Summary
Этот протокол описывает минимально инвазивного остеосинтеза техника, с помощью Интрамедуллярные винт для стандартизированных стабилизации переломов бедренной кости, которые могут быть использованы для анализа endochondral кости Исцеление у мышей.
Abstract
Кость заживление модели необходимо проанализировать сложные механизмы разрушения, исцеление для улучшения лечения клинических переломов. В течение последнего десятилетия более широкое использование мыши модели ортопедических исследований было отмечено, наиболее вероятно потому что мышь модели предлагают большое количество генетически модифицированных штаммов и специальных антител для анализа молекулярных механизмов заживление перелома. Чтобы управлять биомеханические условия, хорошо изученных остеосинтез методы являются обязательными, также у мышей. Здесь мы сообщаем о дизайн и использование закрытой кости Исцеление модель для стабилизации переломов бедренной кости у мышей. Интрамедуллярные винт, медико класса из нержавеющей стали, обеспечивает через перелом сжатия осевой и вращения стабильности, по сравнению с главным образом используется простой Интрамедуллярные штифты, которые показывают полное отсутствие осевого и вращения стабильности. Стабильность, достигнутые Интрамедуллярные винт позволяет анализ endochondral исцеления. Большое количество каллусной ткани, полученные после стабилизации с винтом, предлагает идеальные условия для сбора ткани для биохимических и молекулярных анализа. Еще одним преимуществом использования винт является тот факт, что винт могут быть вставлены в бедренной кости с минимально инвазивной техники не вызывая повреждение мягких тканей. В заключение винт это уникальный имплантат, который идеально может быть использован в закрытых переломов, исцеление моделей, предлагающих стандартизированных биомеханические условия.
Introduction
Кости Исцеление исследования на мышах пользуются большим спросом из-за широкого спектра антител и генетически модифицированных животных. Эти факты позволяют изучать молекулярные механизмы кости Исцеление1. В последние несколько лет различные кости Исцеление модели мышей были разработаны2. Эти модели можно разделить на открытые модели, в которых кости osteotomized с использованием открытого бокового хирургического подхода и в закрытых модели, в которых перелом кости на основе модели разрушения, представленный Bonnares и Einhorn3. Используя эту технику, стандартизированных поперечный перелом может производиться с помощью 3-точка изгиба устройства и Интрамедуллярные имплантаты могут быть вставлены через небольшой медиальный parapatellar разрез в минимально инвазивной техники, избегая крупных мягких тканей травм.
Интрамедуллярные винт может применяться для стабилизации закрытых переломов у мышей. Винт предлагает вращения и осевой стабильности. Это достигается путем сжатия перелом проксимального нитями и дистальной головки4. Дальнейшие преимущества винт простой хирургической техники, имплантата низкосортных invasivity, низкий вес и, прежде всего, выше стабильность предоставления стандартизированной и контролируемых биомеханические условия, по сравнению с другими Интрамедуллярные имплантаты5. В самом деле в самых закрытых переломов моделях, фрагменты стабилизируются только путем простой булавки, которые связаны с полным отсутствием вращения и осевой стабильности и высокого риска ПИН и также перелом дислокации. Это может заметно повлиять на процесс заживления, что может привести к задержки исцеления или несрастание формирования.
Хорошо известно, что стабильность фиксации переломов имеет огромное влияние на заживление процесс6,7. Высокая жесткая фиксация приводит в intramembranous исцеление, в то время как менее жесткой фиксации, которая может позволить микродвижений в зазоре перелом, приводит к endochondral исцеления. Стабилизации переломов с винтом Интрамедуллярные показывает, преимущественно endochondral исцеление с большим количеством каллусной ткани, особенно после 2 недель заживление перелома. Возможность собрать большое количество каллусной ткани позволяет анализ нескольких параметров различными методами.
Здесь мы доклад о разработке и применении Интрамедуллярные винт в мышей, а также на его преимущества и недостатки в экспериментальных исследованиях на обычных endochondral кости Исцеление.
Subscription Required. Please recommend JoVE to your librarian.
Protocol
Все процедуры были исполнены в соответствии с руководящими принципами национальных институтов здравоохранения для использования экспериментальных животных и институциональных руководящими принципами (шведским für Verbraucherschutz, Zentralstelle Amtstierärztlicher Dienst, Саарбрюккен, Германия).
