Waiting
Login processing...

Trial ends in Request Full Access Tell Your Colleague About Jove
Click here for the English version

Neuroscience

الحث الجراحي بسيطه لفقدان السمع موصل مع التحقق باستخدام التصور منظار الرؤية والسلوكية التصفيق Startle الاستجابة في الفئران

Published: October 26, 2019 doi: 10.3791/57993
* These authors contributed equally

Summary

هنا ، ونحن نقدم بروتوكول لإنشاء التعريفي فقدان السمع موصله قابله للتكرار عن طريق ثقب الغشاء الجراحية طبله الطبل والتحقق من التصور والتقييم السلوكي من قبل منظار اليد التصفيق startle.

Abstract

فقدان السمع موصل (CHL) هو ضعف السمع السائدة في البشر. الهدف من البروتوكول هو وصف عمليه جراحيه بسيطه للحث علي القوارض. يوضح البروتوكول CHL بواسطة ثقب غشاء الطبل. وكان التحقق من الجراحة الطبية التجميلية عن طريق فحص منظار الأنف والتقييم السلوكي عن طريق التصفيق باغت الاستجابة ، قابله للتكرار وموثوق بها ، وهي أساليب بسيطه لإثبات فقدان السمع قد حدث. الاجراء [شل] بسيطه مفيده واجبه إلى استنساخه ومرونة إلى مطاردات مختلفه في سمعيه خسارة بحث. وترتبط القيود المفروضة علي الحث علي العلاج بالنهج الجراحي مع منحني التعلم لاجراء العملية الجراحية والثقة في الفحص السمعي. الحث علي ضعف السمع من قبل CHL يسمح للمرء ان يدرس بسهوله المظاهر العصبية والنتائج السلوكية لفقدان السمع.

Introduction

ويبلغ معدل انتشار فقدان السمع لدي الأطفال والبالغين حوالي 19.5 في المائةو 15.2 في المائة علي التوالي. ومع ذلك ، فان حوالي 39.3% من جميع المواليد الجدد المصابين بفحص غير طبيعي للسمع لا يتلقون علاجا علاجيا كما ذكرت مراكز مكافحه الامراض3. فقدان السمع هو حاله مدروسه علي نطاق واسع ، والقوارض هو نموذج قوي لدراسة السمع العادي والسمع الاضطرابات ذاتالصلة4،5،6،7،8،9 ،10،11،12،13،14،15. اضطرابات السمع مثل فقدان السمع موصل (CHL) يؤدي إلى زيادة في الاكتئاب متشابك علي المدى القصير في القشرة السمعية4، مما يؤدي إلى انخفاض المنحدرات القياس العصبي المرتبطة عتبات الكشف عن التحوير التردد 5. نماذج فقدان السمع موصل عن طريق الازاله الجراحية/النزوح من المطرقة ، الغشاء الطبلي (TM) ثقب أو الاذن المستخدمة بسهوله والسماح للاستقراء السريع للنموذج فقدان السمع5،14 ،15،16،17،18. والهدف من هذا البروتوكول والأسلوب هو إظهار نموذج CHL بسيط وقابل للتكرار في القوارض.

هذا البروتوكول غير مكلفه (≈ دولار أمريكي 300 مع جميع الاداات) ، وبسهوله للتعديل علي المساعي البحثية المختلفة. وكان الجرذ تقييمات مفصله لتشريح الاذن الوسطي19,20,21,22,23, النهج الجراحية24, نماذج في التهاب الاذن الوسطي25, 26،27 و TM ثقب التجديد16،17،18،28،29،30، مما يجعلها نموذجا مثاليا للدراسة فقدان السمع. هنا ، يتم وصف اجراء الحث البسيطة CHL مع التحقق من قبل منظار الاذن والتقييم السلوكي مع استجابه باغت التصفيق في الفئران ، والتي يمكن ان تستخدم بعد ذلك لاستكشاف عواقب اضافيه لفقدان السمع. يتم المستحثة الاجراء CHL عن طريق ثقب الجراحية لل TM. يتم تنفيذ التحقق من الاجراء CHL بواسطة المرئيات منظار الدم لتحديد غياب TM. يتم اجراء التقييم السلوكي بواسطة مستوي ضغط الصوت (dB) عاليه الديسيبل (SPL) باليد التصفيق. وقد تم تطبيق هذه الطريقة سابقا في مجموعه متنوعة من القوارض. فمن السهل للنسخ المتماثل ، وتنتج الاختلافات السيكولوجية قويه والتغيرات في الاستجابات الفسيولوجية العصبية4،5،16،17،18.

