Summary
هنا، نحن تصف طريقة بسيطة للحث على الجلد ذات الصلة سريرياً قرحة الضغط (صديد) في نموذج الفأر من إصابات النخاع الشوكي (الخيال العلمي). يمكن استخدام هذا النموذج في الدراسات ما قبل السريرية على الشاشة للعلاجات المختلفة للشفاء صديد في الخيال المرضى.
Abstract
قرحة الضغط (صديد) شائعة من المنهكة مضاعفات إصابات النخاع الشوكي الرضية (العلوم)، وتميل إلى أن تحدث في الأنسجة الرخوة حول prominences عظمى. هناك، مع ذلك، معروفة حول تأثير العلوم على شفاء الجلد الجرح في سياق نماذج حيوانية في إعدادات التجريبية التي تسيطر عليها. ويرد في هذه الدراسة، نموذج ماوس بسيطة وغير الغازية، واستنساخه وذات الصلة سريرياً من صديد في سياق علوم كاملة. وقد حلق الفئران الذكور البالغين (بالب/ج، 10 أسابيع من العمر) وديبيلاتيد. بعد إزالة الشعر (24 ساعة)، تعرض الفئران للصفيحة تليها الحبل الشوكي كاملة ترانسيكشن (T9 T10 فقرات). مباشرة بعد رفع إضعاف جلد في الجزء الخلفي الفئران وتقع بين اثنين من الأقراص المغنطيسية في المكان للقادم ح 12، وبالتالي إيجاد منطقة الدماغية التي تطورت البلوتونيوم خلال الأيام التالية. أثبتت مجالات الجرحى وذمة الأنسجة واختفاء البشرة قبل تطبيق المغناطيس بعد يوم 3. قيح تلقائياً وتلتئم. الشفاء كان، بالمقارنة مع ذلك، أبطأ في الفئران علوم التحكم الفئران غير الخيال عندما أنشئت الجرح دون مستوى "عشر على العكس من ذلك"، لا يوجد فرق في الشفاء كان ينظر بين الفئران غير الخيال العلمي والتحكم عندما أنشئت الجرح فوق مستوى عشر هذا النموذج هو أداة يمكن أن تكون مفيدة لدراسة ديناميات التنمية بو الجلد وتضميد الجراح بعد الخيال العلمي، فضلا عن اختبار النهج العلاجية التي قد تساعد على تضميد هذه الجروح.
Introduction
قرحة الضغط (صديد) هي المضاعفات الثانوية الرئيسية من الصدمة علوم1. قيح هي إصابات موضعية للجلد و/أو الأنسجة الكامنة التي عادة ما تحدث خلال prominences عظمى حيث يتركز وزن الجسم بينما هو يجلس المريض أو الكذب1. الجلد والدهون، والعضلات تتعرض لهذا الضغط المستمر الذي يؤدي إلى تنمية الاسكيمية المترجمة والتهاب الأنسجة والأضرار الميكانيكية ونخر2،3.
تطوير صديد يتأثر بعوامل محلية عدة، بما في ذلك حجم الضغط والقص، تحميل المدة ورطوبة الجلد ودرجة الحرارة، وطول العمر الإصابة والنظافة العامة الجلد. وهناك أيضا العوامل النظامية التي تلعب دوراً، مثل الحالة البدنية العامة والعظام ومورفولوجيا أنسجة العضلات وقوتها4، سن المريض، التدابير الدموية، والجنس والعوامل الاجتماعية-الاقتصادية حتى بما في ذلك الحالة الاجتماعية، التعليم، ودخل4،5.
الوقاية والعلاج من صديد تبقى تحديات كبيرة في الخيال المرضى. وضع المرضى علوم صديد في ~ 30-40% من الحالات، مع معدل تكرار 60-85%، ربما بسبب ضعف ندبا وانعدام الإحساس الواقية1. وهكذا، كثيرا ما يؤدي إلى إعادة الاستشفاء للمرضى علوم صديد، وعموما تشكل عبئا ماليا كبيرا (80 ٪ أكثر مقابل الخيال فقط) لأن نظام الرعاية الصحية5،،من67،،من89 , 10.
