Waiting
Login processing...

Trial ends in Request Full Access Tell Your Colleague About Jove
Click here for the English version

Medicine

Beoordeling van Plasma coagulatie op leverweefsel in een grote diermodel In Vivo

Published: August 4, 2018 doi: 10.3791/57355

Summary

Hier presenteren we een protocol om te beoordelen experimenteel plasma coagulatie in leverweefsel in vivo. In een varkens model, microcirculatie wordt onderzocht door laser Doppler coagulatie diepte wordt gemeten histologisch, temperatuur op coagulatie site door infrarood thermometer en thermografische camera en koker afdichten effect is gedocumenteerd door barstdruk experimenten.

Abstract

Plasma coagulatie als een vorm van elektrocauterisatie wordt gebruikt in de lever chirurgie decennialang te verzegelen het grote lever snijvlak geconstateerd na grote hepatectomy ter voorkoming van bloeduitstortingen in een later stadium. De exacte gevolgen van plasma coagulatie op leverweefsel zijn alleen slecht onderzocht. In onze varkens model, kunnen de bloedstolling effecten dicht bij de klinische toepassing worden onderzocht. Een gecombineerde laser Doppler debietmeter en spectrofotometer documenten microcirculatie verandert tijdens coagulatie op 8 mm weefsel diepte noninvasively, kwantificeerbare voorlichting over hemostase buiten de subjectieve klinische indruk. De temperatuur op coagulatie site is beoordeeld met een infrarood thermometer voorafgaande en post stolling en met een thermografische camera tijdens coagulatie, een meting van de temperatuur van de lichtbundel is niet mogelijk vanwege de hogere drempel van de apparaten. De diepte van stolling microscopisch wordt gemeten op Haematoxyline/eosine gekleurd secties na kalibratie met een object micrometer en geeft een exacte informatie over de macht instelling-stolling diepte-relatie. De afdichtende werking wordt onderzocht op de galwegen, want het is niet mogelijk voor een plasma coagulator voor het afdichten van grotere bloedvaten. Burst druk experimenten worden uitgevoerd die op transplanteren organen uitsluiten van bloeddruk gerelateerde effecten.

Introduction

Argon plasma coagulatie (APC) is een veelgebruikt instrument in de abdominale chirurgie voor meer dan drie decennia1,2. Het is een standaard techniek voor het bereiken van de secundaire hemostase na grote hepatectomy door het afdichten van de lever oppervlak gesneden om te voorkomen dat latere bloeduitstortingen3. Plasma coagulatie is een gespecialiseerde vorm van radiofrequentie elektrocauterisatie, die de elektrische energie door middel van een boog geïoniseerd gas levert. Biedt monopolaire elektrothermische hemostase en heeft deze noncontact techniek het voordeel van de elektrode te houden aan de weefsel4voorkomen. De lichtbundel geïoniseerd gas automatisch is gericht op het gebied van de laagste elektrische weerstand en is wendde zich af wanneer weerstand als gevolg van uitdroging tot andere gebieden nog niet verdroogde stijgt. Dit levert een uniforme beperkte diepte van stolling5,6. Factoren die het effect van de stolling beïnvloeden zijn de activeren tijd, de instelling van het vermogen van het apparaat van de stolling en de afstand van de sonde naar het weefsel. Helium is een ander draaggas, die kan worden gebruikt voor plasma coagulatie7. De nieuwste klinische studies geconcentreerd op klinische resultaten in plaats van histologische en functionele bevindingen3,8,9, terwijl experimentele studies gericht op in vitro onderzoeken10 of experimenten op geïsoleerde geperfundeerd organen11.

Het onderliggende protocol maakt de studie van de effecten van plasma coagulatie in een grote diermodel dicht bij de klinische toepassing met behulp van menselijke standaarduitrusting op varkens: microcirculatie noninvasively wordt beoordeeld door een laser Doppler debietmeter en spectrofotometer, die een klinische standaardhulpmiddel voor deze indicatie12,13 is. Temperatuurveranderingen tijdens coagulatie worden gecontroleerd met een infrarood thermometer en een thermografische camera. De diepte van stolling wordt gemeten op histologische Haematoxyline/eosine gekleurd secties na de oogst van weefselmonsters. Voor de vergelijking met andere middelen voor secundaire hemostase, worden burst druk experimenten uitgevoerd. In tegenstelling tot de eerder beschreven technieken14, worden deze uitgevoerd op transplanteren van organen uit te sluiten van bloeddruk gerelateerde effecten. Naast de beschreven onderzoek naar de lokale effecten van plasma coagulatie, kan standaard bloedonderzoek ook worden ondernomen in de varkens model.

