Summary
Здесь мы опишем простой способ заставить клинически значимых кожи давление язв (PUs) в модели мыши спинного мозга (SCI). Эта модель может использоваться в доклинических исследованиях экран для различных терапии для исцеления гной в SCI больных.
Abstract
Давление язвы (PUs) являются общими, изнурительной осложнений травматической спинного мозга (SCI) и, как правило, происходят в мягких тканей вокруг костлявые протуберанцев. Существует однако, мало известно о влиянии SCI на раны кожи исцеление в контексте животных моделей в контролируемых экспериментальных установках. В этом исследовании представлена простая, неинвазивный, воспроизводимые и клинически значимых мыши модель гноя в контексте полного SCI. Взрослых самцов мышей (Balb/c, 10 недель) были бритые и depilated. После депиляции (24 h), мышей были подвергнуты Ламинэктомия следуют полный спинного перерезка (T9-T10 позвонков). Сразу же после этого складку кожи на задней части мышей был отменен и зажатой между двумя магнитные диски, удерживается на месте на следующий 12 h, таким образом создавая ишемические области, которая превратилась в ПУ в последующие дни. Раненых области продемонстрировал отек тканей и эпидермальный исчезновение приложением 3 день после магнит. Гной спонтанно развитых и исцелил. Исцеление, однако, медленнее в SCI мышей по сравнению контролировать-SCI мышей, когда рана была создана ниже уровня наук и наоборот, нет разницы в исцеление был замечен между SCI и управления-SCI мышей, когда рана был создан выше уровня SCI. Эта модель является потенциально полезным инструментом для изучения динамики развития ПУ кожи и заживление после SCI, а также проверить терапевтические подходы, которые могут помочь залечить раны, такие.
Introduction
Давление язвы (PUs) являются основными вторичных осложнений травматической SCI1. Гной, локализованные повреждения кожи и подлежащих тканей, которые обычно происходят на костлявые протуберанцев где вес тела сконцентрировано в то время как пациент сидя или лежа1. Это постоянное давление, что приводит к развитию локализованных ишемии, воспаление тканей, механических повреждений и некроз2,3подвергаются кожи, жира и мышц.
Разработка гной зависит от нескольких местных факторов, включая масштабы давления и сдвига, Загрузка продолжительность, влажность кожи и температуры, травмы долголетия и общие кожи гигиены. Существуют также системные факторы, которые играют роль, как общее физическое состояние, кости и мышечной ткани морфологии и прочность4, возраст пациента, гематологические меры, пол и даже социально экономических факторов, включая семейное положение, образование, и доходы4,5.
Профилактики и лечения гной остаются значительные проблемы в SCI больных. SCI пациентов развивается гной в ~ 30-40% случаев, с частотой повторения 60-85%, возможно из-за слабой рубцовой ткани и отсутствие защитных ощущение1. Таким образом часто приводит к повторной госпитализации больных SCI гной и в целом представляют собой существенное финансовое бремя (80% больше против SCI только) в системе здравоохранения5,6,,78,9 , 10.
В меру наших знаний было без исследований в контролируемых экспериментальных настройки для изучения последствий SCI на процесс заживления пу из-за отсутствия подходящих животных моделей. Здесь описан воспроизводимость и клинически значимых мыши модель Пу в коже. Эта модель может быть использована для изучения динамики пу начала и последующего исцеления, а также для проверки потенциальных терапевтических подходов к предотвращению пу или улучшить ПУ, заживление в контексте SCI.
Subscription Required. Please recommend JoVE to your librarian.
Protocol
В соответствии с протоколом, утвержденным Ратгерский университет институциональных животное уход и использование Комитета были исполнены все животные обработки и хирургических процедур. Мышей кормили стандартной диете и воды ad libitum.
1. Подготовка хирургических и нехирургических инструментов
- Стерилизуйте хирургические и нехирургические инструментов в автоклаве.