على حد علمنا، كانت هناك لا دراسات في إعدادات التجريبية الخاضعة للتحقيق أثر الخيال على بو عملية الشفاء بسبب عدم وجود نماذج حيوانية مناسبة. ويرد هنا، طراز ماوس ذات الصلة سريرياً واستنساخه من البلوتونيوم في الجلد. يمكن استخدام هذا النموذج لدراسة ديناميات بداية بو والشفاء اللاحقة، فضلا عن اختبار النهج العلاجية المحتملة لمنع البلوتونيوم أو تحسين بو الشفاء في سياق عشر
Subscription Required. Please recommend JoVE to your librarian.
Protocol
وأجريت جميع الحيوانات المناولة والعمليات الجراحية وفقا لبروتوكول أقرته لجنة الاستخدام ورعاية الحيوان المؤسسية جامعة روتجرز. تم تغذية الفئران حمية القياسية ومتواصلة للمياه.
1-إعداد الأدوات الجراحية وغير الجراحية
- تعقيم الأدوات الجراحية وغير الجراحية في اﻷوتوكﻻف.
- تنظيف طاولة العمليات الجراحية مع الإيثانول 70% والحارة وسادة تدفئة إلى 37 درجة مئوية.
- وضع وسادة التدفئة على طاولة العمليات، وتغطية ذلك مع الستائر الجراحية المعقمة.
ملاحظة: في جميع إجراءات البقاء على قيد الحياة، يستخدم تقنية "اللمس لا" هنا للحفاظ على العقم.
2-إعداد الحيوانات وأداء الصفيحة العمود الفقري T9 T10
- شراء الكبار (بالب/ج) أنثى عمرها 10 الأسبوع الفئران. حمل التخدير في الحيوانات كل استخدام بداية استنشاق مع إيسوفلوراني 5% ومن ثم ينخفض إلى 2-3% للمحافظة على التخدير لما تبقى من الإجراءات.
- تأكيد التخدير الكامل قبل استخلاص لا استجابة لحفز nociception قرصه الناجمين عن ذيل/مخلب.
- حلق الشعر أكثر دورسوم (الرأس إلى الذيل) مع ماكينة كهربائية، ومن ثم تطبيق كريم مزيل الشعر (3 دقائق) لإزالة الشعر المتبقي. وأخيراً، أغسل dorsum مع تشغيل المياه/الرطب فرك، وإرجاع الحيوانات إلى اقفاصها.
ملاحظة: وهذا ضروري لتجنب إضافية تهيج الجلد والتلوث الكيميائي في وقت إصابة الجلد - وفي اليوم التالي تطبيق مرهم العيون القرنيات حماية العينين من الجفاف خلال العملية الجراحية وثم فرك الجلد مع 3 الاستعدادات بديلة من الإيثانول تدين فرك و 70%.
- مع مشرط، تنفيذ شق جلد (~1.0-1.5 سم) على طول خط الوسط في الظهر على مستوى فقرات T8 T12.
ملاحظة: يتم تعريف مستوى فقرات بإعادة عد الفقرة من T13 استخدام موقع الأضلاع العائمة التي تتوافق مع T13 فقرة11،12. - مسح الأنسجة الدهنية تحت الجلد الحصول على حق الوصول إلى العضلات باراسبينال وثم تشريح لهم ببطء لكشف العمليات الشائكة وعن كلا الجانبين.
ملاحظة: القيام بهذا الإجراء بعناية فائقة لتجنب النزيف الزائد أو أي ضرر للحبل الشوكي، عند هذه النقطة. - أداء الصفيحة لفضح الحبل الشوكي (الفقرات T9 T10) بلطف تقشير قبالة الصفيحة العمود الفقري باستخدام الملقط ميكروديسيكتينج.
ملاحظة: تنفيذ الصفيحة بحيث يتعرض فائض في النخاع الشوكي لتيسير إيجاد الضرر. في المجموعة عنصر التحكم، يتم فقط الاستئصال.
3-أداء إصابة الحبل الشوكي الكاملة T9 T10
- استخدام الملقط، تأمين العمود الفقري في T8 ورفع يصل إلى المبالغة انحناء العمود الفقري.
- باستخدام مقص الجميلة، الفرع الحبل الشوكي بين فقرة T9 و T10 وصولاً إلى الكلمة فقري للقناة، لضمان ترانسيكشن كاملة.
- بعد مراقبة تطبيق ترانسيكتيون كاملة تحت مجهر جراحي، قطعة من الدهون تحت الجلد عبر موقع الصفيحة توفير مزيد من الحماية للحبل الشوكي قبل إغلاق موقع الجراحية.
