Waiting
Login processing...

Trial ends in Request Full Access Tell Your Colleague About Jove
JoVE Journal Behavior
Click here for the English version

Behavior

Uyuşturucu arayan farelerde şartına yer tercih paradigması kullanarak iade

Published: June 7, 2018 doi: 10.3791/56983
Automatic Translation
1, 1, 1, 1
1Unidad de Investigación Psicobiología de las Drogodependencias, Departamento de Psicobiología, Facultad de Psicología, Universitat de València

Summary

Bu iletişim kuralı şartına yer tercih (CPP) nüks bir model olarak açıklar. Bu yordam nüks ölçümü çevre ipuçları uyuşturucu ilişkili etkisi özlem olarak göz önünde bulundurarak laboratuvar hayvanlarda izin verir ve çekimser bağımlıları nüks Şu anda uyuşturucu bağımlılığı tedavi programları odak noktasıdır.

Abstract

Mevcut Protokolü şartına yer tercih (CPP) nüks içinde uyuşturucu bağımlılığı bir model olarak açıklar. Bu modelde, hayvanlar ilk şartına yer tercih bir uyuşturucu eşleştirilmiş bölme olarak elde etmek için eğitilmiştir ve sonrası Klima test sonra kurulan tercih söndürmek için birkaç seans gerçekleştirirler. CPP uyuşturucu çevre ile ilgili ipuçlarını şartına tatmin edici etkileri değerlendirilmesi izin verir. Sonra extinguished CPP sağlam bir astar doz ilaç sigara ekip yönetimi tarafından ve stresli uyarıcılara maruz iade. Her iki yöntem burada açıklanmaktadır. Hayvan davranış yanıt reinitiates zaman şartına ödül iade yer almış kabul edilir.

Non-invaziv, ucuz ve basit iyi geçerlilik ölçütleri ile bu iletişim kuralı başlıca avantajları şunlardır. Ayrıca, stres veya nüks ilaç davranışları arayan modüle diyet gibi farklı çevresel manipülasyonlar çalışma sağlar. Hayvanların operant yanıt dahil gibi bir sınırlama motivasyon ve ilacın birincil güçlendirici etkileri keşfetmek için araştırmacı hedefliyor verirseniz, o kendi kendine yönetim yordamları ile tamamlanmaktadır ise.

Introduction

Klimalı yer tercih (CPP) paradigma çeşitli uyaranlara1,2tarafından indüklenen şartına ödül değerlendirme basit bir yol sunar ve genel olarak bağımlılık uyuşturucu3 şartına tatmin edici etkilerini incelemek için kullanılan . Bu Pavlovian Klima, bağımlılık davranışı4korumak için uyuşturucu ilişkili çevresel ipuçları motivasyon değerini değerlendirmek dayanır. Bu modelde, ikincil appetitive özellikleri (şartına tatmin edici etkileri) çevre ipuçları elde bir birincil reinforcer3ile eşleştirildiğinde. Örneğin, başlangıçta tarafsız bir yer (örneğin bir kompartımanda CPP kafes rengini) bir ilaç kötüye belirli etkileri ile bazı sırasında eşleştirilmiş iken başka bir bölme bir araç enjeksiyon ile ilişkili oturumları5, Klima. Eğer hayvan daha fazla zaman daha önce uyuşturucu ile ilişkili yerde Klima, takip, CPP3geliştirmiştir varsayılır. Hayvan birincil reinforcer olan uyuşturucuya bağlı çevre ipuçları için pozitif bir değer verdiğinde tercih kurulması sağlanır. Sonuç olarak, hayvan davranış ilaç arama yanıt-e doğru yanıt bu bağlamsal ipuçları6olarak gerçekleştirir. CPP modeli gösterilen belirli bir koşulu (sosyal yenilgiden daha önce acıÖrneğin,) hayvanlarda daha hassas ve duyarlı olan doz ilaç, subthreshold doz ödüllendirici özelliklerinin değerlendirilmesi izin verir. naif hayvanlar7etkili değil.

CPP modeli da yok olma/iade mevcut Protokolü amacı olan nüks3, çalışmaya bir hayvan modeli olarak değerlendirmek için kullanılmıştır. Üç farklı aşama vardır: satın alma, yok olma ve iade (Şekil 1). CPP iade modelde, hayvanlar, öncelikle bir uyuşturucu eşleştirilmiş bölme için CPP edinmeniz ve sonra birkaç nesli oturumları gerçekleştirin. Hayvan yaklaşım olmuştur şartına bir ödüllendirici uyarana davranış onun yanıt azaltır an (Örneğin, uyuşturucu) kaldırılmış olarak tükenme tanımlamak8. Böylece yavaş yavaş zayıflatılmış9edinsel tercihtir tükenme oturumları sırasında hayvanlar yokluğunda bölmeleri uyuşturucunun keşfedin. Extinction (uyuşturucu eşleştirilmiş kompartımanda harcanan süre progresif azalma) sırasında hayvan sergileyen davranış değişikliği nedeniyle önceki öğrenilen Yanıt ile rekabet yeni öğrenme süreçleri olabilir düşünmeye önemli bir konu olduğunu, veya konu3iç motivasyon durumuyla bir düşüş nedeniyle. Son olarak, bağlam ya da ilaç ipuçları aracılığıyla yer tercih ta modelimiz iade1olur.

İlişkili uyuşturucu bir astar enjeksiyon yönetme bağlamsal ipuçlarını yaklaşım ta kabul tercih getirebileceği. Uyuşturucu astar iade özlem indüklenen ve hayvanlar için ödül ile ilgili çevresel ipuçları aramaya motive uyuşturucu zevkli etkileri kalıcı bellek nedeniyle oluşur.

Yordamı (cerrahi gerektiren kendi kendine Yönetim aksine,) non-invaziv CPP iade modeli bazı avantajları nelerdir, ucuz ve basit. Buna ek olarak, bu model iyi ölçüt geçerliliği, iyi insanlar10,11relapse, re-uyuşturucu12,13 maruz gibi neden bir çekim gücü ile iade inducing, ne olacağı taklit vardır veya 14stres.

Extinction-iade model intravenöz kendi kendine idare gibi diğer teknikleri vardır. Burada, hayvan hayvan, compulsivity ve motivasyon14,15,16operant yanıt değerlendirilmesi izni uyuşturucu yapabilirsiniz bir kolu tuşuna basın. CPP büyük avantajı üzerinde kendi kendine yönetim yordamları CPP iade yaklaşımının yeniden ortaya çıkma oluşan uyuşturucu ile eşleştirilmiş bağlam uyaranlar teşvik motivasyonel değerini reaktivasyonu yansıtmak için kabul edilir olduğunu davranış bağlam17. Ayrıca, stres gibi uyuşturucu olmayan uyarıcılara da iade18,19tetikleyebilir. Örneğin, bir ayak şok veya kısıtlama stres sonra20bir kendi kendine Yönetim çalışma iade sıçanlarda eroin alımının üzerinde hiçbir etkisi nitelendirdi. Yazarlar bu gerilim farklı bir bağlamda kendi kendine Yönetim odası dışında test edildi çünkü başarısız oldu tartışıldı. Buna ek olarak, iade CPP modeli kullanırken vardı aynı stresler kullandıktan sonra bir açık yeniden kurulması morfin kaynaklı CPP ve CPP ve farklı zamanlarda farklı bir bağlamda uygulanır (0 ve 15 dakika sonra stres maruz kalma)18 .

