Summary
여기, 척수 상해 (SCI)의 마우스 모델에서 임상으로 관련 된 피부 압력 궤 양 (고름)을 유도 하는 간단한 방법을 설명 합니다. 이 모델 화면에 전 임상 연구에서 다른 치료제에 대 한 치유 고름 SCI 환자에 대 한 사용할 수 있습니다.
Abstract
압력 궤 양 (고름) 일반적인 외상 성 척수 상해 (SCI)의 합병증을 쇠 약하게 하 고 뼈 굴지 주변 부드러운 조직에 발생 하는 경향이 있다. 그러나 거기,, 약간 알려진 SCI 제어 실험 설정에서 동물 모델의 맥락에서 피부 상처 치유에 미치는 영향에 대해. 본이 연구에서는 완전 한 과학의 맥락에서 고름의 간단한, 비-침략 적, 재현할 수 및 임상 관련 마우스 모델 제공 됩니다. 성인 남성 생쥐 (Balb/c, 10 주 오래 된) 면도 있었고 depilated. 후 탈모 (24 시간), 쥐 완전 한 척수 transection (T9 T10 척추) 뒤 laminectomy 대상이 됐다. 직후, 쥐의 뒷면에 피부 배 해제 되었고 12 h, 따라서 다음 일 동안 한 PU로 발전 하는 허 혈 성 영역을 만들기 위한 장소에 개최의 자기 디스크 두 개 사이 끼여. 부상된 영역 조직 부 종 및 상피 실종 3 일 후 자석 응용 프로그램 시연. 고름이 저절로 개발 하 고 치유. 그러나 치유는,, SCI 쥐에 느린 비해 상처의 영향은 반대로 수준 아래 만들 때 비 SCI 마우스를 제어, 치유에 차이가 SCI 및 제어 비 SCI 쥐 과학의 수준 이상의 상처를 만들 때 사이 보였다 이 모델은 피부 PU 개발 및 문화, 또한 이러한 상처를 치유 하는 것을 도울 수 있는 치료 접근을 테스트로 후 치유의 역학을 공부 하는 잠재적으로 유용한 도구입니다.
Introduction
압력 궤 양 (고름)은 충격적인 과학1의 주요 2 차 합병증. 고름은 피부 또는 보통 몸 무게가 집중 환자가 앉아 또는 거짓말1뼈 굴지에 발생 하는 기본 조직에 지역화 된 부상. 피부, 지방, 그리고 근육 지역화 된 허 혈, 조직, 기계적 손상, 염증과 괴 사2,3의 개발에 이르게이 일정 한 압력에 노출 됩니다.
고름의 개발 압력 및 전단, 기간, 피부 수 분 및 온도, 부상 장 수, 및 일반 피부 위생 로드의 크기를 포함 하 여 여러 로컬 요인에 의해 영향을 받습니다. 거기 요인이 또한 조직의 역할 일반 건강 상태, 뼈 근육 조직 형태와 강도4, 환자의 나이, 혈액, 성별, 및 결혼 상태, 교육, 등 심지어 사회 경제적 요인 등 그리고 소득4,5.
고름의 치료와 예방 SCI 환자에 중요 한도 전에 남아 있다. SCI 환자 60-85%, 약한 흉터 조직 및 보호 센 세이 션1의 부족으로 인해 다시 발생 속도 경우, 30 ~ 40%에서 고름을 개발. 따라서, 고름이 종종 SCI 환자의 재 입원 고 전반적인 의료 시스템5,6,7,,89 상당한 금융 부담 (80% 이상 SCI에 대만) 포즈 , 10.
우리의 지식 최선을 다 해 적합 한 동물 모델의 부족 때문에 PU 치유 과정에 과학의 영향을 조사 하기 위해 제어 실험 설정에 아무 연구 되었습니다 합니다. 여기, 피부에 PU의 재현성 및 임상 관련 마우스 모델을 설명 합니다. PU 발병 및 후속 치료의 역학을 공부로 방지 PU 또는 PU 과학의 맥락에서 치유 개선에 잠재적인 치료 접근을 테스트 하려면이 모델을 사용할 수 있습니다.