Subscription Required. Please recommend JoVE to your librarian.

Protocol

وقد وافقت علي هذه الدراسة والإجراءات لجان أخلاقيات البحوث الحيوانية التابعة لجامعه مدينه هونغ كونغ ، وجامعه هونغ كونغ ، ووزارة الصحة في منطقه هونغ كونغ الاداريه الخاصة.

1-الحيوانية

  1. استخدام Sprague-Dawley (SD) الفئران من شهرين (N = 90 ، 200-250 g).
    ملاحظه: تم توفير القوارض من قبل وحده المختبرات الحيوانية المعتمدة في جامعه هونغ كونغ.
  2. الحفاظ علي الفئران تحت درجه حرارة ثابته 25 درجه مئوية والرطوبة 60-70 ٪ في وحده البحوث الحيوانية المختبر.
  3. منزل القوارض في 12/12-ح الضوء/الظلام دورات مع الوصول إلى الغذاء ومياه الشرب ، حسب الاعلانيه.
  4. تاقلم القوارض مع البيئة السكنية لمده يوم واحد علي الأقل قبل الجراحة.
  5. التقاط القوارض من قبل الوازع وتخدير القوارض مع كوكتيل من الكيتامين و اكسيليازين (80-100 مغ/كغ: 5-10 مغ/كغ ، علي التوالي) عن طريق الحقن داخل الصفاق (الجمع بين 1.0 مل من الكيتامين مع 0.5 مل من اكسيليازين كتركيز نهائي).
    ملاحظه: استخدام 1 مل من حقنه مع ابره 23-25G. حقن حوالي 0.2 مل لكل 100 g وزن الجسم من الفئران لمده 30 دقيقه من التخدير.
  6. تنفيذ قرصه اصبع القدم للتحقق من الشعور بالم والتاكد من التخدير السليم. رد فعل علي قرصه اصبع القدم العميق (عن طريق سحب الأطراف الخلفية) يشير إلى عدم كفاية التخدير.

2. الاعداد الجراحي

  1. تعقيم جميع المعدات في الاوتوكلاف أو الزجاج الساخن حبه معقم قبل بدء الجراحة. تنظيف المنطقة الجراحية مع 70 ٪ الايثانول.
  2. استخدام قفازات اللاتكس ومعطف المختبر قبل البدء في الاجراء.
  3. وضع ثني جراحيه معقمه علي مقاعد البدلاء نظيفه (الشكل 1A).
  4. تعقيم المقص الصغير ومنظار الاذن قبل الجراحة للتقليل من الاصابه بالعدوى (الشكل 1 ب).
  5. ضع المقص الصغير ومنظار المناظير في المنطقة المعقمة.
  6. ضع القوارض في المجال الجراحي التوازي مع الجراح.
  7. المضي قدما في الحث الجراحي لل CHL.

