Summary
Intestinal obstruktionerna är en partiell eller fullständig blockering av tarmen som kan orsaka svår buksmärta, illamående, kräkningar och förhindrar passage av avföring. Proceduren för att skapa intestinal partiell obsructions i möss är tillförlitlig i studerar mekanismerna bakom patologiska celltillväxt och död i tarmen.
Abstract
Intestinal obstruktionerna, som hindra eller blockera peristaltiska rörelser, kan orsakas av buken sammanväxningar och mest gastrointestinala (GI) sjukdomar inklusive maligna utväxter. Dock cellulära remodeling mekanismer involverade i, och orsakas av, intestinal obstruktionerna dåligt förstås. Flera djurmodeller av intestinal obstruktionerna har utvecklats, men musmodell är mest kostnad/tid effektivt. Musmodell använder kirurgisk implantation av en partiell tarmobstruktion (PO) som har hög dödlighet om det inte utförs korrekt. Dessutom misslyckas med möss som får PO kirurgi att utveckla hypertrofi om en lämplig blockad inte används eller inte korrekt placerad. Här beskriver vi ett detaljerat protokoll för PO kirurgi som producerar tillförlitliga och reproducerbara intestinal obstruktionerna med en mycket låg dödlighet. Detta protokoll använder tredjeparts en kirurgiskt placerad silikonring som omger ileum som delvis blockerar mag rörelse i tunntarmen. Partiell blockering gör tarmen blir vidgade på grund av halt mag rörlighet. Dilatation av tarmen inducerar smidig muskelhypertrofi på muntliga sida av ringen som successivt utvecklar över 2 veckor tills det orsakar döden. Den kirurgiska PO musmodellen erbjuder en in-vivo -modell av hypertrofisk Tarmvävnaden användbar för att studera sjukliga förändringar av intestinala celler inklusive glatta muskelceller (SMC), interstitiella celler av Cajal (ICC), PDGFRα+, och neuronala celler under utvecklingen av tarmobstruktion.
Introduction
Intestinal obstruktionerna är en partiell eller fullständig blockering i liten eller stor tarmen vilket förhindrar sammandrag mat, vätska och gas rör sig genom tarmen1. På grund av obstruktion inducerar blockeringen tarmväggarna att bli förtjockad, förträngning i lumen2. Tarmobstruktion kan uppstå till följd av buk eller bäcken operationer som orsakar buk vidhäftning vävnad formation eller GI störningar såsom divertikulit, tarmvred, bråck, inflammatoriska tarmsjukdomar (Crohns sjukdom), striktur, invagination, förstoppning, fekalom, pseudo-obstruktion, cancer och tumörer3,4,5. Intestinal obstruktionerna i dessa fall leda ofta till hypertrofi av den tunica muscularis av inälvan6.
PO av lumen inducerar tarm dilatation och ökar muskulatur skiktets tjocklek runt hindret som svar på behovet av att fortsätta funktionella peristaltiken7,8,9,10, 11,12,13. Djurmodeller av intestinal PO har utvecklats för att studera smidig muskelhypertrofi i möss7, råttor10, marsvin11, hundar12och katter13 som konsekvent utveckla liknande hypertrofi inom den tarmens muskellager.
En musmodell av intestinal PO är det mest kostnadseffektiva sättet att generera och studera intestinal obstruktionerna i vivo. Tunntarmen hinder utförs i möss med hjälp av en ring av silikon kirurgiskt placerad kring ileum. PO möss visade en tidig ökning i antalet celler (hyperplasi), och en ökning i muskelmassa skiktets tjocklek (hypertrofi) efter PO kirurgi8,15. SMC är de primära plast celler som växer inom glatta muskellager svar till hypertrofisk villkor14, men andra celler såsom ICC och PDGFRα+ celler som är nära förknippade med SMC, är även nyinsatta. Vi har tidigare rapporterat att PO möss utvecklar hypertrofi i tunntarmen, i vilken SMC är dedifferentiated in PDGFRα+ celler som är mycket proliferativ7,15,16. Omvänt är ICC urartat och förlorade inom hypertrophied glatta muskeln skikten under utvecklingen av intestinal obsruction7. En annan stor fördel av PO modell är dess förmåga att framkalla förändringar i det enteriska nervsystemet och förökningsmaterial neurogen motoriska mönster. Den stora förökningsmaterial neurogen motoriska mönster i tunntarmen mus är migrerar motorn komplexa (MMC), som är neurogen och kräver inte ICC eller elektriska långsamma vågor17. PO modellen kan ge tydliga insikter i hur MMC och enteriska nerver är ombyggda av partiell obstruktion.
