Summary
وهنا، يقدم بروتوكول موحد لقياس فرق الجهد الآنف (NPD). التليف الكيسي transmembrane الموصلية منظم (CFTR) والصوديوم الظهارية قناة (ايناك) الدالة يتم تقييمها بواسطة التغير في الجهد عبر ظهارة الآنف بعد سوبيرفوسيون للحلول التي تعدل أيون قناة النشاط، تقدم قياس النتيجة.
Abstract
يصف لنا مقياس موحد للأنف الفرق المحتملة (NPD). في هذا الأسلوب، التليف الكيسي transmembrane الموصلية منظم (CFTR) ووظيفة قناة (ايناك) الصوديوم الظهارية تخضع للتغير في الجهد عبر ظهارة الآنف بعد سوبيرفوسيون للحلول التي تعدل قناة أيون النشاط. يتم تمكين هذا بقياس الفرق المحتمل بين حجرة تحت الجلد وظهاره مجرى الهواء في الآنف، استخدام قسطرة على اتصال الآنف السفلي توربيناتي.
الاختبار يسمح بقياس الجهد الأساس مستقرة والتغيرات المتعاقبة الجهد الصافي بعد نضح من 100 ميكرومتر amiloride، مثبط لإعادة استيعاب نا+ في الحل للمسابقة؛ حل خالية من كلوريد المحتوية على amiloride لإفراز الكلوريد محرك الأقراص و 10 ميكرون إيسوبروتيرينول في حل خالية من كلوريد مع amiloride لحفز الأدينوزين الادينوسين دوري (مخيم)-كلوريد تعتمد الموصلية تتصل CFTR.
ويمتاز هذا الأسلوب مما يدل على الخصائص الكهربية لاثنين من المكونات الرئيسية إنشاء ترطيب مجرى الهواء السائل السطحية ظهارة تنفسية وايناك CFTR. ولذلك، هو أداة مفيدة لبحث للمرحلة 2 وإثبات للمحاكمات مفهوم العوامل التي تستهدف النشاط CFTR وايناك لعلاج أمراض الرئة التليف الكيسي (CF). وأيضا إجراء متابعة رئيسية لخلل CFTR عندما الاختبارات الجينية، واختبار العرق ملتبسة. وخلافا لكلوريد العرق، الاختبار أكثر استهلاكاً للوقت ومكلفة نسبيا. كما أنه يتطلب عامل التدريب والخبرة لإجراء اختبار نحو فعال. تقلب في جملة subject وداخلها أبلغ في هذا الأسلوب لا سيما في مواضيع الشباب أو غير المتعاونة. مساعدة مع هذا القلق، تم تحسين التفسير من خلال خوارزمية المصادق عليه مؤخرا.
Introduction
والهدف العام لهذا الأسلوب هو قياس الفرق المحتملة الآنف (الحزب الوطني الديمقراطي) الذي يهدف إلى التحقيق في نقل أيون عبر الظهارية في فيفو1. يسمح هذا الأسلوب لقياس الصوديوم (Na+) والنقل الكلوريد (Cl–). الحزب الوطني الديمقراطي قد استخدمت كأداة لبحث منذ أواخر الثمانينات، وقبلت في عام 1998 كإجراء تشخيص ب بيان توافق مؤسسة التليف الكيسي (مرفق التمويل التعويضي)2 وفي عام 2017 في المبادئ "التوجيهية التشخيص توافق مؤسسة التليف الكيسي" (مرفق التمويل التعويضي) 3-وفي الواقع، يتجلى خلل CFTR البيولوجي، الذي هو السبب لقوات التحالف، زيادة امتصاص Na+ في غشاء قمي وخلل في إفراز Cl– . ويوفر هذا الاختبار الوظيفي الاستفادة من أداة التشخيص إضافية عندما علم الوراثة غير قاطعة في المرضى الذين يعانون من عرق الوسيطة غير معرفة نتائج اختبار3. على الرغم من أن هذه المعلومات أيضا الحصول على خزعات القياس الحالي المعوية (ICM)، ICM هو، مع ذلك، فقط متوفرة في بعض المراكز على الصعيد العالمي وتحتاج مزيد من التوحيد. الحزب الوطني الديمقراطي تتوفر أكثر في حوالي 60 من المراكز العالمية، وعلاوة على ذلك، تستهدف الظهارة التنفسية التي هي المكان الرئيسي للمرض.
نظراً للمعلومات التي يقدمها حول نشاط CFTR، كما أنها تستخدم في إثبات مفهوم دراسات تهدف إلى تقييم استعادة الوظيفية للبروتين CFTR المغير العلاجات4،5،،من67، 8. في الواقع، بيانات من دراسات مع التحرير مرناً/جين CFTR، بوتينتياتور CFTR، والعلاجات مصحح، وتسليط الضوء على التغييرات الهامة في Cl– ونا+ النقل مع العلاج6،9 ويؤكد أن الحزب الوطني الديمقراطي يمكن نقطة النهاية تستجيب في التجارب السريرية. كما أننا نفتقر إلى النهاية السريرية حساسة قادرة على الكشف عن تغيير دقيق في الحالة السريرية للمريض على المدى القصير، قد تكون هذه العلامات البيولوجية الإكلينيكية الزاخر. ويوسع مجال العلاجات المغير CFTR بسرعة وإننا نحتاج إلى اختبارات في فيفو التي قادرة على فك المركبات النشطة بسرعة قبل الانتقال إلى مرحلة كبيرة 3 محاكمات10.
الأساس المنطقي الفسيولوجية للأسلوب الذي يستند إلى قياس الاختلاف المحتمل بين ظهارة مجرى الهواء في الآنف وحجرة تحت الجلد. يتم استكشاف أنشطة قناة أيون بقياس ثابت الأساس القصوى المحتملة الفرق (PD)، عن التغييرات بعد حظر ايناك المتصلة بامتصاص Na+ والقيادة إفراز Cl– عبر مختلف الناقلين Cl– قمي بما في ذلك CFTR. يظهر خلل CFTR بتغيير الحد أدنى في الفرق المحتملة على التحفيز لإفراز Cl– من خلال مسار يعتمد مخيم وايناك زيادة وساطة امتصاص Na+ كما الكشف عنها بواسطة خط أساس فرق أكثر سلبية واستجابة معززة ل amiloride. ويرد الأساس آليا لقوات التحالف مقابل PD العادي في الشكل 1.
