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खरगोश में आहार प्रेरित चयापचय सिंड्रोम के एक प्रयोगात्मक मॉडल: Methodological विचार, विकास, और मूल्यांकन

Published: April 20, 2018 doi: 10.3791/57117
Automatic Translation
1,2,3, 1,2,3, 1,2,4, 5, 2,3, 6, 2, 2, 1,3, 6
1CIBERCV, Instituto de Salud Carlos III, 2Department of Physiology, Universitat de València, 3INCLIVA, 4Department of Electronic Engineering, Universidad Politécnica de Valencia, 5UCIM, Universitat de València, 6Department of Physiotherapy, Universitat de València

Summary

हम एक उच्च वसा, उच्च सुक्रोज आहार का उपयोग खरगोशों में आहार प्रेरित चयापचय सिंड्रोम (मेट्स) के एक प्रयोगात्मक मॉडल विकसित करने के लिए तरीकों का वर्णन । पशु केंद्रीय मोटापा, हल्के उच्च रक्तचाप, पूर्व मधुमेह, और डिसलिपिडेमिया, इस प्रकार मानव मेट्स के मुख्य घटकों reproducing विकसित की है । इस पुरानी मॉडल रोग प्रगति के तंत्र अंतर्निहित ज्ञान के अधिग्रहण की अनुमति देगा ।

Abstract

हाल के वर्षों में, मोटापा और चयापचय सिंड्रोम (मेट्स) सार्वजनिक स्वास्थ्य और नैदानिक अभ्यास के लिए एक बढ़ती हुई समस्या बन गए हैं, गतिहीन जीवन शैली और अस्वस्थ भोजन की आदतों के बढ़ने के कारण उनकी वृद्धि हुई प्रसार दिया । पशु मॉडलों के लिए धंयवाद, बुनियादी अनुसंधान ऐसे मेट्स के रूप में रोग प्रक्रियाओं अंतर्निहित तंत्र की जांच कर सकते हैं । यहां, हम आहार प्रेरित मेट्स और उसके आकलन के एक प्रयोगात्मक खरगोश मॉडल विकसित करने के लिए इस्तेमाल किया तरीकों का वर्णन । acclimation की अवधि के बाद, पशुओं को एक उच्च वसा (10% हाइड्रोजनीकृत नारियल तेल और 5% चरबी), हाई-सुक्रोज (15% पानी में घुल सुक्रोज) आहार 28 हफ्तों के लिए खिलाया जाता है । इस अवधि के दौरान, कई प्रयोगात्मक प्रक्रियाओं मेट्स के विभिंन घटकों का मूल्यांकन करने के लिए प्रदर्शन किया गया: रूपात्मक और रक्तचाप माप, ग्लूकोज सहनशीलता निर्धारण, और कई प्लाज्मा मार्करों के विश्लेषण । प्रायोगिक अवधि के अंत में, पशुओं के मध्य मोटापा, हल्के उच्च रक्तचाप, पूर्व मधुमेह, और कम एचडीएल, उच्च एलडीएल के साथ डिसलिपिडेमिया विकसित की है, और ट्राइग्लिसराइड (टीजी) के स्तर की वृद्धि हुई है, इस प्रकार मानव मेट्स के मुख्य घटकों reproducing । इस पुरानी मॉडल रोग की प्रगति में अंतर्निहित तंत्र को समझने के लिए नए दृष्टिकोण की अनुमति देता है, नैदानिक और नैदानिक मार्करों का पता लगाने की अनुमति है कि जोखिम पर रोगियों की पहचान, या यहां तक कि नए चिकित्सीय परीक्षण इस जटिल विकृति के उपचार के लिए दृष्टिकोण ।

Introduction

मोटापा और चयापचय सिंड्रोम (मेट्स) सार्वजनिक स्वास्थ्य और नैदानिक अभ्यास के लिए एक बढ़ती हुई समस्या बन गए हैं, गतिहीन जीवन शैली और अस्वस्थ खाने की आदतों के बढ़ने के कारण उनकी वृद्धि की व्यापकता को देखते हुए1। वहां मेट्स के कई परिभाषाएँ हैं, लेकिन उनमें से ज्यादातर हृदय और चयापचय परिवर्तन जैसे उदर मोटापा, कम एचडीएल और ऊंचा एलडीएल कोलेस्ट्रॉल, ऊपर ट्राइग्लिसराइड्स, ग्लूकोज असहिष्णुता के एक क्लस्टर के रूप में वर्णन, और उच्च रक्तचाप2 ,3,4. निदान की आवश्यकता है कि इन पांच मानदंडों में से तीन मौजूद हैं ।

पशु मॉडलों के कारण, बुनियादी अनुसंधान गया है मेट्स जैसे रोग प्रक्रियाओं अंतर्निहित तंत्र की जांच करने में सक्षम है । कई जानवरों के मॉडल का इस्तेमाल किया गया है, लेकिन यह महत्वपूर्ण महत्व का है कि विकल्प के मॉडल मानव विकृति के मुख्य नैदानिक अभिव्यक्तियाँ reproduces (चित्रा 1). इस उद्देश्य के साथ, पशु मॉडल मनुष्यों के समान माना जाता है, मुख्य रूप से कुत्ते और सूअर, विकसित किया गया है (देखें Verkest5 और जांग और Lerman6 समीक्षा के लिए) । हालांकि, कुत्ते मॉडल मेट्स के सभी घटकों को नहीं दिखा, यह देखते हुए कि atherosclerosis या आहार के माध्यम से कुत्तों में hyperglycemia के विकास संदिग्ध है5। सूअर मॉडल मनुष्यों के साथ सबसे संरचनात्मक और शारीरिक समानता प्रस्तुत करते हैं, और इस तरह elucidating मेट्स अंतर्निहित तंत्र के लिए महत्वपूर्ण पूर्वानुमान शक्ति प्रदान करते हैं, लेकिन उनके रखरखाव और प्रयोगात्मक प्रक्रियाओं की जटिलता का उपयोग करें इस मॉडल बहुत श्रम गहन और6महंगा ।

दूसरी ओर, मूषक मॉडल (माउस और चूहा), आहार-प्रेरित सहज और ट्रांसजेनिक, मोटापा, उच्च रक्तचाप, और मेट्स के अध्ययन के लिए साहित्य में बड़े पैमाने पर इस्तेमाल किया गया है, और विभिन्न अंगों और प्रणालियों में इसके रोग परिणाम (वोंग देखें एट अल. 7 समीक्षा के लिए) । हालांकि इन मॉडलों का उपयोग कुत्ते या सूअर की तुलना में अधिक किफायती है, वे महत्वपूर्ण कमियां है । दरअसल, तनाव पर निर्भर करता है, जानवरों मेट्स के कुछ घटकों को विकसित, जबकि उच्च रक्तचाप, hyperglycemia, और hyperinsulinemia के रूप में दूसरों को7अनुपस्थित रहे हैं । इसके अलावा, मेट्स के मुख्य घटकों में से एक, मोटापा, कुछ आनुवंशिक रूप से संशोधित उपभेदों में, केवल आहार के साथ जुड़े कारकों पर निर्भर नहीं करता है, बल्कि यह दिखाया गया है कि कुछ जानवरों के सामान्य या भी कम भोजन सेवन के साथ मोटापे से ग्रस्त हो जाते हैं8. अंत में, चूहों और चूहों cholesteryl एस्टर स्थानांतरण प्रोटीन (CETP) में एक प्राकृतिक कमी दिखाने के लिए और कोलेस्ट्रॉल परिवहन के प्रमुख साधन के रूप में एचडीएल का उपयोग करें, जो उन्हें अपेक्षाकृत atherosclerosis के विकास के लिए प्रतिरोधी बनाता है । यह मनुष्यों के साथ लिपिड चयापचय में एक महत्वपूर्ण अंतर है, जो CETP एक्सप्रेस और मुख्य रूप से एलडीएल9में उनके कोलेस्ट्रॉल परिवहन ।