Çeşitli çalışmalar literatürde farklı yollarını uyuşturucu ve stres kaynaklı iade göstermiştir. Bir yandan, iade uyuşturucu kaynaklı sıçanlar ve fareler morfin5,21,22,23, kokain24,25, amfetamin26kullanarak rapor edildi, 27, etanol28,29ve 3,4-Methylenedioxymethamphetamine (MDMA)30. Öte yandan, strese maruz kalma ilaç kötüye açığına belirleyici bir faktör olabilir. Stres uyuşturucu7,31,32 tatmin edici etkilerini artırmak için bilinmektedir ve iyi kurulmuş33,34nüks onların rolüdür. Örneğin, bir conspecific sosyal etkileşimleri yenilgi morfin ve kokain CPP18,19edilmekteyse. Buna ek olarak, sosyal yenilgi tekrarlanan maruz hayvanlar subthreshold dozda kokain ödüllendirici şartına etkileri daha savunmasız ve tercih çok düşük dozda kokain7ile yeniden.

Uygulama CPP iade modelinin hayvanlarda relapse için güvenlik açığı değerlendirmek için yararlı ve hassas bir şekilde ve insan relapse, gibi tehdit ana Tetikleyiciler farklı ince çevre manipülasyonlar değerlendirilmesi izin verir uyuşturucu veya stres indüklenen geri alalım.

Subscription Required. Please recommend JoVE to your librarian.

Protocol

Ulusal, bölgesel ve yerel yasa ve yönetmeliklere, tarih için kullanılan hayvanların korunması yönergesi 2010/63/AB sayılı Avrupa Parlamentosu ve Konsey, 22 Eylül 2010 uygun olan tüm yordamları fareler ve bakımı ile ilgili uyulması Bilimsel amaçlı. Hayvan kullanımı ve bakımı Komitesi Valencia Üniversitesi mevcut protokolü onayladı.

1. malzeme ve klimalı yer tercihi için Kurulum:

  1. Fareler 1-2 dk her test önce 3 gün idare. Kuyruk temelini kavramış. Vücut mümkünse desteklenmelidir. Bu ağrı ve acı bir hayvan işlerken en aza indirmek için ve stres gibi müdahale değişkenleri önlemek için yapılır.
    Not: 1 erkek fareler mevcut deneylerde 60 35-40 g ağırlığında gün eski (Genç Yetişkin) istihdam edildi. Uyuşturucu kaynaklı iade her iki cinsiyette farelerde gerçekleştirilebilir. Ancak, stres kaynaklı iade ile ilgili sosyal yenilgi paradigma tasarlanmıştır sadece erkek kemirgen, kadın yapmak Hayır ikamet farelerde agresif bir yanıt ikna etmek.
  2. İçin yer Klima, daha küçük bir merkezi gri alanı tarafından (13,8 uzun × 31,5 cm geniş × 34.5 yüksek) ayrılmış iki özdeş bölümler (30,7 cm uzun × 31,5 cm geniş × 34,5 cm yüksekliğinde) ile yapılan aynı kutuları kullanın.
    Not: Farklı kat doku ve duvar renkleri (siyah yerde düz bir zemin ve beyaz olan kaba bir yerde) bölmeleri var. Her bölmesi CPP kutusunun dört kızılötesi ışık ışınları ve altı merkezi yerde içerir. Bu bölmeler ve hayvan konumunu arasındaki geçişleri kayıt sağlar.
  3. Set up (kapalı ya da indirdi) Oda ışıkları her gün. Hayvanlar algılıyorsun değil ve deneyci (yaklaşık 40 kat seviyesinden 1 m ölçülen lux) için zayıflatılmış kırmızı ışıklar (önerilen) kullanın.
  4. 15 dakika öncesi ve sonrası Klima için kaydetmek üzere program ayarlama (yazılım için Malzemeler tablo görmek) test (Şekil 2)
  5. Bütün deneyin için gerekli kokain çözüm hazırlamak. Kokain hidroklorid % 0,9 içinde erimesi NaCl (serum) 0.1 mL/10 g vücut ağırlığının birimindeki. Girdap karışımı ve günün sonunda 4 ° C'de mağazasında.
    Not: Kokain konsantrasyonları çalışmanın amacı bağlı olarak değişebilir. Amaç subthreshold dozda kokain kullanımının değerlendirecekse, 1 mg/kg konsantrasyon, önceki çalışmalar24,35içinde görüldüğü gibi denetim hayvanlarda etkisiz olduğu kullanılabilir. Etkili bir doz amacı ise, 6 mg/kg konsantrasyon etkilidir ama iade24teşvik değil, seçilmiş veya etkilidir ve iade tercih19indükler bir 25 mg/kg konsantrasyon olabilir.
  6. Hayvanlar kendi karanlık evre sırasında test etmek ve aynı kutusunu her hayvan için gün boyunca kullanın.
  7. Hayvan test oda içinde ev onların kafes her gün getirmek ve onları rahatsız 15dk için habituation dönemi olarak test ile ilgili tüm sesler için bekletin.

