Summary
Tarm forhindringer er en delvis eller fuldstændig blokering af tarmen, der kan forårsage svære mavesmerter, kvalme, opkastning, og at forhindre passagen af afføring. Denne procedure til at oprette intestinal delvis obsructions i mus er pålidelige i at studere de underliggende patologiske cellevækst og død i tarmen mekanismer.
Abstract
Tarm blokeringer, der hindrer eller blokere peristaltiske bevægelser, kan være forårsaget af abdominal sammenvoksninger og mest gastrointestinale (GI) sygdomme herunder tumorous vækster. Men den cellulære remodeling mekanismer involveret i, og forårsaget af intestinal forhindringer er dårligt forstået. Flere dyremodeller for intestinal forhindringer er blevet udviklet, men musen model er det mest pris/tid effektiv. Modellens musen bruger kirurgisk implantation af en delvis tarmobstruktion (PO), har en høj dødelighed, hvis det ikke er udført korrekt. Desuden, undlader musene modtager PO kirurgi at udvikle hypertrofi, hvis en passende blokade ikke anvendes eller ikke korrekt placeret. Her beskriver vi en detaljeret protokol til PO operation, som giver pålidelig og reproducerbar intestinal forhindringer med en meget lav dødelighed. Denne protokol udnytter en kirurgisk indsatte silikone ring, der omgiver ileum, som delvis blokerer mave bevægelse i tyndtarmen. Den delvise blokering gør tarmen blive dilaterede på grund af standsning af fordøjelsessystemet bevægelse. Dilatation af tarmen inducerer glat muskel hypertrofi på den mundtlige side af ringen, der gradvist udvikler over 2 uger indtil det forårsager død. Den kirurgiske PO musemodel tilbyder en i vivo model hypertrofisk tarmens væv nyttigt for at studere patologiske ændringer i tarmcellerne herunder glatte muskelceller (SMC), interstitielle celler af Cajal (ICC), PDGFRα+, og neuronal celler under udviklingen af intestinal obstruktion.
Introduction
Tarm forhindringer er en delvis eller fuldstændig blokering i små eller store tarmen, som forhindrer fordøjet mad, væske og gas, bevæger sig gennem tarmene1. På grund af obstruktion inducerer blokeringen intestinal væggene til at blive fortykket, forsnævring af lumen2. Intestinal obstruktion kan forekomme som følge af abdominal eller bækken kirurgi, der forårsager abdominal vedhæftning væv dannelse eller fra GI lidelser såsom inflammatoriske tarmsygdomme (Crohns sygdom), diverticulitis, Brok, Tarmslyng, forsnævring, intussusception, forstoppelse, fækulit, pseudo-obstruktion, kræft og tumorer3,4,5. Tarm forhindringer i disse sager føre ofte til hypertrofi af tunica muscularis af tarmen6.
PO af lumen inducerer tarm udspilning, og øger glatte muskulatur lagtykkelse omkring obstruktion som reaktion på behovet for at fortsætte funktionelle peristaltik7,8,9,10, 11,12,13. Dyremodeller for intestinal PO er blevet udviklet for at studere glat muskel hypertrofi i mus7, rotter10, marsvin11, hunde12og katte13 der konsekvent udvikler lignende hypertrofi inden for den intestinal muskel lag.