1. Подготовка хирургические инструменты и имплантаты
- Выберите лезвием скальпеля (размер 15), небольшой тампоном, тонкой щипцы, 27 G иглы, шов не рассасывающимся 5-0, ножницы и иглодержателя из микрохирургических инструментов.
- Распакуйте Интрамедуллярные винт, проволочный направитель (диаметром 0,3/0,2 мм, длина 10 см), центрирующее сверло (диаметром 0,5 мм) и ручная дрель (рис. 1; см. Таблицу материалы).
Примечание: Интрамедуллярные винт (диаметром 0,5 мм, длиной 17.2 мм) изготовлен из медико класса из нержавеющей стали для ретроградного имплантации в бедренной кости. Винт имеет проксимальной поток (диаметром 0,5 мм, длина 4 мм) с носом (диаметром 0,2 мм, 0,4 мм длина) на кончик и дистальной голова конической формы (диаметром 0,8 мм, длина 0,9 мм) добиться перелома сжатия, а также осевой и вращения стабильности. - Разоблачить имплантатов и всех хирургических инструментов в противовоспалительное решение (96% спирта) для 5 минут или стерилизовать их (паровой стерилизации, 130 ° C, 25 мин). После дезинфекции и стерилизации Поместите документы на прихваткой операции. Положение операция ткань, непосредственно прилегающих к таблице мелких животных операции.
2. животных, анестезия и анальгезия
- Выберите сорт, возраст и пол мышей, по данным исследования вопрос, который решается.
Примечание: Для этого исследования были использованы 12 до 14-week-old мышей-самцов CD-1. Соответствующие веса использовать винт Интрамедуллярные составляет 25-35 г. - Анестезировать мышей с внутрибрюшинной инъекции кетамина Ксилазина и 75 мг/кг 15 мг/кг. Подтвердите анестезии, мыс пинча. Применение смазки глаз, чтобы защитить глаза животных от пересыхания во время анестезии. После индукции анестезии поместите курсор мыши под радиатор тепла для поддержания постоянной температуры тела. Во время процедуры животные были проверены с неоднократные мыс Пинч, чтобы обеспечить соответствующую плоскость анестезии.
- Применить трамадола гидрохлорид в питьевой воде (1,0 мг/мл) для обезболивания от 1 дня до операции до 3 день после операции.
Примечание: Обезболивание и инфекции предотвращение должно быть с согласия соответствующих руководящих принципов страны и учреждения, где эксперименты должны быть выполнены.
3. хирургическая процедура и имплантации Интрамедуллярные винт
- До операции брить всю прямо заднюю ногу и наносить депиляционный крем. После 5 минут удалить крем и чистые ноги с водой. Затем примените противовоспалительное решение спиртом 96%. Бетадин или хлоргексидином могут добавляться к алкоголю для обеспечения полной асептики.
- В асептических условиях поместите курсор мыши в лежачем положении на мелких животных операционном столе. Согните правое колено для передней подход к мыщелков колена. Выполните 5-мм медиальный parapatellar разрез на правое колено, с использованием лезвие скальпеля.
- Мобилизовать связки надколенника тщательно с лезвием скальпеля и тампон. Затем сдвиг надколенника боков с тонкой щипцами подвергать intercondylar паз бедренной кости.
- Откройте intercondylar паз точно посередине между обеими мыщелок бедра. Убедитесь в том, чтобы не превышать 1,0 мм в глубину для отверстия.
- Начните ручное бурение на медленной скорости и вентрально 45 ° смещения оси бедра, используя 0.5 мм, центрирующее сверло и ручная дрель (Рисунок 1 c и D, рис. 2). Во время бурения, непрерывно уменьшается угол 0 ° смещение (параллельно оси кости бедренной кости). Остановите бурения при глубине 1,0 мм.
- После открытия кости в intercondylar паз, Вставьте иглу 27 G в полость Интрамедуллярные по всей длине бедра. Стопу Интрамедуллярные полости бедра вручную с помощью поворотного движения 27 G иглы. Толкать иглу вперед перфорировать кортикальной кости в большей вертела проксимально.
- Извлеките иглу 27 G и применять руководство провод через дистальной части бедренной кости.
- Сделать разрез кожи с лезвием скальпеля (размер 15) проксимально через проволочный направитель и продвигать проволочный направитель до обоих концах проволочный направитель находятся вне. Убедитесь в том сохранить проволочный направитель на месте.
