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ओलिक एसिड-तीव्र श्वसन संकट सिंड्रोम के लिए एक मॉडल के रूप में सूअरों में इंजेक्शन

Published: October 26, 2018 doi: 10.3791/57783
Automatic Translation
1, 1, 1, 1, 1, 1, 1
1Department of Anesthesiology, University Medical Center of the Johannes Gutenberg-University

Summary

इस अनुच्छेद में, हम ओलिक एसिड की केंद्रीय शिरापरक इंजेक्शन द्वारा सूअरों में तीव्र फेफड़ों की चोट पैदा करने के लिए एक प्रोटोकॉल मौजूद । यह तीव्र श्वसन संकट सिंड्रोम (ARDS) का अध्ययन करने के लिए एक स्थापित पशु मॉडल है ।

Abstract

तीव्र श्वसन संकट सिंड्रोम २.२% और गहन चिकित्सा इकाई के रोगियों के 19% के बीच एक घटना के साथ एक प्रासंगिक गहन देखभाल रोग है । पिछले दशकों में उपचार अग्रिमों के बावजूद, ARDS रोगियों को अभी भी ३५ और ४०% के बीच मृत्यु दर पीड़ित हैं । ARDS से पीड़ित रोगियों के परिणाम में सुधार करने के लिए अब भी आगे अनुसंधान की आवश्यकता है । एक समस्या यह है कि कोई भी पशु मॉडल तीव्र श्वसन संकट सिंड्रोम के जटिल pathomechanism नकल कर सकते हैं, लेकिन कई मॉडलों के विभिंन भागों का अध्ययन करने के लिए मौजूद हैं । ओलिक एसिड इंजेक्शन (OAI)-प्रेरित फेफड़ों की चोट के अध्ययन के लिए एक अच्छी तरह से स्थापित मॉडल है वेंटिलेशन रणनीतियों, फेफड़ों के यांत्रिकी और पशुओं में वेंटिलेशन/छिड़काव वितरण । OAI गंभीर रूप से बिगड़ा गैस विनिमय, फेफड़ों यांत्रिकी की गिरावट और alveolo-केशिका बाधा के विघटन की ओर जाता है । इस मॉडल का नुकसान इस मॉडल के विवादास्पद यंत्रवत प्रासंगिकता और केंद्रीय शिरापरक उपयोग के लिए आवश्यकता है, जो विशेष रूप से छोटे जानवर मॉडल में चुनौती दे रहा है । संक्षेप में, OAI-प्रेरित फेफड़ों की चोट छोटे और बड़े जानवरों में reproducible परिणाम की ओर जाता है और इसलिए ARDS अध्ययन के लिए एक अच्छी तरह से अनुकूल मॉडल का प्रतिनिधित्व करता है । फिर भी, आगे अनुसंधान के लिए एक मॉडल है कि ARDS के सभी भागों नकल और विभिंन आज मौजूदा मॉडलों के साथ जुड़े समस्याओं का अभाव है खोजने के लिए आवश्यक है ।

Introduction

तीव्र श्वसन संकट सिंड्रोम (ARDS) एक गहन देखभाल सिंड्रोम है कि बड़े पैमाने पर ५० साल पहले के बारे में अपनी पहली विवरण के बाद से अध्ययन किया गया है1। अनुसंधान के इस शरीर pathophysiology की एक बेहतर समझ के लिए नेतृत्व किया और सुधार रोगी देखभाल और2परिणाम,3में जिसके परिणामस्वरूप ARDS के विकास का कारण बनता है । फिर भी, ARDS से पीड़ित रोगियों में मृत्यु दर के बारे में 35-40%4,5,6के साथ बहुत अधिक रहता है । तथ्य यह है कि आईसीयू प्रवेश के बारे में 10% और आईसीयू रोगियों जो यांत्रिक वेंटिलेशन की आवश्यकता के 23% ARDS के कारण है इस क्षेत्र में आगे अनुसंधान के लिए प्रासंगिकता रेखांकित करता है ।

