Summary
Her beskriver vi en enkel metode for å indusere klinisk relevante huden Press magesår (PUs) i en musemodell av ryggmargsskade (SCI). Denne modellen kan brukes i pre kliniske studier til skjermen for forskjellige therapeutics for healing PUs i SCI pasienter.
Abstract
Press magesår (PUs) er vanlige ødeleggende komplikasjoner av traumatisk ryggmargsskade (SCI) og tendens til å skje i mykt vev rundt benete prominences. Det er imidlertid lite kjent om virkningen av SCI på huden sår helbredelse i sammenheng med dyremodeller i kontrollerte eksperimentelle innstillinger. I denne studien er en enkel, ikke-invasiv, reproduserbare og klinisk relevante musemodell PUs i sammenheng med komplett SCI presentert. Voksne mannlige mus (Balb/c, 10 uker gammel) ble barbert og depilated. Etter hårfjerning (24 timer), mus ble utsatt for laminectomy etterfulgt av komplett ryggmargen transection (T9-T10 vertebrae). En hudfold på baksiden av musene ble løftet og klemt mellom to magnetiske plater i stedet for neste 12 h, dermed skape en iskemiske området som en PU over følgende dager. Sårede områdene vist vev ødem og epidermal forsvinningen av dag 3 etter magnet program. PUs spontant utviklet og helbredet. Healing var, men tregere i SCI mus forhold du kan angi ikke-SCI mus når såret ble opprettet under nivået av SCI. omvendt, ingen forskjell i healing ble sett mellom SCI og kontroll ikke-SCI mus når såret ble opprettet over nivået på SCI. Denne modellen er et potensielt nyttig verktøy for å studere dynamikken i huden PU utvikling og healing etter SCI, samt å teste terapeutiske metoder som kan bidra til å helbrede slike sår.
Introduction
Press magesår (PUs) er store sekundære komplikasjoner traumatisk SCI1. PUs er lokalisert skader til hud og/eller underliggende vev som vanligvis oppstår over benete prominences der kroppsvekt er konsentrert mens pasienten er sittende eller liggende1. Den hud, fett og muskler er utsatt for dette konstant presset som fører til utvikling av lokaliserte iskemi, vev betennelse, mekaniske og nekrose2,3.
Utviklingen av PUs påvirkes av flere lokale faktorer, inkludert omfanget av press og skjær, lasting varighet, huden fuktighet og temperatur, skade levetid og generell hygiene. Det er også systemiske faktorer som spiller en rolle, for eksempel generelle fysiske tilstand, bein og muskler vev morfologi og styrke4, pasientens alder, Hematologisk tiltak, kjønn og selv sosio-økonomiske faktorer inkludert sivilstand, utdanning, og inntekt4,5.
Forebygging og behandling av PUs fortsatt betydelige utfordringer i SCI pasienter. SCI pasienter utvikle PUs i ~ 30-40% av tilfellene, med en re-forekomsten rate på 60-85%, muligens på grunn av svak arrvev og mangel på beskyttende sensasjon1. Dermed PUs fører ofte til re sykehusinnleggelse SCI pasienter, og samlet utgjør en betydelig økonomisk byrde (80% mer vs SCI bare) til helsevesenet5,6,7,8,9 , 10.
Til best av vår kunnskap, har det vært noen studier i kontrollerte eksperimentelle for å undersøke virkningen av SCI på PU helbredelsesprosessen på grunn av egnet dyremodeller. Her beskrives en reproduserbar og klinisk relevant musemodell PU i huden. Denne modellen kan brukes å studere dynamikken i PU utbruddet og påfølgende helbredelse, samt teste potensielle terapeutiske metoder for å hindre PU eller forbedre PU i sammenheng med SCI.
Subscription Required. Please recommend JoVE to your librarian.
Protocol
Alle dyr håndtering og kirurgiske prosedyrer ble utført i henhold til en protokoll som er godkjent av Rutgers University institusjonelle Animal Care og bruk komiteen. Mus ble matet standard diett og vann ad lib.