इसके विपरीत, प्रयोगशाला खरगोश बड़ा जानवर और कुतर प्रयोगात्मक मॉडल के बीच एक मध्यवर्ती चरण का प्रतिनिधित्व करता है । इस प्रकार, खरगोश आसानी से कर्मियों और रखरखाव की ंयूनतम आवश्यकताओं के साथ प्रोटोकॉल के विभिंन प्रकार के लिए प्रस्तुत किया जा सकता है, और अधिक आसानी से बड़े जानवर मॉडल से प्रयोगात्मक प्रक्रियाओं में संभाला जा रहा है । इसके अलावा, यह बताया गया है कि एक उच्च वसा वाले आहार के साथ खिलाया खरगोशों मोटापे से ग्रस्त मनुष्यों के रूप में समान hemodynamic और neurohumoral परिवर्तन8,10,11। के बारे में ध्यान दें, लिपिड चयापचय के बारे में, खरगोश प्लाज्मा में प्रचुर मात्रा में CETP है और उनके लिपोप्रोटीन प्रोफ़ाइल एलडीएल-रिच12है, जो भी मनुष्य के समान है । इसके अतिरिक्त, खरगोश hyperlipidemia काफी तेजी से है कि, शाकाहारी के रूप में, वे आहार वसा13के लिए बहुत संवेदनशील है दिया विकसित ।

Figure 1
चित्रा 1: मेट्स पशु मॉडल की तुलना. देखो Verkest5, झांग और Lerman6, और वोंग एट अल । समीक्षा के लिए 7 । "" एक लाभ को इंगित करता है और "" एक नुकसान को इंगित करता है ।Equation 1Equation 2 *विवादास्पद, अध्ययन पर निर्भर करता है, * *के रूप में कैरोल एट अल द्वारा बताया । 8, कुछ आनुवंशिक रूप से संशोधित उपभेदों भोजन के सेवन के स्वतंत्र रूप से मोटापे से ग्रस्त हो जाते हैं । सीईपीटी: cholesteryl एस्टर स्थानांतरण प्रोटीन । GTT: ग्लूकोज सहिष्णुता परीक्षण । कृपया यहां क्लिक करें इस आंकड़े का एक बड़ा संस्करण को देखने के लिए ।

आदेश में बुनियादी तंत्र अलग अंगों और प्रणालियों में मेट्स द्वारा उत्पादित रोग remodeling अंतर्निहित स्पष्ट करने के लिए, और इस जटिल विकृति की समझ हासिल करने के लिए, एक प्रयोगात्मक मॉडल है कि के मुख्य घटक reproduces के विकल्प मानव मेट्स आवश्यक आहे. खरगोश मानव शरीर क्रिया विज्ञान और जीर्ण प्रोटोकॉल और माप में उपयोग की सामर्थ्य के साथ अपनी समानता दिया कई लाभ प्रदान कर सकते हैं । इस लाइन में, कुछ आहार-प्रेरित खरगोश उच्च वसा और उच्च सुक्रोज आहार का उपयोग कर मॉडल14इस्तेमाल किया गया है,15,16,17,18,19 (टेबल 1), और एक मेट्स के विभिंन घटकों के लक्षण वर्णन बहुत महत्वपूर्ण है जब अंग remodeling के साथ एक phenotype से संबंधित है । इस प्रकार, इस अनुच्छेद के मुख्य उद्देश्य के लिए तरीकों का वर्णन करने के लिए आहार के एक मॉडल खरगोशों में मेट्स प्रेरित है कि अपनी pathophysiology और अंग remodeling में प्रभाव के अध्ययन की अनुमति देता है विकसित करना है ।

अध्ययन आहार अवधि नस्ल मेट्स अवयव
Ob एचटी पारा डीएल
यिन एट अल. (२००२)14 ·    10% वसा 24 सप्ताह ·      पुरुष NZW Equation 2 - Equation 1 Equation 1
·    ३७% सुक्रोज ·      2 किलो
Zhao एट अल. (२००७)15 ·    10% वसा ३६ सप्ताह ·      पुरुष JW Equation 1 Equation 2 Equation 2 Equation 2
·    30% सुक्रोज ·      16 सप्ताह
Helfestein एट अल. (२०११)16 ·    10% वसा 24 सप्ताह ·      पुरुष NZW Equation 2 - Equation 1 Equation 1
·    ४०% सुक्रोज ·      12 सप्ताह
·    0.5-0.1 कोलेस्ट्रॉल
निंग एट अल. (२०१५)17 ·    10% वसा 8-16 सप्ताह ·      पुरुष WHHL Equation 2 - Equation 2 Equation 1
·    30% फ्रुक्टोज * ·      12 सप्ताह
लियू एट अल. (२०१६)18 ·    10% वसा ४८ सप्ताह ·      पुरुष NZW Equation 2 - Equation 1 Equation 1
·    30% सुक्रोज ·      12 सप्ताह
arias-Mutis एट अल. (२०१७)19 ·    15% वसा 28 सप्ताह ·      पुरुष NZW Equation 1 Equation 1 Equation 1 Equation 1

तालिका 1: आहार प्रेरित मेट्स खरगोश उच्च वसा, उच्च सुक्रोज आहार का उपयोग कर मॉडल । प्रतीक "" अनुपस्थिति को इंगित करता है, "" उपस्थिति, और "-" मूल्यांकित नहीं ।Equation 2Equation 1 प्रतिबंधित. WHHL, वातानाबे heritable hiperlipidemic खरगोश । JW, जापानी सफेद खरगोशों । ओबी, मोटापा. एचटी, हाइपरटेंशन । पारा, hyperglycemia । डीएल, डिसलिपिडेमिया.

