Summary
Även Europeiska kaniner är en social art, kan socialt inhysa dem vara utmanande. Därför måste det finnas en grundlig förståelse av beteenden och sociala strukturer av par-inrymt laboratorium kaniner. Här presenterar vi ett protokoll för att identifiera hopkoppling metoder, arter-typisk hierarki etablering beteenden och beteenden som garanterar lämpliga interventioner.
Abstract
Nya Zeeland White (NZW) laboratorium kaniner (Oryctolagus cuniculus), liksom deras förfäder Europeiska Rabbit, är en sociala arter som uppvisar många fördelar med att vara inrymt med detta. Även om dessa kaniner är medfödd sällskaplig, kan vissa beteenden uppkomma när som hålls i fångenskap, som om de lämnas därhän, kan blanda ihop forskningsresultat eller bly på sårbildning, vilket i extrema fall kan vara svår. För att förhindra dessa problem, måste det finnas en väl strukturerad plan för övervakning och underhåll av Parade laboratorium kaniner. Syftet med detta protokoll är att presentera effektiva förfaranden för att fastställa nya ihopkopplade NZW kaniner samt metoder för framgångsrik underhåll. Flera metoder har testats för skapandet av nya ihopkopplade kvinnliga kaniner från leverantören, men den mest effektiva tekniken betonar kapitalisera på den stress som limning från transporter, urin märkningen, para ihop i en neutral bur med ingen påtvingad delning av resurser och ett system för övervakning och intervention. För att avgöra den bästa metoden för bostäder Parade kaniner i en standard caging miljö, samlades data in för att generera en beteendevetenskaplig ethogram. Beteenden kvantifierades sedan som positiv, neutral eller negativ och spårades över livslängden för paret att avgöra vilka beteenden indicerat par framgång eller misslyckande. Med den nyvunna kunskapen om socialt inhysta laboratorium NZW kanin beteende tillämpades anrikning ingripande för att lindra aggression och förhindra sårbildning, vilket resulterar i en högre andelen framgångsrika par. Förståelse för de komplexa sociala konstruktioner som dominerar par inrymt kanin beteende har dramatiskt genom flera år av trialing olika para metoder, utveckling av ethogram och de resulterande anrikning interventionerna, ökade och möjliggjorde mer artspecifika vård och ökade standarder av välfärd.
Introduction
Bestämmelser för laboratoriet djurvård ger väldefinierade rekommendationer angående kanin subventionerat. Två av de tre primära standarder som används av AAALAC International att utvärdera djurvård och använda program beskriver riktlinjer för arten-lämplig djurhållnings- och bostad. Först av dessa vägledning resurser, den 8: e upplagan av guiden för skötsel och användning av laboratoriedjur1 (Guide) påstår att sociala arter såsom kaniner bör endast vara ensamma som ett undantag och enda bostäder bör inte vara bostäder standard. Andra, den europeiska konventionen för de skydd av Vertebrate djur som används för experimentella och andra vetenskapliga ändamål2, anges att kaniner är en inneboende sociala arter som bör inrymmas i accordant sociala situationer med den undantag av kvalificerade veterinär eller forskning relaterade skäl. Den kontor av laboratorium djur välfärd (OLAW) också mandat att samma hölje är bara lämpligt när det finns vetenskaplig motivering som har utvärderats och godkänts av den institutionella djur vård och användning kommittén (IACUC), djuren är inkompatibel eller den veterinära personalen har en hälsa eller välbefinnande oro3.
Förutom mötet regelefterlevnad ger fackgranskade litteraturen många exempel på fysiska och psykiska fördelar av par bostäder NZW kaniner. För att ge högsta möjliga normer för djurens välbefinnande, måste arten-lämplig bostäder tillhandahållas samtidigt som den uppfyller de specifika målen för forskaren. Socialt inhysta NZW kaniner engagera sig i mer aktiv beteenden4, Visa förstärkta fitness och Visa minskade nivåer av gastrointestinala stasis på grund av ökad motorisk beteenden5. Fysisk aktivitet är särskilt viktigt för laboratoriet kaniner eftersom de är benägna att osteoporos4 när inrymt i en bur-miljö. Förutom de fysiska fördelarna med sociala bostäder finns det en myriad av psykologiska fördelar. Par-inrymt NZW kaniner Visa ökad artspecifika verksamhet6, få berikning förmåner från social stimulering4, Visa förhöjda nivåer av egen lugnande aktiviteter7 samt affiliative beteenden såsom allogrooming8 och uppvisar en ökad förmåga att hantera ångest från romanen stimuli, dvs stress buffring5. Dessutom, i jämförelse med socialt isolerade NZW kaniner, socialt inhysta NZW kaniner skilde sig inte i immunförsvaret9 eller antikropp produktion10, dock ensamma inhysta kaniner hade högre pulsnivå11 och ökad vita blodkroppar10 jämfört med socialt inhysta kaniner.
Precis som fördelarna med sociala bostäder är väl dokumenterade i litteraturen, så är getts av social isolering. Samma hölje av en social art kan leda till fysiologiska indikatorer på stress12. Ensamma inhysta NZW kaniner spendera ökade mängder tid att vara inaktiv och utför onormala beteenden4 och stereotypic beteenden vägledande frustration13,14,15. Gemensamma stereotyper inkluderar: tugga på metall såsom bur barer eller feeder/vattnare, överdriven auto-grooming, Slickande i buren och självförvållad negativt beteende16. Om de måste hållas ensamma, bör ytterligare uppmärksamhet ägnas motvikt stressen från social isolering. Guiden rekommenderar att tillhandahålla ytterligare bostäder utrymme, endast bostäder ensamma för den minsta mängden möjliga tid, möjliggör för enstaka gången i en större bostadssituationen såsom en golv-penna och ge ytterligare och varierad berikning möjligheter inklusive interaktion med andra kaniner när möjligt1. AAALAC International rekommenderar dessutom att tillhandahålla skyddad åtkomst så att djur kan ha visuella, auditiva och lukt kontakt med andra djur17.