- Очистить хирургические операционный стол с 70% этанола и теплая грелка до 37 ° C.
- Место грелку на операционном столе и накрыть стерильные хирургические шторы.
Примечание: Во всех процедурах, выживания техника «No Touch» используется здесь для сохранения стерильности.
2. Подготовка животных и выполнение спинного Ламинэктомия Т9 T10
- Закупать взрослых мышей (Balb/c) 10-недельных мужчины. Побудить анестезии в каждое животное, с использованием ингалятора начиная с 5% изофлюрановая, а затем уменьшить до 2-3% для поддержания седативный эффект на оставшуюся процедур.
- Подтвердите полной анестезии, вызывая никакого ответа на хвост/лапы крайнем случае индуцированной Ноцицепция стимуляции.
- Брить волосы на спинку (головы до хвоста), с электрической машинки, а затем применить депиляционный крем (3 мин), чтобы удалить оставшиеся волосы. Наконец мыть спинку с проточной воды/мокрый скраб и вернуть их клетках животных.
Примечание: Это необходимо, чтобы избежать дополнительного раздражения кожи и химического загрязнения в момент ранения кожи - Следующий день, применять глазная мазь для роговицы для защиты глаз от пересыхания во время хирургической процедуры и затем вымыть кожу с 3 альтернативных препаратов Бетадин скраб и 70% этанола.
- С помощью скальпеля выполните разрез (~1.0-1.5 см) вдоль средней линии на спине на уровне позвонков T8-T12.
Примечание: Уровень позвонков определяется вернуться подсчета позвонка от T13 используя расположение плавающие ребра, которые соответствуют T13 позвонка11,12. - Очистите подкожной жировой ткани, чтобы получить доступ к paraspinal мышц и затем вскрыть их медленно подвергать остистых отростков и пластинки с обеих сторон.
Примечание: Сделать эту процедуру очень тщательно, чтобы избежать избыточное кровотечение или любой травмы спинного мозга, на данный момент. - Выполните Ламинэктомия подвергать спинного мозга (T9-T10 позвонков), мягко пилинг от позвоночника пластинки, используя пинцет microdissecting.
Примечание: Выполните ламинэктомии, чтобы избыток спинного подвергается облегчить создание травмы. В группе элементов управления выполняется только Ламинэктомия.
3. выполнение Т9 T10 Полный спинного мозга
- С помощью щипцов, закрепите позвоночнике Т8 и подъем вверх преувеличивать искривлений позвоночника.
- С помощью тонкой ножницы, раздел спинного мозга между T9 и T10 позвонка вплоть до пол позвоночного канала, для обеспечения полной перерезка.
- После наблюдения за полным перерезка под микроскопом хирургические, применение кусок подкожного жира над Ламинэктомия сайт, чтобы предоставить дополнительную защиту спинного мозга до закрытия операции.
- Наконец закройте рану и шовные паравертебральных мышц, поверхностной фасции, с помощью непрерывного шва и кожи с помощью швов клипы12.
- Пост-SCI, наблюдать движение кишечника на следующий день; Однако управлять мочевого пузыря, ручной пузыря эвакуации.
Примечание: Бассо мыши шкала (BMS) может использоваться для контроля за ходом задних конечностей функциональное восстановление пост SCI на 2 день и затем загрузок, см дополнительная цифра 111,12,13.
4. индукция давление язвы кожи после полного SCI
- Сразу же после операции SCI скраб задней части животного с Бетадин и 70% спирта.
- Для пу ниже сайта SCI впрыскивают в спинной кожи возле крестец, очень небольшой объем (10 мкл) 0,125% бупивакаин раствора с помощью иглы 25 G в равноотстоящих места ~0.5-1.0 см друг от друга, в эллипса вокруг магнита приложения узла.