Här föreslår vi ett murina protokoll för intestinal PO kirurgi med hjälp av en ring av silikon. Möss som fick PO kirurgi tillförlitligt producera hypertrofi i den tunica muscularis av tunntarmen. Inom hypertrofisk muskel, är SMC, ICC, PDGFRα+och neuronala celler dramatiskt remodeled.
Subscription Required. Please recommend JoVE to your librarian.
Protocol
Följande protokoll har godkänts av den institutionella djur vård och använda kommittén (IACUC) vid University of Nevada-Reno (UNR) djur resurser och uppfyller alla institutionella etiska riktlinjer angående användning av försöksdjur.
1. djur.
- Få mogna (4-6 veckor gamla) C57BL/6 möss som väger mellan 20-30 g. House kolonin av laboratoriemöss i en centraliserad djuranläggningen på UNR djur resurser.
2. partiell obstruktion kirurgi
Obs: Operationer utförs i ett rum tillägnat kirurgiska ingrepp. Alla kirurgiska instrument är Ånghärdad före operation. Sterila operationsrockar och handskar bör bäras av all personal i kirurgiska rummet hela tiden.
- Förberedelse för kirurgiska musen
- Kontrollera den anestetiska leverans systemet för att säkerställa tillförseln av syre och isofluran är tillräcklig för förfarandet. Slå på leverans syre. Slå på gas flödesmätaren och justera den till 500-1000 mL/min. plats djuret i induktion kammaren och tätar toppen.
- Slå på den isofluran spridare till 5%, och övervaka djuret tills det blir recumbent. Växla bedövningsmedel leveranssystemet till näsan konen.
- Spola induktion kammaren av någon kvarvarande gas med syre, sedan stänga av induktion kammare raden samtidigt hålla näsan konen linjen öppen.
- Ta bort djuret från kammaren och placera försiktigt oftalmologiska salva på ögonen på djuret.
- Placera näsan konen på en förvärmd varm pad när gas fortsätter att flöda.
- Ändra den syre flöden till 100-200 mL/min, med 2-3% isofluran. Om djuret börjar flytta, gentlyrestrain djuret med näsan konen på tills fullt anesthetized igen.
- Övervaka andning och svar på stimulering under förfarandet och justera procentandelen av isofluran (2-5%) som behövs. Animaliska anesthetization nivån övervakas av bristen på tå nypa reflex innan operationen utförs.
- Injicera smärtbehandling (buprenorfin, 1 µg/g kroppsvikt) intraperitonealt från webbplatsen snitt.
- Applicera hår borttagning lotion på buken med en ren bomullstopp. Låt lotion sit för 3-5 min på mus, sedan ta bort håret med gasväv och bomull svabb. Upprepa detta tills allt hår har tagits bort från magen av musen.
- Ren huden med 70% etanol med gasväv och bomull svabb. Tillämpa swabsticks eller povidonjod lösning för att rengöra buken.
- Partiell obstruktion kirurgi
- Drapera den kirurgiska platsen använder 25 x 50 cm steril papper med en 2,5 x 2,5 cm öppning i mitten för området kirurgi. Säkra drapera djuret genom att placera sterila remsor på gränserna för öppnande och huden.
- Gör en ~3.0 cm buk snitt längdriktningen använda nr 15 blad skalpell, säkerställa att bara huden är anskäras och undvika styckning i det musculoperitoneal lagret vid denna tid.
- Med kirurgisk sax och pincett, noggrant huden separat från det musculoperitoneal lagret utan att orsaka några snitt i musculoperitoneal-skiktet. När lagren skilts tillräckligt (cirka 1 cm x 4 cm), identifiera linea alba på musculoperitoneal lager och skär ~ 2 cm längs linea alba att exponera intraperitoneal hålrummet med hjälp av mikro-pincett och sax.
- Noggrant lokalisera och identifiera blindtarmen. Långsamt och försiktigt bort blindtarmen från intraperitoneal hålrummet med mikro-pincett, föra den proximala kolon och ileum med blindtarmen utanför på den steril duk. Omedelbart Fukta intestinal vävnaden med 0,9% steril saltlösning indränkt kompress och hålla exponerade vävnaden fuktad hela tiden medan de är utanför bukhålan.