3. الحث الجراحي لفقدان السمع موصل

  1. وضع الذيل وراس القوارض محاذاة في موقف المعرضة ، والراس الأقرب إلى الجراح.
  2. تصور الاذن اليمني واليسرى من القوارض تحت منظار لضمان غشاء الطبل صحية (الشكل 2a). تقييم كل من الاذن اليمني واليسرى من كل القوارض للتحقق من حاله صحية قبل الاستقراء CHL.
  3. الاستيلاء علي الحلزون الاذن وتوسيع القناة السمعية الخارجية (اي قناه الاذن ، meatus السمعية الخارجية ، وهنا القناة السمعية) لتسبب في الداخل لتصبح حجب واسودت بالعمق. هنا ، يتم جعل القناة السمعية عمودي علي سطح TM.
    ملاحظه: تاكد من ان كانل السمعية موازيه مباشره الآن و TM يشكل زاوية الحق مع محور الادراج من مقص الصغرى. سيتم تصور كانبوب اسود دون ضوء. في بعض الأحيان تحتاج القناة السمعية إلى أماله بزاوية طفيفه ، حوالي 15 درجه إلى سطح مستو من الجمجمة. وهذا يضمن اليد الجراح هو عمودي علي سطح TM.
  4. تقديم مقص الصغيرة في وسط القناة السمعية مع الانتباه إلى عدم الخالي من الدسم أو نك نسيج القناة السمعية والمضي قدما قليلا ، حوالي ≈ 5 ملم من مركز الغموض ، دفع إلى الامام بلطف من خلال مركز TM.
    ملاحظه: يمكن تاكيد ثقب TM من قبل صوت البوب عندما نصائح مقص الصغرى ثقب TM. ويمكن سماع الصوت تفرقع في حوالي ≈ 2 دقيقه 52 s في الفيديو. هذا ليس صوت مقص; هذا هو الصوت ثقب TM. ووفقا لما تم قياسه بعد التحليل ، فان "البوب" هو ما يقرب من ≈ 20 ديسيبل SPL أكبر من صوت الخلفية كما هو مسجل بواسطة ميكروفون عالي التردد. ليست هناك حاجه للتحقق من صوت "البوب" إلى هذا الحد ، والتصور منظار القولون كافيه. وقد يحتاج المحقق إلى ممارسه ضمان الاستماع إلى "البوب" خلال كل عمليه من الإجراءات الخاصة بالشيلي.
  5. علي الفور فتح الربيع محمله الصغيرة مقص وتناوب ثلاث مرات بعد ثقب TM لضمان النزوح من رئيس مطرقه بعيدا عن TM (فقط إذا كان المطلوب النزوح مطرقه).
  6. أزاله مقص الصغيرة ووضع القوارض تحت منظار القولون لتصور.
    ملاحظه: من المهم ان نلاحظ انه لا ينبغي ان يحدث نزيف كبير بعد العملية الجراحية. موت ببطء القوارض ولا تنتقل إلى التقييم السلوكي إذا حدث نزيف.
  7. الحث علي الثنائية CHL عن طريق المضي قدما علي النحو المذكور أعلاه في الاذن المعاكس.

4. التصور منظار الرؤية

  1. تاكد من نجاح عمليه الجراحة التجميلية لل CHL مع منظار الاذن باستخدام منظار قطر صغير لتصور الأنف الوسطي القوارض.
  2. تقييم كل القوارض قبل وبعد العملية الجراحية CHL تحت منظار الرحم. ضمان التاكد من TM العادي (الشكل 2a) والتالفة tm بعد التعريفي CHL (الشكل 2a).
  3. الرعاية بعد العملية الجراحية لقارض
    1. وضع القوارض في قفص المنزل تحت مصباح دافئ.
    2. مراقبه القوارض بعد-CHL الحث حتى حقوق القوارض نفسها.
    3. حقن القوارض مع الجلوكوز (سكر العنب/المالحة) المصل لاستعاده الوعي ووضع القوارض في المنزل للتعافي.
      ملاحظه: استخدام ابره 23G مع حقنه 10 مل لحقن 5 مل من المحلول الملحي بعد جراحه CHL.
    4. حقن القوارض عن طريق العضلي مع انتيروفلوكساسين المضادة للبكتيريا 0.05 ملغ/كغ مرتين خلال 24 ح فتره الانتعاش.
    5. مراقبه القوارض بانتظام للألم السلوك أو الاعراض بعد الجراحة.

5. التقييم السلوكي (التحقق من الحث CHL)-التصفيق باغت الاستجابة

  1. تؤكد شيلي (بعد تاكيد المنظار) 24 ساعة بعد الجراحة مع التقييم السلوكي الذي يتكون من التصفيق-startle-اختبار.
  2. وضع الفئران المستحثة CHL بجانب الفئران العادية في اثنين من أقفاص منفصلة المجاورة.
  3. وضع القوارض في غرفه صامته.
  4. الوقوف حوالي 0.5 متر بعيدا عن القوارض والمضي قدما في التصفيق في فترات متباعدة علي قدم المساواة عددا من المرات (5 تم اختيار تصفيق ومتباعدة أكثر من 1 ثانيه).
    ملاحظه: التصفيق باغت التي تنتجها التصفيق اليد قياس ≈ 40 ديسيبل SPL أكبر من الصوت في الخلفية كما سجلت من قبل ميكروفون عالي التردد.

Subscription Required. Please recommend JoVE to your librarian.