Примечание: Для пу выше сайта SCI придать спинной кожи возле шейки матки региона. - Аккуратно поднимите складку кожи на задней части мыши и бутерброд между 2 магнитные диски (5 × 12 мм в диаметре, 2.4 g, 3800 G магнитные силы) (рис. 1). 11 , 12
- Сразу же после того, как использовать магниты, возвращение животных одной клетки помещаются грелку пока полное сознание не восстановили (рис. 1).
- После 12 h приложения магнит слегка анестезировать животное с изофлюрановая и удалите магниты. Возьмите фотографию раны сайтов, чтобы записать первоначальный внешний вид Пу (день 0 время точка). Закрыть рану пленкой прозрачной Туалетная (3M) во избежание высыхания или загрязнения.
5. послеоперационный уход за животными, эвтаназия и коллекции тканей для гистологии
- Сразу после операции придать животное с 1 мл 0,9% физиологического раствора подкожно для гидратации.
- Подкожно, сразу придать бупренорфин SR (1 мг/кг) для обезболивания.
- Вводить подкожно животных ежедневно мелоксикам (1 мг/кг) и содержит цефазолина (50 мг/кг за 3-7 дней) и дважды день эвакуации ручной мочевого пузыря.
- Место животных в одной клетки и обеспечивают доступной пищи и воды ad libitum. Мышей с полным SCI можно ходить с помощью их передние конечности и подход пищи и воды без каких-либо трудностей.
- Удаление хирургические зажимы 7 дней после операции SCI.
- В точках желаемое время, после SCI и ранив кожи усыпить животных на CO2 ингаляции (3-5 мин), в соответствии с руководящими принципами AVMA эвтаназии14.
- Сбор образцов раненых кожи, исправить в формалина 10% за 24 часа и затем хранить в 70% этанол на 4 ° C до секционирование.
- Для обработки тканей, внедрить в парафин и генерировать шлифов (5 мкм) на микротома. Пятно с гематоксилином и эозином (H & E) для визуализации тканей морфологии (рис. 3). Для иммуногистохимии исследований (рис. 4), выведение разделы, используя соответствующие антитела для Ki67 (распространения), CD31 (ангиогенеза) и альфа гладких мышц актина (α-SMA), как описано в Kumar et al.12
Примечание: Программное обеспечение для анализа изображений может использоваться для количественного определения изображения особенности12.
Subscription Required. Please recommend JoVE to your librarian.
Representative Results
Этот протокол создает ПУ в обстановке полной SCI. кратко (как показано на рис. 1), все модели мыши с или без полного SCI мириться магниты очень хорошо, который оставался в их исходное положение для полного 12 h (рисунки 1 c, 1f, 1 d, 1 h ). Всех мышей разработаны две круглые раны, разделенных мост нормальной ткани (Рисунок 1e, 1 g, 1i). Первоначальная реакция ранения был похож мышей без SCI (Рисунок 1e), или с SCI выше сайта SCI (Рисунок 1i) или ниже сайта SCI (рис. 1 g).
Рисунок 2 изображает исчезновение эпидермиса на 3 день пост магнит удаление, и его появление, день 7, хотя и с значительно медленнее миграции в РАН создан ниже уровня SCI SCI мышей.
Давление раны были классифицированы в соответствии с ранее опубликованным критериям12. Рисунок 3 и 4 описывают возможности исцеления в SCI и контроля-SCI мышей. Группа SCI выставлены медленнее исцеление, большей площади шрам, тоньше эпидермиса и дермы и более низкая плотность пролиферирующих клеток (Ki67+ клетки), кровеносные сосуды (CD31+ клетки) и альфа гладких мышц актина (α-SMA+) в раны кожи 11 , 12.
Когда раны кожи были созданы выше уровня SCI, как показано на рисунке 5, никаких изменений в сроки заживления, эпидермис и дерму толщины или области шрам был замечен по сравнению с не SCI элементов управления.