- وأخيراً، الجرح وخياطة عضلات مجاورة، فآسيا سطحية، استخدام خياطة مستمرة ثم أغلق والجلد باستخدام مقاطع خياطة12.
- الوظيفة-الخيال، مراقبة حركة الأمعاء اليوم التالي؛ ومع ذلك، إدارة المثانة البولية بإخلاء المثانة اليدوي.
ملاحظة: يمكن أن تكون المستخدمة رصد التقدم المحرز في اللكتات الانتعاش وظيفية وظيفة-العلوم في يوم 2 وثم أسبوعية مقياس الماوس باسو (خدمات إدارة المباني)، انظر التكميلية الرقم 111،،من1213.
4-تنظيم دورات تعريفية لقرحة الضغط الجلد بعد علوم كاملة
- فورا بعد الجراحة الخيال، فرك الجزء الخلفي الحيوان مع الكحول تدين و 70%.
- بو أدناه موقع الخيال، لحقن في الجلد الظهرية بالقرب من العجز، كمية صغيرة جداً (10 ميليلتر) من 0.125 في المائة بوبيفاكيني الحل باستخدام إبرة ز 25 في أماكن مسافة واحدة ~0.5-1.0 سم عن بعضها البعض، في قطع ناقص حول موقع التطبيق المغناطيس.
ملاحظة: بو فوق موقع الخيال، لحقن الجلد الظهرية بالقرب من منطقة عنق الرحم. - رفع إضعاف جلد في الجزء الخلفي الماوس برفق وساندويتش أنها بين 2 أقراص مغناطيسية (5 × 12 مم، كل 2.4 ز، ز 3800 القوة المغناطيسية) (الشكل 1). 11 , 12
- مباشرة بعد تطبيق المغناطيس، عودة الحيوانات في أقفاص واحدة توضع على وسادة تدفئة حتى يتم الوعي الكامل استعاد (الشكل 1).
- بعد 12 ساعة تطبيق المغناطيس، طفيفة تخدير الحيوان مع إيسوفلوراني وإزالة المغناطيس. أخذ صورة فوتوغرافية لمواقع الجرح، لتسجيل مظهر الأولية بو (يوم الوقت 0 نقطة). تغطية الجرح مع الفيلم خلع الملابس شفافة (م 3) لتجنب التجفيف أو التلوث.
5-بعد العمليات الجراحية الرعاية الحيوانية، والقتل الرحيم، وجمع الأنسجة لعلم الأنسجة
- فورا بعد جراحة، حقن الحيوان مع 1 مل من المحلول الملحي 0.9% تحت الجلد للماء.
- تحت الجلد حقن البوبرينورفين-ريال (1 مغ/كغ) فورا للتسكين.
- حقن سيفازولين (50 مغ/كغ لمدة 3-7 أيام)، ميلوكسيكام يوميا تحت الجلد الحيواني (1 مغ/كغ)، ومرتين يوميا من إخلاء المثانة اليدوي.
- ضع الحيوانات في أقفاص مفردة وتوفير الغذاء موجوداً والمياه libitum الإعلانية. الفئران بالخيال العلمي كاملة يمكن المشي باستخدام تلك الأمامية والاقتراب من الأغذية والمياه دون أي صعوبات.
- إزالة مقاطع الجراحية 7 أيام بعد الجراحة الخيال.
- في نقاط الوقت المطلوب بعد الخيال وإصابة الجلد، euthanize الحيوانات باستنشاق أول أكسيد الكربون2 (3-5 دقائق)، وفقا للمبادئ "التوجيهية وبرايتون" شأن القتل الرحيم14.
- جمع عينات الجلد الجرحى وإصلاح في الفورمالين 10% ح 24 وتخزينها ثم في الإيثانول 70% في 4 درجات مئوية حتى تمزيقها.
- معالجة الأنسجة، تضمين في البارافين وإنشاء أقسام رقيقة (5 ميكرومتر) في مبضع. وصمة عار والهيماتوكسيلين ويوزين (H & E) لتصور مورفولوجيا الأنسجة (الشكل 3). للدراسات إيمونوهيستوتشيميستري (الشكل 4)، وصمة عار الأقسام باستخدام الأجسام المضادة المناسبة ل Ki67 (انتشار)، CD31 (الأوعية)، والعضلات الملساء ألفا أكتين (α-SMA) كما هو موضح في كومار et al.12
ملاحظة: يمكن استخدام برمجيات تحليل الصورة تحديد حجم الصورة ميزات12.