Subscription Required. Please recommend JoVE to your librarian.

Protocol

Regels beheerst door Duitse wetgeving voor dierproeven, alsmede de beginselen van Laboratory Animal Care (National Institutes of Health publicatie ed. 8, 2011) werden gevolgd. Officiële toestemming wordt verleend van de gouvernementele dierenverzorgers kantoor (Landesamt für Natur, Umwelt und Verbraucherschutz Nordrhein-Westfalen, Recklinghausen, Duitsland).

1. dieren

  1. Het gebruik van vrouwelijke Duitse landras varkens (onder de 25-30 kilo) in open kooien gehuisvest.
  2. Gebruik 5 dieren per groep (argon en helium).
  3. Toestaan dat de dieren om te acclimatiseren aan de omgeving voor ten minste één week voor de experimenten. Snelle dieren gedurende 24 uur vóór de operatie met gratis toegang tot water.

2. anesthesie

  1. Premedicate de dieren met een intramusculaire injectie van atropine (0,1 mg/kg BW), ketamine (15 mg/kg lichaamsgewicht [BW]) en xylazine (10 mg/kg BW) 10 minuten vóór de inductie van de anesthesie.
  2. Perifeer veneuze toegang is opgericht door plaatsing van een 22-gauge canule in een ader van het oor.
  3. Induceren narcose door i.v. injectie van propofol 2 mg/kg lichaamsgewicht.
  4. Plaats het dier in de liggende positie en het uitvoeren van een longitudinaal huid incisie in de jugular groef over een lengte van 2 cm. Locate ader door de botte voorbereiding van het subcutane weefsel. Invoegen canule, vervolgens Seldinger draad.
  5. Intrekken van de canule en 14 Fr. katheter via de begeleidingskabel invoegen. Intrekken van begeleidingskabel. Katheter verbinden met de uitbreiding en fixeren van de katheter door een riem of een hechtdraad.
  6. Trek de tong en rechte Laryngoscoop invoegen. Gebruik het puntje van de Laryngoscoop te trekken beneden het strotklepje. Plaats de buis door de stembanden. Plaats van manchet onder glottis en opblazen.
  7. Ventileer met 40% zuurstof op 20-26 adem/min en een ademhalingsvolume van 10 ml/kg te houden van de einde-getijde gedeeltelijke koolstofdioxide spanning tussen 36 en 42 mm Hg.
  8. Handhaven van anesthesie met Isofluraan bij een concentratie van 1-1,5% en fentanyl bij een concentratie van 3-4 µg/kg/h.
  9. Leveren van Ringer's lactaat oplossing met een initiële snelheid van 4 mL/kg/h, en verhogen na de laparotomie aan een constante infusiesnelheid van 8 mL/kg/h.

