Summary
육류 제품을 오염 하는 대장균 등 미생물 발생 foodborne 병. 고기 건조 과정에서 에센셜 오일의 사용 깊이 공부 하지 했다. 여기, 우리는 고기에 말린 고기에서 미생물 부하를 줄이기 위해 건조 하는 동안 하는 백 리 향 에센셜 오일 적용의 새로운 방법을 제시.
Abstract
고기는 보존과 안전은 중요 한 육 포, 음식 식사의 준비에 사용 되는 고 단백 식사입니다. 식품 안전 보장을 하 고기 및 육류 제품의 수명 연장, 합성 또는 천연 방부 제를 사용 하 여 컨트롤에 적용 된 고 식중독 박테리아를 제거. 고기에 대 한 자연 식품 첨가제의 응용 프로그램에 관심이 점점 증가 했다. 미생물, 대장균, 등 고기 및 육류 제품, foodborne 병을 일으키는 오염. 따라서, 그것은 고기 보존 프로세스를 개선 하는 데 필요한입니다. 그러나, 고기는 건조 되 고 때 에센셜 오일의 사용은 하지 깊이 연구 되었습니다. 이와 관련, 말린된 고기 값을 증가 하 고 건조 과정에서 에센셜 오일을 적용 하 여 음식 관련 질병의 위험을 줄일 수 있는 기회가입니다. 이 프로토콜에서 우리 고기 건조, 건조 챔버에 직접 증기 형태로 특히 동안 백 리 향 에센셜 오일을 (테오) 적용의 새로운 방법을 제시. 평가, 우리는 원시 샘플에 비해 치료 샘플에서 해로운 박테리아의 수를 검색 하기 위해 최소 억제 농도 (MIC)를 사용 합니다. 예비 결과이 방법은 합성 방부 제를 가능한 대체 옵션 그리고 그것은 크게 말린된 고기 미생물 부하 감소를 보여준다.
Introduction
건조 식품을 보존 하기 위해 전통적인 방법으로는 고 대부터 사용 되었습니다. 요즘, 식품 보존1,2,3에 대 한 효과적인 방법으로 건조에 관심이 있다. 다양 한 특수 처리 된 고기를 만들기 위해 사용 됩니다. 가장 잘 알려진 중 하나입니다 육 포입니다.
경화 및 낮은 물 활동에 건조를 기반으로 하는 육 포, 고기 보존에 대 한 가장 오래 된 방법 중 하나 및 그러므로 그것의 수명을4확장 하. 요즘, 보존된 치유 고기는 여전히 매우 인기 있는 육 포, 어디 식품 안전, 맛, 질감은 필수품입니다. 육 포 준비 고기, 쇠고기, 돼지고기, 닭고기, 또는 게임5를 포함 하 여 거의 모든 종류에 사용할 수 있습니다 그리고 마른 스트립에 고기를도 마와 건조 필요 합니다. 일반적으로, 치료 솔루션 또는 흡연에 고기 marinating 사용 됩니다 건조 함께 주고 육 포의 특징적인 맛6.
진정으로 보존 식품을 건조의 광대 한 관심에도 불구 하 고 제대로 말린된 고기에서 대장균 , 식중독 발생의 위험이 중요 하 고 제어할 수 필요 합니다. 일부 연구 대장균 O157:H7, 부적절 한 열 처리 집 건조 하는 동안에와 특히 식중독 위장염 발발을 보고 있다. 비슷한 경우에도 상업적으로 육 포7,,89준비 생겼다. 레빈 외. 10 식중독 미생물 적당 한 건조 조건 (약 60 ° C) 상업 육 포 생산자에 의해 사용을 살아남을 수 있다고 제안 했다. E. 콜라이 O157:H7는 1990 년대의 한가운데에 음식 관련 질병의 발생 지상 말린 고기 제품6,11에 기인 했다. 흥미롭게도, 모든 이전 경우에서 주요 위험 비 culturable (VBNC)만 가능한 것으로 인식 하는 세균성 병원 체에 의해 발생 합니다. 온도 변화 또는 기아 등 다양 한 스트레스에서 대장균 세포 VBNC 상태12,13로 알려진 특정 상태를 입력할 수 있습니다. VBNC 셀 다음 적당 한 조건에 노출에 의해 culturable 셀에 다시 회복 될 수 있습니다 그리고 식중독 오염14,15인해 인간의 건강을 위협 하는 존재. 즉, 고기 제품을 건조 후 즉시 사용 하는 경우 안전 하다. 그러나, 증가 습도 등 부적 절 한 스토리지의 경우 병원 균 및 미생물 성장의 재 활성화의 높은 위험이 있다.