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Protocol
모든 동물 처리 및 수술 절차는 Rutgers 대학 기관 동물 관리 및 사용 위원회에 의해 승인 하는 프로토콜에 따라 수행 했다. 마우스는 표준 식단 및 ad libitum 물 먹이 했다.
1. 수술 및 비 수술 장비의 준비
- 압력솥에 수술 및 비 수술 악기 소독.
- 70% 에탄올과 외과 운영 테이블을 청소 하 고 37 ° c가 열 패드를 따뜻한
- 운영 테이블에 난방 패드를 놓고 불 임 수술 커튼으로 커버 합니다.
참고: 모든 생존 절차에 "No Touch" 기술은 여기 불 임을 유지 하기 위해 사용 됩니다.
2. 동물과 T9 T10 척추 Laminectomy 수행의 준비
- 성인 (Balb/c) 10 주 된 남성 생쥐를 조달. 5 %isoflurane 시작 하는 흡입기를 사용 하 여 각 동물 마 취를 유발 하 고 절차의 나머지 부분에 대 한 진정을 유지 하기 위해 2-3% 감소.
- 꼬리/발 유도 핀치 nociception 자극에 응답을 도출 하 여 완전 한 마 취를 확인 합니다.
- (꼬리에 머리) 등을 통해 전기 깎기로 머리를 면도 하 고 나머지를 제거 하 depilatory 크림 (3 분)를 적용 합니다. 마지막으로, 물/젖은 스크럽, 실행 등을 세척 하 고 그들의 감 금 소에는 동물을 반환.
참고: 이것은 피부와 피부 부상의 시간에서 화학 오염에 추가 자극을 방지 하는 데 필요한 - 다음 날, 수술 동안 건조에서 눈을 보호 하기 위해 다음, betadine 스크럽과 70% 에탄올의 3 대체 준비와 함께 피부를 문질러 각에 안과 연 고를 적용 됩니다.
- 메스와 T8 T12 척추의 수준에 뒤에 중간에 따라 피부 절 개 (~1.0-1.5 cm)를 수행 합니다.
참고: 척추의 수준은 T13에서 척추 T13 척추11,12에 해당 하는 부동 갈비뼈의 위치를 사용 하 여 다시 계산 하 여 식별 됩니다. - 피하 지방 조직 paraspinal 근육에 대 한 액세스를 얻을 다음 천천히 spinous 프로세스와 양쪽에 하기에 그들을 해 부를 선택을 취소 합니다.
참고: 과다 출혈 또는 시점에서 척추 코드 부상을 피하기 위해이 절차를 매우 신중 하 게 할. - 부드럽게 벗 겨 microdissecting 집게를 사용 하 여 척추 lamina에 의해 척수 (척추 T9 T10) 노출 laminectomy를 수행 합니다.
참고: 상해의 창조를 촉진 하기 위하여 척수의 과잉 노출 되는 laminectomy를 수행. 컨트롤 그룹에서 laminectomy만 수행 됩니다.
3. 수행 T9 T10 완전 한 척수 상해
- 집게를 사용 하 여, 척추만 곡을 과장을 최대 T8 및 리프트에서 척추 보안.
- 좋은 위를 사용 하 여 완전 한 transection 되도록 척추 운하의 바닥을 T9, T10 척추 사이 척수 섹션.
- 관찰 후 수술 현미경 전체 transection 외과 사이트 폐쇄 전에 척수에 추가 보호를 제공 하도록 laminectomy 사이트를 통해 피하 지방 조각 적용.
- 마지막으로, 상처를 닫습니다 그리고 paravertebral 근육, 연속 봉합 사를 사용 하 여 표면 근 막 봉합 한 다음 봉합 클립12를 사용 하 여 피부를 닫습니다.
