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Medicine

La generación de fracturas femorales cerradas en ratones: un modelo para el estudio del hueso curativo

Published: August 16, 2018 doi: 10.3791/58122

Summary

El modelo murino fractura cerrada de fémur es una poderosa plataforma para el estudio de fracturas y nuevas estrategias terapéuticas para acelerar la regeneración ósea. El objetivo de este protocolo quirúrgico es generar fracturas femorales cerradas unilaterales en ratones con una varilla intramedular de acero para estabilizar el fémur.

Abstract

Fracturas óseas imponen una tremenda carga socio-económica en pacientes, además de afectar de manera significativa su calidad de vida. Estrategias terapéuticas que promueven la cicatrización ósea eficiente son inexistentes y en alta demanda. Modelos animales eficaces y reproducibles de curación de las fracturas son necesarios para entender los complejos procesos biológicos asociados a la regeneración del hueso. Muchos modelos animales de curación de fractura se han generado durante los años; sin embargo, modelos murinos fractura recientemente han surgido como poderosas herramientas para el estudio de cicatrización ósea. Se han desarrollado una variedad de modelos abiertos y cerrados, pero el modelo de fractura cerrada de fémur se caracteriza por ser un método sencillo para generar resultados rápidos y reproducibles de manera fisiológicamente relevante. El objetivo de este protocolo quirúrgico es generar fracturas femorales cerradas unilaterales en ratones y facilitar una estabilización de la fractura del fémur mediante la inserción de una varilla intramedular de acero. Aunque los dispositivos tales como un clavo o un tornillo ofrecen una mayor estabilidad axial y rotacional, el uso de una varilla intramedular proporciona una suficiente estabilización consistentes resultados curativos sin producir nuevos defectos en el tejido óseo o dañar cerca suave tejido. Proyección de imagen radiográfica se utiliza para supervisar la progresión de la formación de callo ósea Unión y posterior remodelación del callo óseo. Resultados curación ósea son típicamente asociados con la fuerza del hueso sanado y medidos con pruebas de torsión. Aún, comprender el tempranos eventos celulares y moleculares asociados con la reparación de la fractura es fundamental en el estudio de la regeneración del tejido óseo. El modelo de fractura cerrada de fémur en ratones con fijación intramedular sirve como una plataforma atractiva para estudiar hueso fractura cura y evaluar estrategias terapéuticas para acelerar la curación.

Introduction

Fracturas son las lesiones más comunes que ocurren en el sistema músculo-esquelético y se asocian con una enorme carga socioeconómica, incluyendo los costos de tratamiento que se prevé para superar los $ 25 billones al año en los Estados Unidos1, 2. Aunque la mayoría de las fracturas cura sin incidente, curación se asocia con considerable tiempo de inactividad y pérdida de productividad. Aproximadamente 5-10% de todas las fracturas de resultar en un retraso cicatrización o no sindicalizados, debido a la edad u otras condiciones crónicas de salud subyacentes, tales como osteoporosis y diabetes mellitus3,4,5. No hay tratamientos farmacológicos aprobados por la FDA están disponibles actualmente para promover la curación ósea eficiente y acortar el tiempo de recuperación.

La curación de la fractura es un proceso complejo y altamente dinámico que involucra la coordinación de múltiples tipos de células. Por lo tanto, una comprensión global de los acontecimientos celulares y moleculares asociados con la regeneración ósea es crucial para la identificación de dianas terapéuticas que aceleran este proceso. Como con otras enfermedades humanas, el establecimiento de un modelo animal muy dócil y reproducible es crucial en el estudio de la curación del hueso. Animales más grandes, como ovejas y cerdos, propiedades de remodelación ósea y la biomecánica similar a los seres humanos, pero son caros, requieren mucho tiempo curativo y no son fácilmente susceptibles a manipulación genética6. Por otro lado, modelos animales pequeños, como ratas y ratones, ofrecen muchas ventajas, incluyendo una facilidad de manejo, bajo costo de mantenimiento, ciclos de reproducción cortos y una curación más corto tiempo7. Además, ratón secuenciado el genoma es completamente, lo que permite la rápida manipulación y generación de variantes genéticas. Así, el ratón es un sistema potente modelo para estudiar enfermedades humanas, lesiones y reparación de8. En los seres humanos, comorbilidades como diabetes mellitus y osteoporosis aumentan las posibilidades de una cicatrización retrasada. Varios de los actuales modelos de ratón están disponibles para estudiar los efectos de comorbilidades como diabetes mellitus y osteoporosis en lesiones de huesos y cicatrización. Pacientes que sufren de osteoporosis tienen una formación marcado disminuida del hueso durante las últimas etapas de una fractura cura9. Ratones (OVX) ovariectomizadas presentan pérdida ósea rápida y retrasada del hueso curativo similar a la observada en la osteoporosis postmenopáusica10,11. Además, muchos modelos de ratón de tipo I y tipo II diabetes imitan los fenotipos masa ósea baja y deterioro fractura cura visto en seres humanos11. Por otra parte, modelos murinos fractura sirven como una plataforma versátil para el estudio de los complejos procesos biológicos que ocurren en el callo y explorar nuevas estrategias terapéuticas que aceleran la regeneración del tejido óseo.