पशु मॉडल व्यापक रूप से pathophysiologic परिवर्तन और रोगों के विभिंन प्रकार के लिए संभावित उपचार रूपरेखा की जांच करने के लिए अनुसंधान में प्रयोग किया जाता है । ARDS की जटिलता के कारण, इस रोग की नकल करने के लिए कोई एक पशु मॉडल है, लेकिन अलग अलग पहलुओं का प्रतिनिधित्व7. एक अच्छी तरह से स्थापित मॉडल ओलिक एसिड इंजेक्शन (OAI)-प्रेरित फेफड़ों की चोट है । इस मॉडल चूहों8, चूहों9, सूअरों10, कुत्तों11, और भेड़12सहित जानवरों की एक विस्तृत सरणी में इस्तेमाल किया गया है । ओलिक एसिड एक संतृप्त फैटी एसिड और स्वस्थ मनुष्य13के शरीर में सबसे आम फैटी एसिड होता है । यह मानव प्लाज्मा, कोशिका झिल्ली, और वसा ऊतक13में मौजूद है । शारीरिक, यह एल्ब्युमिन के लिए बाध्य है, जबकि यह खून13के माध्यम से किया जाता है । रक्त प्रवाह में फैटी एसिड के स्तर में वृद्धि विभिन्न विकृतियों और कुछ रोगों की गंभीरता के साथ जुड़े रहे हैं सीरम फैटी एसिड का स्तर13के साथ संबद्ध । ओलिक एसिड ARDS-मॉडल एक को पुन: पेश करने के प्रयास में विकसित किया गया था ARDS लिपिड आवेश की वजह से ट्रामा रोगियों में देखा14. ओलिक एसिड13 फेफड़ों में जन्मजात प्रतिरक्षा रिसेप्टर्स पर प्रत्यक्ष प्रभाव पड़ता है और न्युट्रोफिल संचय15ट्रिगर, भड़काऊ मध्यस्थ उत्पादन16, और कोशिका मृत्यु13. शारीरिक रूप से, ओलिक एसिड तेजी से hypoxemia प्रगति, फेफड़े के धमनी का दबाव और extravascular फेफड़ों के पानी के संचय में वृद्धि लाती है । इसके अलावा, यह धमनी और रोधगलन7अवसाद लाती है । इस मॉडल के नुकसान केंद्रीय शिरापरक उपयोग, संदिग्ध यंत्रवत प्रासंगिकता और तेजी से hypoxemia और हृदय अवसाद की वजह से संभावित घातक प्रगति के लिए आवश्यकता है । अन्य मॉडलों की तुलना में इस मॉडल का लाभ छोटे और बड़े जानवरों में प्रयोज्य है, ARDS में pathophysiological तंत्र की मान्य reproducibility, ओलिक एसिड के इंजेक्शन के बाद ARDS की तीव्र शुरुआत, और अलग से अध्ययन करने की संभावना ARDS कई अंय पूति मॉडल7में की तरह प्रणालीगत सूजन के बिना । निंनलिखित लेख में, हम सूअरों में ओलिक एसिड प्रेरित फेफड़ों की चोट का एक विस्तृत विवरण दे और प्रतिनिधि डेटा प्रदान करने के लिए फेफड़ों समारोह में समझौते की स्थिरता की विशेषता । OAI-प्रेरित फेफड़ों की चोट के लिए अलग प्रोटोकॉल हैं । यहां प्रदान की गई प्रोटोकॉल मज़बूती से तीव्र फेफड़ों की चोट प्रेरित करने में सक्षम है ।

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Protocol

यहां वर्णित सभी पशु प्रयोगों को संस्थागत और राज्य पशु देखभाल समिति (Landesuntersuchungsamt Rheinland-Pfalz, Koblenz, जर्मनी; अनुमोदन संख्या G14-1-077) द्वारा अनुमोदित कर दिया गया है और इस दिशा में किए गए निर्देशों के अनुसार प्रयोगशाला पशु विज्ञान के यूरोपीय और जर्मन समाज । प्रयोगों में आयोजित किए गए anesthetized पुरुष सूअरों (sus scrofa domestica) की 2-3 माह की आयु, वजनी 27-29 किग्रा.

