Summary
여기, 선물이 수혈 또는 쥐 inotropic 에이전트 없이 단순 복구 심폐 바이패스 모델을 설명 하는 프로토콜. 이 모델의 장기 연구 심폐 바이패스의 여러 기관 sequelae 수 있습니다.
Abstract
심장과 폐 우회 (CPB) 심장 혈관 수술에 필수 되지 않습니다. CPB 기술 및 장치, 다중 장기 합병증의 극적인 세련미에도 불구 하 고 장기간에 관련된 형사 요 아직도 심장 혈관 수술의 결과 손상 하 고 수술 후 사망률 및 사망을 악화 시킬 수 있습니다. CPB의 임상 사용 업과 동물 모델 CPB, 하는 동안 발생 하는 병 태 생리 프로세스의 설명을 사용 하 고 이러한 합병증을 방지 하는 전략을 개발 하기 위해 전 임상 연구를 촉진. 쥐 CPB 모델은 유리한 그들의 더 큰 비용 절감 효과, 편리한 실험 과정, 풍부한 테스트 방법에서 유전자 또는 단백질 수준, 및 유전 일관성. 그들은 면역 체계 활성화 및 proinflammatory cytokines, 칭찬 활성화 및 산소 자유 래 디 칼의 생산의 종합 조사를 위해 사용할 수 있습니다. 쥐 모델 정제 그리고 점차적으로 큰 동물 모델의 자리를 차지 하는 있다. 여기, 우리는 수혈 또는 쥐 inotropic 에이전트 없이 간단한 CPB 모델을 설명합니다. 이 복구 모델의 장기 연구 CPB의 여러 기관 sequelae 수 있습니다.
Introduction
1953, CPB1을 사용 하 여 첫 번째 심장 수술 박사 존 H. 긴팔원숭이 주니어에 성공적으로 수행 하 고 이후에 심장 혈관 수술에 필수적인 적임 되었다. 동안 기술 및 장치 극적으로 세련 된, CPB에 관련 된 다중 장기 합병증 여전히 손상, 심장 혈관 수술의 결과 그리고 수술 후 병 적 상태와 사망률2에 영향을 미칠 수 있습니다. CPB 관련 장기 손상 면역 체계 활성화 및 proinflammatory cytokines, 칭찬 활성화 및 산소 자유 래 디 칼2의 생산의 합성에 의해 발생 합니다. 그러나 그 이상,, 하지 되었습니다 완전히 해명 했습니다.
CPB의 임상 사용 업과 동물 모델 및 그 이후 CPB; pathophysiological 프로세스의 명확한 활성화 이 이러한 합병증을 피하기 위해 전략 개발에 전 임상 연구를 용이 하 게 수 있습니다. 이후 Popovic 외. 처음 보고 쥐 CPB 모델 19673, CPB 쥐 모델 세련 된, 그리고 점차적으로 더 큰 비용 절감 효과, 편리한 실험 과정 및 실험 방법에의 한 과다 큰 동물 모델의 장소를 유전 찍은 것과 단백질 수준입니다. 또한, 타고 난된 쥐 유전으로 동일한, 가능한 생물 학적 편견을 줄일 수 있습니다.