رقم 1: الشكل الموجز لنشاط قناة أيون- أيون (أ) النشاط في إثبات ظهارة تنفسية متوازنة والنشاط من ايناك و CFTR في المواضيع العادية والخسارة (ب) النشاط CFTR مما أدى إلى زيادة ايناك وساطة الصوديوم النقل وتخفيض CFTR تعتمد كلوريد النقل. ايناك: قناة الصوديوم الظهارية، نا+: الصوديوم، CFTR: التليف الكيسي transmembrane منظم، CL–: كلوريد، أم: بالميليفولت، PD: الفرق المحتملة، دقيقة: دقيقة/s الرجاء انقر هنا لمشاهدة نسخة أكبر من هذا الرقم-
ومع ذلك، يوضح هذا الاختبار درجة معينة من التقلب في القياسات المتكررة داخل المريض نفسه، ومن بين المرضى الذين يعانون من نفس النمط الوراثي على حد سواء. وهذا ذات أهمية قصوى لتيسير تفسير التغييرات بعد العلاج المغير. وعلاوة على ذلك، لا نزال نفتقر عتبات المصادق عليها التمييز بين قوات التحالف والاصحاء. وهذا قد يكون جزئيا بسبب الاختلافات بين توافر المرافق السريرية والتقنيات المستخدمة. ولذلك يجري بذل جهد دولي كبير ترمي إلى توحيد للاختبار. لنا مرفق التمويل التعويضي-TDN (شبكة التنمية المداواة مؤسسة التليف الكيسي) واكفس--الكرتون (الشبكة الأوروبية التليف الكيسي المجتمع السريرية المحاكمات) إنشاء NPD إجراءات التشغيل القياسية (SOP) للاستخدام في محاكمات متعددة والبحوث. أدى هذا العمل التعاوني مؤخرا من الكرتون و TDN سوب الدولية، مجتمعة، الجمع بين الخبرة التونسية و TDN (2014)11. وتعرض هذه الورقة البروتوكول واختبار تقنيات لتوظيف مدير المشروع الوطني لتشخيص التليف الكيسي أو محقق بدأت المحاكمات دليلاً على المفهوم. كل مركز تنفيذ هذه التقنية المسؤولة عن تطبيق لجنة أخلاقيات البحوث البشرية المؤسسية للموافقة عليها.
رقم 2: أوصى التخطيطي لكامل الإعداد NPD. لاحظ أن يظهر الإعداد الموصى به، بما في ذلك مضخات نضح متسلسلة، وإعداد سلسلة 4-توقف-الديك. وترد في SOP اتصالات محددة وأمثلة للمكونات. (رسم تخطيطي لتعديل بإذن من سليمان، جم الصدر، 201013) الرجاء انقر هنا لمشاهدة نسخة أكبر من هذا الرقم-
التدفق التجريبي العام هو المبين في الشكل 2، حيث يقاس NPD بين الجسر استكشاف المتمركزة على جسر ظهارة مرجع للسطح ووضعها في الفضاء تحت الجلد، وكلاهما متصل بأقطاب ومقاومة عالية- الفولتميتر.
وهذا مكفول بموجب أنظمة مختلفة 2: هناك مرجعية مقبولة 2 مسرى الأجهزة: (ط) متوازنة أقطاب Ag/AgCl ومتصلة بالفضاء تحت الجلد بالكشط طفيف على جسر مملوءة بكريم رسم قلب (ECG) أو (ثانيا) المشبعة كالومل هالفسيلس وأغار شغل الإبرة 22-24 قياس عرض تحت الجلد. يتم تمكين الاتصال إلى الغشاء المخاطي للأنف قسطرة تجويف مزدوجة. مليئة أجار أو كريم ECG التجويف واحد ومتصل بالقياس الكهربائي، وأخرى يسمح نضح على الغشاء المخاطي الأنفي من حلول مختلفة.
يتم وضع طرف الأنبوب استكشاف على الغشاء المخاطي التنفسي تحت أدنى الآنف توربيناتي (الشكل 3).
الشكل 3: التنسيب لاستكشاف الأنابيب على الغشاء المخاطي للجهاز التنفسي. (أ) عرض خارجي يظهر التنسيب. (ب) عرض رهينوسكوبيك مما يدل على الموضع. (ج) الرسم التخطيطي يشير إلى موقع موضع القسطرة التشريحية. PD: الفرق المحتملة
دراسة استجابة PD للعديد من العقاقير وتطبق الحلول سوبيرفوسيون عن طريق التجويف الثاني من القسطرة. وهناك عدة خطوات رئيسية فيما يتعلق بإعداد وإجراء القياسات الحزب الوطني الديمقراطي، والتي ترد تفاصيلها أدناه في البروتوكول، من الإعداد الأولية من خلال تحليل البيانات.
بعد إعداد الحلول واقطاب، يسمح اختبار نوعية كافية من أقطاب والقسطرة لإجراء الاختبار الأساسي. يتم إجراء قياسات القاعدية على طول أدنى توربيناتي، الذي يسمح باختيار أفضل مكان للقياس، التي عادة ما تكون بقياس الأكثر سلبية. ثم تحديد متسلسلة بيرفوسيونس نا+ (ايناك) و Cl– (CFTR-تعتمد) أيون الجريان عبر تغيير في الجهد عبر ظهارة الآنف.
Protocol
وأقر البروتوكول التي تنطوي على البشر كافة المعاهد المشاركة "في لجنة الأبحاث". كل مركز تنفيذ هذه التقنية المسؤولة عن تطبيق لجنة أخلاقيات البحوث البشرية المؤسسية للموافقة عليها.
1-حل إعداد
-
إعداد الحلول #1، #2 و #3، وحلول قاعدة، على دفعات ل 1 قبل الإجراء والمخزنة في الموقع (الجدول 1).
ملاحظة: أميلوريدي حساسة للضوء ويجب أن تكون مخزنة في الظلام (انظر الجدول 1 لتكوين الحل) (انظر سوب ل إعداد حل مفصل11).- المخزن المؤقت كل الحلول على درجة الحموضة 7.4 وتصفية مع تصفية أعلى زجاجة 0.22 ميكرومتر.
- الحل #3، إضافة الأملاح المحتوية على الفوسفات أولاً، تسمح لهم تتأين لمنع تبلور (انظر الجدول 2 لتكوين الحل).
ملاحظة: التسلسل من الاختلاط حاسم بالنسبة للحل #3. - تخزين هذه الحلول في 4 درجات مئوية (مستقرة لمدة 3 أشهر) أو عند-20 درجة مئوية (مستقرة لمدة 6 أشهر).
- إعداد حلول #4 و #5 عن طريق إضافة وكلاء في يوم الاختبار NPD. إيسوبروتيرينول الضوء والأكسدة الحساسة ويفقد نشاطه في درجة حرارة الغرفة (مما يدل على اضمحلال 4% أكثر من 4 ح في 4 – 8 درجات مئوية). مخزن في 4 درجات مئوية.