건조와 마리 네 이드 방법 외 첨가물 대신 천연 제품을 사용 하 여 식품 품질16,17개선에 소비자 로부터 높은 수요가 있다. 고전적인 합성 방부 제18,19,,2021대신 고기에 대 한 자연 식품 첨가제의 응용 프로그램에 특별 한 관심이 되었습니다. 비록 고기를 건조 할 때 에센셜 오일의 사용에 충분 한 실험적 증거의 부족이 있다,이 분야의 초기 연구는 이미 긍정적인 결과22,23보여 줍니다.
중세 시대부터 사람들이 그들의 항균, 살 충 용, 그리고 날짜인 chracteristics24,,2526에 대 한 에센셜 오일 화합물 (EOCs) 인식 했다. 오늘, EOCs 천연 생리 활성 화합물의 가장 중요 한 그룹 중 하나의 일부입니다. 다른 EOCs 중 티는 가장 잘 알려진 중 하나입니다. 그것은 테오23의 85% 이상 구성 됩니다. 이 페 놀은 음식에 추가 될 때 미생물 및 화학 저하를 방지 합니다. 또한 항균 속성 다른 천연 방부 제2,,2728,29,30와 함께에서 향상 될 수 있습니다. 요즘, 백 리 향 (Thymus vulgaris), 꿀풀과 가족에 속하는 허브 매우 효과적 고기 방부 제31뿐만 아니라 맛 내기 요원으로 인정을 받고 있다. 가르시아-Díez 외에의해 연구. 육류 제품에 30 테오 다른 에센셜 오일에 비해 foodborne 병원 체에 대 한 광범위 한 금지 패턴 표시 발견. 따라서, 말린된 고기 값을 증가 하 고 건조 과정에서 에센셜 오일을 적용 하 여 음식 관련 질병의 위험을 줄일 수 있는 기회가입니다.
이 프로토콜에서 우리 고기 건조 동안 테오 적용의 새로운 방법을 제시, 챔버는 건조에 직접 증기 형태로 구체적으로 그것을 사용 하 여. 평가, 우리는 원시 사람에 비해 치료 샘플에서 병원 성 박테리아의 부재를 확인 하려면 마이크를 사용 합니다. 예비 결과이 방법은 합성 방부 제에 대 한 매우 효과적인 대안 그리고 그것은 크게 말린된 고기 미생물 부하 감소를 보여준다.
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Protocol
1. 고기 준비
- 로컬 도살에서 쇠고기 (신선한 쇠고기 팔 뚝 femoris)의 짧은 허리를 얻을 하 고 실험실에 전송.
참고:이 좋습니다 주위 온도 (20-25 ° C)에서 쇠고기의 허리를 수송 하지 연금술 봉인된 봉투에 20 분 이상에 대 한. - 10 70% (v/v) 에탄올을 분사 하 여 근육 층 류 안전 캐비닛, 쇠고기 근육의 외부 표면 소독 세척 s 500 mL의 짜기 병을 사용 하 여. 근육 표면 1 c m2 당 에탄올의 0.025 g을 적용 합니다.
- Aseptically 근육 내부에 남아 있는 에탄올을 피하기 위해 칼으로 고기의 외부 표면을 제거 합니다. 근육의 표면 균일도 유지 하는 근육 내부 약 3 m m를 제거 합니다.
- 패키지 봉인된 된 비닐 봉투에 근육 하 고 냉동 실에 그것을 전송.
- 1 일-18 ° C에서 근육을 저장 합니다. 다음, 6 h 4 ° C에서 냉동된 근육 녹여.