파브르 외. 처음 형사 요4의 여러 기관 sequelae 장기의 연구를 허용 하는 복구 모델 설립. 이 간단한 생존 모델의 장점은 유연성 (CPB 흐름 및 기간), 안정 된 중요 한 상태 및 재현성 조직의 염증입니다. 쥐 CPB 모델 CPB5, 동안 다중 장기 부상을 방지 하기 위해 목표로 치료 전략의 조사에 대 한 중요 한 되고있다 그리고 CPB 동안 임상 상황을 시뮬레이션을 위한 다양 한 모델이 최근에 개발 되었습니다. 드 랭 외. 심근 상해7에 관련 된 효소, 유전자, 그리고 조직학 응답 하 사용 될 수 있는 심장 마비 모델 개발. 피터 외 알. 심근 경색과 심장 disfunction 초점 국 소 빈 혈과 reperfusion 상해8통해 분석 하는 소형된 CPB 모델을 사용 하 여 제어 reperfusion 배열. Jungwirth 외. 먼저 깊은 저체온증이 순환 체포 (DHCA) 모델, DHCA 및 잠재적인 신경 전략6글로벌 국 소 빈 혈과 reperfusion 상해 명료 수 있는 설립. DHCA를 사용 하 여 연구 조사 저체온증, reperfusion, 혈-트리거 신호 이벤트9의 영향. 깊은 저체온증 활성화와 다양 한 효소의 비활성화에 영향을 미칠 수 있습니다 하 고 통로 기계 장치 알 수 없는10유지. 다른 한편으로, 심장 마비 모델 또는 심장 허 혈 모델 국 소 빈 혈과 reperfusion 심장 상해를 조사 하기 위해 사용 되어야 한다. 이러한 다양 한 쥐 CPB 모델을 매우 인간의 CPB 정리 CPB에 관련 된 병 적인 과정을 공개 하 고 CPB 관련 합병증을 줄일 수 있습니다.
이 프로토콜에서는 수혈 또는 쥐 inotropic 에이전트 없이 간단한 CPB 모델을 보여 줍니다. 이 모델은 장기간의 연구에 대 한 여러 기관 sequelae를 CPB의 수 있습니다.
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Protocol
실험 전에 모든 쥐 주어져야 한다 1 주일 적응. 동물에 모든 외 과적 치료 및 실험 동물 사용 (www.nap.edu/catalog/5140.html) 또는 다른 적절 한 윤리 지침에 대 한 가이드에 따라 밖으로 실행 한다. 프로토콜 진행 하기 전에 해당 교육 기관에서 동물 복지 위원회에 의해 승인을 받아야 한다. 모든 후속 절차는 무 균 조건 하에서 수행 되어야 합니다.
1. CPB 회로 준비
참고: 장갑, 안경, 그리고 깨끗 한 코트 또는 일회용 가운 등 개인 보호 장비를 착용 하십시오.
- CPB 회로의 설정
- CPB 회로를 그림 1에 표시 된 대로 수정된 신생아 막 oxygenator 미리 정 저수지와 폴 리 염화 비닐 튜브를 연결 합니다. 모든 연결 꽉 물 누설 하지 않습니다 확인 합니다.
- CPB 회로 제조 업체의 프로토콜에 따라 롤러 펌프 장치에 설정 합니다.
- 높이 조절 테이블에 롤러 펌프를 유지 하 고 실험 책상 아래 10 cm 테이블의 높이 조정 합니다.
- CPB 회로의 못쓰게
- 헤 파 린 그리고 CPB 회로 못쓰게 위한 7% 나트륨 중 탄산염 해결책의 0.5 mL 0.1 mL와 hydroxyethyl 전 분 용액의 혼합 12 mL
- 부드럽게 회전 하는 펌프 롤러 못쓰게 솔루션의 11 mL와 회로 프라임. 공기를 배기에 대 한 저수지로 18-게이지 배기 바늘을 넣어.
- 기울이기는 oxygenator와 deair를 막 oxygenator를 여러 번을 누르십시오. 공기 공기 색 전 증 및 부족 한 산소를 완전히 왜곡 해야 합니다. 회로 못쓰게 동안 저수지에 설정 하는 전기 열 램프에 의해 회로 열.
2입니다. CPB의 앞에 절차
참고: 외과 분야와 장치는 70% 알콜 또는 사용 하기 전에 비밀이 암모늄 화합물에 의해 소독 되어야 한다.
