Waiting
Login processing...

Trial ends in Request Full Access Tell Your Colleague About Jove
JoVE Journal Behavior
Click here for the English version

Behavior

Herstel van de Drug-zoekende in muizen met behulp van de geconditioneerde plaats voorkeur paradigma

Published: June 7, 2018 doi: 10.3791/56983
Automatic Translation
1, 1, 1, 1
1Unidad de Investigación Psicobiología de las Drogodependencias, Departamento de Psicobiología, Facultad de Psicología, Universitat de València

Summary

Dit protocol beschrijft de geconditioneerd plaats voorkeur (CPP) als een model van instorting. Deze procedure maakt het meten van herval in proefdieren, gelet op de invloed van drug-geassocieerde milieu signalen als verlangen en herval in onthouden verslaafden is momenteel de focus van drugsgebruik behandelingsprogramma's.

Abstract

Dit protocol beschrijft de geconditioneerd plaats voorkeur (CPP) als een model van herval in drugsverslaving. In dit model, dieren zijn eerst opgeleid om het verwerven van een geconditioneerde plaats voorkeur in een drug-gecombineerd compartiment, en na de test na conditionering uitvoeren meerdere sessies blussen van de gevestigde voorkeur. De CPP staat de evaluatie van de geconditioneerde lonende gevolgen van drugs aan milieu gerelateerde signalen. Vervolgens kan de gedoofd CPP worden krachtig hersteld door de administratie van de niet-contingent van een priming dosis van het geneesmiddel, en door blootstelling aan stressvolle prikkels. Beide methoden worden hier uitgelegd. Wanneer het dier reinitiates de gedragsmatige reactie, wordt een herstel van de geconditioneerde beloning geacht te hebben plaatsgevonden.

De belangrijkste voordelen van dit protocol zijn dat er niet-invasieve, goedkoop en eenvoudig met goed geldigheidscriteria. Verder staat het de studie van verschillende milieu manipulaties, zoals stress of dieet, dat kan moduleren herval in drug zoekend gedrag. Een beperking is echter dat als de onderzoeker wil verkennen de motivatie en de primaire versterkende effecten van het geneesmiddel, het moet worden aangevuld met zelfbestuur procedures, aangezien zij operante reacties van dieren impliceren.

Introduction

Het paradigma geconditioneerd plaats voorkeur (CPP) biedt een eenvoudige manier om de geconditioneerde beloning geïnduceerd door verschillende prikkels1,2te beoordelen, en heeft in grote lijnen zijn gebruikt bij het bestuderen van de geconditioneerde lonende effecten van verslavende drugs3 . Het is gebaseerd op Pavlov conditioning, evaluatie van de motiverende waarde van drug-geassocieerde milieu signalen voor het handhaven van verslavend gedrag4. In dit model milieu signalen verwerven secundaire appetitive eigenschappen (geconditioneerde lonende effecten) wanneer in paren gerangschikt met een primaire reinforcer3. Bijvoorbeeld een oorspronkelijk neutrale plek (zoals de kleur van één compartiment in de kooi van de CPP) is gekoppeld aan de specifieke effecten van een geneesmiddel van misbruik tijdens sommige sessies5, conditionering, terwijl een ander compartiment geassocieerd met de injectie van een voertuig wordt. Na conditionering, indien het dier meer tijd in het compartiment eerder gekoppeld aan de drug besteedt, wordt ervan uitgegaan dat de CPP3heeft ontwikkeld. De oprichting van de preferentie wordt bereikt wanneer het dier een positieve waarde geeft aan de ecologische signalen gekoppeld aan de drug, die de primaire reinforcer. Bijgevolg zal de dieren gedrags drug-zoekende reacties in reactie op deze contextuele signalen6uitvoeren. De CPP-model staat de evaluatie van de veelbelovende eigenschappen van subthreshold doses van de drug, waaruit blijkt of de dieren in een specifieke voorwaarde (bijvoorbeeld, die lijden onder sociale nederlaag eerder) zijn meer kwetsbaar en gevoelig voor doses die zijn niet effectief in de naïeve dieren7.

De CPP-model is ook gebruikt om te evalueren van uitsterven/herplaatsing als een dierlijk model om te studeren herval3, dat is het doel van dit protocol. Er zijn drie verschillende fasen: acquisitie, uitsterven, en herstel (Figuur 1). Dieren verwerven eerst de CPP voor een drug-gecombineerd compartiment in de CPP herplaatsing model, en voer ze verschillende sessies van het uitsterven. We definiëren uitsterven zoals het moment waarop het dier vermindert haar gedrags antwoorden van aanpassing aan een geconditioneerde lonende stimulans die al verwijderd (bijvoorbeeldde drug)8. Tijdens de sessies van uitsterven verkennen dieren de compartimenten in de afwezigheid van de drug, zodat de verworven voorkeur geleidelijk verzwakte9 is. Een belangrijke kwestie te overwegen is dat de gedragsverandering dat het dier tijdens uitsterven (de progressieve vermindering van de tijd doorgebracht in het drug-gecombineerd compartiment vertoont) kan als gevolg van nieuwe leerprocessen die met de vorige aangeleerde reactie concurreren, of behoren tot een afname van de interne motivationele toestand van de onderwerp-3. Ten slotte, de heroprichting van de voorkeur van de plaats door de context of drug-signalen zou ons model voor herplaatsing1.

Een priming injectie van de bijbehorende drug beheren kunt de preferentie, die wordt beschouwd als een herstel van de aanpassing aan de contextuele signalen te herstellen. Drug priming herstel optreedt als gevolg van het permanente geheugen van de aangename effecten van de drug, die veroorzaakte verlangen en motiveert dieren om de ecologische signalen gerelateerde te belonen.

Enkele voordelen van de CPP herplaatsing model zijn dat de procedure is niet-invasief (in tegenstelling tot zelfbestuur, waarvoor chirurgie), goedkoop en eenvoudig. Dit model heeft bovendien een goed criterium geldigheid, zoals het bootst goed wat er gebeurt in de mens10,11, inducerende herplaatsing prikkels die induceren van herval, zoals re-blootstelling aan de drug12,13 of benadrukken van14.

Er zijn andere technieken zoals het uitsterven-herplaatsing model van intraveneuze zelfbestuur. Hier, druk de dieren op een hefboom van de drug, waardoor de evaluatie van de operante reactie van het dier, compulsivity en motivatie14,15,16zelftoediening. Het belangrijkste voordeel van de CPP over zelfmedicatie procedures is dat herplaatsing van de CPP wordt beschouwd als de reactivering van de prikkel-motivationele waarde van de context stimuli gekoppeld aan de drug, bestaande uit de wederverschijning van de aanpak weerspiegelen gedrag de context17. Bovendien, niet-drug stimuli, zoals stress, kunnen ook leiden tot herplaatsing18,19. Bijvoorbeeld beschreven een zelfbestuur studie geen effecten op herstel van de inname van de heroïne bij ratten na een voet schok of bevestigingssysteem benadrukken20. Auteurs besproken dat het is mislukt omdat deze stressoren buiten de vergaderzaal zelfbestuur in een andere context werden getest. In tegenstelling, bij het gebruik van het model van de CPP van herplaatsing, er was een duidelijk herstel van Morfine-geïnduceerde CPP na het gebruik van de dezelfde stressoren, en toegepast in een ander verband op dat van de CPP en op verschillende tijdstippen (0 en 15 min na stress blootstelling)18 .