3. chirurgie en Plasma Coagulation

  1. Plaats het dier in een liggende positie op een standaard chirurgische tafel.
  2. Desinfecteren van de huid door het toepassen van een standaard chirurgische ontsmettingsmiddel (2-Propanol 45 g/100 g, 1-Propanol 10 g / 100g, Bifenyl-2-ol 0,2 g/100 g) met een chirurgische doekje voor 3 keer.
  3. Uitvoeren van een laparotomie breed middellijn van de xiphoid process naar het schaambeen met een scalpel en chirurgische OPROLMECHANISMEN installeren.
  4. Schakel het apparaat plasma coagulatie, argon of helium gasfles, afhankelijk van het gebruikte dragergas open. Gasstroom te selecteren coagulatie 3 L/min. uitgangsvermogen apparaat desgewenst aanpassen.
    Opmerking: Beide edelgassen, Argon of Helium, kan worden gebruikt voor plasma coagulatie. Stolling effecten zijn vergelijkbaar. Zie referentie7 voor meer informatie.
  5. Plasma coagulatie op de linker lever kwab als eerder beschreven7uitvoeren. Gebruik een titanium mal (vierkante diafragma 1 x 1 cm2) op de standaardisering van de stolling zone. Coaguleren voor 5 s met een sonde-afstand van 1 cm. De coagulations met verschillende energie-instellingen kunnen worden uitgevoerd naast een korte afstand tussen de coagulations van 5 mm (Figuur 1).
  6. Voor het oogsten van de lever, verdeel alle ligamenteuze verbindingen aan de lever. Isoleren en verdeel de hepatische stam boven de superieure duodenale flexure lange delen van portal ader en Galgang verlaten. Verdeel de holle ader boven en onder de lever en het orgel op te halen.
  7. Na de oogst van de lever, waren de varkens euthanized door i.v. toediening van 0.16 g/kg BW pentobarbital.
  8. Resect voor de uitbarsting druk experimenten, de helft van de linker mediale lever kwab met een scherpe schaar. Plasma-coaguleren van de cut oppervlakte (100W uitgangsvermogen) of verzegelen het snijvlak met fibrine sealant (Figuur 2).

4. de microcirculatie meting

Opmerking: Laser Doppler spectroscopie kunt bepalen bloedstroom in weefsel door het meten van de Doppler shift veroorzaakt door het verkeer van erytrocyten. Het signaal van de Laser correleert met het aantal bewegende erytrocyten. Laser Doppler spectroscopie in klinische gebruik (bijvoorbeeld transplantatie geneeskunde) en heeft al meerdere malen15gevalideerd.

  1. Zet de laser Doppler debietmeter en een spectrofotometer. Gebruik een platte sonde.
  2. Neem basislijnmetingen voor stroom en snelheid. Opslaan of Let op de waardes.
  3. Stolling zoals beschreven onder 3.5 uitvoeren
  4. Plaats de vlakke sonde op de sites van de stolling en maatregel flow en snelheid. Nogmaals, opslaan of opmerking waarden.
  5. Herhaal voor alle instellingen van de macht van het coagulator apparaat.

5. de temperatuurmeting

  1. Schakel het systeem op (thermografische camera, laptop en infrarood thermometer) en laat het lopen voor ten minste 1 uur vóór het uitvoeren van metingen.
  2. Focus aanpassen en frame weergeven op de thermografische camera op de stolling-site. Infrarood sequenties kunnen worden opgespoord met de ruimtelijke resolutie van 1024 x 768 pixels met de resolutie van een temperatuur groter dan 20 mK. Rekening, die de regio van coagulatie en het omringende weefsel — beïnvloed door warmteoverdracht — bevindt zich in het midden van de weergave.
    Opmerking: Het moet zoveel pixels van het frame bevatten mogelijk voor een optimale ruimtelijke resolutie.
  3. Record coagulatie proces met de plasma-coagulator van de lever ondergrond met de thermografische camera over een periode van 2-min.
  4. Analyseren van afbeeldingsreeksen met de software van de analyse van de thermografie: definiëren van gebieden van belang.
    Opmerking: Software berekent de loop van de overeenkomstige gemiddelde temperatuur na verloop van tijd.