- 마 취 및 동물 설정
- 3.0 %isoflurane 혼합 공기 흡입은 기화 기에서와 쥐를 anesthetize 작업 대에 쥐를 설정 하 고 기도로 16 게이지 정을 넣어야. (예: 진통 노출량 및 주파수에 관한 당신의 현지 동물 보호 지침에 따라
buprenorphine 0.005 mg/kg 사우스 캐롤라이나)
참고: 쥐 깊은 마 취에 하 고 반사를 잃게 해야 합니다. 호흡 리듬 되어야 하지만, 체포 되지. - 전기 열 패드와 장비 운영 테이블에 쥐를 전송 합니다. 해 양의 8 mL/kg, 70 사이클/분, 호흡 비율과 산소 센서에 의해 모니터링 영감된 산소 분수의 30%와 기계 환기를 시작 합니다.
- 1.5-2.0% isoflurane CPB 개시에서 케 타 민/xylazine의 추가 관리와 마 취를 유지 합니다.
- 직장 프로브를 사용 하 여 직장 온도 모니터링 합니다. 열 패드의 온도 조정 하 고 열 램프 회로 배치 여 normothermic 37 ° C의 온도 유지 합니다.
- 부정사 위치에 쥐를 설정 하 고 바늘을 고정 하 여 4 개의 팔 다리를 스트레칭. 양측 어깨와 왼쪽된 복 부를 ECG 전극 바늘을 설정 하 여 심장 박동을 모니터링 합니다. 촉촉한 거 즈를 배치 하거나 건조를 방지 하기 위해 눈에 안과 연 고를 적용 합니다.
- 3.0 %isoflurane 혼합 공기 흡입은 기화 기에서와 쥐를 anesthetize 작업 대에 쥐를 설정 하 고 기도로 16 게이지 정을 넣어야. (예: 진통 노출량 및 주파수에 관한 당신의 현지 동물 보호 지침에 따라
- Cannulation
- Sprayingby 70% 에탄올 또는 다른 살 균 솔루션을 살포에 의해 전신의 표면 소독 후 양측 사 타 구니 지역에 바로 자 궁 경부 지역 면도칼으로 머리를 면도. (Lidocaine) 등 현지 마 취약 피부 절 개를 하기 전에 사용 해야 합니다. 참고: 대안, 절 개 사이트의 수술 스크럽 대신 몸 전체 사용할 수 있는 온도 있는 하락을 피하기 위해 70% 에탄올 스프레이.
- 가 위 여 양자 사 타 구니 지역과 바로 자 궁 경부 지역에 피부 (약 5 m m)를 incise 하 고 퉁 명 스럽게 노출 바로 주요 대 퇴 동맥을 조직 해 부. 정 맥과 신경 근처에서 동맥을 신중 하 게 구분 합니다. 4-0 실크 및 노출에 의해 긴장으로 일반적인 대 퇴 동맥의 끝에 선.
- 마이크로 위 동맥, 수직 방향에 의해 바로 일반적인 대 퇴 동맥의 동맥 벽 (약 1 m m) 고 신중 하 게 cannulate 24 게이지 정 맥 카 테 터 절 개에서 조직의 동맥을 모니터링 하기 위한 1 cm의 깊이에 압력과 가스 부분 압력 동맥 혈액에서을 분석.
- 카 테 터에서 헤 파 린 나트륨 (500 IU/kg)을 관리 하 고
- 2.2.2, 2.2.3 CPB 회로 동맥 주입 라인으로 일반적인 왼쪽된 대 퇴 동맥으로 24 게이지 정 맥 카 테 터를 cannulate를 단계를 따릅니다.
- 17-게이지 멀티 오리 피스 angiocatheter 바로 내부 경 정 맥으로 삽입 하 고 오른쪽 아 트리 움 및 열 등 한 베 나 정 맥 (IVC)으로 사전. 카 테 터를 밀어 하지 않습니다 약 그릇을 쉽게 끊을 수 있다. 정 맥 배수 장치를 위한 CPB 회로에 카 테 터를 연결 합니다.
- 오염을 방지 하는 촉촉한 거 즈와 cannulated 각 영역을 커버.
3입니다. CPB 중 절차
- CPB 동안 0.8 L/분 oxygenator를 100% 산소 가스를 전달 하 고 30 사이클/분 호흡 속도 감소. 동맥 산소 부분 압력은 200에서 400 mmHg에 필요 합니다.
