Waiting
Login processing...

Trial ends in Request Full Access Tell Your Colleague About Jove
Click here for the English version

Neuroscience

Нервно-сосудистого сети Explorer 2.0: Простой инструмент для изучения и обмена базы данных вызвали Optogenetically Vasomotion в коре мыши в естественных условиях

Published: May 4, 2018 doi: 10.3791/57214

Summary

Графический интерфейс пользователя для изучения и обмена базы данных optogenetically индуцированной сосудистой реакции в мыши соматосенсорной коры в vivo измеряется микроскопии 2-Фотон представлен. Она позволяет просматривать данные, на основе критериев отбора, в среднем, локализация измерений в 3D-объем сосудистую и экспорта данных.

Abstract

Важность обмена экспериментальных данных в неврологии растет с количество и сложность полученных данных и различные методы, используемые для получения и обработки этих данных. Однако большинство экспериментальных данных, особенно от отдельных исследований обычного размера лабораторий никогда не достигают более широкого исследовательского сообщества. Графический пользовательский интерфейс (GUI) двигатель называется нервно-сосудистого сети Explorer 2.0 (Северный 2.0) была создана как инструмент для простых и недорогостоящих обмена и изучения сосудистой визуализации данных. ССВ-2.0 взаимодействует с базой данных, содержащей вызвала optogenetically дилатация/сужения время курсы отдельных судов измеряется в мышей соматосенсорной коры в естественных условиях 2-Фотон микроскопии. ССВ-2.0 позволяет выбор и отображение времени курсы на основе различных критериев (тема, порядок ветвления, корковых глубины, диаметр сосуда, артериол дерево) а также простое математическое (например. усреднения, пик нормализация) и Экспорт данных. Он поддерживает визуализации сосудистой сети в 3D и позволяет локализации измерений диаметра отдельных функциональных судна в пределах сосудистого деревья.

ССВ-2.0, его исходный код и соответствующей базы данных могут свободно загружаться из UCSD нервно-сосудистого Imaging лаборатории сайт1. Исходный код может использоваться пользователями для изучения соответствующей базы данных или как шаблон для databasing и делить их собственные экспериментальные результаты, представила в соответствующий формат.

Introduction

Мозг считается одним из самых сложных органов и желание распутать его сложная функция является неизменной. Она в настоящее время изучается в различных масштабах от молекулярного до уровня поведенческих, используя широкую палитру инструментов2,3,4,5,6,7,8 . Количество неоднородность экспериментальных данных растет с беспрецедентной скоростью. Осознание необходимости совместного использования экспериментальных данных, Организации и стандартизации растет с количеством полученных данных. Стало очевидным, что Нейроинформатика будет играть решающую роль в интеграции экспериментальных данных через весы в модели мозга функции и дисфункции9,10.

С этой целью некоторых исследований, особенно крупных, были в состоянии выделять ресурсы, чтобы сделать их результаты через обширные базы данных11,12,13,14,15. Однако огромное количество экспериментальных данных из отдельных исследований и обычного размера лаборатории никогда не достигла широкого исследовательского сообщества. Это главным образом по двум причинам: во-первых, более посвященный время необходимо создать базу данных и инструменты, которые позволят пользователю взаимодействовать с базой данных; и во-вторых, для поддержки этих задач необходима больше денег. Руководствуясь этими проблемами, MATLAB на основе графического пользовательского интерфейса (GUI) двигатель называется нервно-сосудистого сети Explorer 2.0 (Северный 2.0)16 была разработана как простой и недорогой инструмент для databasing, совместного использования и изучения сосудистой визуализации данных. Эта рукопись дается руководство по эксплуатации ССВ 2.0 и связанная база данных экспериментальных данных.

ССВ-2.0 уже двигателем второго поколения программного обеспечения. Первое поколение, называется нервно-сосудистого сети Explorer 1.0 (Северный 1.0)17 был построен, чтобы взаимодействовать с базой данных чувственного вызывали вазодилатация в крыса первичной соматосенсорной коры (SI) в естественных условиях измеряется 2-Фотон микроскопии18. СВ-1.0, его исходный код, а также связанная база данных свободно скачать как ZIP-файл под названием «Северный Тянь 1» от UCSD нервно-сосудистого Imaging лаборатории сайт1. Дополнительные сведения о СВ 1.0 и связанную базу данных можно найти в17.