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Protocol

पशु देखभाल और प्रयोगात्मक इस अध्ययन में इस्तेमाल किया प्रोटोकॉल वैज्ञानिक प्रयोजनों के लिए इस्तेमाल किया जानवरों के संरक्षण पर यूरोपीय संघ के निर्देश 2010/63 के साथ अनुपालन, और संस्थागत पशु देखभाल और उपयोग समिति द्वारा अनुमोदित किया गया (2015/VSC/मटर/00049) ।

नोट: प्रोटोकॉल एक उच्च वसा के जीर्ण प्रशासन के होते हैं, 28 सप्ताह के लिए उच्च सुक्रोज आहार, और मेट्स के मुख्य घटकों का आकलन. हम 11 वयस्क पुरुष ंयूजीलैंड सफेद (NZW) खरगोश वजन ४.३९ ± ०.१४ (s.d.) किलो है, जो प्रायोगिक प्रोटोकॉल की शुरुआत में 20-22 सप्ताह पुराने थे इस्तेमाल किया । वे आर्द्रता के साथ एक कमरे में स्थित थे (५० ± 5%) और तापमान (20 ± १.५ ° c) नियंत्रित शर्तों के साथ एक 12-h प्रकाश चक्र । शब्द "चाउ" और "आहार" प्रोटोकॉल चरणों में interchangeably इस्तेमाल किया जा सकता है ।

1. आहार प्रशासन

  1. प्राप्त करें या आहार तैयार
    1. जोड़ा हाइड्रोजनीकृत नारियल तेल (10%) और चरबी (5%)19के साथ एक व्यावसायिक रूप से उपलब्ध उच्च वसा आहार प्राप्त करें । यह आहार प्रदान करेगा ३.७ किलो कैलोरी · जी-1.
    2. निष्फल जल में सुक्रोज की उपयुक्त मात्रा को भंग करके 5 से 15% सुक्रोज समाधान तैयार करें (उदा., 15% सुक्रोज सॉल्यूशन के लिए 2 L शेयर में ३०० ग्राम सुक्रोज का उपयोग करे) । एक 15% समाधान प्रदान करेगा ०.६ किलो कैलोरी · एमएल-1।
    3. एक व्यावसायिक रूप से उपलब्ध नियंत्रण आहारप्राप्त करें19, जो प्रदान करता है २.७ किलो कैलोरी · g-1।
  2. 4 हफ्तों के लिए जानवरों Acclimate
    1. नियंत्रण समूह में प्रत्येक जानवर फ़ीड १२० नियंत्रण के जी दैनिक आहार । पानी विज्ञापन libitumप्रदान करें ।
    2. मेट्स समूह में फ़ीड पशु २५० जी चाउ एक ५०% नियंत्रण और ५०% उच्च वसा चाउ के साथ शुरू, 4 सप्ताह के अंत तक १००% उच्च वसा चाउ को उत्तरोत्तर बढ़ रही है ।
      नोट: उद्देश्य को प्राप्त होगा: (i) ३५% नियंत्रण और ६५% उच्च वसा चाउ 1 सप्ताह के अंत तक; (ii) 25% नियंत्रण और 2 सप्ताह के अंत तक ७५% उच्च वसा चाउ; (iii) 15% नियंत्रण और ८५% उच्च वसा चाउ सप्ताह के अंत तक 3 । (iv) 4 सप्ताह के अंत तक १००% उच्च वसा चाउ ।
    3. शुरू में 5% सुक्रोज के साथ मेट्स समूह पानी में पशुओं को दे, और 4वें सप्ताह के अंत तक 15% के लिए सुक्रोज एकाग्रता में वृद्धि ।
    4. चाउ और सुक्रोज समाधान के दैनिक सेवन रजिस्टर 1.1.1 में प्रदान की मूल्यों के अनुसार गरमी सेवन की गणना करने के लिए । और 1.1.2 ।
  3. प्रेरित मेट्स (28 सप्ताह)
    1. नियंत्रण समूह में प्रत्येक जानवर फ़ीड १२० नियंत्रण के जी चाउ और जल विज्ञापन libitum दैनिक ।
    2. मेट्स समूह में जानवरों को खिलाएं २५० ग्राम के उच्च वसा चाउ और 15% पानी में सुक्रोज । चाउ दैनिक और सुक्रोज समाधान हर तीसरे दिन बदलें ।
    3. शेष चाउ और दैनिक खपत का अनुमान करने के लिए पानी रोजाना तौलना ।

2. रूपात्मक भत

  1. एक साप्ताहिक आधार पर पशु bodyweight उपाय ।
  2. माप ऊंचाई, लंबाई, उदर समोच्च, और टिबियल लंबाई, और प्रायोगिक आहार के प्रशासन और सप्ताह 14 और 28 anesthetized पशुओं में से पहले अनुमान बीएमआई ।
    1. Cannulate एक बाँझ डिस्पोजेबल कैथेटर (18-22 जी) के साथ सही कान सीमांत नस और सुई propofol (8mgkg-1) के बाद १.५ मिलीलीटर ०.९% NaCl समाधान. anesthetized खरगोश में, बाद के चरणों में सूचीबद्ध माप निष्पादित करें ।
    2. ऊंचाई और लंबाई को मापने । टेप मापने का प्रयोग, उपाय और पार्श्व decubitus स्थिति (लंबाई) में एड़ी के लिए नाक से दूरी रिकॉर्ड. इसी स्थिति में acromion से कंधे में पंजा (ऊँचाई) की नोक तक की दूरी बना लें.
    3. गणना बॉडी मास इंडेक्स (बीएमआई)20 के रूप में bodyweight (किग्रा) · [शरीर की लंबाई (एम) × ऊंचाई (m)] -1.
    4. उदर समोच्च के आसपास धीरे मापने टेप रखें और लापरवाह स्थिति में पशु के साथ एक माप ले ।
    5. टिबियल लंबाई के निचले भाग से घुटने की दुखती की सम्मिलन के लिए संयुक्त माप ।

3. उपवास Glycemia और नसों में ग्लूकोज सहिष्णुता परीक्षण (IVGTT)

नोट: यह प्रक्रियाओं दिन के एक ही समय (यानी, 2-3 बजे) शुरू करने के लिए सलाह दी जाती है ।

  1. एक ग्लूकोज स्टॉक समाधान (६०%) ६० g ग्लूकोज के साथ १०० मिलीलीटर में ०.९% NaCl समाधान तैयार करें ।
  2. 7 घंटे के लिए पशु फास्ट (भोजन को हटाने और पानी को बनाए रखने), तो एक प्रवण स्थिति में एक निरोधक में सचेत खरगोश जगह है । ग्लूकोज मीटर तैयार (मीटर में एक नई पट्टी डालें), और एक नुकीला का उपयोग कर बाएं कान सीमांत नस से पहला नमूना लेने के लिए रक्त की एक बूंद पाने के लिए । फिर परीक्षण पट्टी के साथ रक्त ड्रॉप स्पर्श और ग्लूकोज मीटर का उपयोग कर रक्त शर्करा के स्तर को मापने उपवास glycemia निर्धारित करने के लिए.
  3. Cannulate एक डिस्पोजेबल कैथेटर (18-22 जी) के साथ सही कान सीमांत नस और एक ६०% ग्लूकोज समाधान की एक बोल्स सुई (०.६ g ·kg-1).
    नोट: बोल्स तैयार करने के लिए, ग्लूकोज स्टॉक में 1 मिलीलीटर/
  4. नुकीला (रक्त की एक बूंद) पर 15, 30, ६०, ९०, १२०, और १८० मिनट के बाद ग्लूकोज इंजेक्शन का उपयोग कर रक्त के नमूने ले लो और उन्हें के रूप में ३.२ में ग्लूकोज मीटर के साथ विश्लेषण.
  5. डिस्पोजेबल कैथेटर निकालें और एक धुंध के साथ कैथेटर प्रविष्टि की साइट चुटकी । एक बार रक्त coagulated है, धुंध को हटाने और पशु की स्थिति की जांच करें ।