1. संज्ञाहरण, इंटुबैषेण और यांत्रिक वेंटिलेशन

  1. संज्ञाहरण से पहले 6 घंटे के लिए खाद्य रोक आकांक्षा के जोखिम को कम करने के लिए, लेकिन पानी के लिए मुफ्त का उपयोग करने की अनुमति तनाव को कम ।
  2. बेहोशी के लिए, Ketamine का एक संयोजन (4 मिलीग्राम किलो-1) और Azaperone (8 मिलीग्राम किलो-1) गर्दन या इंट्रामस्क्युलर इंजेक्शन (20 ग्राम) के लिए एक सुई के साथ सुअर के gluteal मांसपेशी में इंजेक्शन जबकि पशु पशु बॉक्स में है ।
    चेतावनी: उपयोग दस्ताने जब जानवर के साथ काम कर रहे ।
  3. शराब के साथ स्थानीय संक्रमण के बाद एक कान की नस में परिधीय नस कैथेटर (20 ग्राम) डालें ।
  4. सुई fentanyl (4 µ जी किग्रा-1), propofol (3 मिलीग्राम किग्रा-1) और atracurium (०.५ मिलीग्राम किग्रा-1) नसों में संज्ञाहरण के प्रेरण के लिए ।
  5. जब सुअर सांस लेना बंद कर देता है, यह स्ट्रेचर पर लापरवाह स्थिति में जगह और यह पट्टियों के साथ स्थिर ।
  6. एक कान या जानवर की पूंछ पर सेंसर कतरन द्वारा परिधीय ऑक्सीजन संतृप्ति (एसपीओ2) की निगरानी शुरू करो ।
  7. सुअर वेंटिलेशन के लिए एक मुखौटा के साथ कुत्तों, आकार 2, एक चोटी के नीचे inspiratory दबाव के साथ हवादार 20 सेमी एच2ओ, 5 सेमी एच2ओ की एक सकारात्मक अंत expiratory दबाव (झलक), एक श्वसन दर की 14-16 लैंडलाइंस और एक inspiratory ऑक्सीजन अंश (फियो2) की १.०.
  8. संतुलित इलेक्ट्रोलाइट समाधान के साथ एक सतत अर्क शुरू (5 mLkg-1 एच-1), propofol (8-12 मिलीग्राम किग्रा-1 एच-1) और fentanyl (0.1-0.2 मिलीग्राम किलो-1 एच-1) संज्ञाहरण बनाए रखने के लिए ।
  9. इंटुबैषेण के लिए, पशु के लिए उपयुक्त एक आम endotracheal ट्यूब तैयार (उदा., 25-30 किग्रा का वजन, endotracheal ट्यूब आंतरिक व्यास (ID) 6-7mm) endotracheal ट्यूब प्रचार और एक Macintosh ब्लेड 4 के साथ एक आम laryngoscope के साथ सशस्त्र ।
    नोट: दो लोग इंटुबैषेण के लिए आवश्यक हैं ।
  10. 1 व्यक्ति: एक हाथ से जीभ बाहर खींचो और दूसरे के साथ पृष्ठीय थूथन दबाएं ।
  11. 2 व्यक्ति: laryngoscope डालें और यह हमेशा की तरह अग्रिम जब तक उपकंठ देखने में आता है ।
  12. laryngoscope ventrally को खींचने के लिए मुखर डोरियों कल्पना ।
    नोट: कभी उपकंठ नरम तालव्य करने के लिए "छड़ें" । इस मामले में, यह ट्यूब की नोक के साथ जुटाने ।
  13. मुखर डोरियों के माध्यम से ट्यूब डालें और प्रचार बाहर खींचो ।
  14. ब्लॉक हवा के 10 मिलीलीटर के साथ एक सिरिंज के साथ ट्यूब के कफ ।
  15. ट्यूब को वेंटीलेटर से कनेक्ट करें ।
  16. capnography और श्रवण के साथ दोनों फेफड़ों के बराबर वेंटिलेशन के साथ कार्बन डाइऑक्साइड (CO2) के नियमित समाप्ति द्वारा ट्यूब की सही स्थिति के लिए जांच करें ।
  17. यांत्रिक वेंटिलेशन शुरू (ज्वार की मात्रा 6-8 मिलीलीटर/किलो, सकारात्मक झलक 5 सेमी एच20, फियो2 परिधीय ऑक्सीजन संतृप्ति रखने के लिए (एसपीओ2) के बीच ९४ – ९८%17, श्वसन दर अंत रखने के लिए कार्बन डाइऑक्साइड का ज्वार दबाव (etCO 2) के बीच ३५ – ४५ mmHG).

2. इंस्ट्रूमेंटेशन

  1. catheterizing आवश्यक जहाजों के लिए ऊरु क्षेत्र के ऊपर त्वचा खिंचाव के लिए पट्टियों के साथ hindlegs वापस लेना ।
  2. एक 5 मिलीलीटर सिरिंज, एक 10 मिलीलीटर सिरिंज तैयार, एक Seldinger की सुई, 3 प्रचार के आवरण (5 fr, 6 fr, 8 fr) guidewires के साथ, 3 बंदरगाहों (7 fr, 30 सेमी) के साथ guidewire और एक फुफ्फुसीय धमनी कैथेटर (7, 5 fr, ११० सेमी) के साथ एक केंद्रीय शिरापरक कैथेटर ।
  3. उदारता से त्वचा विशुद्धीकरण तकनीक नीचे पोंछ लगाने के साथ ऊरु क्षेत्र को संक्रमित ।
  4. पूरी तरह से खारा के साथ कैथेटर भरें ।
  5. सही वंक्षण बंधन पर अल्ट्रासाउंड जांच प्लेस और ऊरु जहाजों के लिए स्कैन ।
  6. जांच ९० ° बारी पूरी तरह से लंबी धुरी में ऊरु धमनी की कल्पना करने के लिए ।
  7. Seldinger की सुई के साथ में लाइन अल्ट्रासाउंड दृश्य के तहत सही ऊरु धमनी Cannulate ।
    नोट: के साथ या अल्ट्रासाउंड के बिना नाड़ी का उपयोग लाभ के लिए अलग तरीके हैं. अल्ट्रासाउंड निर्देशित संवहनी cannulation इस मॉडल के लिए आवश्यक नहीं है ।
  8. जब pulsating उज्ज्वल रक्त बाहर बहती है, मार्गदर्शन तार परिचय और सुई वापस लेना ।
  9. ऊरु नस कल्पना और सुई के साथ में लाइन अल्ट्रासाउंड दृश्य और सतत आकांक्षा के तहत नस cannulate ।
  10. जब शिरापरक रक्त आकांक्षी है, सिरिंज डिस्कनेक्ट और मार्गदर्शन तार डालें ।
  11. सुई वापस लेना ।
  12. अल्ट्रासाउंड के साथ तारों की स्थिति की जांच करें ।
  13. Seldinger की तकनीक का उपयोग धमनी प्रचार म्यान (5 Fr) और केंद्रीय शिरापरक कैथेटर डालें (Seldinger की तकनीक पर विवरण के लिए, प्रकाशित विधि18का संदर्भ लें) ।
  14. अन्य पक्ष पर धमनी और शिरापरक पंचर दोहराएँ और (धमनी 6 fr, नस 8 fr) ऊपर वर्णित के रूप में Seldinger ´ एस तकनीक का उपयोग कर प्रचार खोल डालें.
  15. एक transducer प्रणाली निगरानी उपकरणों के लिए उपयुक्त करने के लिए धमनी प्रचार म्यान और केंद्रीय शिरापरक कैथेटर कनेक्ट ।
  16. वायुमंडल के खिलाफ आक्रामक निगरानी जांचना (शून्य) वातावरण के लिए तीन तरह से stopcocks खोलने और मॉनिटर पर सभी शून्य दबाएँ द्वारा.
  17. तीन तरह की बारी-stopcocks वापस नाप hemodynamics.
  18. hemodynamics मॉनीटरिंग प्रारंभ करें ।
  19. सभी प्रेशर ट्रांसड्यूसर को दायीं atrium की ऊंचाई पर रखें ।
  20. propofol के अर्क स्विच (8-12 मिलीग्राम किलो-1 एच-1) और fentanyl (0.1-0.2 मिलीग्राम किलो-1 एच-1) संज्ञाहरण बनाए रखने के लिए केंद्रीय शिरापरक रेखा के बंदरगाहों में से एक के लिए ।

