Waiting
Login processing...

Trial ends in Request Full Access Tell Your Colleague About Jove
Click here for the English version

Medicine

نموذج الفئران من أورثوتوبيك زرع الكبد استخدام تقنية رواية ملامسة مغناطيسي للتعمير الوريد الأجوف سوبراهيباتيك

Published: March 19, 2018 doi: 10.3791/56933
* These authors contributed equally

Summary

وتظل إعادة إعمار الأجوف فينا سوبراهيباتيك (شفك) خطوة صعبة في زرع الكبد أورثوتوبيك الفئران. في هذه المقالة، نحن إظهار بروتوكول خطوة بخطوة للتعمير شفك في الفئران باستخدام تقنية رواية ملامسة مغناطيسية.

Abstract

نموذج الفئران من زرع الكبد أورثوتوبيك (OLT) ضروري لأبحاث زرع الأعضاء. وهو نموذج حيوان متطورة للغاية ويتطلب منحنى التعلم حاد. قد إدخال تقنية الكفة لملامسة الوريد البابي (PV) وإينفراهيباتيك الوريد الأجوف (إيهفك) إلى حد كبير على تبسيط إجراءات زرع في الفئران. بسبب الجدار الأمامي القصير سوبراهيباتيك الوريد الأجوف المستلمين (شفك)، تقنية الكفة غير صعبة للغاية لاستخدامها لإعادة بناء شفك. معظم الباحثين في هذا الميدان لا تزال تستخدم تقنية خياطة اليد لإعمار شفك، مما يجعل هذه الخطوة عنق الزجاجة في زرع الكبد أورثوتوبيك الفئران. تقنية ملامسة المغناطيسي (أي، ماجناموسيس) أسلوب الربط بين سفينتين تابعتين لاستخدام قوة جاذبية بين اثنين من المغناطيس. لدينا دراسة أجريت مؤخرا أظهرت أن ملامسة المغناطيسي التقنية متفوقة على تقنية خياطة اليد للتعمير شفك في الفئران. في هذه المقالة، نحن إظهار بروتوكول خطوة بخطوة للتعمير شفك في الفئران باستخدام تقنية الرواية ملامسة المغناطيسية. في هذا النموذج، إعادة إعمار PV وإيهفك كان يؤديها تقنية الكفة القياسية، بينما كان يؤديها تعمير القناة الصفراوية (دينار بحريني) تقنية تركيب دعامات. لم يتم تنفيذ أرتيرياليزاتيون إعادة وظائف الكبد. تقنية ملامسة المغناطيسية جعلت التعمير شفك أسهل بكثير واختصارها إلى حد كبير في مرحلة أنفيباتيك. بعد منحنى التعلم معقولة، يمكن أن تنتج حتى الباحثين دون مهارات متقدمة microsurgical نتائج موثوقة واستنساخه باستخدام نموذج الفئران هذا قلت.

Introduction

نموذج الفئران من زرع الكبد أورثوتوبيك (OLT) ضروري لزرع البحوث1،2. ووصف لي et al. في عام 19733قلت الفئران الأولى. في هذا النموذج، أعيد جميع السفن بتقنية خياطة اليد. تقنية خياطة يدوية تتطلب مهارات microsurgical متقدمة، مما يحد بشكل كبير استخدام. ومنذ ذلك الحين، أبلغ عن مختلف التعديلات على البروتوكول الأصلي من الفئران قلت. فيما بينها، تعتبر تقنية الكفة لملامسة الوريد البابي (PV) وإينفراهيباتيك الوريد الأجوف (إيهفك) عنها كامارا et al. في عام 1979 تحسنا كبيرا لهذا النموذج، كما أنها إلى حد كبير تبسيط الإجراءات التعمير4 . بسبب الجدار الأمامي القصير سوبراهيباتيك الوريد الأجوف المستلمين (شفك)، تقنية الكفة غير صعبة للغاية لاستخدامها لإعادة بناء شفك. معظم الباحثين في هذا الميدان لا تزال تستخدم تقنية خياطة اليد لإعمار شفك، مما يجعل هذه الخطوة عنق الزجاجة في الفئران قلت5،6،7.