En musemodel af intestinal PO er den mest omkostningseffektive måde at generere og studere intestinal forhindringer i vivo. Tyndtarmen forhindringer er udført i mus ved at bruge en silikone ring kirurgisk placeres omkring ileum. PO mus viste en tidlig stigning i antallet af celler (hyperplasi), og en stigning i muskel lagtykkelse (hypertrofi) efter PO kirurgi8,15. SMC er den primære plast celler, der vokser i glat muskel lag i svar til hypertrofisk betingelser14, men andre celler såsom ICC og PDGFRα+ celler, der er tæt forbundet med SMC, er også genbefolket. Vi har tidligere rapporteret at PO-mus udvikler hypertrofi i tyndtarmen, i hvilke SMC er dedifferentiated til PDGFRα+ celler, der er meget proliferativ7,15,16. Omvendt, ICC er degenereret og tabt inden for hypertrofisk glat muskel lag under udviklingen af intestinal obsruction7. En anden stor fordel ved PO model er dets evne til at fremkalde ændringer i det enteriske nervesystem og formeringsmateriale neurogen motor mønstre. Den store formerings neurogen motor mønster i mus tyndtarmen er overflytter motoren komplekse (MMC), som er neurogen og kræver ikke ICC eller elektriske langsom bølger17. PO model kan give klart indblik i hvordan MMCs og enterisk nerver er ombygget af delvis obstruktion.
Her foreslår vi en murine protokol for intestinal PO operation ved hjælp af et silikone ring. Mus modtage PO kirurgi pålideligt producere hypertrofi i tunica muscularis af tyndtarmen. Inden for hypertrofisk muskel, er SMC, ICC, PDGFRα+og neuronale celler dramatisk ombygget.
Subscription Required. Please recommend JoVE to your librarian.
Protocol
Følgende protokol er blevet godkendt af institutionelle Animal Care og bruge udvalg (IACUC) på University of Nevada-Reno (UNR) dyr ressourcer og overholder alle institutionelle etiske retningslinjer vedrørende anvendelsen af forskning dyr.
1. dyr.
- Få modne (4-6 uger gamle) C57BL/6 mus vejer mellem 20-30 g. House koloni af laboratoriemus i en centraliseret dyr facilitet på UNR dyr ressourcer.
2. delvis obstruktion kirurgi
Bemærk: Operationer udføres i et værelse dedikeret til kirurgiske procedurer. Alle kirurgiske instrumenter er autoklaveres forud for operationen. Steril kirurgiske kjoler og handsker skal bæres af alle medarbejdere i den kirurgiske værelse på alle tidspunkter.
- Forberedelse til kirurgisk musen
- Tjek den bedøvende levering system for at sikre forsyningen af ilt og isofluran er passende for proceduren. Drej på levering ilt. Tænd gas flowmeter og justere det til 500-1000 mL/min. sted dyret i induktion kammer og forsegle toppen.
- Tænd isofluran vaporizer til 5%, og overvåge dyret, indtil det bliver liggende. Skifte den bedøvende levering system til næsen kegle.
- Skyl induktion kammer af enhver resterende gas og ilt, så slukke induktion kammer linje samtidig holde næsen kegle linje åben.
- Fjerne dyret fra salen og omhyggeligt placere oftalmologiske salve på øjnene af dyret.
- Placer næsen kegle på en forvarmet varme pad, når gas fortsætter med at strømme.
- Ændre ilt flow til 100-200 mL/min, med 2-3% isofluran. Hvis dyret begynder at bevæge sig, gentlyrestrain dyr med næsen kegle på indtil fuldt anesthetized igen.
- Overvåge respiration og respons på stimulation under proceduren og justere procentdelen af isofluran (2-5%) efter behov. Animalske anesthetization niveau er overvåget af manglen på tå knivspids refleks før operationen er udført.
- Indsprøjtes smertestillende medicin (buprenorphin, 1 µg/g kropsvægt) intraperitoneal fra webstedet indsnit.
- Anvende hår fjernelse lotion på maven ved hjælp af en ren vatpind. Lad lotion sidde for 3-5 min på musen, derefter fjerne hår med gaze og bomuld svaberprøver. Gentag dette trin, indtil alle hår er blevet fjernet fra maven med musen.
- Rens huden med 70% ethanol ved hjælp af gaze og bomuld svaberprøver. Anvende alkoholservietter eller povidon-jod løsning til at rense maven.
- Delvis obstruktion kirurgi
- Drapere operationsstedet bruger 25 x 50 cm sterile papir med en 2,5 x 2,5 cm åbning i midten til området kirurgi. Sikre drapere dyret ved at placere sterile strimler på grænserne for åbning og hud.