- 포스트-스키, 다음 날; 장 움직임을 관찰 그러나, 수동 방광 피난 하 여 방광을 관리 합니다.
참고: 바소 마우스 규모 (BMS) 하루 2에서 hindlimb 기능 복구 게시물-SCI의 진행 상황을 모니터링 하는 데 사용 되며 다음 주간, 보충 그림 111,,1213참조 수 있습니다.
4. 완전 한 스키 후 피부 압력 궤 양의 유도
- SCI 수술 직후 betadine와 70% 알코올로 동물의 뒷면을 문질러.
- 과학 사이트 아래 PU에 대 한 천 골, 0.125 %bupivacaine 솔루션 등거리 장소 ~0.5-1.0 c m 간격, 타원 자석 응용 프로그램 사이트에 25g 바늘을 사용 하 여 아주 작은 양 (10 µ L) 근처 등 피부에 주사.
참고: 과학 사이트 위에 우 레 탄에 대 한 자 궁 경부 지역 근처 등 피부 주사. - 부드럽게 마우스의 뒷면에 피부 배를 들어올린 2 자기 디스크 (5 × 12 m m 직경, 각각 2.4 g, 3800 G 자력) 사이 샌드위치 (그림 1). 11 , 12
- 자석 응용 프로그램, 단일 케이지를 반환 동물에 배치 하는 후에 즉시 완전 한 의식 때까지 열 패드 회복 (그림 1).
- 자석 응용 프로그램의 12 h 후 가볍게 isoflurane와 동물을 anesthetize 하 고 자석을 제거 합니다. PU의 초기 모습을 기록 하는 상처 사이트의 사진을 (하루 0 시간 점). 투명 한 드레싱 영화 (3 M) 건조 또는 오염 방지 하려면 상처를 커버.
5. 수술 동물 치료, 안락사, 및 조직학에 대 한 조직 컬렉션
- 즉시 수술 후, 1 mL의 0.9% 식 염 수 화에 대 한 피하와 동물을 주입.
- 피하 즉시 진통에 대 한 buprenorphine-SR (1 mg/kg)를 주사.
- 주사 피하 동물 일일 meloxicam (1 mg/kg), 그리고 cefazolin (50 mg/kg 3-7 일), 그리고 두 번 매일 수동 방광 철수.
- 한 장에 동물을 배치 하 고 액세스할 수 있는 음식을 제공 광고 libitum물. 완전 한 SCI와 쥐의 앞 발을 사용 하 여 걸 하 고 음식과 물 어떤 어려움 없이 접근 수 있습니다.
- 과학 수술 후 7 일 수술 클립을 제거 합니다.
- SCI와 피부 부상 후 원하는 시간 점에서14안락사 AVMA 지침에 따라 사용 CO2 흡입 (3-5 분)에 의해 동물을 안락사.
- 상처 피부 샘플을 수집 하 고 24 h에 대 한 10% 포 르 말린에 고정 한 다음 단면까지 4 ° C에서 70% 에탄올에 저장.
- 조직 처리, 파라핀에 포함 하 고는 톰에 얇은 섹션 (5 µ m)를 생성 합니다. 되며와 오신 (H & E) 조직 형태 (그림 3) 시각화 얼룩. Immunohistochemistry 연구 (그림 4), Ki67에 대 한 적절 한 항 체를 사용 하 여 섹션을 얼룩 (확산), CD31 (신생), 그리고 알파-부드러운 근육 걸 (α-SMA) 쿠마 외.12 에 설명 된 대로
참고: 이미지 분석 소프트웨어는 이미지 기능12척도를 사용할 수 있습니다.
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Representative Results
이 프로토콜 만듭니다 있는 PU의 완전 한 과학 짧게 설정에서 ( 그림 1에 나와 있는), 모든 마우스 또는 완전 한 과학 없이 용납 아주 잘, 전체 12 h (그림 1 c, 1, 1 층, 1 시간에 대 한 그들의 원래 위치에 남아 있던 자석 ). 모든 마우스는 정상 조직 (그림 1e, 1 g, 1i)의 다리에 의해 분리 된 두 개의 원형 상처를 개발 했다. 초기 부상 응답 마우스 SCI (그림 1e) 없이 또는 SCI와 SCI 사이트 (그림 1i) 이상 SCI 사이트 (그림 1 g) 아래에서 유사 했다.
