Waiting
Login processing...

Trial ends in Request Full Access Tell Your Colleague About Jove
Click here for the English version

Neuroscience

Простая хирургическая индукция кондуктивной потери слуха с проверкой с использованием Otoscope Визуализация и поведенческие хлопать Startle ответ на крысы

Published: October 26, 2019 doi: 10.3791/57993
* These authors contributed equally

Summary

Здесь мы представляем протокол для создания репликативной кондуктивной индукции потери слуха через хирургический проколов ывана барабанная перепончатость и проверки по otoscope визуализации и поведенческой оценки хлопать startle.

Abstract

Кондуктивная потеря слуха (CHL) является распространенным нарушением слуха у людей. Целью протокола является описание простой хирургической процедуры для индуцирования КХЛ у грызунов. Протокол демонстрирует КХЛ по переплету барабанной оболочки. Проверка хирургии КХЛ была otoscope обследования и поведенческой оценки хлопать startle ответ, как репликати и надежные, и простые методы, чтобы продемонстрировать потерю слуха произошло. Простая процедура CHL выгодна из-за ее воспроизводимости и гибкости для различных занятий в исследовании потери слуха. Ограничения индуцирования CHL хирургическим подходом связаны с кривой обучения для выполнения хирургической процедуры и уверенностью в аудиологическом обследовании. Индуцирование нарушения слуха ч. 4 м. позволяет легко изучать нервные проявления и поведенческие исходы потери слуха.

Introduction

Распространенность потери слуха у детей и взрослых составляет примерно 19,5%1 и 15,2%соответственно. Тем не менее, примерно 39,3% всех новорожденных с ненормальным скринингслух не получают лечения, как сообщили Центры по контролю заболеваний3. Потеря слуха является широко изученным состоянием, и грызун является надежной моделью для изучения нормальных нарушений слуха и слуха4,5,6,7,8,9 ,10,11,12,13,14,15. Слуховые расстройства, такие как кондуктивная потеря слуха (CHL) приводят к увеличению краткосрочной синаптической депрессии в слуховой коре4, что приводит к более мелким психометрическим склонам, связанным с порогами обнаружения частотной модуляции 5. Кондуктивные модели потери слуха путем хирургического удаления /смещения Malleus, тимпанической мембраны (TM) прокол или затычка для ушей легко используются и позволяют быстро индукции модели потери слуха5,14 ,15,16,17,18. Целью настоящего протокола и метода является демонстрация простой и воспроизводимой модели КХЛ у грызунов.

Настоящий протокол является недорогим (300 долларов США со всеми инструментами), и легко изменить для различных исследований. Крыса была подробная оценка анатомии среднего уха19,20,21,22,23, хирургические подходы24, модели в отит СМИ25, 26,27 и ТМ прокол регенерации16,17,18,28,29,30, что делает его идеальной моделью для изучения потеря слуха. Здесь, простая процедура индукции CHL описана с проверкой otoscope и поведенческой оценкой с реакцией хлопать startle в крысе, которая после этого может быть использована для того чтобы исследовать дополнительные sequelae потери слуха. Процедура КХЛ индуцируется хирургическим проколом ТМ. Проверка процедуры КХЛ осуществляется с помощью визуализации отоскопа для определения отсутствия ТМ. Поведенческая оценка осуществляется высоким уровнем децибел (dB) уровня звукового давления (SPL) ручной хлопок. Этот метод был применен ранее в различных грызунов. Легко размножается, производит надежные психометрические различия и изменения в нервных физиологических реакциях4,5,16,17,18.

Subscription Required. Please recommend JoVE to your librarian.

Protocol

Настоящее исследование и процедуры были одобрены комитетами по этике исследований в отношении животных Городского университета Гонконга, Университета Гонконга и Департамента здравоохранения Специального административного района Гонконга.