Verschillende studies in de literatuur hebben verschillende manieren van drugsgebruik en stress-geïnduceerde herplaatsing aangetoond. Aan de ene kant, is drugs-geïnduceerde herplaatsing gemeld bij ratten en muizen met behulp van Morfine5,21,22,23,25van de24,van cocaïne, amfetamine26, 27, ethanol28,29, en 3,4-methyleendioxymethamfetamine (MDMA)30. Aan de andere kant, kan blootstelling aan stress zijn een bepalende factor in de kwetsbaarheid voor drugsgebruik. Stress is bekend dat het verhogen van de stimulerende effecten van drugs7,31,32 en hun rol in Herval is goed ingeburgerd33,34. Bijvoorbeeld, herneemt de nederlaag in sociale interacties met een conspecific morfine en cocaïne CPP18,19. Bovendien herhaald sociale nederlaag blootgestelde dieren zijn veel kwetsbaarder voor de geconditioneerde belonen van subthreshold doses van cocaïne, en opnieuw de voorkeur met zeer lage doses van cocaïne7.

Toepassing van het model van de herplaatsing CPP is een handig en gevoelige manier om de kwetsbaarheid te terugvallen in dieren, en de beoordeling van verschillende subtiele milieu manipulaties, die de belangrijkste triggers die menselijke herval, zoals bedreigen vergunningen drug - of stress-geïnduceerde herplaatsing.

Subscription Required. Please recommend JoVE to your librarian.

Protocol

Alle procedures waarbij muizen en hun zorg in acht genomen nationale, regionale en lokale wetten en regels, die zijn in overeenstemming met richtlijn 2010/63/EU van het EuropeesParlement en de Raad van 22 September 2010 betreffende de bescherming van dieren die worden gebruikt voor wetenschappelijke doeleinden worden gebruikt. Het dier gebruik en de zorg van het Comité van de Universiteit van Valencia goedgekeurde dit protocol.

1. materialen en Set-up voor geconditioneerde plaats voorkeur:

  1. Omgaan met muizen 3 dagen vóór de test voor 1-2 minuten elk. De basis van de staart moet worden begrepen. Het lichaam moet indien mogelijk worden gesteund. Dit wordt gedaan om te minimaliseren van ongerief en pijn bij de behandeling van een dier en ter voorkoming van storende variabelen, zoals stress.
    Opmerking: Voor 1 mannelijke muizen 60 dagen oud (jonge volwassenen) met een gewicht van 35-40 g werkten in de huidige experimenten. Drug-geïnduceerde herplaatsing kan worden uitgevoerd in muizen van beide geslachten. Over stress-geïnduceerde herplaatsing, het paradigma van sociale nederlaag is echter ontworpen uitsluitend voor mannelijke knaagdieren, zoals vrouwen doen niet induceren van een agressieve reactie op de ingezetene muizen.
  2. Voor plaats conditionering, gebruikt u identieke vakken gemaakt met twee identieke compartimenten (30.7 cm lange × 31.5 cm breed × 34.5 cm hoog) gescheiden door een kleinere grijs middengebied (13.8 lange × 31.5 cm breed × 34,5 hoog).
    Opmerking: Compartimenten hebben verschillende texturen en kleuren van de muur (een gladde vloer in de zwarte compartiment en een ruwe vloer in de witte). Elk compartiment van de CPP doos bevat vier infrarood lichtstralen en zes in de centrale compartiment. Hierdoor de opname van de grensovergangen tussen compartimenten en de positie van het dier.
  3. Set up de kamer lichten (off of verlaagd) elke dag. Gebruik rode lichten (aanbevolen), als dieren het niet ziet en het is verzwakt voor de experimentator (ongeveer 40 lux gemeten op 1 meter boven de vloer).
  4. Het programma instellen voor het registreren van 15 min voor pre- en post conditionering testen (Zie de Tabel van materialen voor software) (Figuur 2)
  5. Bereid de oplossing van de cocaïne nodig zijn voor het hele experiment. Ontbinden cocaïnehydrochloride in 0.9% NaCl (zoutoplossing) in een volume van 0,1 mL/10 g lichaamsgewicht. Vortex mengsel en winkel bij 4 ° C aan het eind van de dag.
    Opmerking: Cocaïne concentraties kunnen variëren afhankelijk van het doel van de studie. Als het doel is om te evalueren van de subthreshold doses van cocaïne, kon een concentratie van 1 mg/kg gebruiken, dat is ondoeltreffend in controledieren, zoals gezien in de vorige studies24,35. Als een effectieve dosis het doel is, kan een concentratie van 6 mg/kg worden gekozen, die effectief is, maar er niet toe brengt herplaatsing24, of een concentratie van 25 mg/kg, die effectief is en herplaatsing van de voorkeur19induceert.
  6. Test van de dieren tijdens hun donkere fase en gebruiken hetzelfde vak voor elk dier in dagen.
  7. Dieren brengen elke dag naar de testen kamer in hun huis kooi en laat ze ongestoord gedurende 15 minuten als een periode van gewenning aan alle test-gerelateerde geluiden.