그림 2 SCI 쥐에 있는 과학의 수준 아래에 만든 상처에 상당히 느린 마이그레이션와 하루 7, 하루 3 게시물 자석 제거, 및 그것의 재현의 표 피의 실종을 묘사 한다.
압력 상처는 이전에 게시 기준12에 의하여 등급 했다. 그림 3 및 그림 4 SCI에 치유 기능을 묘사 하 고 비 SCI 마우스 제어. 과학 그룹 전시 느린 치유, 큰 흉터 부위, 얇은 표 피와 진 피, 그리고 증식 세포의 낮은 밀도 (Ki67+ 세포), 혈관 (CD31+ 세포), 및 피부 상처에 알파-부드러운 근육 걸 (α-SMA+) 11 , 12.
피부 상처를 만들 때 그림 5에서 같이, 과학의 수준 이상의 치료 시간에 변화 표 피 및 진 비 SCI 컨트롤에 비교 될 때에 두께 또는 흉터 지역 모습 이었다.
그림 1 : 압력을 만들기 위한 실험 절차 비 SCI에 상처 (n = 3), 완료 SCI 마우스 (n = 3). 실험실에서 1 주 요법이 니, 후 쥐 면도 했다 고 depilated (a). 마그네틱 디스크 (M) 배치 (b, 스 태 들러 외.15에서 수정)의 회로도 일반 마우스와 케이지 (d, c)에 마 취에서 회복 후에 그것의 활동의 피부 등에 자기 디스크의 배치. 공상 쥐에서 디스크 (f) 아래 놓일 수 있다 또는 (h)는 과학 위에 사이트. 자석 유도 피부 상해의 지역 구분 비 SCI (e) 및 SCI 쥐 (g, i)에 그대로 피부 다리 2 상처를 보여주는 M 응용 프로그램의 12 h 후 즉시 표시 됩니다. 이 그림의 더 큰 버전을 보려면 여기를 클릭 하십시오.
그림 2 : 피부 상처 조직학 (H & E 얼룩) 및 표 피 상처 폭. 3 일에 M 신청 후 7 일 된 쥐의 비 SCI (컨트롤 + M) 및 초기 효과 M을 이용한 국 소 빈 혈 그리고 reperfusion 연구 완료 SCI (과학 + M) 그룹에 희생 했다. 화살표 위치 상피 안 대기 밖으로 가겠다고 하며 사라집니다 상피 상처 가장자리를 나타냅니다. 눈금 막대 = 1. 표 피 상처 폭으로 측정 된 각 그룹 (n = 3 각 시간 지점에서) 더 낮은 패널 바 다이어그램에 표시 됩니다. 학생 t-검정에 의해 결정 하는 통계적 중요성. * p < 0.05와 * * p < 0.01. 데이터는 ± SEM (뜻의 표준 오류)을 의미 하는 대로 표시 됩니다. 이 그림은 Neurotrauma 저널, 35, 6, 815-824, (2018), 메리 앤 Liebert, 주식, 새로운 Rochelle, 뉴욕12출판 허가 수정 되었습니다. 이 그림의 더 큰 버전을 보려면 여기를 클릭 하십시오.