Subscription Required. Please recommend JoVE to your librarian.
Representative Results
ينشئ هذا البروتوكول بو في الإعداد لإكمال "عشر بإيجاز" (كما هو موضح في الشكل 1)، وجميع الفئران مع أو بدون علوم كاملة التسامح المغناطيس جيدا جداً، التي ظلت في موضعها الأصلي لكامل ح 12 (الأرقام 1 ج، د 1، 1 واو، ح 1 ). ووضع جميع الفئران جرحين دائرية مفصولة بواسطة جسر أنسجة طبيعية (الشكل 1e, ز 1, 1i). وكان الرد المبدئي إصابة مماثلة في الفئران دون علوم (الشكل 1e)، أو مع علوم أسفل الموقع علوم (الشكل 1 ز) أو فوق موقع علوم (1i الشكل).
ويبين الشكل 2 اختفاء البشرة قبل يوم 3 وظيفة إزالة المغناطيس، وعن ظهور يوم 7، أن كان ذلك مع الترحيل أبطأ كثيرا في الجروح التي تم إنشاؤها دون مستوى الخيال في علوم الفئران.
تم تصنيف الجروح الضغط وفقا لمعايير منشورة سابقا12. رقم 3 و رقم 4 تصور ملامح الشفاء في الخيال والتحكم في الفئران غير الخيال. تعرض مجموعة علوم الشفاء أبطأ وأكبر منطقة الندبة والبشرة أرق والادمه وأقل كثافة من تكاثر الخلايا (Ki67+ الخلايا)، الأوعية الدموية (CD31+ الخلايا)، والعضلات الملساء ألفا أكتين (α-SMA+) في الجروح الجلدية 11 , 12.
عند الجراح الجلد تم إنشاؤها على مستوى الخيال، كما هو مبين في الشكل 5، أي تغيير في وقت الشفاء، البشرة والجلد شوهدت سمك أو منطقة ندبة عند مقارنتها بعناصر غير الخيال.
الشكل 1 : الإجراء التجريبي لخلق ضغط الجروح في غير علوم (n = 3) والفئران علوم كاملة (n = 3). بعد التعود مدتها أسبوع واحد في المختبر، وقد حلق الفئران وديبيلاتيد (). التخطيطي لوضع القرص المغناطيسي (M) (ب، تعديل من ستادلر et al.15). وضع الأقراص المغنطيسية على الجلد دورسوم ماوس عادي ونشاطها بعد التعافي من التخدير في القفص (د، ج). في الفئران الخيال العلمي، يمكن أن توضع تحت (f) أقراص أو أعلاه (ح) العلوم المواقع. منطقة الإصابة الجلدية التي يسببها المغناطيس مرئياً مباشرة بعد ح 12 م التطبيق، مما يدل على الجروح 2 مفصولة جسر جلد سليما في غير علوم (ﻫ) وعلوم الفئران (ز، و أنا). الرجاء انقر هنا لمشاهدة نسخة أكبر من هذا الرقم-
الشكل 2 : جلد الجرح علم الأنسجة (H & E وصمة عار) وعرض الجرح البشرة. في اليوم الثالث واليوم السابع بعد تطبيق م، جرى التضحية بمجموعة من الفئران في الخيال العلمي (Control + M) ومجموعات كاملة-علوم (علوم + M) لدراسة الاسكيمية المستحثة م الآثار المبكرة ومن ثم ضخه. تشير الأسهم إلى حواف الجرح البشرة، يقع فيها يخفف البطانة الظهارية ويختفي. شريط مقياس = 1 مم-عرض الجرح البشرة كما تقاس في كل مجموعة (n = 3 عند كل نقطة مرة) ممثلة في الفريق أقل شريط الرسم التخطيطي. الأهمية الإحصائية التي يحددها الطالب اختبار t. * ف < 0.05 و * * ف < 0.01. وترد البيانات يعني ± ووزارة شؤون المرأة (الخطأ المعياري للوسط). وقد تم تعديل هذا الرقم بإذن من "مجلة نيوروتروما"، 35، 6، 815-824، (2018)، نشرتها ماري Ann ليبرت, Inc.، نيو روشيل، نيويورك12. الرجاء انقر هنا لمشاهدة نسخة أكبر من هذا الرقم-