1. Звери

  1. Используйте Крысы Sprague-Dawley (SD) двухмесячных (N 90, 200-250 г).
    ПРИМЕЧАНИЕ: Грызуны были предоставлены аккредитованным лабораторным отделом животных Университета Гонконга.
  2. Поддерживайте крыс при постоянной температуре 25 градусов по Цельсию и 60-70% влажности в Отделе лабораторных исследований животных.
  3. Дом грызунов в 12/12-h свет / темные циклы с доступом к пище и питьевой воде, объявление libitum.
  4. Акклиматизировать грызунов к жилой среде, по крайней мере за один день до операции КХЛ.
  5. Возьмите грызуна по шерсти и анестезируйте грызуна коктейлем из кетамина и ксилазина (80-100 мг/кг: 5-10 мг/кг соответственно) с помощью интраперитонеальной инъекции (смешайте 1,0 мл кетамина с 0,5 мл ксилазина в качестве конечной концентрации).
    ПРИМЕЧАНИЕ: Используйте 1 мл шприца с иглой 23-25G. Вводят около 0,2 мл на 100 г массы тела крысы в течение 30 минут анестезии.
  6. Выполните щепотку ног, чтобы проверить ощущение боли и подтвердить правильную анестезию. Реакция на глубокий щепотку ног (путем снятия задней конечности) указывает на недостаточную анестезию.

2. Хирургическая установка

  1. Стерилизовать все оборудование в автоклавили или горячего стекла стерилизатора перед началом операции. Очистите хирургическую область с 70% этанола.
  2. Используйте латексные перчатки и лабораторное пальто перед началом процедуры.
  3. Поместите стерильную хирургическую драпировку на чистую скамейку(рисунок 1A).
  4. Стерилизовать микро-ножницы и отоскоп до операции, чтобы свести к минимуму инфекции уха(рисунок 1B).
  5. Поместите микро-ножницы и отоскоп в стерильной области.
  6. Поместите грызунов в хирургическое поле и в соответствие с хирургом.
  7. Продолжить хирургическую индукцию КХЛ.

3. Хирургическая индукция кондуктивной потери слуха

  1. Поместите хвост и голову грызуна выровнены в склонном положении, голову ближе к хирургу.
  2. Визуализируйте левое и правое ухо грызуна под отоскопом для обеспечения здоровой барабанной перепонки(рисунок 2а). Оцените как правое, так и левое ухо каждого грызуна, чтобы проверить состояние здоровья до индукции КХЛ.
  3. Захватите ушную спирали и расширить внешний слуховой канал (т.е. ушной канал, внешний слуховой meatus, здесь слуховой канал), чтобы вызвать внутри, чтобы стать скрытыми и почернели от глубины. Здесь слуховой канал выполнен перпендикулярно поверхности ТМ.
    ПРИМЕЧАНИЕ: Убедитесь, что слуховая каннеля прямо параллель сейчас и Tm формирует правильный угол с оси вставки микро-ножницы. Он будет визуализироваться как черная трубка без света. Иногда слуховой канал должен быть наклонен под небольшим углом, примерно на 15 градусов по плановой поверхности черепа. Это гарантирует, что рука хирурга перпендикулярна поверхности ТМ.
  4. Введите микро-ножницы в центре слухового канала обращая внимание не обезжиренное или ник ткани слухового канала и продолжить слегка, примерно 5 мм от центра безвестности, толкая вперед мягко через центр ТМ.
    ПРИМЕЧАНИЕ: ТМ прокол может быть подтверждена поп-звук, когда микро-ножницы советы прокол ТМ. Появляются звук можно услышать примерно на 2 мин 52 с в видео. Это не звук ножниц; это звук прокола ТМ. Как измеряется после анализа, "поп" составляет примерно 20 дБ SPL больше, чем фоновый звук, записанный высокочастотным микрофоном. Нет необходимости проверять "поп" звук до такой степени, достаточно визуализации отоскопа. Следователь, возможно, потребуется на практике обеспечения "поп" слышал во время каждой процедуры КХЛ.
  5. Немедленно откройте пружинные микроножницы и поверните три раза после прокола ТМ, чтобы обеспечить перемещение головы маллеуса от ТМ (только при желании смещения malleus).
  6. Удалите микро-ножницы и поместите грызуна под отоскоп для визуализации.
    ПРИМЕЧАНИЕ: Важно отметить, что после хирургической процедуры не должно происходить значительного кровотечения. Эвтанизировать грызунов и не приступайте к поведенческой оценке, если кровотечение происходит.
  7. Побудить двустороннюю КХЛ, продолжая, как выше, в противоположном ухе.