6. coagulatie diepte meting

  1. Oogst de linker mediale lever kwab met een scherpe schaar.
  2. Accijnzen de coagulatie sites met 1 cm dikte. Snijd in 3 mm dik longitudinale segmenten voor verdere verwerking.
  3. Fix weefselsteekproeven bij 4 ° C's nachts met neutrale 10% gebufferd formaline. Verwarm paraffine 2 ° C boven het smeltpunt en insluiten van segmenten. Proces 's nachts.
  4. De Haematoxyline/eosine-kleuring uitvoeren
    1. Deparaffinize en hydrateren het weefsel door vervolgens dompelen in 2 x xyleen, 100% ethanol (EtOH), 95% EtOH, 70% EtOH, gedeïoniseerd H2O voor elke 2 min.
    2. Vlek het weefsel monster met Meyers Haematoxyline oplossing gedurende 3 minuten.
    3. Nu spoel in leidingwater voor 5 min.
    4. Vlek het weefsel met eosine oplossing gedurende 3 minuten.
    5. Spoel in 2 x EtOH 95% en vervolgens xyleen gedurende 3 minuten elke. Monteer met de standaard montage medium.
  5. Schakel het systeem in (Microscoop aangesloten camera, beeldbewerkingssoftware). Bekijk alle secties met 40 X vergroting.
  6. Neem een foto van een object micrometer bij een vergroting van 40 X. Druk op de knop Herkalibreren in het venster doelstellingen. Selecteer Handmatige kalibratie. Trek een lijn op de micrometer afbeelding van 100 µm. Enter 0,1 mm in het dialoogvenster en druk op OK.
  7. Lengte in de weergave selecteren > analyse besturingselementen > venster aantekeningen en metingen. Meten van de lever oppervlak tot aan de marge van de stolling met de muis. Opmerking het resultaat of exporteren. Herhaal de meting op een andere locatie op dezelfde dia..
    Opmerking: Coagulatie diepte kan gemakkelijk worden onderscheiden van de normale lever weefsel door de scherpe marge tussen de normale hepatocyte koorden en de zone van necrose met gekrompen cytoplasma, pyknotische kernen en bloeding zones.
  8. Berekent gemiddelde uit twee metingen.

7. de meting van de druk van de burst

  1. Schakel het systeem in (automatische pompen, druk meter). De lever monsters volgens de stap 3.7 voor te bereiden.
    Opmerking: Gebruik twee parallelle pompen aangesloten via een 3-weg-afsluiter. De maximale druk van 1 500 mm Hg niet kan worden verkregen met een enkele pomp.
  2. Portal vein, gemeenschappelijke hepatische slagader en gal duct isoleren met een schaar in de haptische stam. Portal vein klem met een pincet overholt en afbinden met een monofil hechtdraad 4-0. Gemeenschappelijke hepatische slagader een pincet overholt klem en afbinden met een monofil hechtdraad 4-0.
  3. Ch-16 katheter in de Galgang invoegen en afbinden met een 2-0 zijde hechtdraad. De katheter verbinden met de automatische pompen, 3-weg afsluiter installeren met druk meter (Figuur 3).
  4. Vul de spuit perfusie met zoutoplossing.
  5. Automatische pompen met een snelheid van de levering van 99 mL/h beginnen.
  6. Lever gesneden oppervlak en druk meter voor lekkage en record barstdruk controleren.
    Opmerking: Voor eenvoudiger erkenning van lekkage, patent blauw kan worden toegevoegd aan saline (2 mL patent blauw + 18 mL zoutoplossing). Het is makkelijker om te observeren barstdruk door merken de tijd van het verlies van druk op de druk meter.

Subscription Required. Please recommend JoVE to your librarian.

Representative Results

Microcirculatie: Met behulp van het diagnostisch apparaat voor hemostase na plasma coagulatie kan worden aangetoond door wijzigingen van de microcirculatie. Capillaire bloed stroom (weergegeven als willekeurige eenheden (AU)) daalt van de waarde van een basislijn van 142.7 ± 76.08 AU tot 57.78 ± 49.57 AU op 25 W apparaat uitgangsvermogen, 48.5 ± 7,26 AU 50 W en 5.04 ± 1.31 AU bij 100 W (Figuur 4).

Temperatuur: Temperatuur op de stolling-sites werd gemeten met een thermografische camera (Figuur 5). De slechts onbeduidend temperatuurveranderingen werden gedocumenteerd met een infrarood thermometer. Bleek een basislijn temperatuur van 32.42 ± 2.27 ° C. Na de coagulatie met 25 W, de temperatuur was 33.33 ± 1,81 ° C. Met een 50 W laser coagulatie leverde een temperatuur van 31.17 ± 2,13 ° C. Na de coagulatie met de instelling van het maximale vermogen van 100 W was de temperatuur meestal onveranderd met 30.17 ± 3.19 ° C (Figuur 6).

Coagulation diepte: Plasma coagulatie creëert een oppervlakkige zone van necrose met kan gemakkelijk worden onderscheiden van de normale lever parenchym (Figuur 7). De diepte van de necrose kan worden gemeten op meerdere secties en laat een niet volledig lineair stijging met stijgende machtsniveaus van de plasma-coagulator. De diepte van de stolling is na helium plasma coagulatie, 230.2 ± 57.83µm op 25W, 314.6 ± 87.39 µm op 50 W, 292.2 ± 45.65 µm op 75W en 412.9 ± 160.9 µm op 100 W apparaat uitgangsvermogen (Figuur 8). Het vermogen van het apparaat zijn vrij te kiezen en koos een positieve correlatie met coagulatie diepte7.