ملاحظة: ATP هو الضوء والأكسدة الحساسة (انظر الجدول 3).
| مجمع | الوزن الجزيئي | تركيز (مم) | تكوين (غرام/لتر) |
| كلوريد الصوديوم | 58 | 148 | 8.58 |
| كاكل2 ح 22س | 147 | 2.25 | 0.33 |
| بوكل | 75 | 4.05 | 0.3 |
| ك2هبو4 | 174 | 2.4 | 0.42 |
| خ2 ص4 | 136 | 0.4 | 0.05 |
| مجكل2 6 س2س | 203 | 1.2 | 0.24 |
الجدول 1: تكوين الحل.
| مجمع | الوزن الجزيئي | تركيز (مم) | تكوين (غرام/لتر) |
| غلوكونات نا | 218 | 148 | 33.26 |
| غلوكونات Ca | 430 | 2.25 | 0.97 |
| غلوكونات ك | 234 | 4.05 | 0.95 |
| ك2 هبو4 | 174 | 2.4 | 0.42 |
| خ2 ص4 | 136 | 0.4 | 0.05 |
| مجسو4 7 ح2س | 246 | 1.2 | 0.24 |
الجدول 2: تكوين الحل.
| الحل | عدد الحل | المحتويات | مارك EDC |
| حقن قارعو الأجراس | الحل #1/A | قارعو الأجراس مخزنة لحقن | قارعو الأجراس |
| قارعو الأجراس + أميلوريدي | الحل #2/ب | قارعو الأجراس مخزنة + 100 ميكرومتر amiloride | إميل |
| صفر Cl– + أميلوريدي | الحل #3/ج | مخزنة صفر Cl– + 100 ميكرومتر amiloride | OCL |
| صفر Cl– + أميلوريدي + إيسوبروتيرينول | الحل #4/د | مخزنة صفر Cl– + 100 ميكرومتر amiloride + 10 ميكرو إيسوبروتيرينول | ISO |
| صفر Cl–+ أميلوريدي + إيسوبروتيرينول + ATP | الحل #5/E | مخزنة صفر Cl– + 100 ميكرومتر amiloride + 10 ميكرومترات isoproterenol 100 ميكرومتر ATP | FT7 |
الجدول 3: قائمة بالحل.
2-القسطرة
-
استخدام PVC، استخدام العقيمة، واحد، والقسطرة 2 لومن (0.7 Ø الداخلية مم) مع جولة وسلس أقصى (Ø 2.5 مم الخارجي)، الذي تم تصميمه خصيصا للحزب الوطني الديمقراطي.
- إجراء اتصالات مع الغشاء المخاطي الثقب جانبية، البعيدة إلى التلميح بوجود ثقب في التلميح لنضح 2 مم (راجع الخطوة 10، 1).
- الاتصال أحد الاتصالات اللوير لوك اثنين من القسطرة مسرى قياس والآخر لضخ التروية. استخدام القناة الملون باللون الأزرق كقياس التجويف. العلامة القسطرة عند كل فاصل 0.5 سم عن 10 سم.
ملاحظة: الفضاء الميت 0.3 مل. فمن الأفضل استخدام الإجراء أعلاه لإعداد القسطرة إذا لم يكن هذا ممكناً، اتبع الخطوتين التاليتين. - قطع أطوال متساوية (~ 76 سم) من أنابيب القسطرة PE50 و PE90.
- إلصاق هذه معا في قطعة 1 سم من أنابيب مطاط السيليكون. إدراج ز 25 نصيحة كليلة إبرة سنججلي في الطرف الآخر من الأنبوب PE-90. إدراج سنججلي إبرة فراشة 25 غ في الطرف الآخر من الأنبوب PE50 مع التأكد من عدم ثقب الأنبوب كما وضعه.
الشكل 4: استخدام قسطرة للقياسات NPD. يوضح مربع اقحم نصيحة القسطرة مع قياس ثقب.
3-إعداد جسر الجلد أجار (إبرة الفراشة) وقسطرة
ملاحظة: التلاعب في أجار ذاب قد تسبب الحروق، وهذا ينبغي أن يتم بحذر.
-
إعداد أجار 3% بخلط 3 ز أجار مع 100 مل من محلول 1 # في زجاجة واسعة الفم. تذوب أجار في الميكروويف حتى القابلة للذوبان (شفاف).
- ملء حقنه 10 مل مع أجار الحارة.
- الاتصال المحاقن فيما بعد بإبرة الفراشة (23 G) والتجويف ملحوظ للقسطرة. حقن في أجار حتى يظهر في التلميح.
- السماح لتبرد لمدة 10 دقيقة على الأقل.
- ضمان أن الجسر الجلد والقسطرة كامل شغل وتصور أن تكون خالية من فقاعات الهواء.
- تخزين الجسور الجلد الأكبر في الحل #1 في 4 درجات مئوية ولا تستخدم بعد أسبوع واحد.
4-في حالة استخدام تخطيط القلب كريم
-
تمييع كريم ECG مع الحل #1 (1:1، v/v في المسابقة). فليهدأ خالية من فقاعات الهواء.
- ملء حقنه 10 مل مع المخفف ECG كريم.
- الاتصال المحاقن التجويف ملحوظ للقسطرة وحقن كريم ECG ببطء حتى يظهر في حفرة الجانب السفلي.
- ضمان أن القسطرة تماما شغلها وخالية من فقاعات الهواء.
5-اقتناء نظام البيانات
ملاحظة: الإعداد العام لنظام حيازة البيانات يظهر في الشكل 5.
الرقم 5: إعداد نظام الاستحواذ على البيانات. إظهار اتصالات بيوامبليفير وهيدستاجي لواجهة الكمبيوتر وكذلك الاتصالات القطب إلى هيدستاجي11. الرجاء انقر هنا لمشاهدة نسخة أكبر من هذا الرقم-
-
اتصالات
- قم بتوصيل الكمبيوتر إلى نظام الحصول على البيانات (جدول المواد) مع كابل الناقل التسلسلي العام.
- لتوصيل نظام الحصول على البيانات بيوامبليفير، قم بتوصيل كبل BNC من القناة 1 الإدخال في نظام الحصول على البيانات (من الأمام) للإخراج على بيوامبليفير (مرة أخرى).
- الاتصال بيوامبليفير هيدستاجي مع كبل مخصص متصل مسبقاً مسامير هيدستاجي إلى جزء إدخال الجزء الأمامي بيوامبليفير.
- الاتصال هيدستاجي للأقطاب والقطب الأرضي. استخدام موصلات أنثى والإناث مم 2 القياسية لتوصيل الجزء الأمامي هيدستاجي إلى أقطاب كهربائية.
ملاحظة: المنفذ هو راحة ويناسب فقط اتجاه واحد من كابل 2 مم: القطب الأحمر قياس للأنف المريض (عن طريق قسطرة الآنف)؛ القطب الأسود-إشارة إلى جسر جلد المريض؛ الأبيض لتخطيط القلب الكهربائي على الأرض للجلد في هذا الموضوع. - تعيين بيوامبليفير كما هو موضح: الإزاحة: سحب لتنشيط، وانتقل إلى ضبط، وترك في الموقف سحبت بعد التعديل؛ الجهد الكهربي: العاصمة؛ كال mV 1: موقف محايد؛ الطاقة: في جمع البيانات، قبالة إلى شحن البطارية؛ الربح: تعيين إلى 10؛ شريط تمرير: لوفريق (مقبض الباب الخارجي): العاصمة؛ شريط تمرير: هيغفريق (مقبض الباب الداخلية): 1 كيلوهرتز؛ وحدة التخزين: إيقاف.
6-ضبط الإزاحة الرأس-المرحلة
-
قم بتوصيل الكمبيوتر المحمول ومكبر للصوت في التسلسل كما هو مبين في سوب11. التبديل على نظام الحصول على البيانات، ومن ثم الكمبيوتر المحمول (التسلسل المهم للبرنامج للتعرف على الجهاز المستخدم للحصول على البيانات).
