Summary
Obstruções intestinais são um bloqueio parcial ou total do intestino que pode causar dor abdominal, náuseas, vômitos e impedindo a passagem das fezes. Este procedimento para criar obsructions parcial intestinal em camundongos é confiável em estudar os mecanismos subjacentes do crescimento celular patológica e morte no intestino.
Abstract
Obstruções intestinais, que impedem ou bloqueiam o movimento peristáltico, podem ser causadas por aderências abdominais e mais gastrointestinais (GI) doenças incluindo tumorosa crescimentos. No entanto, o celular que remodela os mecanismos envolvidos na e obstrução intestinal causada por, é mal compreendidas. Foram desenvolvidos vários modelos animais de obstruções intestinais, mas o modelo do mouse é o custo/tempo mais eficaz. Usa o modelo de rato da implantação cirúrgica de uma obstrução intestinal parcial (PO) que tem uma alta taxa de mortalidade, se não é realizada corretamente. Além disso, ratos recebendo cirurgia PO não conseguem desenvolver hipertrofia se um bloqueio adequado não é usado ou não está devidamente colocado. Aqui, descrevemos um protocolo detalhado para cirurgia de PO que produz confiáveis e reprodutíveis obstruções intestinais, com uma taxa de mortalidade muito baixa. Este protocolo utiliza um anel de silicone colocado cirurgicamente que rodeia o íleo que bloqueia parcialmente o movimento digestivo no intestino delgado. O bloqueio parcial faz o intestino se tornam dilatadas devido a parada do movimento digestivo. A dilatação do intestino induz a hipertrofia do músculo liso no lado oral do anel que desenvolve progressivamente mais de 2 semanas até que causa morte. O modelo de mouse PO cirúrgico oferece um modelo in vivo de tecido intestinal hipertrófica útil para estudar as alterações patológicas das células intestinais, incluindo células musculares lisas (SMC), células intersticiais de Cajal (ICC), PDGFRα+e neuronal células durante o desenvolvimento de obstrução intestinal.
Introduction
Obstruções intestinais são um bloqueio parcial ou total no intestino pequeno ou grande que impede o alimento digerido, fluidos e gases movendo-se através do intestino1. Devido a obstrução, a obstrução induz as paredes intestinais para tornar-se espessada, estreitamento do lúmen2. Obstrução intestinal pode ocorrer como resultado de cirurgias abdominais ou pélvicas que causam a formação de tecido de aderência abdominal ou de distúrbios GI, tais como doenças inflamatórias intestinais (doença de Crohn), diverticulite, hérnias, Volvo, estenose, intussuscepção, constipação, fecaloma, pseudo-obstrução, cancros e tumores de4,3,5. Obstruções intestinais, nestes casos, muitas vezes, levam para a hipertrofia da túnica muscular do intestino6.
PO do lúmen induz a distensão intestinal e aumenta a espessura da camada de músculo liso ao redor da obstrução em resposta à necessidade de continuar o peristaltismo funcional7,8,9,10, 11,12,13. Modelos animais de PO intestinal foram desenvolvidos para estudar a hipertrofia do músculo liso em ratos7ratos10, cobaias11, cães12e gatos13 que consistentemente desenvolver hipertrofia similar dentro o camadas de músculo intestinal.