2. test

  1. Satın alma
    Not: Yer Klima, ilk spontan tercih açısından tarafsız yordamı üç aşamadan oluşmaktadır: ön Klima, Klima ve sonrası Klima (Şekil 1).
    1. Öncesi Klima (Pre-C) (3 gün) (Şekil 2, Şekil 3, Şekil 4)
      Not: Burada, CPP kutusunda bölmeleri tarafsız değeri değerlendirilir. Her bölümünde harcanan zamanı ölçmek ve daha sonra aynı yerde sonrası Klima test harcanan ile karşılaştırın.
      1. Hayvanlar test odasına getir ve onları 15 dakikadır habituated bırakın.
      2. Giyotinler kafes kaldırılır kontrol edin.
      3. Bilgisayar ve program ayarlayın. Hayvan kimlikleri girip "Deneme" ve "Start" komutunu (Şekil 2) tuşuna basın.
      4. Fareyi yavaşça orta odası (gri bölme) yerleştirin ve minimum gürültü ile test odadan.
      5. Bütün hayvanlar ev onların kafes getir ve deneme sona erdiğinde verileri kaydetmek.
      6. Fareler her iki bölmeleri cihazları 15dk için erişmek izin (900 s) günde 3 gün üst üste.
      7. Günde 3, her bölümünde bir 900 s süre içinde harcanan zaman yazın ve sonraki safhaya (Şekil 3) bölmeleri tayini için kaydedin.
      8. Her grup bir bölümü (Örneğin, siyah) ve diğer yarısını da diğer bölme (Örneğin, beyaz) (Şekil 4) uyuşturucu veya araç almak için yarım hayvanlarda atayın.
        Not: Son dağıtım hayvan hayvanlar yarısı başlangıçta tercih edilen bölme ve tercih edilmeyen yuvası diğer yarısı için atanır emin olmalısınız. Buna ek olarak, hayvanların yarısı bir bölümü (örneğin, siyah bir) ve diğer yarısını da (Bu durumda, beyaz olanı) diğer ilaç aldı.
      9. Grup içinde her iki bölmeleri yanı sıra gruplar (bir varyans analizi (ANOVA) ile test grup farklılıklar) arasında denge skorları. Yaklaşık rehberlik gibi değerler etrafında olması gerekir 360-370 s Pre-C testi (Şekil 4). Not: hiçbir önemli farklılıklar arasında uyuşturucu eşleştirilmiş ve araç eşleştirilmiş bölmeleri Pre-C test sırasında harcanan süre tespit edilmelidir.
      10. Bir güçlü isteksizlik veya herhangi bir bölümü için tercih sergi hayvanlar hariç. İsteksizlik yerde % 33 daha az zaman harcama olarak düşünün ve hayvan o yerde fazla % 67 toplam zaman harcanan zaman tercih düşünün.
    2. (4 gün) Merkezi Klima (Şekil 5)
      1. Hayvanlar tartmak ve bu ağırlık sırasında klima kokain doz için kullanın.
      2. Kokain ya da vücut ağırlık dayalı salin ile şırıngalar hazırlayın.
      3. Bir fare intraperitoneally bir kerede enjekte (IP) ve hemen yavaşça atanan siyah ya da beyaz yuvası onların kutusu içine yerleştirin.
      4. Hemen fareyi 30 dk (Şekil 5) uyuşturucu eşleştirilmiş yuvasının sınırlı önce 4 h bir zaman aralığından sonra uyuşturucu doz enjekte et.
      5. Bu yordamı her gün, gün 2 ve 4 gün 1 ve 3 ve serum fizyolojik kokain ile başlayan diğer.
      6. Doğumdan her iki durumda da iki bölmeleri ayıran Giyotin kapıyı kapatarak merkez alan ulaşılmaz yapım gerçekleştirilen onay.
        Not: Bu aşamada, PC programı ayarlamak için gerek yoktur.
    3. Sonrası Klima (Post-C) (1 gün)
      1. Hayvanlar test odasına getir ve onları 15 dakikadır habituated bırakın.
      2. İki bölmeleri ayıran Giyotin kapı kaldırın.
      3. Bilgisayar ve program ayarlayın. Hayvan kimlik girin ve "start" komutunu tuşuna basın.
      4. Her yerde tedavi edilmezse fareler tarafından 900 s gözlem süresince harcanan süreyi kaydetmek.
      5. Deneme tamamlandığında tüm hayvanları geri ev onların kafes getir ve verileri kaydetmek.
      6. Uyuşturucu eşleştirilmiş bölümünde Post-C sırasında harcanan zamanı önemli ölçüde Pre-C testinde daha büyük ise ilaç yer tercih indüklenen düşünün. Tersi durumda, uyuşturucu eşleştirilmiş yuvası için bir isteksizlik göz önünde bulundurun.
  2. Geçersiz kalma
    1. Uyuşturucu eşleştirilmiş yuvası için bir tercih geliştirilen tüm grupları/hayvanlar bir haftalık tükenme oturumda gerçekleştirin.
    2. 15 dakika (öncesi ve sonrası-C testleri aynı) hayvan Aparatı (olmadan giyotinler) içinde yer (Şekil 1).
      Not: doz istihdam CPP yüksektir (25 mg/kg), haftada 1 nesli oturumu gerçekleştirin. Subthreshold bir doz kullanılan (1 mg/kg) ise, o zaman 2 yok olma oturum haftada (Örneğin Pazartesi ve Perşembe) gerçekleştirin.
    3. Ne zaman veri yok olma testinden Pre-C testi ile ilgili olarak farklılıklar görünmüyor ama Post-C testi ile ilgili olarak farklılıklar gösteriyorlar mı sönmüş tercih düşünün.
    4. Test 24 saat sonra yok onaylamak için yineleyin.
  3. CPP iade
    1. Astar kaynaklı iade
      1. Geçersiz kalma onaylamıştır sonra kokain 24 h bir astar doz etkilerini değerlendirmek.
        Not: Astar dozlarda hayvan sırasında klima aldı yarım önceki dozu vardır. İade testi aynı protokolü Pre-C ve Post-C testleri geçer, 15 dk önce test hayvanları olmayan bir ekip içinde kokain doz almak dışında yerleştirin. 23, tekrarlanan yok olma/iade oluştuktan sonra doz sırasını sonuçlarda bir rol oynamaya36elde değil gibi görünüyor, ancak iade inducing içinde uyuşturucu astar etkinliğini gelişmiş olabilir.
      2. Hayvan getirmek için başka bir odaya test odasından (sigara contingent yer) (Şekil 6).
      3. Onları kokain yarım önceki doz ile enjekte (hayvanlar ile 25 mg/kg kokain, astar doz şartına EğerÖrneğin, 12.5 mg/kg olurdu).
      4. Onları kendi vivaryum 15dk için geri getirmek.
      5. Onları test odasına alıp aparatı hayvanlarda (bölmeleri ayıran hemen Giyotin kapı) 15 dakikadır (aynı öncesi ve sonrası-C testleri) yerleştirin.
      6. Saniye uyuşturucu eşleştirilmiş kompartımanda iade tarafından uyuşturucu indüklenen tercihi derecesine bir ölçüsü olarak son nesli oturum ve iade testi sırasında harcanan zaman arasındaki farkı göz önünde bulundurun.
      7. Her zaman bu kadar doz azaltılarak etkisiz teyit yok olma-iade yordamı yineleyin.
        Not: Bir serum fizyolojik enjeksiyon denetim kapasitesine kokain astar (ve enjeksiyon kendisi, değil) kontrol etmek için kullanılabilir iade ikna etmek için.
    2. Stres kaynaklı iade
      1. Geçersiz kalma onaylamıştır sonra stres kaynaklı geri alalım 24 h etkilerini değerlendirmek
        Not: İade testleri (15 dakika ücretsiz ambulation), Post-C agonistik bir sosyal yenilgisinden karşılaşmadan sonra (Şekil 6) hayvanlar 15dk test edilir dışında yürütülen aynıdır
      2. Hayvanlar CPP odadan başka bir odaya götür.
      3. Eşit yaş ve vücut ağırlığı plastik kafes (Şekil 6) eşleşen bir agresif rakip seks ile deneysel fareyi getirin.
        Not: Agonistik karşılaşma deneysel fareyi bir 10 min sınava bir nötr şeffaf plastik kafes (23x13.5x13cm) bir yenilgi sonuç ile oluşur. Agresif rakip hazırlamak için ilk yaş ve vücut ağırlığının deneysel fareler için 3 hafta maç farklı hayvan izole et. Tren onları mücadele deneyimi elde etmek ve agresif karaya ait davranış yüksek düzeyde sahip olmak için onları test etmek için. Agresif conspecifics elde etmek için fare gerekir en az 3 hafta boyunca izole ve sonra olarak saldırgan eğitimli ve saldırı davranışlar. Hayvanlar tarafsız bir ortamda, onları çiftler halinde bakacak şekilde eğitilmiştir. Onları rakibin 2 veya 3 kez ısır ve onları kafesten bir iki fare sunulması, gösterir önce Böylece saldırgan davranışlar karşılaşma deneyimi pekiştiriyor her zaman eğitim biten bırakacağız. Saldırganlık (tehdit ve saldırılara agresif conspecific) acı sonra deneysel fareler kaçınma/kaçmak ve savunması/uysal davranış mevcut olmalıdır. Ölçüt yenilgi, itaatkâr dik tarafından karakterize belirli bir duruş benimsemeye olduğunu, forepaws, upwardly açılı kafa, limp ve kulak (Şekil 6) geri çekildi. Burke ve ark.göre 2016, biz davetsiz misafir için itaatkâr sırtüstü duruşu görüntülerse sosyal karşılaşma daha önce sonlandırıldı düşünün > 8 s veya 13 saldırı ısırıkları meydana eğer. Başka bir seçenek önemli yaralanma riski olmadan ekran hayvanlar için hayvan içinde a kafes çevirme değil kadar her iki hayvan geçmek büyük bir delik ile hızı olabilir.  Saldırganlık hayvanlar tabi saldırgan davranışlar yönlendirmek için tespit edilemedi.  Bir hayvan bir yaralanma bir yara 1 cm çap ve/veya kas doğrudan maruz kalma ile ayakta tutan çalışma söz konusu değildir ve ötenazi.
      4. 10 min agonistik karşılaşma sonra farelerin test odasına götür ve CPP aparatı hayvanlarda (bölmeleri ayıran hemen Giyotin kapı) 15 dakikadır (aynı öncesi ve sonrası-C testleri) yerleştirin.