4. Визуализация отоскопа

  1. Подтвердите успешную операцию КХЛ с помощью speculum малого диаметра для визуализации среднего уха грызунов.
  2. Оцените каждого грызуна до и после хирургической процедуры CHL под отоскопом. Обеспечить подтверждение нормального ТМ(рисунок 2a)и поврежденных ТМ после индукции CHL(рисунок 2b).
  3. Послеоперационный уход за грызунами
    1. Поместите грызуна в домашнюю клетку под теплую лампу.
    2. Наблюдайте за индукцией грызунов после КХЛ до тех пор, пока грызун не не удосучится.
    3. Введите грызунов с глюкозой (декстроза / солиной) сыворотки для восстановления сознания и место грызунов в домашней клетке для восстановления.
      ПРИМЕЧАНИЕ: Используйте 23G иглу с шприцем 10 мл, чтобы ввести 5 мл сольственного раствора после операции КХЛ.
    4. Вводят грызунов через внутримышечный с антибактериальным Энрофлоксацин 0,05 мг/кг дважды в течение 24 ч период восстановления.
    5. Регулярно наблюдайте за грызунами при болевом поведении или симптомах после операции.

5. Поведенческая оценка (проверка индукции КХЛ) - ответ на хлопок

  1. Корроборат КХЛ (после подтверждения отоскопа) 24 ч после операции с поведенческой оценки, состоящей из хлопать-старт-тест.
  2. Поместите крысу, индуцированную КХЛ, рядом с обычной крысой в две отдельные смежные клетки.
  3. Поместите грызунов в тихую комнату.
  4. Встаньте примерно на 0,5 м от грызунов и приступайте к хлопанию в одинаково расставленных длительности несколько раз (5 хлопков были выбраны и расположены более 1 секунды).
    ПРИМЕЧАНИЕ: Хлопок испуг производства хлопать в ладоши измеряется 40 дБ SPL больше, чем фоновый звук, как записано высокочастотным микрофоном.

Subscription Required. Please recommend JoVE to your librarian.

Representative Results

Простая процедура CHL была выполнена на 90 крыс и из этой группы 2 было значительное кровотечение и 2 не имеют потери слуха на следующий день, как оценивается поведенческие хлопок startle. Эти четыре крысы были отброшены. Крысы должны быть отброшены, как описано в причинах в обсуждении из-за осложнений. Индуцирование ТМ прокола и /или маллеуса смещения / удаления(рисунок 2B)вызывает CHL, что приводит к поведенческим проявлениям (т.е. CHL - нет ответа на громкий dB SPL поразительство). Крысы должны быть проверены отоскопом перед операцией, чтобы обеспечить нормальную барабанную перепотака и после операции, чтобы обеспечить прокол барабанной перепонки(рисунок 2; Дополнительная диаграмма 1). Обратите внимание, что кровотечения или значительного воспаления не должно происходить(Дополнительная диаграмма 2). CHL индуцированных грызунов не будет реагировать на громкий звук dB SPL хлопать в то время как контроль слух абонемента будет прыгать на громкий хлопок. КХЛ крыса не глуха к звуку, но имеет КХЛ и, следовательно, тонкие поведенческие проявления происходят5. Контроль слуха грызунов энергично реагирует с прыжками на громкий звук dB SPL, такие как хлопок испуг. Прыжок / старт ответ хорошо виден на видео из слуховой клетки мат, в то время как КХЛ индуцированной крысы не реагирует. Поведение для крысы КХЛ может быть тоньше. Мы демонстрируем общий хлопок испуга рефлекс для представителя КХЛ крысы и контроля слуха крысы. Со временем после операции CHL некоторые крысы могут восстановить хлопок испуга ответ.

Используя процедуру КХЛ, более ранние исследования исследовали нервные проявления потери слуха. Например, степень потери слуха после процедуры была количественно путем измерения слуховых вызванных потенциалов15,16,17, круглые записи окна4,18, и поведенческие пороги слуха5. Нейронная активность после CHL была изучена с помощью метода 2-дезоксиглюкозы и цельноклеточных записей4,16,17. Слуховая нервная активность также была изучена с круглыми записями окна18. Пороги обнаружения частоты модуляции были изучены поведенчески5. Эта процедура КХЛ явно совместима с широким спектром экспериментальных методов детального изучения потери слуха.