Representative Results

أجريت الإجراءات البسيطة لل CHL علي 90 الفئران والخروج من هذه المجموعة 2 كان نزيف كبير و 2 لم يكن لديك فقدان السمع في اليوم التالي كما تقييمها التصفيق السلوكية startle. تم التخلص من هذه الفئران الاربعه. وينبغي التخلص من الفئران علي النحو الموصوف في الأسباب في المناقشة بسبب المضاعفات. الحث علي الثقب TM و/أو مطرقه الازاحه/الازاله (الشكل 2 ب) يثير chl ، والذي ينتج عنه مظاهر سلوكيه (اي انه لا يوجد اي رد علي الضوضاء العالية لديسيبل). يجب فحص الفئران من قبل منظار العين قبل الجراحة لضمان الغشاء الطبلي العادي وبعد الجراحة لضمان ثقب غشاء الطبل (الشكل 2; الشكل التكميلي 1). ملاحظه ، لا ينبغي ان يحدث نزيف أو التهاب كبير ( الشكلالتكميلي 2). و CHL المستحثة-القوارض لن تستجيب لصوت التصفيق عاليه ديسيبل SPL في حين ان السيطرة علي السمع القفص زميله سوف تقفز إلى التصفيق بصوت عال. ال [شل] فاره ليس صماء ان صوه, غير ان يتلقى [شل] ولذلك خفيه مظاهر سلوكيه تحدثت5. يتفاعل القوارض السمع التحكم بقوة مع قفزات إلى صوت عالي الوضوح SPL ، مثل التصفيق startle. القفزة/startle الاستجابة واضحة بوضوح في الفيديو من زميله قفص السمع ، في حين ان الفئران المستحثة CHL لا يستجيب. قد يكون سلوك الفئران CHL الدهاء. ونحن نظهر التصفيق العامة باغت منعكس لفار CHL ممثل ومراقبه الفئران السمع. مع مرور الوقت جراحه ما بعد CHL بعض الفئران قد تستعيد التصفيق باغت الاستجابة.

باستخدام الاجراء CHL ، الدراسات السابقة قد حققت في المظاهر العصبية لفقدان السمع. علي سبيل المثال ، تم تحديد درجه فقدان السمع بعد الاجراء عن طريق قياس الإمكانيات السمعية الناجمة15،16،17، تسجيلات النوافذ المستديرة4،18، و عتبات السمع السلوكية5. وقد درس النشاط العصبي بعد شيلي مع طريقه 2-ديكسيكسي الجلوكوز والتسجيلات الخلية الكاملة4,16,17. كما تم فحص نشاط العصب السمعي مع تسجيلات النوافذ المستديرة18. وقد درست عتبات الكشف عن التحوير التردد سلوكيا5. ومن الواضح ان هذا الاجراء الخاص بشيلي متوافق مع مجموعه واسعه من الأساليب التجريبية للدراسات التفصيلية لفقدان السمع.

Figure 1
الشكل 1: الاعداد الجراحي. ا) مكان القوارض في منطقه مضاءه جيدا مع مصباح الجراحية. تخدير القوارض. جعل مجموعه متنوعة من المقص الصغير ، إذا كان أصغر لا يعمل ، قد زوج أكبر ضمان الثقب TM. تاكد من ان منظار المعدة جاهز. ب) الربيع تحميل الصغيرة مقص. وسوف يكفي ملاقط إذا مجرب يمكن السيطرة علي فتح وإغلاق. يرجى النقر هنا لعرض نسخه أكبر من هذا الرقم. 

Figure 2
الشكل 2: الغشاء الطبلي التمثيلي. ا) غشاء الطبلي (TM) قبل ثقب. ب) TM بعد ثقب. عند القيام بعمليات تاكيد الثقب الخاصة ب CHL و TM مع منظار اليد ، فمن الضروري ان نلاحظ أولا رئيس مطرقه وبعد الحث CHL ، وأزاله ناجحه وثقب من TM. يرجى النقر هنا لعرض نسخه أكبر من هذا الرقم. 

معلومات تكميليه الشكل 1: قبل وبعد الجراحة التجميلية كما تصورها منظار اليد. التصور منظار الرؤية قبل وبعد عمليه الجراحية (فوري) في الفئران متطابقة. العمود الأيسر من الأرقام هي القناات السمعية الفئران التمثيلية تصور قبل الاجراء CHL عن طريق منظار الاذن مع TM العادية والوسطي ossicles. العمود الأيمن من الأرقام هي القناات السمعية الفئران التمثيلية تصور بعد الاجراء CHL بواسطة منظار الاذن مع ثقب TM والنازحين ossicles الأذان الوسطي. نزيف كبير يتكون من تراكم الدم في الاذنين. دراسة تشريح الاذن الوسطي من القوارض قبل تنفيذ الاجراء19,20,21,22,23,24,25, 26،27،28،29. وقد أجريت تصورات منظار الصدر بعد 24 ساعة من الجراحة. يرجى النقر هنا لتحميل هذا الرقم.