- Создание определенных закрытый перелом с помощью гильотины.
- Поместите курсор мыши в боковой позиции с правой ноги под гильотину. Убедитесь, что диафизарных частью бедренной кости находится посередине гильотины.
- Падение веса (200 г) с определенного расстояния 25,5 см.
- Контроль конфигурации перелом и перелом позиции, а также позиция руководства проволоки (рис. 3) с помощью рентгеновского устройства (см. Таблицу материалы).
- Подключите Интрамедуллярные винт с нос на дистальном конце проволочный направитель 0,2 мм и вставить его в бедренной кости под постоянным давлением и вращение по часовой стрелке.
- При сдвиге приводного вала при достаточной крутящий момент достигается.
- Извлеките проволочный направитель проксимально.
- Изменение положения надколенника и исправить коленная чашечка сухожилие мышцы с одного единого шва с использованием синтетических 5-0, леска, nonabsorbable полипропиленовые шовные. Используйте один швы же материала и размера, чтобы закрыть рану. Управление сокращение фрагменты и винт позиции радиологическом с помощью рентгеновского устройства (см. Таблицу материалы).
- Держите животных под радиатор тепла до тех пор, пока они оправиться от анестезии. Не оставляйте животных без присмотра, пока они достаточно сознание для поддержания брюшной recumbency. Возвращение животных в одной клетки в объекте животных. Не вернуть животных в компании других животных в течение первых 24 ч, даже если они полностью оправился от анестезии.
- Животных тщательно контролировать каждый день. Поддерживать послеоперационное обезболивание с помощью трамадола гидрохлорид в питьевой воде с дозировкой 1,0 мг/мл в течение первых трех дней. Продолжить анальгезии, если, на 4 день после операции, животных по-прежнему свидетельствуют о боли, как указано на вокализации, неугомонность, отсутствие мобильности, неспособность жениха, ненормальное положение и отсутствие нормальной интереса в окрестностях. Прекратить анальгезии, когда животные без боли.
- В конце эксперимента усыпить животных от передозировки барбитуратами.
Subscription Required. Please recommend JoVE to your librarian.
Representative Results
Время работы от разрез кожи ушивание был 20 мин. Операции могут выполняться без стерео микроскопа. После операции животные контролируются ежедневно. Послеоперационное обезболивание было прекращено после 2 дней, потому что ни одно из животных свидетельствует о боли после этого периода времени. Животных показало также нормальной несущие в течение 2 дней после операции. Раневые инфекции не наблюдалось за весь период наблюдений.
Радиологические анализы после 2 недель показал очевидное образование каллусной ткани разрыва перелом (рис. 4A). После 5 недель, перелом был исцелен, и периостальной каллуса был почти полностью перестроен (рис. 4В).
Гистологический анализ каллуса и зоны после 2 недель показали типичные тканей распределение endochondral, исцеление с хрящевой ткани, построен во время процесса хондрогенном и тканые кости (рис. 5A). После 5 недель хрящевой ткани исчез, и тканые кости был преобразован в пластинчатая кости для того, чтобы восстановить нормальное анатомическое и несущих свойств кости (Рисунок 5B).
Биомеханический анализ после 2 недель, указанных изгиб жесткость 37% по сравнению с контралатеральной unfractured кости. После 5 недель изгиб жесткость был почти 100% указанием полного заживления (рис. 6).
Рисунок 1: импланты. A. Интрамедуллярные винт (диаметром 0,5 мм, длиной 17.2 мм) с потока (диаметром 0,5 мм, длина 4 мм) и нос (диаметром 0,2 мм, 0,4 мм длина) проксимальный и конусообразной головы (диаметром 0,8 мм, длина 0,9 мм) дистального. B. руководство провод (диаметром 0,3/0,2 мм, длина 10 см). C. центрирующее сверло (диаметром 0,5 мм). D. ручная дрель. Пожалуйста, нажмите здесь, чтобы посмотреть большую версию этой фигуры.
Рисунок 2: схема, чертеж мыщелков бедра, указывающий запись точки для винта Интрамедуллярные. Мыщелков бедренной кости с intercondylar вырез в передней задней посмотреть (слева) и сагиттальной (справа). Крест (слева) указывает точку входа для Интрамедуллярные винта, стрелку (справа) смещение 45 ° к оси бедра, чтобы начать бурение. Пожалуйста, нажмите здесь, чтобы посмотреть большую версию этой фигуры.