Um modelo do rato do PO intestinal é a maneira mais custo-eficaz de gerar e estudar obstruções intestinais na vivo. Obstruções de intestino delgado são realizadas em camundongos, usando um anel de silicone cirurgicamente colocado em torno do íleo. Os ratos PO mostraram um aumento inicial do número de células (hiperplasia) e um aumento na espessura da camada muscular (hipertrofia) após PO cirurgia8,15. SMC são o principais plástico as células que estão crescendo dentro de camadas de músculo liso em resposta a condições hipertrófica14, mas outras células tais como ICC e PDGFRα+ células que estão intimamente associados com o SMC, são também repovoada. Informamos anteriormente que os ratos PO desenvolveram hipertrofia no intestino delgado, no qual SMC são condrossarcoma em células PDGFRα+ que são altamente proliferativas7,15,16. Por outro lado, ICC são degenerou e perdeu dentro das camadas hipertrofiado músculo liso durante o desenvolvimento do obsruction intestinal7. Outro grande benefício do modelo PO é sua capacidade de induzir alterações no sistema nervoso entérico e propagando padrões motor neurogênicos. A grande propagação padrão motor neurogênica no intestino do rato é o migração motor complexo (MMC), que é neurogênica e não requer ICC ou ondas lentas elétrica17. O modelo de PO pode fornecer insights claras sobre como MMCs e nervos entéricos são remodelados pela obstrução parcial.
Aqui, propomos um protocolo murino para intestinal cirurgia de PO, usando um anel de silicone. Ratos recebendo cirurgia PO confiantemente produzem hipertrofia na túnica muscular do intestino delgado. Dentro hipertrófica muscular, SMC, ICC, PDGFRα+e células neuronais são drasticamente remodeladas.
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Protocol
O seguinte protocolo foi aprovado pelo cuidado institucional do Animal e usar Comité (IACUC) na Universidade de Nevada-Reno (UNR) Animal recursos e cumpre com todas as orientações éticas institucionais relativas à utilização de animais de pesquisa.
1. os animais.
- Obter camundongos C57BL/6 de maduro (4-6 semanas de idade) pesando entre 20-30 g casa da colônia de ratos de laboratório em uma instalação centralizada animal em urn Animal Resources.
2. parcial obstrução cirurgia
Nota: Cirurgias são realizadas em uma sala dedicada para procedimentos cirúrgicos. Todos os instrumentos cirúrgicos são autoclavados antes da cirurgia. Luvas e batas cirúrgicas estéreis devem ser usadas por todo o pessoal na sala cirúrgica em todos os momentos.
- Preparação para o mouse cirúrgica
- Verificar o sistema de entrega anestésico para garantir o fornecimento de oxigênio e isoflurano é adequado para o procedimento. Ligue o fornecimento de oxigênio. Ligar o medidor de vazão de gás e ajustá-lo a 500-1000 mL/min. lugar do animal na câmara de indução e selar o topo.
- Ligue o vaporizador de isoflurano para 5% e, em seguida, monitorar o animal até que se torne reclinada. Mude o sistema de entrega de anestésico para o cone de nariz.
- Lave a câmara de indução de qualquer gás residual com oxigênio e, em seguida, desligue a linha de câmara de indução, mantendo a linha do cone de nariz aberto.
- Remover o animal da câmara e cuidadosamente coloque pomada oftálmica nos olhos do animal.
- Coloque o cone de nariz em uma almofada quente pré-aquecido quando gás continua a fluir.
- Altere o fluxo de oxigênio de 100-200 mL/min, com 2-3% de isoflurano. Se o animal começa a se mover, gentlyrestrain o animal com o cone de nariz em até totalmente anestesiados novamente.
- Monitorar a respiração e a resposta à estimulação durante o procedimento e ajustar a porcentagem de isoflurano (2-5%) conforme necessário. Nível de anesthetization animal é monitorado pela falta de reflexo de pitada de dedo do pé antes que a cirurgia é realizada.
- Injete remédios contra a dor (buprenorfina, 1 µ g/g de peso corporal) intraperitonealmente longe do local da incisão.
- Aplique loção de remoção de cabelo sobre o abdome, usando um cotonete limpo. Deixe-o sentar-se loção para 3-5 min no mouse, em seguida retire os cabelos com compressas de gaze e algodão. Repita este passo até que todo o cabelo foi removido do abdômen do mouse.
- Limpe a pele com álcool 70%, usando cotonetes de algodão e gaze. Aplica uma solução swabsticks ou povidone-iodo para limpar o abdômen.
