Waiting
Login processing...

Trial ends in Request Full Access Tell Your Colleague About Jove
Click here for the English version

Medicine

Akut miyokard infarktüsünde farelerde gerçek zamanlı basınç-hacim Analizi

Published: July 2, 2018 doi: 10.3791/57621

Summary

Akut miyokard infarktüsünde farelerde sol ventrikül (LV) fonksiyonları akut ama eksik olarak karakterize değişimler neden olmaktadır. LV kateterizasyon koroner arter tıkanıklığı geçiren farelerde LV fonksiyonu gerçek zamanlı bir şekilde değerlendirilmesi için yeni bir yöntem olarak hizmet vermektedir.

Abstract

Akut miyokard infarktüsünde akut kalp yetmezliği ve kardiyojenik şok yol açabilir. Hemodinami değerlendirilmesi olası herhangi bir tedavi yaklaşımı akut sol ventrikül (LV) disfonksiyon karşı yönetmen değerlendirilmesi için önemlidir. Geçerli görüntüleme yöntemleri (Örn., ekokardiyografi ve manyetik rezonans görüntüleme) LV basınç verileri doğrudan ölçülen olamaz beri çeşitli kısıtlamalar bulunmaktadır. LV kateterizasyon koroner arter tıkanıklığı geçiren farelerde LV fonksiyonu gerçek zamanlı bir şekilde değerlendirilmesi için bir roman yöntemi olarak hizmet verebilir.

Yordamın başlangıcında, fareler tarafından endotrakeal entübasyon takip anestezi. LV kateterizasyon için şu karotid arter maruz yolu ile orta-boyun kesi yapıldı. Kateter tanıttı ve LV boşluğuna yerleştirilir. Sol torakotomi yapılmıştır ve sol ana koroner arter (LCA) tane. Reperfüzyon ikna etmek için dikiş 45 dk. basınç-hacim veri her zaman kaydedildi sonra piyasaya sürüldü.

LCA ligasyonu strok hacmi, LV ejeksiyon fraksiyonu (EF) ve kardiyak çıkış LV sistolik fonksiyonu olarak bir % 30 indirim kanıtladığı azalmasına neden oldu. LV contractility için bir parametre olarak en fazla dP/dt de önemli ölçüde azaltılmış ve diyastolik fonksiyonları ağır engelli (en az dP/dt-%40). Reperfüzyon 20 dk boyunca LV fonksiyonu tamamen iyileşmek için yol açmadı.

Gerçek zamanlı basınç-hacim analiz sırasında farelerde akut miyokard enfarktüsü kardiyak fonksiyon izlemek için geçerli bir yordam olarak görev yaptı. İstikrarlı anestezi ve standartlaştırılmış bir cerrahi yaklaşım geçerli sonuçlar sağlamak için çok önemli. Akut miyokard infarktüsünde erken aşaması morbidite ve mortalite için kritik olarak belirlendi yöntemi cardioprotection için yeni stratejiler preklinik değerlendirilmesi için yararlı olabilir.

Introduction

Kalp-damar hastalıkları ölüm Batı uygarlığının1en sık nedenidir. Akut miyokard infarktüsünde yüksek akut ve kronik ölüm2ile ilişkili önemli bir olaydır. Revaskülarizasyon elde üzerinden acil perkütan koroner girişim (PCI) olsa bile, ölüm oranı yüksek, özellikle hastalarda akut miyokard infarktüsünde3ile semptomlar başlangıcından sonra ilk 48 saat içinde kalır. Kardiyojenik şok akut sol ventrikül (LV) fonksiyonları azalma nedeniyle bu hastaların3' te hastane ölüm için önemli bir nedeni var. LV fonksiyonu erken bu azalma tarafından Miyokardiyal hasarın neden iskemi ve reperfüzyon takip. Bu sözde iskemi/reperfüzyon (ı / R) yaralanma gibi abartılı reaktif oksijen türleri4,5nesil hücresel metabolome değişikliklerden aracılı.