- CPB의 처음부터, CPB 개시 후는 체온의 즉각적인 드롭 완화 최대 42 ° C에 열 패드의 온도 설정을 늘립니다. 신체 온도 36 ° c.에 반환 될 때 설정 온도 37 ° C를 조정
- 조심 스럽게 CPB 흐름을 시작 하 고 저수지에서 혈액의 볼륨에 대 한 감시. 빈 저수지는 공기 색 전 증을 일으킬 수 있습니다. 저수지에서 혈액의 볼륨 감소, 테이블 높이 조정 하거나 배수 카 테 터의 위치를 변경 하 여 펌프 흐름을 낮은. 다시 쉽게 오른쪽 아 트리 움 및 부정맥의 천공을 발생할 수 있습니다 정 맥 배수 테를 배치 하지 마십시오.
- 증가 하 고 100 mL/kg에서 펌프 흐름을 유지/분, 평균 혈압은 70 mmHg에서 유지 하는 동안. 적절 한 혈압을 유지 하 고, 저수지에서 적어도 1 mL의 작은 볼륨 허용 됩니다. 저수지에서 혈액 1 mL 미만 있는 경우에, 그것은 장기에 공기 색 전 증을 발생할 수 있습니다.
- 혈압 안정 하지 않으면 (는 CPB 후 빈 혈 발생할 수 있습니다) 회로를 못쓰게 솔루션의 2-3 mL를 추가 합니다.
4입니다. CPB 후 절차
- 정 맥 배수 튜브 클램프 고 회로에서 그것을 제거 합니다. 점차적으로 혈압을 유지 하기 위해 동맥 회로에서 나머지 혈액 달 이다.
- 70 사이클/분 호흡 속도 증가.
- 배수 정 맥 카 테 터와 왼쪽된 동맥 카 테 터 제거 후 원심 인접 사이트에 있는 배를 선.
- CPB의 끝 후에 60 분 오른쪽 대 퇴 동맥에서 동맥 선을 제거 합니다.
- 식 염 수와 각 상처를 청소 하 고 봉합 상처를 닫습니다.
- 동물의 자연 스러운 호흡을 확인 한 후 마 취와 extubate intratracheal 튜브를 끝.
- 따뜻하게 살 균 isotonic 체액을 관리 하 고 열 매트와 전기 열 램프를 사용 하 여 동물을 따뜻하게. 마 취에서 회복까지 자주 동물의 상태를 확인 합니다. 필요한 경우 호흡기 지원을 제공 합니다. 참고: 동물 시작 되 면 주위를 움직이고, 열원 수 있도록 따뜻한 또는 차가운 쪽을 선택 하는 동물 감 금 소의 부분에서 제거 한다.
- 호흡이 완전히 회복 될 때까지 다른 동물의 회사를 제외 하 고 동물을 유지. 전체 복구까지 회사에 동물을 반환 하지 않습니다.
- 마 취에서 회복 후에 음식 및 물 섭취 량을 확인 하 고 적절 한 영양 지원을 제공. 진통제를 관리 하 고 불편 이나 통증의 흔적을 확인.
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Representative Results
그림 1 에서는 전체 CPB 회로. 이 모델에서 생리 적 변수 그림 2에 표시 됩니다 그리고 직장 온도 포함, 동맥 혈압, 심장 박동을 의미. 그림 3 CPB, 동맥 산소의 부분 압력, 동맥 이산화탄소가, 기본 초과, 혈 청 칼륨, 표현 및 수소의 잠재력의 부분 압력을 포함 하 여 동안 동맥 혈 가스 분석을 보여준다. 절차를 통해 심장 박동 및 평균 동맥 압력 안정 했다. 직장 온도가 못쓰게 볼륨에 의해 발생 하는 hemodilution 때문에 CPB의 시작 부분에서 감소. 동맥 산소의 부분 압력은 크게 막 산소 때문 CPB 동안 증가. 대표 되며 및 폐의 이미지를 얼룩 오신 그림 4, CPB 그룹 (그림 4B, D)와 (그림 4A, C), 가짜 가동 그룹의 이미지와 파 오2 의 비율을 포함에 나와 있습니다. / CPB 후 FiO2 (그림 4E) 기준선과 비교합니다. 간 질 성 부 종, 염증 성 세포 침투, 및 출혈, 상당한 차이가 CPB 그룹에서 관찰 되었다. 그림 5 CPB 후 종양 괴 사 인자-α (TNF-α), 인터 루 킨-6 (일리노이-6), 그리고 높은 이동성의 혈 청 농도 그룹 상자 1 (HMGB1) 수준을 보여 줍니다.