A pesar de las diferencias en la estructura ósea y el metabolismo, el proceso global de curación sigue siendo muy similar en ratones y seres humanos, la fractura de hueso que involucra una combinación de endocondral y Osificación intramembranosa seguido de remodelado óseo. La osificación endocondral involucra el reclutamiento de células progenitoras a regiones menos mecánicamente estables alrededor de la brecha de la fractura, donde se diferencian en condrocitos que hipertrofia y mineralizar el cartílago para producir un callo suave. La segunda ola de células progenitoras de infiltrarse en el callo y se diferencian en osteoblastos maduros que secretan nueva matriz de hueso12,13,de14,15. Durante la Osificación intramembranosa, progenitores en las superficies endóstica y periósticas directamente se diferencian en matriz secretando osteoblasts y facilitan los puentes de la fractura brecha9,11,12 ,13. Juntos, la osificaciones intramembranosa y la endocondral resultan en el desarrollo de un callo duro, que es remodelado más lejos en el tiempo para formar un hueso secundario fuerte capaz de soportar cargas mecánicas13,14 ,15. En los seres humanos sanos, el proceso de curación toma aproximadamente 3 meses, en comparación con sólo 35 días en ratones16.

Fracturas comúnmente se ha estudiado usando cualquiera de los modelos quirúrgicos abiertos o cerrados17. Abordajes quirúrgicos, tales como la generación de un defecto de tamaño crítico de abrir o completar la osteotomía, estandarizar la ubicación de la lesión y la geometría para reducir las desviaciones causadas por fracturas conminutas. Osteotomías sirven como un excelente modelo para estudiar el mecanismo subyacente detrás de una no unión debido a cicatrización se retrasa a menudo comparado con fracturas cerradas. Además, una fijación externa rígida es necesaria para estabilizar el hueso osteotomized, lo que significa que la regeneración dependerá principalmente de la Osificación intramembranosa. Abordajes quirúrgicos abiertos utilizan dispositivos tales como fijación de clavos, clavijas abrazaderas y placas de fijación para proporcionar estabilidad axial y rotacional de la extremidad fracturada; sin embargo, estos dispositivos son costosos y requieren mucho más tiempo en cirugía18,19,20,21. Por otro lado, los modelos cerrados se estabilizan con un dispositivo de fijación intramedular simple, que permite suficiente inestabilidad estimular la curación endocondral. Como resultado, modelos de fractura cerrada no imitar fácilmente las condiciones de una no Unión. Técnicas de fijación interna, como intramedular alfileres, clavos y tornillos de compresión, son ventajosas ya que son baratos, fácil de usar y minimizan el tiempo en cirugía21,,,2223. En algunos casos, pines intramedulares se insertan antes de la fractura, pero la flexión del pasador intramedular puede conducir a la angulación o desplazamiento del fémur fracturado, contribuyendo a un tamaño variable del callo y la curación. La localización de la fractura y la geometría son más difíciles de estandarizar en modelos cerrados, ya que se generan utilizando un dispositivo de flexión de tres puntos, en donde se deja caer un peso en la diáfisis. Sin embargo, con la técnica adecuada, esta vía de abordaje ofrece resultados rápidos y consistentes. Por otra parte, el modelo de fractura cerrada sirve como una herramienta clínicamente relevante para el estudio de las fracturas por impacto de alta fuerza o estrés mecánico22.