Figure 1
Рисунок 1: Хирургическая установка. A) Поместите грызунов в хорошо освещенную область с хирургической лампой. Анестезия грызуна. Приготовьтесь ассортимент микро-ножниц, если самый маленький не работает, большая пара может обеспечить прокол ТМ. Убедитесь, что отоскоп готов. B) Весной загружены микро-ножницы. Пинцеты будет достаточно, если экспериментатор может контролировать открытие и закрытие. Пожалуйста, нажмите здесь, чтобы просмотреть большую версию этой цифры. 

Figure 2
Рисунок 2: Представитель барабанной перепонки. A) Тимпаническая мембрана (ТМ) до прокола. B) ТМ после прокола. При выполнении подтверждения прокола КХЛ и ТМ с помощью отоскопа необходимо сначала отметить главу маллея, а после индукции КХЛ, успешное удаление и прокол ТМ. Пожалуйста, нажмите здесь, чтобы просмотреть большую версию этой цифры. 

Дополнительная информация Рисунок 1: До и после операции КХЛ, как визуализировано отоскопом. Визуализа otoscope до и после операции CHL (немедленно) в идентичных крысах. Левая колонка фигур являются репрезентативными крысиными слуховыми каналами, визуализированными перед процедурой CHL отоскопом с нормальными тМ и осиками среднего уха. Правой колонной фигур являются репрезентативные крысиные слуховые каналы, визуализированные после процедуры CHL отоскопом с проколотым ТМ и смещенными лобками среднего уха. Значительное кровотечение состоит из накопления крови в ушах. Изучение анатомии среднего уха грызунов перед выполнением процедуры19,20,21,22,23,24,25, 26,27,28,29. Визуализация отоскопа была проведена через 24 часа после операции. Пожалуйста, нажмите здесь, чтобы загрузить эту цифру.

Дополнительная информация Рисунок 2: Контроль и после операции КХЛ крысиный слуховой канал, как оценивается гистологией. Гистологический вид среднего уха в контроле и после операции КХЛ (Бар No 500 мкм). Слуховые каналы были обработаны гематоксилин и эозин (H и E) и Массон в трихром (МТ) окрашивания в контроль и 24 часов после операции CHL. Левая колонна фигур являются репрезентативными гистологическими участками слухового канала в контрольных крысах. Правая колонна фигур - репрезентативные гистологические участки слухового канала после процедуры КХЛ. Обратите внимание, что после операции КХЛ значительного воспаления не возникает. Никакой разницы не было замечено до одной недели. Пожалуйста, нажмите здесь, чтобы загрузить эту цифру.

Subscription Required. Please recommend JoVE to your librarian.

Discussion

Мы описываем простую хирургическую индукцию КХЛ с проверкой с использованием визуализации отоскопа и поведенческой реакции хлопания у крыс. Здесь мы демонстрируем метод на крысах и ранее этот метод был применен к песчанки и мышей. Этот метод может быть легко принят к другим грызунам. Индукция КХЛ позволяет изучать тонкую форму потери слуха, которая проявляется в слуховых корковых изменениях и психофизических поведенческих выводах4,5,16,17,18 .