- Gøre en ~3.0 cm abdominal snit på langs ved hjælp af en No. 15 klinge skalpel, at sikre, at kun huden er indskåret og undgå opskæring i musculoperitoneal lag på dette tidspunkt.
- Ved hjælp af kirurgiske saks og pincet, omhyggeligt adskille huden fra musculoperitoneal lag uden at forårsage nogen snit til musculoperitoneal lag. Når lagene har været tilstrækkeligt adskilt (ca. 1 cm x 4 cm), identificere linea alba på musculoperitoneal lag og snit ~ 2 cm langs linea alba at eksponere intraperitoneal hulrummet ved hjælp af mikro-pincet og saks.
- Omhyggeligt lokalisere og identificere coecum. Langsomt og forsigtigt fjerne coecum fra intraperitoneal hulrummet med mikro-pincet, at bringe den proksimale kolon og ileum med cecum på de sterile drapere. Straks fugt i tarmens væv med 0,9% sterilt saltvand gennemblødt gaze og holde udsatte væv fugtet på alle tidspunkter, mens de ligger uden for bughulen.
- Lokalisere og identificere mesenterium mellem ileum og proksimale kolon. Gøre et snit (~ 1 cm) parallelt med og lige under, ileum, i mesenteriet og undgå at skære nogen Vaskulaturen.
- Tage en autoklaveres silikone ring (6 mm i længden, 4 mm udvendig diameter, 3,5 mm indvendig diameter). Skåret på langs for at åbne slangen og åbne ringen med mikro-pincet.
- Sæt den ene ende af den åbnede ring gennem incisionen i mesenteriet væv. Tilbage i ringen til en udfyldt ring figur ved at bringe en ende i kontakt med en anden, med ileum omgivet af ringen.
- Sikre at den silikone ring helt omgiver ileum, Luk ringen med sutur og omhyggeligt placere tarmene tilbage i intraperitoneal hulrum.
- Kirurgi lukning
- Udføre en enkel fortløbende sutur på musculoperitoneal lag langs linea alba at lukke musculoperitoneal sår med en resorberbar sutur. Efter sutur er komplet, rene nogen blødning med 0,9% sterilt saltvand gennemblødt gaze.
- For at helt lukke såret med et separat nylon sutur, skal du udføre en enkel fortløbende sutur på huden.
- Når begge suturer er afsluttet, rense såret med nye swabstick eller povidon-jod.
- Intraperitoneal injicere antibiotika (gentamicin, 150 μl pr. mus baseret på 20-30 g kropsvægt).
- Efter afslutningen af proceduren, slukke for isofluran vaporizer og give dyret til at trække vejret kun flyder ilt indtil det begynde at få bevidsthed.
- Når dyret er vågen, placere dyret i en separat opsving område med termisk støtte indtil fuldt tilbagebetalt.
3. efter operationen observation.
- Efter afslutningen af kirurgi, flytte dyrene til en inkubator i en opvågningsstuen hvor temperatur og luftfugtighed er reguleret. Overvåge dyr efter operationen hver 15 min. den første time derefter hvert 30 min i den anden time, mens dyrene er i rugemaskinen.
- Så snart det foreskrevne observation er komplet, flytte dyrene til deres egen individuelle bur og overvåge dem daglig for kliniske indikationer af smerte18, og at sikre, at den kirurgiske sår healing korrekt uden nogen tegn på komplikationer ( opspringning) til stede.
Subscription Required. Please recommend JoVE to your librarian.