4. ब्लड प्रेशर

  1. एक दबाव transducer, ०.९% NaCl, एक तीन तरह टोंटी, एक एंपलीफायर के साथ एक 10 मिलीलीटर सिरिंज, और अधिग्रहण सॉफ्टवेयर के साथ एक पीसी/लैपटॉप सहित अधिग्रहण प्रणाली तैयार (रक्त दबाव रिकॉर्डिंग के लिए) ।
  2. उपकरण सेट करें । पहला, तीन तरह के टोंटी और सिरिंज को प्रेशर transducer में, transducer और कैथेटर के बीच रखें, और प्रेशर transducer को एम्पलीफायर से कनेक्ट करें । तो पीसी के लिए एम्पलीफायर कनेक्ट/
  3. दबाव transducer अंशांकन निर्माता की सिफारिशों के अनुसार प्रदर्शन करते हैं ।
  4. प्रवण स्थिति में एक खरगोश निरोधक में जागरूक जानवर रखें । cannulation से पहले कान गर्म, तो सामयिक प्रविष्टि की साइट के आसपास कान में एक स्थानीय संवेदनाहारी (२.५% lidocaine/prilocaine) लागू होते हैं । धीरे क्षेत्र जहां संवहनी पैकेज को आसानी से धमनी की पहचान चलाता है नल । फिर एक बाँझ कैथेटर (18-22 ग्राम) को बाएँ कान में केंद्रीय धमनी में डालें. संयम को ढीला और जानवर 30 मिनट के लिए चुप रहने के लिए अनुमति देते हैं ।
  5. रिकॉर्ड रक्तचाप लगातार 20 मिनट के लिए धमनी कैथेटर से सीधे, दबाव transducer दिल के स्तर पर पशु के बगल में तैनात रखने (नमूना आवृत्ति: 1 KHz, चित्रा 5Bदेखें).
    नोट: रक्त जमावट हस्तक्षेप (बीपी सिग्नल खो देता है आयाम या गायब हो जाता है) से मुक्त रिकॉर्डिंग (बीपी) रक्तचाप रखने के लिए, एक NaCl (०.९%) इंजेक्शन किया जाना चाहिए । तीन तरह टोंटी का उपयोग करना, transducer से कैथेटर के लिए चला जाता है कि सर्किट को बंद करें, सर्किट है कि कैथेटर के लिए सिरिंज से चला जाता है खोलने, और 1-2 मिलीलीटर सुई. यह कैथेटर में फार्म कर सकते हैं कि रक्त के थक्के को दूर करेगा । फिर, transducer और कैथेटर के बीच सर्किट खोलें, और संकेत बरामद किया गया है एक बार रिकॉर्डिंग जारी.
  6. रिकॉर्डिंग समाप्त हो गया है एक बार, कैथेटर और खून की कमी को रोकने के लिए कैथेटर प्रविष्टि की साइट में एक धुंध के साथ चुटकी निकालें । एक बार रक्त coagulated है, धुंध को दूर करने और पशु की स्थिति की जांच करें ।

5. प्लाज्मा माप

नोट: यह प्रक्रियाओं दिन के एक ही समय (यानी, 2-3 बजे) शुरू करने के लिए सलाह दी जाती है ।

  1. तेजी से 7 ज के लिए पशु (भोजन को हटाने और पानी को बनाए रखने), तो प्रवण स्थिति में एक निरोधक में चेतन जानवर जगह और बाएं कान सीमांत नस में एक बाँझ 21 जी सुई डालें । एक बार रक्त ड्रिप शुरू होता है, पहली बूंद त्यागें और EDTA ट्यूबों में रक्त के नमूनों को इकट्ठा करने के लिए ट्यूब में संकेत स्तर तक । बर्फ पर नमूनों की दुकान ।
  2. १,५०० x g, 15 मिनट, 4 डिग्री सेल्सियस पर रक्त के नमूने केंद्रापसारक । केंद्रापसारक के बाद, एक पिपेट का उपयोग कर प्लाज्मा सक्शन और २५० µ एल के aliquots तैयार
  3. ताजा नमूनों का तुरंत विश्लेषण करें । बुनियादी नियंत्रण मानकों के रूप में इस प्रकार हैं: ट्राइग्लिसराइड्स, कुल कोलेस्ट्रॉल, एचडीएल, और एलडीएल कोलेस्ट्रॉल.
    नोट: नमूने हौसले से विश्लेषण नहीं एक-८० डिग्री सेल्सियस फ्रीजर में तुरंत संग्रहीत किया जाना चाहिए । प्लाज्मा नमूनों से रक्त ग्लूकोज का विश्लेषण करने में रुचि रखते हैं, तो रक्त ग्लूकोज परीक्षण EDTA के बजाय फ्लोराइड Oxalate के साथ ट्यूबों का उपयोग करना चाहिए.

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Representative Results

मेट्स चयापचय और हृदय विषमताओं का एक क्लस्टर का प्रतिनिधित्व करता है जिसका अध्ययन प्रयोगात्मक मॉडलों के उपयोग द्वारा सुविधा हो सकती है । दरअसल, मेट्स द्वारा उत्पादित रोग remodeling अंतर्निहित तंत्र स्पष्ट करने के लिए, एक प्रयोगात्मक मॉडल है कि उचित मानव हालत जैसा दिखता है और अनुसंधान के लिए उपयुक्त है की पसंद महत्वपूर्ण महत्व का है । यहां, हम एक संतृप्त वसा और सुक्रोज में उच्च आहार का उपयोग कर खरगोश में मेट्स प्रेरित करने के तरीके प्रस्तुत करते हैं, और इसके मूल्यांकन के लिए एक विस्तृत लक्षण वर्णन । बजाय एक आनुवंशिक रूप से संशोधित पशु मॉडल के आहार का उपयोग बहुत महत्व का है क्योंकि आहार पूरे शरीर को प्रभावित करता है चयापचय19, इस प्रकार निकट जो मानव मेट्स में होता है जैसी । हम दो कारकों के साथ एक कारक (मिश्रित मॉडल) ANOVA, एक दोहराया उपाय या "के भीतर" कारक (समय: पूर्व, सप्ताह 14 और 28 सप्ताह, विश्लेषण के आधार पर) और एक "के बीच कारक (समूह: नियंत्रण और मेट्स) सांख्यिकीय विश्लेषण के लिए इस्तेमाल किया । p < 0.05 होने पर माहात्म्य स्वीकार किया गया ।