الشكل 3 : تأثير علوم كاملة في التنمية المستحثة م بو والشفاء. () ممثل صور للجروح الجلدية في الخيال العلمي (Control + M) والفئران إكمال-علوم (علوم + م) بعد بو التعريفي خلال الفترة من 21 يوما. مقياس بار = 1 سم. (ب) كمية الجرح صور عرض جزء صغير إغلاق الجرح كدالة للزمن. (ج، د) صور الممثل لتلتئم الجراح عرض منطقة ندبة في غير علوم وعلوم الفئران. (ه) كمية منطقة ندبة في الخيال العلمي مقابل الفئران الخيال. (و، ز) علم الأنسجة التمثيلية للجلد تلتئم الجراح (ح & ه تلطيخ) تظهر البشرة (E، السهم المزدوج)، الأدمة (D, سهام مزدوجة كبيرة)، وطبقة الدهون (F). شريط المقياس = 100 ميكرومتر. (ح) القياس الكمي لسمك البشرة والجلد من الجروح تلتئم في وقت إغلاق الجرح (21 يوما لغير علوم و 35 يوما للفئران الخيال العلمي). وترد البيانات ك mean±SEM. دلالة إحصائية يحدده ANOVA متبوعاً باختبار LSD الوظيفة المخصصة فيشر واختبار t للطالب. * ف < 0.05، * * ف < 0.01، و * * * ف < 0.001. وقد أعيد طبع هذا الرقم بإذن من "مجلة نيوروتروما"، 35، 6، 815-824، (2018)، نشرتها ماري Ann ليبرت, Inc.، نيو روشيل، نيويورك12. الرجاء انقر هنا لمشاهدة نسخة أكبر من هذا الرقم-
الشكل 4 : التعبير عن Ki67، CD31، والإدارة البحرية السويدية في تقرحات الجلد غير الخيال والخيال العلمي الفئران. كانت تحصد أنسجة الجرح بعد إغلاق الجرح، أي في أيام 21 (السيطرة + م) و 35 (علوم + M) وظيفة-بو التعريفي. صور الممثل من 5 ميكرومتر سميكة أقسام ملطخة Ki67 المضادة أو مكافحة CD31 مكافحة-α-SMA وتصور مع هدف 40 x. إظهار الصور التمثيلية للخيال العلمي (، د، ز) والفئران علوم (ب، ه، ح) توزيع Ki67+، CD31+، و α-SMA+ (وصمة عار البنى، الأحمر أسهم أشر إلى بعض المناطق الملون) . مجال التعبير كما تم الحصول عليها من تحليل الصور الإيجابية % مقارنة بين المجموعات (ج، و، وأنا). وكان متوسط المنطقة من 40 ثلاثة × الحقول (اثنان من حواف الجرح) وواحد من مركز الجرح لكل قسم (ماوس/2، 3 من الفئران في كل مجموعة). يتم عرض البيانات كما تحددها يعني ± sem. الإحصائية أهمية اختبار t للطالب. وقد أعيد طبع هذا الرقم بإذن من "مجلة نيوروتروما"، 35، 6، 815-824، (2018)، نشرتها ماري Ann ليبرت, Inc.، نيو روشيل، نيويورك12. الرجاء انقر هنا لمشاهدة نسخة أكبر من هذا الرقم-
الشكل 5 : "تأثير الخيال العلمي" في التنمية والشفاء من قرحة المعدة فوق موقع علوم. صور الممثل من قرحة في الخيال العلمي (Control + M) والفئران علوم (علوم + M) على مدى فترة الملاحظة (). مقياس بار = 1 سم. ويمثل منطقة ندبة في يوم 21 الدوائر (أ) وتم حساب متوسط القيم في غير علوم وعلوم الفئران (ب). صور الجرح كمياً عرض جزء صغير إغلاق الجرح كدالة للزمن (ج). الممثل الأنسجة الجلد تلتئم القرحة تظهر البشرة (E، سهم مزدوج الصغيرة) وباطن الجلد (د، سهم مزدوج كبير). شريط المقياس = 100 ميكرومتر (د). التحديد الكمي لسمك البشرة والجلد من قرح الجلد تلتئم في وقت إغلاق الجرح (يوم 21). ترد البيانات يعني ± الأهمية الإحصائية sem. يحدده ANOVA يتبع باختبار LSD بوستوك فيشر، أو اختبار t الطالب. NS-غير-إحصائيا. وقد تم تعديل هذا الرقم وطبع بإذن من "مجلة نيوروتروما"، 35، 6، 815-824، (2018)، نشرتها ماري Ann ليبرت, Inc.، نيو روشيل، نيويورك12. الرجاء انقر هنا لمشاهدة نسخة أكبر من هذا الرقم-
التكميلية رقم 1: تم تقييم الدالة موتور في الفئران علوم استخدام نقاط خدمات إدارة المباني في يوم ما بعد الإصابة 2 وثم أسبوعية. كانت النتيجة خدمات إدارة المباني في اليوم الثاني والأسبوع 5 0.058 ±0.058 (متوسط 0-أي حركة، n = 17) و 0.35±0.12 (n = 17، الوسيط-0). وتمثل البيانات ك mean±SEM. وقد تم تعديل هذا الرقم وطبع بإذن من "مجلة نيوروتراوما"، 35، 6، 815-824، (2018)، نشرتها ماري Ann ليبرت, Inc.، نيو روشيل، نيويورك12. اضغط هنا لتحميل هذا الرقم-
Subscription Required. Please recommend JoVE to your librarian.