참고: 녹고, 그것 것이 좋습니다 냉장고에 냉동 실에서 근육을 이동. - 층 류 안전 캐비닛, 각 근육 고기 커터 0.5 cm 두꺼운 조각으로 슬라이스. 다음, 칼으로 잘라 작은 5 × 2.5 c m로2 직사각형 샘플.
- 비닐 봉지에 사각형 고기 샘플을 패키지 하 고 나중에 사용에 대 한-18 ° C에서 냉동 실에 보관.
2. 표준화 된 Inoculum 및 층 류 안전 캐비닛에 접종 절차 준비
- 표준화 된 inoculum (1.5 × 108 CFU/mL)의 대장균 ATCC 25922 접종 고기 샘플을 준비 합니다.
- 재고 inoculum의 준비를 위해 먼저 10 mL의 멸 균된 버퍼링 뮬러 힌 튼 국물 (BMHB)으로 pre-filled 15 mL 소독된 튜브에 동결 건조 된 세균성 문화 (공급 업체에 의해 제공) 분배. 37 ° c.에 24 h에 대 한이 정지를 육성
- 다음과 같이 세균 재고 솔루션을 준비: 걸릴 약 0.1-0.2 mL 세균 현 탁 액 및 20 mL 유리병에 희석 폐쇄 고무 마 개와 함께 사전 멸 균된 BMHB의 15 mL 가득 알루미늄 캡. 37 ° c.에 24 h에 대 한이 정지를 육성
- 냉장고 내부에 표준화 된 inoculum의 준비를 위한 4 ° C에서 저장 합니다.
- 재고 솔루션 (2.1.1 단계 참조) 전자 대장균 의 약 0.1-0.2 mL 세균 현 탁 액 및 15 mL 플라스틱에 희석 소독 튜브 미리 10 mL의 멸 균된 버퍼링 뮬러 힌 튼 국물 (BMHB)으로 가득. 24 h에 대 한 37 ° C에서 튜브를 품 어.
- 표준화 inoculum (1.5 × 108 CFU/mL)의 준비를 위해 미리 멸 균된 BMHB의 10 mL 가득 15 mL 소독된 튜브에이 서 스 펜이 션의 작은 금액을 추가 합니다.
- 철저 하 게 소용돌이 혼합물 및 측정 광학 밀도 (OD) 600에 의해 농도계32nm.
- 단계 2.1.3-2.1.4 맥 팔 랜드 값 0.5 깨끗 한 BMHB의 가치에 비해 증가 표현 OD까지를 반복 합니다.
- 재고 inoculum의 준비를 위해 먼저 10 mL의 멸 균된 버퍼링 뮬러 힌 튼 국물 (BMHB)으로 pre-filled 15 mL 소독된 튜브에 동결 건조 된 세균성 문화 (공급 업체에 의해 제공) 분배. 37 ° c.에 24 h에 대 한이 정지를 육성
- 접종 절차에 대 한 두 개의 다른 알루미늄 포 일 (20 cm x 30 cm), 컨트롤 샘플 및 접종된 고기 샘플에 대 한 두 번째에서에서 사각형 고기 샘플을 놓습니다.
- 두 번째 알루미늄 호 일 동안 표면에 inoculum을 균등 하 게 배포 하 여 원시 사각형 고기 샘플 (이 1.2 × 108 CFU 고기 샘플 당에 해당) 선택한 긴장의 박테리아 정지의 800 µ L 접종.
- 400 µ L 샘플의 1 개의 측에 플라스틱 하 고 부드럽게 표면에 살 균 셀 스프레더를 사용 하 여 확산. 샘플의 10 분 반복 반대편에 서 스 펜 션의 나머지 부분에 대 한 동일한 절차 동안 건조 하자.
- 두 번째 알루미늄 호 일 동안 표면에 inoculum을 균등 하 게 배포 하 여 원시 사각형 고기 샘플 (이 1.2 × 108 CFU 고기 샘플 당에 해당) 선택한 긴장의 박테리아 정지의 800 µ L 접종.