그림 3 : M 유도 PU 개발 및 치유에 완전 한 과학의 영향. 비-SCI (컨트롤 + M)에 21 일 동안 PU 유도 후 완료-SCI (과학 + M) 쥐 피부 상처의 이미지 (한) 대표. 눈금 막대 = 1 cm. (b) Quantified 상처 이미지를 시간의 함수로 상처 폐쇄의 일부분을 보여주는. (c, d) 비 SCI 및 SCI 쥐 흉터 영역을 보여주는 치유 상처의 대표 이미지. 공상 쥐 대 비 SCI에 (e) Quantified 흉터 지역. (f, g) 상처 치유 피부 표 피 (전자, 이중 화살표), 표시 (H & E 염색)의 대표적인 조직학 (D, 대형 이중 화살표), 진 피와 지방 층 (F). 눈금 막대 = 100 µ m. (h) 시간에 치료 상처의 피 및 피부 두께의 정량화의 상처 폐쇄 (비-스키, 21 일 및 SCI 마우스 35 일). 데이터로 mean±SEM. 통계적 의미 ANOVA 게시물 특별 피셔의 LSD 테스트 및 학생의 t-검정에 의해 결정 되 게 됩니다. * p < 0.05 * * p < 0.01, 그리고 * * * p < 0.001. 이 수치는 저널의 Neurotrauma, 35, 6, 815-824, (2018), 메리 앤 Liebert, 주식, 새로운 Rochelle, 뉴욕12출판 허가 재 인 쇄 되었습니다. 이 그림의 더 큰 버전을 보려면 여기를 클릭 하십시오.
그림 4 : Ki67 CD31, 비 SCI 및 SCI 쥐의 피부 궤에는 SMA의 식. 상처 조직 즉 일 21 (컨트롤 + M) 및 35 (과학 + M) 게시물-PU 유도에 상처 폐쇄 후 수확 했다. 5 µ m 두께 섹션의 대표 이미지 Ki67 안티, 안티-CD31, 또는 안티-α-SMA로 얼룩진 고 40 x 목적으로 시각. 비-과학 (a, d, g)와 과학 (b, e, h) 마우스의 대표 이미지 표시 Ki67 배포+, CD31+, 및 α-SMA+ (일부 스테인드 지역에 갈색 얼룩, 빨간 화살표 지점) . 이미지 분석으로 표현의 % 긍정적인 영역 (c, f, i) 그룹 사이 비교 됩니다. 지역 3 40에서 평균 했다 필드 (상처 가장자리에서 2)와 상처 센터에서 한 섹션 (2/마우스, 각 그룹에 3 쥐) 당 x. 데이터에는 평균 ± SEM. 통계 의미 했다 스튜던트 t-검정에 의해 결정 되 게 됩니다. 이 수치는 저널의 Neurotrauma, 35, 6, 815-824, (2018), 메리 앤 Liebert, 주식, 새로운 Rochelle, 뉴욕12출판 허가 재 인 쇄 되었습니다. 이 그림의 더 큰 버전을 보려면 여기를 클릭 하십시오.
그림 5 : 영향의 과학 개발 및 과학 사이트 위 궤 양의 치유에. 비-SCI (컨트롤 + M) 및 관찰 기간 (가) SCI (과학 + M) 마우스에 궤 양의 대표 이미지. 눈금 막대 = 1 cm. 원으로 표현 일 21에 흉터 영역 (a) 고 값 비 SCI 및 SCI 쥐 (b)에 평균 했다. 계량된 상처 이미지 (c) 시간의 기능으로 상처 폐쇄의 일부분을 보여주는. 치료 피부 궤 양 보여주는 표 피 (전자, 작은 이중 화살표)와 진 (D, 대형 이중 화살표)의 대표적인 조직학 눈금 막대 = 100 µ m (d). 부 상처 마감 시간 (21 일)에서 량 치료 피부 궤 양 피 및 피부 두께의 데이터는 posthoc 피셔의 LSD 테스트, 또는 학생 t-검정 평균 ± SEM. 통계 의미 ANOVA를 정한 다음으로 제시 됩니다. NS-통계적으로 비-뜻깊은. 이 그림 수정 되어 있으며 Neurotrauma 저널, 35, 6, 815-824, (2018), 메리 앤 Liebert, 주식, 새로운 Rochelle, 뉴욕12출판에서 허가로 증 쇄. 이 그림의 더 큰 버전을 보려면 여기를 클릭 하십시오.