2. test

  1. Overname
    Opmerking: De procedure voor plaats Conditioning, onbevooroordeelde in termen van eerste spontane voorkeur, bestaat uit drie fasen: pre-conditionering, airconditioning en na conditionering (Figuur 1).
    1. Pre Conditioning (Pre-C) (3 dagen) (Figuur 2 Figuur 3, Figuur 4)
      Opmerking: Hier, de neutrale waarde van de compartimenten in het vak van de CPP wordt geëvalueerd. Meten van de tijd doorgebracht in elk compartiment en het later te vergelijken met die besteed in hetzelfde compartiment in de test na conditionering.
      1. De dieren brengen de testruimte en laat ze gewend gedurende 15 minuten.
      2. Controleer dat guillotines zijn verwijderd uit de kooi.
      3. Instellen van de computer en het programma. Voer van dierlijke id's en druk op de opdracht "Trial" en "Start" (Figuur 2).
      4. Plaats de muis voorzichtig naar de middelste kamer (grijze compartiment) en laat de test kamer met minimale ruis.
      5. Alle dieren terug te brengen in hun huis kooien en sla de gegevens wanneer het proces is voltooid.
      6. Toestaan van muizen tot beide compartimenten van het toestel gedurende 15 minuten (900 s) per dag op 3 opeenvolgende dagen.
      7. Op dag 3, noteer de tijd doorgebracht in elke ruimte een 900 s periode, en op te slaan voor de toewijzing van compartimenten in de volgende fase (Figuur 3).
      8. Toewijzen van de helft van de dieren in elke groep waarnaar de drug of het voertuig in één compartiment (bijvoorbeeldzwart), en de andere helft in het andere compartiment (bijvoorbeeldwitte) (Figuur 4).
        Opmerking: De uiteindelijke verdeling van de dieren moet ervoor zorgen dat de helft van de dieren worden toegewezen aan het aanvankelijk voorkeur compartiment en de andere helft tot het niet mijn voorkeur compartiment. Daarnaast ontvangen de helft van de dieren de drug in één compartiment (bijvoorbeeld de zwarte knop) en de andere helft in de andere (in dit geval, degene wit).
      9. De scores van het evenwicht in de groep binnen beide compartimenten en meerdere groepen (test groep verschillen met een variantieanalyse (ANOVA)). Als de oriëntatie van de geschatte, waarden moeten rond 360-370 s in de Pre-C test (Figuur 4). Opmerking: moeten geen significante verschillen tussen de tijd doorgebracht in de drug-gekoppeld en voertuig-gepaarde compartimenten tijdens de Pre-C proef worden gedetecteerd.
      10. Uitsluiten van dieren die een sterke afkeer of voorkeur voor elk compartiment vertonen. Overwegen van afkeer als besteden minder tijd dan 33% in het compartiment en voorkeur overwegen wanneer het dier besteed meer dan 67% van de totale tijd in dat compartiment.
    2. Conditioning (4 dagen) (Figuur 5)
      1. Weeg de dieren en gebruiken van deze gewichten voor cocaïne doses tijdens de conditionering.
      2. Voorbereiding spuiten met cocaïne of zoutoplossing op basis van de gewichten van het lichaam.
      3. Injecteren van één muis tegelijk intraperitoneally (ip) en leg deze onmiddellijk zachtjes in het toegewezen zwart of wit compartiment van hun vak.
      4. Na een interval van 4 uur, injecteert de drug dosis onmiddellijk voordat de muis is beperkt tot het drug-gecombineerd compartiment voor 30 min (Figuur 5).
      5. Alternatieve deze procedure elke dag beginnen met cocaïne op dagen 1 en 3, en zoute op dag 2 en 4.
      6. Controleer of opsluiting wordt uitgevoerd in beide gevallen door het sluiten van de deur van de guillotine die scheidt de twee compartimenten, het centrale gebied ontoegankelijk maken.
        Opmerking: In deze fase behoeft niet de PC-programma instellen.
    3. Na conditionering (Post-C) (1 dag)
      1. De dieren brengen de testruimte en laat ze gewend gedurende 15 minuten.
      2. Verwijder de deur van de guillotine scheiden van de twee compartimenten.
      3. Instellen van de computer en het programma. Voer dier id's en druk op de "start"-opdracht.
      4. Het opnemen van de tijd besteed door de onbehandelde muizen in elk compartiment tijdens een 900 s observatieperiode.
      5. Wanneer het proces is voltooid, alle dieren terug te brengen in hun huis kooien en sla de gegevens.
      6. Overwegen dat de drug plaats voorkeur heeft opgewekt als de tijd doorgebracht in het drug-gecombineerd compartiment tijdens de Post-C aanzienlijk groter is dan in de Pre-C-test. Als het tegenovergestelde optreedt, kunt u overwegen een afkeer voor de drug-gecombineerd compartiment.
  2. Uitsterven
    1. Het gedrag van een per sessie van uitsterven in alle groepen/dieren die een voorkeur voor de drug-gecombineerd compartiment ontwikkeld.
    2. Plaats het dier in het apparaat (zonder guillotines) gedurende 15 minuten (hetzelfde als de pre- en Post-C tests) (Figuur 1).
      Opmerking: Als de dosis werkzaamheden in loondienst in de CPP is hoog (25 mg/kg), uitvoeren 1 uitsterven sessie per week. Als een subthreshold dosis is gebruikt (1 mg/kg), voer dan 2 uitsterven sessies per week (bijvoorbeeld maandag en donderdag).
    3. Beschouw de voorkeur gedoofd wanneer gegevens uit de test van uitsterven geen verschillen met betrekking tot de test van de Pre-C vertonen, maar zij verschillen met betrekking tot de Post-C-test vertonen.
    4. Herhaal de test 24 h later om te bevestigen het uitsterven.
  3. Herstel van de CPP
    1. Priming-geïnduceerde herplaatsing
      1. De effecten van een priming dosis cocaïne 24u evalueren nadat uitsterven is bevestigd.
        Opmerking: Priming doses zijn helft van de vorige dosis die het dier heeft ontvangen tijdens de conditionering. De herplaatsing test ondergaat hetzelfde protocol zoals in Pre-C en Post-C tests, behalve dat dieren ontvangen de dosis cocaïne in een non-contingent plaatsen 15 min voor de proef. De werkzaamheid van drug priming in inducerende herplaatsing kan worden verbeterd na herhaalde uitsterven/herplaatsing23 ervaringen, hoewel de volgorde van de doses lijkt niet om te spelen een rol in de resultaten verkregen36.
      2. Brengen de dieren naar een andere kamer van de test kamer (niet-contingent plaats) (Figuur 6).
      3. Injecteert ze met de helft van de vorige dosis cocaïne (bijvoorbeeld, als de dieren waren geconditioneerd met 25 mg/kg cocaïne, een priming dosis zou 12,5 mg/kg).
      4. Breng ze terug naar hun vivarium gedurende 15 minuten.
      5. Meenemen in de test kamer en plaats van de dieren in het apparaat onmiddellijk (zonder de guillotine deuren scheiden van de compartimenten) voor 15 min (hetzelfde als de pre en Post-C tests).
      6. Het verschil in seconden tussen de tijd doorgebracht in het drug-gecombineerd compartiment tijdens de laatste sessie van het uitsterven en de herplaatsing test als een maatregel van de mate van herstel van de preferentie geïnduceerd door de drug te overwegen.
      7. Herhaal de procedure voor uitsterven-herplaatsing telkens met afnemende doses tot het ineffectief wordt bevestigd.
        Opmerking: Een zoute injectie-besturingselement kan worden gebruikt om te bepalen van de capaciteit van cocaïne priming (en niet van de injectie zelf) voor het opwekken van herplaatsing.
    2. Stress-geïnduceerde herplaatsing
      1. Evalueren van de effecten van een stress-geïnduceerde herplaatsing 24u nadat uitsterven is bevestigd
        Opmerking: Herplaatsing tests zijn dezelfde als die uitgevoerd in Post-C (gratis ambulation voor 15 min), behalve dat dieren zijn getest 15 min na de sociale nederlaag in een agonistic tegenkomen (Figuur 6)
      2. Neem de dieren naar een andere kamer van de CPP-kamer.
      3. Plaats de experimentele muis met een agressieve tegenstander seks gematched van gelijke leeftijd en lichaamsgewicht in de kunststof kooi (Figuur 6).
        Opmerking: De agonistic ontmoeting bestaat uit een 10 minuten test in een neutrale transparante kunststof kooi (23x13.5x13cm) met als resultaat een nederlaag voor de experimentele muis. Ter voorbereiding van de agressieve tegenstander, eerst isoleren verschillende dieren die overeenkomen met in leeftijd en lichaamsgewicht als de experimentele muizen voor 3 weken. Trainen ze om te vechten ervaring verwerven en testen te hebben hoge niveaus van agressief territoriale gedrag. Voor het verkrijgen van agressieve soortgenoten, muizen moeten worden geïsoleerd voor minstens 3 weken, en vervolgens opgeleid in agressieve en gedragingen aan te vallen. Dieren zijn opgeleid in een neutrale omgeving, waarmee ze geconfronteerd worden in paren. We laten bijten de tegenstander 2 of 3 keer en krijgen ze uit de kooi, altijd eindigend de opleiding voordat een van de twee muizen indienen toont, zodat de ervaring van de ontmoeting agressief gedrag versterkt. Na het lijden van agressie (bedreiging en aanval van de agressieve conspecific), dient de experimentele muizen vermijden/ontvluchten en defensieve/onderdanig gedrag. Het criterium dient vast te stellen van een specifieke houding van nederlaag, gekenmerkt door een onderdanige rechtop, forepaws, opwaarts schuine kop, slap en ingetrokken oren (Figuur 6). Volgens Burke et al., 2016, wij zijn van mening dat de sociale ontmoeting eerder wordt beëindigd als de indringer wordt weergegeven een onderdanige liggende houding voor > 8 s of als 13 beten van de aanval heeft plaatsgevonden. Een andere optie om scherm dieren zonder risico van ernstige schade zou kunnen zijn om het tempo van het dier in een mesh behuizing met een gat, niet groot genoeg is voor een dier te geven.  Agressie kan worden gedetecteerd zonder onderwerpen dieren om agressief gedrag.  Als een dier een blessure met een wond 1cm in diameter en/of rechtstreekse blootstelling van de spier voedt, het is uitgesloten van de studie en euthanized moet worden.
      4. Na 10 min van agonistic ontmoeting, neem de muizen in de test kamer en plaats van de dieren in het CPP apparaat onmiddellijk (zonder de guillotine deuren scheiden van de compartimenten) gedurende 15 minuten (hetzelfde als de pre en Post-C tests).