3. 건조와 테오 응용 프로그램
- 건조 기를 층 류 안전 캐비닛에서 사각형 고기 샘플 포함 모두 알루미늄 포 일 전송: 각각의 알루미늄 호 일을 커버 하 고 다음 장소 건조 기 내부 샘플.
- 표준 실험실 건조 기에 건조를 실시 합니다.
참고: 먼저, 55 ° c 오븐을 예 열 이 절차는 20 분 동안 지난 수 있습니다.- 건조 공기 상대 습도 값은 30-45%와 55 ℃에서 6 h에 대 한 제어 샘플을 건조.
참고: 건조 공기 상대 습도 값에 고기에서 액체의 증발 속도 따라 다릅니다.
- 건조 공기 상대 습도 값은 30-45%와 55 ℃에서 6 h에 대 한 제어 샘플을 건조.
- 적용, 테오의 볼륨을 계산 하 고 드라이어 볼륨 (mL/L 공기) 당 테오의 볼륨으로 에센셜 오일의 농도 표현. 예를 들어 53 L (건조 기의 볼륨)에 테오의 1.5 mL의 복용량 0.028 mL/L의 농도에서 발생합니다. 대장균에 대 한 테오의 마이크를 결정, 1.5 mL (0.028 mL/L 공기), 1 mL (0.019 mL/L 공기), 0.75 mL (0.014 mL/L 공기)의 복용량을 사용 합니다.
- 건조 하 고, 전에 테오의 응용 프로그램 (주요 복합 79%로 티)와 증기 담가 테오와 장소의 1.5 mL 복용량 필터 종이 (12 cm x 20 cm) 팬 앞 건조 기에.
- 컨트롤 샘플 (3.1, 3.2 단계)에 대해서 동일한 절차를 사용 하 여 처리 하는 테오 고기 샘플을 건조.
참고: 건조 과정 끝과 샘플 제거 후 80 ° C에서 3 h 동안 오븐에 전환 하 고 오븐에서 에센셜 오일 잔류물을 청소 하기 위하여 100% 공기 환기에 공기 밸브 표시를 설정 합니다.
4. 미생물 분석
- 박테리아와 고기 접종 하기 전에 어떤 혼합물에 대 한 고기 샘플을 검사 합니다. 점액의 모양과 어떤 강하고 매운 냄새의 탐지는 고기 부패의 지표. 텍스처는 칙칙한 느낌이 든다면, 박테리아는 고기 표면에 증식 하기 시작 했습니다 수 있습니다.
- 접종 효율성 평가, 대장균 ATCC 25922의 존재에 대 한 원시 접종된 샘플을 테스트 하 고 건조 절차 전에 비 주사 제어 샘플 들을 비교 합니다. 이 위해:
- 각 고기 샘플 (2 제어 샘플 및 2 접종된 샘플)을 씻어. 7-7.3에서 pH 범위 (w/v)를 1시 10분의 비율로 버퍼링된 펩 물 (8.5 g의 NaCl, 펩의 1 g, 인산 염 버퍼 식 염 수의 5 정제와 물 1 L에 폴 80의 1 g)로 소독된 플라스 크에 각 고기 샘플을 일시 중단 합니다. 실 온에서 10 분 동안 140 rpm에서 통을 사용 하 여 흔들.
참고: 즉시 접종 절차 후 세척입니다. - 조정 6 × 6 드롭 프로시저가 접시 첸, Nace, 어윈33 판 수 한 천 (PCA)와 MacConkey 한 천 (MCA)에 의해 요약 된 박테리아의 수를 평가 합니다.
참고: 6 × 6 드롭 메서드를 사용 하 여 국물 마이크로 희석 방법 10 직렬 희석 집중 하 고 더 경제적인 종래의 방법33, 에 비해 더 적은 노동은 멀티 채널 피 펫과 조사 샘플의 준비 34. - 대장균의 평가 대 한 6 × 6 드롭 판 절차에 의해 10 직렬 샘플 희석을 육성.