Рисунок 3: рентгенограмме бедренной кости перелом поперечных и проволочный направитель вставленной. Рентгенограмма показывает конфигурацию поперечный перелом в диафизарных части бедра (стрелка) и проволочный направитель в полости Интрамедуллярные преодоление разрыва. Масштаб бары представляют 5 мм. пожалуйста, нажмите здесь, чтобы посмотреть большую версию этой фигуры.
Рисунок 4: рентгенограммы после 2 и 5 недель кости Исцеление. А. радиографический анализ стабилизировать с помощью винта после 2 недель, демонстрируя очевидным каллуса формирования бедренной кости. B. радиографический анализ стабилизировалась с винтом после 5 недель, продемонстрировав почти полное заживление перелома с Ремоделирование каллуса бедренной кости. Масштаб бары представляют 5 мм. пожалуйста, нажмите здесь, чтобы посмотреть большую версию этой фигуры.
Рисунок 5: Гистологические срезы после 2 и 5 недель кости Исцеление. А. гистологический анализ бедренной кости стабилизировать с помощью винта после 2 недель, демонстрирующих типичных ткани распределения во время endochondral кости Исцеление с хряща (c) и костной ткани (b) в пределах каллуса. B. гистологический анализ стабилизировалась с винтом после 5 недель, демонстрируя почти полной реконструкции пластинчатая кости бедренной кости. Гистологические срезы окрашивали согласно методу trichrome. Масштаб бары представляют 1000 мкм. пожалуйста, нажмите здесь, чтобы посмотреть большую версию этой фигуры.
Рисунок 6: биомеханический анализ. Биомеханический анализ изгиб жесткость после 2 недель (белая полоса, n = 9) и 5 недель (черная полоса, n = 8). Жесткость на изгиб приводится в процентах к контралатеральной non перелом бедра. Данные даны как среднее ± Среднеквадратичная ошибка среднего значения (SEM), * p < 0,05 — 2 недели. После доказать предположение для нормального распределения (Колмогорова-Смирнова тест) и с равными дисперсиями (F-тест), сравнение между двумя экспериментальных групп проводилось с использованием Student´s t теста. Пожалуйста, нажмите здесь, чтобы посмотреть большую версию этой фигуры.
Subscription Required. Please recommend JoVE to your librarian.
Discussion
Важнейшие шаги хирургической процедуры, чтобы найти правильный входной точкой для имплантации винт в середине мыщелков бедренной кости в intercondylar паз, а также оптимальной ориентации иглы параллельно оси кости для рассверливания по Интрамедуллярные полости. Чтобы избежать неправильного ввода позиции, хирург следует подготовить паз, пока не будет достигнуто оптимальное представление. Для контроля ориентации во время развёртывания отверстий, бедренной мышей должны проводиться с пальцами в устойчивом положении. Далее важнейшим шагом является вставка винт в бедренной кости через проволочный направитель потому что проволочный направитель может выскользнуть из проксимальных канальцах фрагмент, что приводит к дислокация перелом. В этом случае хирург может попытаться поток костных фрагментов снова, но этот маневр в основном неудачным, и животные должны затем быть исключены из сферы исследования.
Кроме того хирургическая процедура может развиться некоторые осложнения. Например может разрыва связки надколенника, который сдвигается вбок получить оптимальный вид для мыщелков. Это требует, ушивание связки после вставки винт. Во время открытия кости на мыщелков и рассверливание Интрамедуллярные полости, мыщелков может лопнуть. В этом случае нет возможности устранения неполадок, потому что винт адекватно не может быть исправлено на дистальном конце и сжатие перелом не достигается. Другая сложность заключается дислокации проволочный направитель вставленной или неправильной позиции из кости. Это осложнение можно уменьшить путем обработки с осторожностью и радиографического анализа после вставки для подтверждения правильного размещения во время операции. Кроме того, хирург должен обратить внимание, что винт вставлен полностью, потому что выступ винта можно ограничить мобильность мыши или уменьшить сжатие перелом. Таким образом рентген аппарат является обязательным для хирургической процедуры. Только животные после радиографический подтверждения в конце операции должны быть включены в протокол исследования.