تقنية ملامسة المغناطيسي (أي، ماجناموسيس) أسلوب الربط بين سفينتين أو هياكل أخرى أنبوبي باستخدام قوة جاذبية بين اثنين مغناطيس8،،،من910،11. القوة المغناطيسية يضغط تدريجيا ويعيد تشكيل الأنسجة إلى ملامسة قوية، ستارلس،من1213. وقد ثبت هذا ملامسة ضغط فعالة في البشر14،15. لقد قمنا بتصميم زوج من الحلقات المغناطيسية على وجه التحديد لملامسة شفك في الفئران. لدينا دراسة أجريت مؤخرا أظهرت أن ملامسة المغناطيسي التقنية متفوقة على تقنية خياطة اليد للتعمير شفك في الفئران قلت16. والغرض من هذه المقالة توفير بروتوكول تفصيلاً، خطوة بخطوة للتعمير شفك في الفئران باستخدام تقنية الرواية ملامسة المغناطيسية.

Subscription Required. Please recommend JoVE to your librarian.

Protocol

البروتوكول قد نفذت وفقا للمبادئ التوجيهية لرعاية واستخدام الحيوانات المختبرية وأقرته اللجنة المعنية بالأخلاقيات للحيوان تجارب لجامعة شيان جياوتونغ، وشيان، مقاطعة شنشي الصينية.

ملاحظة: أي من الإجراءات الواردة في هذا البروتوكول قد أنجز تحت مجهر جراحي.

1-إعداد قبل الجراحة

  1. تصميم وتشكيل عصابات المغناطيسي (الشكل 1)
    1. قم بتجميع الجهاز المغناطيسي ملامسة بمطابقة زوج من عصابات المغناطيسي نيوديميوم-حديد-بورون.
    2. تصميم الخواتم وفقا لمعلمات الفئران شفك بقطر المحور الرئيسي والمحاور الثانوية قطرها، سمك والوزن من 8 مم، 5.5 ملم، 1 مم، ز 0.5، على التوالي.
    3. منحنى الحلقات بالشكل المطلوب بأسلوب قطع سلك كهربائي، ثم معطف الحلقات التي يتم الحصول عليها مع البخاخة أكسيد تيتانيوم وتعقيم مع أكسيد الإيثيلين 500 مغ/لتر عند درجة 55-60 درجة مئوية ح 6.
  2. الأصفاد (الشكل 2)
    1. تعد صفعة لملامسة إيهفك والكهروضوئية بقطع الأنبوب البولي إيثيلين. التأكد من أن الجسم الكفة 5 مم طويلة مع ملحق الكفة 2 مم.
      ملاحظة: أقطار الداخلي والخارجي من الرباط PV 1.8 و 2.1 ملم، ولئن كانت تلك الكفة إيهفك 2.6 و 2.8 مم، على التوالي.
  3. تركيب دعامات (الشكل 2)
    1. إعداد تركيب دعامات لملامسة دينار بحريني بقطع 24-ز القنية الوريدية بطول 5 مم لإنتاج الميل في كلا طرفي.
  4. الحيوانات التجريبية
    1. استخدام ذكور الفئران "سبراغ داولي" وزنها بين 250 و 280 g كالجهات المانحة والجهات المستفيدة. ضمان أن المتلقي هو نفس الوزن أو أثقل قليلاً (< 10 جرام) من الجهات المانحة.
    2. الحفاظ على الفئران في غرف التحكم في المناخ مع حرية الوصول إلى الغذاء والماء قبل الجراحة.