Рисунок 1 : Раны экспериментальной процедуры для создания давления в не SCI (n = 3) и завершить SCI мышей (n = 3). После 1 недели привыкания в лаборатории мышей были бритые и депилируемое (). Схема размещения магнитного диска (M) (b, изменение Stadler et al.15). Размещение магнитных дисков на тыльной поверхности кожи нормальной мыши и его деятельности после восстановления от анестезии в клетке (d, c). В SCI мышей диски могут быть размещены ниже (f) или выше (h) SCI сайта. Площадь магнита индуцированной кожи травмы виден сразу же после 12 h M приложения, которое показывает 2 раны, разделенных неповрежденную кожу мост-SCI (e) и SCI мышей (g, я). Пожалуйста, нажмите здесь, чтобы посмотреть большую версию этой фигуры.
Рисунок 2 : Кожи раны гистологии (H & E пятно) и ширина эпидермальный рану. В день 3 и 7 день после приложения М набор мышей были принесены в SCI (Ctrl + M) и завершить SCI (SCI + M) групп для изучения ранних эффектов М-индуцированной ишемии и затем реперфузии. Стрелки указывают края раны эпидермиса, расположенный где эпителиальной выстилки утончается и исчезает. Шкалы бар = 1 мм. эпидермальный рану ширина измеряемая в каждой группе (n = 3 в каждый момент времени) представлена на схеме бар нижней панели. Статистическая значимость определяется студент t теста. * p < 0,05 и ** p < 0.01. Данные представлены как означает ± SEM (Среднеквадратичная ошибка среднего значения). Эта цифра была изменена с разрешения от журнала нейротравма, 35, 6, 815-824, (2018), опубликованном Мэри Энн Liebert, Inc., Нью-Рошель, Нью-Йорк12. Пожалуйста, нажмите здесь, чтобы посмотреть большую версию этой фигуры.
Рисунок 3 : Последствия полного SCI на M-индуцированной пу развития и исцеление. () представитель образы раны кожи в SCI (Ctrl + M) и завершить SCI (SCI + M) мышей после индукции ПУ в течение 21 дня. Шкалы бар = 1 cm. (b) определенного рану изображения, показывающие долю закрытия раны как функцию от времени. (c, d) Представитель образы зарубцевавшиеся раны, показаны области шрам-SCI и SCI мышей. (e) определенного шрам область-SCI против SCI мышей. (f, g) Представитель гистология зарубцевавшиеся раны кожи (H & E окрашивание) показаны эпидермиса (E, двойные стрелки), дермы (D, большие двойные стрелки) и толстый слой (F). Шкалы бар = 100 µm. (h) количественная оценка толщины эпидермиса и дермы зарубцевавшиеся раны во время закрытия раны (21 дней-SCI и 35 дней для SCI мышей). Данные представлены в виде mean±SEM. Статистическая значимость определяется ANOVA, после чего пост hoc Фишер тест ЛСД и t критерия Стьюдента. * p < 0,05, ** p < 0.01, и *** p < 0,001. Эта цифра была перепечатана с разрешения от журнала нейротравма, 35, 6, 815-824, (2018), опубликованном Мэри Энн Liebert, Inc., Нью-Рошель, Нью-Йорк12. Пожалуйста, нажмите здесь, чтобы посмотреть большую версию этой фигуры.
Рисунок 4 : Выражение Ki67, CD31 и -SMA в кожные язвы-SCI и SCI мышей. Рану тканях собрано после закрытия раны, а именно на пост пу индукции дней 21 (контроль + M) и 35 (SCI + M). Представитель изображения 5 мкм толщиной секций витражи с анти Ki67, анти CD31 или анти α-SMA и визуализированы с целью 40 x. Представитель изображения SCI (a, d, g) и SCI (b, e, h) мышах показывают распределение Ki67+, CD31+и α-SMA+ (коричневые пятна, красные стрелки точка для некоторых окрашенных областей) . % Положительных области выражение, полученные путем анализа изображения сравниваются между группами (c, f, я). Области был в среднем от трех 40 x поля (два от краев раны) и один из раны центр каждой секции (мышь 2, 3 мышей в каждой группе). Данные представлены как среднее ± SEM. Статистическая значимость определяется t критерия Стьюдента. Эта цифра была перепечатана с разрешения от журнала нейротравма, 35, 6, 815-824, (2018), опубликованном Мэри Энн Liebert, Inc., Нью-Рошель, Нью-Йорк12. Пожалуйста, нажмите здесь, чтобы посмотреть большую версию этой фигуры.