- Lokalisera och identifiera krös mellan ileum och proximala kolon. Gör ett snitt (~ 1 cm) parallellt med, och strax under, ileum, i tarmkäxet och undvika skärning någon kärlsystemet.
- Ta en Ånghärdad silikonring (6 mm i längd, 4 mm utvändig diameter, 3,5 mm invändig diameter). Skär längsled för att öppna slangen och ringen med mikro-pincett.
- Sätt in ena änden av öppnade ringen genom snittet i tarmkäxet vävnaden. Tillbaka ringen till en färdig ringform genom att ena änden i kontakt med en annan, med ileum omgiven av ringen.
- Säkerställa att silikon ringen helt omger ileum, Stäng ringen med sutur och placera försiktigt tarmarna tillbaka i intraperitoneal hålrummet.
- Kirurgi stängning
- Utföra en enkel kontinuerlig sutur på musculoperitoneal lager längs linea alba att stänga musculoperitoneal såret med en resorberbar sutur. Efter suturen är klar, indränkt ren någon blödning med 0,9% steril koksaltlösning kompress.
- För att helt stänga såret, med en separat nylon sutur, utföra en enkel kontinuerlig sutur på huden.
- Efter båda suturer har slutförts, ren såret med nya swabstick eller povidonjod.
- Intraperitonealt injicera antibiotika (gentamicin, 150 μl per mus baserat på 20-30 g kroppsvikt).
- Efter avslutningen av förfarandet, Stäng av den isofluran spridare och tillåter djuret att andas bara flödar syre tills det börjar få medvetande.
- När djuret är vaken, sätt djuret i ett separat återvinning område med termisk stöd tills återhämtat sig helt.
3. efter operationen observation.
- Efter avslutad kirurgi, flytta djuren till en inkubator i en uppvaket där temperatur och luftfuktighet regleras. Övervaka djuren postoperativt var 15: e minut under den första timmen då var 30: e minut för den andra timmen medan djuren är i inkubatorn.
- Så snart den föreskrivna observationen är komplett, flytta djuren till deras egna individuella bur och övervaka dem dagligen för kliniska indikationerna smärta18och för att säkerställa att den kirurgiska sår läker ordentligt utan några tecken på komplikationer ( sårruptur) närvarande.
Subscription Required. Please recommend JoVE to your librarian.
Representative Results
Partiell obstruktion (PO) var kirurgiskt inducerad i en månad gamla möss genom att placera en silikonring runt ileum nära ileocecal sphincter. Denna ring skapade en partiell blockering i ileum. Simulerade operationer (så) utfördes även utan en ring på ålder/kön matchas möss och dessa möss visade inte några symtom liknande de som finns i PO möss. Möss återhämtade sig snabbt från PO kirurgi inom några timmar. De visade inga uppenbara beteendeförändringar eller svaghet inom den första veckan, men efter den första veckan, de successivt började visa tecken på PO: en utspänd buk och produktionen av färre och mindre fekal pellets. PO möss offrades vid 8 och 13 dagar post-PO kirurgi tillsammans med SO kontroll möss. Tunntarmen var delvis fylld och utspänd på 8 dagar post-PO kirurgi och helt fylld och utspänd på 13 dagar post-PO kirurgi, jämfört med så styra möss (figur 1A). Fekal pellet bildas i tjocktarmen 8 och 13 dagar post-PO kirurgi möss reducerades jämfört med SO kontroll möss (figur 1B). Ileal vävnad som var bara uppströms i ringen var dissekeras och den glatta muskulaturen analyserades av hematoxylin och eosin (H & E) färgning. Den glatta muskulatur lagret var hypertrophied på 8 dagar post-PO kirurgi och mycket längre hypertrophied på 13 dagar post-PO kirurgi (figur 2). Vi observerade också förändringar i SMC, ICC, PDGFRα+och neuronala celler inom det tunica muscularis i PO möss med hjälp av immunkemi. Varje cell var märkt med cell-typ specifika markörer: MYH11 (SMC), KIT (ICC), PDGFRA (PDGFRα+ celler) och PGP9.5 (neuronala celler). SMC ligger knappt tre lager av vävnad: längsgående muskel (LM), cirkulär muskel (CM) och de muscularis slemhinnor (MM) i ileum. SMC successivt växte i snabb takt i alla tre lager på 8 och 13 dagar post-PO kirurgi (figur 3). När det gäller ICCs, är deras subpopulationer belägna i de djupa muskulös plexus (DMP), myenteric region (MY) och subserosal regionen (SS). Dock var ICC-DMP, ICC-min, ICC-SS urartat i intra/intermuscular lager (figur 3). Liknar ICC subpopulations, subpopulations av PDGFRα+ celler (PαC) ligger i DMP, MY och SS. I PO möss, PαC-DMP, PαC-min, och PαC-SS var dynamiskt remodeled inom de intermuscular lagrarna av PO möss: de växte på 8 dagar post-PO kirurgi och urartat på 13 dagar post-PO kirurgi (figur 3). Slutligen försvann myenteric plexus (MP), submukosala plexus (SP), subserosal nervceller (SS) och enteriska motoriska nervceller (EMN) betydligt i inter/intramuskulär regionerna av PO möss vid 8 och 13 dagar post-PO kirurgi (figur 3).