Удаление Интрамедуллярные винт в конце эксперимента может выполняться без каких-либо трудностей, потому что головку винта может быть подключен к специальным удаления документа или, альтернативно, винт могут быть также удалены с держателя иглы.
Ограничение методики состоит в том, что винт Интрамедуллярные предоставляется компанией только в одном размере с определенной длиной 17.2 мм, и поэтому следует учитывать размер бедра. Дальнейшее ограничение на использование Интрамедуллярные винт является то, что в естественных условиях Микро Компьютерная томография (КТ)- или магнитно-резонансная томография (МРТ) анализ процесса заживления практически невозможно из-за материала имплантата, который влияет на изображение качество. Таким образом эти анализы могут выполняться только после эвтаназии и удаления имплантата в конце периода исследования. Наконец винт не может использоваться для анализа костный дефект исцеление, потому что осевой стабильность достигается путем сжатия костных фрагментов нить проксимальный и дистальный главой.
Кость заживление исследования используют либо13,12,10,,1114 с открытым8,9,или закрыт4,15, 16,17 кости Исцеление модели. Открытый кости Исцеление модели позволяют более жесткой фиксации фрагментов, по сравнению с закрытой кости Исцеление модели, в результате большее количество intramembranous исцеления без формирования произносится каллуса. Потому что с немного каллуса формирования связаны открытые модели, эти модели не могут отдавать предпочтение в экспериментах, которые требуют большего количества каллусной ткани для биохимических и молекулярных анализа. Еще один недостаток открытых моделей является необходимость инвазивных боковой подход с травмой крупных мягких тканей. В отличие от использования закрытых модели требует лишь небольшой менее инвазивные разрез. До сих пор лишь несколько закрытых модели существуют в мыши2.
В закрытых кости Исцеление модели используется главным образом простой Интрамедуллярные ПИН. Однако этот метод имеет различные недостатки. Прежде всего отсутствие осевого и вращения стабильности. Это может привести к гетерогенной исцеления ответ5. Хотя этот недостаток, как известно, влияют на результаты эксперимента18, недавние исследования, которые намерены проанализировать механизмы заживления кости, по-прежнему использовать мышиных модели, в которых перелом стабилизирован только с булавкой или даже осталось нестабилизированный7 . Мы считаем, что стабильный остеосинтез методов, аналогичных тем, которые используются в клинической практике, должен также использоваться для мышей. Для достижения осевой и вращения стабильности, Интрамедуллярные винт был разработан который индуцирует сжатие перелом дистальной части головы и проксимальной поток. Интерес применение Интрамедуллярные винт не производят жесткой фиксации, и, таким образом, торсионная жесткость перелом бедра, стабилизировать с помощью винта Интрамедуллярные значительно ниже, когда по сравнению с переломом бедра стабилизировать посредством внешних фиксаторов или замок пластина5. Однако менее жесткой фиксации необходим для изучения endochondral кости Исцеление, потому что позволяет только менее жесткая фиксация микродвижений костных фрагментов, которые провоцируют endochondral, процесс заживления. Тем не менее как показано в предыдущем ex vivo исследования, винт Интрамедуллярные производит собственный осевой и вращения стабильности. Биомеханический анализ показал, что винт Интрамедуллярные достигает торсионная жесткость 0.34 ± 0,18 Nmm / °, что значительно выше по сравнению с достигнутый с обычными pin (0.00 ± 0.00 Nmm / °)5. Таким образом винт Интрамедуллярные представил здесь является только имплантат, который может использоваться в минимально инвазивной техники и которые обеспечивают стандартизированные биомеханические условия для endochondral заживление перелома исследование на мышах.
Subscription Required. Please recommend JoVE to your librarian.
Disclosures
Авторы заявляют, что они не имеют никаких финансовых интересов.
Acknowledgments
Эта работа была поддержана RISystem AG, Давос, Швейцария.