معلومات تكميليه الشكل 2: السيطرة وبعد القناة السمعية الفئران جراحه CHL كما تقييمها من قبل الانسجه. العرض النسيجي للاذن الوسطي في السيطرة وبعد جراحه CHL (بار = 500 μm). تمت معالجه القناات السمعية بواسطة الهييوكسيسين والايزين (H & E) والتلطيخ في ماسون (MT) في السيطرة و 24 ساعة بعد--CHL الجراحة. العمود الأيسر من الأرقام هي الأقسام النسيجية التمثيلية للقناه السمعية في الفئران السيطرة. العمود الأيمن من الأرقام هي الأقسام النسيجية التمثيلية من القناة السمعية بعد الاجراء CHL. لاحظ انه لا يحدث التهاب كبير بعد جراحه CHL. لم يلاحظ اي فرق ما يصل إلى أسبوع واحد. يرجى النقر هنا لتحميل هذا الرقم.

Subscription Required. Please recommend JoVE to your librarian.

Discussion

نحن وصف التحريض الجراحية بسيطه من CHL مع التحقق باستخدام التصور منظار القولون والسلوكية التصفيق باغت استجابه في الفئران. هنا نظهر الطريقة علي الفئران وسابقا تم تطبيق هذه الطريقة علي جربوع والفئران. يمكن بسهوله ان تعتمد الطريقة إلى القوارض الأخرى. التعريفي من CHL يسمح دراسة شكل خفيه من فقدان السمع الذي يتجلى في التعديلات القشرية السمعية والنتائج السلوكية بسيتشوفيسيكال4,5,16,17,18 .

ويمكن ان يعزي الإخفاق في الحث علي الدفع الشيلي إلى عده أسباب علي النحو المبين أدناه. في كل حاله ، نوصي بتجاهل الجرذ. موت ببطء الجرذ إذا كان أحد الأذان ينزف. النزيف يشير إلى ان المقص جعل الاتصال مع القناة السمعية والنهج الجراحي لم تكن نظيفه. خلاف ذلك ، فانه يمكن ان يعني ان ثقب كان أعمق من المفضل ، مما تسبب في اضرار داخلية ، وربما تلف في الدماغ. الضرر الداخلي يمكن ان يعني الادراج العميق أو خداع القناة السمعية. الاجراء هو الحد الأدنى الغازية غشاء الطبل و/أو أزاله مطرقه/النزوح; لذلك ، لا ينبغي ان يحدث نزيف كبير (الشكل التكميلي 1). إذا حدث نزيف كبير ، موت ببطء الجرذ. إذا لم يسمع صوت "البوب" خلال ثقب غشاء الطبل ، وهذا يمكن ان تشير إلى الفقراء CHL ، مما يعني ان المقص لم يجعل الاتصال المباشر مع غشاء الطبلي. تجاهل القوارض من المجموعة والموت ببطء. باستخدام منظار الاذن ، إذا كانت الرؤية البصرية تؤكد ان الأذان الوسطي تشبه اذني التحكم ، فان هذا يشير إلى ان الغشاء الطبلي لم يتم ثقبه. ولم يحدث اي من هذه النفايات ، ولذلك ينبغي التخلص من القوارض. إذا كان القوارض يستجيب لاختبار التصفيق والصوت ، يجب ان يتم تجاهله. إذا كانت القوارض المستحثة بالقفز أو يقفز بعد أصوات التصفيق ، علي غرار زميله في القفص ، وهذا يشير إلى ان العملية الجراحية لم تكن ناجحه. ويشير الرد علي صوت التصفيق إلى عدم حدوث اي من هذه الإشارات والي انه ينبغي التخلص من الجرذ أو رحيمه. ترتبط القيود المفروضة علي الحمل بواسطة النهج الجراحي بمنحني التعلم لاجراء العملية الجراحية والثقة في الفحص السمعي19،20،22،23، 27و28و29. وعلاوة علي ذلك ، لم يستخدم هذا البروتوكول ABR أو DPOAE لتقييم فقدان السمع15 من أجل إنشاء بروتوكول بسيط للعلماء غير المطلعين علي الإجراءات السمعية. ويمكن استخدام الإجراءات السمعية ABR و DPOAE للعلماء الذين يريدون مزيد من التقييم لل15CHL.