Med tanke på valet, föredrar kaniner att vara med andra kaniner. Preferens tester visat att kvinnliga NZW kaniner fungerade nästan lika hårt för begränsad social kontakt som de gjorde för mat18. Flera andra studier har visat att Parade kaniner, när det ges valet, observerades i fysisk kontakt med varandra 4,8,19,20. Dessa studier belysa den betydande värde kaniner platsen på socialization med artfränder. Intressant, gäller dessa resultat inte för endast kvinnliga kaniner. När förutsatt med en modifierad bur avdelare som var halv ogenomskinlig, halv klart med små hål borras i tydlig portion till möjliggör förbättrad men skyddade sociala åtkomst, manliga NZW kaniner tillbringade mer tid i kvarteret i buren som mest tillgång till en angränsande hane än hanarna i burar utan modifierad avdelare. De manliga NZW kaninerna med skyddade sociala tillgång var betydligt mer aktiv, spendera mer tid i aktivitet och vila beteenden och mindre på underhåll beteenden såsom grooming som är associerad med tristess och social misär. Män med en modifierad avdelare var också mindre rädda obekanta personal vilket framgår av en minskad latens att närma sig en obekant hand än män med en standard avdelare; möjligen på grund av de sociala buffring effekterna av interaktion med en partner21. Dessutom blev de dygnsrytm mönster av aktivitet och resten av de manliga kaninerna med modifierade avdelare synkroniseras i en skymnings mönster, liknande till vilda kaniner, medan socialt isolerade kaniner varierade avsevärt från varandra i deras mönster aktivitet och vila21. Litteratur tyder på att manlig kaniner inte är idealiska kandidater för sociala bostäder på grund av aggression bokför könsmognad14,22,23,24. I vilda populationer, honorna är mer sällskapliga än hanar6 och flera honor dela ofta en bostadsyta medan män tenderar att hålla ett större avstånd mellan andra hanar som kan leda till ökad aggressivitet när du placerar män i det begränsade utrymmet ett laboratorium bur15,25. Vissa studier har försökt att socialt house män i större penna miljö med blandade resultat14,22,26,27. En studie försökt para ihop hanar i en bur-miljö vilket resulterade i alla tre par att skiljas för aggression14. Följande protokoll är först att författarnas kunskap som möjliggör housing hanar med syskon hanar framgångsrikt i en bur inställning in i vuxenlivet. Det finns ingen hopkoppling av obesläktade hanar eller vuxna män på grund av risken för aggression och ingen manlig/kvinnlig lottning på grund av forskningen använder av kolonin.
Det första steget mot kanin subventionerat är upprättande av nya par. Denna artikel beskriver de metoder som tillåts för den största framgången inom denna institution att fastställa nya kvinnliga par och den ethogram som används för övervakning av strukturerade. Protokollet utnyttjar metoder såsom urin märkning6,28, betona limning, som tillhandahåller neutralt territorium och garanterar ingen Tvingad resursdelning. I vilda kanin kolonier kissar dominerande buck på kaninerna i sin avel grupp (inklusive kit, ungfisk och gör) därmed doft märkning kaninerna som tillhör hans social grupp29. Denna idé har översatts till laboratoriet inställning genom att tillämpa nyligen uppsamlat urin från en manlig kanin på pannan av nyligen Parade honor. Detta genomsyrar honorna med en delad doft att visa dem att de är inom samma avel grupp och de behöver inte konkurrera aggressivt. Utredning av använder urin märkningen att skapa nya kvinnliga kanin par fann att omärkt par var mer aggressiva och uppvisade mindre affiliative beteenden än par markerad med buck urin6. Stress limning har också visat sig vara en effektiv metod att para ihop i följeslagare kanin gemenskapen genom att skapa en milt stressande situation som både kaniner utsätts ömsesidigt för att uppmuntra limning30. Detta uppnås vanligen genom en bil eller en promenad i en bärare. En teori är att kaninerna kommer att föra över känslorna av säkerhet att de fått från att ha en partner under denna stressiga tid till deras framtida bindning erfarenheter och de, därför kommer att vara mer benägna att bilda en framgångsrik par31. Para ihop nya ankomst kaniner som har gått igenom stress av transport från leverantören skapar en naturlig stress limning upplevelse som kan aktiveras på att hjälpa till med parningen. När par är etablerad, måste en effektiv övervakningsprogram genomföras för att spåra paret beteende över tid för att ingripa när det behövs. Denna artikel belyser den beteendemässiga ethogram som utvecklades för att möjliggöra en fullständig förståelse av kanin sociala beteende och metoder för par underhåll. Par underhåll är ofta en svårighet i anläggningar på grund av omfattande litteratur som beskriver standard kanin sociala interaktioner och vad de kan indikera. Kanin värdepar avgränsas ofta för interaktioner som verkar kämpar beteende men är faktiskt normala sociala interaktioner som kan övervakas och tilltalat med korrekt ingripande. Denna artikel ser ut för att lindra detta genom att tillhandahålla en omfattande lista av beteenden att spåra och vad de kan vara vägledande för. Dessutom används miljömässiga anrikning intervention för att hjälpa i förhindrande av par misslyckande. Lämplig miljö berikning kan minska rädda beteenden och möjliggör bättre hantera stressorer1, minska onormala beteenden24,32, ger möjligheter för grundläggande fysiologiska krav 33 och övergripande öka välfärden34. Resultaten av föregående undersökning vid denna institution visade att öka miljö anrikning underlättar större framgångar i par bostäder genom att minska de aggressiva beteenden som uppkommer i sexuell mognad (12-17 veckor)35-årsåldern . Denna metod har en dubbel fördel; anrikningen skapar en distraktion för att förhindra att slåss, liksom, vilket möjliggör positiva interaktioner genom arter-typiska beteenden.
Subscription Required. Please recommend JoVE to your librarian.