1. forberedelse av kirurgiske og ikke-kirurgiske instrumenter
- Sterilisere kirurgiske og ikke surgical instrumenter i en autoklav.
- Rengjør kirurgisk drifts tabellen med 70% etanol og varme en varmeputen til 37 ° C.
- Plasser varmeputen i drifts tabellen og dekke det med sterilt kirurgisk gardiner.
Merk: I alle overlevelse prosedyrer brukes "No Touch" teknikken her å opprettholde sterilitet.
2. forberedelse og utføre T9-T10 Spinal Laminectomy
- Skaffe voksen (Balb/c) 10-uke gammel mann mus. Indusere anestesi i hvert dyr med en inhalator begynnelsen med 5% isoflurane, og deretter redusere til 2-3% å opprettholde sedasjon for resten av prosedyrer.
- Bekreft komplett anestesi ved fremlokkende ingen svar til en hale/pote knipe indusert nociception stimulering.
- Barbere håret over dorsum (hode til hale) med en elektrisk avklipt, og deretter bruke depilatory kremen (3 minutter) for å fjerne gjenværende hår. Endelig vask dorsum med rennende vann/våt kratt, og returnere dyrene til deres burene.
Merk: Dette er nødvendig for å unngå ytterligere irritasjon til hud og kjemisk forurensning ved huden såret - Neste dag, gjelde hornhinner beskytte øynene fra tørking under kirurgiske prosedyren og deretter, skrubbe huden med 3 alternativ forberedelser av betadine scrub og 70% etanol ophthalmica salve.
- Skalpell, utføre en huden snitt (~1.0-1.5 cm) langs midtlinjen på baksiden på nivået av T8-T12 ryggvirvler.
Merk: Nivået av ryggvirvler identifiseres av tilbake teller vertebra fra T13 med plasseringen av flytende ribber som tilsvarer T13 vertebra11,12. - Fjern subkutan fettvev for å få tilgang til paraspinal musklene og deretter analysere dem sakte å avsløre spinous prosessene og laminae på begge sider.
Merk: Gjøre denne prosedyren nøye for å unngå overflødig blødning eller skade på ryggmargen, på dette punktet. - Utføre en laminectomy å avsløre ryggmargen (T9-T10 vertebrae) av forsiktig peeling av spinal lamina bruker microdissecting tang.
Merk: Utføre laminectomy slik at et overskudd av ryggmargen er utsatt for å forenkle etableringen av skaden. I kontrollgruppen utføres bare laminectomy.
3. utfører T9-T10 komplett ryggmargen skaden
- Ved hjelp av pinsett, sikre ryggraden på T8 og løft opp for å overdrive spinal kurvatur.
- Bruke fine saks, delen ryggmargen mellom T9 og T10 vertebra helt til gulvet i vertebral kanalen, å sikre fullstendig transection.
- Etter å observere den komplette transection under et kirurgisk mikroskop, bruke en del av subkutant fett over webområdet laminectomy å gi ytterligere beskyttelse i ryggmargen før kirurgiske området nedleggelse.
- Til slutt, lukke såret og Sutur paravertebral musklene, fascia superficialis, bruker Sutur kontinuerlig og Lukk huden med Sutur klipp12.
- Post-SCI, observere avføring på dagen; imidlertid behandle urinblæren ved manuell blæren evakuering.
Merk: Basso musen skala (BMS) kan brukes til å overvåke fremdriften av hindlimb funksjonelle utvinning innlegg-SCI på dag 2 og deretter ukentlig, se utfyllende figur 111,12,13.
4. induksjon av huden trykksår etter fullført SCI
- Umiddelbart etter SCI kirurgi, skrubbe baksiden av dyr med betadine og 70% alkohol.
- For en pur under webområdet SCI, injisere i dorsal huden nær sacrum, et lite volum (10 µL) på 0.125% bupivacaine løsning bruker en 25 G nål for equidistant steder ~0.5-1.0 cm fra hverandre, i en ellipse rundt magnet programmet nettstedet.