3. आंशिक ऑक्सीजन दाब का Ultrafast मापन (पीओ2)

नोट: ultrafast po2-माप के लिए जांच के साथ पीओ2 की माप अनिवार्य नहीं है, लेकिन pO2 में वास्तविक समय परिवर्तन visualizing में मदद करता है ।

  1. सॉफ़्टवेयर NeoFox व्यूअर खोलें और विकल्पक्लिक करें ।
  2. अंशांकन टैब चुनें और अंशांकन खोलें बटन क्लिक करें ।
  3. अंशांकन फ़ाइल चुनें और खोलें और डाउनलोडक्लिक करें ।
  4. हांक्लिक करके पॉप-अप विंडो की पुष्टि करें ।
  5. विकल्प संवाद खोलें ।
  6. अंशांकन टैब चुनें और सिंगल पॉइंट अंशांकनपर क्लिक करें ।
  7. क्षेत्र ऑक्सीजन और क्षेत्र के तापमानमें तापमान में 21% दर्ज करें ।
  8. वर्तमान ताऊ और डाउनलोडकरें बाद में, हांक्लिक करके पॉप-अप विंडो की पुष्टि करें ।
  9. बाईं धमनी प्रचार म्यान के माध्यम से पीओ2 के ultrafast माप के लिए जांच डालें ।

4. फुफ्फुसीय धमनी कैथेटर डालने

  1. नुकसान के लिए फुफ्फुसीय धमनी कैथेटर के गुब्बारे की जांच करें ।
  2. निगरानी उपकरणों के लिए उपयुक्त transducer प्रणाली से कनेक्ट करें ।
  3. वायुमंडल के खिलाफ फुफ्फुसीय धमनी दबाव निगरानी जांचना (शून्य) तीन तरह से खोलने के द्वारा-टोंटी वातावरण के लिए और मॉनिटर पर शून्य दबाएँ.
  4. फेफड़े के धमनी के दबाव को मापने के लिए तीन तरह-टोंटी वापस मुड़ें ।
  5. फुफ्फुसीय धमनी दबाव की निगरानी शुरू करें ।
  6. बाएं शिरापरक प्रचार म्यान (गुब्बारा फुलाया) के माध्यम से फुफ्फुसीय धमनी कैथेटर डालें ।
  7. जब फेफड़े की धमनी कैथेटर प्रचार म्यान के माध्यम से पारित कर दिया है, हवा के 1 मिलीलीटर के साथ गुब्बारा फुलाना ।
  8. फुफ्फुसीय धमनी कैथेटर अग्रिम और ठेठ waveforms (शिरापरक जहाजों, सही atrium, सही निलय, फेफड़े के arteria, और फुफ्फुसीय केशिका कील दबाव) की निगरानी । गुब्बारा खंडन करना और जांच, अगर यह संभव है फुफ्फुसीय धमनी कैथेटर के सभी बंदरगाहों के माध्यम से रक्त महाप्राण ।
    नोट: कैसे फुफ्फुसीय धमनी कैथेटर डालने के लिए पर विस्तृत अनुदेश के लिए, पिछले प्रकाशन19को देखें ।