Protocol
Detta protokoll följt normerna i vården utvecklas och utnyttjas av enheten för laboratorium djur medicin (ULAM) av University of Michigan (U av M), som mottar godkännande och tillsyn av alla djurvård förfaranden och metoder av IACUC. IACUC är i full överensstämmelse med den åttonde upplagan av Guide. Alla kaniner var inrymt i burar som var minst.46 m2 per bur som överstiger Guide minimikrav.
1. metoder för skapande av kvinnliga paren från nyligen anlände kaniner som inte parats pre av leverantören.
- Samla alla de följande material före parning:
- Samla urin från en manlig kanin. Gör detta genom att välta liner under buren så att den plastiska sidan är vänd uppåt och urinen samlar på toppen av liner. Spruta ut urinen och lagra i ett sterilt koniska rör.
- Förbered en ren, neutral bur för ihopparningen att äga rum. Ta bort center avdelaren så att paret har full tillgång till två sida vid sida burar (även kallad en ”doublewide” bur). Se till att denna bur innehåller följande objekt: minst 2 lågt värde anrikning objekt dessutom till 2 högt värde, anrikning av förstörbara objekt, minst två dölja möjligheter såsom abborre, koja eller låda och 2 separata åtkomstpunkter för mat och vatten och två separata högar av lös hö.
- Fyll i kanin sociala introduktion loggen (figur 1).
- Förbered en ren sprayflaska med färskvatten.
- Packa upp den första kvinnligt från transportbehållaren.
- Väger kaninen och utföra en spik trim. Markera kaninen på tips av öronen med en giftfri, djur säker markör om ingen enskild identifiering är tillgänglig (päls, öronmärke, tatuering, etc.).
Obs: Använd en färg till exempel blå eller lila som inte ska förväxlas med kroppsvätskor som blod- eller urinprov. - Använder en gasväv pad eller bomull boll, applicera ungefär 1 mL av tidigare insamlade buck urinen till kaninens pannan och placera kaninen i neutrala buren.
- Upprepa steg 1,2 - 1.2.2 med andra kanin med undantag för märkning kaninen för identifiering.
Obs: Endast en kanin behöver märkas i identifieringssyfte, men båda bör markeras med urin. - Övervaka par kontinuerligt i minst 1 h och fortsätta att fylla loggen kanin sociala introduktion som paret övervakas, inspelning varje beteende observerats vid varje tidpunkt.
- Ingripa med en skvätt vatten från en sprayflaska först när bita observeras, båda kaniner jagar varje andra (kretsande) kontinuerligt för över 15 s eller slåss beteende (t.ex. tornerspel/lunging) äger rum.
- Separata tillfälligt och fysiskt kontrollera varje kanin för bevis av såra om dessa beteenden är noterade.
Obs: Spraya inte med vatten om en kanin jagar men annan flyr. Interventionen bör endast när båda kaniner är aktivt engagerade i den som jagar. Också, inte ingriper för snabbt. Under detta skede är det viktigt för kaninerna att upprätta sin dominans hierarki och täta avbrott och interventioner kan fördröja eller förhindra denna nödvändiga process.
- Separata tillfälligt och fysiskt kontrollera varje kanin för bevis av såra om dessa beteenden är noterade.
- Kontakta veterinär om mindre sårande såsom en repa eller drog päls vilket resulterar i en liten lesion observeras men skiljer inte paret.
- Fortsätta att övervaka för positiva affiliative beteenden vägledande par framgång. Hänvisa till 3,2 positiva/Affiliative beteenden.
- Separat omedelbart om specifika typer av såra noteras (se 3.4.3.2), för exempel aktivt blödande lesioner eller något sårande på eller nära könsorganen eller ögonen.
- Väger kaninen och utföra en spik trim. Markera kaninen på tips av öronen med en giftfri, djur säker markör om ingen enskild identifiering är tillgänglig (päls, öronmärke, tatuering, etc.).
- Lämna rummet om efter 1 h para är stabil. Slutföra två ytterligare 10 min kontroller under resten av dagen (figur 2).
Obs: Tecken på ett stabilt par inkluderar klart dominant och undergiven beteenden, vilar tillsammans, äta/dricka och/eller allogrooming (se 3.2 positiva/Affiliative beteenden). Tecken på en instabil par inkluderar både kaniner som bedriver tydlig dominans beteenden, resurser bevakning eller aggressiva interaktioner (se 3.4.1 aggressiva interaktioner). Majoriteten av aggressiva interaktioner sågs under parning inträffar inom den första timmen, men om ett par fortsätter att Visa aggressiva interaktioner, övervakningstid kan ökas. - Lämna den par grupp övernattning om paret fortsätter att vara stabila efter båda ytterligare kontroller.
- Fysiskt kontrollera båda kaniner morgonen därpå genom känsla under pälsen att kontrollera för att såra och kontrollera könsorganen för lesioner.
- Om ingen betydande såra observeras, utför dagligen 10 min kontroller på paret under resten av veckan. Om paret upprätthålls för resten av veckan, betrakta dessa som ett stabilt par. Dokumentera detta på loggen kanin sociala introduktion och generera en Social inrymt interaktion och anrikning Log (figur 3).
Obs: Par endast betraktas som ett misslyckande om de Visa särskilda typer av skadade (se 3.4.3.2) eller om de inte kan vara kvar tillsammans över natten utan nya mindre lesioner som upptäcks inom två arbetsveckor. Kvinnliga par som var åtskilda på grund av aggression eller forskning relaterade syften kan vara framgångsrikt åter hopkopplad med samma partner (om separerade för forskningsändamål) eller med en ny kvinna (om separerade för aggression), men vuxna manliga par som var åtskilda kan aldrig paras igen på grund av risken för svår aggressivitet. Underhåll av manliga par därför av yttersta vikt på grund av att när väl separerade, de kommer att vara ensamma inrymt för resten av sin tid i djuranläggningen.
