Summary
선물이 색도계 프러시안 블루 메서드를 사용 하 여 식물 조직에 철 분 함량을 측정 하는 간단 하 고 신뢰할 수 있는 프로토콜.
Abstract
철, 살아있는 유기 체에서 가장 중요 한 영양소 중 하나는 호흡과 광합성 등의 기본 프로세스에 포함 된다. 철 분 모든 생물, 식물에 건조 중량의 약 0.009%에 이른다에 오히려 낮습니다. 날짜 하려면, 화 염 흡수 원자 분광학은 식물 조직에서 철 분 농도 측정 하기 위한 가장 정확한 방법 중 하나. 그러나,이 접근은 어렵고 비싼 이며 특정 장비 공장 실험실에서 주로 발견. 따라서, 정기적으로 사용 될 수 있는 간단한 아직 정확한 방법 필요 합니다. 색도계 프러시안 블루 메서드는 정기적으로 동물과 식물 조직학 섹션에 얼룩 질적 철에 사용 됩니다. 이 연구에서 우리는 담배에 있는 철의 양적 측정 방법 나뭇잎 프러시안 블루 적응. 우리는 원자 분광학과 같은 샘플에 철 콘텐츠를 측정 하 여 선형 회귀 발견 얼룩 프러시안 블루를 사용 하 여이 방법의 정확도 확인 (R2 = 0.988) 두 절차 사이. 우리는 프러시안 블루 식물 조직에서 양적 철 측정 방법은, 간단, 정확 하 고 저렴 한 결론. 그러나, 여기에 제시 된 선형 회귀 다른 식물 종, 샘플 및 시 사이 잠재적인 상호 작용 때문에 적합 하지 않을 수 있습니다. 따라서 회귀 곡선의 다른 식물 종의 필요 합니다.
Introduction
철 (Fe)은 모든 생명체에 중요 한 미 량 영양소 이다. 식물에는 필수 미 량 영양소1 호흡, 광합성과 엽록소 생 합성 등의 기본 프로세스에의 참여 때문 이다. 무료 철 이온의 높은 축적은 식물 세포 산화 스트레스를 일으키는 자유 래 디 칼의 방출에 지도 하는 반응 때문에 유해한. 식물 세포 내 철 항상성 유지, 이온 그들에 저장 하 고 ferritins, 철 항상성2 에 직접 관여 단백질 버팀대 및 모든 살아있는 유기 체에 있는 철의 주요한 저장소 구조 내에서 분리 된. 동시에 철 분 결핍 빈 혈 공장 철 영양실조 증가 필요에 따른 인간의 인구의 상당한 비율을 영향을 줍니다. 식물 ferritin의 독특한 특성으로 인해 ferritin 철 식품 농축 영양3의이 문제를 싸 우기 위하여 유망 전략을 제공 합니다.
철 이온은 주로에서 발견된 두 산화 상태, 즉 철 (divalent Fe2 + 또는 철 (II))과 제 2 철 (trivalent Fe3 + 또는 철 (III)) 형태. 철, 철 클러스터4, 등의 여러 다른 형태도 세포에서 발견 된다. Fe 철 산화물 세포와 자연스럽 게 폼 hematites (Fe2O3) 및 ferryhidrites로 저장 됩니다 ((Fe3 +)2O3•0.5 H2O)에서 생리 적 조건5. 이러한 반응, 특히 제 2 철 형태에서에서 형성 하는 수 산화물은 매우 낮은 용 해도 있다. 철 보존 따라서 솔루션의 pH에 의해 영향을 받는 이며 주로 pH 56위의 고체.
불 쌍 한 용 해도 및 Fe의 높은 반응성을 고려 하면 공장 조직 및 장기 들의 전송 적합 한 chelating 분자와 연결 되어야 합니다. 또한, 철과 제 2 철 양식1 사이 그것의 산화 상태를 제어 해야 합니다. 잎, 내는 철의 약 80% 한다, 엽록소와 다른 heme 분자의 생 합성에서 전자 교통 시스템에서의 필수적인 역할 때문에 광합성 세포에서 발견 되 고 Fe S의 형성에서 클러스터7. 셀 내에서 과잉 철 분의 경우 흑자 금속 ferritin 분자8에 저장 하는 공포에 translocated입니다.