5. फेफड़ों में चोट की प्रेरण

  1. तैयार ओलिक-एसिड समाधान: ०.१ एमएल किलो- एक 20 मिलीलीटर सिरिंज में ओलिक एसिड की 1 और यह एक 3 तरह से कनेक्ट-टोंटी ।
  2. एक और 20 मिलीलीटर सिरिंज में 2 मिलीलीटर रक्त ले और दोनों सीरिंज में 20 मिलीलीटर की कुल मात्रा में खारा जोड़ें ।
  3. दूसरा सिरिंज भी 3-way-टोंटी से कनेक्ट करें ।
    चेतावनी: ओलिक एसिड के साथ काम करते समय दस्ताने और आंख संरक्षण का प्रयोग करें ।
  4. निरंतर अर्क के लिए और बोल्स इंजेक्शन (10 µ g/एमएल) के लिए norepinephrine तैयार करें (०.१ mg/
  5. इसे शुरू करने के बिना केंद्रीय शिरापरक कैथेटर के बंदरगाहों में से एक के लिए norepinephrine सिरिंज पंप कनेक्ट ।
  6. ultrafast पीओ2-माप प्रारंभ करें ।
  7. फेफड़ों की चोट की प्रेरण से पहले, सभी प्रासंगिक मापदंडों से मूल्यों (आधारभूत) रिकॉर्ड.
  8. सेट एफiओ2 १.० करने के लिए और एक फेफड़ों भर्ती पैंतरेबाज़ी आचरण (पठार दबाव ४० सेमी एच2ओ के लिए 10 एस) ।
  9. 3 तरह से कनेक्ट-टोंटी फुफ्फुसीय धमनी कैथेटर के समीपस्थ बंदरगाह के लिए ।
  10. मिश्रण ओलिक एसिड और रक्त/खारा मिश्रण अच्छी तरह से यह दोहराव से एक सिरिंज से दूसरे में 3 तरह-टोंटी के माध्यम से इंजेक्शन और हर समय मिश्रण रखने के द्वारा.
  11. जब यह एक समरूप पायस है, पायस के 2 मिलीलीटर इंजेक्षन और मिश्रण जारी है ।
    नोट: यदि मिश्रण बंद कर दिया है, पायस एक lipophilic और एक हाइड्रोफिलिक भाग में अलग हो सकता है ।
  12. बारीकी से ओलिक एसिड के इंजेक्शन के बाद hemodynamics की निगरानी और हाथ में norepinephrine रखने के लिए । यदि आवश्यक हो, बोल्स इंजेक्शन के रूप में norepinephrine दे (10-१०० µ जी) या निरंतर अर्क ६० mmHg ऊपर मतलब धमनी का दबाव रखने के लिए ।
  13. दोहराएं समाधान के 2 मिलीलीटर के इंजेक्शन हर 3 मिनट जब तक ऑक्सीजन की धमनी आंशिक दबाव (पाओ2)/FiO2-अनुपात २०० mmHg नीचे है ।
  14. अगर सिरिंज पहले पाओ2/FiO2-अनुपात के बीच १०० और २०० mmHg के बीच है खाली है, 2 और सीरिंज के रूप में चरण ५.१ में वर्णित तैयार करें ।
  15. 30 मिनट रुको और फिर से पाओ2/FiO2-अनुपात का मूल्यांकन । यदि यह अभी भी खत्म हो गया है २०० mmHg, दोहराएं चरण 5.5-5.8 जब तक पाओ2/FiO2-अनुपात १०० और २०० mmHg के बीच पड़ता है ।
  16. अगर पाओ2/FiO2-अनुपात १०० और २०० mmHg के बीच है, 30 मिनट के लिए प्रतीक्षा करें और फिर से जांच करें ।
  17. यदि यह २०० के नीचे निर्बाध है mmHg प्रयोग/उपचार शुरू, अंयथा चरण ५.१ में वर्णित के रूप में 2 और सीरिंज तैयार है और चरण 5.5-5.9 दोहराएं ।
  18. ARDS नेटवर्क20से सुझावों के अनुसार वेंटिलेशन सेट करें ।

6. प्रयोग और इच्छामृत्यु का अंत

  1. सुई ०.५ मिलीग्राम fentanyl के अतिरिक्त निरंतर संज्ञाहरण के लिए और 5 मिनट के लिए प्रतीक्षा करें । propofol के २०० मिलीग्राम और पोटेशियम क्लोराइड के ४० mmol गहरे संज्ञाहरण में पशु euthanize करने के लिए सुई ।

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Representative Results

पाओ2/FiO2-ओलिक अम्ल (चित्रा 1) के fractionated आवेदन के बाद अनुपात घट जाता है । प्रस्तुत अध्ययन में फेफड़ों की चोट से होने वाली प्रेरण के लिए ०.१८५ ± ०.०१ एमएल केजी-1 ओलिक एसिड आवश्यक था । सभी जानवरों को फेफड़ों की चोट के प्रेरण के बाद एक बिगड़ा ऑक्सीजन दिखाया, आगे के पाठ्यक्रम में किस्मों के साथ । पशु 1 और 3 में, यह थोड़ा उतार चढ़ाव के साथ एक स्तर पर बने रहे; 2 पशु में, हम एक प्रारंभिक वृद्धि का पालन, अंत में एक कमी के बाद, जबकि 4 पशु एक निरंतर वृद्धि से पता चलता है । फिर भी, हम 6 घंटे के बाद सभी 4 पशुओं में ऑक्सीजन में एक चिह्नित हानि पाते हैं । इसलिए, यह बारीकी से नजर रखने केलिए आवश्यक है 2/FiO2-अनुपात जबकि फेफड़ों की चोट उत्प्रेरण । हम एक ultrafast पीओ2-माप जांच का उपयोग करने के लिए असली समय21में पाओ2 में कमी की निगरानी । एसपीओ2 को गिराना शुरू होने से समय से नियमित धमनी रक्त गैस के नमूने लेने का एक अलग विकल्प है । वाहन में इलाज पशुओं (5 और 6), वहां पाओ2/FiO2में कोई कमी-अनुपात है ।