참고: 특히 대 한 방울-재배 사용 6 5 µ L, 6 × 6 드롭 메서드를 6 선택 멀티 채널 피 펫과 조사 샘플의 희석. 적절 하 게 건조 배양 접시에 방울은 agar에 신속 하 게 흡수 하 고 매우 편리 하 고 관리34는이 방법으로 설치 합니다. - 24 h에 대 한 37 ° C에서 배양 접시를 품 어. 섹션 5에에서 설명 된 대로 재배 기간 후 대장균 의 배양 접시 (CFU g-1 의 말린된 고기)에 식민지의 수를 평가 합니다.
- 각 고기 샘플 (2 제어 샘플 및 2 접종된 샘플)을 씻어. 7-7.3에서 pH 범위 (w/v)를 1시 10분의 비율로 버퍼링된 펩 물 (8.5 g의 NaCl, 펩의 1 g, 인산 염 버퍼 식 염 수의 5 정제와 물 1 L에 폴 80의 1 g)로 소독된 플라스 크에 각 고기 샘플을 일시 중단 합니다. 실 온에서 10 분 동안 140 rpm에서 통을 사용 하 여 흔들.
- 건조, 후 두 접종된 말린된 샘플 고 그들 두 말린된 비 주사 제어 샘플을 비교 가능한 대장균, 각각. 이러한 4 개의 s더의 대장균 의 존재 여부를 확인 하려면 다음과 같이 각 고기 샘플의 사전 농축 과정을 수행:
- 버퍼링 된 펩 물 소독된 플라스 크에 고기 샘플 각 중단 (참조 단계 4.2.1) 140 rpm에서 통을 사용 하 여 실 온에서 10 분 동안 흔들어. 다음 사전 농축 6 h 동안 37 ° C에서 각 플라스 크를 품 어.
- 평가 및 박테리아의 경작, 4.2.4 4.2.2-단계에서 설명한 대로 동일한 절차를 따릅니다.
5. 결과 검토
- 부 화 완료 후 인큐베이터에서 배양 접시를 제거 하 고 다음과 같은 결과 검토:
- 식민지의 총 수를 평가 하려면 PCA (흰 반점) 및 일반 대장균 mesophilic 호 기성 박테리아의 존재에 대 한 번호판을 검사 MCA에 식민지 (어두운 분홍색 빨간색). 병원 체 결 석 인 경우 두 agars 성장이 제시.
- 식민지를 계산 하 고 대장균 (CFU/g-1 의 말린된 고기) 존재의 양을 결정 합니다.
참고: 드롭 (그림 1) 당 30 이하의 식민지를 포함 하는 두 개의 연속 희석에 식민지 (N)의 수를 계산 합니다. 말린 고기 CFU/g-1 의 수 N 다음과35 로 결정 됩니다.
어디, C 는 계산 하는 모든 상품에 식민지의 합계, v 는 드롭 (여기, 0.05 mL) 당 사용 하는 샘플 희석의 볼륨, n1 은 첫 번째 희석에서 사용 하는 상품의 수, n2 방울의 수는 두 번째 희석에서 사용 하 고 d 는 첫 번째 카운트 캡처된 희석을 나타냅니다.
- 생물학적 데이터를 분석 하려면 CFU g-1 를 기록 하 고 치료36의 주요 효과 대 한 그들을 분산 분석 (ANOVA)을 주제로 식민지의 수를 변환 합니다.
- 여러 의미 비교36 Tukey 정직한 상당한 차이가 테스트 (Tukey HSD)를 수행 하 고 치료의 중요 한 차이점을 확인.
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Representative Results
우리 먼저 이전 개발 했다이 방법은 식품 안전을 강화 하 고 말린된 고기 값을 증가에 오 레가 노 에센셜 오일 (OEO)를 사용 하 여. 일반적으로, 이전 실험 E. 콜라이 생존 전략으로 서 건조 하는 동안 VBNC 상태로는 보였다. 이 끝나면 건조22culturable 박테리아 없음 이었다고 하는 사실에 의해 증명 됩니다. 따라서, 6 h에 대 한 사전 농축 과정은 긴장의 계산을 허용 하는 데 필요한. 짧은 기간에 성장 하 고 있는 셀의 숫자 아직도 매우 낮은 했다. 따라서, 결과 사전 농축 과정 후 제시 하 고 접종 효율의 컨트롤을 표시 하는 예제 주사 원시 제외 ( 표 1참조). 전반적으로, 우리의 이전 연구22 부터 3 mL (0.057 mL/L 공기)의 테오 복용량을 테스트 하는 대장균 OEO 치료 후 찾지 못했습니다 하 고 그것으로 너무 강한 맛에 대 한 소비자에 의해 평가 되었다이 필요 했다. 따라서, 테오의 낮은 농도 대장균에 대 한 마이크를 정의 하기 위해 테스트 되었습니다.