- Cirurgia de obstrução parcial
- Cubra o local cirúrgico usando papel estéril de 25 x 50 cm com um 2.5 x 2.5 cm de abertura no meio para a área de cirurgia. Prenda a cortina para o animal colocando tiras estéril nos limites da abertura e da pele.
- Faça uma incisão abdominal de ~3.0 cm longitudinalmente usando um bisturi de lâmina n º 15, garantindo que apenas a pele é incisada e evitando o corte da camada de musculoperitoneal neste momento.
- Usando pinças e tesouras cirúrgicas, separe com cuidado a pele da camada de musculoperitoneal sem causar qualquer incisão para a camada de musculoperitoneal. Depois que as camadas foram suficientemente separadas (aproximadamente 1 cm x 4 cm), identificar o linea alba na camada musculoperitoneal e corte ~ 2 cm ao longo da linea alba para expor a cavidade intraperitoneal usando microfórceps e a tesoura.
- Cuidadosamente, localizar e identificar o ceco. Lenta e suavemente remova o ceco da cavidade intraperitoneal com microfórceps, trazendo o cólon proximal e íleo com o ceco lá fora para a cortina estéril. Imediatamente, umedeça o tecido intestinal com gaze embebido salina estéril 0,9% e manter o tecido exposto umedecido em todos os momentos, enquanto eles estão fora da cavidade abdominal.
- Localizar e identificar o mesentério entre o íleo e o cólon proximal. Fazer uma incisão (~ 1 cm) paralelo a e logo abaixo, o íleo, no mesentério e evitar cortar qualquer vasculatura.
- Pegue um anel de silicone autoclavado (6 mm de comprimento, diâmetro exterior de 4 mm, diâmetro interior de 3,5 mm). Corte longitudinalmente para abrir o tubo e abra o anel com microfórceps.
- Insira uma extremidade do anel aberto através da incisão no tecido mesentério. Devolver o anel que forma um anel completo, trazendo uma extremidade em contato com o outro, com o íleo, rodeado pelo anel.
- Certifique-se de que o anel de silicone rodeia completamente o íleo, feche o anel com sutura e coloque cuidadosamente o intestino volta na cavidade intraperitoneal.
- Encerramento de cirurgia
- Realizar uma simples sutura contínua sobre a camada de musculoperitoneal ao longo da linea alba para fechar o musculoperitoneal ferida com uma sutura absorvível. Após a sutura é completa, limpa qualquer sangramento com solução salina 0,9% embebido gaze.
- Para fechar completamente a ferida, com uma sutura de nylon separados, realize uma sutura contínua simples na pele.
- Depois ambas as suturas foram concluídas, limpe a ferida com novo swabstick ou iodo-povidona.
- Intraperitonealmente injete antibióticos (gentamicina, 150 μL por rato com base em 20-30 g de massa corporal).
- Após a conclusão do procedimento, desligue o vaporizador de isoflurano e permitir que o animal de respirar só flui oxigênio até começar ganhando consciência.
- Uma vez que o animal está acordado, coloca o animal em uma área de recuperação separada com apoio térmico até totalmente recuperado.
3. pós-operação observação.
- Após a conclusão da cirurgia, mova os animais para uma incubadora em uma sala de recuperação onde a temperatura e umidade são regulamentadas. Monitore os animais no pós-operatório a cada 15 minutos para a primeira hora depois a cada 30 min para a segunda hora, enquanto os animais estão na incubadora.
- Tão logo a observação prescrita for concluída, mova os animais para sua própria gaiola individual e monitorá-los diariamente para indicações clínicas de dor18e para garantir que a ferida cirúrgica está curando corretamente sem quaisquer sinais de complicações ( deiscência) presente.