पाओ2/FiO2में कमी-अनुपात फुफ्फुसीय धमनी दबाव (पीएपी), जो आम तौर पर प्रयोग (चित्रा 2) के आराम के लिए ऊंचा रहता है में वृद्धि के द्वारा समानांतर है । इसी तरह पाओ2/FiO2-अनुपात, यह कभी-कभार थोड़ा उतार चढ़ाव । एक पशु (पशु 3) में, MPAP बाद में इस स्तर पर रहे; दो पशुओं में (पशु 1 और 4), यह थोड़ा गिर गया; एक जानवर (पशु 2) में, यह शुरू में बाद में वृद्धि हो गई । वाहन में इलाज पशुओं (5 और 6), MPAP प्रयोग के दौरान परिवर्तन नहीं किया ।

फेफड़ों की चोट भी नेत्रहीन पशुओं की मौत के बाद बाहर ले लिया फेफड़ों में पता लगाने में है । चित्रा 3 इच्छामृत्यु के बाद OAI प्रेरित फेफड़ों की चोट के साथ एक सुअर के प्रतिनिधि फेफड़ों से पता चलता है । histologic स्लाइस में, पहले प्रकाशनों के अनुसार संसाधित22, वायुकोशीय शोफ और नकसीर दिखाई दे रहे हैं (चित्रा 4).

Figure 1
चित्रा 1 : विकास पाओ का 2 /FiO 2 -4 अनुकरणीय सूअरों में ओलिक एसिड के इंजेक्शन के बाद 6 ज के दौरान अनुपात और 2 वाहन के साथ इलाज सूअरों। (a). प्रतिनिधि भूखंडों थोड़ा उतार चढ़ाव के साथ स्थिर मूल्यों दिखा (जानवरों 1 और 3), प्रारंभिक वृद्धि (पशु 2) या निरंतर वृद्धि (पशु 4) के बाद । वाहन का इलाज सूअरों (जानवरों 5 और 6) समय के साथ थोड़ा बदलाव दिखा । (ख). मतलब और सभी जानवरों के लिए मानक विचलन । कृपया यहां क्लिक करें इस आंकड़े का एक बड़ा संस्करण को देखने के लिए । 

Figure 2
चित्रा 2 : 4 अनुकरणीय सूअरों में ओलिक एसिड के इंजेक्शन के बाद 6 एच के दौरान मतलब फुफ्फुसीय धमनी का दबाव (MPAP) का विकास और 2 वाहन के साथ इलाज सूअरों । (क). प्रतिनिधि भूखंड सभी 4 पशुओं में एक प्रारंभिक वृद्धि दिखा । एक पशु (पशु 3) में, MPAP बाद में इस स्तर पर रहे; दो पशुओं में (पशु 1 और 4), यह थोड़ा गिर गया; एक जानवर (पशु 2) में, यह शुरू में बाद में वृद्धि हो गई । वाहन का इलाज सूअरों (जानवरों 5 और 6) समय के साथ थोड़ा बदलाव दिखा । (ख). मतलब और सभी जानवरों के लिए मानक विचलन । कृपया यहां क्लिक करें इस आंकड़े का एक बड़ा संस्करण को देखने के लिए ।

Figure 3
चित्रा 3 : ओलिक एसिड के इंजेक्शन के बाद फेफड़ों । ओलिक एसिड के इंजेक्शन के बाद फेफड़ों की फोटो 6 एच. रक्तस्रावी क्षेत्र दिखाई दे रहे हैं. कृपया यहां क्लिक करें इस आंकड़े का एक बड़ा संस्करण को देखने के लिए ।

Figure 4
चित्र 4 : ओलिक एसिड इंजेक्शन के बाद फेफड़ों में चोट के Histologic छवियों । फेफड़ों के लिए 10% formalin में तय किए गए थे आयल सेक्शनिंग और haematoxylin/eosin धुंधलाना । छवि आवर्धन: 10x । (अ). वायुकोशीय शोफ. (ख). नकसीर. कृपया यहां क्लिक करें इस आंकड़े का एक बड़ा संस्करण को देखने के लिए ।

पशु 1 पशु 2 पशु 3 पशु 4 पशु 5 पशु 6
शरीर का वजन [kg] 27 28 27 27 27 29
सही ऊपरी पालि गीला [g] ९६ ८३ ११६ ११६ ६० ४४
दायां ऊपरी पालि शुष्क [g] 14 13 13 11 11 9
गीला करने वाली सूखी 6, 9 6, 4 8, 9 10, 5 5, 5 4, 9

तालिका 1: इस तालिका जानवरों के फेफड़ों के सही ऊपरी पालि के गीले वजन, शुष्क वजन और गीला करने वाली सूखी अनुपात के वजन से पता चलता है ।

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Discussion

यह आलेख गंभीर ARDS के विभिन्न पहलुओं का अध्ययन करने के लिए एक मॉडल के रूप में ओलिक एसिड प्रेरित फेफड़ों की चोट का एक तरीका का वर्णन करता है । विभिन्न इमल्शन, विभिन्न इंजेक्शन साइटों, और इमल्शन के विभिन्न तापमानों के साथ अन्य प्रोटोकॉल भी हैं23,24,25,26,27,28 ,29. हमारे विधि फेफड़ों समारोह में एक reproducible और स्थिर गिरावट प्रदान करता है । ओलिक एसिड के प्रभाव के रूप में खुराक पर निर्भर है, यह पाओ2/FiO2के लिए व्यक्तिगत दहलीज को परिभाषित करने के लिए आवश्यक है-अनुपात, वांछित अध्ययन पर निर्भर करता है, और इस अनुपात को प्राप्त करने के लिए ओलिक एसिड की आवश्यक खुराक मिल.