Discussion
ويصف البروتوكول في هذه الدراسة نموذج تجريبي رواية من صديد لتقييم أثر الخيال على التئام. تم فعل الجلد صديد عبر تطبيق ح 12 من قطرها 12 مم اثنين القرص المغناطيس في حظيرة جلد الظهرية، أما تعيين أعلى أو أسفل الموقع الخيال. وتظهر البيانات أن علوم يبطئ التئام الجلد في الفئران. الأهم من ذلك، هذه الملاحظات على وجه التحديد في الجروح الجلدية تحت مستوى تعصيب للخيال العلمي، كالجروح المشار إليه أعلاه على مستوى الخيال، وهكذا أن بقي إينيرفاتيد، ولم تتأثر إلى حد كبير في نمطها الشفاء مقارنة بالفئران غير الخيال.
البروتوكول بو المبينة في هذا التقرير يستند إلى أسلوب نشرها مسبقاً المستخدمة في الفئران، حيث طبقت مغناطيس الأضعف (1000 غاوس) في ثلاث دورات من التطبيق مغناطيس 12 h مفصولة ح 12 دون المغناطيس15. في البداية، نحن مقارنة باستخدام واحد، اثنين، وثلاث دورات ح 12 تطبيق المغناطيس. هو عيب من استخدام التطبيقات المتكررة في كل مرة يجب إيلاء عناية خاصة فصل المغناطيس من حظيرة الجلد وإعادة تطبيقه في نفس المكان الدقيق. ولذلك طلب واحد أبسط بكثير وكان كافياً لخلق بو في حظيرة الجلد الظهرية الماوس. خلاف ذلك، هذه المنهجية لا يتطلب جهاز معقد ولا ينتقص من تحركات الحيوانات، وهو الغاية استنساخه. دراسات استخدام المغناطيس مختلفة الأحجام، والأشكال واو القوة، أو محاولة إنشاء صديد في مختلف المواقع التشريحية قد تحتاج إلى ريوبتيميزي في البروتوكول. كما هو الحال في جميع الدراسات شفاء الجلد الجرح، من المهم أن تطبق بشكل صحيح وتغيير الفيلم شفافة تغطي لتجنب التلوث قاع الجرح والتجفيف بشكل منتظم.