2-الجهات المانحة العملية

  1. حقن البوبرينورفين (0.05 مغ/كغ) تحت الجلد كمسكن 1 ساعة قبل العملية.
  2. تخدير الفئران المانحين باستنشاق إيسوفلوراني. استخدام 5 المجلد % إيسوفلوراني بمعدل تدفق 1.5 لتر في الدقيقة في صندوق زجاجي لاستحثاث التخدير والمجلد 2% إيسوفلوراني بمعدل تدفق 0.6-0.8 لتر/دقيقة في مخروط قناع للمحافظة على التخدير. تأكيد عمق التخدير عن طريق إجراء رشة أخمص القدمين وقرصة جلد.
  3. يحلق الجلد البطن كله من الفئران باستخدام ماكينة حلاقة كهربائية للسماح للتعرض أكثر نظافة. تطهير الجلد المقابلة بمحلول بوفيدون.
  4. فتح تجويف البطن عبر شق cruciform استخدام مقص جراحي من جذر القضيب تمتد إلى 1 سم فوق إكسيفيستيرنوم على طول لينيا ألبا، ويمتد من نقطة الوسط للشق الطولي لخط ميداكسيلاري. اكستريورز الجهاز الهضمي إلى اليسار وتغطية ذلك مع الشاش الرطب.
  5. المشبك وسحب إكسيفيستيرنوم نحو الرأس باستخدام ملقط مرقئ. تشريح في الرباط فالسيفورم والأنسجة الضامة حول الكبد. عزل وسد الوريد فرنك أدنى اليسار مع خياطة حرير 6-0.
  6. إدراج في تركيب دعامات الصفراوية.
    1. المشبك دينار بحريني فقط أعلى نقطة حيث ينضم هذا السياق قصور الوريد البابي وتسحبه إلى الإبقاء على التوتر قليلاً باستخدام ميكروفورسيبس. ثم تنفيذ شق "V" من طول 1 ملم على الجدار الأمامي حوالي 5 مم الدانية لالتقاء الصفراوية عن طريق مقصات الصغرى.
    2. إدراج في تركيب دعامات في التجويف القناة الصفراوية استخدام ميكروفورسيبس منحنية. تأكد من أن مالا يقل عن نصف من الأكاذيب تركيب دعامات خارج القناة الصفراوية.
    3. تأمين تركيب دعامات مع خياطة حرير 6-0. قطع واحدة من نهاية خياطة الجروح. الاحتفاظ بواحدة أخرى على عقد أثناء ملامسة لاحقاً. قطاع القناة الصفراوية أدناه تركيب دعامات وتأكد من الصفراء يمكن الخروج تركيب دعامات.
  7. عزل إيهفك وصولاً إلى مستوى الوريد الكلوي الأيسر. تحرير إيهفك من الأنسجة المحيطة بها الأمامية والجانبية بتشريح براعم القطن حتى إيهفك هو العظمية. منفصلة وسد الوريد سوبرارينال الحق والوريد الكلوي الحق مع خياطة حرير 6-0.
  8. هيبارينيزي الفئران بحقن 50 ش الهيبارين المخفف في 2 مل المحلول الملحي العادي عن طريق الوريد الظهرية للقضيب.
  9. نتخلل في الكبد.
    1. عزل الشريان الاورطي البطني أسفل الوريد الكلوي الأيسر. إدراج قسطرة 22-ز في الشريان الاورطي.
    2. أداء thoracotomy، المشبك الشريان الاورطي الصدري استخدام ميكروفورسيبس.
    3. نتخلل في الكبد الجهات المانحة عن طريق القسطرة في الشريان الاورطي مع 20 مل محلول الملحي العادي يحتوي على 25 يو الهيبارين (4 درجة مئوية) بمعدل 3 مل/دقيقة مع مضخة تسريب. وفي الوقت نفسه، قطع الأجوف فينا أدناه الوريد الكلوي الحق للسماح بحل نضح تتدفق من الكبد.
    4. قطاع شفك جنبا إلى جنب مع جزء من الحجاب الحاجز وإيهفك على مستوى الوريد الكلوي الأيسر عندما أصبح الكبد المانحة سبيله.
  10. تشريح النسيج الضام المحيطة الكهروضوئية بالملقط الصغير اثنين. سد وتقسم عروق البواب مع خياطة بروليني 8-0. قطاع الكهروضوئية على مستوى الوريد الطحال. المكوس الكبد المانحين وشطفه مع المحلول الملحي العادي البارد. مكان في الملحية باردة حمام 4 درجات مئوية.

3-الكسب غير المشروع إعداد

ملاحظة: يتم تنفيذ جميع الإجراءات لإعداد الاختلاس الكبد في حمام مالحة باردة عند 4 درجة مئوية.