Второе поколение, Северный 2.0, взаимодействует с базой данных optogenetically вызывают расширение сосудов отдельных мышей SI в vivo измеряется 2-Фотон микроскопии20. Пользователь может просматривать, выберите и визуализировать данные, основанные на выбор категорий, таких как корковых глубины, ветвления порядок, диаметр сосуда, животные тему или конкретного артериол дерева. GUI далее выполняет простые математические операции, такие как усреднение и пик нормализации в выбранных категориях. ССВ-2.0 позволяет просматривать и просматривать изображения захвата 3D томов сосудистую, а также определить расположение функциональных измерений в пределах сосудистого деревья. Эта функция может использоваться для реконструкции сосудов морфологии в 3D и заполнить их с реальной сингл судно сосудисто движение измерения. Эти реконструкций в свою очередь могут быть включены в вычислительных моделях мозга функции21,22. ССВ-2.0, его исходный код и связанная база данных свободно скачать как ZIP-файл под названием «Северный 2.0 HDbase v1.0» от UCSD нервно-сосудистого Imaging лаборатории сайт1.

ССВ-2.0 работает с базой данных под названием «vdb.mat». Эта база данных является матрица, содержащая временные профили (время курсы) одно судно диаметр изменений вызываемую optogenetic стимул и измеряется в разных местах артериол деревьев. Каждый раз курс был рассчитан с помощью пользовательской программы. Он вычисляет относительное изменение диаметра судна от расширения профиля интенсивности флуоресценции, полученные путем сканирования через судна. Флуоресцентный контраст был представлен внутрисосудистого введения флуоресцеин Изотиоцианаты (FITC)-помечены декстрана. Дополнительные сведения о данных и анализ процедур пожалуйста, смотрите20,23. База данных имеет в общей сложности 305 время курсы (т.е. записей базы данных). В дополнение к изменению диаметра, каждая запись в базе данных содержится массив дополнительных метаданных, которые (1) количественно время курс (2) измеренные судна и описать (3) измерения местоположения в 3D-объем корковых сосудистую. Метаданные включают время начала, пиковых амплитудно, пиковой амплитудой времени, корковых глубины, порядок ветвления, диаметр судна на базовой линии, путь к оригинальных исходных образов и стеки 3D изображений для каждого измерения и низким масштаб карты поверхности мозга сосудистую. Пожалуйста, смотрите все параметры в метаданных, перечислены и подробно описаны ранее в таблице 116.

ССВ-2.0 взаимодействует с ссылкой изображения, которые являются что сканирует X-Y плоскости, где произошло измерения диаметра. Каждая запись базы данных имеет один соответствующий исходный образ с именем ссылки, отображаемые в GUI. Каждая запись базы данных также имеет связанный стек изображений (3D стека) захвата 3D-объем сосудов дерева, в течение которого произошло измерения. Графический интерфейс позволяет выбрать запись определенной базы данных и отображения соответствующего исходного образа, а также 3D стека. Он также направляет пользователю найти соответствующий исходный образ и фрейм в стеке 3D (те же функции можно найти в оба изображения). Все стек и исходных образов в их полном разрешении (1024 пикселей x 1024 пикселей), включены в папки hana_stk и hana_refs, соответственно. Низкий масштаб карты мозга сосудистую, включены в папку «карты». Все три папки, а также базы данных матрицы «vdb.mat» загружаются в ZIP-файл «Северный 2.0 HDbase v1.0» от UCSD нервно-сосудистого Imaging лаборатории сайт1 и сохранены в корневой папке ССВ 2.0 во время процесса установки.

Графический интерфейс был разработан как набор четырех панелей (Группа 1 (основные группы) – Группа 4), которые открываются последовательно, как пользователь исследует базы данных и выбирает конкретные данные, основанные на категориях выбора. Каждая группа состоит из двух основных частей: (1) правой колонке предоставляет возможность для взаимодействия с базой данных, выбрав параметры и категории данных и отображает важную информацию из метаданных; (2 левый столбец отображает данные в виде времени курсы (диаметр изменения во времени) и скаттер участки. Существует четыре типа точечных участков показано начало (1) дилатация (2) время дилатация пик (3) максимальный диаметр изменения (пик амплитуда) и (4) базовый диаметр (диаметр до стимуляции) как функции корковых глубины. Пользователь имеет возможность отображать среднее время курсы и значений для выбранных данных, сгруппированных корковых глубины или порядка ветвления. Это должно подчеркнуть особенность градиента диаметр изменения поведения с увеличением глубины и ветвление порядка20. ССВ-2.0 позволяет пользователю экспорт выбранного подмножества данных в формате «xls», «.csv» или «.mat».

Subscription Required. Please recommend JoVE to your librarian.