3. statistische analyse

Opmerking: De ideale steekproefgrootte moet een minimum van 15 dieren per groep.

  1. Analyseren van de gemiddelde tijd doorgebracht in het drug-gecombineerd compartiment van de groep door middel van een gemengde ANOVA met één tussen variabele, behandeling, met twee niveaus (controlegroep, experimentele groep, voorbeeld van twee groepen is in Figuur 7 c), en één in variabele-dagen, met 2 niveaus (Pre- en Post-C).
    Opmerking: In de controlegroep dieren ontvangen van de drug, maar hebben geen milieu manipulaties. Aan de andere kant, worden de experimentele groep dieren blootgesteld aan verschillende omgevingsfactoren. Vergelijk de tijd doorgebracht in het drug-gecombineerd compartiment op de dag van de Post-C met respect de Pre-C testen om te zien of er zijn significante verschillen in gevoeligheid aan de drug.
  2. Daarnaast voeren Bonferroni post-hoc analyses om te controleren op een van de belangrijke scores.
  3. Analyseren van gegevens met betrekking tot uitsterven en herplaatsing waarden in de fracties dat ontwikkelde voorkeur door middel van Student´s t-tests aan het uitsterven-herplaatsing procedure voortzetten in de loop van het experiment, maar op het laatste moment, ze analyseren met een ANOVA met een binnen variabele (dagen) met het aantal niveaus afhankelijk van elke groep.
    Opmerking: Wanneer het aantal vergelijkingen wordt verhoogd, het aantal mensen dat zal aanzienlijke toevallig ook verhoogd. Zo voorkom vals-positieven (Type 1 fouten) krijgen corrigeren we' ' de p-waarde waardoor de test van de meer conservatieve met de Bonferroni-correctie voor meerdere t-tests. Echter voor de herplaatsing-test, moet de vergelijking worden gemaakt tussen de herplaatsing en de laatste test van uitsterven. Daarom, is er geen behoefte voor correctie.

Subscription Required. Please recommend JoVE to your librarian.

Representative Results

Ten eerste, representatieve resultaten uit de priming - en stress-geïnduceerde herplaatsing worden weergegeven in Figuur 7 met behulp van volwassen 1 mannelijke muizen.

De gegevens in Figuur 7a-b vertegenwoordigen tijd doorgebracht in de drug-gekoppeld compartment(s) in de pre- en Post-C test werden geanalyseerd met een herhaalde maatregelen ANOVA met een binnen-onderwerpen variabele dagen (vergelijking van de Pre- en Post-C). De resultaten toonden een significant effect van de variabele dagen [F(1,34) = 51.179; p < 0.001], zoals alle dieren een voorkeur ontwikkeld in de dag van de Post-C in vergelijking met de Pre-C. Alle dieren waren voorzien van airconditioning met 25 mg/kg cocaïne en wanneer uitsterven werd bereikt, één groep kreeg een priming dosis van 12,5 mg/kg cocaïne te testen van het herstel (figuur 7a) en de andere werd onderworpen aan een sociale interactie waarin de experimentele dier werd verslagen door een agressieve tegenstander (figuur 7b). 15 min na de twee gebeurtenissen, dieren zijn getest in hun bijbehorende CPP-vak.

De priming-geïnduceerde herplaatsing (figuur 7a) werd onderworpen aan latere gebleken priming doses (halve vorige degene) tot een priming dosis minderen is bevestigd. De doses waren: 12,5, 6,25, 3.125 en 1,56 mg/kg cocaïne. De Student´s t-test bleek een significant effect op het herstel van 12,5 mg/kg cocaïne met betrekking tot de sessie uitsterven (t-statistiek (t) = 20.589, vrijheidsgraden (d.f.) = 17; p < 0.001) en latere doses (6,25 mg/kg: t = 18.356; 3.125 mg/kg: t = 14.260; 1,56 mg/kg: t = 16.934 d.f. = 17; p < 0,001). Priming met 0,78 mg/kg deed het herstel niet veroorzaken.

Met betrekking tot het herstel van stress-geïnduceerde (Zie figuur 7b), wordt blootgesteld aan een agressieve dier en versloeg 15 min voordat de test leidt tot het herstel van de eerder gedoofd voorkeur (t = 26.810; d.f. = 15; p < 0.001)19 .

Andere milieu manipulaties, zoals lijden herhaalde sociale nederlaag vóór de CPP procedure, wijzigen de stimulerende effecten van subthreshold doses van cocaïne (Figuur 7 c). A gemengd ANOVA met de tussen variabele "stress" en de binnen de variabele "dagen" werd uitgevoerd, en er was een significant effect van de interactie Stress x dagen [F(1,29) = 4.144; p < 0.05]. Enige sociaal versloeg dieren tentoongesteld voorkeur voor de drug-gecombineerd compartiment met een subthreshold dosis cocaïne, waarvan is aangetoond in standaard dieren7gebleken. Bovendien, na het uitsterven van de voorkeur, sociaal versloeg dieren hersteld hun voorkeur met slechts 0, 5 mg/kg cocaïne priming (t = 25.484 d.f. = 17; p < 0,001).