  1. نعلق الكفة إيهفك الجهة المانحة (الشكل 3).
    1. إدراج في إيهفك في الرباط مع ملحق الكفة لافتاً نحو الكبد. موقف التمديد صفعة على الجدار الخلفي من إيهفك. إصلاح تمديد الكفة وإيهفك مع ميكروفورسيبس منحنى نفسها المرفقة باستخدام مقطع ملف إلى حاوية حمام.
    2. إيفرت نهاية القاصي إيهفك على الجسم الكفة استخدام الملقط الصغير اثنين.
    3. تأمين الحافة مع خياطة حرير 6-0. تأكد من أن هو لم الملتوية إيهفك أثناء العملية.
  2. كرر الخطوة 3.1 على الكهروضوئية لإرفاقها الكفة PV الجهة المانحة.
  3. إرفاق حلقة مغناطيسي شفك الجهة المانحة (الشكل 4).
    1. سحب الحجاب الحاجز عن طريق الملقط الأربعة وتقليم شفك.
    2. تمرير شفك من خلال الطوق المغناطيسي باستخدام الملقط الصغير المصنوع من سبائك التيتانيوم.
    3. إيفرت نهاية القاصي شفك على الحلبة.
    4. تأمين الطوق مع خياطة حرير 6-0. تأكد من عدم هو الملتوية في شفك أثناء العملية.
    5. قم بإزالة الحاجز الزائدة حول الكبد.
  4. تزج الكبد المانحين في حمام مالحة عادية باردة وتخزينها في 4 درجات مئوية.

4-المتلقي العملية

ملاحظة: يظهر مخطط زرع الفساد في الفئران المستفيدة في الشكل 5.

  1. حقن البوبرينورفين (0.05 مغ/كغ) تحت الجلد كمسكن 1 ساعة قبل العملية. تخدير الفئران المانحين باستنشاق إيسوفلوراني. استخدام 5 المجلد % إيسوفلوراني بمعدل تدفق 1.5 لتر في الدقيقة في صندوق زجاجي لاستحثاث التخدير والمجلد 2% إيسوفلوراني بمعدل تدفق 0.6-0.8 لتر/دقيقة في مخروط قناع للمحافظة على التخدير.
  2. يحلق الجلد البطن كله من الفئران. تطهير الجلد المقابلة بمحلول بوفيدون.
  3. فتح تجويف البطن عبر شق خط الوسط 4 سم. ضع الكامشات البطن. سحب الأضلاع متباعدة قدر الإمكان من خط الوسط.
  4. المشبك وسحب إكسيفيستيرنوم نحو الرأس باستخدام ملقط مرقئ. تشريح الأنسجة الضامة والأربطة حول الكبد. سد وتقسيم الرباط الكبدية المريء. سد وتقسيم الشريان الكبدي مع خياطة برلين 8-0.
  5. عزل القناة الصفراوية المشتركة من أول بوابة الكبد. وضع خياطة حرير حول القناة الصفراوية المشتركة فقط دون الشعبة 6-0، وسد القناة الصفراوية المشتركة.
  6. تشريح إيهفك وصولاً إلى الوريد الكلوي الحق. سد وتقسم على المنوال حق الغدة الكظرية. وضع حزام في شفك في الكبد.
  7. المشبك إيهفك فقط فوق الوريد الكلوي الحق مع مقاطع ميكروفيسيل. المشبك الكهروضوئية على مستوى الوريد البواب مع مقاطع ميكروفيسيل.
    1. تدفق الدم من الكبد، ببطء حقن 2 مل من المحلول الملحي العادي عن طريق الكهروضوئية. اسحب لأسفل الكبد عن طريق سحب الشريط الموضوعة سابقا. المشبك بشفك وجزء من الحجاب الحاجز مع المشبك ساتينسكي.