3. istatistiksel analiz

Not: Ideal örnek boyutu 15 hayvan grubu başına en az olmalıdır.

  1. Bir değişken, tedavi, arasında karışık bir ANOVA aracılığıyla Grup ilaç eşleştirilmiş kompartımanda geçirdim bu süre analiz (kontrol grubu, deney grubu, iki grup örneği Şekil 7 c) iki düzeyleri ve bir değişken-gün içinde 2 düzeyleri ile (Pre-C ve Post-C).
    Not: Kontrol grubunda hayvanlar ilaç almak ama hiçbir çevre manipülasyonlar yok. Öte yandan, deney grubu hayvanlar farklı çevresel koşullara maruz kalır. Uyuşturucu eşleştirilmiş kompartımanda duyarlılık herhangi bir önemli farklar ilaç varsa görmek için test öncesi-C saygı ile Post-C günü harcanan süre karşılaştırın.
  2. Buna ek olarak, ya önemli puanlarının kontrol etmek için Bonferroni post-hoc çözümlemesi.
  3. Student´s t-testleri aracılığıyla gelişmiş tercih deneme ama son anda, ders sırasında yok olma-iade prosedürü ile devam etmek için bunları analiz grupları yok olma ve iade değerleri ile ilgili verileri analiz bir ANOVA ile ile bir değişken içinde (gün) ile bağlı olarak her grup düzeyi sayısı.
    Not: ne zaman karşılaştırma sayısı arttı, şans eseri de bu önemli olacak sayısı arttı. Bu nedenle, yanlış-mutlak (tip 1 hataları) almamak için biz 'böylece test daha muhafazakar birden çok t-test için Bonferroni düzeltmesi olan yapım p-değeri doğru'. Ancak, iade sınava iade test ve son nesli test arasında karşılaştırma yapılmalıdır. Bu nedenle, düzeltme için gerek yoktur.

Subscription Required. Please recommend JoVE to your librarian.

Representative Results

İlk olarak, astar ve stres indüklenen iade temsilcisi sonuçlarını yetişkin OF1 erkek fare kullanarak Şekil 7 ' de gösterilen.

Şekil 7a-b saatini temsil eden veri ön içinde uyuşturucu eşleştirilmiş compartment(s) geçirdi ve Post-C testi tekrarlanan ölçüler ANOVA ile konular içinde değişken yaşam (Pre-C ve Post-C karşılaştırma) ile analiz edilebilir. Sonuçlar gösterdi değişken gün önemli bir etkisi [F(1,34) = 51.179; p < 0,001], bütün hayvanlar bir tercih öncesi C'ye göre Post-C gün geliştirilen Bütün hayvanlar 25 mg/kg kokain ile klimalı ve yok olma erişildiğinde, bir grup alınan iade (şekil 7a) test etmek için 12.5 mg/kg kokain bir astar doz ve diğer hangi sosyal etkileşim için maruz kaldığı deneysel hayvan agresif bir rakip (şekil 7b) tarafından yenildi. 15 dakika sonra iki olay, hayvanlar onların ilgili CPP kutusuna test edildi.

Astar kaynaklı iade (şekil 7a) için sonraki maruz kaldığı astar dozlarda (yarım önceki bir) bir astar doz kadar azalan olduğunu doğruladı etkisiz. Doz vardı: 12.5, 6,25, 3.125 ve 1,56 mg/kg kokain. Student´s t-testi 12.5 mg/kg kokain iade yok olma oturum ile ilgili olarak üzerinde önemli bir etkisi ortaya (t istatistik (t) 20.589, serbestlik derecesi (d.f.) = = 17; p < 0.001) ve sonraki doz (6.25 mg/kg: t = 18.356; 3.125 mg/kg: t 14.260; = 1,56 mg/kg: t 16.934 = d.f. 17; = p < 0.001). Astar 0,78 mg/kg ile iade neden değil.

Stres kaynaklı iade ile ilgili olarak (bakınız şekil 7b), agresif bir hayvana maruz ve daha önce extinguished tercih geri getirmemesi için test yol önce 15 dk yendi (t = 26.810; d.f. = 15; p < 0.001)19 .

Yinelenen sosyal yenilgi CPP yordamı önce acı gibi çevre diğer manipülasyonlar, subthreshold dozda kokain (Şekil 7 c) tatmin edici etkileri değiştirin. A karışık ANOVA ile değişken "stres" arasında ve değişken içinde "gün" gerçekleştirilen ve stres etkileşimin önemli bir etkisi vardı x gün [F(1,29) 4.144; = p < 0.05]. Kokain, standart hayvanlar7' etkisiz olduğu gösterilmiştir subthreshold bir doz uyuşturucu eşleştirilmiş yuvası için tercih sosyal mağlup hayvanlar sadece sergiledi. Buna ek olarak, sonra geçersiz kalma tercih sosyal mağlup hayvanlar onların tercihi tek 0.5 mg/kg kokain astar ile yeniden (t = 25.484 d.f. 17; = p < 0.001).