표 1 쇠고기 샘플 6 h 55 ° C에서 건조와 PCA와 MCA에 대 한 사전 농축 과정에 복종에서 대장균 의 동작을 제공 합니다. PCA 모나 스 종 및 대장균같은 호 기성 박테리아 mesophilic의 증가 보여줍니다. MCA는 대장균의 존재를 식별합니다. 접종된 원시 샘플 접종 (접종 효율성에 대 한 제어)에 도달한 후 평균 박테리아의 5.31 로그 CFU g-1 의 인구 PCA와 MCA, 프로시저의 시작 부분에서 고기 샘플에 아무 오염 했다 의미. 건조, 중요 한 차이 후 (p <0.05) 치료 비 샘플 (NoEO) 및 0.75 mL, 1 mL, 및 1.5 mL 테오 취급 샘플 두 agars 사이 각각 관찰 했다. 이 결과 테오 치료, 에센셜 오일 복용량을 증가 하는 동안 대장균 수를 감소의 성공적인 성과를 밝혔다. 뿐만 아니라, 그 후에 사전 농축 샘플 선물 대장균 및 비 오염 다른 박테리아와 제안 모두 agars에 카운트는 매우 비슷합니다. 크게, 대장균 1.5 mL 복용량 테오 치료에서 탈락 했다. 결과적으로, 공기의 0.028 mL/L의 테오 농도 VBNC 대장균 에서 상당한 감소 때문 대장균 에 대 한 적절 한 마이크로 계시 되었다 (p < 0.05) 6 h 55 ° c.에 건조 후 테오의 복용량 사이 여러 의미 비교를 수행할 때 통계 차이가 관찰 했다 유형과 샘플 PCA와 MCA (참조 표 1; Tukey HSD, p < 0.05).
그림 1: 드롭 당 30 이하의 식민지를 포함 하는 두 개의 연속 희석에 식민지 (N)의 수를 계산의 데모. 이 예제에서는 결과 후 PCA Petri의 인큐베이션 24 h에 대 한 37 ° C에서 요리. 활용 하 여 재배에 대 한 6 × 6 드롭 방법, 6 5 µ L-드랍 스는, 멀티 채널 피 펫과 조사 샘플의 6 선택 된 희석에서 설치 했다. 이 경우 PCA, 적절 하 게 건조 배양 접시에 성장된 식민지 (흰 반점) 두 개의 연속 희석 (10-4 , 10-5) 드롭 당 30 이하의 식민지를 포함 하는에서 열거 됩니다. 이 그림의 더 큰 버전을 보려면 여기를 클릭 하십시오.
| 샘플 유형 | ||||
| 처리 샘플 | 치료 샘플 | |||
| 테오의 복용량 | PE 6H_PCA | PE 6H_MCA | Raw_PCA | Raw_MCA |
| NoEO | 3.929 (0.44)d | 3.833 (0.40)d | 5.474 (0.12)는 | 5.516 (0.05)를 |
| 0.75 mL | 2.493 (0.11)c | 2.516 (0.22)c | 5.370 (0.03)는 | 5.452 (0.24)는 |
| 1 mL | 1.574 (1.05)b | 1.579 (1.06)b | 5.129 (0.35)는 | 5.123 (0.40)는 |
| 1.5 mL | ND는는 | ND는는 | 5.298 (0.09)는 | 5.166 (0.33)는 |
표 1: 기존 건조 기에 6 h 55 ° C에서 건조 쇠고기 샘플에서 대장균 ATCC 25922 (로그 CFU g-1)의 행동의 의미 (표준 편차) 두 접시 6 h 및 접종 효율 (RAW)의 제어에 대 한 사전 농축 (PE)를 받게 수 한 천 (PCA)와 MacConkey 한 천 (MCA). 다른 문자 ("a", "b", "c',"d") 같은 열에 카테고리의 통계 그룹을 대표 하 고 상당한 차이 나타내는 (p < 0.05). 테오, 백 리 향 에센셜 오일;의 복용량의 복용량 NoEO, 아무 에센셜 오일; ND, 인식 되지 않음 P 값 보고 여러 의미 비교 테오의 복용량 사이에서 및 PCA와 MCA에 대 한 샘플 형식 (Tukey HSD, p < 0.05 통계 중요성을 나타냅니다).