وهناك تعديل لهذه التقنية باستخدام ثقب TM مع الازاحه مطرقه. بالنسبة للمبتدئ قد يكون من الصعب إنشاء ، ولكن يتم تصور مطرقه بوضوح مع منظار الاذن في جميع أذان القوارض تقريبا. و TM هو غشاء ليفي مع مظهر التكوير الذي ينقل الضوء. الممارسة منظار القولون التحقق لإنشاء التصورمتسقةاستنادا إلى الأدبيات السابقة19،20،22،23،27،28،29 . بعد واحد واثق في التصور المطرقة ، وأكد بسهوله النزوح خلال الجراحة من قبل بصوت عال ' البوب ' كما يمكن سماعها في ≈ 2 دقيقه 52 s. هذا البوب هو تغيير عاليه الوضوح SPL في ملف الصوت من ما يقرب من 20 ديسيبل SPL قبل التواء من الربيع محمله المقص الصغير. البوب بصوت عال يؤكد ثقب TM والنجاح دون الاضرار القناة السمعية. يجب ان يتم تنفيذ جانبين من العملية الجراحية مع الرعاية: 1) ضمان وضع مقص الصغيرة في وسط القناة السمعية ، و 2) ضمان زاوية المقص الصغير موازيه مع القناة السمعية اثناء ثقب النزول. ضمان الحركة ثقب سريعة وتقريبا 5 مم الاتجاه الهبوطي من فتح القناة السمعية. تدوير وفتح مقص الصغرى لمطرقه النزوح إذا كان مرغوبا فيه.

الخطوات الرئيسية للبروتوكول CHL هي ضمان ثقب TM والتحقق من التصفيق السلوكية startle. ويؤكد ضمان التحقق من أزاله المطرقة/البزل الخاص بالعملية الخاصة بالنقل التي أجريت. ويتم التحقق من خلال الفحص الأوتوسكوبيك. الخطوات الحاسمة للتقييم السلوكي هي لضمان التصفيق بصوت عال بما فيه الكفاية ان القوارض هو الدهشة. وقد لوحظت اختلافات عندما يوضع الجرذ الشيلي في قفص مماثل كجرذ سمعي ؛ هنا ، وأذهل أحد الفئران من قبل الآخر ، حتى لو كان الجرذ لا يمكن سماع الصوت. وسوف الفئران الدهشة/القوارض في كثير من الأحيان القفز أو هوب ، ولكن هذا ليس معيارا. وكما يمكن ملاحظته ، فان الجرذ CHL لا ينتقل إلى التصفيق. منذ ثقب TM هو CHL ، قد تكون سمعت مستويات مختلفه من الأصوات SPL ديسيبل من قبل القوارض5.

والاهميه الاساسيه لهذه الطريقة البسيطة هي انه يمكن القيام بها من قبل مجموعه واسعه من الباحثين ، حتى مع موارد متواضعة فقط. يتم تنفيذ التحقق من فقدان السمع عن طريق التصور منظار القولون والسلوكية التصفيق باغت استجابه في الفئران. هنا نظهر الطريقة علي الفئران وسابقا تم تطبيق هذه الطريقة علي جربوع والفئران. يمكن بسهوله ان تعتمد الطريقة إلى القوارض الأخرى. التعريفي من CHL يسمح دراسة شكل خفيه من فقدان السمع الذي يتجلى في التعديلات القشرية السمعية والنتائج السلوكية بسيتشوفيسيكال4,5,16,17,18 ويمكن الجمع بين هذه التقنية الحالية مع الفيزيولوجيا الكهربية والتقنيات السلوكية لتحديد العواقب القشرية لفقدان السمع ، والتي هي ذات اهميه كبيره لبحوث فقدان السمع31.

Subscription Required. Please recommend JoVE to your librarian.

Disclosures

ولا يعلن أصحاب البلاغ عن تضارب مصالح مالية أو غير مالية.