Ten tweede, als een negatief resultaat, kunnen we zien hoe herstel kan worden voorkomen door een positieve sociale interactie met een niet-agressieve conspecific (figuur 8a). Daarom is het belangrijk om te evalueren of dieren zijn verslagen niet na een sociale ontmoeting37.

Een ander voorbeeld van negatieve resultaten waardoor herstel kunnen voeding manipulaties, zoals de inname van een vetrijke smakelijk dieet. Eerst, ANOVA-analyse bleek een effect van de variabele dagen [F(1,26) = 21.527; p <.0.001], als beide groepen ontwikkeld voorkeur voor de drug-gecombineerd compartiment (p < 0.01) (Figuur 8). Na uitsterven tonen onze resultaten aan dat dieren overgestapt naar de hoog-vet dieet na detest Post-C hun gevoeligheid voor drug-priming geïnduceerde herplaatsing daalde, zoals ze deed niet opnieuw de voorkeur met een cocaïne 6,25 mg/kg dosis38.

Figure 1
Figuur 1: experimentele procedure van de preferentie plaats geconditioneerd. Het bestaat uit drie fasen: pre-conditionering, airconditioning en na conditionering. Er zijn 4 conditionering dagen waarin de procedure wordt afgewisseld elke dag beginnen met cocaïne op dagen 1 en 3 en voertuig op dag 2 en 4. Vervolgens worden uitsterven en herplaatsing sessies uitgevoerd. Klik hier voor een grotere versie van dit cijfer.

Figure 2
Figuur 2: Software gebruik sessies voor Pre- en Post-C tests waar tijd doorgebracht in elk compartiment en aantal vermeldingen wordt vastgelegd. Klik hier voor een grotere versie van dit cijfer.

Figure 3
Figuur 3: gegevens na de Pre- en Post-C test Hier, het opnemen van de gegevens die zijn verkregen tijdens de test. Klik hier voor een grotere versie van dit cijfer.

Figure 4
Figuur 4: onbevooroordeelde toewijzing van dieren naar de compartimenten voor de volgende fase van conditionering. Neem de gegevens van de laatste dag van de Pre-C test in de witte en zwarte compartimenten. De helft van de dieren worden toegewezen aan het ontvangen van de drug of voertuig in één compartiment (zwart of wit), en de andere helft in het andere compartiment. Dieren die sterke afkeer of voorkeur vertonen uit te sluiten. Klik hier voor een grotere versie van dit cijfer.

Figure 5
Figuur 5: definitieve toewijzing van voertuig en cocaïne gekoppeld sessies. Deze figuur toont afwisseling op de volgorde van koppelingen. Op dag 1 en 3, een dier (bijvoorbeeld1.1) eerst wordt blootgesteld aan de cocaïne-gecombineerd compartiment (de witte knop) en, na vier uur, is blootgesteld aan het voertuig-gecombineerd compartiment (de zwarte knop). Op dag 2 en 4, de volgorde van koppelingen is omgekeerd en het dier is eerst blootgesteld aan voertuig-gekoppeld (zwart) compartiment en, na vier uur, tot het cocaïne-gekoppeld (witte) compartiment. Als deze procedure onbevooroordeeld is en Ophaalbare, gelijktijdige conditioning sessies kunnen worden uitgevoerd met twee dieren met behulp van beide compartimenten van hetzelfde vak (bijvoorbeelddieren 1.1 en 2.4, 3.1 en 1.3), waardoor we verminderen de tijd besteed aan de experimentele procedure. Merk op dat deze paren van dieren de omgekeerde volgorde van de koppelingen door de fase van de conditionering volgt. Klik hier voor een grotere versie van dit cijfer.

Figure 6
Figuur 6: twee modellen van herplaatsing. (een) Priming-geïnduceerde herplaatsing en (b) stress-geïnduceerde herplaatsing. (een) dieren ontvangen een drug-injectie in een niet-voorwaardelijke kamer en worden gebracht aan de vivarium; 15 min later die zij worden getest in het vak van de CPP. (b) dieren worden verslagen in een agonistic ontmoeting in een niet-voorwaardelijke kamer gedurende 10 minuten en daarna, ze worden getest in het vak van de CPP. Klik hier voor een grotere versie van dit cijfer.

Figure 7
Figuur 7: representatieve positieve resultaten. Priming (een) en stress-geïnduceerde (b) herstel na 25 mg/kg cocaïne CPP. (c) gevolgen van sociale nederlaag voor de stimulerende effecten van subthreshold doses van cocaïne (1 mg/kg). Met staven zijn in de tussentijd (± SEM) in seconden bracht in de drug-gecombineerd compartiment tijdens pre-conditionering (wit), na conditionering (zwart), de laatste uitsterven sessie (lichtgrijs) en herstel (donker grijs). De herplaatsing test was 15 min na een priming dosis van de helft van de vorige dosis ontvangen geëvalueerd. * p < 0,05; ** p < 0,01; p < 0,001 significant verschil vs Pre-C (ANOVA met een binnen-onderwerpen variabele dagen (vergelijking van de Pre- en Post-C) of de vorige sessie voor uitsterven (Student t-test). Deze cijfers zijn gewijzigd van 7,19. Klik hier voor een grotere versie van dit cijfer.

Figure 8
Figuur 8: representatieve negatieve resultaten. Effecten van beschermende milieu manipulaties op de stimulerende effecten van cocaïne. (een) effecten van een positieve sociale interactie voordat het herstel test. (b) effecten van een vetrijke voeding tijdens het hele uitsterven periode en herplaatsing. De controlegroep werd gevoed met een standaard dieet (13% van het kcal uit vet, 67% kcal uit koolhydraten en 20% uit eiwitten kcal; 2.9 totale kcal/g) en de hoog-vet dieet groep (45% kcal uit vet, 36% kcal uit koolhydraten en 19% kcal uit eiwitten; 4.6 totale kcal/g). Met staven zijn in de tussentijd (± SEM) in seconden bracht in de drug-gecombineerd compartiment tijdens pre-conditionering (wit), na conditionering (zwart), de laatste uitsterven sessie (lichtgrijs) en herstel (donker grijs). De herplaatsing test was 15 min na een priming dosis van de helft van de vorige ontvangen dosis geëvalueerd. * p < 0,05; ** p < 0,01; significant verschil vs Pre-C (ANOVA met een binnen-onderwerpen variabele dagen (vergelijking van de Pre- en Post-C) of de vorige sessie voor uitsterven (Student t-test). Deze cijfers zijn aangepast van 37,38 Klik hier voor een grotere versie van dit cijfer.

Subscription Required. Please recommend JoVE to your librarian.