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Discussion
이전 연구는 음식 관련 질병을 일으키는 미생물 건조10생존을 보이고 있다. 그것은 따라서 식품 안전을 보장 하기 위해서 건조 하기 전에 방부 제를 적용 하는 데 필요한입니다. 이 연구에서 우리는 테오를 사용 하 여에 집중 한다. 이유는 두 가지 이다: 먼저, 개선 식품 품질16; 대체 첨가물으로 천연 제품을 사용 하는 소비자에서 수요는 둘째, 이전 연구 OEO 고기 건조 과정22동안 사용한 후 긍정적인 결과 증명. 따라서, OEO 고기 건조 하는 동안 응용 프로그램에 의해 방법 미생물 부하 제어를 다른 에센셜 오일의 사용에 확장 되었다.
이전 연구에서는 식품 안전을 개선 하 고 말린된 고기 값을 증가 OEO 테스트 했습니다. 우리의 이전 결과 대장균 OEO 고기 건조, 대장균 가능한 카운트 6 h OEO22의 1.5 mL (0.028 mL/L 공기)와 55 ° C에서 건조 후 크게 감소 하기 때문에 사용 하 여 성공적으로 저해 했다 보여주었다. 현재 연구를 위해 우리는 테오와 메서드 구현. 그것은이 방법을 사용 하 여 그것은 검색, 열거, 말린된 고기 샘플에서 VBNC 대장균 감소 하는 것을 시연 했다. 그러나, 테오의 사용 때문에 맛, 냄새, 그리고 말린된 고기 제품의 질감에 영향을 미치는 organoleptic 특성으로 인해 제한에 있다. 이러한 이유 때문에 대장균 성장을, 특히 식중독 감염 시키는 병원 성 박테리아를 방지 하는 데 필요한 마이크를 설정 하는 중요 한 했다.
두 경우 모두, 대장균 1.5 mL 복용량 OEO 테오 치료에서 감소 되었다. 두 연구 결과로 OEO와 테오의 0.028 mL/L 공기의 농도가 각각, 표시 했다 대장균 에 대 한 마이크로 VBNC 대장균 의 상당한 감소 때문 (p < 0.05) 6 h 55 ° c.에 건조 후 표 1 에 결과 표시 샘플 테오의 1.5 mL로 치료에서 대장균 제거 되었습니다. 이와 관련, 테오의 3 mL (0.057 mL/L 공기)의 복용량을 테스트 하는 데 필요한 했다. 게다가, 이전 연구는 박테리아 OEO 3 mL의 복용량으로 치료 에센셜 오일 치료22후 검색 되지 않습니다 증명. 따라서, 테오의 더 낮은 복용량은 현재 프로토콜에서 사용 되었다. E. 콜라 이 제거 테오 복합 미생물 활동에 대 한 매우 효과적인 에센셜 오일은 아메리카, 포함 된 연결 됩니다. 특히, 그것은 한 주된 대장균37,38의 변종에 대 한 주로 인정된 화합물.