철은 여러 방법을 비롯 하 여 불꽃 원자 흡수 분광학9 (FAAS) 또는 색도계 분석 실험10, 전 후자 보다 훨씬 더 정확한 되 고 식물 조직에서 측정할 수 있습니다. FAAS 있는 개별 요소의 전자기 방출 기초 샘플의 원소 구성을 결정 하는 매우 정확한 기술입니다. FAAS 변환 합니다 금속 이온 원자 상태 샘플의 화 염 열에 의해 주어진된 이온 접지 상태로 반환 될 때 이온 여기 및 특정 파장의 방출으로 이어지는. 다른 이온에서 방출 한 단색으로 구분 되며 흡수 센서11에 의해 감지. FAAS 따라서 직접 철 농도 척도를 제공 합니다. 그러나 생물 조직에 철을 시각화에 대 한 다른 기술을,, 사용할 수 있습니다. 유도 결합 플라즈마-질량 분광학 (ICP-MS)12 철 및 다른 성분 측정을 위한 매우 정확한 방법 이지만 장비, FAAS와 ICP-MS, 모두의 부족은 일반적인 문제 이다. 다른 한편으로, 안산 기능성13 철 측정 정밀도 결여 하 고 샘플 사이의 작은 변화를 감지 하 실패 합니다. 프러시안 파란 얼룩14,,1516,17 Fe 양이온, 생산 되는 칼륨 제 2 철 ferrocyanide (K4Fe(CN)6)의 반응에 따라 간접 방법입니다는 강한 블루 색상, 질적 철 검출 동물과 식물 조직의 조직학 섹션에 사용 됩니다.
철 금속 (0-발렌타인)는 암석에 드문 경우입니다. 환경에서 철의 지배적인 비 complexed 이온 형태로 주로 에어로빅 사이트에서 우세한 제 2 철 철 철 철 무산 소 환경에서 상대적으로 더 풍부한 되 고와 주변에 있는 산소의 양에 의해 결정 됩니다. 철 철 산화의 원인이 되는 에이전트 자주 무산 소 및 산 성 주변18에 차이가 있지만이 후자의 형태는 또한 극단적으로 산 성 환경에서 지배적 이다. 때 철 분 4%에서 solubilized 이다 호 기성 환경에서 HCl (pH 0), 희석된 철의 존재는 제 2 철 (Fe3 +)19,20양식.
철 이온과 K4Fe(CN)6 사이의 반응을 아래와 같습니다.
Fe3 +: FeCl3 + K4Fe(CN)6 KFe(III)Fe(II)(CN)6¯ + 3KCl =
Fe2 +: 4 FeCl2 + 2 K4Fe(CN)6 Fe4(Fe(CN)6)2 + 8 = KCl
현재 연구에서 우리는 프러시안 파란 얼룩 솔루션에서 철 수준을 측정 하는 데 유용 수 있습니다 여부를 물었다.
처음에, 수성 해결책에서 Fe의 농도 및 프러시안 파란 얼룩의 상관관계를 확인합니다. 수성 해결책에서 (FeCl2, FeCl3 또는 2의 1:1 혼합물)로 철 농도 프러시안 블루의 추가 후 원자 분광학와 흡 광도 (OD)을 측정 했다. 그림 1 측정 각 방법으로 얻은 선형 회귀 곡선을 보여준다. 우리는 프러시안 블루 메서드 솔루션에서 철 분 농도의 정량 분석을 위해 사용 될 수 있다는 결론을 내렸다.