2. metoder för skapandet av andra typer av paren inklusive kvinnliga syskonpar på Weaning, kvinnliga icke-syskonpar inom en vecka av ålder på Weaning, kvinnliga avvanda med sin mor, manliga syskon på Weaning eller vuxna som parats pre från leverantören.
- Förbereda den neutrala kasse som beskrivs i 1.1.2.
- Slutför steg 1.2.1 och placera kaniner tillsammans.
- Övervaka för 5 min att säkerställa kompatibilitet och generera en Social inrymt interaktion och anrikning logga.
- Fortsätt till steg 1.1 om någon kämpande beteenden ses och följa hela kopplingsprocessen.
3. Observera för positiva/Affiliative, neutrala och negativa beteenden.
- Övervaka par dagligen och registrera beteenden observerats på Social inrymt interaktion och anrikning Log.
- Monitor för positiva/Affiliative beteenden.
- Observera paret för tydlig dominans/underkastelse beteenden.
Obs: Dessa beteenden inkluderar (men begränsas inte till) beteenden som en kanin visar dominerande tendenser som jagar, montering, grooming, haka märkning eller dunkande och den andra att acceptera och visa underkastelse beteenden som flykt, att tillåta montering eller grooming eller upprätthålla en haka ner hållning. - Iaktta kaninerna dela resurser (mat, vatten, hö).
Överväg att dela resurser som en positiv indikator på par stabilitet när det finns ingen konkurrens eller aggression över resursen. - Iaktta paret engagerande i allo grooming beteenden som en kanin rensning i den andra.
Obs: Kanin varelse groomed bör godta den grooming. Normalt dominerande är grooming den undergivna men detta kan skifta till den undergivna grooming dominerande som inte indikerar en par uppdelning. - Observera själv grooming beteende när en kanin känns tillräckligt säkra i delad miljö att brudgummen själv.
Obs: Tänk själv grooming som ett positivt tecken att paret är stabil. Om kaninen kände sig hotade, skulle det inte engagera sig i problemet underhåll som kräver en vertikal sittställning som öka kaninens sårbarhet för angrepp från en fientlig partner. - Observera dela utrymme beteendet när kaninen väljer att vara på samma plats som sin artgränserna.
Obs: Inställningen standard buren ger gott om utrymme för kaniner bo inom deras territorium om de väljer. När de föredrar att dela utrymme med sin artgränserna, är detta en positiv indikator på ett stabilt par. - Observera en kanin som bedriver solo interaktion med anrikning objekt.
Obs: Iakttagelsen att antingen kanin mår tillräckligt säkra för att engagera sig i interaktion med miljön anrikning är en positiv indikator. - Observera det paret som interagerar med miljön anrikning objekt tillsammans.
Anmärkning: Se till att båda kaniner är ömsesidigt engagerande i samspel med miljön anrikningen i en icke-aggressiv och icke-konkurrenskraftiga sätt.
- Observera paret för tydlig dominans/underkastelse beteenden.
- Neutrala beteenden.
- Iaktta instanser där ingen interaktion har observerats.
Obs: Det kan finnas ett par som observeras alltid i ett tillstånd av neutrala eller icke-interaktion. Detta kanske inte visar några problem, men om paret är konsekvent neutral och inga andra positiva eller negativa beteenden är någonsin observerats detta par måste övervakas noga. Konsekvent neutral interaktioner kan tyda på att paret inte har ännu inrättat en dominans hierarki och är en större risk för striderna och såra beteenden allteftersom tiden går.
- Iaktta instanser där ingen interaktion har observerats.
- Negativa beteenden.
- Aggressiva interaktioner.
Obs: Definiera aggressiva interaktioner som båda kaniner som bedriver ett negativt beteende på samma gång. Exempelvis om en kanin jagar och en flyr, detta är inte en negativ interaktion men om båda kaniner jagar varandra (kretsande), detta anses en aggressiv interaktion eftersom båda kaniner är aktivt engagerade i detta härskande beteende.- Titta noga för bitande, såra, ömsesidigt jagar (kretsande), resurs vaktar eller hoppar på varandra i ett kämpande sätt (tornerspel). Behandla dessa som aggressiva interaktioner som måste vara ingrep.
- När ovanstående beteenden visas ingripa med en skvätt vatten från en sprayflaska att distrahera kaninerna från beteendet.
Anmärkning: Se till att vattnet är aldrig ett straff verktyg, snarare en distraktion teknik. Kaninerna kommer vanligtvis separata till motsatta sidor av buren för att brudgummen vattnet bort av sin päls.- Don tjocka handskar att förebygga skada och manuellt skilja paret om vattnet inte distraherar från aggression och fysisk separation är nödvändigt.
- När ovanstående beteenden visas ingripa med en skvätt vatten från en sprayflaska att distrahera kaninerna från beteendet.
- Titta noga för bitande, såra, ömsesidigt jagar (kretsande), resurs vaktar eller hoppar på varandra i ett kämpande sätt (tornerspel). Behandla dessa som aggressiva interaktioner som måste vara ingrep.
- Observera beteenden som innebär svårigheter att fastställa dominans.
Obs: Dessa situationer är väsentliga för observatörer för att kunna identifiera eftersom ett par som inte kan upprätta en ordentlig dominans hierarki är en hög risk för par misslyckande och kan resultera i skadade om det inte identifieras i tid.- För att identifiera dessa situationer, leta efter par där båda kaniner är uppvisar skärmar av dominans eller undergiven kanin ofta kämpar för att komma bort från dominans visar.
Om till exempel undergiven kanin accepterar inte montering och istället flyr bort eller försöker montera dominerande kaninen.- Ge ytterligare övervakning och anrikning ingripande till dessa par att försöka hjälpa dem i deras hierarki etablering.
- För att identifiera dessa situationer, leta efter par där båda kaniner är uppvisar skärmar av dominans eller undergiven kanin ofta kämpar för att komma bort från dominans visar.
- Sårande.
- Omedelbart kontakta veterinärpersonal för något sårande.