Representative Results
Delvis obstruktion (PO) var kirurgisk induceret i en måned gamle mus ved at placere en silikone ring omkring ileum tæt på ileocecal sphincter. Denne ring lavet en delvis blokering i ileum. Forlorne operationer (så) blev også udført uden en ring på alder/køn matchede mus og disse mus viste ikke nogen symptomer svarende til dem, der findes i PO mus. Mus hurtigt inddrives fra PO kirurgi inden for et par timer. De viste ingen indlysende adfærdsændringer eller svaghed i den første uge, men efter den første uge, de gradvis begyndte at vise tegn på PO: en udspilet abdomen og produktion af færre og mindre fækal pellets. PO mus blev ofret på 8 og 13 dage post-PO kirurgi sammen med SO kontrol mus. Tyndtarmen var delvist fyldt og udspilet på 8 dage post-PO kirurgi og fuldt fyldt og udspilet på 13 dage post-PO kirurgi, sammenlignet med så styre mus (figur 1A). Fækal pellet dannelse i tyktarmen af 8 og 13 dage post-PO kirurgi mus blev reduceret i forhold til SO kontrol mus (figur 1B). Ileal væv, der var bare opstrøms af ringen blev dissekeret og glatte muskulatur blev analyseret af hæmatoxylin & eosin (H & E) farvning. Den glatte muskulatur lag var hypertrofisk på 8 dage post-PO kirurgi og meget længere hypertrofisk på 13 dage post-PO kirurgi (figur 2). Vi har også observeret ændringer i SMC, ICC, PDGFRα+og neuronale celler i tunica muscularis i PO mus ved hjælp af immunochemistry. Hver celle var mærket med celletype specifikke markører: MYH11 (SMC), KIT (ICC), PDGFRA (PDGFRα+ celler) og PGP9.5 (neuronale celler). SMC er fundet inden for tre lag af væv: langsgående muskel (LM), cirkulær muskel (CM) og muscularis mucosae (MM) i ileum. SMC voksede gradvis til hurtige priser i alle tre lag på 8 og 13 dage post-PO kirurgi (figur 3). Som for ICC, er deres delpopulationer placeret i dybt muskuløs plexus (DMP), myenteric region (MY) og subserosal regionen (SS). Men ICC-DMP, ICC-min, og ICC-SS var degenereret i samhandelen/intermuscular lag (figur 3). Svarende til ICC delpopulationer, delpopulationer af PDGFRα+ celler (PαC) er placeret i DMP, MY og SS. I PO mus, PαC-DMP, PαC-min, og PαC-SS var dynamisk ombygget i intermuscular lag af PO mus: de voksede på 8 dage post-PO kirurgi og degenereret på 13 dage post-PO kirurgi (figur 3). Endelig blev myenteric plexus (MP), submukøse plexus (SP), subserosal neuroner (SS) og enterisk motor neuroner (EMN) betydeligt tabt i regionerne inter/intramuskulær i PO mus på 8 og 13 dage post-PO kirurgi (figur 3).
Figur 1. Delvis tarmobstruktion kirurgisk induceret i en musemodel. PO er fremkaldt ved PO kirurgi. En måned gamle mus var anesthetized, deres underliv blev åbnet af et snit, en silikone ring blev placeret omkring ileum, og åbningen blev lukket af sutur. Mus, der blev opereret fik lov til at genoprette i enten 8-13 dage. Alder og køn matches så mus blev opereret på samme måde som PO mus undtagen der var ingen placering af en ring. (A) brutto billeder af mave-tarmkanalen i mus, der undergik PO eller SO kirurgi. Billeder er af mus på 8 og 13 dage efter operationen (B) gastrointestinalkanalen dissekeret fra mus i A. tyndtarmen opstrøms af ringen var udspilet på både 8 og 13 dage post-PO kirurgi og fækal pellets i tyktarmen var også mindre i både 8 og 13 dag post-PO kirurgi som i forhold til 13 dage post-SO kirurgi mus på grund af delvis obstruktiv silikone ring. Skala barer er 0,5 cm. venligst klik her for at se en større version af dette tal.