Merk: For en pur over SCI nettstedet, injisere dorsal huden i nærheten av cervical regionen. - Forsiktig løfte en hudfold på baksiden av musen og sandwich det mellom 2 magnetiske plater (5 × 12 mm diameter, 2.4 g hver, 3800 G magnetisk kraft) (figur 1). 11 , 12
- Straks magnet program, retur dyr til enkelt burene plasseres på gjenvunnet en varmeputen til full bevissthet er (figur 1).
- Etter 12 timer med magnet program, lett bedøve dyr med isoflurane og fjerne magneter. Ta et bilde av såret områder, registrere den opprinnelige utseendet på PU (dag 0 tid punkt). Dekk såret med gjennomsiktig dressing film (3M) å unngå tørking eller forurensning.
5. postoperativ dyr omsorg, Euthanasia og vev samling for Histology
- Umiddelbart etter kirurgi, injisere dyret med 1 mL av 0,9% saltløsning subcutaneously i hydration.
- Subcutaneously sprøyte buprenorfin-SR (1 mg/kg) umiddelbart for analgesi.
- Injiser subcutaneously dyr daglig har meloksikam (1 mg/kg), og cefazolin (50 mg/kg for 3-7 dager), og to ganger daglig manuell blæren evakuering.
- Plasser dyr i enkelt bur og gi tilgjengelig mat og vann ad libitum. Mus med komplett SCI kan gå med deres forelimbs og tilnærming mat og vann uten noen problemer.
- Fjerne kirurgisk klipp 7 dager etter SCI kirurgi.
- På ønsket tid poeng etter SCI og huden såret, euthanize dyr av CO2 innånding (3-5 min), i henhold til AVMA veiledning Euthanasia14.
- Samle sårede hud prøver, fikse i 10% formalin 24 h, og deretter lagre i 70% etanol 4 ° c før snitting.
- Behandle vev, bygge inn i parafin og generere tynne deler (5 µm) på en mikrotom. Flekker med hematoxylin og eosin (H & E) å visualisere vev morfologi (Figur 3). For immunohistochemistry studier (Figur 4), beis seksjoner med passende antistoffer for Ki67 (spredning), CD31 (angiogenese), og alpha-glatt muskel utgangen (α-SMA) som beskrevet i Kumar et al.12
Merk: Analyseprogramvare kan brukes å kvantifisere bilde funksjoner12.
Subscription Required. Please recommend JoVE to your librarian.
Representative Results
Denne protokollen skaper en PU i omgivelser fullstendig SCI. kort (som vist i figur 1), alle mus med eller uten fullstendig SCI tolerert magneter godt, som forble i den opprinnelige plasseringen for full 12 h (tall 1 c, 1 d, 1f, 1 h ). Alle musene utviklet to runde sår atskilt med en bro av normalt vev (figur 1e, 1 g, 1i). Første såret reaksjon var like i mus uten SCI (figur 1e) eller SCI under SCI siden (figur 1 g) eller over området SCI (figur 1i).
Figur 2 viser forsvinningen av overhuden dag 3 innlegg magnet fjerning og sin tilbakekomst dag 7, men med en betydelig lavere overføring i sår opprettet under nivået av SCI i SCI mus.
Trykket sår ble klassifisert som er publisert tidligere vilkår12. Figur 3 og Figur 4 skildre helbredende funksjonene i SCI og kontrollere ikke-SCI mus. Gruppen SCI utstilt tregere healing, større arr område, tynnere overhuden og dermis og lavere tetthet av voksende celler (Ki67+ celler), blodkar (CD31+ celler), og alpha-glatt muskel utgangen (α-SMA+) i huden sår 11 , 12.
Når huden sår ble opprettet over nivået på SCI, som vist i figur 5, ingen endring i helbredende tid, epidermal og dermal ble tykkelser eller arr området sett i forhold til ikke-SCI kontroller.