Barstte druk: Burst druk metingen verricht op het snijvlak van de mediale lever transplanteren linker kwab toont geen verschil na helium (1254±578.7 mmHg) of argon (1003 ± 554.4 mmHg) plasma coagulatie (Figuur 9). Burst druk zijn beduidend goedkoper in vergelijking tot fibrine mastieken7 maar lijken geschikt voor klinisch gebruik.

Figure 1
Figuur 1: links mediale kwab van de lever na argon plasma coagulatie. Acht coagulatie sites op de linker mediale lever kwab (vanaf links boven naar rechts onder: 10 W, 15 W, 20 W, 25 W, 30 W, 50 W, 75 W, 100 W). De mate van stolling gestandaardiseerd met de schimmel. Klik hier voor een grotere versie van dit cijfer.

Figure 2
Figuur 2: voorbereiding van lever prothese burst druk metingen. De helft van de lever kwab is gereseceerd, en lever snijvlak is verzegeld met fibrine sealant. Klik hier voor een grotere versie van dit cijfer.

Figure 3
Figuur 3: apparatuur voor burst druk metingen. Automatische pomp (spuit gevuld met zoutoplossing) en druk meter aangesloten via een 3-weg-afsluiter. Klik hier voor een grotere versie van dit cijfer.

Figure 4
Figuur 4: wijzigingen van de microcirculatie. Wijzigingen in bloed stroom (weergegeven als willekeurige eenheden) vóór en na argon plasma coagulatie op 25 W, 50 W en 100 W apparaat uitgangsvermogen (n = 3-6). * = P< 0,05, 1-way ANOVA. Klik hier voor een grotere versie van dit cijfer.

Figure 5
Figuur 5: temperatuur bij stolling plaatsen gemeten met een thermografische camera. De voorbeeldige foto met een thermografische camera tijdens helium plasma coagulatie met uitgangsvermogen van 40W apparaat. Klik hier voor een grotere versie van dit cijfer.

Figure 6
Figuur 6: temperatuur bij stolling plaatsen gemeten met een infrarood thermometer. De temperatuur op de stolling-sites met een infrarood thermometer gemeten vóór en na argon plasma coagulatie (n = 3-6). Klik hier voor een grotere versie van dit cijfer.

Figure 7
Figuur 7: Zone van oppervlakkige necrose na helium plasma coagulatie. De Haematoxyline/eosine gekleurd lever sectie bij 40 X vergroting. De zone van necrose toont een verlies van de hepatocyte snoer architectuur, cellen met gekrompen cytoplasma en bloeding zones. Pijlen geven aan dat de diepte van stolling op twee verschillende locaties. Klik hier voor een grotere versie van dit cijfer.

Figure 8
Figuur 8: coagulatie diepte na helium plasma coagulatie. Stolling diepte op de verschillende machtsniveaus (25W, 50W, 75W en 100W, n = 6). * = P< 0,05, *** = P< 0,001, 1-way ANOVA. Klik hier voor een grotere versie van dit cijfer.

Figure 9
Figuur 9: druk barsten. Barsten druk metingen op de lever snijvlak geconstateerd na argon of helium plasma coagulatie. Klik hier voor een grotere versie van dit cijfer.

Figure 10
Figuur 10: bloed testresultaten. Geselecteerde parameters van klinische biochemie en bloed gas resultaten worden weergegeven vóór en volgende argon plasma coagulatie. Geen significante veranderingen optreden, demonstreren de effecten van plasma coagulatie beperkt tot lokale wijzigingen op de site van de stolling. Klik hier voor een grotere versie van dit cijfer.

Subscription Required. Please recommend JoVE to your librarian.