Preklinik bir ortamda Miyokardiyal hasarın azalmasına yol açan olası koruyucu mekanizmaları keşfetmek için güvenilir fare modelleri yazı-Ben/R LV fonksiyonu6değerlendirilmesi için yöntemleri de dahil olmak üzere gerekli olan. Bu ayar, transtorasik ekokardiyografi7 ve manyetik rezonans görüntüleme (MRG)6 fonksiyonel fenotipleme8,9için yaygın olarak kullanılır. Ancak, bu yöntemlerin şiddetli LV disfonksiyon ve devam eden akut miyokard infarktüsünde kardiyojenik şokta değerlendirilmesi için uygun değildir ve doğrudan veri LV basınç gösteremez. Temel pathomechanisms erken faz izole kalp bir ex vivo tahlil kullanarak Langendorff aparatı Kılavuzu ben / R yaralanma10. Bu yöntem vivo içinde özerk sinir sistemi veya hormonal düzenleme ve asit-baz homeostasis gibi uyarlamalı mekanizmaları çoğaltmak onun yetersizlik nedeniyle sınırlıdır. Kullanılabilir şu anda herhangi bir yöntem için bir tam işlevsel fenotipleme-kardiyojenik şok ve sol ventrikül fonksiyon bozukluğu sırasında devam eden bir miyokardiyal ben / R yaralanma.

Basınç-hacim (PV) kateterizasyon ve geçici cerrahi sol ana koroner arter (LCA) tıkanıklığı kombinasyonu ile eşitlenmiş bir yaklaşım faydalı ama teknik olarak zor olabilir. Ben sırasında istikrarlı extracardiac hemodinami / R yaralanma için geçerli sonuçlar temel kararsız anestezi veya kan kaybı ağır sonuçları etkileyebilir beri. Bir roman yaklaşım için ı hemodinamik fenotipleme / R yaralanma üzerinden LV PV kateterizasyon ve geçici LCA tıkanıklığı kardiyojenik şok ve akut miyokard infarktüsünde LV disfonksiyonu yeni anlayışlar getirmek ve ilerideki analizleri için bir yöntemi olarak hizmet cardioprotection.

Subscription Required. Please recommend JoVE to your librarian.

Protocol

Tüm deneyler uygun olarak ve tüm ilgili düzenlemeler ile uyum içinde tamamlanmıştır (' koruma, omurgalı deneysel ve diğer bilimsel amaçlar (yönergesi 2010/63/AB) ve hayvan bakımı için kullanılan hayvanlar için Avrupa Sözleşmesi yapıldı Kurumsal yönergelere uygun olarak. Tüm deneyler 6 ay yaşında erkek C57BL/6JRj fareler ile gerçekleştirilmiş.

1. hazırlık

  1. Cerrahi mikroskop ve ısıtma yastığını yanı sıra vücut sıcaklık izlemek için bir rektal sonda hazırlayın. Temiz ve tüm cerrahi aletler sterilize.
  2. 10 cm 2 adet 5-0 ipek iplik damar ligasyonu, 5 cm 6-0 polipropilen iplik ve 2 mm silikon tüp ligasyonu LCA için hazırlanın.
  3. PV kateter kalibrasyon küvet için 37 ° C ön ısıtma tarafından ve Hamilton şırınga H2O tuzlu kalibrasyon için % 15 sodyum klorür (NaCl) ile doldurulmuş bir 100 µL hazırlayın.
  4. 37 ° C'de yer PV kateter (3 cm, 1.4 F) önceden ısıtılmış % 0,9 NaCl (serum) H2O içinde en az 30 dk önce ölçüm. Kateter veri edinme cihaza bağlayın ve bir analog/sayısal dönüştürücü aygıtı bağlayın. Her iki cihaz bir bilgisayara bağlayın.
  5. Yazılımı kurar. Yazılım destekli basınç kalibrasyonu ve gürültülerinden kalibrasyon yazılım güdümlü iş akışı8tarafından talep gibi gerçekleştirin.

2. anestezi ve analjezi

  1. Ketamin 100 mg/kg vücut ağırlığı ve xylazine hidroklorür 10 mg/kg vücut ağırlığı mayi enjeksiyonu ile kullanarak fare anestezi. Ben başında / R cerrahi, 0,05 mg/kg vücut ağırlığı buprenorfin intraperitoneally analjezi sağlamak için yönetmek.
  2. 10 dk sonra bir 20 G intravenöz (IV) kateter kullanarak bir endotrakeal entübasyon gerçekleştirebilir ve fare ile % 40 oksijen (O2) ve (v) % 2 isoflurane havalandırın. Uygun havalandırma parametreleri (Örneğin, 220 µL kontur hacim, 150/dk 25-30 g C57BL/6JRj fare için) ayarlayın.
  3. Sürekli vücut sıcaklığı ile rektal sonda izlemek. Fare ısıtmalı plaka üzerinde araştırmacı doğru işaret kafa ile bağlayın. Fare normal vücut sıcaklığı 36,5-38 ° c. Vücut ısısını 1 derece içinde ateşli tabağı sıcaklık ayarı tarafından korumak.