그림 1 : The CPB 회로. 저수지 (8 mL), 3.3 mL, 그리고 롤러 펌프의 못쓰게 볼륨 막 oxygenator 전체 CPB 회로 의하여 이루어져 있다. 폴 리 염화 비닐 관, 정 맥 배수 라인 등을 통해 연결 되는 모든 부품 (외경 (OD), 3.3 m m, 내경 (ID), 2 mm, 약 1.4 mL), 간선 (OD, 2 mm; ID, 1.2 m m; 약 1.2 mL)와 튜브 연결 펌프 롤러 (OD, 6.6 m m; ID, 4.5 m m; 약 2.8 mL). 총 못쓰게 볼륨 저수지에서 약 3 mL를 포함 하 여 11 mL 이다. 이 그림의 더 큰 버전을 보려면 여기를 클릭 하십시오.
그림 2 : 생리 적 변수. 및 그 이후 CPB, (A) 직장 온도, (B) 평균 동맥 혈압, 및 (C) 심장 박동을 포함 하 여 생리 적 변수 (n = 6). 점과 오차 막대 평균 및 표준 편차로 표시 됩니다. CPB, 심폐 우회; CPB; 전에 예약 CPB X, CPB;의 개시 후 분 X CPB의 끝 후에 분 X X, 게시. 이 그림의 더 큰 버전을 보려면 여기를 클릭 하십시오.
그림 3 : 동맥 혈 가스 분석. 동맥 혈 가스 분석 및 그 이후 CPB입니다. (A) 부분 압력 동맥 산소, (B) 부분 압력 동맥 이산화탄소, (C)가, (D) 기본 초과, (E) 혈 청 칼륨의 표현과 수소의 (F) 잠재력의의 (n = 6). 점과 오차 막대 평균 및 표준 편차로 표시 됩니다. CPB, 심폐 우회; CPB; 전에 예약 CPB X, CPB;의 개시 후 분 X CPB의 끝 후에 분 X X, 게시. 이 그림의 더 큰 버전을 보려면 여기를 클릭 하십시오.
그림 4 : 폐 조직학 분석. 대표 되며 고 오신 얼룩 가짜 작업 그룹에 대 한 이미지 (A, C) 와 심폐 바이패스 수행 그룹 (B, D). CPB 후 4 h입니다. 호흡 곤란의 심각도 부 종 및 출혈 병 적인 결과의 범위에 상관 했다. 스케일 바; 50 µ m (A, B), 1 m m (C, D). (E) 파 오2/FiO2 CPB 가짜 그룹과 통제 그룹에 기준선과 비교 후의 비율 (n = 6 각 그룹에서). 점과 오차 막대 평균 및 표준 편차로 표시 됩니다. p < 0.01 가짜 그룹 대. CPB, 심폐 우회; 파 오2, 동맥 산소의 부분 압력 FiO2, 분수의 영감된 산소; CPB의 끝 후에 분 X X, 게시. 이 그림의 더 큰 버전을 보려면 여기를 클릭 하십시오.