उच्च वसा, उच्च सुक्रोज आहार अच्छी तरह से जानवरों द्वारा सहन किया है । 4 सप्ताह की एक acclimation अवधि के लिए उच्च वसा, उच्च सुक्रोज आहार पिछले खिला शासन से सही संक्रमण के लिए आवश्यक है । नियंत्रण समूह में पशु १२० जी चाउ, जो वयस्क खरगोश8के रखरखाव के लिए उपयुक्त होना दिखाया गया है खिलाया जाता है । मेट्स समूह में खरगोश प्रयोगात्मक प्रोटोकॉल (तालिका 2) के अंत तक वजन में उत्तरोत्तर वृद्धि हुई । पशु प्रति सप्ताह ५०-१०० जी हासिल करना चाहिए । यह महत्वपूर्ण है कि खरगोश पिंजरों में पर्याप्त जगह, प्रकाश, और पर्यावरण संवर्धन (चित्रा 2c) के साथ व्यक्तिगत रूप से स्थित हैं, और जानवरों की एक दैनिक जांच की जाती है । इसके अलावा एक दैनिक आधार पर, चाउ और पेय का सेवन पर्यवेक्षण और पंजीकृत किया जाना चाहिए, ताकि वजन प्राप्त करने और संभव स्वास्थ्य समस्याओं का पता लगाने के लिए, के बाद से खरगोश आसानी से बल दिया और प्रतिक्रिया के लिए पोषण की खपत बंद हो सकता है । इसके अलावा, के बाद से उच्च वसा छर्रों बहुत अस्थिर हो जाते है और बहुत आसानी से निरंतरता खो, पाउडर जो खरगोश नहीं खाते में बदल रहा है, यह महत्वपूर्ण महत्व का है चाउ के दैनिक भागों बहुत ध्यान से तैयार (चित्रा 2a) । चित्रा 3ए में, हम ऊर्जा की खपत और उसके उतार चढ़ाव, मेट्स समूह में २५० से ८१५ किलो कैलोरी से लेकर व्यवहार का निरीक्षण कर सकते हैं । चित्रा बीमें, ऊर्जा के विभिंन स्रोतों (चाउ और पी) के सापेक्ष योगदान दर्शाया गया है । वहां 14 सप्ताह और 28 में महत्वपूर्ण समय है क्योंकि, प्रयोगात्मक प्रक्रियाओं द्वारा उत्पादित तनाव को देखते हुए, खरगोश चाउ और पानी की मात्रा कम हो सकती है । दैनिक ठहराव इस समस्या का तेजी से पहचान है, जो नियंत्रण चाउ (८०% उच्च वसा, 20% नियंत्रण) और 15% से 10%, या भी 5% से सुक्रोज समाधान कम शुरू करने से बचा जा सकता है की अनुमति देता है, जब तक पशुओं को अपने सामांय ठीक सेवन मान । पशुओं को भी वजन में वृद्धि, उदर परिधि और बीएमआई (तालिका 2) है, जो निकट जोखिम कारकों है कि मेट्स3को परिभाषित करने के साथ संबंधित है द्वारा दिखाए गए के रूप में केंद्रीय मोटापा विकसित की है ।

Figure 2
चित्रा 2: आहार प्रशासन. पैनल में एक, नियंत्रण चाउ (ऊपर) और उच्च वसा चाउ (नीचे) चित्रित कर रहे हैं, जोड़ा वसा के कारण दो के बीच मतभेद दिखा । आदेश में पाउडर है कि उच्च वसा छर्रों कम स्वादिष्ट बनाता है से बचने के लिए, यह एक छलनी का उपयोग करने के लिए अलग उच्च वसा गोली पाउडर (पैनल एक, नीचे) आवश्यक है । पैनल में बी, हम पीने के समाधान (बाएं) बनाने के लिए आवश्यक सामग्री का पालन कर सकते हैं, और यह कैसे एक शेयर समाधान करने के लिए पानी की मशीन में वितरित करने के लिए सलाह दी जाती है । अंत में, पशुओं के कल्याण के लिए बहुत महत्वपूर्ण है, और वे पिंजरों में व्यक्तिगत रूप से घर में होना चाहिए (सी) पर्याप्त स्थान और प्रकाश के साथ और, यदि संभव हो तो, पर्यावरण संवर्धन (यानी, प्लेटफार्मों, खिलौने, आदि) । कृपया यहां क्लिक करें इस आंकड़े का एक बड़ा संस्करण को देखने के लिए ।

Figure 3
चित्रा 3: ऊर्जा का सेवन । प्रयोगात्मक अवधि के 28 सप्ताह के दौरान साप्ताहिक सेवन के विकास पैनल में एक नियंत्रण और मेट्स के लिए दर्शाया गया है । रिश्तेदार का सेवन (प्रतिशत में) उच्च वसा चाउ से किलो कैलोरी की और मेट्स पशुओं के पीने के समाधान के पैनल में दिखाया गया है B. Control (n = 5), मेट्स (n = 6). त्रुटि पट्टियां: एसडी. arias से संशोधित-Mutis एट अल। 19 कृपया यहां क्लिक करें इस आंकड़े का एक बड़ा संस्करण को देखने के लिए ।

पूर्व आहार सप्ताह 14 सप्ताह 28
नियंत्रण मेट्स नियंत्रण मेट्स नियंत्रण मेट्स
वजन (किग्रा) दुपारी (0.15) (0.14) (0.12) 5.42 (0.17) 4.51 (0.13) 5.75 (0.6)
लंबाई (सेमी) 52.4 (1.6) 53.6 (1.7) 52.5 (0.8) 54.4 (1.7) 53.7 (0.7) 54.6 (0.8)
ऊँचाई (सेमी) 25.9 (0.7) 25.5 (1.1) 25.9 (2.2) 26.1 (5.3) 26.0 (1.0) 26.1 (1.5)
Abdom । परिधि (सेमी) 39.8 (1.7) 40.5 (1.4) 38.5 (1.5) 47.5 (2.2) 38.1 (1.0) 49.7 (3.5)
टिबियल लंबाई (सेमी) 16.4 (0.8) 16.3 (0.7) 16.7 (0.3) 16.7 (0.4) 17.4 (0.4) 16.8 (0.6)
बीएमआई (किग्रा/ 32.8 (1.9) 32.9 (2.6) 32.8 (1.2) 36.8 (1.9) 32.6 (2.1) 39.3 (6.0)

तालिका 2: रूपात्मक लक्षण. हम मतभेद जब नियंत्रण बनाम तुलना पाया मेट्स पर सप्ताह 14 और 28 में वजन (मुख्य प्रभाव p = ०.००३, η2 = ०.६; pairwise तुलना सप्ताह में 14 p < 0.001 और सप्ताह 28 p < 0.001), उदर परिधि (मुख्य प्रभाव p < 0.001, η2 = ०.९ pairwise सप्ताह में तुलना 14 p < 0.001 और सप्ताह 28 p < 0.001), और बीएमआई (मुख्य प्रभाव p = ०.०१६, η2 = ०.५; सप्ताह में pairwise तुलना 14 p < 0.001 और सप्ताह 28 p < 0.001) । नियंत्रण (n = 5) और मेट्स (n = 6) । मान (SD) मतलब के रूप में व्यक्त कर रहे हैं । arias से संशोधित-Mutis एट अल। 19.

उपवास रक्त ग्लूकोज के बारे में, IVGTT की प्रतिक्रिया ग्लूकोज homeostasis के लक्षण वर्णन में एक महत्वपूर्ण भूमिका निभाता है21. हम 14 सप्ताह में हल्के hyperglycemia का निरीक्षण, जो एक पठार तक पहुंचता है और 28 सप्ताह (चित्रा 4a) में समान मूल्यों का कहना है । वक्र (ईमेज) के नीचे का क्षेत्र भी मेट्स समूह (figure 4B) में बढ़ जाता है । भले ही कट-ऑफ मूल्यों की पहचान करने के लिए प्रकार द्वितीय मधुमेह के आधार पर खरगोशों में उपवास रक्त ग्लूकोज अभी तक नहीं पहचाना गया है19, इस प्रायोगिक प्रोटोकॉल के साथ, खरगोश उच्च वसा के 28 सप्ताह के लिए प्रस्तुत, उच्च सुक्रोज खिला पूर्व मधुमेह विकसित बिगड़ा उपवास ग्लूकोज और ग्लूकोज असहिष्णुता के साथ.