    2. قطاع إيهفك قريبة لحمه والكهروضوئية في hepatis بورتا. المكوس الكبد من ترانسيكتينج شفك فقط فوق الكبد. إزالة الكبد المتلقي بسرعة.
  8. إرفاق حلقة مغناطيسي شفك الخاص بالمستلم.
    1. إدراج شفك المتبقية للمستلم في عصابة مغناطيسية.
    2. إصلاح الطوق المغناطيسي على المشبك ساتينسكي واسطة الجذب المغناطيسي.
    3. إيفرت شفك على الطوق المغناطيسي حتى يغطي السفينة على حافة الحلبة.
  9. ضع أورثوتوبيكالي الاختلاس الكبد المانحين وتغطية ذلك مع شاش رطب بارد.
  10. ملء التجويف شفكس المانح والمتلقي مع المحلول الملحي العادي. إزالة فقاعات الهواء جيدا لمنع الانسداد الهواء. الانتهاء من إعادة بناء شفك باقتران حلقات مغناطيسية جزءا لا يتجزأ من شفك المانح والمتلقي معا من خلال القوة المغناطيسية.
  11. إعادة إنشاء الكهروضوئية.
    1. المسالك فرع PV المستلم عن طريق سحب خياطة برلين 8-0 للحفاظ على توتر الكهروضوئية في اليمين واليسار.
    2. نقل المشبك الفلطاضوئيه المستلم إلى أسفل من المنطلق بواب إلى الوريد الطحال من أجل فضح هذا السياق تماما.
    3. جداً الجدار الأمامي للمستلم. ملء التجويف الكهروضوئية مع المحلول الملحي العادي.
    4. لإجراء تمديد الكفة PV الجهة المانحة ملقط منحنية.
    5. إدراج نص الكفة الكهروضوئية للمانحين في PV المستلم بينما تبقى شطف التجويف الكهروضوئية مع المحلول الملحي العادي.
    6. تأمين مع كفافى حرف مزدوج الحرير 6-0. إعادة تدفق الدم إلى الكبد الابتزاز عن طريق الإفراج عن المشابك على الكهروضوئية وشفك.
  12. كرر الخطوة 4، 11 في إيهفك لإعادة بناء إيهفك.
  13. إعادة بناء القناة الصفراوية بتقنية تركيب دعامات.
    1. جداً "V" على الجدار الأمامي للقناة الصفراوية المشتركة المستفيدة.
    2. إدراج تركيب دعامات المانحين في التجويف المستلم دينار بحريني وإصلاحه بخياطة الجروح كفافى حرير 6-0. سحب خيوط الصفراوية اثنين معا، وربط خيوط جلب دينار بحريني قريبة من بعضها البعض.
    3. التفاف الثرب الأنسجة المحيطة بموقع أناستوموتيك لمنع تسرب الصفراء.
  14. ري تجويف البطن مع المحلول الملحي العادي الحارة. إغلاق شق البطن في طبقتين مع مستمرة خياطة الجراحية غير الامتصاص 3-0.
  15. إدارة سيفوروكسيم 16 مغ/كغ (مضاد حيوي) والبوبرينورفين 0.05 مغ/كغ (مسكن) عن طريق الحقن تحت الجلد بعد العملية فورا.
  16. وضع الفئران في قفص نظيف والسماح للمواد الغذائية والمياه libitum الإعلانية.
  17. حقن البوبرينورفين (0.05 مغ/كغ) وسيفروكسيم (16 مغ/كغ) في تجويف البطن كل 12 ساعة لمدة 3 أيام.