Discussion

Het belangrijkste punt van drug verslaving onderzoek is de ontwikkeling van behandelingen die verminderen van verlangen en, bijgevolg, de kwetsbaarheid om terugval te verminderen. Dankzij de herplaatsing model van de CPP paradigma is het mogelijk om te bestuderen van de invloed van verschillende procedurele en ecologische factoren die moduleren herval, dat een prioriteit voor toekomstig onderzoek is. Er zijn enkele belangrijke punten te overwegen, zoals het paradigma van de CPP is een test die is zeer gevoelig voor omgevingsfactoren.

Wijzigingen en probleemoplossing: De CPP-versie van het model hersteld moet worden aangepast afhankelijk van de drug van belang. Er zijn verschillende factoren die invloed op de omvang van de geconditioneerde preferentie, zoals de duur en het aantal sessies van de conditionering hebben kunnen. Het aantal verenigingen meestal varieert van één tot zes, met vier worden de meest voorkomende. De duur van de tests van de airconditioning is opgericht volgens de kenmerken van de drug en de farmacokinetiek.

CPP studies sprake meestal van vele proeven, dus het is handig om te gebruiken protocollen die minder tijd nodig. Een manier om dit te bereiken is het aantal proeven te verminderen, en een andere manier is om uit te voeren van twee sessies van conditionering per dag, zoals blijkt uit het huidige protocol. Het is in dit geval moet ervoor worden gezorgd dat de effecten van de drug van de notering bij marktsluiting Sleep niet op deze tweede sessie39, dat is waarom het interval van vier uur tussen de cocaïne - voertuig sessie werd gekozen. Bijvoorbeeld, moet de timing van de koppeling in het geval van cocaïne tijdens de fase van de conditionering elke 24u voor 4 dagen met een pairing duur van 30 min. Integendeel, het tijdsverloop van de procedure van de conditionering van ethanol moet elke 48 h, een totaal van 8 dagen, 1 sessie per dag, airconditioning en afwisselend voertuig en EtOH, tenslotte hebben een totaal van 4 EtOH paringen. Ethanol in paren rangschikken moet een korte duur, zoals 5 min, zoals meer tijd aversieve Staten produceren kon. Effectieve doses variëren van 1-2 g/kg en de subthreshold doses zijn 0,75 g/kg40. Priming-geïnduceerde herplaatsing moet de helft van de vorige dosis ontvangen, en het apparaat moet hetzelfde zijn.

Echter kiezen voor het doen van 1 of 2 sessies per dag kan invloed hebben op de resultaten in enkele speciale geneesmiddelen van misbruik. Bijvoorbeeld in het geval van MDMA-geïnduceerde CPL met het protocol twee sessies, wordt de geconditioneerde voorkeur in na conditionering niet waargenomen, overwegende dat dit kan worden verkregen door het uitvoeren van een enkele vereniging elke dag30, dus MDMA moet ook worden beheerd elke 48 uur, maar de duur van de sessie conditionering moet 30 min.

Er zijn twee belangrijkste methoden van uitsterven die kan worden uitgevoerd na de oprichting van CPP, ofwel dagelijkse injecties van voertuig beperken het dier in zowel de eerder drug en voertuig geconditioneerd compartimenten41,42, 43, of door te herhalen de test van de CPP, verhuur dieren verkennen van de drie compartimenten zonder de guillotine tot voorkeur7,18,30,38niet langer wordt voldaan. In het huidige protocol, we gebruikt de laatste, omdat het een soort spontane uitsterven zonder iedere manipulatie van het farmacologische of gedragsproblemen aan airconditioning (meer vergelijkbaar met dat optreden in menselijke verslaafden) gerelateerde, maar beide methoden aanvaardbaar zijn en geldig, zoals literatuur heeft jarenlang.

Beperkingen van de techniek: De belangrijkste beperking van de CPP paradigma en de herplaatsing-model is dat ze zeer gevoelig voor eventuele veranderingen in het milieu zijn. Daarom moeten kamer en vivarium voorwaarden stabiele en constante blijven tijdens de hele procedure. Bijzondere zorg moet worden genomen om aspecten zoals wonen in dezelfde kamer met vrienden van het andere geslacht, kooien met artefacten zoals wielen die een specifieke en constante lawaai, maken of lichte voorwaarden. Naast de controle van deze variabelen, is de rol van de onderzoeker ook kritisch, als ze kunnen een toename van de dieren stress niveaus veroorzaken en met de resultaten interfereren.

Betekenis ten opzichte van bestaande methoden: Met betrekking tot andere methoden, in de versie van de CPP van de herstel-model, is de onderzoeker degene die de drug aan het dier, in tegenstelling tot zelfbestuur paradigma's die de motivatie van de animal´s beheert te nemen van de drug worden geëvalueerd. Het is belangrijk dat wij hiermee rekening houden. Dit betekent dat we niet zijn motivatie via een operante antwoord noch de primaire versterkende effecten van het geneesmiddel te evalueren. Zoals wij vermeldden, is CPP een nuttig model te beoordelen van de kritieke rol die milieu signalen spelen op herval in middelenmisbruik, die in feite de belangrijkste factoren die herval bij de mens moduleren.

Toekomst toepassingen: Toekomstige toepassingen van de CPP herplaatsing model moeten worden gericht op de zogenaamde incubatie van verlangen, die uit een geleidelijke toename in cue reactiviteit na onthouding van drugs bestaat, het nabootsen van verlangen in de mens. Tegenwoordig is weinig bekend over dit in het paradigma van de CPP. Een paar jaar geleden, in slechts één studie wordt gesuggereerd dat CPP ook deze periode van incubatie44kon meten. Recenter, was het al of niet milieu signalen gekoppeld aan morfine in de CPP de gedragsmatige reactie over de periode van intrekking45 toenemen kunnenbeoordeeld. Deze studie bleek dat het aantal posten naar de compartimenten van de CPP na verloop van tijd als gevolg van de incubatie toeneemt waren van verlangen en suggereert dat beloning herinneringen en hunkeren naar de drug in het paradigma van de CPP zich kunnen onderscheiden.

Kritische stappen: er zijn verschillende kritische stappen in het protocol. Om te bevestigen dat de dieren hun voorkeur hersteld, moet uitsterven gegevens weerspiegelen een echte uitsterven van de preferentie, voor de herplaatsing proef wordt bevestigd. Gegevens uit het uitsterven test mag geen tonen verschillen met betrekking tot de Pre-C test maar met betrekking tot de Post-C-test.

Met betrekking tot de sociale stress-geïnduceerde herplaatsing versie, wij moeten hebben bevestigd dat het dier zich heeft bevonden eigenlijk versloeg, aangezien een positieve sociale ontmoeting die niet in een nederlaag eindigt toont beschermende effecten blokkeren van het herstel van de plaats voorkeur van cocaïne. Als de proefdieren al niet versloeg, zal zij worden uitgesloten van de studie. Het is raadzaam opnemen en evalueren van de agonistic ontmoeting, het meten van de latentie van het agressieve gedrag of indiening gedrag, het aantal aanvallen en de tijd doorgebracht in elk van deze gedragingen. Wij zijn van mening dat de proefdieren verslagen wordt wanneer het ontvangt een minimum van 2 aanslagen (beten) en tekenen van indiening toont (zoals wordt geïllustreerd in Figuur 6). In alle gevallen duurt de ontmoeting 10 min.