إليه تشكيل بو في هذا النموذج يعتمد على قوة ضاغطة بين المغناطيس اثنين، التي من المتوقع أن تتجاوز إلى حد كبير الضغوط التروية الوريدية والشعيرات الدموية في الجلد، وقد سبق موثقة جيدا للحث على الآفات في أكبر 16من الحيوانات. استخدام دورة واحدة ح 12 إنشاء قرحة جلد التي قد تمتد عميقا في باطن الجلد، الذي يتوافق مع المراحل الأولى والثانية وفقا للمعايير الموحدة15إصابة. واحد الحد من هذا الأسلوب أن نحن لم تكن قادرة على الحصول على مرحلة "بو" الثالث والرابع. ولذلك، واحد يمكن أن لا دراسة إشراك العضلات والعظام في التنمية بو والشفاء دون إدخال تعديلات كبيرة على نموذجنا الحالي. وعلاوة على ذلك، صديد تتولد لدينا تشفي عفويا و، ولذلك لا إخلاص تمثل بو مزمن كما يمكن أن يرى في المرضى البشرية. من المثير للاهتمام، غير أن الأسلوب أسفر بو بحجم مماثل الأولى مغلقة مع ديناميات كما يشيع استخدام مماثلة 1 سم × 1 سم سمك كامل الجلد استئصالية الجروح. أسلوب الحث بو قطع غيار كارنوسوس بانيكولوس الأساسي، بينما يتم إزالته تماما في نموذج استئصالية. وهكذا، يبدو أن كارنوسوس بانيكولوس لا تلعب دوراً رئيسيا في عملية إغلاق الجرح، الذي، في الفئران والقوارض الأخرى، يحدث أساسا عن طريق انكماش بوساطة الخلايا الليفية وميوفيبروبلاستس في الأدمة قابلة للحياة المحيطة بموقع الجرح، مع تشكيل ندبة صغيرة17.
موقع بو التعريفي، أعلى أو أسفل الخيال، لا تتداخل مع شق الجلد المستخدم للوصول إلى موقع عشر ولذلك يمكن تطبيق الأسلوب سهولة تحت أو فوق مستوى الخيال العلمي، الذي يتيح للدراسات التي يمكن أن تميز المحلية مقابل التأثيرات المنتظمة للخيال العلمي على التئام الجروح. بينما لا تزال غير علوم الحيوانات زيادة الوزن بعد التعريفي بو، هو توقف نمو الحيوانات الخيال. وعلى الرغم من هذا التغيير المنهجي العميق، التئام لم يتأثر عندما أنشئت PU فوق مستوى الخيال. ولذلك، يمكن هذا النموذج فهم أفضل لدور تعصيب المحلية في التئام الجروح. وكما في جميع الدراسات التي تنطوي على الخيال العلمي، من المهم توفير الرعاية الخاصة ورصد للفئران وظيفة الخيال، مما يتطلب تجفيف اليدوي من المثانة، رصد ظروف الأمعاء، والعلاج بالمضادات الحيوية الاتقائية11،12 .
وتحدي الخيال المرضى إلى حد كبير حتى مع أفضل مستشفى الرعاية والتعليم، والجلد صديد نقل تكاليف كبيرة لنظام الرعاية الصحية في الولايات المتحدة. يسمح هذا الطراز-جانب تقييم أثر الخيال على التنمية بو الجلد وتضميد الجراح، والذي يوفر منبرا لاختبار مختلف الاستراتيجيات العلاجية التي قد تساعد في شفاء المرضى علوم بو.
Subscription Required. Please recommend JoVE to your librarian.
Disclosures
الكتاب ليس لها علاقة بالكشف عن.
Acknowledgments
وأيد هذا العمل جزئيا "اللجنة ولاية نيو جيرسي" في الحبل الشوكي البحوث (CSCR15IRG010) ووزارة الدفاع الأمريكية (SC160029) وجامعة ييل إدارة لجراحة أوهسي منحة برنامج البحوث. ونحن نشكر ليرى "يا شون" من مركز كيك "علم الأعصاب التعاونية"، روتجرز للمساعدة التقنية.
Materials
| Name | Company | Catalog Number | Comments |
| Magnets | Master Magnetcs, Inc., Castle Rock, CO | CD14C | 3800 G Magnetic force |
| Mice standard diet | PMI Nutrition International, Brentwood, MO | Standard Food Pellet | |
| Isoflurane | HENRY SCHEIN Animal Health | SKU 029405 | |
| ImageJ | NIH, Bethesda, MD | Image Analysis Software | |
| BETADINE Surgical Scrub | HENRY SCHEIN Animal Health | ||
| Ophthalmic Ointment | HENRY SCHEIN Animal Health | SKU 008897 | |
| NAIR-Hair Remover Lotion | Church & Dwight Co., Inc. Princeton, NJ | ||
| ELOXIJECT (meloxicam) Injection | HENRY SCHEIN Animal Health | SKU 049755 | 5 mg/mL, 10 mL |
| Cefazolin Sodium | HENRY SCHEIN Animal Health | SKU 054846 | 1 g, 10 mL bottle |
| Buprenorphine-SR | ZooPharm, Windsor, CO | - | - |
| 0.9% Sodium Chloride Injection USP | BRAUN, Irvine, CA | S8004-5384 | |
| 10% Neutral Buffered Formalin | VWR, Radnor, PA | 16004-130 | |
| BALB/C Male Mouse | Charles River Lab., Wilmington, MA | 28 | |
| Sterile Cotton Tipped Applicator | Puritan, Guilford, ME | SKU#: 25-806 | |
| Michel Suture Clips | Fine Science Tools (USA) Inc., Foster City, CA | 12040-01 | |
| Surgical Suture, U.S.P. | Henry Schein Animal Health | 101-2636 |
References
- Rappl, L. M. Physiological changes in tissues denervated by spinal cord injury tissues and possible effects on wound healing. International Wound Journal. 5 (3), 435-444 (2008).