Figur 1. Partiell tarmobstruktion kirurgiskt inducerad i en musmodell. PO förmåddes av PO kirurgi. En månad gamla möss var sövda, deras buk öppnades av ett snitt, en silikonring placerades kring ileum och öppnandet stängdes av suturering. Möss som opererades tilläts att återvinna för antingen 8 eller 13 dagar. Ålder och kön som matchade så möss fungerades på på samma sätt som PO möss Förutom fanns det ingen placering av en ring. (A) brutto bilder av mag-tarmkanalen hos möss som genomgick PO eller SO kirurgi. Bilderna är av möss vid 8 och 13 dagar efter operationen (B) mag-tarmkanalen dissekeras från möss i A. tunntarmen uppströms i ringen var utspänd på både 8 och 13 dagar post-PO kirurgi och fekal pellets i tjocktarmen var också mindre på både 8 och 13 dag post-PO kirurgi som jämfört med 13 dagar post-SO kirurgi möss på grund av delvis obstruktiv silikonring. Skala barer är 0,5 cm. vänligen klicka här för att visa en större version av denna siffra.
Figur 2. Glatta muskulaturen lagret ändras i den kirurgiska musmodellen. Representant H & E färgning av ileal tvärsnitt från intestinal PO, så och ingen drift (NO) möss. Glatt muskulatur (SM) och slemhinna (Mu) lager är tjockare hos PO möss vid 8 och 13 dagar post-PO kirurgi än de i SO och inga möss. Skala barer är 50 µm. vänligen klicka här för att visa en större version av denna siffra.
Figur 3. Dynamiska cellulära remodeling i smidig muskelhypertrofi induceras av partiell tarmobstruktion. Representativa confocal laserscanning bilder av hypertrofisk ileal tvärsnitt, från PO, så och inga möss. Immunohistochemically färgning med antikroppar (röd) av MYH11 (SMC), KIT (ICC), PDGFRA (PDGFRα+ celler) eller PGP9.5 (NC; neuronala celler), samtidig fläckade DAPI (blå). SMC i slemhinnan muscularis (MM), cirkulär muskel (CM), och längsgående muskellager (LM), liksom PDGFRα+ celler i djup muskulär plexus (DMP), myenteric region (MY) och subserosal regionen (SS) växer i hypertrofisk ileum på 8 och 13 dagar post-PO kirurgi medan ICC i DMP, MY och SS, myenteric plexus (MP), submukosala plexus (SP), subserosal NC (SS) och enteriska motoriska nervceller (EMN) var urartat. Skala barer är 50 µm. vänligen klicka här för att visa en större version av denna siffra.
Figur 4. Resultat av silikon ringar som är alltför stor, för liten eller felplacerade på tjocktarmen. (A) ingen smidig muskelhypertrofi framkallar i ileum om ringen är för stor för att orsaka obstruktion. Ringen görs lite att ingen blockering av ileum. (B) Intestinal ischemi utvecklar i ileum om ringen är för liten. Ringen gjorde en nästan fullständig blockering av ileum, vilket kan skada vävnaden och leda till tidig död före hypertrofi utvecklar. (C) glatta muskelhypertrofi utvecklats i tjocktarmen på grund av en missriktad ring. Ringen på tjocktarmen flyttades av lumenal innehåll (avföring), som skadade krös vaskulatur och orsakade massiv blödningen i tjocktarmen. Klicka här för att se en större version av denna siffra.
Subscription Required. Please recommend JoVE to your librarian.