Discussion

Knaagdier modellen voor lever chirurgie vastgesteld voor een lange tijd-16. Niettemin, grote dierlijke modellen bieden bepaalde voordelen: geen microchirurgische apparatuur nodig is als standaard operatieve uitrusting voor de mens kan worden toegepast, chirurgische technieken vergelijkbaar met klinische gebruik zijn en standaard klinische evaluatiemethoden kunnen overgedragen aan de experimenten. Standaard klinische tests van het bloed kan bijvoorbeeld worden uitgevoerd zonder de behoefte aan speciale laboratorium testmethoden (Figuur 10).

Varkens zijn aangewezen laboratoriumdieren voor Cardiorespiratoire onderzoek zoals hun fysiologie die lijkt op de menselijke17. Vanwege de gelijkenis in omvang, gesegmenteerde structuur en histologie zijn varkens ook een van de standaard proefdieren voor experimentele hepatische heelkunde18. Plasma coagulatie werd geëvalueerd in de varkens model vanwege de voordelen (gelijkenis met menselijke fysiologie en evaluatie van klinische standaarduitrusting)7. In tegenstelling tot heelkundige technieken, kan niet anesthesiologic beheer gemakkelijk worden geëxtrapoleerd. Vooral het beheer van de luchtwegen kunnen moeilijk17. De afstand tussen de snijtanden de glottis is erg lang en de anatomie is anders op de mens orotracheal intubatie moeilijker voor de onervaren onderzoeker. Daarnaast is masker ventilatie bijna onmogelijk in varkens, zodat berging strategieën (bv tracheostomy) aanwezig moeten zijn.

De onderzoeker moet vergelijkbare om resultaten te bereiken in plasma coagulatie, strikt aandacht om te standaardiseren sonde afstand en duur van coagulatie. Hoewel het is relatief makkelijk te onderhouden de sonde afstand, een stopwatch kan worden gebruikt om de 5 tellen s van coagulatie. De beschreven techniek van plasma coagulatie op de lever oppervlak werd gebruikt in basisonderzoek op de onderliggende effecten van plasma coagulatie op de lever in vivo7. De hierboven beschreven technieken van varkens anesthesie, chirurgie en plasma coagulatie kunnen ook worden gebruikt grote hepatische resectie onderzoeken en vergelijken van verschillende technieken van snijvlak daarna afdichten.

De laser Doppler debietmeter en de spectrofotometer voor microcirculatie metingen is een klinische standaardhulpmiddel19 en bleek zeer nuttig zijn voor de beoordeling van het verkeer rechtstreeks op het orgel parenchym. Waarden voor de bloedstroom en bloed stroomsnelheid worden berekend met het voordeel van niet-invasivity. Microcirculatie parameters zijn slechts indirecte maatregelen van het effect van de coagulatie, dus Doppler metingen moeten worden gecorreleerd met een objectieve parameter voor de coagulatie. In onze experimenten gebruikten we histologische coagulatie diepte voor correlatie.

Een tekortkoming van de temperatuurmeting is het onvermogen voor het meten van de temperatuur van de lichtbundel plasma tijdens coagulatie, omdat de temperatuur van de plasma-balk boven de bovenste grenswaarde van beide apparaten. De infrarood thermometer is gemakkelijk toe te passen, terwijl de thermografische camera setup meer complex is, maar meer precieze gegevens biedt. De temperatuur van de basislijn voordat coagulatie is lager dan verwacht (varkens lichaam temperatuur ~38.5 ° C17), demonstreren de vernietigende effecten van laparotomie op lichaamstemperatuur. De gemeten temperatuur toeneemt niet tijdens en na de coagulatie, demonstreren de uitstekende perfusie van de lever. Deze thermische stelen effect van de lever is bekend uit radiofrequentie ablatie20. Burst druk directies werden uitgevoerd op de gal kanaalsysteem in plaats van op hepatische vaartuigen voor een eenvoudige reden: het is onmogelijk voor plasma coagulators (zoals het is voor fibrine mastieken) voor het afdichten van grotere schepen. Beide middelen van secundaire hemostase zegel het snijvlak van het resected orgel, terwijl grotere schepen tijdens resectie als ligatuur zijn verbonden. Onze burst druk experimenten zijn enigszins gewijzigd ten opzichte van de gerapporteerde techniek14. We gemeten barstdruk op transplanteren organen om organisatorische redenen. Deze regels uit de bloeddruk gerelateerde effecten en zijn veel gemakkelijker toe te passen dan aan gebruik geperfundeerd of in-vivo -organen. Waarden van de druk die experimenten kunnen, daarom, van afwijken geperfundeerd /in-vivo metingen als gevolg van gewijzigde lever structuur (meestal hogere druk op transplanteren organen). De hierboven beschreven burst druk techniek kan ook worden uitgevoerd in vivo.