- Inte omedelbart separata paret om inte specifika typer av såra iakttas, exempelvis aktivt blödning lesioner eller något sårande på eller nära könsorganen eller ögon.
- Ge ökad anrikning underhållna par mindre, ytliga skador såsom små repor eller sårskorpor, barbering eller hår drar och bildskärm. Inte att separera dessa par.
- När någon av dessa beteenden är noterade, placera paret på ökad övervakning och anrikning ingripande.
- Aggressiva interaktioner.
- Övervaka kommunikation beteenden som kan föregå kämpar beteenden.
Obs: Följande beteenden är alla naturliga sätt som kaniner använder att kommunicera deras dominans hierarki med varandra som om de lämnas därhän kan fortsätta att bekämpa beteenden. Observation av dessa beteenden är en bra indikator på att ett par arbetar genom deras dominans etablering och skulle dra nytta av ökad övervakning och anrikning.- Se för jagar/flyr beteenden.
Obs: Detta är ett mycket vanligt sett beteende hos kaniner att etablera dominans. Detta beteende garanterar inte intervention med en sprayflaska så länge en kanin gör den som jagar och den andra är gör den flyr. - Se för urin besprutning.
Obs: Detta beteende ses oftast hos ihopkopplade vuxna män men kan observeras i Parade honor samt som ensamma inhysta kaniner. Urin kan sprutas på buren eller undergiven kanin. - Titta för montering av beteenden.
Obs: Detta är en mycket typisk dominans display med dominerande montering och den undergivna att acceptera. - Titta efter tecken på Barbering.
Obs: Barbering är vanligtvis först observerades på näsan, mellan öronen eller på baksidan av halsen. Övervaka för att säkerställa att det inte framsteg på lesioner. - Se för dunkande beteenden.
Obs: Dunkande görs av flera kommunikation skäl. En av dem är att Visa dominans i en avgörande hotelser visning av upprepade dunkande mot undergiven kanin. Dunkande kan också göras som ett tecken på underkastelse när de åtföljs av ett flyende beteende. - När någon av dessa beteenden är noterade, måste paret placeras på ökad övervakning och anrikning ingripande.
- Se för jagar/flyr beteenden.
4. metoder för par underhåll med miljömässiga anrikning ingripande.
- Spåra åldern på alla ihopkopplade kaniner. Placera en lapp bakom buren kortet som betecknar kaninerna ålder i veckor och uppdatera den en gång per vecka.
- Öka när problem tenderar att uppstå35övervakning runt vecka 10-20. Könsmognad börjar mellan 12-17 veckors ålder.
- När negativa beteenden (se avsnitt 3.4) eller kommunikation beteenden (se avsnitt 3.5) observeras, öka parets berikning till tre gånger per vecka.
- Tre gånger per vecka ger paret med romanen anrikning objekt (en per kanin) och ökad övervakning dokumenteras på Social inrymt interaktion och anrikning Log.
- Om negativa beteenden eller kommunikation beteenden förvärras eller om nya uppföranden observeras, öka parets berikning till dagliga.
- Varje dag (inklusive helger och helgdagar) ge paret med romanen anrikning objekt (en per kanin) och associerade övervakning dokumenteras på Social inrymt interaktion och anrikning Log.
- Berikning riktlinjer.
- Före användning av berikning får objektet clearance från institutionella anrikning kommittén och/eller veterinära personalen.
- Tillhandahålla minst en anrikning objekt per kanin i varje par som är roterad varannan vecka och lös hö dagligen32.
- Se till att alla papper och kartong anrikning objekt Ånghärdad före användning enligt institutionell policy.
- Ta bort gamla anrikning objekt innan du lägger till en ny så att varje kanin inte har mer än två objekt samtidigt.
- Rotera kategorierna av berikande att upprätthålla nyhet (se figur 4).
Subscription Required. Please recommend JoVE to your librarian.
Representative Results
Under en 12-månadersperiod kvarstod 172 NZW laboratorium kanin par (62% kvinnor, 38% män) efter protokollet ovan. Av dessa par hade bara 20% av manliga par och 1% av kvinnliga par separeras för att bekämpa som visas i figur 5. Paren som var åtskilda för att bekämpa beteenden var separerade i genomsnitt 18,5 veckor gamla. Majoriteten av totala par av båda könen (63%) var separerade för forskningsändamål som inte var relaterade till parning, med 29% av paren fortfarande tillsammans och endast 8% av totala par behöva avskiljas för aggression.
Av dessa 172 parar skulle stabil lottning kunna underhållas väl in i vuxenlivet med den äldsta manliga par att vara 75 veckor gamla och de äldsta kvinnliga par att vara 92 veckor gamla vid tidpunkten för avskiljandet. Båda dessa par skildes för forskningsändamål och hade visas inga skadade och gott om skärmar av affiliative beteenden under sin tid tillsammans. Obesläktade honor Parade vid ankomsten stod för 21% av de kvinnliga par med återstående kvinnliga paren och alla män att vara avvanda tillsammans från en intern transgena avel koloni.
Totalt var endast 14 av de 172 par separerade för aggressivt beteende. Av dessa 14 krävs bara två par veterinär behandling utöver övervakning (en krävs analgesi och en sutur). Dessutom har 172 par i förra året, bara två kaniner haft skadade som inte kan lindras med vanliga behandlingar eller hade en betydande negativ inverkan på deras avsedda forskning användning.
Figur 1: kanin sociala introduktion logg Denna logg möjliggör detaljerad spårning av beteenden som ofta ses under sociala introduktioner. Loggen är modifierad från Royal Society för den förhindrande av Grymheten till djuren (RSPCA) Ethogram37. Klicka här för att se en större version av denna siffra.
Figur 2: kanin sociala introduktion Log ytterligare övervakning logg Denna logg möjliggör detaljerad spårning av beteenden som observerats efter ihopkoppling. Dagen för ihopkoppling kräver två ytterligare 10 min kontroller medan de efterföljande tre dagar endast kräver en ytterligare 10 min check. Klicka här för att se en större version av denna siffra.