3. sol ventrikül kateterizasyon

  1. Göğsündeki ve boynundaki üç alternatif scrubs betadin ve % 70 alkol ile dezenfekte edin.  Cilt dezenfektan kurumasını bekleyin. Göğüs kılları küçük hayvan tıraş sistemi kullanarak kaldırın.
  2. Bir 10 mm boyuna medyan kesi doğru küçük cerrahi makas kullanarak göğüs kemiğinin alt dudak altında 5 mm gerçekleştirin.
  3. Bir forseps kullanarak çene bezi yoluyla künt hazırlık sol ve sağ parçası incelemek. Ayrı kas ve yağ dokusu doğru komün şah damarı ortaya çıkarmak için sağ paratracheal bölgede. Seferber ve bükülmüş bir forseps ile bağ dokusu geminin yanında dikkatli künt hazırlık ile 5-10 mm toplam uzunluğu için gemi ayırmak.
    Not: Bu şiddetli hipotansiyon ve bradikardi neden olabilir vagus siniri veya karotis vücut Mekanik manipülasyonu her zaman önlemek.
  4. İki hazır ipek konu altında gemi geçmektedir. Sıkı bir düğüm ile distal gemi ligate ve gevşek bir düğüm hala kateter geçişini sağlar proksimal maruz kalan bölge koyun.
  5. Kafatası (sıkı) düğüm Bu kateterin giriş kolaylaştıracaktır gibi hafif bir gerginlik gemide uygulamak için farelerin şakağındaki konu saptamak. Bir hemostat damar kıskacı proksimal gemide proksimal geri dönülebilir olarak kan akışını engellemek için gevşek düğüm yerleştirin.
  6. Bir kama şeklinde kesi 1 mm mikro makasla gemi açmak için kafatası düğüm proksimal gerçekleştirin.
    Not: Küçük bir damla kan doğru bu adım yürütülmesini belirtir.
  7. Kateter dikkatli için 10 mm. başlangıç veri yazmak için kateter takın.
    Not: bir forseps ile belgili tanımlık kesme uzanan bu işlem daha kolay yapabilirsiniz.
  8. Damar kıskacı ayıklayın. 1-2 damla serum kateter hareketi kolaylaştırmak için kesi ekleyin. Yaklaşık bir 10 mm için kateter tanıtımı devam edin. Sensör ipucu ile proksimal düğüm geçtikten sonra düğüm dikkatle sadece tutturmak önlemek için yeterli kateter hareketi bozulması olmadan reflü kateterin daha ince parçalar yanında kan.
    Not: Kateter ucu algılayıcısına boyutunu reflü kan damar kıskacı ayıklanan önler.
  9. Yavaşça katater aort (Şekil 3A) yerleştirilir profil arteryel kan basıncı gösteren basınç analizi gösteriyor kadar kateter ekleyerek devam edin.
    Not: aort kapak ulaşan kateter hafif direnç ve nabız senkronize hareket kateterin tarafından belirtilir.
  10. Aort kapak ilerlemeye çalışıyor direnci yaşandığı zaman, çekme kateter tekrar 5 mm ve önceden diastolik basınç 0 - ulaştığı LV kateterizasyon PV analiz bir değişikliğe belirtilir kadar 20 mmHg (Şekil 3B). Daha fazla sensör ucu (Şekil 3 c) sol ventrikül yerleşimini onaylamak için izleme birimindeki değişiklikleri unutmayın. Proksimal düğüm kateter hareket önlemek için daha sıkı bağla.