그림 1: Fe 농도 사이의 선형 재발 FAAS와 빛 흡 광도 측정 (OD, 715 nm) 프러시안 블루 메서드에서 얻은. 파란색 사각형 및 선 Fe2 + 솔루션, 빨간 사각형 및 선 Fe3 + 솔루션 및 검은 사각형을 나타냅니다 나타내고 선 사이 Fe2 + Fe3 +1:1 혼합물을 나타냅니다. 다음 재발 얻어 졌다: [Fe2 +] 3 + 123 x OD = r = 0.996, R2 0.989; = [Fe3 +] 1 + 292 x OD = r = 0.999, R2 = 0.997; 그리고 [Fe2 + 3 +] 11 + 146 x OD = r = 0.983, R2 0.956 =. Fe2 + 기증자 FeCl2 이었고 Fe3 + 기증자 FeCl3했다. 이 그림의 더 큰 버전을 보려면 여기를 클릭 하십시오.
식물 조직의 철 정량 분석에 대 한 색도계 프러시안 블루 방법에 맞게, 담배 잎 재 철 콘텐츠 불꽃 흡수 원자 분광학 및 프러시안 파란 얼룩에 의해 측정 되었다. 두 가지 방법에 의해에서 결과 사이 좋은 상관 관계가 있었습니다.
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Protocol
1. 식물 재료와 성장 조건
- 씨앗 한 담배 (재배 삼 순) 씨 5 cm x 5 cm 냄비 당 표준 냄비 중간으로 가득합니다. 쟁반에 냄비를 놓습니다. 23 ° C의 일정 한 온도에서 긴 하루 조건 (16/8 h 명암) 성장 방에 식물을 성장 냄비에서 물 배수까지 수돗물 관개.
- 50±5 일 후, 관개, 실험에 대 한 적당 한 농도 따라에서 Fe 치료를 시작 합니다. 예를 들어 우리는 철 농도 0에서 6 m m, 성 철 chelator (Fe EDDHA)에 의해 보완의 범위를 사용. 관개는 적절 한 솔루션으로 식물 매 2 일 (탈수를 피하기 위해) 6-8 일.
2. 철 측정에 대 한 잎을 준비합니다.
참고: 모든 자료를 사용할 수 있어야 합니다 철 오염. 의 위험을 감소 시키기 위하여 철 무료 박격포와 유 봉 4 %HCl 솔루션과 두 번 청소 하 고 건조 한 종이 필터 사용 하기 전에 각 시간. 자료를 다시 사용 하는 경우 4 %HCl 솔루션과 두번 청소 하 고 건조 한 종이 필터.
- 분리는 줄기에서 잎, 장갑 (모든 금속 장비 사용 안 함)를 사용 하 여. 잎 (신선한 무게)의 약 10 g를 사용 하 여 각 샘플에 대 한. 두 배 증류수 (DDW) 스프레이 용기를 사용 하 여 함께 각 잎 청소. 이 단계는 Fe 오염을 방지 해야 합니다.
- 종이 타월에 잎을 건조 하 고 종이 가방에 넣어. 2-3 일 동안 80 ° C의 일정 한 온도에서 오븐에 종이 봉지를 전송.
- 건조 하면, 분말 박격포와 유 봉 및 살 균 15 mL 플라스틱 튜브에 사용 하 여 나뭇잎 호감.
3. 불타는 화산재를 잎
참고 사항: HCl의 (0)에 가까운 낮은 pH 해결책의 사용 철 용 해도 증가 의미입니다. 바위 모직 불타는 동안 유리병을 탈출에서 가스를 방지 하는 데 사용 됩니다.
- 새로운, 봉인 20 mL 섬광 유리병의 뚜껑 없이 무게. 값을 확인 하거나 자체 버튼을 사용 하 여 0 값으로 설정 합니다. 유리병에 짓 눌린된 말린된 잎 (샘플)을 추가 합니다.
- 그리고 샘플 및 컨테이너 무게 값. 바위 양모와 유리병을 닫습니다.
- 3 추가 튜브 샘플을 추가 하지 않고 무게 고 값을 확인 합니다. 이러한 튜브 샘플 무게 증가를 이끈 수 바위 모직의 양을 평가 하 컨트롤로 사용 됩니다.