Protocol

1. Установка СВ 2.0

  1. Перейти к UCSD нервно-сосудистого Imaging лаборатории сайт1 и щелкните левой кнопкой мыши на «Северный 2.0 HDbase v1.0» скачать сжатые программные файлы в нужное место на вашем компьютере.
    Примечание: Северный 2.0 требует Windows операционной системы версии 7-10, по крайней мере 2,8 ГБ свободного места для загрузки ZIP-файл и 6,9 ГБ для установки программы.
  2. Распакуйте «NNE2_HDbase_v1.0.zip».
    Примечание: Разархивируются папка NNE2 содержит 10 файлов: «hana_refs.tar.gz», «hana_stk.tar.gz», «maps.tgz», «MCRInstaller.exe», «NNE2.exe», «NNE2.zip», «NNE2_README.txt», «source.zip», «users_guide.pdf» и «vdb.mat».
  3. Северный 2.0 установите, следуя инструкциям в «NNE2_README.txt».

2. Запуск Северный 2.0

  1. Запустите Северный 2.0 с «NNE2.exe».
  2. Группа 1 (основные группы): Выберите подмножество данных (рис. 1). Изображения в левом столбце на главной панели показывают графики время курсы и параметры всех записей для «vdb.mat» (рис. 1).
    1. Выберите диапазон для Корковой глубины в правой колонке группы. Тип в диапазоне глубины в формате [dмин dМакс], где dмин является минимальная глубина и dМакс является максимальная глубина.
      Примечание: Данные была измерена на глубине 30-560 мкм.
    2. Выберите Порядок ветвления в правой колонке группы. Щелкните стрелку и выберите один из вариантов из списка (поверхности | Дайвинг ствола | Первый заказ филиалов | Выше порядок ветви).
    3. Выберите диапазон Базового диаметра в правой колонке группы. Введите его в формате [diaмин diaМакс], где диамин — это минимальный диаметр и диаметрМакс максимальный диаметр.
    4. Выберите темы (животных в соответствии с даты приобретения) в правой колонке группы. Щелкните левой кнопкой мыши на стрелку и выбрать один из доступных вариантов. Кроме того выберите данные из всех предметов по левой клавише мыши все в синий прямоугольник.
    5. Нажмите кнопку SUBMIT для отображения и изучить выбранные данные в группе 2.
  3. Группа 2: Изучение выбранного подмножества данных и дальнейшее уточнение данных (Рисунок 2).
    1. Выберите тип для группы усреднения данных по левой клавише мыши на соответствующую кнопку в правой колонке на вершине. Выберите: Avg кортикального слоя глубиной или Avg, порядка ветвления.
      Примечание: Фактические выбор подсвечивается зеленым цветом ниже (Рисунок 2).
    2. Выберите данные, основанные на морфологию судна или теме. Щелкните левой кнопкой мыши, выберите все данные для дерева (один Дайвинг артериолы и его филиалов) или выбрать все данные для пожалуйста (животные тему).
    3. Отправить левой кнопкой мыши для отображения выбранных данных в левой части графики (1) индивидуальный время курсы (2) группы-в среднем время курсы и точечные (3) начало раз (4) время к пики (5) пик амплитуд и диаметров (6) базовых
    4. Щелкните левой кнопкой мыши на след в графе отдельных timecourses в столбце слева выбрать время курс.
      Примечание: Выбранный курс получает выделены в графе (пурпурный) и его время начала, время пик, пик амплитуды и базовый диаметр будет отмечен красными кругами на графиках ниже. Красные точки в точечные участки являются средние значения.
    5. Обратите внимание идентификаторы тема (Тема ID) и дерево (Tree ID) для выбранного времени курса в правой колонке внизу.
    6. При необходимости измените тип группы-усреднения, щелкнув соответствующий выбор верхней части правой колонке, а затем нажать кнопку Отправить и повторите шаги от 2.3.4.
    7. Щелкните правой кнопкой мыши группы 2 с крест курсор, чтобы просмотреть и изучить все следы для выбранной темы (Тема ID) или дерева (Дерево ID) в группе 3.
  4. Группа 3: Исследовать конечное подмножество данных и экспортировать их (рис. 3).
    1. Выберите время курс в графе верхней части левой колонки по левой клавише мыши на след: выбранный трассировки будут выделены на графе (пурпурный) и описательных параметров записи базы данных будет отображаться в верхней графе.
      Примечание: Среднее время курс отображается в густой черный (рис. 3).
    2. Обратите внимание, соответствующее время начала, время пик, пик амплитуды и базовый диаметр на графиках ниже.
    3. Щелкните кнопку Экспортировать набор в правой колонке для сохранения следов, отображается на верхнем графике в папку, где Северный 2.0 выполняется из.
      Примечание: Это действие сохраняет три файла: «vdb_subset.xls», «vdb_subset.csv» и «vdb_subset.mat», содержащий векторов изменения диаметра и время векторов; «vdb_subset.mat» также содержит описания параметров и информации от «vdb.mat».
    4. Для проверки всех данных «тема» вместо «дерево» закрыть панель 3, нажав [x], перезапуск Северный 2.0, повторите выбор категорий в группе 1 (шаги 2.2.1-2.2.5) и выберите все данные для субъекта в группе 2 (шаг 2.3.2).
    5. Щелкните правой кнопкой мыши в панели 3 с крест курсор, чтобы перейти к панели 4 исследовать ссылки изображений и 3D стеки для всех трассировок в верхнем графике Группа 3.
      Примечание: Группа 4 будет открыт, если вариант все данные для «дерево» был выбран в группе 2. Если вместо этого были выбраны все данные для «тема», пользователю будет предложено изменить свой выбор и направлены на панели 1.
  5. Группа 4: Локализация функциональных измерений в пределах эталонный образ и 3D изображение стека сосудистую (рис. 4).
    1. Выберите время курс по левой клавише мыши на нем в графе верхней части левой колонки.
      Примечание: Выбранный трассировки будут выделены на графе (пурпурный), и ее описательные сведения из метаданных будет отображаться на вершине.
    2. Изучите соответствующий исходный образ, который автоматически загружается из папки «hana_refs» в правой нижней части левой колонки.
    3. Изучите соответствующие стека 3D изображения загружены автоматически из папки «hana_stk» в левом нижнем углу левого столбца. Прокрутка через стек с помощью стрелок или ползунок ниже показателя.
      Примечание: Когда изображение стек достигает уровня исходного образа – т.е. на уровне измерения диаметра («Индекс стека» = «Ссылка»), изображение стека подчеркнул и указано как «Уровень кадра».
    4. Нажмите кнопку Экспорт в правой колонке для экспорта в файл «ref_stacks_trace.xls», который сохраняется в папку, где Северный 2.0 выполняется из выделенное время курс.
      Примечание: Файл содержит время вектор, диаметр изменения вектора, идентификатор субъекта, запись индекса, расположение исходного образа, местоположение 3D стека и номер образа стека для кадра уровня.
    5. Закройте панель 4, [x] идти обратно к группе 1.