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Representative Results
Obstrução parcial (PO) foi cirurgicamente induzida em ratos um mês de idade, colocando um anel de silicone ao redor do íleo perto do esfíncter ileocecal. Este anel criado um bloqueio parcial no íleo. Operações Sham (então) também foram realizadas sem um anel na idade/sexo correspondem ratos e estes ratos não apresentaram qualquer sintomas semelhantes aos encontrados em camundongos PO. Os ratos rapidamente recuperaram da cirurgia PO dentro de algumas horas. Eles não mostraram mudanças comportamentais óbvias ou fraqueza na primeira semana, mas depois da primeira semana, eles progressivamente começaram a mostrar sinais de PO: um abdômen distendido e a produção de pelotas de menos e menor fecais. Ratos de PO foram sacrificados em 8 13 dias post-PO cirurgia e junto com os ratos controle de SO. O intestino delgado foi parcialmente preenchido e distendido na cirurgia de 8 dias borne-PO e totalmente preenchido e distendido na cirurgia de post-PO de 13 dias, comparado com o controle-ratos (figura 1A). Formação de sedimento fecal no cólon de 8 e 13 dias post-PO cirurgia os ratos foi reduzida em comparação com ratos SO do controle (figura 1B). Tecido ileal que foi apenas rio acima do anel foi dissecado e o músculo liso foi analisado pela hematoxilina & eosina (H & E) coloração. A camada de músculo liso foi hipertrofiada em cirurgia de 8 dias borne-PO e ainda muito hipertrofiada em cirurgia de post-PO de 13 dias (Figura 2). Observamos também alterações nas células neuronais dentro da túnica muscular em camundongos PO através da utilização de imunoquímica, ICC, PDGFRα+e SMC. Cada célula foi rotulada com marcadores específicos do tipo de célula: MYH11 (SMC), KIT (ICC), PDGFRA (células PDGFRα+ ) e PGP9.5 (células neuronais). SMC são formadas por três camadas de tecido: músculo longitudinal (LM), músculo circular (CM) e a muscularis mucosa (MM) no íleo. SMC foram progressivamente crescendo a taxas rápidas em todas as três camadas para 8 e 13 dias post-PO a cirurgia (Figura 3). Quanto ao CIEC, suas subpopulações localizam-se no plexo profundo muscular (DMP), região mioentérico (MY) e região subserosal (SS). No entanto, ICC-DMP, ICC-MY e ICC-SS foram degenerou dentro das camadas intra/intermuscular (Figura 3). Semelhante ao subpopulações de ICC, subpopulações de células PDGFRα+ (PαC) estão localizadas no DMP, meu e SS. Em camundongos PO, DMP-PαC, meu PαC e PαC-SS foram remodelados dinamicamente dentro das camadas intermuscular dos ratos PO: eles estavam crescendo em cirurgia de 8 dias borne-PO e degenerou em cirurgia de post-PO de 13 dias (Figura 3). Finalmente, Plexo mioentérico (MP), plexo submucosa (SP), neurônios subserosal (SS) e neurônios entéricos (REM) perderam significativamente nas regiões inter/intramuscular de ratos de PO na cirurgia de post-PO dias 8 e 13 (Figura 3).
Figura 1. Obstrução intestinal parcial cirurgicamente induzido em um modelo do rato. PO foi induzido pela cirurgia de PO. Ratos de um mês de idade foram anestesiados, seu abdômen foi aberto por uma incisão, um anel de silicone foi colocado em torno do íleo e a abertura foi fechada por sutura. Ratos que se submeteram à cirurgia foram autorizados a recuperar por 8 ou 13 dias. Idade e sexo correspondido para que ratos foram operados da mesma forma como ratos PO só que não havia nenhuma colocação de um anel. (A) imagens do trato GI em ratos submetidos a PO de efectivação ou SO cirurgia. Imagens são de ratos em 8 e 13 dias depois da cirurgia (B) digestivo dissecado de ratos em r. intestino contra a corrente do anel foi distendido na cirurgia de post-PO dias 8 e 13 e pelotas fecais no cólon foram também menores em ambos os 8 e 13 dias post-PO cirurgia como comparado aos ratos de 13 dias post-SO cirurgia devido o anel de silicone parcialmente obstrutiva. Barras de escala são 0,5 cm. clique aqui para ver uma versão maior desta figura.