- 샘플 및 제어 튜브로 놓고 다음 온도 단계를 사용 하 여 레코딩을 시작: 실 온, 4 시간 동안 425 ° C, 그리고 마지막으로, 425 ° C를 빠른 증가. 이 시간까지, 마른 나뭇잎 재를 설정 할 것입니다.
- 약 100 ° C까지 샘플 식만이 온도 습도 피하기 위해 다음 두 단계는 수 미치지 샘플의 최종 무게. 무거운 장갑을 사용 하 여, 핀셋, exteriorly 유리병을 들고와 보일 러에서 샘플 제거 합니다.
- 평평한 표면에 튜브를 배치, 바위 모직을 제거 하 고 그들의 원래 뚜껑 튜브를 닫습니다.
- (3.3 참조) 3 제어 튜브 무게 하 고 그들의 평균 체중 증가 계산. 체중 증가 이상 재 무게의 1% (단계 4.2 참조)이이 값을 사용 하 여 측정 오차의 견적으로.
4. 철 측정에 대 한 재 준비
참고: 초기 샘플에 최종 철 농도 HCl의 추가 볼륨 나눈 유골의 중량으로 계산 됩니다.
- 1 M HCl 해결책 준비 (4 %HCl) (플라스틱 또는 유리 플라스 크)에 DDW 87.5 mL을 37 %HCl 재고 솔루션의 12.5 mL을 추가 하 여.
- 15 mL 플라스틱 튜브 무게 값을 확인 하거나 자체 버튼을 사용 하 여 0 값으로 설정 합니다. 유골을 전송 튜브, 무게, 그리고 값. 이것은 재 무게 이다.
- 유골을 1 M HCl의 5 mL를 추가 합니다. 재 22 µ m 필터를 통해 필터링 하 고 동일한 필터를 통해 1 M HCl의 추가 5 mL를 추가 합니다.
- 마지막 볼륨 10 mL 이어야 한다입니다. 참고 필터에는 솔루션의 일부를 손실 됩니다.
참고: 샘플은 Fe 측정 FAAS 또는 프러시안 블루 방법에 대 한 준비. - Fe 농도 보정 곡선 원자 분 광 분석에 의해 측정 가능한 프러시안 블루 메서드에서 확인 ( 그림 4참조) 각 식물 종에 대 한. 그 후, 혼자 프러시안 블루 메서드에서 Fe 농도 측정할 수 있습니다.
5. FAAS에 의해 Fe 농도 측정
- FAAS 측정에 대 한 각 샘플에서 4 mL를 제거 합니다.
- 유골의 무게에 의해 FAAS 측정에서 얻은 결과 나눕니다. (유골은 10 mL에서 solubilized 했다) 때문에 0.01로 결과 값을 나눕니다. 결과 값 그램 재 (ppm) 당 철 분 농도 이다.
6. 준비 솔루션 얼룩 프러시안 블루
- 준비 4% K4Fe(CN)6 100ml DDW와 소용돌이의 4 g를 추가 하 여 프러시안 블루 솔루션 (다른 볼륨 또는 농도 사용할 수 있습니다 다양 한 요구에 대 한). 이 연구에 덜 집중 프러시안 블루 솔루션 보다 이전에 보고 된 (20%)14 사용을 주목 한다.
- 사용 될 때까지 4 ° C에서 어둠 속에서 솔루션 유지. 솔루션은 이러한 조건에서 저장 될 때 6 개월 동안 안정.
7. FAAS 결과 사용 하 여 프러시안 블루 방법에 대 한 교정 곡선을 생성 합니다.
참고: 다음 수식을 사용 하 여 재에서 철 분 농도 계산
공식 1
C: 농도, v: 샘플 볼륨, w: 재 중량 (g).
- 프러시안 블루 솔루션 및 0.50 mL의 1 M HCl 0.50 mL를 혼합. 이 빈 솔루션 될 것입니다.