Subscription Required. Please recommend JoVE to your librarian.

Representative Results

ССВ-2.0 и ассоциированных базы данных служат для просмотра и просмотра данных в базе данных, сортировать данные, основанные на критериях отбора, скачать выбранные данные и найти сосудистой измерений в течение соответствующего сосудистой дерева.

Группа 1 имеет выбор данных, основанные на категориях: «Корковой глубина», «Порядок ветвления», «Базовый диаметр» и «Темы» – Рисунок 1). Пожалуйста, обратите внимание, что в этом исследовании, никаких записей для поверхности артериол («поверхности») «Порядок ветвления» выбор категории. Если выбран этот параметр, «Не найдено записей – Поиск слишком ограничительный» диалоговое окно с предупреждением появляется и пользователю предлагается выбрать другой вариант. Это же предупреждение появится при наличии измерения, не удовлетворяющих выбранным критериям группы 1. В этом случае пользователь должен закрыть панель 1, нажав [x] и перезапустить программу.

Все изменения диаметра время курсы выполняет критерии, выбранный в группе 1 можно просмотреть в панели 2 (рис. 2). Пользователь может изучить все индивидуальные, время курсы, время группа-в среднем кортикального слоя глубиной или порядок ветвления и соответствующие значения «Время начала», «Пик амплитуды», «Время пик» и «Базовый диаметр» печать как функции глубины. Пользователь выбирает один раз курс из графа индивидуального времени курсы и исследует форму кривой, а также соответствующие численные характеристики в точечные участки.

Все данные, полученные в том же дереве животных или артериол могут быть изучены в Группа 3 (рис. 3). Таким же образом как и группа 2 пользователь выбирает один раз курс из графа индивидуального времени курсы и исследует форму кривой, а также соответствующие численные характеристики в точечные участки. При желании пользователь может экспортировать все данные из группы 3 в формате «xls», «csv» и «.mat». Эти файлы создаются или перезаписаны каждый раз, когда меры «Экспорт». Перед перезаписью файлов, диалоговое окно с предупреждением «собирается переписать vdb_subset.xls» выскакивает пользователю для переименования ранее экспортированные результаты. Пользователю следует убедиться, что ни один из экспортированных файлов открыты во время акции «Экспорт». Если один из файлов открыто диалоговое окно с предупреждением ' Ошибка экспорта файла Excel: Убедитесь, что vdb_subset.xls не открыт ' будет отображаться. В этом случае пользователь должен закрыть экспортированный файл и перезапустите Северный 2.0.