Неспособность побудить КХЛ может быть связано с несколькими причинами, перечисленными ниже. В каждом случае мы рекомендуем отказаться от крысы. Эвтаназии крысу, если один из ушей кровоточит. Кровотечение указывает на то, что ножницы соприкоснулись со слуховым каналом, и хирургический подход не был чистым. В противном случае, это может означает, что прокол был глубже, чем предпочтительным, вызывая внутреннее повреждение, возможно, повреждение мозга. Внутреннее повреждение может означать глубокую вставку или упор слухового канала. Процедура представляет собой минимально инвазивную барабанную перепонку и/или удаление/перемещение маллеуса; поэтому, никаких значительных кровотечений не должно произойти(Дополнительная рисунок 1). Если происходит значительное кровотечение, усыпление крысы. Если во время прокола барабанной перепонки не слышно «поп-музыки», это может свидетельствовать о плохой КХЛ, а это значит, что ножницы не ввязывались в прямой контакт с барабанной перепонки. Выбросить грызуна из группы и усыпать. Использование отоскопа, если визуализация подтверждает, что среднее ухо похоже на контрольные уши, это указывает на то, что барабанная перепочка не была проколона. Никакая CHL не была наведена и поэтому грызун должен быть отброшен. Если грызун реагирует на хлопок-звуковой тест, он должен быть отброшен. Если CHL индуцированных грызунов прыжки или прыжки после хлопать звуки, похожие на его клетке мат, это указывает на хирургическую процедуру не была успешной. Ответ на хлопок звук указывает на отсутствие CHL произошло, и крыса должна быть отброшена или эвтаназии. Ограничения индуцирования CHL хирургическим подходом связаны с кривой обучения для выполнения хирургической процедуры и уверенностью в аудиологическом обследовании19,20,22,23, 27,28,29. Кроме того, этот протокол не использовал ABR или DPOAE для оценки потери слуха15 для того, чтобы установить простой протокол для ученых, незнакомых с аудиологическими процедурами. Аудиологические процедуры ABR и DPOAE могут быть использованы для ученых, которые хотят дальнейшей оценки CHL15.

Модификация техники использует тМ прокол с маллеусом смещения. Для новичка это может быть трудно установить, но malleus ясно визуализирован с отоскопом почти во всех ушах грызунов. ТМ представляет собой волокнистую мембрану с пеллюцидным внешним видом, который передает свет. Практика проверки отоскопа для установления последовательной визуализации на основе предыдущей литературы19,20,22,23,27,28,29 . После того, как один уверен в визуализации Malleus, его перемещение во время операции легко подтверждается громким "поп", как можно услышать на 2 мин 52 с. Эта поп-музыка является громким dB SPL изменения в аудио файл примерно 20 дБ SPL до скручивания пружинных микро-ножницы. Громкий поп подтверждает ТМ прокол и успех, не повреждая слуховой канал. Два аспекта хирургической процедуры должны быть выполнены с осторожностью: 1) обеспечить микро-ножницы помещаются в центре слухового канала, и 2) обеспечить угол микро-ножницы параллельно слухового канала во время нисходящего прокола. Убедитесь, что движение прокола быстро ежевидно и примерно на 5 мм вниз тяги от открытия слухового канала. Поверните и откройте микро-ножницы для смещения malleus если желательно.

Ключевыми шагами протокола КХЛ являются обеспечение прокола ТМ и проверка поведенческого хлопка. Обеспечение проверки удаления моллеуса/прокола ТМ подтверждает, что КХЛ была выполнена. Проверка проводится с помощью отоскопической экспертизы. Критические шаги для поведенческой оценки, чтобы обеспечить достаточно громкий хлопок, что грызун поражен. Различия были отмечены, когда кхл крыса помещается в аналогичную клетку, как слухкрыса; здесь, одна крыса поражена другой, даже если крыса не может слышать звук. Пораженный крысы / грызунов часто прыгать или прыгать, но это не критерий. Как можно наблюдать, кхла крыса не переходит в хлопок. Так как прокол ТМ является CHL, различные уровни db SPL звуки могут быть услышаны грызунов5.

Основное значение этого простого метода КХЛ заключается в том, что он может быть выполнен широким кругом исследователей, даже при скромных ресурсах. Проверка потери слуха осуществляется с помощью визуализации отоскопа и поведенческой реакции хлопать испуга у крыс. Здесь мы демонстрируем метод на крысах и ранее этот метод был применен к песчанки и мышей. Этот метод может быть легко принят к другим грызунам. Индукция КХЛ позволяет изучать тонкую форму потери слуха, которая проявляется в слуховых корковых изменениях и психофизических поведенческих выводах4,5,16,17,18 Настоящий метод может быть объединен с электрофизиологией и поведенческими методами для определения корковых последствий потери слуха, что представляет большой интерес для исследования потери слуха31.

Subscription Required. Please recommend JoVE to your librarian.

Disclosures

Авторы не заявляют о каких-либо финансовых или нефинансовых конфликтах интересов.