- 샘플의 0.5 mL를 혼합 (재 4 %HCl에서, 섹션 3에에서 설명 된 대로) pipetting으로 프러시안 블루 솔루션 (단계 6.1)의 0.5 ml. 1 분 이상 하지만 5 분 이상 기다립니다. 5 분 후, 샘플에서 침전이 발생 합니다.
- 믹스는 베트 전송과 715에서 OD를 측정 nm는 분 광 광도 계를 사용 하 여. 값 note
- 샘플의 재 중량 (3.2 단계)에 의해 OD 값 (7.3 단계)를 나눕니다. 결과 그램 재 당 세를 나타냅니다.
- FAAS 측정 (Y 축)와 OD 값에서 얻은 철 농도 사이의 선형 회귀 플롯 (X 축). 5.2와 7.4 단계에서 얻은 결과 사용 합니다. 회귀 수식 Y 계산 = a + bX, Y 철 분 농도, 교차 하는 흡 광도 나타냅니다, b를 나타냅니다 흡 광도 슬로프를 나타내고 X는 OD.
8. 동일한 식물 종류에서 다른 샘플에 있는 철 수준을 결정 하기 위한 프러시안 블루 메서드를 사용 하
참고: 식물의이 유형에 대 한 교정 곡선 이미 설정 된 이후 같은 식물 종류에서 어떤 새로운 샘플에서 철 분 농도 계산할 수 있습니다 직접 선형 회귀 수식을 사용 하 여.
- 섹션 3, 4, 단계 7.1 7.4 다음 단계를 수행 합니다.
- 선형 회귀 (7.5 단계)에서 얻은 수식을 사용 하 여 솔루션에서 철 분 농도 계산 합니다.
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Representative Results
이 프로토콜은 제대로 실시는, 하나 우수한 상관관계 프러시안 블루와 원자 분광학 방법으로 얻은 결과 얻어야 한다. 따라서, 프러시안 블루 메서드를 사용할 수 있습니다 쉽게 식물 샘플에서 철 분 농도의 정확한 측정을 얻기 위해 다음과 같은 실험에 반영.
담배 식물은 프로토콜에 설명 된 대로 성장 하 고 다른 철 농도 포함 하는 물으로 관개 (0, 1, 2, 3, 4, 5, 또는 6 m m) 7 일 동안. 식물은 다음 수확, 청소 및 80 ° c.에 3 일 동안 건조 프로토콜의 다음 단계를 (즉, 단계 2.3에서에서) 설명한 대로 따라 했다. 제어 튜브 보여 재 무게에서 1% 미만의 변형, 이후이 값 추가 계산에 추가 되지 않았습니다.
FAAS 철 분 농도 측정 했다. 표 1 은 이러한 측정의 대표적인 결과 보여줍니다. 21 샘플 (3에서 7 농도 복제)에서 가져온 데이터는 보정 곡선을 생성 하기 위해 사용 되었다.
| 치료 (관개에 m m 철) | 공장 | HCl 솔루션 (ppm)에서 철 분 농도 |
| 0 | A | 7.1 |
| 1 | B | 16.6 |
| 2 | C | 23.4 |
| 3 | D | 31.2 |
| 4 | F | 47.4 |
| 5 | G | 50.7 |
| 6 | H | 41.6 |
표 1: 담배 재 솔루션에서 철 분 농도 다른 철 레벨을 포함 하는 물으로 관개 식물에서 출발 한다.
위에서 언급 한 21 샘플의 유골에서 철 분 농도 FAAS (7 단계에서 참고)에 의해 얻은 값을 사용 하 여 계산 됩니다. 결과 관개 물에 철 분 농도 크게 잎 철 내용 (그림 2) 영향을 보여주었다.
그림 2: 담배에 철 농도에 관개에 공급 하는 철의 효과 잎. 바 나타내는 표준 편차 (n = 3). 이 그림의 더 큰 버전을 보려면 여기를 클릭 하십시오.