Subscription Required. Please recommend JoVE to your librarian.

Disclosures

De auteurs hebben niets te onthullen.

Acknowledgments

De auteurs hebben geen bevestigingen.

Materials

Name Company Catalog Number Comments
Xylazine 20 mg/mL Vetoquinol GmbH Xylapan
Ketamine 100 mg/mL Ceva GmbH Ceva Ketamine Injection
Atropine 100 mg / 10 mL Dr. Franz Köhler Chemie GmbH Atropinsulfat Köhler 100mg Amp.
Propofol Fresenius Kabi GmbH Propofol 1% MCT Fresenius
Fentanyl KG Rotexmedica GmbH Fentanyl 0,5mg Rotexmedica
Isoflurane Abbot GmbH Forene 100% (V/V) 250 mL
Ringer's lactate solution Baxter Deutschland GmbH sodium 131mmol/l, potassium 5 mmol/l, calcium 2 mmol/l, cloride 111 mmol/l, lactate 29 mmol/l
Surgical disinfactant Schülke & Mayr GmbH Kodan Tinktur forte gefärbt 1l 104804
Motorized microscope Nikon Instruments Europe Eclipse TE2000-E
Microscope camera Nikon Instruments Europe Digitalsight DS-Qi1Mc
Imaging software Nikon Instruments Europe NIS elements Vers. 4.40
Plasma coagulator Söring GmbH CPC-1000
Argon gas Linde AG Argon 4.8 
Helium gas Linde AG Helium 4.8
O2C LEA Medizintechnik GmbH O2C Version 1212 with LF-2 or LF-3 probe
Infrared thermometer Voltcraft VOLTCRAFT IR 260-8S
Thermographic camera InfraTec GmbH VarioCAM HD head 820
Thermographic analysis software InfraTec GmbH IRBIS 3
Mayer's Hematoxylin solution Merck 1.09249
Eosin solution VWR International GmbH Merck 1.09844
Rollerpump Masterflex L/S easy Load Cole-Parmer Instrument Company model 7518-10
Perfusorpump B. Braun Melsungen AG Perfusor secura FT
Digital pressure meter Greisinger electronic GMH 3161
Perfusorsyringe, 50 mL B. Braun Melsungen AG REF 8728810 F
Perfusor line, Type IV Standard, PVC Luer lock B. Braun Melsungen AG REF 8722960
3-Way stopcock, Dicofix C35C B. Braun Melsungen AG REF 16494 C
Silk 2-0. 3 metric Resorba REF H5F
Vicryl 4-0 Sutupak Ethicon V1224H
NaCl 0.9 % B. Braun Melsungen AG