Acknowledgments

Эта работа была частично поддержана Гонконгнаучной гранты Совета, Ранняя карьера Схема, проект #21201217 К. Л., для проекта мозга картирования управляемой электрофизиологии с приложениями в области слуха и исследования шумового загрязнения. Мы благодарим Посградо ан Сьенсиас Биомидикас, Институт нейробиологии Национального университета Aut'noma де Мексика (УНАМ), Consejo Nacional де Ciencia у Tecnologa (ConACyT) Мексика для аспирантов 578458 в FAM.

Materials

Name Company Catalog Number Comments
Latex, polyvinyl or nitrile gloves AMMEX Use unpowdered gloves 8-mil
Micro spring scissors (see Fig. 1b) RWD Life Science S11035-08 8.0 cm total length, with 3.5mm cutting edge, or similar micro forceps. Standard tweezers with spring action will suffice
Otoscope mini 3000 HEINE  D-008.70.120M Standard LED otoscope will suffice
Rat or mouse JAX labs Any small rodent 
Small rodent cage Tecniplast 1284L Need two cages to separate CHL rodent from hearing rodent. If rodents are in direct contact with one-another, they will startle each other. Cage dimensions 365 x 207 x 140 mm, floor area: 530 cm2/82.15 in2

DOWNLOAD MATERIALS LIST

References

  1. Shargorodsky, J., Curhan, S. G., Curhan, G. C., Eavey, R. Change in prevalence of hearing loss in US adolescents. The Journal of the American Medical Association. 304 (7), 772-778 (2010).
  2. Lucas, J. W., Schiller, J. S., Benson, V. Summary health statistics for U.S. adults: National health interview survey, 2001. National Center for Health Statistics. Vital and health statistics. 10 (218), 1-134 (2004).
  3. Gaffney, M., Green, D. R., Gaffney, C. Newborn hearing screening and follow-up: Aare children receiving recommended services? Public Health Reports. 125 (2), 199-207 (2010).
  4. Xu, H., Kotak, V. C., Sanes, D. H. Conductive hearing loss disrupts synaptic and spike adaptation in developing auditory cortex. The Journal of Neuroscience. 27 (35), 9417-9426 (2007).
  5. Buran, B. N., et al. A sensitive period for the impact of hearing loss on auditory perception. The Journal of Neuroscience. 34 (6), 2276-2284 (2014).
  6. Finck, A., Sofouglu, M. Auditory sensitivity of the Mongolian gerbil. The Journal of Auditory Research. 6, 313-319 (1966).
  7. Finck, A. Auditory sensitivity of the Mongolian Gerbil (Merionesunguiculatus). The Journal of the Acoustical Society of America. 41 (60), 1579 (1967).
  8. Finck, A., Schneck, C. D., Hartman, A. F. Jr Development of auditory function in the Mongolian gerbil. The Journal of the Acoustical Society of America. 46 (1A), 107 (1969).
  9. Ryan, A. Hearing sensitivity of the Mongolian gerbil, Meriones Unguiculatis. The Journal of the Acoustical Society of America. 59, 1222-1226 (1976).
  10. Dallos, P., Harris, D., Ozdamar, O., Ryan, A. Behavioral, compound action potential, and single unit thresholds: relationship in normal and abnormal ears. The Journal of the Acoustical Society of America. 64 (1), 151-157 (1978).
  11. Kelly, J. B., Potash, M. Directional responses to sounds in young gerbils (Meriones unguiculatus. Journal of Comparative Psychology. 100 (1), 37-45 (1986).
  12. Heffner, H. E., Koay, G., Heffner, R. S. Behavioral assessment of hearing in mice--conditioned suppression. Current Protocols in Neuroscience. , Chapter 8, Unit 8.21D (2006).
  13. Heffner, R. S., Koay, G., Heffner, H. E. Audiograms of five species of rodents: implications for the evolution of hearing and the perception of pitch. Hearing Research. 157 (1-2), 138-152 (2001).
  14. Lupo, E. J., Koka, K., Thornton, J. L., Tollin, D. J. The effects of experimentally induced conductive hearing loss on spectral and temporal aspects of sound transmission through the ear. Hearing Research. 272 (1-2), 30-41 (2011).
  15. Liberman, M. C., Liberman, L. D., Maison, S. F. Chronic conductive hearing loss leads to cochlear degeneration. PLoS One. 10 (11), e0142341 (2015).