- ضبط "إزاحة" رئيس المرحلة وفقا لتسلسل سوب.
7-الإزاحة
ملاحظة: هناك إزاحة عدة ينبغي اختبارها لضمان استقرار نظام قياس كهربائية. (انظر الشكل 6)
-
"إزاحة القطب"، وضع قطب مرجعي (سلبية) وقياس قطب كهربائي (الإيجابية) معا في كريم ECG المخفف أو 3 م بوكل. ضمان أن الفرق المحتملة القراءة بين الأقطاب بالقرب من الصفر على هيدستاجي.
- لتحديد الإزاحة جسر القسطرة و/أو الجلد، وضع نهاية القسطرة الأنفية اللوير لوك أو قفل اللوير نهاية الجسر الجلد في الحمام مع القياس الكهربائي (إيجابية). وضع الطرف الآخر من القسطرة في القلب كريم حمام أو 3 م بوكل تحتوي على مرجع القطب (السلبية) ضمان أن الاختلاف المحتملة صفر في هيادستاجي القرب.
- لإعداد إزاحة حلقة مغلقة، ضمان أن يغلق الدارة عند استبدال القسطرة الأنفية في الحمام من أقطاب كهربائية. تحقق من أن تعوض حلقة مغلقة يقرأ قرب 0 mV (= 'يعوض'؛ ±2.5 mV). ضبط هيدستاجي مقبض الباب المقابل لكي الإزاحة 0 أم.
ملاحظة: وهذا يؤكد أن كافة الاتصالات داخل الدائرة سليمة. إذا كان هذا ليس هو الحال، القسطرة الآنف قد لا تكون سليمة (الهواء فقاعات في أجار أو كريم ECG). تغيير الجسر أجار أو دفع كريم ECG في برنامج الإعداد. الإزاحة الكهربائي يجب أن يتم أولاً، متبوعاً بإغلاق نظام (إزاحة حلقة مغلقة) مع الكهربائي والجسر (الشكل 6).
رقم 6: الإعداد (A) إزاحة قطب كهربائي أو القسطرة (ب) (أو جسر) الإزاحة، إزاحة حلقة مغلقة (ج).
8-حقنه الإعداد
ملاحظة: التالي هو الإعداد الموصى به.
-
ذوبان الجليد الحلول #1 و #2 و #3 تقريبا 1 ح قبل أخذ القياس.
- قم بتوصيل خط الإرشاد محبس الحنفية الأقرب إلى القسطرة.
- التبديل على جميع المضخات وتدفق القسطرة مع الحل #1 لمسح تماما قبالة القسطرة حتى ستوبكوكس واضحة من الفقاعات.
9-وضع المرجع والقياس الكهربائي
الرقم 7: هذا الموضوع مع قياس القطب وجسر تحت الجلد جاهزة للقياسات.
-
يكون موضوع دراسة اتخاذ موقف مقاعدهم التي تواجه المشغل الحزب الوطني الديمقراطي. للمزيد من الراحة، بوضع القدمين على حصيرة مكافحة ساكنة الاختياري ورأسه على بقية الذقن انفصال.
- الاتصال مسرى الأرض تؤدي إلى لوح الرسم الكهربائي للقلب توضع على الذراع للموضوع (الشكل 7).
- أما إدخال إبرة تحت الجلد في الساعد الظهرية (نظام أجار) أو تطبيق مسرى إشارة ECG كريم في منطقة الحد الأدنى الحبيبات سابقا على الساعد (انظر النقاط 7 من خلال إلى 10 أدناه).
- تحقق من اتصال إلى الفضاء تحت الجلد بقياس الفرق المحتملة مع الجلد (PD الإصبع) وطرح هذا الموضوع لإغلاق ثقب "قياس" معسر القسطرة بين طرف الإبهام والسبابة.
- إذا لم يكن PD الإصبع-30 أم أو أكثر سلبية، والتحقق من إدخال إبرة الفراشة. كرر الكشط (لإنشاء تخطيط القلب كريم) والتحقق من الجسور.
- بدء ضخ حقنه الحل #1 في 80 مل/حاء ابدأ مع الآنف الصحيح.
- قياس PD الإصبع كجهد سلبي مستمر (مجموعة نموذجية-40 إلى-80 mV).
- في حالة استخدام نظام كريم ECG: تمييع كريم ECG 1:1 وشغل القسطرة بعد مطاردة كاملة قبالة الخروج من الحفرة التحقيق ينظر كما سبق لاجار.
- قم بتوصيل القسطرة حقنه 50 مل مملوءة نصف مع كريم ECG يستحم الأقطاب، مما يتيح الاختيار الإزاحة الكهربائي والجسر قبالة مجموعة.
- الاتصال الإشارة Ag/Cl القطب إلى الفضاء تحت الجلد بالكشط الحد الأدنى السابق طفيف من الجلد، والجلد سوف تظهر 'الوردي ولامعة' عندما يتم التوصل إلى مستوى الأدمة.
- ضع مسرى قياس، مغطاة بكريم ECG، على الجلد المتسحج. فحص الإصبع PD سيظهر كما سبق لنظام أجار.
10-قياس PD القاعدية
-
أدخل القسطرة الآنف في الآنف حق استخدام رهينوسكوبي إلقاء الضوء (أو ما يعادلها) لتصور أدنى توربيناتي. استخدام تلميح الأمامي كعلامة بارزة، النهوض بالقسطرة استهداف الموقع أدنى من أدنى توربيناتي على الغشاء المخاطي للجهاز التنفسي. بدلاً من ذلك، إذا وضع صعب، يمكن وضع ثقب التحقيق على اتصال أرضية الآنف.
ملاحظة: القسطرة جامد ما فيه الكفاية أن تسترشد في الآنف المشغل. لتسهيل وضع، قناة واحدة للقسطرة هو الملون باللون الأزرق ويحتوي على حفرة جانب التحقيق على اتصال بأدنى توربيناتي. وهذا ما يمنع دوران القسطرة. علامات المشار إليه على القسطرة من 1 إلى 10 سم توفير نقاط مرجعية سهلة.- قياس PD في أدنى توربيناتي. ولهذا الغرض، ضمان أن قياس حفرة القسطرة مغلق بموقعها ضد الغشاء المخاطي لأدنى توربيناتي (مارك حق القاعدية في).
- قياس PD في 3.0 2.0، 1.5، 1.0، و 0.5 سم (المسافة داخل ماتيوس أدنى من أدنى توربيناتي): مارك حق PDs القاعدية.
- الحفاظ على كل قياس في المسافة المحددة لما يقرب من 5 s كل لضمان قراءة ثابتة (mV ± 1) ولتيسير التفسير الدقيق للقيم PD القاعدية.
- كرر الخطوات المذكورة أعلاه في الآنف الأيسر، باستخدام الوظيفة الرئيسية لوضع علامة على اليسار PDs القاعدية (3 سم، 2 سم، إلخ) واليسار القاعدي في.