4. iskemi/reperfüzyon cerrahi

  1. Kaburga görüntülenir kadar cilt kesi sol koltuk altı toplam uzunluğu, 15 mm. devam et iki kas tabakaları künt hazırlanması için doğru kaudal göğüs kemiği gerçekleştirmek.
  2. Kesik göğüs üzerinden üçüncü ve dördüncü sol kaburga arasında açın. Kalp zarını erişmek için cerrahi kanca kullanın. Kalp zarını kalp yukarıda çıkarabileceğim. LCA ligasyonu, geçerli analiz için hayvan kayıt PV verilere dokunmadan bekle 30 s ile devam etmeden önce.
  3. Sol auricle altında ortaya çıkan ve kalp tepe doğru sol tarafındaki azalan LCA yerelleştirilmesine. 6-0 polipropilen sütür arter bir döngü sol auricle altında 2 mm ile sarmak için kullanın. Bir küçük silikon tüp döngü altında yerleştirin ve sıkı bir düğüm yukarıdaki yerleştirin.
    Not: Distal Miyokardiyum dönüm gri LCA tıkanıklığı6için pozitif kontrol olarak hizmet vermektedir. Ben / R cerrahi bağımsız olarak çalışma araştırmacı üzerinden 5 dk içinde gerçekleştirilmesi.
  4. Dikişi 1 mm uzunlukta kesin. Cerrahi kanca yayın ve kas tabakaları yukarıda belgili tanımlık kesme el ile kapatın. 45 dk sürekli PV veri kaydederken bekleyin.
  5. 45 dakika sonra kesi yeniden açın ve reperfüzyon ikna etmek için silikon tüp kaldırın. Kayıt verilerini başka bir 20 dakika.
    Not: Başarılı reperfüzyon olarak görülen iskemi önce kırmızı bir renk bir değişiklik gösterir.

5. Kalibrasyon

Not: PV kateter sistemi kalibrasyon ikisi sonra ölçüm yapılması gerek 4 zorunlu adımlardan oluşur. Kalibrasyon geçerli sonuçlar sağlamak için her deneyden sonra tekrarlanmalıdır.

  1. Basınç Kalibrasyonu ve gürültülerinden kalibrasyon adım 1,5 açıklandığı gibi deneme önce gerçekleştirin.
  2. Serum fizyolojik kalibrasyon deney tamamlandıktan sonra kateter sol ventrikül hala yerleştirildiğinde gerçekleştirin. Hazırlanan bölgede karotid arter sağ juguler ven lateral yerelleştirilmesine. 10 enjekte µL % 25 NaCl içinde H2O yolu ile bir Hamilton şırınga kayıt veri.
  3. Kalibrasyon birim eğrisi (Şekil 5C) artan aşamasında vurgulayarak edinme yazılımını kullanarak hesaplayın. Bu adımları toplam 3 kez tekrarlayın. Kan kaybı şırınga çıkarma sonra hızla ponksiyon sıkıştırmak için bir damar kıskacı kullanılarak kaçının.
  4. Hacim kalibrasyon göre Standart birimlerin analiz birimi veri toplama ayarlamak için gerçekleştirin. Yaklaşık 500 µL fare kan kalp ponksiyon (Örneğin, 200 IE heparin başına 5 µL) biraz heparinized 1 mL şırınga ile elde edilir. Geri çek PV kateter kateter zarar görmesini önlemek için 10-15 mm.
  5. Elde edilen kan 37 ° C önceden ısıtılmış kalibrasyon küvet (Şekil 5A) doldurun. Olarak sonuçları ile engelleyebilir kabarcıklar kaçının. Kateter ucu her iyi ve kayıt veri ekleyin. Standart eğriye göre analiz yazılım destekli (Şekil 5B) edinin. Toplam 3 kez tekrarlayın.
  6. Yeterli isoflurane anestezi her zaman korunur iken kan kaybı veya servikal çıkması tarafından fareler ötenazi.