예비 실험 (표시 되지 않음), Fe2 + 와 Fe3 + 의 다른 농도 포함 하는 솔루션의 흡 광도 스펙트럼 측정 및 최고의 피크 715에서 얻은 nm. 21 샘플의 모든 스펙트럼 또한 프러시안 블루 방법으로 시험 되었다. 그것은 715에서 그 흡 광도 취소 했다 nm는 최적의 파장 또한 여기서도 (그림 3). 따라서,이 파장은 모든 실험에 사용 되었다.
선형 회귀 곡선 FAAS 여 철 농도 값과 그림 3 (그림 4)에 표시 하는 샘플에 대 한 프러시안 블루 메서드를 사용 하 여 얻은 흡 광도 (OD) 값 사이 구성 되었다. 다음과 같은 회귀 얻은: [Fe] = 0.32 + 25.3 x OD, r = 0.994 및 R20.988 =.
그림 3: 담배 재 흡 광도 파장 스펙트럼 프러시안 블루 솔루션 프로토콜에 설명 된 대로 혼합. 파장 스펙트럼 화산재의 농도 의해 분할 되었다. 이 그림의 더 큰 버전을 보려면 여기를 클릭 하십시오.
그림 4: 담배 재에서 Fe 농도의 선형 재발 FAAS와 빛 흡 광도 측정 (OD, 715 nm) 프러시안 블루 메서드에서 얻은. 다음과 같은 회귀 얻은: [Fe] = 0.32 + 25.3 x OD, r = 0.994, R20.988 =. 이 그림의 더 큰 버전을 보려면 여기를 클릭 하십시오.
8 단계에서 설명한 대로 얻은 선형 회귀 이제 새로운 샘플 같은 식물 형식에서 사용할 수 있습니다.
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Discussion
식물 조직에서 철 측정 관개 또는 다른 환경 조건의 효과 평가 하기 위한 매우 중요 하다. 여기, 우리는 다른 종의 식물와 조직에 쉽게 적응 될 수 있는 담배 잎에 Fe 내용 측정을 위한 간단 하 고 정확한 색도계 방법 설명.
색도계 방법에 대 한 조건 최적화, 우리는 철 용 해도를 낮은 pH 매체 (pH < 1.0) 사용 있습니다. 레코딩 프로세스는 모든 형태의 철을 해제 하 고 아무 오염 물질 샘플에는 결과 수정할 것을 보장 하기 위해 수행 되었다. 철 오염, 하나 명심 해야 한다 지구의 지 각의 6.7% 산화 철 종 (FeOn)21 구성 및 그들의 농도 식물 건조 중량22의 0.009%를 도달할 수 있다에 대해서. 따라서, 하나으로 3-7% (지역)에 따라 철23, 크게 결과 영향을 미칠 수 있습니다 포함 될 수 있습니다 먼지부터 오염의 위험을 고려해 야 합니다. 그것도 신중 하 게 실험에 사용 된 모든 장비의 철 분 콘텐츠를 확인 하 고 오염을 피하기 위하여 모든 필요한 예방 조치를 필수적입니다. 공기와 접촉 했던 나는 실험 4 %HCl 솔루션에서 다시 사용 되는 모든 장비를 청소 하는 것이 좋습니다. 가 위 또는 숟가락 등의 금속 도구를 사용 하 여 피해 야 한다 완전히, 대신 유리 또는 플라스틱 버전에 의해 대체 되 고. 철 오염을 방지 하는 중요 한 단계 단계 3.1와 4.1, 예를 들어 강조 했다.
샘플에서 신호를 실패 프로토콜의 여러 단계에서 발생 하는 문제 때문에 발생할 수 있습니다. 이 인스턴스에 알려진된 철 농도와 솔루션에 대 한 시 약을 확인 하는 것이 좋습니다. 문제가 계속 되 면, 신선한 프러시안 블루 시 약을 준비 한다. 그러나 표준,, 신호를 표시 해야 합니다이 샘플에서 철 분 농도 검출 임계값 아래는 샘플 더 집중 해야 나타냅니다. 복제 중 큰 변화가 철 오염에서 줄기 수 고 새 샘플의 사용이 필요 합니다.