- استخدام التدابير PD القاعدية كدليل، إدراج التحقيق القسطرة الأنفية إلى موقع الإشارات الأكثر سلبية (تصل إلى 3 سم من الطرف الأمامي للأنف السفلي توربيناتي)، وآمنة مع قطعة صغيرة من الشريط على طرف الآنف (أو ما يعادلها).
11-مديرية تتبع بيرفوسيونس متسلسلة
-
منخر الحق
- تحقق من أن الحل هو نازف من آنف المريض. يكون هذا الموضوع تفترض وضع مريح مع الرأس إلى أسفل (كثيرا ما ساعد بالموضوع بقية رؤوسهم في أيديهم أو استخدام تشينريست أو أي جهاز إيموبيليزينج). أذكر موضوع للتقليل من الحركة وتجنب لمس الآنف أو الأنابيب، وتجنب الحديث.
- تشغيل الحل #1 (قارعو الأجراس) مضخة (5 مل/دقيقة، أو 300 مل/ساعة). تسجيل حتى يتم الحصول على قيمة ثابتة (< 1 s التغيير/30 mV).
ملاحظة: هذا يستغرق حوالي 3 دقيقة لتحقيق الاستقرار. - إيقاف التروية مع الحل #1.
- تبدأ نضح الحل #2 (أميلوريدي). تسجيل مدير المشروع الوطني للحد أدنى من 3 دقيقة (إذا كان الجهد الهضبة في شك، يستمر التسجيل لإجمالي يصل إلى 5 دقائق).
- تبدأ نضح الحل #3 (كلوريد صفر). تسجيل مدير المشروع الوطني للحد أدنى من 3 دقيقة (إذا كان الجهد الهضبة ليست مستقرة، يستمر التسجيل لإجمالي يصل إلى 5 دقائق).
- تبدأ نضح الحل #4 (إيسوبروتيرينول). تسجيل الحزب الوطني الديمقراطي للحد أدنى من 3 دقيقة [إذا كان الجهد الهضبة ليست مستقرة (تتبع جهد مستمر لمالا يقل عن 30 s انجراف mV < 1)، يستمر التسجيل لمدة تصل إلى 5 دقائق مجموع].
- تبدأ نضح الحل #5 (ATP). قياسياً NPD للحد أدنى من 1 دقيقة، حتى يتم الحصول على ذروة هايبربولاريزينج الاستجابة.
- تشغيل التروية مع الحل #1 (قارعو الأجراس) والسماح 30 ثانية لمسح القسطرة.
- إيقاف نضح الحل #1.
- كرر هذا الإجراء للأنف الأيسر.
12-نهاية الاختبار
-
إعادة فحص وتسجيل مستقر الإصبع PD ("إصبع بوست") 5 s.
- إزالة الجسر الجلدية في هذا الموضوع وضمادة من موقع الإدراج على الجلد. "نظام كريم" AgCl/ECG، إزالة مسرى من الذراع.
- تسجيل الجهد "إزاحة حلقة مغلقة في النهائي" كما هو موضح لقياس الإزاحة الأولى حلقة مغلقة (راجع الخطوة 7.1.3).
- مارك الإزاحة النهائي مع الوظيفة الرئيسية.
- إيقاف الحصول على البيانات (الصحافة "بدء'').
ملاحظة: سوب الحالية توصي باستخدام 100 ميكرومتر ATP لتنشيط بورينيرجيك الكالسيوم تعتمد Cl– إفراز، ليكون بمثابة عنصر تحكم إيجابية للاختبار؛ ومع ذلك، هذا اختبار اختياري.
Representative Results
في مجرى الهواء الطبيعي ابيثيليا، هو امتصاص Na+ بنشاط النقل أيون الأولية. ينتج عن هذا فرق محتملة سطح مجرى الهواء سلبي فيما يتعلق إينتيرستيتيوم. نضح amiloride مانع قناة ايناك يؤدي إلى فارق أقل سلبية محتملة. ثم، سوبيرفوسيون Cl–-حل الحرة يخلق تدرج المواد كيميائية ل Cl-، الذي يخلق فرقا محتملة أكثر سلبية، وينشط جميع الناقلين Cl– ، بما في ذلك CFTR. إيسوبروتيرينول، مما يزيد من مخيم داخل الخلايا، يزيد إفراز Cl– بالتحديد تنشيط CFTR ويزيد الفرق المحتملة.
على النقيض من ذلك، في مواضيع CF، على غائبة أو اختلال ينتج CFTR ايناك زيادة وساطة امتصاص Na+ 12. نتيجة لذلك الفرق الأساس المحتمل أكثر سلبية. ديبولاريزيشن لاحظ مع تطبيق أميلوريدي أكبر، بينما هناك الحد الأدنى أو أي تغيير في الفرق المحتملة على التحفيز لإفراز Cl– من خلال مسارات تعتمد CFTR. وهذا يتضح من وسم الممثل في الشكل 8، عرض مقابل 'صحية' وسم 'قوات التحالف'.
الشكل 8: وسم الممثل في هذا الموضوع 'صحية' وهذا الموضوع مع قارن PD: الفرق المحتملة، ΔAmiloride: دلتا amiloride،/Iso Cl 0––: انخفاض الكلوريد: التغير في المشتريات بين انتهاء حل #2 والحل #4 التروية، S1-S4: المراحل 1-4، الخط الأخضر على الرسوم البيانية A و B تشير إلى تعقب NPD والأسود تشير الأسهم إلى الاختلاف في الفرق المحتملة
Discussion
في فيفو، الحزب الوطني الديمقراطي يوفر قياس فريدة التي يمكن أن يقوم على أساس طولية مرارا وتكرارا، ويوضح أن تحترم نتائج طولية متشابهة مع القياسات المتكررة، على أساس جروبويسي والفردية14، 15. وهناك أدلة قوية على أن الحزب الوطني الديمقراطي صلاحية التمييز ممتازة للتمييز بين قوات التحالف من غير قوات التحالف. أثبتت الدراسات 25 استمرار اختلاف مهم إحصائيا في Cl– والموصليه نا+ بين المرضى الذين يعانون من التليف الكيسي وضوابط صحية10. بينما المؤشرات المتقدمة سابقا عدة تثبت هذه الصفة، ونحن نتوقع أن التحديثات الجديدة ضرورية نظراً ستاندارديزيشنز الأخيرة لمنهجية7،8.
التعديلات واستكشاف الأخطاء وإصلاحها
ويتطلب هذا الاختبار عدة خطوات رئيسية لضمان قياسات دقيقة. وهذا يشمل أقطاب والقسطرة الإزاحة حلقة مغلقة لضمان أن يتم تنفيذ النظام للمعايير الموصى بها. يجب أن تبقى لا يزال المرضى وتمتنع عن الحديث، وهذا يقلل من التحف وأماكنها القسطرة. وهذا يجعل الاختبار الصعب في المرضى غير المتعاونة وتم إبلاغ هذه التقنية فقط في دراسة واحدة في الأطفال دون 6 سنوات من العمر7.
السابقة للتفتيش ظهارة الآنف ضروري للتأكد من أنه لا توجد أي قشور أو مخاط في الظهارة، التي يمكن أن تؤثر على القياسات.