Este protocolo quirúrgico es una adaptación de los métodos anteriormente descritos utilizando un pin intramedular para estabilizar fracturas de fémur en ratas y ratones22,24,25. En primer lugar, se inserta una aguja intramedular de pequeño diámetro a través de la muesca intracondilar para establecer un punto de entrada, y se introduce una guía antes de generar una fractura transversal en el midshaft femoral usando un dependiente de la gravedad de tres puntos dispositivo de doblez. Tras la exitosa generación de una fractura cerrada de fémur, se incorpora una varilla intramedular de un diámetro más grande sobre el alambre guía para estabilizar el fémur fracturado. Este método evita el riesgo de cicatrización causada por la angulación de la pin intramedular durante la fractura, como la colocación de la fractura de la barra permite la estabilización optimizada y rotación del fémur lesionado.

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Protocol

El procedimiento se realizó con la aprobación de la Indiana University School de medicina institucional Animal Care y el Comité uso (IACUC). Todas las cirugías de supervivencia se realizaron bajo condiciones estériles como se indica en las directrices de los NIH. Dolor y el riesgo de infecciones fueron manejados con analgésicos apropiados y antibióticos para asegurar un resultado exitoso.

1. anestesia y preparación

  1. Peso del ratón y anestesiar con una mezcla de ketamina (100 mg/kg) y xilacina (10 mg/kg) administrado a través de la ruta del intraperitoneal (I.P.). Coloque el ratón en una jaula vacía y vigilar hasta que está totalmente sedado.
  2. Asegúrese de que el ratón es sedado con un reflejo del pellizco del dedo del pie. Aplicar ungüento oftálmico en sus ojos para protegerlos de la desecación.
  3. Retire la piel de la extremidad derecha. Limpiar el sitio quirúrgico con un etanol de matorral y 70% base de yodo. Limpiar el sitio quirúrgico a partir del centro de la rodilla y haciendo un barrido circular hacia afuera. Repita este 3 x con peelings frescos, terminando con etanol al 70%.
  4. Administrar una dosis preoperatoria de analgesia clorhidrato de buprenorfina (0,03 mg/kg) por vía subcutánea para el tratamiento del dolor postoperatorio inmediato.
  5. Coloque el ratón sobre una almohadilla de calefacción cubierta por una esponja quirúrgica estéril.

2. vía de abordaje

Nota: Antes de la fractura, el peso y la altura de caída deben empíricamente determinar la cepa específica, edad y sexo de los ratones antes de la cirugía. Este procedimiento quirúrgico está optimizado para ratones machos C57BJ6 en 10 semanas de edad.

  1. Coloque el ratón en su parte posterior y flexión de la rodilla de la pierna operativa. Usando una hoja de bisturí, haga una incisión de 1.5 cm centrada sobre la articulación de la rodilla.
  2. Desplazar lateralmente la rótula utilizando pinzas para exponer el extremo distal del fémur. Inserte una aguja de hipodérmica 1.5 en acero inoxidable de largo calibre 25 en el centro de la ranura trochlear, a lo largo del canal medular en una manera retrógrada y a través del extremo proximal del fémur. Tomar una radiografía para asegurar la colocación correcta del perno.
    Nota: La aguja debe salir el lado dorsal del ratón para crear un camino para la guía.
  3. Pasar una guía de tungsteno larga 36 calibre 4 - in a través del eje de la aguja, entrando por el centro en el fémur distal y salir el bisel en el lado dorsal del ratón.
  4. Tras la exitosa colocación de la guía, retire con cuidado la aguja de calibre 25 tirando suavemente del cubo mientras sostiene la extremidad y la guía en su lugar. Confirmar la colocación de la guía por rayos x.
  5. Mantenga un peso de 391 g desde una altura de 34,6 cm por encima del disco de impacto (figura 1A). Apoyo a posición el fémur horizontal a través de los dos puntos, tal que las regiones intertrocantéricas y supracondíleo del fémur descansan sobre los yunques de apoyo (figura 1B) y el lado lateral de la extremidad hacia el punto de carga (figura 1 ). El peso de la gota y retire con cuidado el ratón desde el dispositivo inmediatamente después de la fractura.
  6. Confirmar la localización de la fractura mediante rayos x.
  7. Inserte la tubería hipodérmicas de acero inoxidable de calibre 24 sobre la guía metálica para estabilizar el fémur fracturado.
    Nota: Esta aplicación puede requerir una fuerza como el punto de entrada fue generado usando una aguja de un diámetro más pequeño. Esta diferencia de diámetro con eficacia previene una migración potencial de la varilla calibre 24 a través del extremo proximal del fémur. La profundidad de inserción se siente manualmente como el tubo de Romo encuentra la cortical ósea del trocánter mayor.
  8. Confirmar la posición de la barra de acero y la estabilización del fémur fracturado por rayos x antes de retirar la guía.
  9. Corte el exceso de tubo en el extremo distal del fémur con cortadores de alambre. Enterrar la tubería expuesta debajo de la superficie de los cóndilos con unas pinzas para aplicar una suave presión hacia abajo, teniendo cuidado de no dislocar la articulación de la rodilla.
  10. Vuelva a colocar la rótula usando fórceps. Cerrar la incisión con una sutura absorbible 5-0.