Figur 2. Glatte muskelceller lag ændret i den kirurgiske musemodel. Repræsentant H & E farvning af ileal tværsnit fra tarm PO, så og ingen drift (NO) mus. Glat muskulatur (SM) og slimhinde (Mu) lag er tykkere i PO mus på 8 og 13 dage post-PO kirurgi end dem i SO og ingen mus. Skala barer er 50 µm. venligst klik her for at se en større version af dette tal.
Figur 3. Dynamisk cellulære remodeling i glat muskel hypertrofi induceret af delvis tarmobstruktion. Repræsentative Konfokal laser scanning billeder af hypertrofisk ileal tværsnit, fra PO, så og ingen mus. Immunohistochemically farvning med antistoffer (rød) af MYH11 (SMC), KIT (ICC), PDGFRA (PDGFRα+ celler) eller PGP9.5 (NC; neuronale celler), co farves med DAPI (blå). SMC i mucosa muscularis (MM), cirkulær muskel (CM), og langsgående muskel (LM) lag, samt PDGFRα+ celler i dyb muskuløs plexus (DMP), myenteric region (MY) og subserosal regionen (SS) voksede i hypertrofisk ileum på 8 og 13 dage post-PO kirurgi mens ICC i DMP, MY og SS, myenteric plexus (MP), submukøse plexus (SP), subserosal NC (SS) og enterisk motor neuroner (EMN) var degenereret. Skala barer er 50 µm. venligst klik her for at se en større version af dette tal.
Figur 4. Resultaterne af silikone ringe, der er alt for store, for små eller malplaceret på tyktarmen. (A) ingen glat muskel hypertrofi udvikler sig i ileum hvis ringen er for stor til at forårsage obstruktion. Ring lavet lidt at ingen blokering af ileum. (B) Intestinal iskæmi udvikler i ileum hvis ringen er for lille. Ringen foretages en næsten fuldstændig blokering af ileum, som kan skade væv og føre til tidlig død før hypertrofi udvikler. (C) glat muskel hypertrofi udviklet i tyktarmen på grund af en forkert placerede ring. Ring på tyktarmen blev flyttet af lumenal indhold (afføring), som beskadiget mesenterium vaskulatur og forårsaget massive hemorrhaging i tyktarmen. Venligst klik her for at se en større version af dette tal.
Subscription Required. Please recommend JoVE to your librarian.
Discussion
Vi viste, at mus får den intestinale PO kirurgi, konsekvent og reproducerbar udvikle tarm glat muskel hypertrofi, som efterligner humane tarmobstruktion. Intestinal obstruktion operationer er blevet udviklet til forskellige dyr herunder mus7, rotter10, marsvin11, hund12 og katte13. Musemodel af intestinal obstruktion har tid, omkostninger, størrelse og fænotypiske fordele i forhold til andre større dyremodeller. Udviklingen af hypertrofi i mus eller rotter tager kun 10-14 dage10, sammenlignet med 2-4 uger i marsvin, hunde og katte11,12,13. Omkostninger til køb og vedligeholdelse af mus er også en enorm økonomisk fordel i forhold til andre modeller. Desuden, er musene lille og let at håndtere for PO kirurgi. Vigtigst, udvikle mus modtage PO kirurgi, gradvist og grundigt hypertrofi i tyndtarmen, mens andre større dyr udvikler mindre omfattende vækst.