Figur 1 : Eksperimentell fremgangsmåten for å opprette trykket sår i ikke-SCI (n = 3) og fullføre SCI mus (n = 3). Etter 1 ukes habituering i laboratoriet, mus ble barbert og depilated (en). Skjematisk av magnetisk plate (M) plassering (b, endret fra Stadler et al.15). Plassering av magnetiske plater på huden dorsum en vanlig mus og sin virksomhet etter utvinning fra anestesi i buret (d, c). SCI mus, plater kan plasseres under (f) eller over (h) av SCI området. Magnet-indusert huden skade området vises umiddelbart etter 12 timer med M-programmet, som viser 2 sår atskilt med en intakt huden bro i ikke-SCI (e) og SCI mus (g, jeg). Klikk her for å se en større versjon av dette tallet.
Figur 2 : Huden sår histologi (H & E flekker) og epidermal såret bredde. Dag 3 og dag 7 etter M program, et sett av mus ble ofret i ikke-SCI (CTRL + M) og fullføre SCI (SCI + M) grupper å studere tidlig effekter M-indusert iskemi og deretter reperfusion. Pilene angir epidermal såret kantene, der epithelial fôr tynner og forsvinner. Skala bar = 1 mm. Epidermal såret bredde målt i hver gruppe (n = 3 på hvert punkt) er representert i nedre panelet bar diagram. Statistisk signifikans bestemmes av Student t-test. * p < 0,05 og ** p < 0,01. Dataene presenteres som betyr ± SEM (standard feil av gjsnitt). Dette tallet er endret med tillatelse fra the Journal av Biografiske filmer, 35, 6, 815-824, (2018), utgitt av Mary Ann Liebert, Inc., New Rochelle, NY12. Klikk her for å se en større versjon av dette tallet.
Figur 3 : Virkningen av komplett SCI på M-indusert PU utvikling og healing. (en) representant bilder av huden sår i ikke-SCI (CTRL + M) og fullføre-SCI (SCI + M) mus etter PU induksjon over perioden for 21 dager. Skala bar = 1 cm. (b) Quantified sår bilder viser brøkdel av såret nedleggelse som en funksjon av tid. (c, d) Representant bilder av helbredet sår viser området arr i ikke-SCI og SCI mus. (e) Quantified arr området i ikke-SCI versus SCI mus. (f, g) Representant histology helbredet sår hud (H & E farging) viser overhuden (E, doble piler), dermis (D, store doble piler), og fett lag (F). Skala bar = 100 µm. (h) kvantifisering av epidermal og dermal tykkelser av helbredet sår på tiden av såret nedleggelse (21 dager for ikke-SCI og 35 dager for SCI mus). Dataene presenteres som mean±SEM statistiske betydning avhenger av ANOVA etterfulgt av innlegg-hoc Fishers LSD test og Student t-test. * p < 0,05, ** p < 0,01, og *** p < 0,001. Dette tallet har blitt gjengitt med tillatelse fra the Journal av Biografiske filmer, 35, 6, 815-824, (2018), utgitt av Mary Ann Liebert, Inc., New Rochelle, NY12. Klikk her for å se en større versjon av dette tallet.
Figur 4 : Uttrykk for Ki67, CD31 og en SMA i huden sår av ikke-SCI og SCI mus. Såret vev ble høstet etter såret nedleggelse, nemlig på dager 21 (kontroll + M) og 35 (SCI + M) post-PU induksjon. Representant bilder av 5 µm tykke snitt beiset med anti-Ki67, anti-CD31 eller anti-α-SMA og visualisert med en 40 x mål. Representant bilder av ikke-SCI (en, d, g) og SCI (b, e, h) mus viser fordelingen av Ki67+, CD31+, og α-SMA+ (brun stain, røde piler peker til deler farget) . % Positiv området uttrykk som hentes av bildeanalyse sammenlignes mellom (c, f, jeg). Området var gjennomsnitt tre 40 x felt (to fra såret kantene) og en såret Center per inndeling (2/mus, 3 mus i hver gruppe). Dataene presenteres som gjennomsnittlig ± SEM. statistisk betydning var Student t-test. Dette tallet har blitt gjengitt med tillatelse fra the Journal av Biografiske filmer, 35, 6, 815-824, (2018), utgitt av Mary Ann Liebert, Inc., New Rochelle, NY12. Klikk her for å se en større versjon av dette tallet.