İkinci olarak, negatif sonuç olarak iade saldırgan olmayan conspecific (Şekil 8a) olumlu bir sosyal etkileşim nasıl önlenebilir görebilirsiniz. Bu nedenle, hayvan mağlup oldular ya da değil bir sosyal sonra37karşılaşma değerlendirmek önemlidir.

Başka bir örnek iade önlemek olumsuz sonuçları yüksek yağlı lezzetli diyet alımı gibi beslenme manipülasyonlar olabilir. İlk olarak, ANOVA çözümleme değişken gün bir etkisi ortaya [F(1,26) = 21.527; p <.0.001], her iki grup tercih uyuşturucu eşleştirilmiş yuvası için geliştirilen (p < 0,01) (Şekil 8b). Sonra yok olma, sonra Post-C test ilaç-astar indüklenen geri alalım, onların duyarlılık azalmıştır onlar tercih 6.25 mg/kg kokain ile yeniden değil gibi yüksek yağlı diyet açık hayvanlar38doz bizim sonuçlar gösterir.

Figure 1
Şekil 1: deneysel bir işlem şartına yer tercih. Üç aşamadan oluşmaktadır: ön Klima, Klima ve sonrası Klima. 4 Klima gün içinde yordamı her gün, gün 2 ve 4 araç ile kokain gün 1 ve 3 ile başlayan dönüşümlü olarak vardır. O zaman, yok olma ve iade oturumlar gerçekleştirilir. Bu rakam daha büyük bir versiyonunu görüntülemek için buraya tıklayınız.

Figure 2
Şekil 2: yazılım kullanım oturumları nerede her kompartımanda harcanan zaman ve kaydedilen giriş sayısını Pre-C ve Post-C testleri için. Bu rakam daha büyük bir versiyonunu görüntülemek için buraya tıklayınız.

Figure 3
Şekil 3: Pre-C ve Post-C test sonra verileri Burada, test sırasında elde edilen verileri kaydetmek. Bu rakam daha büyük bir versiyonunu görüntülemek için buraya tıklayınız.

Figure 4
Şekil 4: Klima bir sonraki aşaması için bölmeleri için hayvanların tarafsız atama. Veri son Pre-C test günü beyaz ve siyah bölmeleri al. Hayvanların yarısından ilaç ya da araç içinde bir bölme (siyah veya beyaz) ve diğer yarısı diğer yerde almak için atanır. Güçlü isteksizlik veya tercih göstermek hayvanlar hariç. Bu rakam daha büyük bir versiyonunu görüntülemek için buraya tıklayınız.

Figure 5
Şekil 5: kokain ve araç son atama eşleştirilmiş oturumları. Bu rakam münavebe eşlendirme sırasını gösterir. Gün 1 ve 3, bir hayvan (Örneğin, 1.1) kokain eşleştirilmiş yuvası (beyaz bir) ilk maruz ve dört saat sonra araç eşleştirilmiş yuvası (siyahı) yararlanılır. Günlerde 2 ve 4, pairings sırasını ters ve hayvan ilk (siyah) bölmesi araç eşleştirilmiş ve kokain eşleştirilmiş (beyaz) yuvası dört saat sonra maruz kalmaktadır. Bu yordamı tarafsız ve denge ağırlıklı, eşzamanlı Klima oturumları her iki bölmeleri azaltmak için bize izin verir (Örneğin, hayvanlar 1.1 ve 2.4, 3.1 ve 1.3), aynı kutusunun kullanarak iki hayvan ile yürütülen zaman ayrılmış deneysel bir işlem. Not Bu çiftleri hayvanların eşlendirme Klima aşaması ters işlem sırasını izleyin. Bu rakam daha büyük bir versiyonunu görüntülemek için buraya tıklayınız.

Figure 6
Şekil 6: iki modelleri iade. (bir) astar kaynaklı geri alalım ve (b) stres kaynaklı geri alalım. (bir) hayvanlar bir uyuşturucu enjekte bir ekip sigara odasında almak ve vivaryum için getirilir; CPP kutusunda test edilir 15dk sonra. (b) hayvanlar 10 min için bir ekip sigara odasında agonistik bir karşılaşma yendi ve daha sonra CPP kutusunda test edilir. Bu rakam daha büyük bir versiyonunu görüntülemek için buraya tıklayınız.

Figure 7
Şekil 7: temsilcisi olumlu sonuçlar. Astar (bir) ve 25 mg/kg kokain CPP sonra stres kaynaklı (b) geri alalım. (c) sosyal yenilgi üzerine etkileri subthreshold dozda kokain (1 mg/kg) tatmin edici etkileri. Çubuklar (± SEM) bu süre içinde uyuşturucu eşleştirilmiş kompartımanda öncesi Klima (beyaz), sonrası Klima (siyah), son nesli oturum (açık gri) ve geri alalım (koyu gri) sırasında harcanan saniye gösterir. İade testi aldı yarım önceki doz bir astar doz sonra 15 dk değerlendirilmiştir. * p < 0,05; ** p < 0,01; p < 0,001 önemli fark vs Pre-C (ANOVA bir içinde-konuları ile değişken gün (Pre-C ve Post-C karşılaştırma) veya önceki nesli oturum (öğrenci t testi). Bu rakamlar 7,19değiştirdiniz. Bu rakam daha büyük bir versiyonunu görüntülemek için buraya tıklayınız.

Figure 8
Şekil 8: temsilcisi negatif sonuç. Kokain tatmin edici etkileri üzerinde koruyucu çevre manipülasyonlar etkileri. (bir) etkileri olumlu bir sosyal etkileşim geri alalım önce sınayın. (b) etkileri yüksek yağlı diyet sırasında tüm geçersiz kalma süresi ve geri alalım. Kontrol grubu (yağ, % 67 kcal den karbonhidrat ve protein dan % 20 kcal dan kcal % 13; 2.9 Toplam kcal/g) standart bir diyet ve yüksek yağlı diyet grubu (% 45 kcal yağ, % 36 kcal den karbonhidrat ve protein dan % 19 kcal; 4,6 Toplam kcal/g) ile beslenen oldu. Çubuklar (± SEM) bu süre içinde uyuşturucu eşleştirilmiş kompartımanda öncesi Klima (beyaz), sonrası Klima (siyah), son nesli oturum (açık gri) ve geri alalım (koyu gri) sırasında harcanan saniye gösterir. İade test 15 dk sonra yarım önceki alınan doz bir astar doz değerlendirilmiştir. * p < 0,05; ** p < 0,01; önemli fark vs Pre-C (ANOVA bir içinde-konuları ile değişken gün (Pre-C ve Post-C karşılaştırma) veya önceki nesli oturum (öğrenci t testi). Bu rakamlar 37,38değiştirdiniz. Bu rakam daha büyük bir versiyonunu görüntülemek için buraya tıklayınız.

Subscription Required. Please recommend JoVE to your librarian.