보충 그림 1: 공상 쥐에 모터 기능 후 부상 일 2 다음 주간에 BMS 점수를 사용 하 여 평가 되었다. 주 2 및 주 5에서 BMS 점수 했다 0.058 ±0.058 (평균 0-아니 운동, n = 17) 및 0.35±0.12 (n = 17, 중간-0). 데이터는 mean±SEM로 표시 됩니다. 이 그림 수정 되어 있으며 Neurotrauma 저널, 35, 6, 815-824, (2018), 메리 앤 Liebert, 주식, 새로운 Rochelle, 뉴욕12출판에서 허가로 증 쇄. 이 그림을 다운로드 하려면 여기를 클릭 하십시오.
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Discussion
이 연구에서 프로토콜 상처 치유에 과학의 영향을 평가 하는 고름의 새로운 실험 모델을 설명 합니다. 고름이 피부 등 피부 배, 위 또는 아래 과학 사이트 설정에 두 12 mm 직경 디스크 자석의 12 h 응용을 통해 유도 했다. 데이터 과학 피부 상처 치유 생쥐에서 감속을 보여준다. 중요 한 것은, 이러한 관찰 했다 특별히 피부 상처는 SCI의 신경 분포 수준 아래 SCI 수준 위에 만든 상처로 고 따라서 innervated 남아, 비 SCI 쥐에 비해 그들의 치유 패턴에 크게 영향을 받는 했다.
여기에 설명 된 PU 프로토콜 약한 자석 (1000 가우스) 구분 없이 자석1512 h 12 h 자석 응용 프로그램의 세 가지 사이클에 적용 된 마우스에 사용 되는 이전에 게시 방법을 기반으로 합니다. 처음에, 우리는 하나, 자석 응용 프로그램의 2, 그리고 3 개의 12 h 주기를 사용 하 여 비교. 반복된 응용 프로그램을 사용 하 여 불리는 특별 한 주의가 피부 겹에서 자석 분리 하 여 정확한 동일한 위치에 그것을 다시 적용 하는 각 시간 이다. 단일 응용 프로그램 따라서 훨씬 더 간단 하 고 마우스 등 피부 겹에는 PU를 생성 하기에 충분 했다. 그렇지 않으면,이 방법론 복잡 한 장치를 필요로 하지 않습니다, 동물의 움직임을 손상 하지 않습니다 이며 재현성이 좋다. Reoptimize 프로토콜 사용 하 여 다른 자석 크기, 모양 및 또는 힘, 또는 다른 해 부 위치에 고름을 만들려고 연구 해야 합니다. 모든 피부 상처 치유 연구에서 그것은 제대로 적용 하 고 정기적으로 건조 하 고 상처의 오염 방지를 다루는 투명 필름을 변경 하는 것이 중요.
실질적으로 피부에 모 세관 및 정 맥 관류 압력을 초과할 것으로 예상 되 고에서 병 변 유발 하 잘 문서화 되었습니다 이전 두 자석 사이 압축 힘에 의존 하는이 모델에 PU 형성의 메커니즘은 큰 동물16. 단일 12 h 주기를 사용 하 여 만든 부상에 해당 하는 단계 I 및 II 표준 기준15에 따라 진 피 깊숙이 확장 했다 피부 궤 양. 이 기술의 한 가지 한계는 단계 III IV PU를 얻을 수 없었습니다. 따라서, 하나 하지 근육과 뼈 PU 개발에 우리의 현재 모델에 중요 한 수정 없이 치유의 개입을 연구 수 없습니다. 또한, 우리가 생성 하는 고름이 저절로 치유 그리고, 따라서, 충실 하 게 나타내지 않는 만성 PU 인간 환자에서 볼 수 있습니다. 그러나 흥미롭게도,, 메서드 결과 유사한 일반적으로 사용 하는 역학 1 cm × 1 cm 전체 두께 excisional 피부 상처와 초기와 비슷한 크기의 PU. PU 유도 방법 excisional 모델에서 완전히 제거 하는 동안 기본 panniculus carnosus 예비. 따라서, panniculus carnosus, 쥐 및 다른 설치류에 주로 수축 섬유 아 세포와 가능한 진 피와 상처 사이트를 둘러싼에 myofibroblasts 중재를 통해 발생 하는 상처 폐쇄 과정에서 중요 한 역할을 재생 되지 않습니다 나타납니다. 작은 흉터 형성17.