3. cuidados posoperatorios

  1. Después de la cirugía, los ratones se pueden inyectar con hasta 500 μl de estéril salina a través de la ruta I.P. para ayudar en su recuperación postoperatoria.
  2. Controlar los animales en una cama caliente de recuperación hasta que despierte de la cirugía. Una vez que ambulatorio, devolverlos a su jaula.
  3. Seguir vigilando de cerca los ratones durante varios días después de la cirugía para asegurarse de que están sanando correctamente y recuperar la movilidad. Administrar analgesia clorhidrato de buprenorfina (0,03 mg/kg) por vía subcutánea cada 6 h durante 3 días después de la cirugía y según sea necesario después de eso. Evitar el uso de antiinflamatorios no esteroideos (AINES), como se ha demostrado para deteriorar la cicatrización ósea después de la cirugía.

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Representative Results

La exitosa implementación de la intervención quirúrgica fue supervisada con proyección de imagen radiográfica. Pasos clave incluyen la inserción de una aguja intramedular, la colocación de un alambre de guía, la inducción de una fractura transversal en el midshaft femoral y la estabilización adecuada con una varilla intramedular (figura 2A - 2Aiv). La progresión de la curación del callo de fractura fue supervisada con imágenes radiográficas semanales hasta 28 días después de la cirugía (figura 2B). Días 10-16 post fractura, los condrocitos experimentaron la hipertrofia y producción cartílago mineralizado para formar un callo suave prominente.

Comprender los tempranos eventos celulares y moleculares involucrados en la osificaciones intramembranosa y la endocondral es importante al estudiar la cura de fractura de hueso. Fémur se tiñeron con toluidina azul en 7 y 14 días post fractura para visualizar la formación de una matriz de cartílago en el boquete de la fractura (Figura 3A). La formación de cartílago era perceptibles 7 días después de la fractura y alineado con el hueco de fractura por fractura posterior al día 14.

Tras la formación del callo blando, osteoclastos reabsorben cartílago calcificado y osteoblastos maduros sintetizan matriz ósea nueva. Inicialmente, la deposición de matriz ósea en el callo era espacial no específicos, pero una remodelación del cartílago calcificado, con el tiempo, produce estructuras más definidas en la región central y periferia del callo de fractura. Colágeno tipo 1 (COL1) es un componente importante de la matriz ósea, y su expresión mostró la organización espacial y la cantidad relativa de la matriz del hueso que se fractura la presente 14 días (figura 3B). Tomados en conjunto, estos datos demuestran la producción coordinada de cartílago y matriz ósea primaria durante la curación endocondral.

Después de eso, durante los días 17-35 post fractura, el hueso primario poco a poco fue remodelado para formar un hueso secundario fuerte de la cortical midshaft12. Microcomputed tomografía (micro-CT) análisis reveló el volumen de callo disminuido en aproximadamente un 50% entre los días 14 y 28 post fractura, indicando una remodelación eficaz del callo (Figura 4A - 4B). Aunque las técnicas radiográficas de imagen proporcionan una valiosa evaluación de los contenidos de la ósea y la microarquitectura, pruebas de torsión deben realizarse para evaluar correctamente la fuerza ósea en relación con el fémur contralateral no heridos.