Acknowledgments

وقد دعم هذا العمل جزئيا مجلس المنح البحثية في هونغ كونغ ، المخطط الوظيفي المبكر ، مشروع #21201217 إلى c. ل. ، لمشروع رسم خرائط الدماغ الكهربية الموجهة مع التطبيقات في السمع والضوضاء البحوث التلوث. ونشكر الرابطة الحيوية لجامعه مكسيكو الوطنية المستقلة (UNAM) ، ومعهد الدراسات العصبية الوطنية للمكسيك (CONACyT) ، والمكسيك لزمالة الخريجين 578458 إلى شركه فأم ماننو.

Materials

Name Company Catalog Number Comments
Latex, polyvinyl or nitrile gloves AMMEX Use unpowdered gloves 8-mil
Micro spring scissors (see Fig. 1b) RWD Life Science S11035-08 8.0 cm total length, with 3.5mm cutting edge, or similar micro forceps. Standard tweezers with spring action will suffice
Otoscope mini 3000 HEINE  D-008.70.120M Standard LED otoscope will suffice
Rat or mouse JAX labs Any small rodent 
Small rodent cage Tecniplast 1284L Need two cages to separate CHL rodent from hearing rodent. If rodents are in direct contact with one-another, they will startle each other. Cage dimensions 365 x 207 x 140 mm, floor area: 530 cm2/82.15 in2