Subscription Required. Please recommend JoVE to your librarian.

Representative Results

بعد حوالي عشر محاولات، كان يتقن تقنية ملامسة المغناطيسي للتعمير شفك بنجاح بأحد الباحثين الذين قد لا يوجد تدريب microsurgical السابقة. إعادة إعمار شفك استغرق أقل من 2 دقيقة. وكان مرحلة أنهيباتيك للفئران المستفيدة حوالي 10 دقيقة. ولوحظ لا تجلط الدم أو النزيف أو أنجيوستيجنوسيس في الموقع أناستوموتيك شفك في أيام 1 و 5 و 30 بعد ضخه. وأجرى كافوجرافي فينا أقل شأنا في 2 أسابيع بعد زرع الأعضاء. كما هو موضح في الشكل 6، الحلقات المغناطيسية كانت سليمة، وتدفق الدم براءات الاختراع من خلال ملامسة شفك. وكان معدل البقاء على قيد الحياة بعد زرع 95% في اليوم 1، 90% في اليوم الثالث، و 85% في الأيام 7 إلى 30 (الشكل 7).

Figure 1
الشكل 1 : تصميم (A) وصور (ب) من الطوق المغناطيسي لملامسة شفك.
شفك: سوبراهيباتيك الوريد الأجوف.  الرجاء انقر هنا لمشاهدة نسخة أكبر من هذا الرقم-

Figure 2
الشكل 2 : الأصفاد ودعامات لملامسة إيهفك (A)، PV (ب) و (ج) دينار بحريني.
إيهفك: إينفراهيباتيك الوريد الأجوف؛ PV: الوريد البابي؛ دينار بحريني: القناة الصفراوية. الرجاء انقر هنا لمشاهدة نسخة أكبر من هذا الرقم-

Figure 3
الشكل 3 : مخطط لملامسة الكفة إيهفك والكهروضوئية. إدراج إيهفك أو PV في الكفة (A)؛ إيفرت نهاية القاصي إيهفك أو الكهروضوئية على نص الكفة باستخدام ميكروفورسيبس اثنين (ب)؛ تأمين الحافة مع خياطة حرير 6-0 (ج)؛ إدراج الهيئة الكفة إيهفك الجهة المانحة أو PV إيهفك الخاص بالمستلم أو PV (د).
إيهفك: إينفراهيباتيك الوريد الأجوف؛ PV: الوريد البابي. الرجاء انقر هنا لمشاهدة نسخة أكبر من هذا الرقم-

Figure 4
الشكل 4 : مخطط لملامسة المغناطيسي شفك. تمرير شفك من خلال عصابة مغناطيسي باستخدام سبائك التيتانيوم ميكروفورسيبس (A)؛ إيفرت القاصي نهاية شفك على الحلبة (ب)؛ تأمين الطوق مع خياطة حرير (ج) 6-0. بضع حلقات مغناطيسية مضمن في شفك المانح والمتلقي معا من خلال القوة المغناطيسية (د).
شفك: سوبراهيباتيك الوريد الأجوف. الرجاء انقر هنا لمشاهدة نسخة أكبر من هذا الرقم-

Figure 5
الشكل 5 : مخطط لزرع الفساد في الفئران المستفيدة. إعادة إعمار شفك: ملامسة المغناطيسي؛ إعادة بناء إيهفك والكهروضوئية: الكفة ملامسة؛ التعمير دينار بحريني: ملامسة تركيب دعامات. إعادة إعمار ها: لم يتم تنفيذ.
شفك: سوبراهيباتيك الوريد الأجوف؛ إيهفك: إينفراهيباتيك الوريد الأجوف؛ PV: الوريد البابي؛ دينار بحريني: القناة الصفراوية؛ ها: الكبد الشريان. الرجاء انقر هنا لمشاهدة نسخة أكبر من هذا الرقم-

Figure 6
الرقم 6 : كافوجرافي فينا أقل شأنا من الفئران في 2 أسابيع بعد زرع الأعضاء. الرجاء انقر هنا لمشاهدة نسخة أكبر من هذا الرقم-

Figure 7
الشكل 7 : علاج الممثل البقاء على قيد الحياة بعد زرع الأعضاء. الرجاء انقر هنا لمشاهدة نسخة أكبر من هذا الرقم-

Subscription Required. Please recommend JoVE to your librarian.

Discussion

تقدم سريرية كثيرة في زرع الكبد يمكن أن يعزى إلى دراسات أجريت على الحيوانات. قلت الفئران نموذجا جيدا المقبولة والمستخدمة على نطاق واسع في البحوث المتعلقة بالحفاظ على الجهاز وزرع علم المناعة، وعلم وظائف الأعضاء وعلم الأمراض. ومع ذلك، هو أيضا إجراء معقد جداً ويتطلب مهارة microsurgical متقدمة. وعلى الرغم من العديد من التحسينات في الإجراء للفئران قلت، ظلت ملامسة شفك خطوة صعبة. في هذه المقالة، نحن وصف أسلوب رواية ملامسة مغناطيسي للتعمير شفك في الفئران قلت. تطبيق هذا الأسلوب تقليل الوقت للتعمير شفك إلى أقل من 2 دقيقة ومرحلة أنهيباتيك من الفئران قلت لحوالي 10 دقيقة. ونحن نعتقد أن هذا الأسلوب له آثار كبيرة في بحوث زرع الأعضاء.

الخطوة الحاسمة في استخدام هذا الأسلوب المغناطيسي ملامسة لإعادة إعمار شفك لإرفاق الحلقات المغناطيسية شفك المانح والمتلقي. ينبغي توخي كل الحذر لتجنب التواء في شفك. وعلاوة على ذلك، عند الاتصال اثنين من حلقات مغناطيسية، يجب إزالة فقاعات الهواء في شفك دقة.