Der er flere vigtige faktorer at overveje, når de forsøger at producere pålidelige hypertrofi gennem tarmens PO kirurgi. Flere forskergrupper har brugt ringe i forskellige størrelser og placeret en ring på forskellige steder langs tarmen til at oprette delvise forhindringer7,9,10,11,12, 13,14. Dog bør en silikone ring af optimal størrelse anvendes til mus som en større ring skaber lidt eller ingen blokering i ileum hvor hypertrofi kun delvist, eller aldrig udviklet (figur 4A). Omvendt, når en ring var for lille, det skabt nær fuldstændig blokering af ileum, som inducerede intestinal iskæmi og/eller beskadiget slimhinden forårsager sepsis, fører til tidlig død inden for en uge (figur 4B). Vi brugte en silikone ring af en bestemt størrelse (6 mm i længden, 4 mm udvendig diameter, 3,5 mm indvendig diameter) på en måned gamle mus (Tabel af materialer). Forskellige størrelser af ringene skal testet og anvendes til mus i forskellige størrelser for at skabe den optimale blokering i ileum. En anden vigtig faktor er placeringen af ringen på tarmen. Ileum, tæt på ileocecal ventil, er det bedste sted at placere ringen så håndfast producere delvis forhindringer. Andre regioner såsom jejunum eller forskellige regioner af ileum fra ileocecal ventil, har haft en lignende ring placeret på dem for at inducere hypertrofi7. Men på grund af den serosal overfladen af tarmen bliver meget smurt af peritonealvæske, en ring placeret på disse dele af tarmen let flytter på grund af den kontraktile styrke af tarmen skubbe fecal materiale gennem. Som ringen er skubbet ned på længden af tarmen, afskærer det mesenteriallymfeknuderne arterier innerveres i regionen myenteric i tarmen, forårsager hemorrhaging. Når en ring er indsat i slutningen af ileum ved siden af ileocecal ventil, det fysisk forhindres i at bevæge sig yderligere af den omfangsrige natur af coecum. Coecum kan nemt beliggende og taget ud af maven i operationen for at finde ileocecal ventil region som coecum forbinder til både ileum og proksimale kolon. Ileum og colon sluttet til coecum ser helt ens og en ring kan ved et uheld placeres på den proksimale kolon i stedet for ileum. Når en ring var malplaceret på den proksimale colon, som også ses på jejunum, ringen blev skubbet nedad og beskadiget mesenteriallymfeknuderne arterier, forårsager omfattende hemorrhaging (figur 4 c). For at undgå denne forveksling, bør ileum altid være korrekt placeret og identificeres inden i ringen er sat på plads. Ileum løber ind i midten af coecum, mens tyktarmen løber ind i den ene side af coecum pose.
Denne PO kirurgi protokollen betragtes som en større operation for mus. Alle kirurgiske instrumenter og materialer skal steriliseres inden brugen, og kirurgi bør udføres i en dedikeret kirurgi værelse rent miljø for at minimere kontaminering, som kan føre til infektion og betændelse i mus. Derudover bør en smertestillende medicin ydes til mus efter operationen. Vi valgte at bruge en langsom udgivelsesversionen af buprenorphin, som er virkningsfuldt op til 7-8 h22. Desuden efter kirurgi har mus svært ved tygge og synke fast føde. For op til 5 dage efter operationen, musene skal være forsynet med blødgjort mad (solid kost med en smule vand tilføjes blødgøre mad) og skiftede til normal solid kost efter 5 dage.
Vores tarm PO kirurgi giver en i vivo hypertrofi model for intestinal obstruktion i hvilke SMC, ICC, og PDGFRα+ celler er unormalt ombygget. Denne PO model er også særdeles velegnet til forståelse enteriske neuroner er ændret af PO og hvordan de store motoriske aktiviteter påvirkes i små og store tarm23. Disse celler kan være dynamisk ombygget i patologiske betingelser såvel som under kulturperler betingelser15,16. Vi bemærkede, at disse celler i SO mus opførte sig en smule anderledes end normale mus uden operation (figur 2 og figur 3). De fleste intestinal obstruktion hos mennesker opstår ved abdominal sammenvoksninger udviklet efter kirurgi, fører til glat muskel hypertrofi3,4,5,21. Efter SO kirurgi, fandt vi også, at SMC, ICC og PDGFRα+ celler var lidt hypertrofisk i tyndtarmen, sammenlignet med ingen (figur 3), tyder på, at kirurgi, selv kan fremkalde intestinal glat muskel hypertrofi. Hvis dette er tilfældet, så er kirurgi ikke en komplet negativ kontrol for PO kirurgi. INGEN samt SO bør bruges som en sammenligning til PO tarmen.