DOWNLOAD MATERIALS LIST

References

  1. Shargorodsky, J., Curhan, S. G., Curhan, G. C., Eavey, R. Change in prevalence of hearing loss in US adolescents. The Journal of the American Medical Association. 304 (7), 772-778 (2010).
  2. Lucas, J. W., Schiller, J. S., Benson, V. Summary health statistics for U.S. adults: National health interview survey, 2001. National Center for Health Statistics. Vital and health statistics. 10 (218), 1-134 (2004).
  3. Gaffney, M., Green, D. R., Gaffney, C. Newborn hearing screening and follow-up: Aare children receiving recommended services? Public Health Reports. 125 (2), 199-207 (2010).
  4. Xu, H., Kotak, V. C., Sanes, D. H. Conductive hearing loss disrupts synaptic and spike adaptation in developing auditory cortex. The Journal of Neuroscience. 27 (35), 9417-9426 (2007).
  5. Buran, B. N., et al. A sensitive period for the impact of hearing loss on auditory perception. The Journal of Neuroscience. 34 (6), 2276-2284 (2014).
  6. Finck, A., Sofouglu, M. Auditory sensitivity of the Mongolian gerbil. The Journal of Auditory Research. 6, 313-319 (1966).
  7. Finck, A. Auditory sensitivity of the Mongolian Gerbil (Merionesunguiculatus). The Journal of the Acoustical Society of America. 41 (60), 1579 (1967).
  8. Finck, A., Schneck, C. D., Hartman, A. F. Jr Development of auditory function in the Mongolian gerbil. The Journal of the Acoustical Society of America. 46 (1A), 107 (1969).
  9. Ryan, A. Hearing sensitivity of the Mongolian gerbil, Meriones Unguiculatis. The Journal of the Acoustical Society of America. 59, 1222-1226 (1976).
  10. Dallos, P., Harris, D., Ozdamar, O., Ryan, A. Behavioral, compound action potential, and single unit thresholds: relationship in normal and abnormal ears. The Journal of the Acoustical Society of America. 64 (1), 151-157 (1978).
  11. Kelly, J. B., Potash, M. Directional responses to sounds in young gerbils (Meriones unguiculatus. Journal of Comparative Psychology. 100 (1), 37-45 (1986).
  12. Heffner, H. E., Koay, G., Heffner, R. S. Behavioral assessment of hearing in mice--conditioned suppression. Current Protocols in Neuroscience. , Chapter 8, Unit 8.21D (2006).
  13. Heffner, R. S., Koay, G., Heffner, H. E. Audiograms of five species of rodents: implications for the evolution of hearing and the perception of pitch. Hearing Research. 157 (1-2), 138-152 (2001).
  14. Lupo, E. J., Koka, K., Thornton, J. L., Tollin, D. J. The effects of experimentally induced conductive hearing loss on spectral and temporal aspects of sound transmission through the ear. Hearing Research. 272 (1-2), 30-41 (2011).
  15. Liberman, M. C., Liberman, L. D., Maison, S. F. Chronic conductive hearing loss leads to cochlear degeneration. PLoS One. 10 (11), e0142341 (2015).
  16. Tucci, D. L., Cant, N. B., Durham, D. Conductive hearing loss results in a decrease in central auditory system activity in the young gerbil. Laryngoscope. 109, 1359-1371 (1999).
  17. Tucci, D. L., Cant, N. B., Durham, D. Effects of conductive hearing loss on gerbil central auditory system activity in silence. Hearing Research. 155, 124-132 (2001).
  18. Cook, R. D., Hung, T. Y., Miller, R. L., Smith, D. W., Tucci, D. L. Effects of conductive hearing loss on auditory nerve activity in gerbil. Hearing Research. 164, 127-137 (2002).
  19. Albuquerque, A. A., Rossato, M., Oliveira, J. A., Hyppolito, M. A. Understanding the anatomy of ears from guinea pigs and rats and its use in basic otologic research. Brazilian Journal of Otorhinolaryngology. 75, 43-49 (2009).
  20. Li, P., Gao, K., Ding, D., Salvi, R. Characteristic anatomical structures of rat temporal bone. Journal of Otology. 10, 118-124 (2015).
  21. Judkins, R. F., Li, H. Surgical anatomy of the rat middle ear. Otolaryngology-Head and Neck Surgery. 117, 438-447 (1997).
  22. Hellström, S., Salén, B., Stenfors, L. E. Anatomy of the rat middle ear. A study under the dissection microscope. Acta Anatomica (Basel). 112, 346-352 (1982).
  23. Albiin, N., Hellström, S., Salén, B., Stenfors, L. E., Wirell, S. The vascular supply of the rat tympanic membrane. The Anatomical Record. 212, 17-22 (1985).
  24. Li, P., Ding, D., Gao, K., Salvi, R. Standardized surgical approaches to ear surgery in rats. Journal of Otology. 10, 72-77 (2015).
  25. Johansson, U., Hellström, S., Anniko, M. Round window membrane in serous and purulent otitis media. Structural study in the rat. Annals of Otology, Rhinology & Laryngology. 102, 227-235 (1993).
  26. Magnuson, K., Hellström, S. Early structural changes in the rat tympanic membrane during pneumococcal otitis media. European Archives of Oto-Rhino-Laryngology. 251, 393-398 (1994).
  27. Hellström, S., Salén, B., Stenfors, L. E. The site of initial production and transport of effusion materials in otitis media serosa. A study on rat middle ear cavity. Acta Oto-Laryngologica. 93, 435-440 (1982).
  28. Shen, Y., et al. Scaffolds for tympanic membrane regeneration in rats. Tissue Engineering Part A. 19, 657-668 (2013).
  29. Wang, A. Y., et al. Rat model of chronic tympanic membrane perforation: Ventilation tube with mitomycin C and dexamethasone. International Journal of PediatricOtorhinolaryngology. 80, 61-68 (2016).
  30. Stenfeldt, K., Johansson, C., Hellström, S. The collagen structure of the tympanic membrane: collagen types I, II, and III in the healthy tympanic membrane, during healing of a perforation, and during infection. Archives of Otolaryngology--Head & Neck Surgery. 132, 293-298 (2006).
  31. Zhao, H., et al. Temporary conductive hearing loss in early life impairs spatial memory of rats in adulthood. Brain and Behavior. 8, e01004 (2018).

Tags

العلوم العصبية ، الإصدار 152 ، فقدان السمع موصل ، منظار القولون ، السلوكية التصفيق باغت استجابه ، القوارض ، ثقب غشاء الطبل ، أزاله مطرقه/النزوح
الحث الجراحي بسيطه لفقدان السمع موصل مع التحقق باستخدام التصور منظار الرؤية والسلوكية التصفيق Startle الاستجابة في الفئران
Play Video
PDF DOI DOWNLOAD MATERIALS LIST

Cite this Article

Manno, F. A. M., Manno, S. H. C.,More

Manno, F. A. M., Manno, S. H. C., Ma, V., Barrios, F. A., Cho, W. C., Cheng, S. H., Lau, C. Simple Surgical Induction of Conductive Hearing Loss with Verification Using Otoscope Visualization and Behavioral Clap Startle Response in Rat. J. Vis. Exp. (152), e57993, doi:10.3791/57993 (2019).

Less
Copy Citation Download Citation Reprints and Permissions
View Video

Get cutting-edge science videos from JoVE sent straight to your inbox every month.

Waiting X
Simple Hit Counter