Figura 2. Camada de músculo liso mudou no modelo cirúrgico rato. Representante H & E mancha de ileais seções transversais do PO intestinal, então e ratos sem operação (n). Músculo liso (SM) e mucosa (Mu) camadas são mais grossas em camundongos PO na cirurgia de post-PO dias 8 e 13 do que aqueles em SO e não ratos. Barras de escala são 50 µm. clique aqui para ver uma versão maior desta figura.
Figura 3. Dinâmica celular remodelação na hipertrofia do músculo liso induzida por obstrução intestinal parcial. Representante laser confocal Digitalizando imagens de hipertróficas ileais seções transversais, de PO, então e não ratos. Immunohistochemically KIT (ICC), de coloração (vermelho) de MYH11 (SMC), com anticorpos PDGFRA (células PDGFRα+ ) ou PGP9.5 (NC; células neuronais), co manchado com DAPI (azul). SMC na muscularis mucosa (MM), músculo circular (CM) e camadas musculares longitudinais (LM), assim como as células PDGFRα+ no plexo profundo muscular (DMP), região mioentérico (MY) e região subserosal (SS) estavam crescendo em íleo hipertrófica em 8 e 13 dias post-PO cirurgia ao ICC em DMP, meu e SS, mioentérico plexo (MP), plexo submucosa (SP), subserosal NC (SS) e neurônios entéricos (REM) foram degenerou. Barras de escala são 50 µm. clique aqui para ver uma versão maior desta figura.
Figura 4. Resultados de anéis de silicone que são demasiado grandes, demasiado pequenos ou extraviado no cólon. (A) não hipertrofia do músculo liso que se desenvolve no íleo se o anel é grande demais para causar obstrução. O anel feito pouca ou nenhuma obstrução do íleo. (B) isquemia Intestinal se desenvolve no íleo se o anel é muito pequeno. O anel feito um bloqueio quase completo do íleo, que pode danificar o tecido e levar a morte precoce antes de que desenvolve hipertrofia. (C) hipertrofia do músculo liso desenvolvido no cólon devido a um anel equivocado. O anel no cólon foi movido para baixo pelo conteúdo lumenal (fezes), que danificou a vasculatura do mesentério e causou a hemorragia maciça no cólon. Clique aqui para ver uma versão maior desta figura.
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Discussion
Temos demonstrado que ratos recebendo a cirurgia intestinal do PO consistentemente e reproducibly desenvolveram hipertrofia intestinal de músculo liso, que imita a obstrução intestinal humana. Cirurgias de obstrução intestinal foram desenvolvidas para animais diferentes, incluindo ratos7ratos10, cobaias,11,13, de12 e gatos cachorro. O modelo do rato de obstrução intestinal tem tempo, custo, tamanho e fenotípicas vantagens sobre outros modelos animais maiores. O desenvolvimento da hipertrofia em camundongos ou ratos leva apenas 10-14 dias10, em comparação com 2-4 semanas em cobaias, cães e gatos11,12,13. O custo para compra e manutenção de ratos também é uma tremenda vantagem financeira quando comparado a outros modelos. Além disso, os ratos são pequeno e fácil de manusear para a cirurgia de PO. Mais importante ainda, ratos recebendo cirurgia PO progressivamente e extensivamente desenvolvem hipertrofia no intestino delgado, enquanto outros animais maiores desenvolvem crescimento menos extenso.