Рисунок 5 : Влияние SCI на развитие и заживлению язв выше сайта SCI. Представитель образы язвы в SCI (Ctrl + M) и SCI (SCI + M) мышах за период наблюдений (). Шкалы бар = 1 см. Области шрам на 21 день представлен кругов () и значения были среднем-SCI и SCI мышей (b). Количественные рану изображения показаны доли закрытия раны как функцию времени (c). Представитель гистология исцелил кожные язвы, показаны эпидермиса (E, маленький двойной стрелки) и дермы (D, большой двойной стрелки). Шкалы бар = 100 мкм (d). Количественная оценка толщины эпидермиса и дермы исцелил кожа язв во время закрытия раны (21 день). Данные представлены как среднее ± SEM. Статистическая значимость определяется ANOVA после posthoc Фишер тест ЛСД, или студент t теста. NS-Статистически незначимая. Этот рисунок был изменен и перепечатана с разрешения от журнала нейротравма, 35, 6, 815-824, (2018), опубликованном Мэри Энн Liebert, Inc., Нью-Рошель, Нью-Йорк12. Пожалуйста, нажмите здесь, чтобы посмотреть большую версию этой фигуры.
Дополнительные Рисунок 1: мотор функции в SCI мышей была оценена с помощью BMS Оценка на день после травмы 2 и затем еженедельных. Оценка СЭЗ на 2 день и неделя 5 были 0,058 ±0.058 (средний 0-нет движения, n = 17) и 0.35±0.12 (n = 17, медиана-0). Данные представлены в виде mean±SEM. Этот рисунок был изменен и перепечатана с разрешения от журнала нейротравма, 35, 6, 815-824, (2018), опубликованном Мэри Энн Liebert, Inc., Нью-Рошель, Нью-Йорк12. Пожалуйста, нажмите здесь, чтобы скачать этот показатель.
Subscription Required. Please recommend JoVE to your librarian.
Discussion
Протокол в этом исследовании описывает Роман Экспериментальная модель гноя для оценки влияния SCI на заживление ран. Через 12 ч применение двух магнитов-шайб диаметром 12 мм на складку спинной кожи, установить выше или ниже сайта SCI были индуцированной кожи гной. Данные показывают, что SCI замедляет кожи заживление ран у мышей. Важно отметить, что эти замечания были специально сделаны в раны кожи ниже уровня иннервации SCI, как раны, сделанные выше уровня SCI, и таким образом, оставался иннервируемые, были в основном без изменений в их заживления шаблон, по сравнению с не SCI мышей.
Протокол ПУ, описанные здесь основан на опубликованных ранее метод, используемый в мышей, где более слабые магниты (1000 Гаусс) были применены в трех циклов применения 12 h магнит, разделенные 12 h без магнита15. Первоначально мы сравнили, используя один, два и три 12 h циклов применения магнит. Недостаток использования повторяющихся приложений является то, что каждый раз, когда особое внимание необходимо отсоединить магнит от складке кожи и восстановить ее на точно том же месте. Одно приложение поэтому намного проще и было достаточно для создания ПУ в складке спинной кожи мыши. В противном случае эта методология не требует сложного устройства, не нанесет ущерба животных движений и легко воспроизводимые. Исследования с помощью магнита различных размеров, формы и/или сильные, или попытка создания гной в различных анатомических местах может потребоваться повторно оптимизировать протокол. Как и все исцеления исследования кожи раны важно правильно применять и регулярно менять прозрачный пленку, чтобы избежать высыхания и заражение раны кровать.
