.9193 | |
| Adson Forceps | Fine science tools | 11006-12 | |
| Mosquito classic delicate hemostatic forceps | Codman | 30-4472 | |
| Micro-retractor | Murdock; Roboz Surgical Instrument | RS-6550 | |
| Nonwoven gauze sponges | Fisherband | 870-PC-DBL | |
| Puritan 6” Small Cotton Swab w/Wooden Handle | Puritan Medical Products Company | 868-WCS | |
| Dumont SS Forceps - Standard Tips/Straight/Inox/13.5cm | Fine science tools | 11203-23 | |
| Dumont SS Forceps - Standard Tips/Angled 45°/Inox/13.5cm | Fine science tools | 11203-25 | |
| Vannas Spring Scissors - 3mm Cutting Edge | Fine science tools | 15000-00 | |
| Microneedle holder | Aesculap Surgical Instruments | FD231R | |
| Micro AROSuture, sterile 10-0 nylon suture, 70 µm, TAP points | AROSurgical Instruments Corporation | T4A10N07 | |
| 4-0 Vicryl | Ethicon | J662H | |
| 5-ml Syringe | BD | 309646 | |
| Falcon tissue culture dish, 60 × 15 mm | Corning | 353002 | |
| Isoflurane, United States Pharmacopeia (USP) liquid for inhalation, 250 ml | Piramal Healthcare | NDC 66794-017-25 | |
| Buprenex injectable (buprenorphine hydrochloride) | Reckitt Benckiser Pharmaceuticals | NDC 12496-0757-1 | |
| Cefazolin for injection , USP | APP Pharmaceuticals | NDC 63323-238-61 | |
| PVP scrub solution (povidone–iodine 7.5%) | Medline | NDC 12496-0757-1 | |
| 70% Ethanol | Decon Labs | 2716 | |
| Phosphate Buffered Saline Without Calcium or Magnesium | LONZA | 17-516F | |
| Sirius Red | Sigma | 365548 | |
| Hematolxylin | Fisher (Richard-Allan Scientific) | 22-050-111 (7211) | |
| Eosin | Anatech (Fisher) | 832 (NC9686037) | |
| Formalin | Fisher | SF100-20 |
References
- Higgins, G. M., Anderson, R. Experimental pathology of the liver - Restoration of the liver of the white rat following partial surgical removal. Arch Pathol. 12, 186-202 (1931).
- Cameron, G. R., Oakley, C. L. Ligation of the common bile duct. The Journal of Pathology and Bacteriology. 35 (5), 769-798 (1932).
- Kountouras, J., Billing, B. H., Scheuer, P. J. Prolonged bile duct obstruction: a new experimental model for cirrhosis in the rat. Br J Exp Pathol. 65 (3), 305-311 (1984).
- Michalopoulos, G. K., Barua, L., Bowen, W. C. Transdifferentiation of rat hepatocytes into biliary cells after bile duct ligation and toxic biliary injury. Hepatology. 41 (3), 535-544 (2005).
- Dipaola, F., et al. Identification of intramural epithelial networks linked to peribiliary glands that express progenitor cell markers and proliferate after injury in mice. Hepatology. 58 (4), 1486-1496 (2013).
- Guyot, C., Combe, C., Desmouliere, A. The common bile duct ligation in rat: A relevant in vivo model to study the role of mechanical stress on cell and matrix behaviour. Histochem Cell Biol. 126 (4), 517-523 (2006).
- Zhang, Y., et al. Effect of bile duct ligation on bile acid composition in mouse serum and liver. Liver Int. 32 (1), 58-69 (2012).
- Tag, C. G., et al. Bile duct ligation in mice: induction of inflammatory liver injury and fibrosis by obstructive cholestasis. J Vis Exp. (96), e52438 (2015).
- Osawa, Y., et al. Systemic mediators induce fibrogenic effects in normal liver after partial bile duct ligation. Liver Int. 26 (9), 1138-1147 (2006).
- Khan, Z., et al. Bile Duct Ligation Induces ATZ Globule Clearance in a Mouse Model of alpha-1 Antitrypsin Deficiency. Gene Expr. 17 (2), 115-127 (2017).
- Birkhead, H. A., Briggs, G. B., Saunders, L. Z. Toxicology of cefazolin in animals. J Infect Dis. 128, 378 (1973).
- Kunst, M. W., Mattie, H., van Furth, R. Antibacterial efficacy of cefazolin and cephradine in neutropenic mice. Infection. 7 (1), 30-34 (1979).
- Traul, K. A., et al. Safety studies of post-surgical buprenorphine therapy for mice. Lab Anim. 49 (2), 100-110 (2015).
- Carlson, J. A., et al. Accumulation of PiZ alpha 1-antitrypsin causes liver damage in transgenic mice. J Clin Invest. 83 (4), 1183-1190 (1989).
- Sifers, R. N., Finegold, M. J., Woo, S. L. Alpha-1-antitrypsin deficiency: accumulation or degradation of mutant variants within the hepatic endoplasmic reticulum. Am J Respir Cell Mol Biol. 1 (5), 341-345 (1989).
- Rudnick, D. A., Shikapwashya, O., Blomenkamp, K., Teckman, J. H. Indomethacin increases liver damage in a murine model of liver injury from alpha-1-antitrypsin deficiency. Hepatology. 44 (4), 976-982 (2006).
- Heinrich, S., et al. Partial bile duct ligation in mice: a novel model of acute cholestasis. Surgery. 149 (3), 445-451 (2011).
- Glaser, S. S., Alpini, G. Activation of the cholehepatic shunt as a potential therapy for primary sclerosing cholangitis. Hepatology. 49 (6), 1795-1797 (2009).
- Gurpinar, E., et al. A novel sulindac derivative inhibits lung adenocarcinoma cell growth through suppression of Akt/mTOR signaling and induction of autophagy. Mol Cancer Ther. 12 (5), 663-674 (2013).
- Alpini, G. G., Francis, H., Marzioni, M., Venter, J., Phinizy, J., LeSage, G. Madame Curie Bioscience Database. , Landes Bioscience. Austin, TX. (2013).
- Kirkland, J. G., et al. Reversible surgical model of biliary inflammation and obstructive jaundice in mice. J Surg Res. 164 (2), 221-227 (2010).
- Delhove, J. M., et al. Longitudinal in vivo bioimaging of hepatocyte transcription factor activity following cholestatic liver injury in mice. Sci Rep. 7, 41874 (2017).
- Li, C., et al. Homing of bone marrow mesenchymal stem cells mediated by sphingosine 1-phosphate contributes to liver fibrosis. J Hepatol. 50 (6), 1174-1183 (2009).
- Xu, J., et al. Factors released from cholestatic rat livers possibly involved in inducing bone marrow hepatic stem cell priming. Stem Cells Dev. 17 (1), 143-155 (2008).
- Sharma, S., et al. Propitious role of bone marrow-derived mononuclear cells in an experimental bile duct ligation model: potential clinical implications in obstructive cholangiopathy. Pediatr Surg Int. 29 (6), 623-632 (2013).