이 프로토콜은 주로 VBNC E. 콜라이 긴장 (이 필요 없기 때문에 건조를 마친 후 culturable 박테리아 없음)의 계산을 허용 하도록 6 h에 대 한 말린된 고기 샘플의 사전 농축을 사용 하 여 화면을 표준화 되어 있습니다. 이 프로토콜 잠재적으로 살 모 넬 라 enteritidis , 말린된 고기 제품, Listeria monocytogenes 등 다른 foodborne 병원 체를 검출 하기 위하여 적응 시킬 수 있다 하지만이 지역에 더 많은 연구가 필요 하다.
Foodborne 병원 체를 다루는 조사는 매우 동적 이며 포함 하는 다단계 프로세스를 특정 상황 및 지역 환경 조건에 따라 다를 수 있습니다. 이러한 조사는 그들은 다른 음식 보존 기술에 천연 첨가물의 사용을 촉진 하기 때문에 중요 하다. 우리가 알고 있는,이 연구는 먼저 고기 건조, 건조 챔버에 직접 증기 형태로 구체적으로 그들을 사용 하 여 동안 에센셜 오일의 응용 프로그램에 의해 새로운 방법을 공개 하다. 긍정적인 결과는이 메서드는 합성 첨가물을 현저 하 게 효과적인 선택이 고 그것은 크게 말린된 고기 미생물 성장을 감소 보여 줍니다. 미래 연구에 대 한 다른 에센셜 오일 및 다른 보존 방법 함께 응용 프로그램의 복용량 최적화 그 시너지 효과의 항균 효과 평가 하기는 것이 좋습니다.
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Disclosures
저자는 공개 없다.
Acknowledgments
이 작품은 열 대 AgriSciences의 학부의 내부 부여 기관에 의해 지원 되었다 (프로젝트 번호: 20175013)와 둘 다 생명 과학의 체코 대학에서 부여 CIGA 20182023.
Materials
| Name | Company | Catalog Number | Comments |
| Meat cutter | Kalorik | KP 3530 | from Miami Gardens, FL, USA |
| Laminar safety cabinet | Faster s.r.l | from Italy | |
| Squeeze bottle of 500 mL | Merci | 632 524 325 025 | from CZ |
| Standard laboratory drier UFE 400 | Memmert | DE 66812464 | from Germany |
| Incubator | BT 120 | N/A | from CZ |
| Refrigerator and Freezer | Bosch | KGN34VW20G | from DE |
| Densitometer | Biosan | 220 000 050 122 | Latvia; supplier Merci, CZ |
| Escherichia coli ATCC 25922 | Oxoid | CL7050 | from CZ |
| Vortex | Chromservis | 22008013 | from CZ |
| Sterilized plastic tubes 15 mL | Gama | 331 000 020 115 | from CZ, supplier Merci |
| 20 mL injection vial | Healthy vial | hvft169 | from China |
| 20 mm sterile butyl rubber stopper | Merci | 22008013 | from CZ |
| 20 mm aluminum cap | Healthy vial | N/A | from China |
| Thyme essential oil | Sigma Aldrich | W306509 | from St Louis, MO, USA |
| Mueller Hinton Broth | Oxoid | CM0337 | from CZ |
| NaCl | Penta | 16610-31000 | from CZ |
| Peptone | Oxoid | LP0034 | from CZ |
| Phosphate-buffered saline | Sigma Aldrich | P4417 | from CZ |
| Polysorbate 80 (Tween 80) | Roth | T 13502 | from DE, supplier P-lab |
| Shaker SHO-1D | Verkon | DH.WSR04020 | from CZ, 10 - 300 rpm. 350 x 350 mm with a platform for flasks |
| Ethanol 70% | Bioferm | N/A | from CZ |
| MacConkey Agar | Oxoid | CM007 | from CZ |
| Plate Count Agar | Oxoid | CM0325 | from CZ |
| Filter paper | Merci | 480 622 080 040 | from CZ |
| Erlenmeyer flasks 250 mL | Simax | 610 002 122 636 | from CZ; supplier Merci CZ |
| Multichannel pipette | Socorex | S852820 | from Switzerland; supplier P lab, CZ |
| Microtiter plate | Gamma | V400916 | CZ |
| Microlitre pipette 100-1000 μL | Eppendorf | 333 120 000 062 | from Germany; supplier Merci, CZ |
References
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