Все данные, полученные в рамках единого дерева артериол могут быть изучены в контексте 3D сосудистую в группе 4 (рис. 4). Выбор времени курс будет автоматически отображать связанные эталонный образ и стека 3D изображений, которые загружаются из папки «hana_refs» и «hana_stk», соответственно. Измеренной судно выделяется в его исходный образ с красный полупрозрачный прямоугольник в середине изображения. Пути сканирования помечен как красная линия пересечения измеренных судна. Если больше судов проверяются в течение одного измерения (красная линия пересекает несколько судов – рис. 4), пользователю необходимо учитывать порядок ветвления в «vdb.mat» или отображаться в GUI на вершине на графике время курсы («B. порядок») чтобы понять какие проверки принадлежит особое измерение. Ветвления порядок '0' этикетки Дайвинг стволы, '1' этикетки филиалы подключены непосредственно к Дайвинг стволы, ' 2' этикетки филиалов напрямую подключены к 1st порядок ветви и т.д. Чтобы определить соответствующие артериол дерево начиная с дайвинг противовоспали на поверхности мозга (видел в лучших изображений 3D стека), пользователь должен сослаться низкий масштаб карты, сохраняются в папке «карты». Эта карта является уникальным для каждого животного предмета и может быть расположен, используя идентификатор соответствующего вопроса (например, «022014.jpg»). Эта карта является изображение весь мозг воздействия с поверхности сосудистую. Дайвинг сегментов измеренных артериол помечены с дерева идентификаторы («дерево-ID») (рис. 5). Пользователь может экспортировать один выбранного времени курс вместе с информацией о соответствующей ссылкой изображения, 3D стека и положение измерения внутри стека в «ref_stacks_trace.xls». Аналогичным образом что касается «Экспорт» в группе 3, «ref_stacks_trace.xls» должны быть закрыты до принятия «Экспорт». Тот же тип предупреждения диалоги будут отображаться перед перезаписью экспортированный файл, или когда файл открыт во время акции «Экспорт». Пожалуйста, обратите внимание, что если есть отсутствует ссылка изображения для выбранной базы данных записи (9 записей в общей сложности), предупреждение ' не найдена ссылка изображения: индекс = ' будет отображаться вместо изображения ссылки в панели 4. Экспорт не доступен для этих записей, и пользователю будет предложено выбрать другой курс. Если пользователь выбирает элемент, для которого укладывают 3D не существует или не опорный кадр стека изображений был найден (31 и 52 записей, соответственно) записка * нет СТЕКА матч * будет отображаться поверх пустое изображение вместо стека 3D изображения в панели 4.

Figure 1
Рисунок 1: Группа 1 (основные группы) служит для выбора подмножества данных, основанных на выбор категорий. В шести графиков в левом столбце отображаются все данные из «vdb.mat». Правой колонке позволяет пользователю выбрать подмножество данных, выбрав корковой глубина | Порядок ветвления | Базовый диаметр | Темы. Пожалуйста, нажмите здесь, чтобы посмотреть большую версию этой фигуры.

Figure 2
Рисунок 2: Группа 2 позволяет изучение выбранного подмножества данных и дальнейшего совершенствования отбора. Правой колонке предлагает для вычисления среднего выбранных данных, основанные на категориях глубины или ветвления порядка (фактический выбор подсвечивается зеленым цветом). Левый столбец отображает данные, выполняя критерии отбора в группе 1 и средний тип, выбранный в правой колонке. Пользователь может выбрать время курс в верхний левый график (крест курсор) который получает выделенную (пурпурный). Соответствующие времена начала и пик, пик амплитуды и базовый диаметр кружил в красный цвет и идентификаторы записей отображаются в правой колонке внизу. Толстые красные точки в точечные участки Марк средние значения для подмножества фактических данных. Выбор «всех данных для дерева» против «все данные для пожалуйста» влияет на данные в следующие панели. Пожалуйста, нажмите здесь, чтобы посмотреть большую версию этой фигуры.

Figure 3
Рисунок 3: панель 3 позволяет изучать конечное подмножество данных и их экспорт. Пользователь может выбрать (крест курсор)-курс в графе верхней части левой колонки. Выбранный след получает выделенную (пурпурный) и запись метаданных отображается на верхней части графа. Одновременно начала соответствующего и пик, а также пик амплитуды и базовых диаметры отображаются на графиках ниже. ЭКСПОРТИРОВАТЬ установить кнопку в правой колонке позволяет экспортировать все время курсы из топ графа. Среднее время курс строится в густой черный. Пожалуйста, нажмите здесь, чтобы посмотреть большую версию этой фигуры.