Figure 1
Figura 1: diagrama del aparato de fractura y la colocación del ratón durante la generación de una fractura. (A) este panel muestra un esquema del aparato usado para generar fracturas y una identificación de los componentes: (A1) el disco de impacto, (A2) tuercas y varillas roscadas, (A3) la plataforma superior, Postes de la vertical (A4), (A5) el resorte y el vástago, (A6) la plataforma inferior, (A7) la etapa de apoyo, (A8) la perilla moleteada y (A 9) la base. Las flechas indican un desplazamiento hacia abajo de las varillas roscadas y caña después un peso cae sobre el disco de impacto. (B) fracturas se generan en la diáfisis media usando una hoja de guillotina (B1) mientras el intertrocantérea y regiones supracondílea del fémur son compatibles con yunques (B2). (C) estas imágenes demuestran el posicionamiento de las extremidades de ratón a través de los yunques de apoyo antes de la generación de una fractura. Haga clic aquí para ver una versión más grande de esta figura.

Figure 2
Figura 2: fractura de inducción y curación progresión controlada con el uso de la radiografía de. (A) imágenes radiográficas de los ratones fueron tomadas a lo largo de la cirugía que muestra (Ai) la inserción de una aguja de calibre 25 retrógrada a través de la longitud del fémur, (Aii) la colocación de la guía de 30 calibre tungsteno antes ( Aiii) la generación de una fractura transversal y (Aiv) la estabilización del fémur fracturado con una varilla de calibre 24. (B) imágenes radiográficas semanal fueron utilizados para monitorear la progresión de la cura hasta a 28 días post fractura. Haga clic aquí para ver una versión más grande de esta figura.

Figure 3
Figura 3: formación de cartílago y nueva deposición de matriz ósea durante la osificación endocondral. (A) este panel muestra las secciones histológicas de 7 y 14 días viejos callos teñidos con toluidina azul. La periferia del callo está delineada en rojo. (B) este panel muestra la inmunohistoquímica tinción de colágeno tipo 1 expresión como verde en el callo de fractura 14 días después de la fractura (40 X y 100 X de ampliación). Las muestras fueron contratinción con DAPI para visualizar núcleos como azul. Coche = cartílago; BM = médula ósea; Oct = viejo hueso cortical; MUS = músculo. Haga clic aquí para ver una versión más grande de esta figura.

Figure 4
Figura 4: Análisis de Micro-CT del callo de fractura. (A) este panel muestra longitudinal y transversales micro-CT en imágenes de la fractura callo en 14 y 28 días post fractura (n = 6/Grupo). (B) este panel muestra el volumen de callo promedio (m3) en 14 y 28 días post fractura. Las barras de error representan una desviación de estándar. La comparación estadística entre los grupos de tratamiento fue realizada usando un impar 2 cola de Student t-test. Desviación estándar; p < 0.05. Haga clic aquí para ver una versión más grande de esta figura.

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Discussion

El objetivo de este procedimiento quirúrgico es generar fracturas femorales cerradas estandarizadas en ratones. Una ventaja clave de este modelo es que la fijación interna ocurre después de la generación de la fractura, evitando así una forma angular de la varilla intramedular. Quizás el aspecto más crítico de este protocolo es la generación de una fractura transversal estandarizada en el midshaft femoral, como la geometría de fractura depende de la fuerza de doblado aplicada y el posicionamiento de las extremidades. Colocación incorrecta del fémur durante el momento flector puede conducir a fracturas oblicuas o conminutas. La altura peso y caída debe ser determinada empíricamente, dependen de la edad, sexo y tensión de los ratones. La fuerza aplicada puede controlarse aún más utilizando un material de prueba provista de un aparato de flexión de tres puntos en lugar de un peso cayó24. Sin embargo, generando fracturas con un peso caída es un modelo clínico relevante de lesiones de alto impacto o relacionados con el estrés.

Además, pueden desarrollar complicaciones durante el procedimiento quirúrgico. La guía puede ser desplazada después de la generación de la fractura, llevando a una desalineación del fémur lesionado durante la estabilización con la varilla intramedular. Esto puede prevenirse mediante el control de la proyección de imagen radiográfica antes y después de la generación de la fractura. En el caso de fracturas conminutas, el animal debe ser excluido del estudio. Además, los animales deben ser vigilados cuidadosamente después de la cirugía para la migración de la barra intramedular, ya que esto podría afectar la movilidad y la curación de la extremidad lesionada. Una limitación de la técnica es en vivo micro-CT o análisis de la proyección de imagen de resonancia magnética (MRI) no son posibles, como el acero inoxidable varilla intramedular que comprometería la calidad de imagen. Por lo tanto, estos análisis sólo pueden ser realizado ex vivo, después de la extirpación cuidadosa de la varilla intramedular.