보정 곡선 6 개월 마다 생성 하거나 매번 새로운 프러시안 블루 시 약의 배치 사용 됩니다. 초기 교정 곡선 6 샘플에 철 분 함량을 측정 하 고 선형 회귀는 아직도 정확 하 게 확인 하 여 재유효화 해야 합니다. 보정 곡선에서 1 또는 r (상관 계수)-1와 R2 (결정 계수)24,,2526대 1에 가까운 값을 얻기 위해 필수적 이다. 완벽 한 라인, R2 값이 1 했 하는 동안 0.95 대부분 R2 값 보정 곡선에 대 한 허용 됩니다.
프로토콜의 한계는 사실 다른 식물 조직 및 종 철 농도 결심을 위한 설명 된 절차를 사용 하 여 다른 상관 관계 곡선을 표시 될 수 있습니다를 포함 합니다. 따라서 상관 관계 곡선 주어진된 실험에 대 한 정확한 지 확인 하는 파일럿 테스트를 수행 하는 것이 좋습니다. 얻은 결과 대 한 곡선을 사용 하 여 수식 Y에에서 새로 측정 된 OD 값을 대체 = a + bX. 현재의 경우에는 다음 수식을 사용 되었다: [Fe] = 0.32 + 25.3 x OD.
또 다른 한계는 오히려 많은 양의 식물 조직의 필요에서 발생합니다. 이 적절 한 신호를 얻을 수 있도록 (단계 5.3 참조) 유골을 분해 하는 데 사용 하는 HCl 볼륨 적응 하 여 어느 정도 피할 수 있습니다. 그럼에도 불구 하 고, 여기에 설명 하는 방법을 ICP-MS, 또는 FAAS에 준비 접근에 사용 되는 같은 비용이 많이 드는 장비를 사용할 수 있는 동일한 식물 종의 수많은 샘플 분석 하는 경우 좋은 옵션입니다.
철 탐지 시스템으로 프러시안 블루 메서드의 가능한 추가 응용 프로그램 재에 주어질 수 있는 어떤 유기 물질 뿐만 아니라 무기 질, 토양 등 양적 철 감지를 포함 합니다.
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Disclosures
저자는 공개 없다.
Acknowledgments
이 작품은 농업 (#16-16-0003)의 이스라엘 사역의 수석 과학자에서 교부 금에 의해 이스라엘 사역의 과학, 기술 및 Spaceand에 의해 지원 되었다.
Materials
| Name | Company | Catalog Number | Comments |
| Potassium Hexacyanoferrate(II) | Fisher Chemical | 14459-95-1 | Reagent for the Pussian Blue |
| Millex Syringe Filter Unit, Vial Vent 0.22 μm | Millec | SLGP033RS | Filter used to filter the ashes + 4% HCl Solution |
| Scintillation Vials | Fisherbrand | 03-337-4 | Used to keep the dry powdered plant material during the burning procedure. |
| Disposable Syringe 10 ml | Medi-Plus | 1931 | Syringe used during the filtration |
| Hydrochloric acid | Sigma-Aldrich | 231-595-7 | Used in the 4% HCl solution to dilute the ashes and clean the materials |
| Tobacco, Nicotiana tabacum cv. Samsun NN | Obtained from Prof. Simon Barak and routinely used in the Zaccai Lab | Barak S, Nejidat A, Heimer Y, Volokita M. Transcriptional and posttranscriptional regulation of the glycolate oxidase gene in tobacco seedlings. Plant Molecular Biology. 2001 Mar 1;45(4):399-407. | Tobacco cultivar used in this protocol |
| Glass Wool (Rock Wool) | Sigma-Aldrich | 659997-17-3 | Used in the procedure of burning samples in the furnace. |
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