الأهم من ذلك، يجب الإشارة إلى أن موقع موضع القسطرة هو موضوع المناقشة. ويستخدم SOP المعروضة هنا القياس تحت أدنى توربيناتي (IT). تم توحيد موضع القسطرة تحت ذلك وإجراء محاكمات متعددة المراكز، وذلك، هذا هو الأسلوب المستحسن. يتم إجراء القياس تحت ذلك بالقسطرة حفرة الجانبية، التي قد يكون من الصعب الحفاظ على اتصال وطيد مع الغشاء المخاطي للأنف، حين يجري اتصالات مع الحلول. مجموعات أخرى قد قياس PD في الطابق الآنف، وأسهل من الناحية الفنية. الأهم من ذلك، أثبتت فيرميولين (2011) أن أساليب 2 قابلة للمقارنة16.
احترار الحلول التي ما زال موضع نقاش بين أوروبا والولايات المتحدة ومراكز17،18. نادي أن استخدام الحلول في 37 درجة مئوية بدلاً من 22 درجة مئوية يزيد من استجابة كلوريد الإجمالي الملحوظ بحوالي 25% وكلوريد إيسوبروتيرينول-تعتمد على الاستجابة به حوالي 95%18. بيد أن الاحترار يزيد تقلب، حسب تقييم انحراف المعياري أكبر من الاستجابة كلوريد إجمالي17. ولذلك، كما الاحترار الحلول عامل إضافي لتقلب، فإنه ينصح لا الحارة الحلول ما لم يشترط على أساس دراسة.
لدينا سابقا مقارنة كلا من تقنيات القطب ووجد أن نظم القطب أجكل وكالومل على السواء تعمل كذلك في التيارات القاعدية وحفز في المواضيع العادية13.
القيود المفروضة على هذه التقنية
ويخضع هذا الاختبار كبيرة داخل موضوع التغير. تباين التهديف منتشر خاصة في المرضى الذين يعانون من وسم غير محدد، وهذا ينبغي أن يحسب في تطبيق التشخيص19. وتشمل العوامل تقلب عدوى الجهاز التنفسي العلوي الحادة والزوائد الأنفية واسعة النطاق وجراحة الجيوب الأنفية السابقة والالتهابات المتصلة بقوات التحالف، التي تقلل خصائصه وحساسية20،10. بالإضافة إلى ذلك، قد يكون التفسير لوسم مختلفة بين القراء، على الرغم من أن القراء الخبراء تثبت اتفاق ممتاز سجل الكمية والقدرة على تفسيرها في قوات التحالف ووسم غير CF، المتناقضة مع تقلب كبير في الثقة تتبع19.
التغيرات الجوهرية مقابل عتبات كبيرة
الأهم من ذلك، التغيرات الفسيولوجية للقياس كبيرة، كما هو مبين في الدراسات المختلفة10، مثل المحاكمات العلاج الجينات التي أثبتت تقلب كبير في التغييرات في النقل الإجمالي كلوريد CFTR و وتتراوح أميلوريدي21،22. التقييم مستعرضة يوحي بأن الصفر Cl– بالإضافة إلى استجابة isoproterenol فوق العتبة-5 إلى-7 أم هو الوقف بين قوات التحالف والمواضيع غير CF10.
إلا أننا نفتقر إلى معرفة واضحة عن حجم التغيير هذه المعلمة يمثل إجراء تصحيح CFTR فعالة في تجارب المرحلة الثانية مع المرض تعديل العلاجات. لتقييم الاستجابة الفردية، قد يلزم تكرار الاختبارات رصد الاستجابة لتدخل لتمييز التغييرات الهامة من التغيرات الجوهرية. الأهم من ذلك، الدراسات المستقبلية الطويلة الأجل مع المرض تعديل الأدوية بحاجة إلى إثبات أن التحسن في وظيفة CFTR يرتبط بتحسن في النتائج ذات الصلة سريرياً أو النتائج البديلة (مثل تحسين FEV1) من قوات التحالف المرض. وفي الواقع، تستفيد مرحلة الأخيرة أظهرت دراسة "إيفاكافتور الثاني" علامة سريرية على الرغم من تحسن طفيف في إفراز الكلوريد23.
هذه الدراسات سوف تساعد على إقامة إذا كان قيمة وقف للتحسن في ترانس-الطلائية Cl–الموصلية قد تكون معلمة بديلة للفائدة السريرية. وهذا سيكون معياراً هاما لتوجيه تنمية CFTR تعديل العلاج.
أهمية فيما يتعلق بالأساليب القائمة: "اختبار العرق" والقياسات الحالية المعوية (ICM)
في المرضى الذين يعانون من التليف الكيسي '' مشكوك فيها ''، كما يقيمها عرق وسيطة تركيز Cl– بين 30 و 60 مم، والحزب الوطني الديمقراطي مركب عشرات يوفر أداة حساسة للغاية لتشخيص مرضى '' قوات التحالف--من المحتمل '' و '' قوات التحالف--من غير المحتمل ''10 . القياس الحالي المعوية (ICM)، التي تنص على قياس السابقين فيفو Cl صافي– التدفقات عبر ظهارة المستقيم، كما يتيح تحديد وظيفة CFTR المتبقية مع حساسية عالية للغاية هو أعرب عن CFTR في هذا الظهارة.
النظر في تعديل الدالة CFTR جهري CFTR، والعلاقة بين هذه التغييرات العلامات البيولوجية CFTR مختلفة في الوقت الحاضر غير واضح. على الرغم من أن العمل مؤخرا على أساس إيفاكافتور قرر أن اختبار NPD والعرق هي مرتبطة4، ولا حتى الآن وقد ثبت إذا كان قياس في الجهاز التنفسي مؤشرا أفضل لنتائج الجهاز التنفسي مما كان، على سبيل المثال، العرق اختبار24 , 25 أو تغيير في الرياضيات. وعلاوة على ذلك، قد تختلف المخدرات المعدل أيضا في بلغت محددة على الجهاز. وفيما يتعلق بالحزب الوطني الديمقراطي، من المهم ملاحظة أن التغييرات استجابة PD و amiloride القاعدية يعربون عن النقل نا+ ، في حين أن التغييرات في Cl 0– ورد isoproterenol النقليات Cl– . أنها لم توضع فيها هذه هي أكثر أهمية لتحسين حال المرض.
تطبيق هذه التقنية مستقبلا
ومن المتوقع استخدام هذه التقنية خارج الميدان قوات التحالف. أن هذا الأسلوب يناسب فريد لإثبات نا+ و Cl– قناة أيون، يمكن تطبيقها لإثبات الخلل في الخطوط الجوية من الأمراض بما في ذلك الربو26،27من التهاب الشعب الهوائية المزمن، غير CF القصبات28 والتهاب البنكرياس المتكررة29. وباﻹضافة إلى ذلك، إدخال تعديلات على هذه التقنية قد استخدمت في الخطوط الجوية السفلي (LAPD) لإظهار خلل CFTR تركز على الخطوط الجوية السفلي في مرض الانسداد الرئوي المزمن (COPD) المرضى الذين يعانون من التهاب الشعب الهوائية المزمن30.