I Resumé, har vi fundet en cost/tid effektiv, pålidelig og repeterbare PO kirurgisk protokol i mus der håndfast genererer intestinal forhindringer. Under udviklingen af obstruktion ombygget SMC, ICC, PDGFRα+samt neuronale celler dynamisk inden for forskellige væv lag og landestandarder. Denne i vivo obstruktion model tilbyder nye indsigter i vores viden om hvordan fænotypiske forandringer opstår i blokeret tarmen på cellulært niveau.
Subscription Required. Please recommend JoVE to your librarian.
Disclosures
Forfatterne har ikke noget at oplyse.
Acknowledgments
Forfatterne vil gerne takke Benjamin J Weigler, D.VM, Ph.D. og Walt Mandeville, D.VM (dyr ressourcer & Campus at deltage i dyrlæge, University of Nevada, Reno) for deres fremragende animalske tjenester ydes til såvel mus som deres advokat på kirurgiske procedurer.
Materials
| Name | Company | Catalog Number | Comments |
| Surgical drape | Medical and veterinary supplies | SMS40 | 40”X100 yards |
| Underpad, econ, pro plus | Medical and veterinary supplies | MSC281224 | 17x24” |
| Iris scissors | Braintree scientific, Inc | SC-i-130 | |
| Iris scissors | Vantage | V95-304 | |
| Dumont electronic & jeweler tweezers | Dumont | 98-180-3 | |
| Braided absorbable suture | Covidien polysorb | SL-5687G | 5-0, polyglactin |
| Nylon non-absorbable mono filament | AD surgical | S-N618R13 | 6-0, nylon |
| Surgical blade | Dynarex | No.15 | |
| Needle holder | Jacobson microvascular | 36-1342TC | 8.5 inch |
| Scalpel handle | Flinn scientific | AB1049 | |
| Microsurgical scissor | WPI | 503305 | |
| Petrolatum ophthalmic ointment | Puralube VET | 3.5 g | |
| Fluriso (isoflurane) | Vetone | V1 502017 | 250 ml |
| Steri-strip reinforced skin closure | 3M | R1547 | |
| Surgical gloves | Medline | MSG2270 | |
| Ear loop face mask | The safety zone | RS700 | |
| Avant gauze non-woven sponges | Caring | PRM25444 | |
| Surgical cup | Admiral craft OYC-2 | 725-A42 | 2.5 oz |
| Swabstick | ChloraPrep | 260103 | 2% w/v Chlorhexidine Gluconate (CHG) and 70% v/v Isopropyl Alcohol (IPA) |
| Cotton tipped applicator | Puritan | 806-WC | |
| Buprenorphine | Zoo pharm | BZ8069317 | 1 mg/ml |
| Gentamycin sulfate | Vetone | G-6336-04 | 100 mg/ml |
| Fast acting gel cream remover | Veet | 8111002 | |
| Syringe | AHS | AH01T2516 | 1 ml with needle |
| Silicon ring | VWR | 60985-720 | 6 mm in length, 4 mm exterior diameter, 3.5 mm interior diameter |
| C57BL/6 mice | The Jackson Laboratory | 4-6 weeks old |
References
- Millat, B., Guillon, F. Physiopathology and principles of intensive care in intestinal obstructions. Rev Prat. 43, 667-672 (1993).
- Tonelli, P. New developments in Crohn's disease: solution of doctrinal mysteries and reinstatement as a surgically treatable disease. 1. The process is not a form of enteritis but lymphedema contaminated by intestinal contents. Chir Ital. 52, 109-121 (2000).
- Limsrivilai, J. Meta-analytic Bayesian model for differentiating intestinal tuberculosis from Crohn's disease. Am J Gastroenterol. 112, 415-427 (2017).
- Dvorak, D., Adamova, Z., Bar, T., Slovacek, R. Internal hernia as a cause of small bowel obstruction. Rozhl Chir. 96, 34-36 (2017).