जब इस विधि का उपयोग कर, वहां कुछ नुकसान कर रहे हैं । सबसे पहले ओलिक एसिड की lipophilicity है । यह रक्त में emulsified/खारा मिश्रण रखने के लिए, यह लगातार इसे मिश्रण करने के लिए आवश्यक है । एक अंय समस्या ओलिक एसिड के इंजेक्शन के बाद hemodynamics में अचानक परिवर्तन है । सीधे ओलिक एसिड के इंजेक्शन के बाद, पीएपी मूल्यों अचानक hemodynamic क्षतिपूर्ति और पशु की मौत में परिणाम कर सकते हैं, जो ६० से अधिक mmHg के लिए अचानक बढ़ सकता है । इसलिए, यह पर्याप्त बचाव दवा रखने के लिए आवश्यक है, जैसे, norepinephrine, तैयार है और हाथ में । फिर भी, hemodynamic क्षतिपूर्ति जानवर के अचानक मौत में परिणाम कभी नहीं रोका जा सकता है । पिछले ख़तरा ओलिक एसिड के बाद प्रभाव है । मानव ARDS के लिए इसी तरह, लक्षण शुरुआत करने के लिए समय भिन्न हो सकते हैं और यह न तो वास्तव में कितना ओलिक एसिड फेफड़ों की चोट की प्रेरण के लिए एक दिया सुअर में आवश्यक है भविष्यवाणी करने के लिए संभव है, और न ही पाओ पर एक दिया खुराक के प्रभाव की भविष्यवाणी करने के लिए2/FiO2-अनुपात. पाओ2/FiO2-अनुपात लगभग ठहराव हो सकता है; लेकिन वे भी सुधार या आगे गिरावट हो सकती है । यह चित्र 1में प्रदर्शित किया जाता है । एक बार पाओ2/FiO2-अनुपात १०० और २०० mmHg के बीच एक झलक ≥ 5 सेमी ज2ओ में है, हम और अधिक से अधिक 30 मिनट के लिए इस दहलीज के नीचे बने रहने के लिए ऑक्सीजन की आवश्यकता होती है । आमतौर पर, पाओ2/FiO2 अपेक्षाकृत स्थिर रहता है इस समय पाठ्यक्रम के दौरान, हालांकि यह आगे छोड़ सकते हैं । शायद ही कभी, यहां तक कि एक सुधार संभव है, २०० mmHg ऊपर मूल्यों तक पहुंचने । इन परिस्थितियों के तहत ज्यादा ओलिक एसिड की जरूरत होती है ।

ओलिक एसिड द्वारा फेफड़ों की चोट की प्रेरण कुछ सीमाएं हैं । मुख्य नुकसान केंद्रीय शिरापरक उपयोग के लिए की जरूरत है, जो विशेष रूप से छोटे जानवरों में चुनौतीपूर्ण हो सकता है । एक और इस मॉडल की यंत्रवत प्रासंगिकता के बारे में सवाल है । ओलिक एसिड ARDS-मॉडल के लिए एक प्रयास में विकसित किया गया था ARDS के कारण लिपिड आवेश के रूप में ट्रामा रोगियों में देखा14. लेकिन आघात ARDS मामलों के बारे में 10% के लिए केवल प्रेरणा है30 और चाहे या नहीं पूति या निमोनिया जैसे अंय कारणों का हिस्सा एक ही तंत्र चर्चा के अंतर्गत अभी भी है । ARDS के लिए इस सुअर मॉडल के अंतिम नुकसान जटिल उपकरण और नैदानिक अचानक hemodynamic परिवर्तन के साथ hypoxic बड़े पशुओं में संज्ञाहरण बनाए रखने के लिए आवश्यक अनुभव है । इसलिए, बड़े पशु अनुसंधान और गहन देखभाल चिकित्सा में अनुभव के साथ केवल जांचकर्ताओं इस मॉडल के साथ काम करना चाहिए या कम निकटता से अनुभवहीन शोधकर्ताओं की निगरानी ।