Discussion

Uyuşturucu bağımlılığı araştırma kilit noktası özlem azaltmak ve sonuç olarak, relapse için güvenlik açığı azaltmak tedaviler gelişmedir. CPP paradigma iade modeli sayesinde bir önceliktir gelecekteki araştırma nüks modüle farklı yordam ve çevresel faktörlerin etkisini incelemek mümkündür. CPP paradigma için çevresel faktörler son derece hassas bir test olarak dikkate alınacak bazı önemli noktalar vardır.

Değişiklikler ve sorun giderme: İade modeli CPP sürümünü faiz uyuşturucu bağlı olarak değiştirilmesi gerekir. Farklı faktörler süre ve klima oturum sayısı gibi şartına tercih büyüklüğünü etkileyebilir. İlişkilendirmeleri sayısı genellikle biri en yaygın olanıdır dört ile altı arasında. Klima test süresi ilaç ve onun farmakokinetik özellikleri göre kurulur.

Yani gereken süreyi azaltmak iletişim kurallarını kullanmak yararlı birçok denemeler, genellikle dahil CPP çalışmaları. Bunu başarmak için bir yol denemeleri sayısını azaltmak için ve başka bir yol mevcut protokolünde gösterildiği koşullanma günlük, iki oturum gerçekleştirilecek. Bu durumda, önceki oturumundan ilacın etkileri kokain arasında-dört saatlik aralıklarla araç oturum seçildi neden olan bu ikinci oturum39için üzerine sürükleyin değil ki sağlamak gereklidir. Örneğin, kokain durumunda Klima aşamasında eşleştirme zamanlama her 24 h 30 dk bir eşleştirme süresi 4 gün boyunca olmalıdır. Aksine, etanol ve klima usul zaman elbette her 48 h, toplam 8 gün, 1 oturum günlük, Klima olmalı ve araç ve alkol alternatif, sonunda 4 alkol eşlendirme toplam sahip. Etanol eşleştirme 5 dk gibi kısa bir süre daha fazla zaman itici Birleşik üretmek olabilir olmalıdır. 1-2 g/kg ve subthreshold dozlarda etkili doz aralığı 0,75 g/kg40vardır. Astar kaynaklı iade alınan yarım önceki doz olmalı ve aparatı aynı olması gerekir.

Ancak, 1 veya 2 seans yapmak için tercih bir gün özel uyuşturucu istismarı sonuçlarında etkileyebilir. Bu MDMA ayrıca yönetilen bu yüzden her gün30, tek bir dernek gerçekleştirerek elde edilebilir, ancak örneğin, MDMA kaynaklı ikili oturum protokolü ile CPL söz konusu olduğunda, klimalı bir tercih olarak sonrası Klima, görülmektedir değil her 48 h, ancak klima oturum süresi 30 dk olmalıdır.

İki ana yöntem vardır CPP kurulması sonra çalışabilecek yok oluşu, her iki günlük enjeksiyonları daha önce ilaç ve araç içinde hayvan hapsetmesi aracın şartına bölmeleri41,42, 43, ya da hayvanları tercih artık7,18,30,38görülmektedir kadar Giyotin olmadan üç bölmeleri keşfetmek izin CPP test yinelenen tarafından. Mevcut iletişim kuralında, ikincisi, çünkü Klima (daha o insan bağımlıları meydana gelen benzer) ile ilgili herhangi bir farmakolojik veya davranışsal manipülasyon olmadan kendiliğinden geçersiz kalma türüdür, ama her iki yöntem kabul edilebilir istihdam ve geçerli, edebiyat yıllardır gösterdiği gibi.

Teknik sınırlamaları: En önemli CPP paradigma ve iade modeli için herhangi bir çevresel değişimin çok hassas olduklarını kısıtlamasıdır. Bu nedenle, Oda ve vivaryum koşulları sırasında tüm prosedürü istikrarlı ve sürekli kalması gerek. Özel bakım cinsten kafesleri belirli ve sürekli bir gürültü yapmak tekerlek gibi eserler ile arkadaşları ile aynı odada yaşayan gibi yönleri alınmalıdır veya ışık koşulları. Bu değişkenler kontrol ek olarak, araştırmacı da hayvanların stres düzeyleri bir artış neden ve sonuçları ile müdahale gibi kritik roldür.

Önemi ile ilgili mevcut Yöntemler: CPP sürüm iade modelinin diğer yöntemleri ile ilgili hayvan, ilaç almak için animal´s motivasyon değerlendirmek öz yönetim paradigmalar aksine için ilaç yöneten bir araştırmacıdır. Biz bu dikkate almak önemlidir. Bu biz motivasyon operant bir yanıt ne de ilacın birincil güçlendirici etkileri aracılığıyla değerlendirirsiniz değil anlamına gelir. Biz de belirtildiği gibi CPP çevre ipuçları aslında nüks insanlarda modüle ana faktörler nelerdir madde bağımlılığı bozukluklarında nüks oynamak kritik rol değerlendirmek için kullanışlı bir modeldir.

Gelecekteki uygulamalar: CPP iade modeli gelecekteki uygulamalar özlem, özlem insanlarda taklit ilaçların oruç sonra işaret reaktivite ilerici bir artış oluşan sözde kuluçka odaklı olmalıdır. Günümüzde, az bu konuda CPP paradigmada bilinir. Bir kaç yıl önce yalnızca bir çalışma CPP da bu kuluçka dönemi44ölçmek önerdi. Daha yakın zamanlarda, çevre işaretleri morfin CPP için eşleştirilmiş davranışsal yanıt çekilmesi dönem45artış olabilir olup olmadığını değerlendirildi. Bu çalışmada özlem ve ödül anılar ve uyuşturucu özlem CPP paradigmada ayırt düşündüren kuluçka yansıtan CPP bölmeleri için girdi sayısı zaman içinde artan bulundu.

Kritik adımlar: protokolünde çeşitli kritik adımlar vardır. Hayvanlar onların tercihi yeniden teyit için geçersiz kalma veri önce iade test doğruladı tercih, gerçek bir yok oluşu yansıtmalıdır. Geçersiz kalma test gelen verileri Pre-C testi ile ilgili ama Post-C testi ile ilgili olarak farklılıklar göstermelidir değil.

Sosyal stres kaynaklı iade versiyonu ile ilgili olarak, biz yenilgi bitmiyor olumlu bir sosyal karşılaşma koruyucu etkileri iade yeri engelleme gösterir beri hayvan aslında mağlup oldu doğruladı kokain tercih. Deneysel hayvan mağlup olan değil varsa, çalışma dışlanır. Kayıt ve agonistik karşılaşma değerlendirirken saldırgan davranışlar ya da boyun eğme davranışı, saldırıların sayısı ve bu davranışları her harcanan zaman gecikme süresi ölçme öneririz. Biz en az 2 saldırıları (alıntılar) alır ve ( Şekil 6' da gösterildiği gibi) gönderme belirtileri gösterir zaman deneysel hayvan mağlup oldu düşünün. Her durumda, karşılaşma 10 dakika sürer.