- Salcido, R., Popescu, A., Ahn, C. Animal models in pressure ulcer research. The Journal of Spinal Cord Medicine. 30 (2), 107-116 (2007).
- Mak, A. F., Zhang, M., Tam, E. W. Biomechanics of pressure ulcer in body tissues interacting with external forces during locomotion. Annual Review of Biomedical Engineering. 12, 29-53 (2010).
- National Pressure Ulcer Advisory Panel. Prevention and Treatment of Pressure Ulcers: Clinical Practice Guideline. , Cambridge Media. Osborne Park, Western Australia. (2014).
- Marin, J., Nixon, J., Gorecki, C. A systematic review of risk factors for the development and recurrence of pressure ulcers in people with spinal cord injuries. Spinal Cord. 51 (7), 522-527 (2013).
- Krause, J. S. Skin sores after spinal cord injury: relationship to life adjustment. Spinal Cord. 36 (1), 51-56 (1998).
- Redelings, M. D., Lee, N. E., Sorvillo, F. Pressure ulcers: more lethal than we thought? Advances in Skin & Wound. 18 (7), 367-372 (2005).
- Kruger, E. A., Pires, M., Ngann, Y., Sterling, M., Rubayi, S. Comprehensive management of pressure ulcers in spinal cord injury: current concept and future trends. The Journal of Spinal Cord Medicine. 36 (6), 572-585 (2013).
- Lala, D., Dumont, F. S., Leblond, J., Houghton, P. E., Noreau, L. Impact of pressure ulcers on individuals living with a spinal cord injury. Archives of Physical Medicine and Rehabilitation. 95 (15), 2312-2319 (2014).
- Li, C., DiPiro, N. D., Krause, J. A latent structural equation model of risk behaviors and pressure ulcer outcomes among people with spinal cord injury. Spinal Cord. 55 (6), 553-558 (2017).
- Kumar, S., Yarmush, M. L., Berthiaume, F. Impact of complete spinal cord injury on neovascularization and tissue granulation in mouse model of skin pressure ulcers. Journal of Neurotrauma. 34 (13), A72-A73 (2017).
- Kumar, S., Yarmush, M. L., Dash, B. C., Hsia, H. C., Berthiaume, F. Impact of complete spinal cord injury on healing of skin ulcers in mouse models. Journal of Neurotrauma. 35 (6), 815-824 (2018).
- Basso, D. M., Fisher, L. C., Anderson, A. J., Jakeman, L. B., McTigue, D. M., Popovich, P. G. Basso Mouse Scale for locomotion detects differences in recovery after spinal cord injury in five common mouse strains. Journal of Neurotrauma. 23 (5), 635-659 (2006).
- Leary, S., et al. AVMA Guidelines for the Euthanasia of Animals. , American Veterinary Medical Association. Schaumburg, Illinois, USA. (2013).
- Stadler, I., Zhang, R. Y., Oskoui, P., Whittaker, M. S., Lanzafame, R. J. Development of a simple, noninvasive, clinically relevant model of pressure ulcers in the mouse. Journal of Investigative Surgery. 17 (4), 221-227 (2004).
- Peirce, S. M., Skalak, T. C., Rodeheaver, G. T. Ischemia-reperfusion injury in chronic pressure ulcer formation: a skin model in the rat. Wound Repair and Regeneration. 8 (1), 68-76 (2000).
- Wong, V. W., Sorkin, M., Glotzbach, J. P., Longaker, M. T., Gurtner, G. C. Surgical approaches to create murine models of human wound healing. Journal of Biomedicine and Biotechnology. 2011, 969618-969625 (2011).