Figur 3: kanin sociala inrymt interaktion och anrikning logg Denna logg möjliggör detaljerad spårning av beteenden som observerats och anrikning ingripande i hela loppet av parets liv. Detta dokument ger en detaljerad historia av beteenden som observerats och resultatet av interventionen som tillhandahålls. Klicka här för att se en större version av denna siffra.
Figur 4: kategorier av anrikning. Det här diagrammet beskrivs de olika kategorierna av anrikning som tillhandahålls till kaniner på ett roterande schema. Klicka här för att se en större version av denna siffra.
Figur 5: para ihop resultat efter kön. Denna figur visar att majoriteten av män och kvinnor skildes för forskningsändamål med näst högsta majoriteten av kaniner fortfarande att vara ihopkopplade. Den minsta gruppen av par som skildes var till följd av striderna. Klicka här för att se en större version av denna siffra.
Subscription Required. Please recommend JoVE to your librarian.
Discussion
En av de svåraste utmaningarna en kanin subventionerat program är differentieringen mellan arter typiska aggressiv eller kommunikation beteenden och problematiska kämpar beteenden. En djupgående och omfattande kunskap om normal kanin socialt beteende som krävs av alla djurhållning och veterinärpersonal övervakning kopplingsprocessen eftersom många beteenden som verkar vara en kamp beteende är faktiskt nödvändiga hierarki etablering beteenden som vanligtvis inte leder till skada. Exempelvis jagar och flyr är vanliga, dagliga beteenden inom stabila hierarkier som används för att förstärka rank6,29, men de kan ses som farliga kamp beteenden som kräver separation för ett otränat öga. Laboratoriet kaniner tillbringar en betydande andel av sin tid ägnar sig åt aggressiva beteenden som bidrar till fortsatt underhåll av par hierarki38 och vilda dominerande kaniner kräver undergiven beteenden (t.ex. flyr) från underordnade som ofta som dagligen15. Om en observatör är omedvetna om detta faktum, kan det leda till separation av par som beter sig på ett sätt som arten-lämplig och inte har en oro som motiverar separation. På grund av intensiteten av dessa arter-typiska beteenden, kan det vara svårt att avgöra när ska ingripa och när att låta ett par sortera ut sina egna problem. Detta är särskilt viktigt när du skapar nya par som är att fastställa deras dominans hierarki för första gången. För mycket mänskligt ingripande kan leda till paret är oförmögen att tydligt fastställa en dominans hierarki som kan leda till par uppdelning. Det är viktigt att ha dedikerade, utbildade tekniker att övervaka parar dagligen för att veta när beteenden går framåt förbi punkten för normala dominans beteenden. Par får alltid uttrycka arter-typiska beteenden när möjligt33.
Utbildning är ett viktigt steg i etableringen av en framgångsrik kanin subventionerat program. Det är nödvändigt att träna och samarbeta med djurhållning personalen, personalen och laboratorium veterinärpersonal under varje steg av kopplingsprocessen att instruera dem om vad utgör en separation värdig beteende och vad som är acceptabelt arter-typiska beteende. Laboratoriepersonal bör vara medveten om hur du kontaktar den veterinära personalen att rapporten aggressiva beteenden istället för att rutinmässigt separera kanin par. Ordentlig utbildning kommer att eliminera onödiga separation av par som skulle ha hållits tillsammans med ökad anrikning och övervakning.
Andelen misslyckande av manliga par var sannolikt högre än honorna på grund av svårigheten att fastställa en framgångsrik dominans hierarki inom ett begränsat utrymme bur inställning. Dominerande män begära frekvent aktiviteter från den underordna kanin15 och om dessa inte görs paret inte kanske att upprätta en effektiv hierarki, vilket resulterar i par misslyckande. Även om underordnade kaninen visar lämpliga inlämning beteenden, kan den utrymme tvang som en bur möjliggöra inte adekvat flyr från den dominerande6,39. Detta är en av begränsningar för hopkoppling hanar inom en bur inställning.
En annan begränsning med denna metod är att alternativa dofter från och med tidpunkten för offentliggörandet, inte har testats mot buck urin för en kontroll. Det är möjligt att en doft som erhålls lättare genom faciliteter som inte har ett överflöd av manliga kanin urin kommer att skapa samma effekt. Tidigare arbete i detta koncept som visade att buck urin var mer effektivt begränsa aggression än doe urin, så det är troligt att den lukt som från en manlig kanin är mer betydande än det är en roman lukt6, men detta har inte testats inom denna institution. En ytterligare begränsning är att protokollet för parning är endast tillämplig på kvinnliga nyanlända från en kommersiell uppfödare, honor avvanda med kvinnliga syskon eller mor eller hanar avvanda med manliga syskon vid denna tid. Optimering förfaranden pågår för närvarande för att undersöka de mest effektiva metoderna för ihopkoppling obesläktade honor redan inrymt i ett vivarium inom en standard kasse system, men ytterligare undersökning behövs fortfarande innan dessa metoder kan vara tryggt rekommenderas. Denna metod har också begränsningen bara vara tillämpliga på syskon hanar som har avvanda tillsammans och inte nyskapade manliga par. Publicerade rapporter för att skapa nya ihopkopplade hanar i burar har varit misslyckade14 på grund av deras höga nivåer av aggressioner mot hawaiimonark hanar. Avsnitten underhåll och ingripande av detta protokoll dock gäller för såväl kvinnor som män (Parade vid avvänjning) och resultaten visade, kan vara oerhört effektiv på bostäder hopkopplade män väl förbi könsmognad och in i vuxenlivet. Detta protokoll har också endast testats med NZW kaniner. Ytterligare utredning av andra raser av kaniner är nödvändigt innan detta protokoll kan tillämpas på laboratoriet kanin raser än NZW. Presenterade protokollet har testats i holländska bältade kaniner framgångsrikt men inte med betydande nog nummer att författarna kan tryggt rekommendera denna metod för andra raser. Slutligen togs inspelningarna vid slumpmässiga tidpunkter under standard arbetsdagen. Därför observerades inte beteenden som kan finnas bara på natten. Dessa beteenden kan vara fördelaktigt i förståelse kanin beteende eftersom de är ett skymnings arter och kanske visas mer aktiv beteenden vid gryning och skymning40.