Materials
| Name | Company | Catalog Number | Comments |
| Mouse Screw | RISystem AG | 221,100 | |
| Guide wire | RISystem AG | 521,100 | |
| Centering bit | RISystem AG | 590,205 | |
| Hand drill | RISystem AG | 390,130 | |
| Cotton-Swab (150 mm, small head) | Fink Walter GmbH | 8822428 | |
| Suture (5-0 Prolene) | Ethicon | 8614H | |
| Forceps | Braun Aesculap AG &CoKG | BD520R | |
| Scissors | Braun Aesculap AG &CoKG | BC100R | |
| Needle holder | Braun Aesculap AG &CoKG | BM024R | |
| 27 G needle | Braun Melsungen AG | 9186182 | |
| Scalpel blade size 15 | Braun Aesculap AG &CoKG | 16600525 | |
| Heat radiator | Sanitas | 605.25 | |
| Depilatory cream | Asid bonz GmbH | NDXZ10 | |
| Eye lubricant | Bayer Vital GmbH | 2182442 | |
| Xylazine | Bayer Vital GmbH | 1320422 | |
| Ketamine | Serumwerke Bernburg | 7005294 | |
| Tramadol | Grünenthal GmbH | 2256241 | |
| Disinfection solution (SoftaseptN) | Braun Melsungen AG | 8505018 | |
| CD-1 mice | Charles River | 22 | |
| X-ray Device | Faxitron MX-20, Faxitron X-ray Corporation | 2321A0988 | |
| Fracture device small | RISystem AG | 891,100 |
References
- Jacenko, O., Olsen, B. R. Transgenic mouse models in studies of skeletal disorders. J Rheumatol Suppl. 43, 39-41 (1995).
- Histing, T., et al. Small animal bone healing models: standards, tips, and pitfalls results of a consensus meeting. Bone. 49 (4), 591-599 (2011).
- Bonnarens, F., Einhorn, T. A. Production of a standard closed fracture in laboratory animal bone. J Orthop Res. 2 (1), 97-101 (1984).
- Holstein, J. H., et al. Development of a stable closed femoral fracture model in mice. J Surg Res. 153 (1), 71-75 (2009).
- Histing, T., et al. Ex vivo analysis of rotational stiffness of different osteosynthesis techniques in mouse femur fracture. J Orthop Res. 27 (9), 1152-1156 (2009).
- Claes, L., Augat, P., Suger, G., Wilke, H. J. Influence of size and stability of the osteotomy gap on the success of fracture healing. J Orthop Res. 15 (4), 577-584 (1997).
- Histing, T., et al. Characterization of the healing process in non-stabilized and stabilized femur fractures in mice. Arch Orthop Trauma Surg. 136 (2), 203-211 (2016).
- Thompson, Z., Miclau, T., Hu, D., Helms, J. A. A model for intramembranous ossification during fracture healing. J Orthop Res. 20 (5), 1091-1098 (2002).
- Cheung, K. M., Kaluarachi, K., Andrew, G., Lu, W., Chan, D., Cheah, K. S. An externally fixed femoral fracture model for mice. J Orthop Res. 21 (4), 685-690 (2003).
- Garcia, P., et al. A new technique for internal fixation of femoral fractures in mice: impact of stability on fracture healing. J Biomech. 41 (8), 1689-1696 (2008).
- Histing, T., et al. An internal locking plate to study intramembranous bone healing in a mouse femur fracture model. J Orthop Res. 28 (3), 397-402 (2010).
- Garcia, P., et al. The LockingMouseNail-a new implant for standardized stable osteosynthesis in mice. J Surg Res. 169 (2), 220-226 (2011).
- Histing, T., Klein, M., Stieger, A., Stenger, D., Steck, R., Matthys, R., Holstein, J. H., Garcia, P., Pohlemann, T., Menger, M. D. A new model to analyze metaphyseal bone healing in mice. J Surg Res. 178 (2), 715-721 (2012).
- Histing, T., Menger, M. D., Pohlemann, T., Matthys, R., Fritz, T., Garcia, P., Klein, M. An Intramedullary Locking Nail for Standardized Fixation of Femur Osteotomies to Analyze Normal and Defective Bone Healing in Mice. J Vis Exp. (117), (2016).
- Hiltunen, A., Vuorio, E., Aro, H. T. A standardized experimental fracture in the mouse tibia. J Orthop Res. 11 (2), 305-312 (1993).
- Manigrasso, M. B., O'Connor, J. P. Characterization of a closed femur fracture model in mice. J Orthop Trauma. 18 (10), 687-695 (2004).
- Holstein, J. H., Menger, M. D., Culemann, U., Meier, C., Pohlemann, T. Development of a locking femur nail for mice. J Biomech. 40 (1), 215-219 (2007).
- Claes, L. E., et al. Effects of mechanical factors on the fracture healing process. Clin Orthop Relat Res. 355 Suppl, S132-S147 (1998).