그림 5 : 혈 청에 선 동적인 응답의 평가. CPB 후 (A) 종양 괴 사 인자-α (TNF-α), (B) 인터 루 킨-6 (일리노이-6), 그리고 (C) 높은 기동성 그룹 상자 1 (HMGB1) 레벨의 혈 청 농도. n = 각 그룹에 대 한 5: 사기 그룹 및 CPB 그룹, CPB 겪고 쥐. 점과 오차 막대 평균 및 표준 편차로 표시 됩니다. p < 0.05, †p < 0.001 가짜 그룹 대. CPB, 심폐 우회; CPB의 끝 후에 분 X X, 게시. 이 그림의 더 큰 버전을 보려면 여기를 클릭 하십시오.
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Discussion
이 쥐 CPB 모델 HMGB-1, 선 동적인 응답 조절 핵심 전사 인자와 염증 성 cytokines의 혈 청 및 폐 식 수준 CPB 후 극적으로 증가 했다. 이전 임상 연구 보여주었다 HMGB-1 레벨의 혈 청 분 비 환자 심혈 관 수술11에 상승 그리고 CPB 동안 피크 혈 청 HMGB-1 레벨은 더 심각한 조직의 염증 반응 증후군과 연관 그리고 CPB12후 폐 산소 장애. 또한, 혈 청 HMGB-1 레벨은 심한 폐 렴과 급성 호흡 곤란 증후군 (아즈)13를 가진 환자에서 환자 실 사망률을 예측 하는 독립적인 바이오 마커. HMGB-1 활성화는 성공적으로이 쥐 CPB 모델에서 시뮬레이션 및 심각한 형사 요 관련 아즈 염증 성 cytokines와 관련.
CPB 관련 조직의 염증에 대 한 수많은 연구 조사 proinflammatory cytokine 식14, 핵 카파 B 포함 하 여 조직 선 동적인 응답에 대 한 그들의 유용성 때문에 쥐 모델에서 실시 되었습니다. 활성화15, 접착 분자16, 및 매트릭스 metalloproteinase-9 활동17호 중구 활성화. CPB 중 호-1 단백질의 활성화와 같은 산화 스트레스 또한 쥐 CPB 모델18를 사용 하 여 조사 했다.
최근 쥐 CPB 모델 CPB에서 합병증의 임상 상황을 시뮬레이션 하는 다양 한 절차에서 개발 되었습니다. 심근에 대 한 효소, 유전자, 및 더 효과 심장 마비 모델7조사 될 수 있다. 또한, DHCA 모델은 흉부 대동맥 수술 후 불리 한 대뇌 결과와 관련 된 메커니즘을 공개 하 고 조사 잠재적인 신경 전략6을 보고 하 고 있다. 전통적인 쥐 CPB 모델에 따라 이러한 모델은 밀접 하 게 심장 혈관 수술에 있는 임상 상황을 흉내 낸 CPB의 다양 한 효과 평가 하기 귀중 한.
이 모델의 생존 율은 탐정의 기술 향상에 따라 달라 집니다. 병 적 상태와 관련 된 가장 중요 한 요소는 혈관, 심장 파열, 그리고 retroperitoneum 혈 종, 일반적으로 기술적인 오류 발생의 분리 하는 동안 출혈이 있습니다. 좋은 노출, 적절 한 장력을 선박, 그리고 부드러운 cannulation 성공 위한 수술 요구 있습니다. 예약 된 혈액과 추가 솔루션을 제어 하 여 적어도 60 mmHg의 평균 혈압을 유지 하는 것은 극단적인 빈 혈 및 더 낮은 사지 결핍을 피하는 것이 중요. 소장 또는 다른 복 부 장기에 공기 색 전 증은 또한 중요 피하기 위해; 일단이 절차를 완료할 수 없습니다.
이러한 절차의 이른 연습, CPB의 완료 cannulation, 어려움 때문에 약 20%는 최대 10% 생존 4 h CPB 후. 20 모델 경험, 후 생존 율 극적으로 개선 거의 80%로 안정적인 hemodynamics 때문에 모델 준비 중.