PU 유도, 위 또는 아래 과학의 과학의 사이트에 액세스 하는 데 사용 하는 피부 절 개 방해 하지 않는 따라서, 메서드를 사용 하면 아래 또는 스키, 상처 치유에 과학의 조직 효과 대 로컬 차별화 수 있는 연구를 가능 하 게 보다 쉽게 적용할 수 있습니다. 비 과학 동물 PU 유도 후 체중을 계속, 하는 동안 과학 동물의 성장 저하 됩니다. 이 깊은 조직의 변화에도 불구 하 고 상처 치유는 영향을 받지는 PU SCI 수준 위에 만들 때. 이 모델 수, 따라서, 상처 치유에 로컬 신경 분포의 역할을 이해를 사용할 수 있습니다. 과학을 포함 하는 연구에 대 한 모든, 그것은 특별 한 주의 및 방광의 수동 배출 요구 하는 게시물-SCI 마우스 모니터링을 제공 하는 것이 중요 대 장 조건, 그리고 예방 항생제 치료11,12의 모니터링 .
SCI 환자는 실질적으로 최고의 병원 의료 및 교육, 함께 전하고 피부 고름 얻으며 미국 의료 시스템에 상당한 비용. 이 모델의 피부 PU 개발에 과학의 효과 측면-의해-측면 평가 허용 하 고 치유는 PU SCI 환자의 치유에 도움이 될 수 있는 다양 한 치료 전략을 테스트 하기 위한 플랫폼을 제공.
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Disclosures
저자는 공개 없다.
Acknowledgments
이 작품은 척수 연구 (CSCR15IRG010), 미국 국방부 (SC160029), 그리고 예일 부의 수술 타다 연구 보조금 프로그램에 뉴저지 위원회에 의해 부분적으로 지원 되었다. 우리가 감사 숀 오 플 레 리를 W.M. 켁 센터 공동 신경 과학, 기술 지원에 대 한 럿 거 스에서 합니다.
Materials
Name | Company | Catalog Number | Comments |
Magnets | Master Magnetcs, Inc., Castle Rock, CO | CD14C | 3800 G Magnetic force |
Mice standard diet | PMI Nutrition International, Brentwood, MO | Standard Food Pellet | |
Isoflurane | HENRY SCHEIN Animal Health | SKU 029405 | |
ImageJ | NIH, Bethesda, MD | Image Analysis Software | |
BETADINE Surgical Scrub | HENRY SCHEIN Animal Health | ||
Ophthalmic Ointment | HENRY SCHEIN Animal Health | SKU 008897 | |
NAIR-Hair Remover Lotion | Church & Dwight Co., Inc. Princeton, NJ | ||
ELOXIJECT (meloxicam) Injection | HENRY SCHEIN Animal Health | SKU 049755 | 5 mg/mL, 10 mL |
Cefazolin Sodium | HENRY SCHEIN Animal Health | SKU 054846 | 1 g, 10 mL bottle |
Buprenorphine-SR | ZooPharm, Windsor, CO | - | - |
0.9% Sodium Chloride Injection USP | BRAUN, Irvine, CA | S8004-5384 | |
10% Neutral Buffered Formalin | VWR, Radnor, PA | 16004-130 | |
BALB/C Male Mouse | Charles River Lab., Wilmington, MA | 28 | |
Sterile Cotton Tipped Applicator | Puritan, Guilford, ME | SKU#: 25-806 | |
Michel Suture Clips | Fine Science Tools (USA) Inc., Foster City, CA | 12040-01 | |
Surgical Suture, U.S.P. | Henry Schein Animal Health | 101-2636 |
References
- Rappl, L. M. Physiological changes in tissues denervated by spinal cord injury tissues and possible effects on wound healing. International Wound Journal. 5 (3), 435-444 (2008).