Figure 4
Рисунок 4: Группа 4 позволяет локализации диаметр измерения в пределах эталонный образ и 3D стек сосудистую. Время курсы участок верхней части левой колонки идентичен с время курсы сюжет в группе 3. Пользователь может выбрать индивидуальный время курсы из верхней графа в левой колонке. Соответствующее изображение ссылка отображается внизу справа вместе со сведениями о метаданных: «Ref. изображение» (имя образа ссылки), «Глубина» (корковых глубина измерения) и «Масштаб» (масштаб изображения в мкм на пиксель). Соответствующие 3D стека отображается внизу слева наряду с описательные метаданные: «Индекс стека» (фактическое изображение номер в стеке), «Дельта» (вертикальное расстояние от верхнего изображения), «Предложение» (изображение номер в стеке, который соответствует эталонный образ и захватывает место измерения) и «Масштаб» (масштаб изображения в мкм на пиксель). Пожалуйста, обратите внимание, что глубина поверх исходного образа был введен вручную в ходе эксперимента и приблизительное. Он не соответствует точно значение «Дельта» уровня кадра стека изображений с тем, что поверхность мозга наклонен относительно плоскости изображения. Пожалуйста, нажмите здесь, чтобы посмотреть большую версию этой фигуры.

Figure 5
Рисунок 5: низкий увеличение карта поверхности сосудистую. Изображение захватывает подвергаются мозга регионе с надводных кораблей. Дайвинг сегментов измеренных артериол деревьев помечены с дерева идентификаторы («дерево ID»). Эти карты будут сохранены в папке «карты» в папке, где Северный 2.0 выполняется из. Пожалуйста, нажмите здесь, чтобы посмотреть большую версию этой фигуры.

Subscription Required. Please recommend JoVE to your librarian.

Discussion

ССВ-2.0 был написан для того, чтобы поделиться сосудистой визуализации данных конкретного исследования20 , но с целью разработки простой инструмент для обмена и изучения данных подобного рода другими пользователями. Исследователей, заинтересованных в проверке связанная база данных сосудистой данных могут использовать графический интерфейс для просмотра данных, выбора подмножества данных, сравнить их с их собственных экспериментальных результатов или обработать их с использованием их собственных вычислительных процедур. Пользователи, знакомые с MATLAB можно непосредственно использовать базы данных «vdb.mat», в то время как пользователи, используя другой тип языка программирования можно экспортировать данные в одном из альтернативных форматов («XLS» или «.csv»).

Исследователи, которые заинтересованы в обмене их собственных экспериментальных данных, используя ССВ 2.0 нужно структурировать результаты в матрицу аналогично «vdb.mat». Основные записи в эту базу данных должны быть время курсы любого рода в виде векторов и соответствующее время векторов. Параметры базы данных можно изменить или добавляется через Модульная структура GUI. Все ссылки на изображения, стеки изображений и облучения мозга карты (если применимо) должны быть собраны и на хранение вместе с базой данных и исполняемый GUI в Интернете (например, лаборатория веб-страницы или стороннего репозитория).

Исследователей, заинтересованных в использовании сосудистой измерений наряду с 3D сосудистой морфология в моделировании исследования функции мозга сначала можно исследовать данные с использованием графического интерфейса пользователя. После выбора нужного подмножества данных, они могут использовать метаданные экспортируются в «ref_stacks_trace.xls» наряду с переменными в «vdb.mat», 3D стека изображений, сохраненных в «hana_stk» и облучения мозга карт в «карты» реконструировать сосудистой морфология в 3D .

Наиболее важным этапом протокола является экспорт данных. Для правильного экспорта выбранных данных (из группы 3 и 4) важно закрыть все файлы, в которых данные должны быть экспортированы до принятия «Экспорт». Только тогда будут правильно перезаписаны файлы с фактическим выбор данных. Любые изменения в программу или устранения неполадок необходимо выполнить в исходный код.

ССВ-2.0 был разработан поделиться Временные профили, рассчитанное от линии сканов, которые были приобретены 2-Фотон микроскопии. Данных, исследовал Северный 2.0 поэтому не сырые интенсивности сканирует но скорее предварительно обработанные время курсы изменений относительного диаметра. Таким образом пользователи имеют возможность обрабатывать их сырья экспериментальные данные, используя свои собственные стандартные процедуры и программного обеспечения и использовать ССВ 2.0 в качестве шаблона для представления и обмена их результатами с другими исследователями. Не только диаметр сосудистых изменений, но в основном любое время зависимых сигнал измеряется с помощью методов различных измерений могут использоваться таким образом. Такие сигналы включают флуоресценции кальция24, натрия25, напряжения чувствительных красители26, генетически закодированный показателей для метаболитов27, парциальное давление кислорода (по2)28, насыщение крови кислородом (BOLD, 18, спектральных изображений29), кровотока (спекл изображений29) или электрофизиологии сигналов30. Условием использования ССВ 2.0 представляет собой базу данных в формате матрицы ' * .mat '. Это может быть достигнуто либо путем обработки данных непосредственно в MATLAB или с помощью инструментов для создания матрицы из других форматов (например, «xlsread(filename)» служит для чтения excel распространение листов в формате «.mat»). Использование ССВ 2.0 без MATLAB ограничивается изучения, загрузки и последующей обработки данных из текущей базы данных «vdb.mat».