6. veri analizi

  1. Kalibrasyon adımları tamamladıktan sonra yazılım destekli veri çözümlemesi gerçekleştirin. Bu nedenle, PV iş akışı analiz bölüm içinde uygun bölüme (en az on döngüleri) vurgulayın ve temel çözümlemesi gerçekleştirin. Havalandırma veya işleme nedeniyle sapmalar ile devir gerekirse hariç (şekil 3D).
  2. PV temel analiz (arteriyel basınç sadece), aort kapak geçirilmesi önce hemen önce ve sonra LCA tıkanıklığı gerçekleştirin. PV temel analiz yapma ve 5 dk. süre iskemi ve reperfüzyon sonrası aralıklarla devam edin. Deney sonunda, geri sol ventrikül (arteriyel basınç) üzerinden kateterin çekilmesi sonra basınç veri çözümlemesi gerçekleştirin.
  3. Örnekleme hatayı önlemek için en az 10 ardışık çevrimleri analiz. Ne zaman güçlü girişim yaşandığı elde edilen değerler havalandırma, havalandırma için en fazla 5 geçici kesinti ile s kabul edilebilir.
  4. Temel analiz (LV fonksiyonu karakterize etmek içinşekil 3D) hesaplanır aşağıdaki parametreleri kullanın:
    1. Kontur birim (µL)
    2. Ejeksiyon fraksiyonu: inme birim / end-diastolik hacim (%)
    3. Kardiyak çıkış: inme cilt * kalp hızı (µL/dk)
    4. Kardiyak Dizin: kardiyak çıkış / vücut yüzey alanı (µL/(min*cm²)
    5. İnme iş: iç alan PV eğrisinin (mmHg * µL)
    6. Maksimum basınç (değerleri); Ortalama basınç (Pmean)
    7. Max dP/dt (mmHg/s) LV sistolik fonksiyonunun parametre olarak
    8. Min dP/dt (mmHg/s) LV uyum için bir parametre olarak
    9. Saat sabit isovolumetric gevşeme: Tau (ms)

Subscription Required. Please recommend JoVE to your librarian.

Representative Results

LV kateterizasyon sonra tersinir LCA ligasyonu 45 dakika reperfüzyon 10 min tarafından takip yapıldı. PV veri hiç (Şekil 1) kaydedildi.

PV kateter doğru yerleşimini karakteristik LV PV grafik (Şekil 2A) elde ederek teyit edildi. LV kateter yerleştirme gösterdi tipik ventrikül basınç aralığı en az 0 - 20 mmHg ise yanlış yerleştirme PV-katater aort içinde 30-60 mmHg (diyastolik kan basıncı en az bir baskısı ile tipik arteriyel basınç eğrisi gösterirdim ) ve kapanış (Şekil 3B ve 3 C) aort kapak gösteren sistol sonunda küçük bir gezi. LCA başarılı tıkanıklığı görsel olarak distal LV Miyokardiyum (Şekil 2B) sarararak tarafından doğrulandı.

LCA tıkanıklığı sonra 5 dk aralıklarla PV veri satın alınmıştır. Basınç veri analizi en yüksek LV sistolik basınç korunmuş periferik perfüzyon ve istikrarlı anestezi (4A rakam) gösteren hiçbir değişiklik gösterdi. LV cilt analizi ortaya her iki EF önemli bir azalma (% 52 vs. % 40, p 0.008 =) ve mutlak kontur hacim (Şekil 4B ve 4 C). İskemi ve LV işlevsel veri iskemi daha sonraki aşamada değişmemiştir erken faz içinde bu değişiklikler oldu. LV contractility parametre olarak en fazla dP/dt miyokardiyal iskemi geçiren farelerde % 30 azalma gösterdi. Kontur iş azaltılmış % 30 (Şekil 4 d ve 4E) yapıldı. Diyastolik işlev için parametre olarak, en az dP/dt önemli ölçüde Engelli LV uyum (Şekil 4F) gösteren azalma. Reperfüzyon silikon tüp çıkarma tarafından görsel olarak doğrulandı. Reperfüzyon önemli değişiklikler 20 dk (Şekil 4A-4D) bir süre içinde PV veri analizi belli etmedi. Sham işletilen hayvan değil göstermek did belirgin bir şekilde azaltılmasına LV sistolik veya diyastolik parametreleri (Şekil 4I-4J).

Veri toplama sonunda, küvet kalibrasyon ve serum fizyolojik kalibrasyon yapıldı (Şekil 5).

Figure 1
Şekil 1: düzeni yöntemi. Sol ventrikül (LV) kateterizasyon, sol ana koroner arter (LCA) tıkanıklığı ve reperfüzyon dizisi.

Figure 2
Şekil 2: cerrahi işlemler. (A)sol ventrikül kateterizasyon üzerinden şu ortak karotid arter yerleştirilir. (B) sol ana koroner arter oklüzyonu ile polipropilen sütür ve silikon tüp. Bu rakam daha büyük bir versiyonunu görüntülemek için buraya tıklayınız.