이 모델 수립의 처음부터, CPB 회로의 총 볼륨 3 mL는 현재 하나의 보다 높은 했다. 따라서, 과도 한 콜 로이드 볼륨 CPB 동안 중요 한 빈 혈 유발 (보통 의미: 14.7%)19. CPB 회로 볼륨 및 수술 출혈 감소, CPB 동안가 극적으로 안정적인 hemodynamics 유지 허용 21.3%에 증가.
17 게이지 멀티 오리 피스 그것의 적당 한 길이 부드러움, 정 맥 벽에 밖으로 착용 하는 것을 방지 하기 때문에 오른쪽 아 트리 움, 통해 IVC에서 내부 경 정 맥 cannulation에 매우 적합 하다. 또한, 멀티 오리 피스와 충분 한 내부 직경은 충분 한 정 맥 반환 및 높은 성공률을 수 있습니다. IVC로 테를 소개 기술적으로 어려운 그것의 장 님 방식으로 인해 이며 정 맥 또는 심 방 벽을 꿰뚫기 쉽게 것 이다.
쥐의 대 퇴 동맥에 동맥 cannulation 꼬리 동맥 이나 경 동맥20에 비해 사지 허 혈 발생 해 경향이 있다. 우리의 경험에서 hemodynamics (평균 혈압 보다 60 mmHg)의 불안정, 깊은 대 퇴 동맥, 및 중요 한 빈 혈의 결 찰 심한 다리 손상을 발생할 수 있습니다. 혈압 유지, 일반적인 대 퇴 동맥의 더 높은 지역 cannulating 및 더 높은 유지은 쥐의 타고 난 부자 부수적인 관류로 인 한 사지 허 혈을 방지 하기 위해 모든 솔루션입니다.
카 테 콜 아민 및 수혈의 정확 하 게 테스트 자료 및 개입의 hemodynamic, 생 화 확 및 생리 적인 응답을 조사할 필요가 있다. Vasopressor 및 우리의 모델에 절차 동안에 수혈에 대 한 필요가 있다. 깊은 마 취 염증 성 크린 시 토 킨의 릴리스를 보완 하 고 이후에 장기 기능21일이 요. 적절 한 마 취 깊이, 삽 관 법, 대 동물 기관지의 원활 하 고 부드러운 cannulation 및 출혈 없이 혈압 모니터링을 위한 대 퇴 동맥 cannulation CPB의 개시 전에 중요 하다. CPB의 개시 전에 hemodynamic 불안정성이 있는 경우에, 성공률 현저 하 게 감소 될 것 이다. CPB, 동안 형사 요의 흐름 속도 저수지에서 볼륨을 조정 하 여 유지 되어야 합니다. CPB의 개시 후 60 분 볼륨 (1-3 mL 염 분)의 주의 추가 필요 hemodynamic 불안정성 때문에 염증 과정에 의해 합니다. 그러나, 과도 한 콜 로이드 볼륨의 추가 불안정 한 조건으로 이어질 수 있는 빈 혈을 발생 합니다. CPB 사지 또는 소장 허 혈 등 잠재적인 사망률은 의미 후 CPB, 후 CPB 회로에 피 30 분 불안정에 부드럽게 쥐를 반환 합니다.
적당 한 마 취 깊이 사망률과 질병 률 감소를이 모델에서 팁 중 하나입니다. 흡입 마 취약 깊이의 적절 한 제어 및 마 취의 기간을 제공합니다. 우리는 기도에 정을 넣어야 때 쥐 해야 합니다 깊은 마 취에 반사를 잃을 정도로. 호흡 리듬 되어야 하지만, 체포 되지. 호흡기 체포는 매우 깊은 마 취, 저 혈압, 및/또는 조직의 염증을 일으키는 임박한 죽음을 나타냅니다. 반대로, 부족 한 마 취는 동물에 더 많은 스트레스를 발생합니다. CPB, 동안 동물의 몸 움직임은 뉼의 가능한 실수로 제거 때문에 줄이기 위해 중요 하다. 심장 박동, 동맥 압력, 그리고 가슴 벽 움직임을 모니터링 하 여 isoflurane 기화 기를 제어 하는 것은 절차 동안 필요 합니다. CPB의 개시에서 isoflurane에의 혈액 농도 끝났다 볼륨에 의해 팽창에서 줄일 수 있습니다. 추가 복 pentobarbital 마 취의 안정적인 깊이 허용할 수 있습니다.