- Salcido, R., Popescu, A., Ahn, C. Animal models in pressure ulcer research. The Journal of Spinal Cord Medicine. 30 (2), 107-116 (2007).
- Mak, A. F., Zhang, M., Tam, E. W. Biomechanics of pressure ulcer in body tissues interacting with external forces during locomotion. Annual Review of Biomedical Engineering. 12, 29-53 (2010).
- National Pressure Ulcer Advisory Panel. Prevention and Treatment of Pressure Ulcers: Clinical Practice Guideline. , Cambridge Media. Osborne Park, Western Australia. (2014).
- Marin, J., Nixon, J., Gorecki, C. A systematic review of risk factors for the development and recurrence of pressure ulcers in people with spinal cord injuries. Spinal Cord. 51 (7), 522-527 (2013).
- Krause, J. S. Skin sores after spinal cord injury: relationship to life adjustment. Spinal Cord. 36 (1), 51-56 (1998).
- Redelings, M. D., Lee, N. E., Sorvillo, F. Pressure ulcers: more lethal than we thought? Advances in Skin & Wound. 18 (7), 367-372 (2005).
- Kruger, E. A., Pires, M., Ngann, Y., Sterling, M., Rubayi, S. Comprehensive management of pressure ulcers in spinal cord injury: current concept and future trends. The Journal of Spinal Cord Medicine. 36 (6), 572-585 (2013).
- Lala, D., Dumont, F. S., Leblond, J., Houghton, P. E., Noreau, L. Impact of pressure ulcers on individuals living with a spinal cord injury. Archives of Physical Medicine and Rehabilitation. 95 (15), 2312-2319 (2014).
- Li, C., DiPiro, N. D., Krause, J. A latent structural equation model of risk behaviors and pressure ulcer outcomes among people with spinal cord injury. Spinal Cord. 55 (6), 553-558 (2017).
- Kumar, S., Yarmush, M. L., Berthiaume, F. Impact of complete spinal cord injury on neovascularization and tissue granulation in mouse model of skin pressure ulcers. Journal of Neurotrauma. 34 (13), A72-A73 (2017).
- Kumar, S., Yarmush, M. L., Dash, B. C., Hsia, H. C., Berthiaume, F. Impact of complete spinal cord injury on healing of skin ulcers in mouse models. Journal of Neurotrauma. 35 (6), 815-824 (2018).
- Basso, D. M., Fisher, L. C., Anderson, A. J., Jakeman, L. B., McTigue, D. M., Popovich, P. G. Basso Mouse Scale for locomotion detects differences in recovery after spinal cord injury in five common mouse strains. Journal of Neurotrauma. 23 (5), 635-659 (2006).
- Leary, S., et al. AVMA Guidelines for the Euthanasia of Animals. , American Veterinary Medical Association. Schaumburg, Illinois, USA. (2013).
- Stadler, I., Zhang, R. Y., Oskoui, P., Whittaker, M. S., Lanzafame, R. J. Development of a simple, noninvasive, clinically relevant model of pressure ulcers in the mouse. Journal of Investigative Surgery. 17 (4), 221-227 (2004).
- Peirce, S. M., Skalak, T. C., Rodeheaver, G. T. Ischemia-reperfusion injury in chronic pressure ulcer formation: a skin model in the rat. Wound Repair and Regeneration. 8 (1), 68-76 (2000).
- Wong, V. W., Sorkin, M., Glotzbach, J. P., Longaker, M. T., Gurtner, G. C. Surgical approaches to create murine models of human wound healing. Journal of Biomedicine and Biotechnology. 2011, 969618-969625 (2011).