Figure 3
Şekil 3: temsilcisi basınç-hacim veri. (A)temsilcisi arteriyel basınç belirtilen en az bir baskısı tarafından > 30 mmHg ve aort kapak kapanış gösteren sistol sonunda tipik bir gezi. (B) temsilcisi sol ventrikül basıncı veri gösteren diyastolik değerleri < 20 mmHg. (C) temsilcisi sol ventrikül basınç-hacim diyagramı. (D) Screenshot-in bilgisayar yazılımı-esaslı PV temel analiz. Bu rakam daha büyük bir versiyonunu görüntülemek için buraya tıklayınız.

Figure 4
Şekil 4: basınç/hacim veri farelerde iskemi/reperfüzyon geçiyor. (A)sistolik ventrikül kan basıncı (değerleri) için yorum yaptı. (B) sol ventrikül (LV) ejeksiyon fraksiyonu (EF) (%). (C) LV kontur birimi (µL). (D) en fazla dP/dT (max dP/dt) (mmHg/s). (E) LV kontur çalışma (SW). (F) en az dP/dt (min dP/dt) (mmHg/s). (G) zaman sabit isovolumetric gevşeme Tau (ms). (H) basınç/hacim önce ve sonra indüksiyon 45 dk miyokardiyal iskemi diyagramını oluşturun. (I-J) Zamanlı birim (SV) (µL) ve maksimum dP/dt (max dP/dt) (mmHg/s) 15/30 dakika iskemi sonra hayvanlara göre sahte işletilen hayvanlarda. Ortalama ± SEM sunulan verilerin (A-G) * p < öğrencinin 0,05 ile t-testi ya da t-testi, n oranı eşleştirilmiş 4 fareler/grup (A + D-G) =) ya da n = 3 fare/grup (B, C). + 45: 45 dk iskemi; rep: reperfüzyon. Bu rakam daha büyük bir versiyonunu görüntülemek için buraya tıklayınız.

Figure 5
Şekil 5: Post-hoc kalibrasyon. Kalibrasyon küvet(a)şeması. Cilt küvet kalibrasyon gerçekleştirmek için elde edilen birim veri temsili doğrusal regresyon çözümlemesi µL. (B) olarak. (C) temsilcisi birim veri 10 µL % 25 sodyum klorür H2O Enjeksiyon tuzlu kalibrasyon gerçekleştirmek için sağ juguler ven içine sonra. Bu rakam daha büyük bir versiyonunu görüntülemek için buraya tıklayınız.

Subscription Required. Please recommend JoVE to your librarian.

Discussion

Kardiyojenik şok ve ben Engelli LV fonksiyonu gerçek zamanlı vivo değerlendirilmesi için yeni bir yöntem olarak hizmet veren akut miyokard infarktüsünde LV hemodinami PV izlenmesi / R yaralanma. PV kateterizasyon parametreleri LV sistolik ve diyastolik fonksiyon ile ilgili geniş bir yelpazede sağlayabilir. LV hacimsel parametrelerin yanında genellikle ekokardiyografi veya MRI (odası birimler, EF, kontur birim ve kardiyak çıkış) tarafından elde edilen, PV analiz LV fonksiyonu daha tam bir yandan görünüş aynı anda LV sistolik tedbirlerinin sağlayarak verimleri performans (contractility dP/dt, kontur çalışması) ve LV uyumluluk (-dP/dt, Tau) Diyastolik işlev için parametre olarak.

Akut kalp yetersizlikli hastalarda akut miyokard infarktüsünde erken hastane morbidite ve mortalite2için kritik bir tahmin olarak, akut hemodinamik bozulma ve akut miyokard infarktüsünde kardiyojenik şokta izleme olarak hizmet verebilir deneysel bir ortamda mümkün koruyucu mekanizmaları tanımlamak için değerli bir araç.

Çeşitli faktörler başarılı veri toplama için kritik olduğu ortaya çıktı. Basınç, LV EF ve kontur hacim güçlü cardiodepressive etkisi ile damla İsoflurane geldiğinden beri istikrarlı anestezi geçerli PV veri için çok önemli. Atravmatik hazırlık karotid arter Hipovclemi kan kaybı nedeniyle önlemek önemliydi. Ayrıca, sıkıştırma veya yaralanma vagus siniri ve karotis beden hemodinami ciddi bozulma neden olabilir.