वहां रहे हैं, तथापि, इस मॉडल के लिए विशिष्ट लाभ । यह मानव ARDS के बुनियादी रोग परिवर्तन पैदा करता है-पारगम्यता परिवर्तन के साथ भड़काऊ फेफड़ों की चोट, गैस विनिमय और फेफड़ों यांत्रिकी में हानि-बहुत अच्छी तरह से और अच्छी reproducibility के साथ7,31. यह आम तौर पर एक या अधिक रोग प्रभाव की कमी है कि अन्य मॉडलों के लिए यह बेहतर बनाता है. लेवेज द्वारा Surfactant कमी केवल छोटे वायुकोशीय उपकला परिवर्तन7,19 और lipopolysaccharide प्रशासन, एक पूति मॉडल, आमतौर पर alveolo-केशिका बाधा7के केवल ंयूनतम परिवर्तन लाती लाती है । ओलिक एसिड इंजेक्शन बड़े और छोटे जानवरों में व्यवहार्य है, इसलिए यह विभिन्न प्रयोगशालाओं में इस्तेमाल किया जा सकता है कि पशु मॉडल8,9,10,12का उपयोग करें । तीसरा, यह न केवल ARDS के प्रारंभिक चरण की नकल है, लेकिन यह भी वायुकोशीय सतह16पर फाइब्रिन के जमाव के साथ बाद के चरणों । इसके अलावा, बड़े जानवरों का उपयोग करते समय, यह विस्तारित नैदानिक निगरानी और उपकरण है कि छोटे जानवरों में पूरी तरह से उपलब्ध नहीं है का उपयोग करने के लिए संभव है । यह एक बेडसाइड सेटिंग जो गहन देखभाल चिकित्सकों के लिए इस्तेमाल कर रहे है की स्थिति जैसा दिखता है, इस प्रकार इस विधि के लिए चिकित्सकों के लिए आसान पहुंच की अनुमति और उपचार एल्गोरिदम में तेजी से कार्यांवयन की सुविधा ।

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Disclosures

सभी लेखकों को कोई वित्तीय या हित के किसी भी अंय संघर्ष का खुलासा ।

Acknowledgments

लेखक उत्कृष्ट तकनीकी सहायता के लिए Dagmar Dirvonskis का शुक्रिया अदा करना चाहते हैं ।

Materials

Name Company Catalog Number Comments
3-way-stopcock blue Becton Dickinson Infusion Therapy AB Helsingborg, Sweden 394602
3-way-stopcock red Becton Dickinson Infusion Therapy AB Helsingborg, Sweden 394605
Atracurium Hikma Pharma GmbH , Martinsried 4262659
Canula 20 G Becton Dickinson S.A. Carretera Mequinenza Fraga, Spain 301300
Datex Ohmeda S5 GE Healthcare Finland Oy, Helsinki, Finland
Desinfection Schülke & Mayr GmbH, Germany 104802
Endotracheal tube Teleflex Medical Sdn. Bhd, Malaysia 112482
Endotracheal tube introducer Rüsch 5033062
Engström Carestation GE Heathcare, Madison USA
Fentanyl Janssen-Cilag GmbH, Neuss
Gloves Paul Hartmann, Germany 9422131
Incetomat-line 150 cm Fresenius, Kabi Germany GmbH 9004112
Ketamine Hameln Pharmaceuticals GmbH
Laryngoscope Teleflex Medical Sdn. Bhd, Malaysia 671067-000020
Logical pressure monitoring system Smith- Medical Germany GmbH MX9606
Logicath 7 Fr 3-lumen 30cm Smith- Medical Germany GmbH MXA233x30x70-E
Masimo Radical 7 Masimo Corporation Irvine, Ca 92618 USA
Mask for ventilating dogs Henry Schein, Germany 730-246
Neofox Kit Ocean optics Largo, FL USA NEOFOX-KIT-PROBE
Norepinephrine Sanofi- Aventis, Seutschland GmbH 73016
Oleic acid Applichem GmbH Darmstadt, Germany 1,426,591,611
Original Perfusor syringe 50ml Luer Lock B.Braun Melsungen AG, Germany 8728810F
PA-Katheter Swan Ganz 7,5 Fr 110cm Edwards Lifesciences LLC, Irvine CA, USA 744F75
Percutaneous sheath introducer set 8,5 und 9 Fr, 10 cm with integral haemostasis valve/sideport Arrow international inc. Reading, PA, USA AK-07903
Perfusor FM Braun B.Braun Melsungen AG, Germany 8713820
Potassium chloride Fresenius, Kabi Germany GmbH 6178549
Propofol 2% Fresenius, Kabi Germany GmbH
Saline B.Braun Melsungen AG, Germany
Sonosite Micromaxx Ultrasoundsystem Sonosite Bothell, WA, USA
Stainless Macintosh Size 4 Teleflex Medical Sdn. Bhd, Malaysia 670000
Sterofundin B.Braun Melsungen AG, Germany
Stresnil 40mg/ml Lilly Germany GmbH, Abteilung Elanco Animal Health
Syringe 10 mL Becton Dickinson S.A. Carretera Mequinenza Fraga, Spain 309110
Syringe 2 mL Becton Dickinson S.A. Carretera Mequinenza Fraga, Spain 300928
Syringe 20 mL Becton Dickinson S.A. Carretera Mequinenza Fraga, Spain 300296
Syringe 5 mL Becton Dickinson S.A. Carretera Mequinenza Fraga, Spain 309050
venous catheter 22G B.Braun Melsungen AG, Germany 4269110S-01

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References

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चिकित्सा अंक १४० ARDS फेफड़ों की चोट ओलिक एसिड सुअर पशु मॉडल विधि
ओलिक एसिड-तीव्र श्वसन संकट सिंड्रोम के लिए एक मॉडल के रूप में सूअरों में इंजेक्शन
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Kamuf, J., Garcia-Bardon, A., Ziebart, A., Thomas, R., Rümmler, R., Möllmann, C., Hartmann, E. K. Oleic Acid-Injection in Pigs As a Model for Acute Respiratory Distress Syndrome. J. Vis. Exp. (140), e57783, doi:10.3791/57783 (2018).

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