Discussion
Vi visat att möss som fick intestinal PO operationen konsekvent och reproducibly utvecklar tarmens muskulatur hypertrofi, som härmar mänskliga tarmobstruktion. Tarmobstruktion operationer har utvecklats för olika djur inklusive möss7, råttor10, marsvin11, hund12 och katter13. Musmodell tarmobstruktion har tid, kostnad, storlek och fenotypiska fördelar jämfört med andra större djurmodeller. Utvecklingen av hypertrofi hos möss eller råttor tar endast 10-14 dagar10, jämfört med 2-4 veckor i marsvin, hundar och katter11,12,13. Kostnad för inköp och underhåll av möss är också en enorm finansiell fördel jämfört med andra modeller. Dessutom är möss små och lätt att hantera för PO operationen. Viktigast av allt, utveckla möss som får PO kirurgi successivt och i stor utsträckning hypertrofi i tunntarmen medan andra större djur utvecklar mindre omfattande tillväxt.
I området i närheten finns det flera viktiga faktorer att tänka på när du försöker producera tillförlitlig hypertrofi genom tarmens PO kirurgi. Flera forskargrupper har använt ringar i olika storlekar och placeras en ring på olika ställen längs tarmen att skapa partiella hinder7,9,10,11,12, 13,14. Dock bör en silikonring av optimal storlek användas för möss som en större ring skapar lite eller ingen blockering i ileum där hypertrofi endast delvis, eller aldrig, utvecklade (figur 4A). Omvänt, när en ring var för liten, det skapade nära fullständig blockering av ileum som inducerad intestinal ischemi och/eller skadas slemhinnan orsakar sepsis, leder till tidig död inom en vecka (figur 4B). Vi använde en silikonring av en viss storlek (6 mm i längd, 4 mm utvändig diameter, 3,5 mm invändig diameter) på en månad gamla möss (Tabell för material). Olika storlekar på ringarna bör testas och används för möss i olika storlekar för att skapa optimala blockeringen i ileum. En annan viktig faktor är platsen för ringen på tarmen. Ileum, nära ileocecal ventil, är det bästa stället att placera ringen för att kraftfullt producera partiella hinder. Andra regioner såsom de jejunum eller olika regioner i ileum från ileocecal ventil, har haft en liknande ring placeras på dem för att inducera hypertrofi7. Dock på grund av serös ytan i tarmen som mycket smörjs med peritonealvätska, flyttar en ring som placeras på dessa delar av tarmen enkelt på grund av tarmen driver fekalt material genom kontraktila kraft. Som ringen skjuts ned längden på tarmen, skär det av mesenterica artärer innerveras i regionen myenteric i tarmen, orsakar blödningen. När en ring sätts i slutet av ileum bredvid ileocecal ventil, det är fysiskt förhindrad att flytta ytterligare av skrymmande beskaffenhet blindtarmen. Blindtarmen kan enkelt lokaliseras och tas ur buken i kirurgi för att lokalisera regionen ileocecal ventil som blindtarmen ansluter till både ileum och proximala kolon. I ileum och colon ansluten vid blindtarmen ser ganska lika och en ring av misstag kan placeras på proximala kolon i stället för ileum. När en ring var felplacerad på proximala kolon, som också ses på jejunum, ringen pressades nedåt och skadade mesenterica artärer, orsakar omfattande blödningar (figur 4 c). För att undvika detta felplacering, bör ileum alltid korrekt lokaliseras och identifieras innan ringen sätts på plats. Ileum körs in i mitten av blindtarmen medan tjocktarmen går in i ena sidan av blindtarmen påsen.
Detta PO kirurgi protokoll anses som en större operation för möss. Alla kirurgiska instrument och material ska steriliseras före användning, och kirurgi bör utföras i ren miljö för en dedikerad kirurgi för att minimera kontaminering, vilket kan leda till infektion och inflammation hos möss. Dessutom bör en smärtstillande medicin ges till möss efter operation. Vi valde att använda en långsam frisättning versionen av buprenorfin, som är effektiv upp till 7-8 h22. Dessutom efter operation har möss svårigheter att tugga och svälja fast föda. För upp till 5 dagar efter operationen, möss bör vara försedd med mjuk mat (fast diet med lite vatten som tillsätts mjuka mat) och bytte till normal fast kost efter 5 dagar.