Figur 5 : Virkningen av SCI på utvikling og helbredelse av sår over webområdet SCI. Representant bilder av sår i ikke-SCI (CTRL + M) og SCI (SCI + M) mus i observasjon periode (en). Skala bar = 1 cm. Arr området på dag 21 representeres av sirkler (a) og var gjennomsnittet av verdiene i ikke-SCI og SCI mus (b). Kvantifisert såret bilder viser brøkdel av såret nedleggelse som en funksjon av tid (c). Representant histology av blekne huden sår viser epidermis (E, liten dobbeltpil) og dermis (D, store dobbeltpil). Skala bar = 100 µm (d). Kvantifisering av epidermal og dermal tykkelser på blekne huden sår sår nedleggelse tid (dag 21). Dataene presenteres som gjennomsnittlig ± SEM. statistisk betydning avhenger av ANOVA etterfulgt av posthoc Fishers LSD test, eller Student t-test. NS-statistisk ikke betydning. Dette tallet har blitt endret og gjengitt med tillatelse fra the Journal av Biografiske filmer, 35, 6, 815-824, (2018), utgitt av Mary Ann Liebert, Inc., New Rochelle, NY12. Klikk her for å se en større versjon av dette tallet.
Supplerende figur 1: Motor funksjon i SCI mus ble vurdert bruker BMS score etter skade dag 2 og deretter ukentlig. BMS poengsum på dag 2 og uke 5 var 0.058 ±0.058 (median 0-ingen bevegelse, n = 17) og 0.35±0.12 (n = 17, median-0). Dataene vises som mean±SEM. Dette tallet har blitt endret og gjengitt med tillatelse fra the Journal av Biografiske filmer, 35, 6, 815-824, (2018), utgitt av Mary Ann Liebert, Inc., New Rochelle, NY12. Klikk her for å laste ned dette tallet.
Subscription Required. Please recommend JoVE to your librarian.
Discussion
Protokollen i denne studien beskriver en ny eksperimentell modell av PUs å evaluere virkningen av SCI på sårtilheling. Huden PUs ble indusert via en 12t anvendelse av to 12 mm diameter platen magneter på en dorsal hudfold, enten angi over eller under SCI området. Dataene viser at SCI bremser ned huden sår helbredelse i mus. Viktigere, disse observasjonene var spesielt laget i sår på huden under hvilket gir SCI, som sår gjort over SCI nivået, og dermed som forble innervated, var i stor grad upåvirket i sitt helbredende mønster sammenlignet med ikke-SCI musene.
PU-protokollen som er beskrevet her er basert på en tidligere publiserte metode som brukes i mus, der svakere magneter (1000 Gauss) ble brukt i tre sykluser av 12t magnet program med 12 h uten magnet15. I utgangspunktet sammenlignet vi med en, to og tre 12t sykluser av magnet program. En ulempe med å bruke gjentatte søknader er at hver gang spesiell omsorg må tas å koble magneten fra hudfold og bruke den på nytt på nøyaktig samme sted. Et enkelt program er derfor mye enklere og var tilstrekkelig til å opprette en PU i musen dorsal hudfold. Ellers denne metoden krever ikke en sammensatt enhet svekke ikke dyr bevegelser og reproduserbare svært. Studier bruker forskjellige magnet størrelser, figurer og eller sterke, eller prøver å opprette puss på ulike anatomiske steder må reoptimize protokollen. Som alle hud sårbehandling helbredende studier er det viktig å bruke riktig og regelmessig endre gjennomsiktige filmen dekker for å unngå tørking og forurensning av sengen sår.