Resultaten visar att följa protokollet beskrivs för sociala introduktioner, par underhåll, och miljömässiga anrikning ingripande kan leda till en framgångsrik NZW kanin par inrymt koloni i standard kasse med reducerad negativa interaktioner som upprätthålla efterlevnad och djurens välfärd. Genom att förstå beteenden som är typiska för NZW kanin social interaktion och vad de indikerar, en mycket mer rigorös och effektiv process kunde utvecklas som tillåts för förbättringar i kaninerna livskvalitet genom att skapa stabila par och upprätthålla den par-inrymt upplevelsen för som länge så experimentellt möjligt.
Subscription Required. Please recommend JoVE to your librarian.
Disclosures
Författarna har något att avslöja.
Acknowledgments
Författarna vill tacka de flera laboratorierna vid U av M som använder kanin modeller för generösa användningen av sina kolonier, i synnerhet, laboratoriet för Dr. Eugene Chen och centrum för avancerade modeller för translationell vetenskaper och Therapeutics ( CAMTraST) team. Tack också till U av M ULAM djurhållning team, Jenny Jones för anrikning samordning och Katie Wearsch för hjälp med ihopparning.
Materials
| Name | Company | Catalog Number | Comments |
| Euro Rabbit Housing | Allentown, Inc. | RBEURO-06 | Middle divider removed http://www.allentowninc.com/large-animal-housing/rabbit-ferret/ |
| R-Suite Enriched Rabbit Housing | Techniplast | 2 attached single cages with middle divider removed http://www.tecniplast.it/en/product/r-suite-rabbit-housing-rack.html |
|
| Lab Animal Marker - Standard Tip | Ketchum Manufacturing | Blue http://www.ketchum.ca/products/lab-animal/animal-markers/1313/animal-markers-standard-tip |
|
| Western Timothy Hay | Oxbow Animal Health | http://www.oxbowanimalhealth.com/products/type/detail?object=1530 | |
| Spray Bottles | Uline | S-18404BLU | https://www.uline.com/Product/Detail/S-18404BLU/Spray-Bottles/24-oz-Blue-Spray-Bottles |
| Rabbit liners | Blue Ridge Tissue | Custom Versa-Pak T.1503 30'' X 30'' http://www.blueridgetissue.com/products/#versa_pak |
|
| Premium Full Leather Glove | Wells Lamont | 0-53300-07006-8 | https://www.wellslamont.com/catalog/product/premium-full-leather-glove/ |
| Various Enrichment Toys | Bio-Serv | Multiple | https://www.bio-serv.com/category/Rabbit_Enrichment_Devices.html |
| Fruit and Veggie Medley Dried Treats | Bio-Serv | F7227 | https://www.bio-serv.com/Rabbit_Enrichment_Treats/FVM.html |
| White Noise Machine | HoMedics | https://www.amazon.com/HoMedics-SS-2000G-Relaxation-Machine-Nature/dp/B00A2JBMRE/ref=redir_mobile_desktop/134- 0048439-0235364?_encoding=UTF8&keywords=white%20noise%20machine&qid=1503569413 &ref_=mp_s_a_1_6_a_it&sr=8-6 |
|
| Safari Soft Bristle Cat Brush | Safari | https://www.amazon.com/Safari-Soft-Bristle-Brush-Cats/dp/B0002RJMB4 | |
| Crink-l'Nest | The Andersons Lab Bedding | CNK | http://www.andersonslabbedding.com/irradiated/crink-lnest/ |
| Manzanita Wood Gnawing Sticks | Bio-Serv | W0016 | http://www.bio-serv.com/Rabbit_Enrichment_Devices/W0016.html |
| Wood Gnawing Blocks Certified | Bio-Serv | K3511 | Small http://www.bio-serv.com/Rabbit_Enrichment_Devices/Wood_Blocks.html |
| Paper Bags | Duro | Sack Lunch Bags https://www.amazon.com/Duro-Paper-Lunch-Brown-Count/dp/B01N0AS7QO/ref=sr_1_9?ie=UTF8&qid=1511194982&sr=8-9 &keywords=paper+bags |
|
| Various Sources of Cardboard | Recycled supply boxes from the vivarium | All cardboard is autoclaved prior to use |
References
- Council, N. R. Guide for the Care and Use of Laboratory Animals. , 8th ed, The National Academies Press. (2011).
- Council of Europe, Publication Section. European Convention for the Protection of Vertebrate Animals used for Experimental and other Scientific Purposes: explanatory report on the convention opened for signature on 18 March 1986. , (1986).
- Office of Laboratory Animal Welfare. Departures from the Guide. , Available from: https://grants.nih.gov/grants/olaw/departures.htm (2013).
- Chu, L. -r, Garner, J. P., Mench, J. A. A behavioral comparison of New Zealand White rabbits (Oryctolagus cuniculus) housed individually or in pairs in conventional laboratory cages. Appl Anim Behav Sci. 85 (1), 121-139 (2004).
- Lofgren, J. L. Comfortable Quarters for Laboratory Animals. Litwak, K., Liss, C., Tiford, D., Reinhardt, V. 10, Animal Welfare Institute. 66-76 (2015).
- Valuska, A. J., Mench, J. A. Size does matter: The effect of enclosure size on aggression and affiliation between female New Zealand White rabbits during mixing. Appl Anim Behav Sci. 149 (1), 72-76 (2013).
- Whary, M., Peper, R., Borkowski, G., Lawrence, W., Ferguson, F. The effects of group housing on the research use of the laboratory rabbit. Lab Anim. 27 (4), 330-341 (1993).