ويقدم الحزب الوطني الديمقراطي حساسة في فيفو العلامات البيولوجية للدالة CFTR، التي يمكن أن تستخدم لكلا التشخيص، وأيضا، لإثبات مفهوم الدراسات الرامية إلى تصحيح CFTR وايناك توجيه النشاط في مجال البحوث متعدية الجنسيات. وهذا يسمح التقييم طولية لوظيفة عبر الظهارية ويبشر بوصفه استراتيجية للطب يشخص تكييف مصحح الأكثر كفاءة لكل مريض مع قوات التحالف.
Disclosures
الكتاب يعلن أن لديهم لا تضارب المصالح المالية.
Acknowledgments
هذا البحث أيده الفريق العامل للدالة CFTR للجنة توحيد (شبكة التجارب السريرية، والمجتمع الأوروبي التليف الكيسي) وموارد مركز الفريق الوطني (شبكة التنمية المداواة، التليف الكيسي مؤسسة). تم تقديم دعم إضافي من مؤسسة CF (كﻻنسي FY09 لمنطقة الميكونج الكبرى)، والمعاهد الوطنية للصحة (DK072482 سمر ومنطقة الميكونج الكبرى).
Materials
| Name | Company | Catalog Number | Comments |
| KD Scientific infusion pump (or equivalent – such as programmable infusion pumps provided by the institution/hospital) | Fisher Scientific | ||
| Powerlab 4/30 | AD Instruments | ||
| BMA-200 AC/DC portable bioamplifier | AD Instruments | ||
| IS0-Z isolation headstage for BMA-200 | AD Instruments | ||
| Windows compatible PC - Minimum requirements of Windows XP or higher | Various | ||
| AD Instruments software: GLP Client V6 (Windows) or higher | AD Instruments | ||
| ECG electrode (ground for study subject) | Hospital standard | ||
| 2 mini calomel reference electrodes | Fisher Scientific | 13-620-79 | |
| Potassium Chloride KCl, Granular – USP, formula weight 76, qty: 500 gm | Spectrum | ||
| Sterile container (such as specimen collection container , or similar) to be used for KCl calomel bath, with holes cut in lid to hold electrodes in place. (If not provided by electrode manufacturer.) | Hospital standard | ||
| 2 electrodes: Ag/AgCl 8 mm TP electrode | BIOPAC Systems | UNSHLD-EL258 | |
| 2 Ag/AgCl electrodes, B0194, plug 4 mm | SLE Instruments | ||
| Signacreme® Conductive Electrode Cream | Fisher Scientific | Parker Labs ref # 17-05 | |
| Skin abrasion device | PROMED Feeling | Ref 374901 | |
| Hi Di 541 M, Diamond tipped dental burrs | Ash Instruments | ||
| Becton Dickinson PE 50 tubing | Fisher Scientific | 427411 | |
| Becton Dickinson PE 90 tubing | Fisher Scientific | 427421 | |
| Silastic tubing, 0.062” ID, 0.095” OD | Fisher Scientific | 508-007 | |
| Micropore Surgical Tape Paper (25 mm x 9.1 m) | 3M | 1530-1 | |
| Marquat double lumen catheter Length: 80 cm; Outer diameter: 2.5 mm; Internal diameter of the channels: 0.8 mm; Distance of the side-holes to the tip: 2 mm. EU label Agreement for NPD: I0202US | Marquat | I0202US | |
| 1" X 10 yards silk tape | 3M Durapore | 1538-1 | |
| IV extension tubing (30", 50/box) | International Limited | IMN30 | |
| Three-way stopcock (50/box) | Medex | MX5311L | |
| Sterile syringe filters (ANOTOP 25 sterile 50 pk; 0.22-μm or smaller filters; or equivalent) | Fisher Scientific | 09-926-7 | |
| Becton Dickinson Intramedic Luer stub adapter (20 G, for connection to PE90 if using nasal catheter produced at study site) | Fisher Scientific | 427564 | |
| Becton Dickinson 23 G, 0.75” Vacutainer (“butterfly”) needles (0.6 mm x 19 mm; 50 U/box) (for connection to PE50) if using nasal catheter produced at study site) | Fisher Scientific | 367283 | |
| Becton Dickinson Syringe 60 mL without needle Luer-Lok tip (40/Box) | Fisher Scientific | 309653 | |
| Becton Dickinson Syringe 10 mL without needle Luer-Lok tip (100/Box) | Fisher Scientific | 309604 | |
| Single use sterile wipes (per institutional availability) | Hospital standard | ||
| 70% EtOH (1 pint), Aaper Alcohol and Chemical Co. catalog number NC9274019 (or equivalent) | Fisher Scientific | ||
| Corning single use sterile bottle-top filters, 0.22 μm pore size (0.15 – 1.0 L volumes acceptable) | Fisher Scientific | 430624 | |
| Buffer Cert Ph 10.00 (1 L Sn04332) – for pH meter calibration | Fisher Scientific | ||
| Buffer Cert Ph 4.00 (1 L Sn04327) – for pH meter calibration | Fisher Scientific | ||
| Buffer Cert Ph 7.00 (500 mL Sn04328) – for pH meter calibration | Fisher Scientific | ||
| Disposable underpads (Blue Pads; 23" x 36" 150/Box; or equivalent per hospital standard) | SureCare | ||
| 23 G, 0.75” Vacutainer “butterfly” needles (0.6 mm x 19 mm; 50 U/box) | Becton Dickinson | 367283 | |
| Difco Laboratories Agar (Noble 100 g 0142-15-2; or equivalent) | Fisher Scientific | ||
| Welch Allyn Rhinoscope 71000-C (or equivalent) | Fisher Scientific | ||
| Welch Allyn Convertible Handle Battery 72300 (or equivalent) OR Otoscope with battery | Fisher Scientific | ||
| Head and chin rest (or equivalent; optional) | Richmond Products, Inc | 629R | |
| Static Dissipative Anti-Fatigue Matting (or equivalent) | Fisher Scientific | No. 791 | |
| REAGENTS FOR SOLUTIONS MIXED ON SITE | |||
| Sodium Chloride, Granular – USP NaCl | Spectrum | Formula Weight: 58; Size: 500 gm | |
| Calcium Chloride CaCl2 •2H2O – USP | Spectrum | Formula Weight: 147; Size: 500 gm | |
| Magnesium Chloride Hexahydrate Crystal, MgCl2•6H2O – USP | Spectrum | Formula Weight: 203; Size: 500 gm | |
| Potassium Phosphate Dibasic, Anhydrous, Granular, KH2PO4 – USP | Spectrum | Formula Weight: 174; Size: 500 gm | |
| Potassium Phosphate Monobasic Crystals – NF (KH2PO4) | Spectrum | Formula Weight: 136; Size: 500 gm | |
| Sodium Gluconate- USP (monosodium salt) | Spectrum | Formula Weight: 218; Size: 500 gm | |
| Calcium Gluconate – USP (Anhydrous Powder) | Spectrum | Formula Weight: 430; Size: 500 gm | |
| Potassium Gluconate- USP (Anhydrous) | Spectrum | Formula Weight: 234; Size: 500 gm | |
| Magnesium Sulfate Heptahydrate – USP MgSO4•7H2O | Spectrum | Formula Weight: 246; Size: 500 gm | |
| Amiloride HCl – USP | Spectrum | Formula Weight: 302; Size: 5gm | |
| Adenosine 5’-Triphosphate (ATP) (Disodium salt) | Spectrum | Formula Weight: 551; Size: 5 gm | |
| Magnesium Chloride, Hexahydrate, Crystal – USP MgCl2•6H2O | Spectrum | Formula Weight: 203; Size: 500 gm | |
| Double-distilled water (ddH2O) | Hospital Pharmacy | Formula Weight: NA; Size: 1 L | |
| Isoproterenol HCL Injection - USP 1 mg/5 mL ampule | Hospital Pharmacy | Formula Weight: 248; Size: single use | |
| Ringers Injection, USP or Ringers Irrigation | Hospital Pharmacy | Formula Weight: NA; Size: 5 L |
References
- Rosenstein, B. What is a Cystic Fibrosis Diagnosis? Clinics in Chest Medicine. 19, 423-441 (1998).