Mekanismen PU-formasjonen i denne modellen er avhengig av kompresjons kraft mellom to magneter, som er ventet å vesentlig overstige kapillære og venøse perfusjon press i huden, og har tidligere vært godt dokumentert for å indusere lesjoner i større dyr16. Bruke en enkelt 12t syklus opprettet en huden sår som hadde skade utvide dypt inn i dermis, som tilsvarer stadiene I og II ifølge standardkriteriene15. En begrensning av denne teknikken er at vi ikke var i stand til å få en fase III-IV PU. Derfor kan en ikke studere involvering av muskler og bein i PU utvikling og helbredelse uten betydelige endringer i vår nåværende modell. Videre PUs genererer vi helbrede spontant, og derfor trofast representerer ikke en kronisk PU som kan sees i menneskelige pasienter. Interessant, men resulterte metoden i en PU av den første samme størrelsen som lukket med lignende dynamics som brukte 1 cm x 1 cm full-tykkelse excisional huden sår. Metoden PU induksjon reservedeler den underliggende panniculus carnosus, mens det er helt fjernet i excisional modellen. Dermed ser det ut til at panniculus carnosus ikke spille en viktig rolle i såret nedleggelse prosessen som mus og annet Red, hovedsakelig skjer via sammentrekning formidlet av fibroblaster og myofibroblasts i levedyktig dermis rundt såret området, med lite arr formasjon17.
Stedet av PU induksjon, over eller under SCI, påvirker ikke den hud snittet for tilgang til området av SCI. Derfor kan metoden lett brukes under eller over nivået på SCI, som gjør studier som kan skille mellom lokalt vs systemiske effekter av SCI på sårtilheling. Ikke-SCI dyr fortsetter å få vekt etter PU induksjon, er veksten av SCI dyr forkrøplet. Til tross for denne dype systemisk endring, ble sårheling ikke påvirket når PUEN ble opprettet over SCI nivået. Denne modellen kan derfor brukes til å forstå rollen som den lokale gir i sårtilheling. Som i alle studier som involverer SCI, er det viktig å gi spesiell omsorg og overvåking til post-SCI mus, som krever manuell drenering av blæren, overvåking av tarm forhold og forebyggende antibiotikabehandling11,12 .
SCI pasienter er vesentlig utfordret selv med de beste sykehus og utdanning, og huden PUs gi betydelige kostnader til det amerikanske helsevesenet. Denne modellen kan siden av evaluering av effekten av SCI på huden PU utvikling og healing, som gir en plattform for å teste ulike strategier som kan hjelpe PU i SCI pasienter.
Subscription Required. Please recommend JoVE to your librarian.
Disclosures
Forfatterne ikke avsløre.
Acknowledgments
Dette arbeidet ble delvis støttet av New Jersey kommisjonen på ryggmargen forskning (CSCR15IRG010), US Department of Defense (SC160029) og den Yale avdeling av kirurgi Ohse Research Grant Program. Vi takker Sean o ' Leary fra WM Keck senter for samarbeidende nevrovitenskap, Rutgers for teknisk assistanse.
Materials
| Name | Company | Catalog Number | Comments |
| Magnets | Master Magnetcs, Inc., Castle Rock, CO | CD14C | 3800 G Magnetic force |
| Mice standard diet | PMI Nutrition International, Brentwood, MO | Standard Food Pellet | |
| Isoflurane | HENRY SCHEIN Animal Health | SKU 029405 | |
| ImageJ | NIH, Bethesda, MD | Image Analysis Software | |
| BETADINE Surgical Scrub | HENRY SCHEIN Animal Health | ||
| Ophthalmic Ointment | HENRY SCHEIN Animal Health | SKU 008897 | |
| NAIR-Hair Remover Lotion | Church & Dwight Co., Inc. Princeton, NJ | ||
| ELOXIJECT (meloxicam) Injection | HENRY SCHEIN Animal Health | SKU 049755 | 5 mg/mL, 10 mL |
| Cefazolin Sodium | HENRY SCHEIN Animal Health | SKU 054846 | 1 g, 10 mL bottle |
| Buprenorphine-SR | ZooPharm, Windsor, CO | - | - |
| 0.9% Sodium Chloride Injection USP | BRAUN, Irvine, CA | S8004-5384 | |
| 10% Neutral Buffered Formalin | VWR, Radnor, PA | 16004-130 | |
| BALB/C Male Mouse | Charles River Lab., Wilmington, MA | 28 | |
| Sterile Cotton Tipped Applicator | Puritan, Guilford, ME | SKU#: 25-806 | |
| Michel Suture Clips | Fine Science Tools (USA) Inc., Foster City, CA | 12040-01 | |
| Surgical Suture, U.S.P. | Henry Schein Animal Health | 101-2636 |
References
- Rappl, L. M. Physiological changes in tissues denervated by spinal cord injury tissues and possible effects on wound healing. International Wound Journal. 5 (3), 435-444 (2008).