DOWNLOAD MATERIALS LIST

References

  1. Link, W. J., Incropera, F. P., Glover, J. L. A plasma scalpel: comparison of tissue damage and wound healing with electrosurgical and steel scalpels. ArchSurg. 111, 392-397 (1976).
  2. Kwon, A. H., Inui, H., Kamiyama, Y. Successful laparoscopic haemostasis using an argon beam coagulator for blunt traumatic splenic injury. EurJSurg. 167, 316-318 (2001).
  3. Frilling, A., et al. Effectiveness of a new carrier-bound fibrin sealant versus argon beamer as haemostatic agent during liver resection: a randomised prospective trial. Langenbecks ArchSurg. 390, 114-120 (2005).
  4. Raiser, J., Zenker, M. Argon plasma coagulation for open surgical and endoscopic applications: state of the art. J Phys Appl Phys. 39 (16), 3520-3523 (2006).
  5. Farin, G., Grund, K. E. Technology of argon plasma coagulation with particular regard to endoscopic applications. EndoscSurgAllied Technol. 2, 71-77 (1994).
  6. Grund, K. E. Argon plasma coagulation (APC): ballyhoo or breakthrough? Endoscopy. 29, 196-198 (1997).
  7. Glowka, T. R., Standop, J., Paschenda, P., Czaplik, M., Kalff, J. C., Tolba, R. H. Argon and helium plasma coagulation of porcine liver tissue. J Int Med Res. , (2017).
  8. Dowling, R. D., Ochoa, J., Yousem, S. A., Peitzman, A., Udekwu, A. O. Argon beam coagulation is superior to conventional techniques in repair of experimental splenic injury. JTrauma. 31, 717-720 (1991).
  9. Go, P. M., Goodman, G. R., Bruhn, E. W., Hunter, J. G. The argon beam coagulator provides rapid hemostasis of experimental hepatic and splenic hemorrhage in anticoagulated dogs. JTrauma. 31, 1294-1300 (1991).
  10. Brand, C. U., Blum, A., Schlegel, A., Farin, G., Garbe, C. Application of argon plasma coagulation in skin surgery. Dermatology. 197, 152-157 (1998).
  11. Carus, T., Rackebrandt, K. Collateral tissue damage by several types of coagulation (monopolar, bipolar, cold plasma and ultrasonic) in a minimally invasive, perfused liver model. ISRNSurg. , 518924 (2011).
  12. Bludau, M., Vallbohmer, D., Gutschow, C., Holscher, A. H., Schroder, W. Quantitative measurement of gastric mucosal microcirculation using a combined laser Doppler flowmeter and spectrophotometer. DisEsophagus. , (2008).
  13. Beckert, S., Witte, M. B., Konigsrainer, A., Coerper, S. The impact of the Micro-Lightguide O2C for the quantification of tissue ischemia in diabetic foot ulcers. Diabetes Care. 27, 2863-2867 (2004).
  14. Erdogan, D., de Graaf, W., van Gulik, T. M. Adhesive strength of fibrinogen-coated collagen patch or liquid fibrin sealant in an experimental liver resection model in pigs. Eur Surg Res Eur Chir Forsch Rech Chir Eur. 41 (3), 298-302 (2008).
  15. Knobloch, K., et al. Microcirculation of the sternum following harvesting of the left internal mammary artery. ThoracCardiovascSurg. 51, 255-259 (2003).
  16. Kanzler, S., et al. Recommendation for severity assessment following liver resection and liver transplantation in rats: Part I. Lab Anim. 50 (6), 459-467 (2016).
  17. Pehböck, D., Dietrich, H., Klima, G., Paal, P., Lindner, K. H., Wenzel, V. Anesthesia in swine optimizing a laboratory model to optimize translational research. Anaesthesist. 64 (1), 65-70 (2015).
  18. Nykonenko, A., Vávra, P., Zonča, P. Anatomic Peculiarities of Pig and Human Liver. Exp Clin Transplant Off J Middle East Soc Organ Transplant. 15 (1), 21-26 (2017).
  19. Fechner, G., von Pezold, J., Luzar, O., Hauser, S., Tolba, R. H., Müller, S. C. Modified spectrometry (O2C device) of intraoperative microperfusion predicts organ function after kidney transplantation: a pilot study. Transplant Proc. 41 (9), 3575-3579 (2009).
  20. Patterson, E. J., Scudamore, C. H., Owen, D. A., Nagy, A. G., Buczkowski, A. K. Radiofrequency ablation of porcine liver in vivo: effects of blood flow and treatment time on lesion size. AnnSurg. 227, 559-565 (1998).

Tags

Geneeskunde kwestie 138 Argon plasma coagulatie APC helium plasma coagulatie plasma coagulatie lever chirurgie varkens varken varkens
Beoordeling van Plasma coagulatie op leverweefsel in een grote diermodel <em>In Vivo</em>
Play Video
PDF DOI DOWNLOAD MATERIALS LIST

Cite this Article

Glowka, T. R., Paschenda, P.,More

Glowka, T. R., Paschenda, P., Czaplik, M., Kalff, J. C., Tolba, R. H. Assessment of Plasma Coagulation on Liver Tissue in a Large Animal Model In Vivo. J. Vis. Exp. (138), e57355, doi:10.3791/57355 (2018).

Less
Copy Citation Download Citation Reprints and Permissions
View Video

Get cutting-edge science videos from JoVE sent straight to your inbox every month.

Waiting X
Simple Hit Counter