Figure 4
चित्रा 4: रक्त ग्लूकोज विनियमन. 14 और 28 हफ्तों में नियंत्रण और मेट्स पशुओं में IVGTT के परिणाम पैनल ए में दिखाया गया है । 0 से १८० मिनट तक वक्री (ईमेज) के तहत क्षेत्र के ठहराव को बॉक्स और मूंछों वाले प्लाट के साथ पैनल बी में दर्शाया गया है । यह पैरामीटर मेट्स पशुओं में सप्ताह 14 और 28 बनाम नियंत्रण (मुख्य प्रभाव p = ०.००१, η2 = ०.५; pairwise तुलना में सप्ताह में 14 p = ०.००१ और सप्ताह 28 p = ०.००२) में वृद्धि हुई है । नियंत्रण (n = 5), मेट्स (n = 6) । arias से संशोधित-Mutis एट अल। 19 कृपया यहां क्लिक करें इस आंकड़े का एक बड़ा संस्करण को देखने के लिए ।

उच्च रक्तचाप निकटता और सीधे मोटापे की गंभीरता से संबंधित है । खरगोशों एक उच्च वसा, उच्च सुक्रोज आहार 28 सप्ताह के लिए खिलाया सिस्टोलिक, डायस्टोलिक में वृद्धि हुई है, और पहले से ही 14 सप्ताह में रक्त दबाव मतलब दिखाया, और रक्तचाप में वृद्धि 28 सप्ताह में बनाए रखा है (चित्रा 5C - E) । रक्तचाप और बीएमआई22के बीच घनिष्ठ संबंध को देखते हुए यह बहुत महत्व का है सुनिश्चित करने के लिए कि पशुओं के वजन उत्तरोत्तर लाभ रक्तचाप में एक महत्वपूर्ण वृद्धि प्राप्त करने के लिए ।

Figure 5
चित्र 5: रक्तचाप में संशोधन. पैनल एक auricular धमनी में डाला कैथेटर दर्शाया गया है । नोट की, यह देखते हुए कि नस और auricular धमनी कान के दांत निकलना के माध्यम से बहुत बारीकी से चलाने के लिए, यह महत्वपूर्ण महत्व का है उंहें अंतर है । cannulation से पहले, यह कान गर्म करने के लिए सलाह दी जाती है और सामयिक संज्ञाहरण के बाद, जहां संवहनी पैकेज चलाता है धीरे क्षेत्र को टैप करने के लिए । धमनी में एक मोटा संवहनी दीवार और नस की तुलना में हल्का रंग है, और रक्त दालों मनाया जा सकता है । पैनल बी के साथ प्रायोगिक सेटअप से पता चलता है दबाव transducer, जो एक एंपलीफायर और रिकॉर्ड लगातार संकेत (बीपी रिकॉर्डिंग) से जुड़ा है । पैनलों सी और डी दिखाएँ बॉक्स और सिस्टोलिक और डायस्टोलिक रक्तचाप के व्हिस्की भूखंडों सप्ताह में 14 और 28 दोनों प्रयोगात्मक समूहों में. मतलब धमनी दबाव (नक्शा) पैनल ई में प्रस्तुत किया है । हम मतभेद जब नियंत्रण बनाम तुलना पाया मेट्स पर सप्ताह 14 और सिस्टोलिक में 28 (मुख्य प्रभाव p = ०.००३, η2 = ०.४; सप्ताह में 14 की तुलना pairwise p = ०.०२९ और सप्ताह 28 p = ०.०१३), डायस्टोलिक (मुख्य प्रभाव p = ०.०२७, η2 = ०.३; सप्ताह में pairwise तुलना 14 p = ०.०३६ और सप्ताह 28 p = ०.००१) और मानचित्र (मुख्य प्रभाव p = ०.००६, η2 = ०.४; pairwise तुलनाs पर सप्ताह 14 p = ०.०२७ और सप्ताह 28 p = ०.००१) । नियंत्रण (n = 5), मेट्स (n = 6) । arias से संशोधित-Mutis एट अल। 19 कृपया यहां क्लिक करें इस आंकड़े का एक बड़ा संस्करण को देखने के लिए ।

अंत में, मेट्स के विकास का आकलन करने के लिए, प्लाज्मा जैव रासायनिक मार्कर में परिवर्तन के एक मूल्यांकन की जरूरत है. इस पुरानी मॉडल में, हम लिपिड प्रोफ़ाइल में एक परिवर्तन के रूप में 14 सप्ताह के रूप में जल्दी मनाया, और इस परिवर्तन 28 सप्ताह तक स्थिर रहे, मतभेदों में आगे बढ़ बिना । प्लाज्मा लिपिड प्रोफाइल में संशोधन ट्राइग्लिसराइड्स और एलडीएल में वृद्धि, एचडीएल में कमी, और दोनों समय बिंदुओं (सप्ताह 14 और 28) (तालिका 3) में नियंत्रण बनाम मेट्स पशुओं में कुल कोलेस्ट्रॉल में कोई परिवर्तन की विशेषता है ।

सप्ताह 14 सप्ताह 28
नियंत्रण मेट्स नियंत्रण मेट्स
कुल कोलेस्ट्रॉल (एमजी · dL-1) 20.4 (2.3) 24.0 (9.1) 27.4 (15.7) 21.2 (4.4)
एचडीएल (मिलीग्राम · dL-1) 9.1 (4.2) 4.3 (1.7) 11.2 (4.2) 5.1 (2.9)
एलडीएल (एमजी · dL-1) 3.8 (1.1) 8.7 (4.5) 4.0 (1.2) 13.8 (9.3)
ट्राइग्लिसराइड्स (मिलीग्राम · dL-1) 71.2 (58.8) 118.0 (40.7) 30.2 (11.4) 76.8 (28.2)

तालिका 3: प्लाज्मा जैव रसायन का मूल्यांकन । हम मतभेदों को जब 14 सप्ताह और 28 एचडीएल में पर नियंत्रण बनाम मेट्स की तुलना पाया (मुख्य प्रभाव पी = ०.००८, η2 = ०.३; pairwise की तुलना में सप्ताह में 14 p = ०.००६ और सप्ताह 28 p = ०.०३७), एलडीएल (मुख्य प्रभाव p = ०.०४०, η2 = ०.२; सप्ताह में pairwise तुलना 14 p = ०.०२ 8 और सप्ताह 28 पी = ०.०३४), और ट्राइग्लिसराइड्स (मुख्य प्रभाव पी = ०.००२, η2 = ०.४; pairwise तुलना पर सप्ताह में 14 p = ०.००४ और सप्ताह 28 p = ०.००१). नियंत्रण (n = 5) और मेट्स (n = 6) । मान (SD) मतलब के रूप में व्यक्त कर रहे हैं । arias से संशोधित-Mutis एट अल। 19

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Discussion

एक उपयुक्त प्रयोगात्मक मॉडल की स्थापना मेट्स के विकास का अध्ययन करने के लिए एक अधिक सुसंगत और विश्वसनीय विधि प्रदान कर सकते हैं, और यह भी बुनियादी तंत्र है कि आबाद अंगों और प्रणालियों remodeling को समझने के लिए आवश्यक है । यहां, हम आहार प्रेरित मेट्स के एक प्रासंगिक प्रयोगात्मक मॉडल विकसित करने के लिए इस्तेमाल किया तरीकों का वर्णन और कैसे चयापचय और हृदय विषमता के इस क्लस्टर के मुख्य घटकों का आकलन करने के लिए कि इस मॉडल विशेषताएं: केंद्रीय मोटापा, उच्च रक्तचाप, ग्लूकोज असहिष्णुता, और कम एचडीएल, उच्च एलडीएल के साथ डिसलिपिडेमिया, और टीजी स्तर की वृद्धि हुई है ।