- Rosenstein, B., Cutting, G. R. The Diagnosis of Cystic Fibrosis: A Consensus Statement: Cystic Fibrosis Foundation Consensus Panel. The Journal of Pediatrics. 132, 589-595 (1998).
- Farrell, P. M., et al. Diagnosis of Cystic Fibrosis: Consensus Guidelines from the Cystic Fibrosis Foundation. The Journal of Pediatrics. 181, S4-S15 (2017).
- Mesbahi, M., et al. Changes of CFTR functional measurements and clinical improvements in cystic fibrosis patients with non-p.Gly551Asp gating mutations treated with ivacaftor. Journal of Cystic Fibrosis. 16, 45-48 (2017).
- Accurso, F., et al. Sweat chloride as a biomarker of CFTR activity: proof of concept and ivacaftor clinical trial data. Journal of Cystic Fibrosis. 13 (2), 139-147 (2014).
- Accurso, F., et al. Effect of VX-770 in Persons with Cystic Fibrosis and the G551D-CFTR Mutation. New England Journal of Medicine. 363, 1991-2003 (2010).
- Sermet, I., et al. Measurement of nasal potential difference in young children with an equivocal sweat test following newborn screening for cystic fibrosis. Thorax. 65 (6), 539-544 (2010).
- Wilschanski, M., et al. Mutations in the Cystic Fibrosis Transmembrane Regulator Gene and In vivo Transepithelial Potentials. American Journal of Respiratory and Critical Care Medicine. 174 (7), 787794 (2006).
- Sermet-Gaudelus, I., et al. Clinical Phenotype and Genotype of Children with Borderline Sweat Test and Abnormal Nasal Epithelial Chloride Transport. American Journal of Respiratory and Critical Care Medicine. 182 (7), 929-936 (2010).
- De Boeck, K., et al. CFTR biomarkers: time for promotion to surrogate endpoint? European Respiratory Journal. 14, 38 (2013).
- US CFF-TDN (Cystic Fibrosis Foundation-Therapeutics Development Network) and the ECFS-CTN (European Cystic Fibrosis Society- Clinical Trials Network). Standard Operating Procedure 528.01. Standardized Measurement of Nasal Membrane Transepithelial Potential Difference (NPD). , (2014).
- Knowles, M., et al. Increased bioelectric potential difference across respiratory epithelia in CF. New England Journal of Medicine. 305 (25), 1489-1493 (1981).
- Solomon, G. M., et al. An international Randomised Multicentre Comparison of NPD Techniques. Chest. 138, 919-928 (2010).
- Sermet, I., et al. Chloride Transport in Nasal Ciliated Cells of Cystic Fibrosis Heterozygotes. American Journal of Respiratory and Critical Care Medicine. 171, 1026-1031 (2005).
- Naehrlich, L., et al. Nasal potential difference measurements in diagnosis of cystic fibrosis: an international survey. Journal of Cystic Fibrosis. 13 (1), 24-28 (2014).
- Vermeulen, F., et al. Nasal potential measurements on the nasal floor and under the inferior turbinate: Does it matter? Pediatric Pulmonology. 46 (2), 145-152 (2011).
- Bronsveld, I., et al. Influence of perfusate temperature on nasal potential difference. European Respiratory Journal. 42, 389-393 (2013).
- Boyle, M., et al. A multi-center study on the effect of solution temperature on nasal potential difference measurements. Chest. 124 (2), 482-489 (2003).
- Solomon, G. M., et al. A Multiple Reader Scoring System for Nasal Potential Difference Parameters. Journal of Cystic Fibrosis. 16 (5), 573-578 (2017).
- Beekman, J. M., et al. CFTR functional measurements in human models for diagnosis, prognosis and personalized therapy: Report on the pre-conference meeting to the 11th ECFS Basic Science Conference, Malta, 26-29 March 2014. Journal of Cystic Fibrosis. 13, 363-372 (2014).
- Accurso, F., et al. Effect of VX-770 in persons with cystic fibrosis and the G551D-CFTR mutation. New England Journal of Medicine. 363, 1991-2003 (2010).
- Wilschanski, M., et al. Chronic ataluren (PTC124) treatment of nonsense mutation cystic fibrosis. European Respiratory Journal. 38, 59-69 (2011).
- Accurso, F., et al. Sweat Chloride as a biomarker of CFTR activity: proof of concept and Ivacaftor clinical trial data. Journal of Cystic Fibrosis. 13 (2), 139-147 (2014).
- Rowe, S., et al. Clinical Mechanism of the Cystic Fibrosis Transmembrane Conductance Regulator Potentiator Ivacaftor in G551D-mediated Cystic Fibrosis. American Journal of Respiratory and Critical Care Medicine. 190 (2), 175-184 (2014).
- Boyle, M., et al. A CFTR corrector lumacaftor and a CFTR potentiator (ivacaftor) for treatment of patients with cystic fibrosis who have a phe508del CFTR mutation: a phase 2 randomised controlled trial. The Lancet Respiratory Medicine. 2 (7), 527-538 (2014).
- Schulz, A., Tummler, B. Non-allergic asthma as a CFTR-related disorder. Journal of Cystic Fibrosis. 15 (5), 641-644 (2016).
- Sloane, P. A., et al. A pharmacologic approach to acquired cystic fibrosis transmembrane conductance regulator dysfunction in smoking related lung disease. PLoS One. 7 (6), e39809 (2012).
- Bienvenu, T., et al. Cystic Fibrosis Transmembrane Conductance Regulator Channel Dysfunction in Non-Cystic Fibrosis Bronchiectasis. American Journal of Respiratory and Critical Care Medicine. 181 (10), 1078-1083 (2010).
- Werlin, S., et al. Genetic and electrophysiological characteristics of recurrent acute pancreatitis. Journal of Pediatric Gastroenterology and Nutrition. 60 (5), 675-679 (2015).
- Dransfield, M. T., et al. Acquired Cystic Fibrosis Transmembrane Conductance Regulator Dysfunction in the Lower Airways in COPD. Chest. 144 (2), 498-506 (2013).