Subscription Required. Please recommend JoVE to your librarian.

Disclosures

De auteurs hebben niets te onthullen.

Acknowledgments

Generalitat Valenciana, PROMETEOII / 2014/063; Ministerie van volksgezondheid, sociale diensten en gelijkheid. Delegatie van de regering voor het nationale Plan inzake Drugs, onderzoeksprojecten op Drug afhankelijkheden, 2014I007; Ministerie van economie en concurrentievermogen (MINECO), Health Institute Carlos III, netwerk van verslavend aandoeningen (RTA) RD12 / 0028/0005 en RD16 / 0017/0007 en de Europese Unie, FEDER fondsen "una manera de hacer Europa", en PSI2014-51847-R.

Materials

Name Company Catalog Number Comments
MONPRE 2Z software CIBERTEC S.A., Spain N/A
Identical Plexiglas boxes with two equal sized compartments separated by a grey central area. CIBERTEC S.A., Spain N/A The compartments have different colored walls (black vs white) and distinct floor textures (fine grid in the black compartment and wide grid in the white one). All boxes are equipped with four infrared light beams in each compartment of the box and six in the central area which allow the recording of the position of the animal and its crossings from one compartment to the other.
Cocaine hydrochloride Laboratorios Alcaliber S.A., Madrid, Spain N/A
Animals: mice of the OF1 outbred strain Charles River, Barcelona Spain N/A Male mice who arrive to the laboratory on PND 42 and on PND 60 perform the CPP test. These animals are specially indicated for social defeat and aggression models.
Standard Diet- Teklad Global Diet 2014 Supplied by Harlan Laboratories Models, S. L. (Barcelona, Spain) 13 kcal % fat, 67 kcal % carbohydrates and 20% kcal protein; 2.9 kcal/g
High fat diet TD.06415 45 kcal % fat, 36 kcal % carbohydrates and 19% kcal protein; 4.6 kcal/g