ССВ-2.0 имеет потенциал, чтобы помочь распространению экспериментальных данных через широкий нейронауки исследовательского сообщества необходимо изучать и по сравнению с другими экспериментальных данных подобного рода содействие разработке стандартов для сбора данных и обработки 31. Северный 2.0 также может помочь, распространение данных через сообщество нейроинформатики, где она может использоваться в моделях неинвазивная изображений сигналов, таких как функциональной магнитно-резонансной томографии (МРТ)21. В то время как 2.0 ССВ не могут конкурировать с более сложных баз данных5,,3233,34, он может обеспечить бесшовных и готовые к использованию платформу для обмена экспериментальных данных без необходимости и databasing дополнительные обширные инвестиции.

Subscription Required. Please recommend JoVE to your librarian.

Disclosures

Авторы не имеют ничего сообщать.

Acknowledgments

Мы с благодарностью признаем поддержку от НИЗ (NS057198, EB00790, MH111359 и S10RR029050) и министерства образования, молодежи и спорта Чешской Республики (CEITEC 2020, LQ1601). KK был поддержан докторской стипендии от международного головная боль общества в 2014 году и научных и технологических исследований Совет Турции в 2015 году. MT была поддержана докторантура стипендий от немецкого фонда научных исследований (DFG й 2031/1).

Materials

Name Company Catalog Number Comments
MATLAB MathWorks program
Winrar Rarlabs program