- Salcido, R., Popescu, A., Ahn, C. Animal models in pressure ulcer research. The Journal of Spinal Cord Medicine. 30 (2), 107-116 (2007).
- Mak, A. F., Zhang, M., Tam, E. W. Biomechanics of pressure ulcer in body tissues interacting with external forces during locomotion. Annual Review of Biomedical Engineering. 12, 29-53 (2010).
- National Pressure Ulcer Advisory Panel. Prevention and Treatment of Pressure Ulcers: Clinical Practice Guideline. , Cambridge Media. Osborne Park, Western Australia. (2014).
- Marin, J., Nixon, J., Gorecki, C. A systematic review of risk factors for the development and recurrence of pressure ulcers in people with spinal cord injuries. Spinal Cord. 51 (7), 522-527 (2013).
- Krause, J. S. Skin sores after spinal cord injury: relationship to life adjustment. Spinal Cord. 36 (1), 51-56 (1998).
- Redelings, M. D., Lee, N. E., Sorvillo, F. Pressure ulcers: more lethal than we thought? Advances in Skin & Wound. 18 (7), 367-372 (2005).
- Kruger, E. A., Pires, M., Ngann, Y., Sterling, M., Rubayi, S. Comprehensive management of pressure ulcers in spinal cord injury: current concept and future trends. The Journal of Spinal Cord Medicine. 36 (6), 572-585 (2013).
- Lala, D., Dumont, F. S., Leblond, J., Houghton, P. E., Noreau, L. Impact of pressure ulcers on individuals living with a spinal cord injury. Archives of Physical Medicine and Rehabilitation. 95 (15), 2312-2319 (2014).
- Li, C., DiPiro, N. D., Krause, J. A latent structural equation model of risk behaviors and pressure ulcer outcomes among people with spinal cord injury. Spinal Cord. 55 (6), 553-558 (2017).
- Kumar, S., Yarmush, M. L., Berthiaume, F. Impact of complete spinal cord injury on neovascularization and tissue granulation in mouse model of skin pressure ulcers. Journal of Neurotrauma. 34 (13), A72-A73 (2017).
- Kumar, S., Yarmush, M. L., Dash, B. C., Hsia, H. C., Berthiaume, F. Impact of complete spinal cord injury on healing of skin ulcers in mouse models. Journal of Neurotrauma. 35 (6), 815-824 (2018).
- Basso, D. M., Fisher, L. C., Anderson, A. J., Jakeman, L. B., McTigue, D. M., Popovich, P. G. Basso Mouse Scale for locomotion detects differences in recovery after spinal cord injury in five common mouse strains. Journal of Neurotrauma. 23 (5), 635-659 (2006).
- Leary, S., et al. AVMA Guidelines for the Euthanasia of Animals. , American Veterinary Medical Association. Schaumburg, Illinois, USA. (2013).
- Stadler, I., Zhang, R. Y., Oskoui, P., Whittaker, M. S., Lanzafame, R. J. Development of a simple, noninvasive, clinically relevant model of pressure ulcers in the mouse. Journal of Investigative Surgery. 17 (4), 221-227 (2004).
- Peirce, S. M., Skalak, T. C., Rodeheaver, G. T. Ischemia-reperfusion injury in chronic pressure ulcer formation: a skin model in the rat. Wound Repair and Regeneration. 8 (1), 68-76 (2000).
- Wong, V. W., Sorkin, M., Glotzbach, J. P., Longaker, M. T., Gurtner, G. C. Surgical approaches to create murine models of human wound healing. Journal of Biomedicine and Biotechnology. 2011, 969618-969625 (2011).