- Trocino, A., Xiccato, G. Animal welfare in reared rabbits: a review with emphasis on housing systems. World Rabbit Sci. 14 (2), 77-93 (2010).
- Turner, R. J., Held, S. D., Hirst, J. E., Billinghurst, G., Wootton, R. J. An immunological assessment of group-housed rabbits. Lab Anim. 31 (4), 362-372 (1997).
- Fuentes, G. C., Newgren, J. Physiology and clinical pathology of laboratory new zealand white rabbits housed individually and in groups. J Am Assoc Lab Anim Sci. 47 (2), 35-38 (2008).
- Noller, C. M., et al. The influence of social environment on endocrine, cardiovascular and tissue responses in the rabbit. Int J Psychophysiol. 88 (3), 282-288 (2013).
- Held, S., Turner, R., Wooton, R. Choices of laboratory rabbits for individual or group-housing. Appl Anim Behav Sci. 46 (1), 81-91 (1995).
- Gunn, D., Morton, D. B. Inventory of the behaviour of New Zealand White rabbits in laboratory cages. Appl Anim Behav Sci. 45 (3), 277-292 (1995).
- DiVincenti, L. Jr, Rehrig, A. Social Behavior of Adult Male New Zealand White Rabbits Housed in Groups or Pairs in the Laboratory. J Appl Anim Welf Sci. 20 (1), 86-94 (2017).
- DiVincenti, L. Jr, Rehrig, A. N. The Social Nature of European Rabbits (Oryctolagus cuniculus). JAALAS. 55 (6), 729-736 (2016).
- Froberg-Fejko, K. A Review of the Physiology and Behavior of the Laboratory Rabbit. ALN. , (2014).
- AAALAC. Social Housing and Social Experience FAQ. , Available from: https://www.aaalac.org/accreditation/faq_landing.cfm#C6 (2017).
- Seaman, S. C., Waran, N. K., Mason, G., D'Eath, R. B. Animal economics: assessing the motivation of female laboratory rabbits to reach a platform, social contact and food. Anim Behav. 75 (1), 31-42 (2008).
- Huls, W. L., Brooks, D. L., Bean-Knudsen, D. Response of adult New Zealand white rabbits to enrichment objects and paired housing. Lab Anim Sci. 41 (6), 609-612 (1991).
- Reinhardt, V., Reinhardt, A. Variables, refinement and environmental enrichment for rodents and rabbits kept in research institutions. , Animal Welfare Institute. (2006).
- Lofgren, J. L., et al. Innovative social rabbit housing. , Massachusetts Institute of Technology. Abstract Presented at the 62nd American Association for Laboratory Animal Science Annual Meeting (2010).
- Love, J., Hammond, K. Group-Housing Rabbits. Lab Anim. 20 (8), (1991).
- Wyatt, J., DiVincenti, L. Social Housing of Rabbits. , University of Rochester. (2013).
- Morton, D. B., et al. Refinements in rabbit husbandry: second report of the BVAAWF/FRAME/RSPCA/UFAW Joint Working Group on Refinement. Lab Anim. 27 (no. 4), 301-329 (1993).
- Lockley, R. M. Social Structure and Stress in the Rabbit Warren. J of Anim Ecol. 30 (2), 385-423 (1961).
- Enser, S. Comparison of housing and welfare of group housed rabbits. Envigo RMS, Exhibited at IAT Congress. , (2016).
- Raje, S., Stewart, K. Group Housing for Male New Zealand White Rabbits. Lab Anim. 28 (4), (1997).
- Hoffman, K., McDonald, K. Reducing Social Housing Complications in Adult Female New Zealand White Rabbits. , University of Pittsburgh. Poster presented at National AALAS Meeting (2016).
- Mykytowycz, R. Territorial marking by rabbits. Sci Am. 218 (5), 116-126 (1968).
- Harriman, M. Introducing Rabbits: Bonding Techniques for Matchmakers. , Drollery Press. Alameda, CA. DVD (1994).
- DeMello, M. Bonding Rabbits. , House Rabbit Society. Available from: http://rabbit.org/faq-bonding-multiple-rabbits/ (2011).
- Lidfors, L. Behavioural effects of environmental enrichment for individually caged rabbits. App Anim Behav Sci. 52 (1), 157-169 (1997).
- Baumans, V. Environmental enrichment for laboratory rodents and rabbits: requirements of rodents, rabbits, and research. Ilar j. 46 (2), 162-170 (2005).
- Hansen, L. T., Berthelsen, H. The effect of environmental enrichment on the behaviour of caged rabbits (Oryctolagus cuniculus). Appl Anim Behav Sci. 68 (2), 163-178 (2000).
- Thurston, S., Burlingame, L., Lofgren, J. Troubleshooting Aggressive Behaviors in Pair Housed Rabbits Using Environmental Enrichment. , University of Michigan. Poster Presented at National AALAS Meeting (2015).
- Patterson-Kane, E. G., Farnworth, M. J. Noise Exposure, Music, and Animals in the Laboratory: A Commentary Based on Laboratory Animal Refinement and Enrichment Forum (LAREF) Discussions. J of Appl Anim Wel Sci. 9 (4), 327-332 (2006).
- Hawkins, P. Refining rabbit care: A resource for those working with rabbits in research. , Royal Society for the Prevention of Cruelty to Animals. Handout #2 Ethogram Format (2015).
- Lidfors, L., Edström, T. Chapter 28. T2 - The UFAW Handbook on the Care and Management of Laboratory and Other Research Animals. Kirkwood, J., Hubrecht, R. C. , Wiley-Blackwell. (2010).
- Mykytowycz, R., Hesterman, E. R. An Experimental Study of Aggression in Captive European Rabbits, Oryctolagus cuniculus (L.). Behav. 52 (1/2), 104-123 (1975).
- Mykytowycz, R., Rowley, I. Continuous observations of the activity of the wild rabbit, Oryctolagus cuniculus (L.), during 24 hour periods. CSIRO Wild Res. 3 (1), 26-31 (1958).