وهناك بعض أوجه القصور في استخدام هذا الأسلوب. وقد بعض سلالات من الفئران مثل فيشر-344 الجرذان والفئران الجاموس شفك قصيرة للغاية. من المستحيل لإرفاقها شفك الطوق المغناطيسي. ومن ثم، فليست مناسبة لهذا الأسلوب. ومع ذلك، هذا الأسلوب يمكن تطبيقها بسهولة لقلت في معظم سلالات من الفئران بما في ذلك الفئران "سبراغ داولي" ولويس الجرذان والفئران النرويج براون. حلقات مغناطيسية يمكن أن تتداخل مع فحص التصوير بالرنين المغناطيسي (التصوير بالرنين المغناطيسي). ولذلك، لا يمكن استخدام هذا الأسلوب ملامسة المغناطيسي إذا كان مطلوب امتحان التصوير بالرنين المغناطيسي للتجربة.

وباختصار، تقنية ملامسة المغناطيسي يجعل التعمير شفك سهلة وسريعة في الفئران ممكن. بعد منحنى التعلم معقولة، يمكن أن تنتج حتى الباحثين دون مهارات متقدمة microsurgical نتائج موثوقة واستنساخه باستخدام نموذج الفئران هذا قلت.

Subscription Required. Please recommend JoVE to your librarian.

Disclosures

الكتاب ليس لها علاقة بالكشف عن.

Acknowledgments

كان يؤيد هذا العمل بمنح من "وزارة التعليم الابتكار فريق تطوير البرنامج من الصين" (رقم IRT16R57)، المؤسسة الوطنية للعلوم الطبيعية في الصين (رقم 81470896)، وبحث صندوق للشباب المواهب توظيف خطط لمدينة شيان جياوتونغ جامعة (RW).

Materials

Name Company Catalog Number Comments
Anesthesia Machine Harvard  tabletop Animal anaesthesia
PLX7000B HF Mobile Digital C-arm System Perlong Medical PLX7000B It is mainly used for the angiography and photography of various operations
Syringe Pump Mindray BeneFusion SP5 intravenous infusion
Isoflurane RWD life Science Co. anesthetic:for the induction and maintenanceof anesthesia
iohexol Shanghai General Pharmaceutical Co  intravascular contrast media  
heparin sodium injection SPH No.1 Biochemical & Pharmaceutical Co., LTD   prevent the formation of thrombosis 
cefuroxime  Glaxo Operations UK Limited  an antibiotic
buprenorphine  TIPR Pharmaceutical Responsible Co.,Ltd an analgesic
curved microforceps Shanghai Medical Instruments (Group) Ltd., Corp. W40350 surgical tool
hemostatic forceps(straight) Shanghai Medical Instruments (Group) Ltd., Corp. J31010 surgical tool
hemostatic forceps(curved) Shanghai Medical Instruments (Group) Ltd., Corp. J31020 surgical tool
Satinsky clamp Shanghai Medical Instruments (Group) Ltd., Corp. XEC050 surgical tool
needle holder Shanghai Medical Instruments (Group) Ltd., Corp. J32010 surgical tool
microneedle holder Shanghai Medical Instruments (Group) Ltd., Corp. WBA040 surgical tool
notched forceps Shanghai Medical Instruments (Group) Ltd., Corp. J42010 surgical tool
tissue forceps(with hook) Shanghai Medical Instruments (Group) Ltd., Corp. J41010 surgical tool
tissue scissor Shanghai Medical Instruments (Group) Ltd., Corp. Y00040 surgical tool
surgical scissors Shanghai Medical Instruments (Group) Ltd., Corp. Y00030 surgical tool
micro scissors Shanghai Medical Instruments (Group) Ltd., Corp. MR-S121T surgical tool
microvessel clips Shanghai Medical Instruments (Group) Ltd., Corp. XEC240 surgical tool
straight microforceps(titanium alloy) Shanghai Medical Instruments (Group) Ltd., Corp. WCC010 surgical tool
curved microforceps  (titanium alloy) Shanghai Medical Instruments (Group) Ltd., Corp. WCC020 surgical tool