Vår intestinala PO kirurgi ger en in-vivo hypertrofi modell för tarmobstruktion i som SMC, ICC, och PDGFRα+ celler är onormalt remodeled. PO modellen passar också perfekt till förståelse hur enteriska neuron modifieras av PO och hur de stora motoriska aktiviteterna påverkas i de små och stora tarm23. Dessa celler kan vara dynamiskt remodeled i sjukdomstillstånd samt enligt odlade villkor15,16. Vi observerade att dessa celler i SO möss betett sig lite annorlunda än normala möss utan operation (figur 2 och figur 3). De flesta tarmobstruktion hos människor uppstår genom buken sammanväxningar utvecklats efter operation, vilket leder till smidig muskel hypertrofi3,4,5,21. Efter SO operation, vi fann också att SMC, ICC och PDGFRα+ celler var något hypertrofisk i tunntarmen, jämfört med ingen (figur 3), vilket tyder på att operation själv kan inducera tarmens glatta muskelhypertrofi. Om så är fallet, så är operation inte en fullständig negativ kontroll för PO kirurgi. Nej liksom SO bör användas som en jämförelse till PO tarmen.
Sammanfattningsvis har vi hittat en kostnad och tid effektiva, pålitliga och repeterbara PO kirurgiska protokollet hos möss som kraftfullt genererar intestinal obstruktionerna. Under utvecklingen av obstruktion, är SMC, ICC, PDGFRα+, samt neuronala celler dynamiskt remodeled inom olika vävnad lager och lokaler. Denna i vivo obstruktion modell erbjuder nya insikter i vår kunskap om hur fenotypiska förändringar uppstå i hindras tarmen på cellnivå.
Subscription Required. Please recommend JoVE to your librarian.
Disclosures
Författarna har något att avslöja.
Acknowledgments
Författarna vill tacka Benjamin J Weigler, D.V.M., Ph.D. och Walt Mandeville, D.V.M. (djur resurser & Campus deltar i veterinär, University of Nevada, Reno) för sina utmärkta djur tjänster som tillhandahålls till möss samt deras råd på kirurgiska ingrepp.
Materials
| Name | Company | Catalog Number | Comments |
| Surgical drape | Medical and veterinary supplies | SMS40 | 40”X100 yards |
| Underpad, econ, pro plus | Medical and veterinary supplies | MSC281224 | 17x24” |
| Iris scissors | Braintree scientific, Inc | SC-i-130 | |
| Iris scissors | Vantage | V95-304 | |
| Dumont electronic & jeweler tweezers | Dumont | 98-180-3 | |
| Braided absorbable suture | Covidien polysorb | SL-5687G | 5-0, polyglactin |
| Nylon non-absorbable mono filament | AD surgical | S-N618R13 | 6-0, nylon |
| Surgical blade | Dynarex | No.15 | |
| Needle holder | Jacobson microvascular | 36-1342TC | 8.5 inch |
| Scalpel handle | Flinn scientific | AB1049 | |
| Microsurgical scissor | WPI | 503305 | |
| Petrolatum ophthalmic ointment | Puralube VET | 3.5 g | |
| Fluriso (isoflurane) | Vetone | V1 502017 | 250 ml |
| Steri-strip reinforced skin closure | 3M | R1547 | |
| Surgical gloves | Medline | MSG2270 | |
| Ear loop face mask | The safety zone | RS700 | |
| Avant gauze non-woven sponges | Caring | PRM25444 | |
| Surgical cup | Admiral craft OYC-2 | 725-A42 | 2.5 oz |
| Swabstick | ChloraPrep | 260103 | 2% w/v Chlorhexidine Gluconate (CHG) and 70% v/v Isopropyl Alcohol (IPA) |
| Cotton tipped applicator | Puritan | 806-WC | |
| Buprenorphine | Zoo pharm | BZ8069317 | 1 mg/ml |
| Gentamycin sulfate | Vetone | G-6336-04 | 100 mg/ml |
| Fast acting gel cream remover | Veet | 8111002 | |
| Syringe | AHS | AH01T2516 | 1 ml with needle |
| Silicon ring | VWR | 60985-720 | 6 mm in length, 4 mm exterior diameter, 3.5 mm interior diameter |
| C57BL/6 mice | The Jackson Laboratory | 4-6 weeks old |
References
- Millat, B., Guillon, F. Physiopathology and principles of intensive care in intestinal obstructions. Rev Prat. 43, 667-672 (1993).