Existem vários fatores-chave a considerar ao tentar produzir hipertrofia confiável através de cirurgia intestinal do PO. Diversos grupos de pesquisa têm usado anéis de vários tamanhos e colocou um anel em vários locais ao longo do intestino para criar obstruções parciais7,9,10,11,12, 13,14. No entanto, um anel de silicone de tamanho ideal deve ser usado para os ratos como um anel maior cria pouca ou nenhuma obstrução no íleo onde hipertrofia apenas parcialmente, ou nunca, desenvolvido (Figura 4A). Por outro lado, quando um anel era muito pequeno, que ele criado perto de bloqueio completo do íleo que induzido por isquemia intestinal e/ou danificar a mucosa causando sepse, levando à morte precoce dentro de uma semana (Figura 4B). Usamos um anel de silicone de um tamanho específico (6 mm de comprimento, diâmetro exterior de 4 mm, diâmetro interior de 3,5 mm) em ratos um mês de idade (Tabela de materiais). Diferentes tamanhos dos anéis devem ser testados e utilizados para ratos de diferentes tamanhos para criar o bloqueio ideal no íleo. Outro fator fundamental é a localização do anel no intestino. O íleo, próximo a válvula ileocecal, é o melhor lugar para colocar o anel para produzir robustamente obstruções parciais. Outras regiões, como o jejuno ou regiões diferentes do íleo longe da válvula ileocecal, tem tido um anel semelhante colocado neles para induzir hipertrofia7. No entanto, devido a superfície serosas do intestino sendo altamente lubrificada pelo líquido peritoneal, um anel colocado nessas partes do intestino facilmente se move por causa da força contrátil do intestino, empurrando o material fecal. Como o anel é empurrado para baixo do comprimento do intestino, corta artérias mesentéricas inervadas para a mioentérico região do intestino, causando hemorragia. Quando um anel é inserido no final do íleo ao lado da válvula ileocecal, é fisicamente impedido de mover-se mais pela natureza volumosa do ceco. O ceco pode ser facilmente localizado e retirado do abdômen na cirurgia, a fim de localizar a região de válvula ileocecal como o ceco se conecta para o íleo e o cólon proximal. O íleo e o cólon ligado no ceco parecem bastante semelhantes e um anel acidentalmente pode ser colocado sobre o cólon proximal ao invés de íleo. Quando um anel foi extraviado no cólon proximal, como também visto no jejuno, o anel foi empurrado para baixo e danificado artérias mesentéricas, causando hemorragias extensas (Figura 4). Para evitar este erro, o íleo deve sempre ser adequadamente localizado e identificado antes que o anel é colocado no lugar. O íleo é executado no meio do ceco, enquanto o cólon é executado em um lado da bolsa ceco.
Este protocolo de cirurgia PO é considerado como uma cirurgia de grande porte para os ratos. Todos os instrumentos cirúrgicos e materiais devem ser esterilizados antes da utilização, e a cirurgia deve ser realizada no ambiente limpo de uma sala de cirurgia dedicado a fim de minimizar a contaminação, que pode levar à infecção e inflamação em ratos. Além disso, uma medicação para a dor deve ser fornecida em ratos após a cirurgia. Optamos por usar uma versão de liberação lenta de buprenorfina, que é eficaz até 7-8 h22. Além disso, após a cirurgia, os ratos têm dificuldade em mastigar e engolir alimentos sólidos. Para cima para pós-cirurgia de 5 dias, os ratos devem ser fornecidos com comida amolecida (dieta sólida com um pouco de água adicionada para amolecer o alimento) e mudou a dieta sólida normal após 5 dias.