Aunque hay muchos modelos de fractura murino, el modelo de fractura cerrada de fémur se destaca como un simple, eficiente y un método clínicamente relevante para el estudio de la regeneración ósea. La fijación interna con una varilla intramedular, como se describe en este protocolo, proporciona suficiente estabilidad para consistente hueso curativo, pero todavía puede permitir cierto grado de movimiento axial y rotacional del fémur lesionado. Abrir modelos como osteotomías permiten la generación de estandardizado "fracturas", requieren de una fijación externa rígida del hueso, y la curación se basa en la Osificación intramembranosa. Fracturas de huesos largos agudos suelen sanan a través de una combinación de endocondral y Osificación intramembranosa. Por lo tanto, las fracturas femorales cerradas descritas en el presente Protocolo proporcionan un modelo fisiológico relevante para estudiar el mecanismo subyacente de la curación del hueso. Estudios futuros que implican fracturas femorales cerradas murinas se beneficiarían el desarrollo de una varilla intramedular radiolúcida para permitir en vivo imágenes técnicas, como el uso de medios de contraste para medir la formación de nueva vasculatura en la extremidad lesionada. En conjunto, el modelo murino fractura cerrada de fémur es una plataforma atractiva para estudiar los acontecimientos celulares y moleculares asociados a lesiones de hueso y regeneración e identificar nuevas dianas terapéuticas para acelerar la curación del hueso.

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Disclosures

Los autores de este manuscrito no tienen nada que revelar. El estado más de autores que no existen restricciones sobre el acceso completo a todo el material utilizado en el estudio divulgado en este manuscrito.

Acknowledgments

Este trabajo fue financiado por donaciones desde el Departamento de defensa (DoD) nos ejército investigación médica y material comando (USAMRMC) Congreso dirigido médicos investigación programas (CDMRP) (PR121604) y los institutos Nacional de artritis y lesiones músculo-esqueléticas y piel (NIAMS), NIH R01 AR068332 a Uma Sankar.

Materials

Name Company Catalog Number Comments
Oster Minimax Trimmer Animal World Network 78049-100
POVIDONE-IODINE Thermo Fisher Scientific 395516
OPHTHALMIC OINTMENT Thermo Fisher Scientific NC0490117
Styker T/Pump Warm Water Recirculator Kent Scientific Corporation TP-700
1ml Sub-Q Syringe Thermo Fisher Scientific 309597
ENCORE Sensi-Touch PF Moore Medical LLC 30347 Latex, powder-free surgical glove
PrecisionGlide 25G Hypodermic Needles Thermo Fisher Scientific 14-826-49
Ultra-High-Temperature Tungsten Wire, McMaster-Carr 3775K37 0.005" Diameter, 1/16 lb. Spool, 380' Long
304 stainless steel, 24G thin walled tubing Microgroup Inc 304h24tw-5ft
#15 Scalpel Blades Fine Science Tools 10015-00
#10 Scalpel Blades Fine Science Tools 10010-00
Narrow Pattern Forceps Fine Science Tools 11002-12 Serrated/Straight/12cm
Iris Forceps Fine Science Tools 11066-07 1x2 Teeth/Straight/7cm
Dissector Scissors Fine Science Tools 14081-09 Slim Blades/Angled to Side/Sharp-Sharp/10cm
Fine Scissors Fine Science Tools 14058-11 ToughCut/Straight/Sharp-Sharp/11.5cm
Olsen-Hegar Needle Holder with Suture Cutter Fine Science Tools 12002-12 Straight/Serrated/12cm/with Lock
Crile Hemostat Fine Science Tools 13004-14 Serrated/Straight/14cm
Tungsten Wire Cutter ACE Surgical Supply Co., Inc. 08-051-90 ACE #150 Wire Cutter, tungsten carbide tips
3-0 VICRYL Suture Ethicon Suture J423H 3-0 VICRYL UNDYED 27" FS-2 CUTTING
piXarray 100 Digital Specimen Radiography System Bioptics, Inc Cabinet x-ray system
Einhorn 3-Point Bending Device N/A N/A Custom Built

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Williams, J. N., Li, Y., ValiyaMore

Williams, J. N., Li, Y., Valiya Kambrath, A., Sankar, U. The Generation of Closed Femoral Fractures in Mice: A Model to Study Bone Healing. J. Vis. Exp. (138), e58122, doi:10.3791/58122 (2018).

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