मॉडल की एक प्रमुख शक्ति है कि विकृति के नैदानिक अभिव्यक्ति से पहले की स्थिति का अध्ययन करने की क्षमता है । दरअसल, चयापचय परिवर्तन के बारे में, 28 हफ्तों में पशुओं प्रकार द्वितीय मधुमेह विकसित नहीं किया था और मधुमेह (चित्रा 4) के एक राज्य में थे. इसी तरह, प्लाज्मा जैव रासायनिक मार्करों एलडीएल और टीजी में वृद्धि के साथ लिपिड प्रोफाइल में एक स्पष्ट परिवर्तन दिखाया, एचडीएल में कमी, लेकिन कुल कोलेस्ट्रॉल में कोई परिवर्तन (तालिका 3), जो atherosclerosis के विकास में एक महत्वपूर्ण कारक है । हालांकि हम सिस्टोलिक, डायस्टोलिक में वृद्धि का निरीक्षण कर सकते हैं, और 28 सप्ताह में नक्शा (चित्रा 5), यह हल्के उच्च रक्तचाप पर विचार किया जा सकता है । कुल मिलाकर, उन चयापचय और हृदय मार्करों में प्रभाव मामूली हैं, लेकिन इस मॉडल से पहले राज्य के अनुसंधान को सक्षम कर सकते है प्रकट (और ज्यादातर मामलों में अपरिवर्तनीय) विकृति विज्ञान, इस प्रकार के पूर्व नैदानिक और नैदानिक की पहचान की अनुमति मार्करों कि जोखिम में रोगियों का पता लगाने की अनुमति हो सकती है ।

इसके अलावा, अंय मेट्स पशु मॉडल (माउस, चूहा, और कुत्ते) के विपरीत, सहज या ट्रांसजेनिक खरगोश मॉडल मेट्स के सभी घटकों को विकसित कर सकते हैं । दिलचस्प है, यह बताया गया है कि मेट्स के विभिंन घटकों के संयोजन हृदय जोखिम बढ़ाना कर सकते हैं । वास्तव में, मेट्स के अधिक घटकों23दिखाई देते हैं जब उच्च रक्तचाप द्वारा उत्पादित रोग remodeling बढ़ जाता है । इस प्रयोगात्मक मॉडल अंतर्निहित तंत्र के अध्ययन की अनुमति, और विभिंन घटकों के संयुक्त प्रभाव सकता है । इसके अलावा, यह देखते हुए कि आहार पूरे शरीर को प्रभावित करता है चयापचय, एक आहार का उपयोग-प्रेरित मॉडल महत्वपूर्ण महत्व है, बारीकी से अनुकरण क्या मानव मेट्स में होता है19.

पिछले है, लेकिन कम महत्वपूर्ण ताकत नहीं, प्रासंगिकता और शोधों अनुसंधान और आर्थिक लागत पर प्रभाव के बीच संतुलन है । एक तरफ हम सूअर मॉडल मिल जाए, बहुत मनुष्यों के समान है, लेकिन समय, संसाधनों के मामले में बहुत महंगा है, और आर्थिक लागत । दूसरी तरफ, हम मॉडल है, जो बहुत कम लागत के साथ लागू करने के लिए आसान कर रहे है कुतर दिया है, लेकिन एक कम सामांयीकरण शक्ति है । खरगोश मॉडल मध्य बिंदु का प्रतिनिधित्व करता है, क्योंकि यह बहुत से विभिंन प्रकार के अध्ययन के लिए लचीला है, जबकि बड़े पशु मॉडलों की कमियां से कुछ परहेज है, और इसी तरह के hemodynamic और neurohumoral परिवर्तनों को दिखाता है मानव मेट्स में मनाया8, 10,19.

वर्णित विधियों की निम्न सीमाएँ मानी जानी चाहिए. केंद्रीय मोटापा और शरीर में वसा वितरण के संबंध में, चुंबकीय अनुनाद इमेजिंग के उपयोग के सोने के मानक होगा, यदि उपलब्ध है, अंयथा 28 सप्ताह के अंत में आंत वसा के ठहराव का उपयोग करें । अनुदैर्ध्य अध्ययन के लिए अंय गैर इनवेसिव तरीकों, एक्स-रे गणना टोमोग्राफी के रूप में, और अधिक पर्याप्त होगा24। हम उदर परिधि और बीएमआई के बजाय मापा (तालिका 2), जो भी मध्य मोटापे का एक उपाय के रूप में खरगोशों में कई अध्ययनों में इस्तेमाल किया गया है25,11,26. टिबियल लंबाई माप भी echography या एक पैर रेडियोग्राफी का उपयोग कर अधिक सटीक हो सकता है । यदि इस जीर्ण मॉडल में ग्लूकोज असहिष्णुता के कारण इंसुलिन प्रतिरोध या इंसुलिन उत्पादन में कमी आई है स्थापित करने के लिए, इंसुलिन प्रतिरोध एक इंसुलिन सहिष्णुता परीक्षण का उपयोग कर निर्धारित किया जाना चाहिए या उपवास इंसुलिन का स्तर निर्धारित.

अंत में, मॉडल को बेहतर बनाने के क्रम में, कई उपाय किए जा सकते हैं । हम शायद alloxan इंजेक्शन और उच्च वसा, उच्च सुक्रोज आहार की संक्षिप्त अवधि के संयोजन के साथ glycaemia में एक तेजी से वृद्धि प्राप्त हो सकता है, लेकिन तब phenotype केवल आहार के लिए जिंमेदार ठहराया नहीं जा सकता है । उंर भी एक महत्वपूर्ण भूमिका निभा सकता है, क्योंकि हम युवा वयस्क खरगोश के साथ काम किया (४.५ महीने पुराने जब पशुओं पशु सुविधाओं में आ, १२.५-13 महीने प्रयोगात्मक प्रोटोकॉल के अंत तक पुराने) और मेट्स अक्सर बड़ी उंर में होता है27। दुर्भाग्य से, पुराने खरगोश व्यावसायिक रूप से उपलब्ध नहीं थे । यह पुराने जानवरों में इस मॉडल का परीक्षण और अगर phenotype बढ़ रहा है का पालन दिलचस्प होगा ।

प्रयोगशाला खरगोशों में मेट्स के इस प्रयोगात्मक मॉडल के विकास के लिए यहां प्रस्तुत तरीकों के लिए एक महत्वपूर्ण उपकरण प्रदान करना चाहिए अध्ययन के लिए बुनियादी तंत्र स्पष्ट में मेट्स द्वारा उत्पादित रोग remodeling अंतर्निहित अंगों और प्रणालियों, और इस जटिल विकृति की समझ हासिल करने के लिए । अंत में, के बाद से NZW खरगोश आसीन जानवर हैं, इस आहार प्रेरित मॉडल अध्ययन करने के लिए उपयोगी हो सकता है कैसे पैथोलॉजी के विभिंन घटकों से एक समान तरीके से विकसित मानव मेट्स में होता है, और समझने के लिए नए दृष्टिकोण की अनुमति सकता है pathophysiological रोग की प्रगति में शामिल तंत्र, नैदानिक और नैदानिक मार्करों की पहचान करने के लिए जोखिम पर रोगियों की पहचान, या यहां तक कि इस जटिल विकृति के उपचार के लिए नए चिकित्सीय दृष्टिकोण का परीक्षण ।