Nossa cirurgia intestinal do PO fornece um modelo de hipertrofia na vivo para obstrução intestinal na qual SMC, ICC, e células PDGFRα+ são anormalmente remodeladas. Este modelo de PO é também ideal para compreensão como neurônios entéricos são modificados por PO e como as principais atividades motoras são afetadas no intestino pequeno e grande23. Estas células podem ser dinamicamente remodeladas em condições patológicas, bem como sob condições cultivadas15,16. Observou-se que estas células em ratos SO se comportou um pouco diferente do que ratos normais sem operação (Figura 2 e Figura 3). A maioria dos obstrução intestinal em humanos ocorre por aderências abdominais desenvolvidas após a cirurgia, levando à hipertrofia muscular liso3,4,5,de21. Após a cirurgia de SO, nós também achamos que SMC, ICC e PDGFRα+ células foram ligeiramente hipertróficas no intestino delgado, comparado a não (Figura 3), sugerir que a cirurgia em si pode induzir a hipertrofia do músculo de liso intestinal. Se este for o caso, por cirurgia não é um completo controlo negativo para cirurgia de PO. Não, bem como SO deve ser usado como uma comparação com intestino PO.
Em resumo, encontramos um custo/hora, eficaz, confiável e repetível PO cirúrgico protocolo nos ratos que gera robustamente obstruções intestinais. Durante o desenvolvimento da obstrução, SMC, ICC, PDGFRα+, bem como de células neuronais são dinamicamente remodeladas dentro de várias camadas de tecido e localidades. Este modelo obstrução na vivo oferece novos insights sobre nosso conhecimento de alterações fenotípicas como ocorrem em obstrução intestino a nível celular.
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Disclosures
Os autores não têm nada para divulgar.
Acknowledgments
Os autores gostaria de agradecer Benjamin J Weigler, DVM, pH.d. e Walt Mandeville, D.V.M. (recursos animais & Campus frequentando veterinário, Universidade de Nevada, Reno) para seus serviços excelentes animais fornecidos para os ratos, bem como seus conselhos sobre procedimentos cirúrgicos.
Materials
| Name | Company | Catalog Number | Comments |
| Surgical drape | Medical and veterinary supplies | SMS40 | 40”X100 yards |
| Underpad, econ, pro plus | Medical and veterinary supplies | MSC281224 | 17x24” |
| Iris scissors | Braintree scientific, Inc | SC-i-130 | |
| Iris scissors | Vantage | V95-304 | |
| Dumont electronic & jeweler tweezers | Dumont | 98-180-3 | |
| Braided absorbable suture | Covidien polysorb | SL-5687G | 5-0, polyglactin |
| Nylon non-absorbable mono filament | AD surgical | S-N618R13 | 6-0, nylon |
| Surgical blade | Dynarex | No.15 | |
| Needle holder | Jacobson microvascular | 36-1342TC | 8.5 inch |
| Scalpel handle | Flinn scientific | AB1049 | |
| Microsurgical scissor | WPI | 503305 | |
| Petrolatum ophthalmic ointment | Puralube VET | 3.5 g | |
| Fluriso (isoflurane) | Vetone | V1 502017 | 250 ml |
| Steri-strip reinforced skin closure | 3M | R1547 | |
| Surgical gloves | Medline | MSG2270 | |
| Ear loop face mask | The safety zone | RS700 | |
| Avant gauze non-woven sponges | Caring | PRM25444 | |
| Surgical cup | Admiral craft OYC-2 | 725-A42 | 2.5 oz |
| Swabstick | ChloraPrep | 260103 | 2% w/v Chlorhexidine Gluconate (CHG) and 70% v/v Isopropyl Alcohol (IPA) |
| Cotton tipped applicator | Puritan | 806-WC | |
| Buprenorphine | Zoo pharm | BZ8069317 | 1 mg/ml |
| Gentamycin sulfate | Vetone | G-6336-04 | 100 mg/ml |
| Fast acting gel cream remover | Veet | 8111002 | |
| Syringe | AHS | AH01T2516 | 1 ml with needle |
| Silicon ring | VWR | 60985-720 | 6 mm in length, 4 mm exterior diameter, 3.5 mm interior diameter |
| C57BL/6 mice | The Jackson Laboratory | 4-6 weeks old |
References
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