DOWNLOAD MATERIALS LIST

References

  1. Bardo, M., Bevins, R. Conditioned place preference: what does it add to our preclinical understanding of drug reward? Psychopharmacology. 153, 31 (2000).
  2. Tzschentke, T. M. Review on CPP: Measuring reward with the conditioned place preference (CPP) paradigm: update of the last decade. Addiction biology. 12 (3-4), 227-462 (2007).
  3. Aguilar, M. A., Rodríguez-Arias, M., Miñarro, J. Neurobiological mechanisms of the reinstatement of drug-conditioned place preference. Brain research reviews. 59 (2), 253-277 (2009).
  4. García-Pardo, M. P., Roger-Sánchez, C., De la Rubia Ortí, J. E., Aguilar, M. A. Animal models of drug addiction. Adicciones. 12 (0), 823 (2017).
  5. Manzanedo, C., Aguilar, M. A., Rodrı́guez-Arias, M., Miñarro, J. Effects of dopamine antagonists with different receptor blockade profiles on morphine-induced place preference in male mice. Behavioural brain research. 121 (1), 189-197 (2001).
  6. Robbins, T. W. The acquisition of responding with conditioned reinforcement: effects of pipradrol, methylphenidate, d-amphetamine, and nomifensine. Psychopharmacology. 58 (1), 79-87 (1978).
  7. Montagud-Romero, S., Nuñez, C., Blanco-Gandia, M. C., Martínez-Laorden, E., Aguilar, M. A., Navarro-Zaragoza, J., et al. Repeated social defeat and the rewarding effects of cocaine in adult and adolescent mice: dopamine transcription factors, proBDNF signaling pathways, and the TrkB receptor in the mesolimbic system. Psychopharmacology. , (2017).
  8. Pavlov, I. P. Conditioned Reflexes. , Oxford University Press. Oxford. (1927).
  9. Yahyavi-Firouz-Abadi, N., See, R. E. Anti-relapse medications: preclinical models for drug addiction treatment. Pharmacology & therapeutics. 124 (2), 235-247 (2009).
  10. Epstein, D. H., Preston, K. L., Stewart, J., Shaham, Y. Toward a model of drug relapse: an assessment of the validity of the reinstatement procedure. Psychopharmacology. 189 (1), 1-16 (2006).
  11. Geyer, M. A., Markou, A. Animal models of psychiatric disorders. Psychopharmacology: the Fourth Generation of Progress. Bloom, F. E., Kupfer, D. J. , Raven. New York. 787-798 (1995).
  12. De Wit, H. Priming effects with drugs and other reinforcers. Experimental and Clinical Psychopharmacology. 4 (1), 5 (1996).
  13. Wang, B., Luo, F., Zhang, W. T., Han, J. S. Stress or drug priming induces reinstatement of extinguished conditioned place preference. Neuroreport. 11 (12), 2781-2784 (2000).
  14. Shalev, U., Erb, S., Shaham, Y. Role of CRF and other neuropeptides in stress-induced reinstatement of drug seeking. Brain research. 1314, 15-28 (2010).
  15. Bossert, J. M., Marchant, N. J., Calu, D. J., Shaham, Y. The reinstatement model of drug relapse: recent neurobiological findings, emerging research topics, and translational research. Psychopharmacology. 229 (3), 453 (2013).
  16. Weiss, F. Neurobiology of craving, conditioned reward and relapse. Current opinion in pharmacology. 5 (1), 9-19 (2005).
  17. Mueller, D., Stewart, J. Cocaine-induced conditioned place preference: reinstatement by priming injections of cocaine after extinction. Behavioural brain research. 115 (1), 39-47 (2000).
  18. Ribeiro Do Couto, B., Aguilar, M. A., Manzanedo, C., Rodriguez-Arias, M., Armario, A., Miñarro, J. Social stress is as effective as physical stress in reinstating morphine-induced place preference in mice. Psychopharmacology. 185 (4), 459-470 (2006).
  19. Titomanlio, F., Manzanedo, C., Rodríguez-Arias, M., Mattioli, L., Perfumi, M., Miñarro, J., Aguilar, M. A. Rhodiola rosea impairs acquisition and expression of conditioned place preference induced by cocaine. Evidence-Based Complementary and Alternative Medicine. , (2013).
  20. Shalev, U., Highfield, D., Yap, J., Shaham, Y. Stress and relapse to drug seeking in rats: studies on the generality of the effect. Psychopharmacology. 150 (3), 337-346 (2000).
  21. Lu, L., Ceng, X., Huang, M. Corticotropin-releasing factor receptor type 1 mediates stress-induced relapse to opiate dependence in rats. Neuroreport. 11 (11), 2373-2378 (2000).
  22. Ribeiro Do Couto, B., Aguilar, M. A., Manzanedo, C., Rodriguez-Arias, M., Miñarro, J. Reinstatement of morphine-induced conditioned place preference in mice by priming injections. Neural Plast. 10, 279-290 (2003).
  23. Do Couto, B. R., Aguilar, M. A., Rodriguez-Arias, M., Miñarro, J. Long-lasting rewarding effects of morphine induced by drug primings. Brain research. 1050 (1), 53-63 (2005).
  24. Maldonado, C., Rodriguez-Arias, M., Castillo, A., Aguilar, M. A., Miñarro, J. Gamma-hydroxybutyric acid affects the acquisition and reinstatement of cocaine-induced conditioned place preference in mice. Behav. Pharmacol. 17, 119-131 (2006).
  25. Maldonado, C., Rodriguez-Arias, M., Castillo, A., Aguilar, M. A., Miñarro, J. Effect of memantine and CNQX in the acquisition, expression and reinstatement of cocaine-induced conditioned place preference. Prog. Neuropsychopharmacol. Biol. Psychiatry. 31, 932-939 (2007).
  26. Cruz, F. C., Marin, M. T., Planeta, C. S. The reinstatement of amphetamine-induced place preference is long-lasting and related to decreased expression of AMPA receptors in the nucleus accumbens. Neuroscience. 151, 313-319 (2008).
  27. Li, S. M., Ren, Y. H., Zheng, J. W. Effect of 7-nitroindazole on drug-priming reinstatement of D-methamphetamine-induced conditioned place preference. Eur. J. Pharmacol. 443, 205-206 (2002).
  28. Font, L., Miquel, M., Aragon, C. M. Involvement of brain catalase activity in the acquisition of ethanol-induced conditioned place preference. Physiol. Behav. 93, 733-741 (2008).
  29. Roger-Sánchez, C., Aguilar, M. A., Rodríguez-Arias, M., Aragon, C. M., Miñarro, J. Age-and sex-related differences in the acquisition and reinstatement of ethanol CPP in mice. Neurotoxicology and teratology. 34 (1), 108-115 (2012).
  30. Daza-Losada, M., Do Couto, B. R., Manzanedo, C., Aguilar, M. A., Rodríguez-Arias, M., Miñarro, J. Rewarding effects and reinstatement of MDMA-induced CPP in adolescent mice. Neuropsychopharmacology. 32 (8), 1750-1759 (2007).
  31. Will, M. J., Watkins, L. R., Maier, S. F. Uncontrollable stress potentiates morphine's rewarding properties. Pharmacol. Biochem. Behav. 60, 655-664 (1998).
  32. Der-Avakian, A., Will, M. J., Bland, S. T., Deak, T., Nguyen, D. T., Schmid, M. J., Spencer, R. L., Watkins, L. R., Maier, S. F. Surgical and pharmacological suppression of glucocorticoids prevents the enhancement of morphine conditioned place preference by uncontrollable stress in rats. Psychopharmacology. 179, 409-417 (2005).
  33. Sinha, R. How does stress increase risk of drug abuse and relapse? Psychopharmacology. 158, 343-359 (2001).
  34. Lu, L., Shepard, J. D., Hall, F. S., Shaham, Y. Effect of environmental stressors on opiate and psychostimulant reinforcement, reinstatement and discrimination in rats: a review. Neurosci. Biobehav. Rev. 27, 457-491 (2003).
  35. Vidal-Infer, A., Arenas, M. C., Daza-Losada, M., Aguilar, M. A., Miñarro, J., Rodríguez-Arias, M. High novelty-seeking predicts greater sensitivity to the conditioned rewarding effects of cocaine. Pharmacol Biochem Behav. 102, 124-132 (2012).
  36. Reguilón, M. D., Montagud-Romero, S., Ferrer-Perez, C., Roger-Sánchez, C., Aguilar, M. A., Miñarro, J., Rodríguez-Arias, M. Dopamine D2 receptors mediate the increase in reinstatement of the conditioned rewarding effects of cocaine induced by acute social defeat. European Journal of Pharmacology. 799, 48-57 (2017).
  37. Ribeiro Do Couto, B., Aguilar, M. A., Lluch, J., Rodríguez-Arias, M., Miñarro, J. Social experiences affect reinstatement of cocaine-induced place preference in mice. Psychopharmacology. 207 (3), 485-498 (2009).
  38. Blanco-Gandía, M. C., Aracil-Fernández, A., Montagud-Romero, S., Aguilar, M. A., Manzanares, J., Miñarro, J., Rodríguez-Arias, M. Changes in gene expression and sensitivity of cocaine reward produced by a continuous fat diet. Psychopharmacology. 234 (15), 2337-2352 (2017).
  39. Tzschentke, T. M. Measuring reward with the conditioned place preference paradigm: a comprehensive review of drug effects, recent progress and new issues. Progress in neurobiology. 56 (6), 613-672 (1998).
  40. Blanco-Gandía, M. C., Ledesma, J. C., Aracil-Fernández, A., Navarrete, F., Montagud-Romero, S., Aguilar, M. A., Manzanares, J., Miñarro, J., Rodríguez-Arias, M. The rewarding effects of ethanol are modulated by binge eating of a high-fat diet during adolescence. Neuropharmacology. 121, 219-230 (2017).
  41. Itzhak, Y., Martin, J. L. Cocaine-induced conditioned place preference in mice: induction, extinction and reinstatement by related psychostimulants. Neuropsychopharmacology. 26 (1), 130-134 (2002).
  42. Kreibich, A. S., Blendy, J. A. cAMP response element-binding protein is required for stress but not cocaine-induced reinstatement. Journal of Neuroscience. 24 (30), 6686-6692 (2004).
  43. Zavala, A. R., Weber, S. M., Rice, H. J., Alleweireldt, A. T., Neisewander, J. L. Role of the prelimbic subregion of the medial prefrontal cortex in acquisition, extinction, and reinstatement of cocaine-conditioned place preference. Brain research. 990 (1), 157-164 (2003).
  44. Orsini, C., Bonito-Oliva, A., Conversi, D., Cabib, S. Genetic liability increases propensity to prime-induced reinstatement of conditioned place preference in mice exposed to low cocaine. Psychopharmacology. 198 (2), 287-296 (2008).
  45. Sun, Y., Pan, Z., Ma, Y. Increased entrances to side compartments indicate incubation of craving in morphine-induced rat and tree shrew CPP models. Pharmacology Biochemistry and Behavior. 159, 62-68 (2017).

Tags

Gedrag kwestie 136 geconditioneerde plaats voorkeur cocaïne herplaatsing stress muizen drug-zoekende
Herstel van de Drug-zoekende in muizen met behulp van de geconditioneerde plaats voorkeur paradigma
Play Video
PDF DOI DOWNLOAD MATERIALS LIST

Cite this Article

Blanco-Gandía, M. C., Aguilar,… More

Blanco-Gandía, M. C., Aguilar, M. A., Miñarro, J., Rodríguez-Arias, M. Reinstatement of Drug-seeking in Mice Using the Conditioned Place Preference Paradigm. J. Vis. Exp. (136), e56983, doi:10.3791/56983 (2018).

Less
Copy Citation Download Citation Reprints and Permissions
View Video

Get cutting-edge science videos from JoVE sent straight to your inbox every month.

Waiting X
Simple Hit Counter