Serum fizyolojik kalibrasyon ve küvet kalibrasyon geçerli veri korumak için başka bir önemli adım olduğu ortaya çıktı. Serum fizyolojik kalibrasyon için % 15 NaCl çözüm enjeksiyon artan gürültülerinden ses seviyesini (Şekil 5C) geçici bir artış ile gösterilen yol açtı. Aynı hızda enjekte koruma kararlı veriler için çok önemli. Küvet kalibrasyon iletken zaman kabarcıklar içinde geçerli sonuçlar sağlamak için cuvettes önlemek önemliydi.

Veri yalnız önemli belli etmedi basınç deney (4A rakam boyunca değişir bu yana elde edilen PV veri ayrıca basınç ve hacim veri geçerli bir hemodinamik karakterizasyonu için eşzamanlı bir edinimi önemini belirtin ). LV contractility (dP/dt) ve LV gevşeme için parametreleri yanı sıra her iki temel parametre LV sistolik fonksiyonu (Örneğin, ejeksiyon fraksiyonu) için kombine PV analiz sunulan (-dP/dt, Tau).

İlginçtir, LCA hastalarda akut tıkanıklığı genellikle ciddi bir açığı LV fonksiyonu mekanik hemodinamik destek için hemen zorunluluk neden olur ve bir yüksek ölüm oranı11,12ile ilişkilidir. LCA tıkanıklığı farelerde daha az hemodinamik bozulma gösterdi ve LCA tıkanıklığı ilişkili ölüm işlemi sırasında değil gözlenmiştir. Oturumlarýnda kalýcý olan Hemodinamik stabilite iskemi sırasında bir işareti olarak, tüm zaman (Şekil 4A) LV sistolik kan basıncı istikrarlı. Ancak, bu etkinin farelerde LCA occlusions insanlarda kıyasla daha distal d nedeni olabilir.

Birlikte, gerçek zamanlı alınan hemodinamik akut miyokard infarktüsünde farelerde izlenmesi kardiyoprotektif mekanizmalar akut geçiren hastaların erken aşama tedavisi geliştirmek amaçlayan ciddi LV disfonksiyon eğitim için yeni bir yöntem olarak hizmet verebilir miyokard infarktüsü.

Subscription Required. Please recommend JoVE to your librarian.

Disclosures

Yazarlar ifşa gerek yok.

Acknowledgments

Yazarlar aşağıdaki finansman kaynakları kabul: başka Kröner-Fresenius-Stiftung (Tienush Rassaf); Hans und Gertie Fischer Stiftung (Tienush Rassaf), hibe Tıp Fakültesi, üniversite Duisburg-Essen, Almanya (Tienush Rassaf, Lars Michel); Ernst-und Berta Grimmke-Stiftung (Christos Rammos).

Materials

Name Company Catalog Number Comments
Betaisodona Loesung Mundipharma 4162-1606/89x30mm Povidon-Iod
Calibration cuvette Millar instruments 910-1049 Calibration cuvette
Contura professional hair trimmer Wella HS-60 Small animal shaving system
Eclipse Needle 27G BD REF 305770 27G needle
Forceps FST 11203-25, 11069-08, 11616-15, 11506-12, 11051-10 Surgical forceps
Forceps Aesculap Braun BN731R, BD 311R Surgical forceps
Foris FS2434 Eizo 0FTD2033 Monitor
Hamilton Syringe 100 µl needle Hamilton 80621 100µl syringe with needle
Heated Small animal OP table Harvard Apparatus 15001 Heated OP table
Heparin-Natrium 25000 Ratiopharm N68542.04 Heparin
Ketamin 10% 100 mg/ml bela-pharm FS1670041 Ketamin
Labchart Pro 8 + Pro modules AD Instruments MLS260/8 PV data analysis software
LAS EZ Leica LAS EZ Microscope camera software
Leica IC80 HD Leica IC80 HD Microscope camera
Leica M80 Leica M80 Microscope
Micro-tip catheter transducer Millar instruments SPR-839 PV catheter
MiniVent Harvard Apparatus 845 ventilation
MPVS Ultra Millar instruments PL3508B48/M PV catheter data acquisition device
Octenisept Schülke 20000832-A disinfectant
Plastipak 1ml PD REF 303172 1ml syringe
PowerLab 8/35 AD Instruments PL3508 analog/digital converter
Prolene 6-0 Ethicon XNEH7814.P31 Polypropylene suture
Retraction Kit FST 18200-20 retraction of surgical situs
Seraflex 5-0 Naila IC108000 silk suture
Small and micro-scissors FST Essen 14059-11, 15007-08, 14064-11 Surgical scissors
Small silicon tube Reichelt Chemietechnik tube for LCA occlusion
Sodium Chloride Sigma-Aldrich S7653 Sodium Chloride
testo 108 testo 5631080 rectal thermometer
Thinkcentre desktop computer Lenovo PC0EJS2V Computer
Vasofix Safety 20G Braun 4269110S-01 intubation catheter
Windows 10 Microsoft KW9-00240 Operating system
Xylazin 2% Ceva 6324464.00.00 Xylazine hydrochloride