수술 후 감염 쥐에 생리 적인 매개 변수22에 수많은 변화를 발생 합니다. 긴 생존 모델 절차 동안 살 균 조건의 엄격한 유지 보수를 필요합니다. 별도 룸과 깨끗 한 무 균 절차는 바람직한 지역 작업. 외과 분야와 장치 70% 알코올 또는 사용 하기 전에 비밀이 암모늄 화합물으로 소독 되어야 한다. 아마 뉼, 솔루션, 봉합 재료 등 오염에 영향을 미치는 모든 자료는 멸 균 팩에 있어야 합니다. CPB, 동안 수술 필드 촉촉한 작은 거 즈를 덮고 오염의 잠재적인 출처에서 사이트를 방지할 수 있습니다. 상처를 닫기 전에 상처에서 혈액을 제거 하 고 살 균 물으로 rinsing 상처 감염을 피하기 위해 필요 하다. 우리의 경험에서는, 아무 상처 감염 작업 후 24 h를 발생 했습니다.
즉에이 형사 요 모델의 한계는 완전히 임상 상황을 모방 수 없습니다. 첫째, 모델 박동이 심장 체포 마음으로 임상 심장 수술에서 다른 타악기 흐름을 전시 한다. 둘째,이 모델 thoracotomy, 없이 지휘 될 수 있다 그리고이 완벽 하 게 수술 중 출혈에 이르게 중간 thoracotomy와 임상 CPB를 재현 하지 것 이다.
결론적으로,이 복구 CPB 모델 연구를의 초기-장기 CPB와 연관 된 여러 장기 손상 수 있습니다. 이 모델의 주요 장점은 수혈, vasopressors, 또는 inotropic 에이전트에 의해 가능한 편견의 감소를 포함합니다. 이 모델은 CPB 동안 다중 장기 부상을 방지 하기 위한 치료 전략 조사에 적합 합니다.
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Disclosures
모든 저자를 사용 없다 상업 지원에 관한 공개 수 있습니다.
Acknowledgments
감사는 그들의 기술 지원에 대 한 박사 토니 폭포와 박사 M. Funamoto에 확장 됩니다.
Materials
| Name | Company | Catalog Number | Comments |
| Rodent Ventilator 7025 | Ugo Basile | 7025 | Ventilator |
| OxiQuant B | ENVITEC | 46-00-0023 | Oxygen Sensor |
| CMA 450 Temperature Controller | CMA | 8003759 | Temperature Controller |
| CMA 450 Heating Pad | CMA | 8003763 | |
| CMA 450 Rectal Probe | CMA | 8003761 | |
| DIN(8) to Disposable BP Transducer | ADInstruments | MLAC06 | |
| Disposable BP Transducer | ADInstruments | MLT0670 | |
| IX-214 Data Recorder | iWorx Systems | IWX-214 | amplifier |
| LabScribe software | iWorx Systems | software | |
| Roller pump | Furue Science | Model RP-VT | pump |
| Happy Cath | Medikit | EB 19G 4HCLs PP | 17-gauge multiorifice angiocatheter |
| SURFLO ETFE I.V. Catheter | Terumo | SR-OX2419CA | 24-gauge angiocatheter |
| Oxygenator | Mera | HPO-002 | |
| CPB circuit | Mera | custom-made | |
| Hespander fluid solution | Fresenius Kabi | 3319547A4035 | Hydroxyethyl starch |
References
- Gibbon, J. H. Application of a mechanical heart and lung apparatus to cardiac surgery. Minn Med. 37 (3), 171-185 (1954).
- Apostolakis, E., Filos, K. S., Koletsis, E., Dougenis, D. Lung dysfunction following cardiopulmonary bypass. J Cardiac Surg. 25 (1), 47-55 (2010).
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