- Massani, M., Capovilla, G., Ruffolo, C., Bassi, N. Gastrointestinal stromal tumour (GIST) presenting as a strangulated inguinal hernia with small bowel obstruction. BMJ Case Rep. , (2007).
- Chen, J., Chen, H., Sanders, M., Perrino, B. A. Regulation of SRF/CArG-dependent gene transcription during chronic partial obstruction of murine small intestine. Neurogastroenterol Motil. 20, 829-842 (2008).
- Chang, I. Y., et al. Loss of interstitial cells of Cajal and development of electrical dysfunction in murine small bowel obstruction. J Physiol. 536 (Pt 2), 555-568 (2001).
- Liu, D. H., et al. Voltage dependent potassium channel remodeling in murine intestinal smooth muscle hypertrophy induced by partial obstruction. PLoS One. 9 (2), e86109 (2014).
- Guo, X., et al. Down-regulation of hydrogen sulfide biosynthesis accompanies murine interstitial cells of Cajal dysfunction in partial ileal obstruction. PLoS One. 7, e48249 (2012).
- Yang, J., Zhao, J., Chen, P., Nakaguchi, T., Grundy, D., Gregersen, H. Interdependency between mechanical parameters and afferent nerve discharge in hypertrophic intestine of rats. Am J Physiol-Gastr L. 310, G376-G386 (2016).
- Zhao, J., Liao, D., Yang, J., Gregersen, H. Biomechanical remodeling of obstructed guinea pig jejunum. J Biomech. 43, 1322-1329 (2010).
- Bowen, E. J., et al. Duodenal Brunner's glade adenoma causing chronic small intestinal obstruction in a dog. J Small Anim Pract. 53, 136-139 (2012).
- Bettini, G., et al. Hypertrophy of intestinal smooth muscle in cats. Res Vet Sci. 75, 43-53 (2003).
- Macdonald, J. A. Smooth muscle phenotypic plasticity in mechanical obstruction of the small intestine. J Neurogastroenterol Motil. 20, 737-740 (2008).
- Ha, S. E., et al. Transcriptome analysis of PDGFRα+ Cells identifies T-types Ca2+ channel CACNA1G as a new pathological marker for PDGFRα+ cell hyperplasia. PLoS One. 12, e0182265 (2017).
- Park, C., et al. Serum response factor is essential for prenatal gastrointestinal smooth muscle development and maintenance of differentiated phenotype. J Neurogastroenterol Motil. 21, 589-602 (2015).
- Spencer, N. J., Sanders, K. M., Smith, T. K. Migrating motor complexes do not require electrical slow waves in the mouse small intestine. J Physiol. 553, 881-893 (2003).
- Langford, D. J., et al. Coding of facial expressions of pain in the laboratory mouse. Nat Methods. 7, 447-449 (2010).
- Terez, S. D., Notari, L., Sun, R., Zhao, A. Mechanisms of smooth muscle responses to inflammation. Neurogastroenterol Motil. 24, 802-811 (2012).
- Chen, W., et al. Smooth muscle hyperplasia/hypertrophy is the most prominent histological change in Crohn's fibrostenosing bowel strictures: A semiquantitative analysis by using a novel histological grading scheme. J Crohns Colitis. 11, 92-104 (2017).
- Huizinga, J. D., Chen, J. H. Interstitial Cells of Cajal: Update on Basic and Clinical Science. Curr Gastroenterol Rep. 16, 363 (2014).
- Jirkof, P., Touvieille, A., Cinelli, P., Arras, M. Buprenorphine for pain relief in mice: repeated injections vs sustained-release depot formulation. Lab Animal. 49, 177-187 (2015).
- Spencer, N. J., Dinning, P. J., Brookes, S. J., Costa, M. Insights into the mechanisms underlying colonic motor patterns. J Physiol. 594, 4099-4116 (2016).