DOWNLOAD MATERIALS LIST

References

  1. Sanchis-Gomar, F., Perez-Quilis, C., Leischik, R., Lucia, A. Epidemiology of coronary heart disease and acute coronary syndrome. Annals of Translational Medicine. 4 (13), 256 (2016).
  2. Anderson, J. L., Morrow, D. A. Acute Myocardial Infarction. New England Journal of Medicine. 376 (21), 2053-2064 (2017).
  3. McNamara, R. L., et al. Predicting in-hospital mortality in patients with acute myocardial infarction. Journal of the American College of Cardiology. 68 (6), 626-635 (2016).
  4. Kurian, G. A., Rajagopal, R., Vedantham, S., Rajesh, M. The Role of Oxidative Stress in Myocardial Ischemia and Reperfusion Injury and Remodeling: Revisited. Oxidative Medicine and Cellular Longevity. , (2016).
  5. Turer, A. T., Hill, J. A. Pathogenesis of myocardial ischemia-reperfusion injury and rationale for therapy. American Journal of Cardiology. 106 (3), 360-368 (2010).
  6. Totzeck, M., Hendgen-Cotta, U. B., French, B. A., Rassaf, T. A practical approach to remote ischemic preconditioning and ischemic preconditioning against myocardial ischemia/reperfusion injury. Journal of Biological Methods. 3 (4), (2016).
  7. Respress, J. L., Wehrens, X. H. Transthoracic echocardiography in mice. Journal of Visualized Experiments. (39), (2010).
  8. Pacher, P., Nagayama, T., Mukhopadhyay, P., Batkai, S., Kass, D. A. Measurement of cardiac function using pressure-volume conductance catheter technique in mice and rats. Nature Protocols. 3 (9), 1422-1434 (2008).
  9. Zhang, B., Davis, J. P., Ziolo, M. T. Cardiac catheterization in mice to measure the pressure volume relationship: Investigating the Bowditch effect. Journal of Visualized Experiments. (100), e52618 (2015).
  10. Rossello, X., Hall, A. R., Bell, R. M., Yellon, D. M. Characterization of the Langendorff perfused isolated mouse heart model of global ischemia-reperfusion injury: Impact of ischemia and reperfusion length on infarct size and LDH release. Journal of Cardiovascular Pharmacology and Therapeutics. 21 (3), 286-295 (2016).
  11. Task Force on the management of ST-segment elevation acute myocardial infarction of the European Society of Cardiology (ESC). ESC Guidelines for the management of acute myocardial infarction in patients presenting with ST-segment elevation. European Heart Journal. 33 (20), 2569-2619 (2012).
  12. Shigemitsu, O., et al. Acute myocardial infarction due to left main coronary artery occlusion. Therapeutic strategy. Japanese Journal of Thoracic and Cardiovascular Surgery. 50 (4), 146-151 (2002).

Tags

Tıp sayı: 137 iskemi/reperfüzyon hasarı (ı / R yaralanma) miyokard infarktüsünde ventriküler kateterizasyon PV-kateter sol sol ventrikül fonksiyonları hemodinamik
Akut miyokard infarktüsünde farelerde gerçek zamanlı basınç-hacim Analizi
Play Video
PDF DOI DOWNLOAD MATERIALS LIST

Cite this Article

Michel, L., Stock, P., Rammos, C.,More

Michel, L., Stock, P., Rammos, C., Totzeck, M., Rassaf, T., Hendgen-Cotta, U. B. Real-time Pressure-volume Analysis of Acute Myocardial Infarction in Mice. J. Vis. Exp. (137), e57621, doi:10.3791/57621 (2018).

Less
Copy Citation Download Citation Reprints and Permissions
View Video

Get cutting-edge science videos from JoVE sent straight to your inbox every month.

Waiting X
Simple Hit Counter