Subscription Required. Please recommend JoVE to your librarian.

Disclosures

Yazarlar ifşa gerek yok.

Acknowledgments

Generalitat Valenciana, PROMETEOII / 2014/063; Sağlık Bakanlığı, sosyal hizmetler ve eşitlik. Uyuşturucu, uyuşturucu bağımlılığı, 2014I007 araştırma projeleri Ulusal Plan için hükümet temsilcisi; Ekonomi Bakanlığı ve rekabet (MINECO), Sağlık Enstitüsü Carlos III, ağ bağımlılık bozuklukları (RTA) RD12 / 0028/0005 ve RD16 / 0017/0007 ve Avrupa Birliği, FEDER fonlar "una manera de hacer Europa" ve PSI2014-51847-R.

Materials

Name Company Catalog Number Comments
MONPRE 2Z software CIBERTEC S.A., Spain N/A
Identical Plexiglas boxes with two equal sized compartments separated by a grey central area. CIBERTEC S.A., Spain N/A The compartments have different colored walls (black vs white) and distinct floor textures (fine grid in the black compartment and wide grid in the white one). All boxes are equipped with four infrared light beams in each compartment of the box and six in the central area which allow the recording of the position of the animal and its crossings from one compartment to the other.
Cocaine hydrochloride Laboratorios Alcaliber S.A., Madrid, Spain N/A
Animals: mice of the OF1 outbred strain Charles River, Barcelona Spain N/A Male mice who arrive to the laboratory on PND 42 and on PND 60 perform the CPP test. These animals are specially indicated for social defeat and aggression models.
Standard Diet- Teklad Global Diet 2014 Supplied by Harlan Laboratories Models, S. L. (Barcelona, Spain) 13 kcal % fat, 67 kcal % carbohydrates and 20% kcal protein; 2.9 kcal/g
High fat diet TD.06415 45 kcal % fat, 36 kcal % carbohydrates and 19% kcal protein; 4.6 kcal/g