DOWNLOAD MATERIALS LIST

References

  1. Neurovascular Imaging Laboratory. Use Our Data. , UC San Diego School of Medicine. Available from: https://neurosciences.ucsd.edu/research/labs/nil/Pages/UseOurData.aspx (2017).
  2. Craddock, R. C., et al. Imaging human connectomes at the macroscale. Nat Methods. 10 (6), 524-539 (2013).
  3. Devor, A., et al. Frontiers in optical imaging of cerebral blood flow and metabolism. J Cereb Blood Flow Metab. 32 (7), 1259-1276 (2012).
  4. Ji, N., Freeman, J., Smith, S. L. Technologies for imaging neural activity in large volumes. Nat Neurosci. 19 (9), 1154-1164 (2016).
  5. Maze, I., et al. Analytical tools and current challenges in the modern era of neuroepigenomics. Nat Neurosci. 17 (11), 1476-1490 (2014).
  6. Medland, S. E., Jahanshad, N., Neale, B. M., Thompson, P. M. Whole-genome analyses of whole-brain data: working within an expanded search space. Nat Neurosci. 17 (6), 791-800 (2014).
  7. Osten, P., Margrie, T. W. Mapping brain circuitry with a light microscope. Nat Methods. 10 (6), 515-523 (2013).
  8. Poldrack, R. A., Farah, M. J. Progress and challenges in probing the human brain. Nature. 526 (7573), 371-379 (2015).
  9. Kotter, R. Neuroscience databases: tools for exploring brain structure-function relationships. Philos Trans R Soc Lond B Biol Sci. 356 (1412), 1111-1120 (2001).
  10. Uhlirova, H., et al. The roadmap for estimation of cell-type-specific neuronal activity from non-invasive measurements. Philos Trans R Soc Lond B Biol Sci. 371 (1705), (2016).
  11. Aine, C. J., et al. Multimodal Neuroimaging in Schizophrenia: Description and Dissemination. Neuroinformatics. , (2017).
  12. Amunts, K., et al. BigBrain: an ultrahigh-resolution 3D human brain model. Science. 340 (6139), 1472-1475 (2013).
  13. Laird, A. R., Lancaster, J. L., Fox, P. T. BrainMap: the social evolution of a human brain mapping database. Neuroinformatics. 3 (1), 65-78 (2005).
  14. Lein, E. S., et al. Genome-wide atlas of gene expression in the adult mouse brain. Nature. 445 (7124), 168-176 (2007).
  15. Shin, D. D., Ozyurt, I. B., Liu, T. T. The Cerebral Blood Flow Biomedical Informatics Research Network (CBFBIRN) database and analysis pipeline for arterial spin labeling MRI data. Front Neuroinform. 7, 21 (2013).
  16. Uhlirova, H., et al. Neurovascular Network Explorer 2.0: A Database of 2-Photon Single-Vessel Diameter Measurements from Mouse SI Cortex in Response To Optogenetic Stimulation. Front Neuroinform. 11, 4 (2017).
  17. Sridhar, V. B., Tian, P., Dale, A. M., Devor, A., Saisan, P. A. Neurovascular Network Explorer 1.0: a database of 2-photon single-vessel diameter measurements with MATLAB((R)) graphical user interface. Front Neuroinform. 8, 56 (2014).
  18. Tian, P., et al. Cortical depth-specific microvascular dilation underlies laminar differences in blood oxygenation level-dependent functional MRI signal. Proc Natl Acad Sci U S A. 107 (34), 15246-15251 (2010).
  19. Neurovascular Imaging Laboratory. Use Our Data. , UC San Diego School of Medicine. Available from: https://neurosciences.ucsd.edu/research/labs/nil/Pages/UseOurData.aspx (2017).
  20. Uhlirova, H., et al. Cell type specificity of neurovascular coupling in cerebral cortex. Elife. 5, (2016).
  21. Gagnon, L., et al. Quantifying the microvascular origin of BOLD-fMRI from first principles with two-photon microscopy and an oxygen-sensitive nanoprobe. J Neurosci. 35 (8), 3663-3675 (2015).
  22. Sakadzic, S., et al. Two-photon high-resolution measurement of partial pressure of oxygen in cerebral vasculature and tissue. Nat Methods. 7 (9), 755-759 (2010).
  23. Nizar, K., et al. In vivo stimulus-induced vasodilation occurs without IP3 receptor activation and may precede astrocytic calcium increase. J Neurosci. 33 (19), 8411-8422 (2013).
  24. Reznichenko, L., et al. In vivo alterations in calcium buffering capacity in transgenic mouse model of synucleinopathy. J Neurosci. 32 (29), 9992-9998 (2012).
  25. Langer, J., Rose, C. R. Synaptically induced sodium signals in hippocampal astrocytes in situ. J Physiol. 587 (Pt 24), 5859-5877 (2009).
  26. Gong, Y., et al. High-speed recording of neural spikes in awake mice and flies with a fluorescent voltage sensor. Science. 350 (6266), 1361-1366 (2015).
  27. Tantama, M., Hung, Y. P., Yellen, G. Optogenetic reporters: Fluorescent protein-based genetically encoded indicators of signaling and metabolism in the brain. Prog Brain Res. 196, 235-263 (2012).
  28. Devor, A., et al. "Overshoot" of O(2) is required to maintain baseline tissue oxygenation at locations distal to blood vessels. J Neurosci. 31 (38), 13676-13681 (2011).
  29. Devor, A., et al. Stimulus-induced changes in blood flow and 2-deoxyglucose uptake dissociate in ipsilateral somatosensory cortex. J Neurosci. 28 (53), 14347-14357 (2008).
  30. Rauch, A., Rainer, G., Logothetis, N. K. The effect of a serotonin-induced dissociation between spiking and perisynaptic activity on BOLD functional MRI. Proc Natl Acad Sci U S A. 105 (18), 6759-6764 (2008).
  31. Lemmon, V. P., et al. Minimum information about a spinal cord injury experiment: a proposed reporting standard for spinal cord injury experiments. J Neurotrauma. 31 (15), 1354-1361 (2014).
  32. Ascoli, G. A., Donohue, D. E., Halavi, M. NeuroMorpho.Org: a central resource for neuronal morphologies. J Neurosci. 27 (35), 9247-9251 (2007).
  33. Mennes, M., Biswal, B. B., Castellanos, F. X., Milham, M. P. Making data sharing work: the FCP/INDI experience. Neuroimage. 82, 683-691 (2013).
  34. Marmarou, A., et al. IMPACT database of traumatic brain injury: design and description. J Neurotrauma. 24 (2), 239-250 (2007).

Tags

Нейробиологии выпуск 135 автоматическая обработка данных сбор данных отображения данных баз данных как тема поисковая система нейробиология нейроинформатики графический пользовательский интерфейс MATLAB Визуализация 2-фотон соматосенсорной коры артериолы поток крови гемодинамика нарушение мозгового кровообращения
Нервно-сосудистого сети Explorer 2.0: Простой инструмент для изучения и обмена базы данных вызвали Optogenetically Vasomotion в коре мыши в естественных условиях
Play Video
PDF DOI DOWNLOAD MATERIALS LIST

Cite this Article

Uhlirova, H., Tian, P.,More

Uhlirova, H., Tian, P., Kılıç, K., Thunemann, M., Sridhar, V. B., Chmelik, R., Bartsch, H., Dale, A. M., Devor, A., Saisan, P. A. Neurovascular Network Explorer 2.0: A Simple Tool for Exploring and Sharing a Database of Optogenetically-evoked Vasomotion in Mouse Cortex In Vivo. J. Vis. Exp. (135), e57214, doi:10.3791/57214 (2018).

Less
Copy Citation Download Citation Reprints and Permissions
View Video

Get cutting-edge science videos from JoVE sent straight to your inbox every month.

Waiting X
Simple Hit Counter