DOWNLOAD MATERIALS LIST

References

  1. Aller, M. A., et al. A half century (1961-2011) of applying microsurgery to experimental liver research. World journal of hepatology. 4, 199-208 (2012).
  2. Aller, M. A., et al. The value of microsurgery in liver research. Liver international : official journal of the International Association for the Study of the Liver. 29, 1132-1140 (2009).
  3. Lee, S., Charters, A. C., Chandler, J. G., Orloff, M. J. A technique for orthotopic liver transplantation in the rat. Transplantation. 16, 664-669 (1973).
  4. Kamada, N., Calne, R. Y. Orthotopic liver transplantation in the rat. Technique using cuff for portal vein anastomosis and biliary drainage. Transplantation. 28, 47-50 (1979).
  5. Oldani, G., Lacotte, S., Morel, P., Mentha, G., Toso, C. Orthotopic liver transplantation in rats. Journal of visualized experiments : JoVE. , (2012).
  6. Nagai, K., Yagi, S., Uemoto, S., Tolba, R. H. Surgical procedures for a rat model of partial orthotopic liver transplantation with hepatic arterial reconstruction. Journal of visualized experiments : JoVE. , e4376 (2013).
  7. Liu, X., He, C., Huang, T., Gu, J. Development of a New Technique for Reconstruction of Hepatic Artery during Liver Transplantation in Sprague-Dawley Rat. PloS one. 10, e0145662 (2015).
  8. Jamshidi, R., Stephenson, J. T., Clay, J. G., Pichakron, K. O., Harrison, M. R. Magnamosis: magnetic compression anastomosis with comparison to suture and staple techniques. Journal of pediatric surgery. 44, 222-228 (2009).
  9. Pichakron, K. O., et al. Magnamosis II: Magnetic compression anastomosis for minimally invasive gastrojejunostomy and jejunojejunostomy. Journal of the American College of Surgeons. 212, 42-49 (2011).
  10. Gonzales, K. D., et al. Magnamosis III: delivery of a magnetic compression anastomosis device using minimally invasive endoscopic techniques. Journal of pediatric surgery. 47, 1291-1295 (2012).
  11. Wall, J., et al. MAGNAMOSIS IV: magnetic compression anastomosis for minimally invasive colorectal surgery. Endoscopy. 45, 643-648 (2013).
  12. Xue, F., et al. Choledochojejunostomy with an innovative magnetic compressive anastomosis: How to determine optimal pressure? World journal of gastroenterology. 22, 2326-2335 (2016).
  13. Yan, X., et al. Portacaval shunt established in six dogs using magnetic compression technique. PloS one. 8, e76873 (2013).
  14. Dorman, R. M., Vali, K., Harmon, C. M., Zaritzky, M., Bass, K. D. Repair of esophageal atresia with proximal fistula using endoscopic magnetic compression anastomosis (magnamosis) after staged lengthening. Pediatric surgery international. 32, 525-528 (2016).
  15. Russell, K. W., Rollins, M. D., Feola, G. P., Scaife, E. R. Magnamosis: a novel technique for the management of rectal atresia. BMJ case reports. , (2014).
  16. Shi, Y., et al. Magnetic ring anastomosis of suprahepatic vena cava: novel technique for liver transplantation in rat. Transplant international : official journal of the European Society for Organ Transplantation. 28, 89-94 (2015).

Tags

الطب، المسألة 133، نموذج الحيوان، الفئران، أورثوتوبيك، وزرع الكبد، ملامسة المغناطيسي، الطوق المغناطيسي، سوبراهيباتيك الوريد الأجوف التعمير، جراحة
نموذج الفئران من أورثوتوبيك زرع الكبد استخدام تقنية رواية ملامسة مغناطيسي للتعمير الوريد الأجوف سوبراهيباتيك
Play Video
PDF DOI DOWNLOAD MATERIALS LIST

Cite this Article

Yang, L., Lu, J., Wang, Y., Zhang,More

Yang, L., Lu, J., Wang, Y., Zhang, M., Shi, Y., Wei, S., Liu, P., Wu, Z., Lv, Y., Wu, R. A Rat Model of Orthotopic Liver Transplantation Using a Novel Magnetic Anastomosis Technique for Suprahepatic Vena Cava Reconstruction. J. Vis. Exp. (133), e56933, doi:10.3791/56933 (2018).

Less
Copy Citation Download Citation Reprints and Permissions
View Video

Get cutting-edge science videos from JoVE sent straight to your inbox every month.

Waiting X
Simple Hit Counter