DOWNLOAD MATERIALS LIST

References

  1. Bardo, M., Bevins, R. Conditioned place preference: what does it add to our preclinical understanding of drug reward? Psychopharmacology. 153, 31 (2000).
  2. Tzschentke, T. M. Review on CPP: Measuring reward with the conditioned place preference (CPP) paradigm: update of the last decade. Addiction biology. 12 (3-4), 227-462 (2007).
  3. Aguilar, M. A., Rodríguez-Arias, M., Miñarro, J. Neurobiological mechanisms of the reinstatement of drug-conditioned place preference. Brain research reviews. 59 (2), 253-277 (2009).
  4. García-Pardo, M. P., Roger-Sánchez, C., De la Rubia Ortí, J. E., Aguilar, M. A. Animal models of drug addiction. Adicciones. 12 (0), 823 (2017).
  5. Manzanedo, C., Aguilar, M. A., Rodrı́guez-Arias, M., Miñarro, J. Effects of dopamine antagonists with different receptor blockade profiles on morphine-induced place preference in male mice. Behavioural brain research. 121 (1), 189-197 (2001).
  6. Robbins, T. W. The acquisition of responding with conditioned reinforcement: effects of pipradrol, methylphenidate, d-amphetamine, and nomifensine. Psychopharmacology. 58 (1), 79-87 (1978).
  7. Montagud-Romero, S., Nuñez, C., Blanco-Gandia, M. C., Martínez-Laorden, E., Aguilar, M. A., Navarro-Zaragoza, J., et al. Repeated social defeat and the rewarding effects of cocaine in adult and adolescent mice: dopamine transcription factors, proBDNF signaling pathways, and the TrkB receptor in the mesolimbic system. Psychopharmacology. , (2017).
  8. Pavlov, I. P. Conditioned Reflexes. , Oxford University Press. Oxford. (1927).
  9. Yahyavi-Firouz-Abadi, N., See, R. E. Anti-relapse medications: preclinical models for drug addiction treatment. Pharmacology & therapeutics. 124 (2), 235-247 (2009).
  10. Epstein, D. H., Preston, K. L., Stewart, J., Shaham, Y. Toward a model of drug relapse: an assessment of the validity of the reinstatement procedure. Psychopharmacology. 189 (1), 1-16 (2006).
  11. Geyer, M. A., Markou, A. Animal models of psychiatric disorders. Psychopharmacology: the Fourth Generation of Progress. Bloom, F. E., Kupfer, D. J. , Raven. New York. 787-798 (1995).
  12. De Wit, H. Priming effects with drugs and other reinforcers. Experimental and Clinical Psychopharmacology. 4 (1), 5 (1996).
  13. Wang, B., Luo, F., Zhang, W. T., Han, J. S. Stress or drug priming induces reinstatement of extinguished conditioned place preference. Neuroreport. 11 (12), 2781-2784 (2000).
  14. Shalev, U., Erb, S., Shaham, Y. Role of CRF and other neuropeptides in stress-induced reinstatement of drug seeking. Brain research. 1314, 15-28 (2010).
  15. Bossert, J. M., Marchant, N. J., Calu, D. J., Shaham, Y. The reinstatement model of drug relapse: recent neurobiological findings, emerging research topics, and translational research. Psychopharmacology. 229 (3), 453 (2013).
  16. Weiss, F. Neurobiology of craving, conditioned reward and relapse. Current opinion in pharmacology. 5 (1), 9-19 (2005).
  17. Mueller, D., Stewart, J. Cocaine-induced conditioned place preference: reinstatement by priming injections of cocaine after extinction. Behavioural brain research. 115 (1), 39-47 (2000).
  18. Ribeiro Do Couto, B., Aguilar, M. A., Manzanedo, C., Rodriguez-Arias, M., Armario, A., Miñarro, J. Social stress is as effective as physical stress in reinstating morphine-induced place preference in mice. Psychopharmacology. 185 (4), 459-470 (2006).
  19. Titomanlio, F., Manzanedo, C., Rodríguez-Arias, M., Mattioli, L., Perfumi, M., Miñarro, J., Aguilar, M. A. Rhodiola rosea impairs acquisition and expression of conditioned place preference induced by cocaine. Evidence-Based Complementary and Alternative Medicine. , (2013).
  20. Shalev, U., Highfield, D., Yap, J., Shaham, Y. Stress and relapse to drug seeking in rats: studies on the generality of the effect. Psychopharmacology. 150 (3), 337-346 (2000).
  21. Lu, L., Ceng, X., Huang, M. Corticotropin-releasing factor receptor type 1 mediates stress-induced relapse to opiate dependence in rats. Neuroreport. 11 (11), 2373-2378 (2000).
  22. Ribeiro Do Couto, B., Aguilar, M. A., Manzanedo, C., Rodriguez-Arias, M., Miñarro, J. Reinstatement of morphine-induced conditioned place preference in mice by priming injections. Neural Plast. 10, 279-290 (2003).
  23. Do Couto, B. R., Aguilar, M. A., Rodriguez-Arias, M., Miñarro, J. Long-lasting rewarding effects of morphine induced by drug primings. Brain research. 1050 (1), 53-63 (2005).
  24. Maldonado, C., Rodriguez-Arias, M., Castillo, A., Aguilar, M. A., Miñarro, J. Gamma-hydroxybutyric acid affects the acquisition and reinstatement of cocaine-induced conditioned place preference in mice. Behav. Pharmacol. 17, 119-131 (2006).
  25. Maldonado, C., Rodriguez-Arias, M., Castillo, A., Aguilar, M. A., Miñarro, J. Effect of memantine and CNQX in the acquisition, expression and reinstatement of cocaine-induced conditioned place preference. Prog. Neuropsychopharmacol. Biol. Psychiatry. 31, 932-939 (2007).
  26. Cruz, F. C., Marin, M. T., Planeta, C. S. The reinstatement of amphetamine-induced place preference is long-lasting and related to decreased expression of AMPA receptors in the nucleus accumbens. Neuroscience. 151, 313-319 (2008).
  27. Li, S. M., Ren, Y. H., Zheng, J. W. Effect of 7-nitroindazole on drug-priming reinstatement of D-methamphetamine-induced conditioned place preference. Eur. J. Pharmacol. 443, 205-206 (2002).
  28. Font, L., Miquel, M., Aragon, C. M. Involvement of brain catalase activity in the acquisition of ethanol-induced conditioned place preference. Physiol. Behav. 93, 733-741 (2008).
  29. Roger-Sánchez, C., Aguilar, M. A., Rodríguez-Arias, M., Aragon, C. M., Miñarro, J. Age-and sex-related differences in the acquisition and reinstatement of ethanol CPP in mice. Neurotoxicology and teratology. 34 (1), 108-115 (2012).
  30. Daza-Losada, M., Do Couto, B. R., Manzanedo, C., Aguilar, M. A., Rodríguez-Arias, M., Miñarro, J. Rewarding effects and reinstatement of MDMA-induced CPP in adolescent mice. Neuropsychopharmacology. 32 (8), 1750-1759 (2007).
  31. Will, M. J., Watkins, L. R., Maier, S. F. Uncontrollable stress potentiates morphine's rewarding properties. Pharmacol. Biochem. Behav. 60, 655-664 (1998).
  32. Der-Avakian, A., Will, M. J., Bland, S. T., Deak, T., Nguyen, D. T., Schmid, M. J., Spencer, R. L., Watkins, L. R., Maier, S. F. Surgical and pharmacological suppression of glucocorticoids prevents the enhancement of morphine conditioned place preference by uncontrollable stress in rats. Psychopharmacology. 179, 409-417 (2005).
  33. Sinha, R. How does stress increase risk of drug abuse and relapse? Psychopharmacology. 158, 343-359 (2001).
  34. Lu, L., Shepard, J. D., Hall, F. S., Shaham, Y. Effect of environmental stressors on opiate and psychostimulant reinforcement, reinstatement and discrimination in rats: a review. Neurosci. Biobehav. Rev. 27, 457-491 (2003).
  35. Vidal-Infer, A., Arenas, M. C., Daza-Losada, M., Aguilar, M. A., Miñarro, J., Rodríguez-Arias, M. High novelty-seeking predicts greater sensitivity to the conditioned rewarding effects of cocaine. Pharmacol Biochem Behav. 102, 124-132 (2012).
  36. Reguilón, M. D., Montagud-Romero, S., Ferrer-Perez, C., Roger-Sánchez, C., Aguilar, M. A., Miñarro, J., Rodríguez-Arias, M. Dopamine D2 receptors mediate the increase in reinstatement of the conditioned rewarding effects of cocaine induced by acute social defeat. European Journal of Pharmacology. 799, 48-57 (2017).
  37. Ribeiro Do Couto, B., Aguilar, M. A., Lluch, J., Rodríguez-Arias, M., Miñarro, J. Social experiences affect reinstatement of cocaine-induced place preference in mice. Psychopharmacology. 207 (3), 485-498 (2009).
  38. Blanco-Gandía, M. C., Aracil-Fernández, A., Montagud-Romero, S., Aguilar, M. A., Manzanares, J., Miñarro, J., Rodríguez-Arias, M. Changes in gene expression and sensitivity of cocaine reward produced by a continuous fat diet. Psychopharmacology. 234 (15), 2337-2352 (2017).
  39. Tzschentke, T. M. Measuring reward with the conditioned place preference paradigm: a comprehensive review of drug effects, recent progress and new issues. Progress in neurobiology. 56 (6), 613-672 (1998).
  40. Blanco-Gandía, M. C., Ledesma, J. C., Aracil-Fernández, A., Navarrete, F., Montagud-Romero, S., Aguilar, M. A., Manzanares, J., Miñarro, J., Rodríguez-Arias, M. The rewarding effects of ethanol are modulated by binge eating of a high-fat diet during adolescence. Neuropharmacology. 121, 219-230 (2017).
  41. Itzhak, Y., Martin, J. L. Cocaine-induced conditioned place preference in mice: induction, extinction and reinstatement by related psychostimulants. Neuropsychopharmacology. 26 (1), 130-134 (2002).
  42. Kreibich, A. S., Blendy, J. A. cAMP response element-binding protein is required for stress but not cocaine-induced reinstatement. Journal of Neuroscience. 24 (30), 6686-6692 (2004).
  43. Zavala, A. R., Weber, S. M., Rice, H. J., Alleweireldt, A. T., Neisewander, J. L. Role of the prelimbic subregion of the medial prefrontal cortex in acquisition, extinction, and reinstatement of cocaine-conditioned place preference. Brain research. 990 (1), 157-164 (2003).
  44. Orsini, C., Bonito-Oliva, A., Conversi, D., Cabib, S. Genetic liability increases propensity to prime-induced reinstatement of conditioned place preference in mice exposed to low cocaine. Psychopharmacology. 198 (2), 287-296 (2008).
  45. Sun, Y., Pan, Z., Ma, Y. Increased entrances to side compartments indicate incubation of craving in morphine-induced rat and tree shrew CPP models. Pharmacology Biochemistry and Behavior. 159, 62-68 (2017).

Tags

Tercih kokain iade stres fareler ilaç-arama davranışı sayı: 136 klimalı yer
Uyuşturucu arayan farelerde şartına yer tercih paradigması kullanarak iade
Play Video
PDF DOI DOWNLOAD MATERIALS LIST

Cite this Article

Blanco-Gandía, M. C., Aguilar,… More

Blanco-Gandía, M. C., Aguilar, M. A., Miñarro, J., Rodríguez-Arias, M. Reinstatement of Drug-seeking in Mice Using the Conditioned Place Preference Paradigm. J. Vis. Exp. (136), e56983, doi:10.3791/56983 (2018).

Less
Copy Citation Download Citation Reprints and Permissions
View Video

Get cutting-edge science videos from JoVE sent straight to your inbox every month.

Waiting X
Simple Hit Counter