- Tonelli, P. New developments in Crohn's disease: solution of doctrinal mysteries and reinstatement as a surgically treatable disease. 1. The process is not a form of enteritis but lymphedema contaminated by intestinal contents. Chir Ital. 52, 109-121 (2000).
- Limsrivilai, J. Meta-analytic Bayesian model for differentiating intestinal tuberculosis from Crohn's disease. Am J Gastroenterol. 112, 415-427 (2017).
- Dvorak, D., Adamova, Z., Bar, T., Slovacek, R. Internal hernia as a cause of small bowel obstruction. Rozhl Chir. 96, 34-36 (2017).
- Massani, M., Capovilla, G., Ruffolo, C., Bassi, N. Gastrointestinal stromal tumour (GIST) presenting as a strangulated inguinal hernia with small bowel obstruction. BMJ Case Rep. , (2007).
- Chen, J., Chen, H., Sanders, M., Perrino, B. A. Regulation of SRF/CArG-dependent gene transcription during chronic partial obstruction of murine small intestine. Neurogastroenterol Motil. 20, 829-842 (2008).
- Chang, I. Y., et al. Loss of interstitial cells of Cajal and development of electrical dysfunction in murine small bowel obstruction. J Physiol. 536 (Pt 2), 555-568 (2001).
- Liu, D. H., et al. Voltage dependent potassium channel remodeling in murine intestinal smooth muscle hypertrophy induced by partial obstruction. PLoS One. 9 (2), e86109 (2014).
- Guo, X., et al. Down-regulation of hydrogen sulfide biosynthesis accompanies murine interstitial cells of Cajal dysfunction in partial ileal obstruction. PLoS One. 7, e48249 (2012).
- Yang, J., Zhao, J., Chen, P., Nakaguchi, T., Grundy, D., Gregersen, H. Interdependency between mechanical parameters and afferent nerve discharge in hypertrophic intestine of rats. Am J Physiol-Gastr L. 310, G376-G386 (2016).
- Zhao, J., Liao, D., Yang, J., Gregersen, H. Biomechanical remodeling of obstructed guinea pig jejunum. J Biomech. 43, 1322-1329 (2010).
- Bowen, E. J., et al. Duodenal Brunner's glade adenoma causing chronic small intestinal obstruction in a dog. J Small Anim Pract. 53, 136-139 (2012).
- Bettini, G., et al. Hypertrophy of intestinal smooth muscle in cats. Res Vet Sci. 75, 43-53 (2003).
- Macdonald, J. A. Smooth muscle phenotypic plasticity in mechanical obstruction of the small intestine. J Neurogastroenterol Motil. 20, 737-740 (2008).
- Ha, S. E., et al. Transcriptome analysis of PDGFRα+ Cells identifies T-types Ca2+ channel CACNA1G as a new pathological marker for PDGFRα+ cell hyperplasia. PLoS One. 12, e0182265 (2017).
- Park, C., et al. Serum response factor is essential for prenatal gastrointestinal smooth muscle development and maintenance of differentiated phenotype. J Neurogastroenterol Motil. 21, 589-602 (2015).
- Spencer, N. J., Sanders, K. M., Smith, T. K. Migrating motor complexes do not require electrical slow waves in the mouse small intestine. J Physiol. 553, 881-893 (2003).
- Langford, D. J., et al. Coding of facial expressions of pain in the laboratory mouse. Nat Methods. 7, 447-449 (2010).
- Terez, S. D., Notari, L., Sun, R., Zhao, A. Mechanisms of smooth muscle responses to inflammation. Neurogastroenterol Motil. 24, 802-811 (2012).
- Chen, W., et al. Smooth muscle hyperplasia/hypertrophy is the most prominent histological change in Crohn's fibrostenosing bowel strictures: A semiquantitative analysis by using a novel histological grading scheme. J Crohns Colitis. 11, 92-104 (2017).
- Huizinga, J. D., Chen, J. H. Interstitial Cells of Cajal: Update on Basic and Clinical Science. Curr Gastroenterol Rep. 16, 363 (2014).
- Jirkof, P., Touvieille, A., Cinelli, P., Arras, M. Buprenorphine for pain relief in mice: repeated injections vs sustained-release depot formulation. Lab Animal. 49, 177-187 (2015).
- Spencer, N. J., Dinning, P. J., Brookes, S. J., Costa, M. Insights into the mechanisms underlying colonic motor patterns. J Physiol. 594, 4099-4116 (2016).