  16. Tucci, D. L., Cant, N. B., Durham, D. Conductive hearing loss results in a decrease in central auditory system activity in the young gerbil. Laryngoscope. 109, 1359-1371 (1999).
  17. Tucci, D. L., Cant, N. B., Durham, D. Effects of conductive hearing loss on gerbil central auditory system activity in silence. Hearing Research. 155, 124-132 (2001).
  18. Cook, R. D., Hung, T. Y., Miller, R. L., Smith, D. W., Tucci, D. L. Effects of conductive hearing loss on auditory nerve activity in gerbil. Hearing Research. 164, 127-137 (2002).
  19. Albuquerque, A. A., Rossato, M., Oliveira, J. A., Hyppolito, M. A. Understanding the anatomy of ears from guinea pigs and rats and its use in basic otologic research. Brazilian Journal of Otorhinolaryngology. 75, 43-49 (2009).
  20. Li, P., Gao, K., Ding, D., Salvi, R. Characteristic anatomical structures of rat temporal bone. Journal of Otology. 10, 118-124 (2015).
  21. Judkins, R. F., Li, H. Surgical anatomy of the rat middle ear. Otolaryngology-Head and Neck Surgery. 117, 438-447 (1997).
  22. Hellström, S., Salén, B., Stenfors, L. E. Anatomy of the rat middle ear. A study under the dissection microscope. Acta Anatomica (Basel). 112, 346-352 (1982).
  23. Albiin, N., Hellström, S., Salén, B., Stenfors, L. E., Wirell, S. The vascular supply of the rat tympanic membrane. The Anatomical Record. 212, 17-22 (1985).
  24. Li, P., Ding, D., Gao, K., Salvi, R. Standardized surgical approaches to ear surgery in rats. Journal of Otology. 10, 72-77 (2015).
  25. Johansson, U., Hellström, S., Anniko, M. Round window membrane in serous and purulent otitis media. Structural study in the rat. Annals of Otology, Rhinology & Laryngology. 102, 227-235 (1993).
  26. Magnuson, K., Hellström, S. Early structural changes in the rat tympanic membrane during pneumococcal otitis media. European Archives of Oto-Rhino-Laryngology. 251, 393-398 (1994).
  27. Hellström, S., Salén, B., Stenfors, L. E. The site of initial production and transport of effusion materials in otitis media serosa. A study on rat middle ear cavity. Acta Oto-Laryngologica. 93, 435-440 (1982).
  28. Shen, Y., et al. Scaffolds for tympanic membrane regeneration in rats. Tissue Engineering Part A. 19, 657-668 (2013).
  29. Wang, A. Y., et al. Rat model of chronic tympanic membrane perforation: Ventilation tube with mitomycin C and dexamethasone. International Journal of PediatricOtorhinolaryngology. 80, 61-68 (2016).
  30. Stenfeldt, K., Johansson, C., Hellström, S. The collagen structure of the tympanic membrane: collagen types I, II, and III in the healthy tympanic membrane, during healing of a perforation, and during infection. Archives of Otolaryngology--Head & Neck Surgery. 132, 293-298 (2006).
  31. Zhao, H., et al. Temporary conductive hearing loss in early life impairs spatial memory of rats in adulthood. Brain and Behavior. 8, e01004 (2018).

Tags

Неврология Выпуск 152 Кондуктивная потеря слуха Отоскоп Поведенческий хлопок испуг ответ грызун Тимпади мембраны прокол Удаление Malleus / перемещение
Простая хирургическая индукция кондуктивной потери слуха с проверкой с использованием Otoscope Визуализация и поведенческие хлопать Startle ответ на крысы
Play Video
PDF DOI DOWNLOAD MATERIALS LIST

Cite this Article

Manno, F. A. M., Manno, S. H. C.,More

Manno, F. A. M., Manno, S. H. C., Ma, V., Barrios, F. A., Cho, W. C., Cheng, S. H., Lau, C. Simple Surgical Induction of Conductive Hearing Loss with Verification Using Otoscope Visualization and Behavioral Clap Startle Response in Rat. J. Vis. Exp. (152), e57993, doi:10.3791/57993 (2019).

Less
Copy Citation Download Citation Reprints and Permissions
View Video

Get cutting-edge science videos from JoVE sent straight to your inbox every month.

Waiting X
Simple Hit Counter