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Disclosures

लेखकों की घोषणा है कि वे कोई प्रतिस्पर्धा वित्तीय हितों की है ।

Acknowledgments

यह काम Generalitat Valenciana (GV2015-062), Universitat de València (यूवी-INV-PRECOMP14-206372) को MZ, Generalitat Valenciana (PROMETEOII/2014/037) और Instituto डे Salud कार्लोस III-FEDER फंड्स (CIBERCV CB16/11/0486) से FJC तक सपोर्ट किया गया ।

Materials

Name Company Catalog Number Comments
Veterinary scale SOEHNLE 7858 Scale
https://www.soehnle-professional.com/en/productgroup/details/103/veterinary-scale
Shovel for aluminum feed COPELE 10308 Shovel for aluminum feed
http://copele.com/es/herramientas/48-pala-para-pienso-de-aluminio.html
Balance PCE Ibérica PCE-TB 15 Balance
http://www.pce-iberica.es/medidor-detalles-tecnicos/balanzas/balanza-compacta-pce-bdm.htm
Strainer (20 cm diam.) ZWILLING 39643-020-0 Strainer
https://es.zwilling-shop.com/Menaje-del-hogar/Menaje-de-cocina/Menaje-especial/Accesorios/Colador-20-cm-ZWILLING-39643-020-0.html
Bowl ZWILLING 40850-751-0 Scale
https://www.soehnle-professional.com/en/productgroup/details/103/veterinary-scale
Funnel BT Ingenieros not available Funnel
http://www.bt-ingenieros.com/fluidos-y-combustibles/961-juego-de-4-embudos-de-plastico.html?gclid=EAIaIQobChMIuInui_y-1QIVASjTCh28Zwf-EAQYBSABEgK7xPD_BwE
Introcan Certo 22G blue B Braun 4251318 Peripheral intravenous catheter
http://www.bbraun-vetcare.es/producto/introcan-
Propofol Lipuro 10 mg/ml vial 20 ml B Braun 3544761VET General intravenous anesthetic
http://www.bbraun-vetcare.es/producto/propofol-lipuro-1-
FisioVet serum solution 500ml B Braun 472779 Scale
https://www.soehnle-professional.com/en/productgroup/details/103/veterinary-scale
Askina Film Vet 1,25cm x 5m B Braun OCT13501 Plastic Plaster
http://www.bbraun-vetcare.es/producto/askina-film-vet
Askina Film Vet 2,50cm x 5m B Braun OCT13502 Plastic Plaster
http://www.bbraun-vetcare.es/producto/askina-film-vet
Injekt siringe 10ml luer B Braun 4606108V Injection-aspiration syringe of two single-use bodies
http://www.bbraun-vetcare.es/producto/injekt-
Seca 201 seca seca 201 Ergonomic tape for measuring perimeters
https://www.seca.com/es_es/productos/todos-los-productos/detalles-del-producto/seca201.html#referred
Sterican 21Gx1" - 0,8x25mm verde B Braun 4657543 Single Use Hypodermic Needle
http://www.bbraun-vetcare.es/producto/agujas-hipodermicas-sterican-
CONTOURNEXT-Meter BAYER 84413470 Blood glucose analysis system
http://www.contournextstore.com/en/contour-next-meter-2
CONTOUR NEXT test strips BAYER 83624788 Blood glucose test strips
http://www.contournextstore.com/en/contour-next-test-strips-100-ct-package
MICROLET NEXT LANCING DEVICE BAYER 6702 Lancing device
http://www.contournextstore.com/en/new-microlet-next-lancing-device
MICROLET 2 Colored Lancets BAYER 81264857 Ultra-thin sterile lancet for capillary puncture
http://www.contournextstore.com/en/microlet2-colored-lancets-100s
Injekt 20ml luer siringe B Braun 4606205V Scale
https://www.soehnle-professional.com/en/productgroup/details/103/veterinary-scale
Askina Mullkompressen 7,5x7,5cm - sterile B Braun 9031219N Sterile gauze packets in envelopes
http://www.bbraun-vetcare.es/producto/askina-mullkompressen-esteril
Emla lidocaine/prilocaine AstraZeneca not available Local anesthetics
https://www.astrazeneca.es/areas-terapeuticas/neurociencias.html
Introcan Certo 18G short B Braun 4251342 Peripheral intravenous catheter
http://www.bbraun-vetcare.es/producto/introcan-
Introcan Certo 20G B Braun 4251326 Peripheral intravenous catheter
http://www.bbraun-vetcare.es/producto/introcan-
Blood Pressure Transducers-MA1 72-4497 Harvard Apparatus 724497 Transducer for monitoring blood pressure
http://www.harvardapparatus.com/physiology/physiological-measurements/transducers/pressure-transducers/research-grade-pressure-transducers.html
PowerLab 2/26 AD Instruments ML826 Amplifier
https://www.adinstruments.com/products/powerlab
LabChart ver. 6 AD Instruments not available Acquisition software
https://www.adinstruments.com/products/labchart
Animal Bio Amp AD Instruments FE136 Amplifier
https://www.adinstruments.com/products/bio-amps#product-FE136
K2EDTA 7.2mg BD 367861 Blood collection tubes
http://catalog.bd.com/nexus-ecat/getProductDetail?productId=367861
Centrifuge SciQuip 2-16KL Centrifuge
http://www.sigma-centrifuges.co.uk/store/products/refrigerated-sigma-2-16k-centrifuge/
Eppendorf Reference 2, 100 – 1000 μL Eppendorf 4920000083 Pipette
https://online-shop.eppendorf.es/ES-es/Pipeteo-44563/Pipetas-44564/Eppendorf-Reference2-PF-42806.html
Eppendorf Safe-Lock Tubes, 0.5 mL Eppendorf 30121023 Tubes
https://online-shop.eppendorf.es/ES-es/Puntas-tubos-y-placas-44512/Tubos-44515/Eppendorf-Safe-Lock-Tubes-PF-8863.html
NZW rabbits (16-18 weeks old) Granja San Bernardo not available New Zealand White rabbits
http://www.granjasanbernardo.com/en/welcome/
Sucrose  Sigma S0389-5KG Sucrose for drinking solution
http://www.sigmaaldrich.com/catalog/product/sigma/s0389?lang=es&region=ES
Rabbit maintenance control diet Ssniff V2333-000 Control diet
http://www.ssniff.com/
Rabbit high-fat diet Ssniff S9052-E020 High-fat diet
http://www.ssniff.com/
Rabbit rack and drinker Sodispan not available Rack for rabbits
https://www.sodispan.com/jaulas-y-racks/racks-conejo-y-cobaya/
Rabbit restrainer Zoonlab 3045601 http://www.zoonlab.de/en/index.html

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Arias-Mutis, Ó. J., Genovés, P., Calvo, C. J., Díaz, A., Parra, G., Such-Miquel, L., Such, L., Alberola, A., Chorro, F. J., Zarzoso, M. An Experimental Model of Diet-Induced Metabolic Syndrome in Rabbit: Methodological Considerations, Development, and Assessment. J. Vis. Exp. (134), e57117, doi:10.3791/57117 (2018).

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