Механизм формирования ПУ в этой модели опирается на сжимающей между двух магнитов, которые, как ожидается, существенно превышают капиллярного и венозного перфузионного давления в коже и ранее хорошо задокументировано побудить поражений в больших 16животных. С помощью единого 12 h цикла создал язвы кожи, что травмы, расширяя глубоко в дерму, что соответствует этапов I и II согласно стандартным критериям15. Единственным ограничением этой методики является, что мы не смогли получить PU III-IV стадии. Таким образом один не может изучать участия мышц и костей в развитии ПУ и исцеления без внесения существенных изменений в нашей текущей модели. Кроме того гной, мы генерируем исцелить спонтанно и, таким образом, не представляют собой добросовестно хронический пу как может быть замечен в человека пациентов. Интересно однако, метод привели к пу первоначальный аналогичного размера, который закрыт с аналогичными раны эксцизионная кожи полный толщина 1 см x 1 см динамики как обычно используется. Метод индукции пу запчастей базовой carnosus подкожной, пока она полностью удаляется в эксцизионная модели. Таким образом представляется, что carnosus подкожной не играет важную роль в процессе закрытия раны, которые, мышей и других грызунов, главным образом происходит через сокращение посредничестве фибробластов и миофибробласты в жизнеспособные дермы, окружая рану сайта, маленький шрам формирования17.
На сайте пу индукции, выше или ниже SCI, не вмешиваться с разрезом кожи, используется для доступа к сайту SCI. Таким образом метод может быть легко применен ниже или выше уровня SCI, который позволяет исследования, которые могут дифференцировать местное против системные эффекты SCI на заживление ран. Хотя-SCI животных продолжают набирать вес после индукции ПУ, рост животных SCI низкорослые. Несмотря на это глубоких системных преобразований заживления ран был не влияет на пу был создан выше уровня SCI. Эта модель таким образом, можно лучше понять роль, местные иннервации в заживлении ран. Как во всех исследованиях, которые включают SCI, важно обеспечить особый уход и мониторинга для пост SCI мышей, которые требуют ручной опорожнение мочевого пузыря, мониторинг условий кишечника и профилактического лечения антибиотиками11,12 .
SCI больных существенно оспорены даже с лучшими больничного обслуживания и образования, и кожи гнойные распространять значительные расходы в системе здравоохранения США. Эта модель позволяет бок о бок оценки влияния на развития ПУ кожи SCI и исцеления, которая обеспечивает платформу для тестирования различных терапевтических стратегий, которые могут помочь ПУ, исцеление в SCI пациентов.
Subscription Required. Please recommend JoVE to your librarian.
Disclosures
Авторы не имеют ничего сообщать.
Acknowledgments
Эта работа была частично поддерживается Комиссией Нью-Джерси по спинного исследований (CSCR15IRG010), Министерство обороны США (SC160029) и Йельского университета Кафедра хирургии ОГСЕ исследований грантовой программы. Мы благодарим Шон о ' Лири W.M. Кек центра совместных неврологии, Ратгерс для оказания технической помощи.
Materials
| Name | Company | Catalog Number | Comments |
| Magnets | Master Magnetcs, Inc., Castle Rock, CO | CD14C | 3800 G Magnetic force |
| Mice standard diet | PMI Nutrition International, Brentwood, MO | Standard Food Pellet | |
| Isoflurane | HENRY SCHEIN Animal Health | SKU 029405 | |
| ImageJ | NIH, Bethesda, MD | Image Analysis Software | |
| BETADINE Surgical Scrub | HENRY SCHEIN Animal Health | ||
| Ophthalmic Ointment | HENRY SCHEIN Animal Health | SKU 008897 | |
| NAIR-Hair Remover Lotion | Church & Dwight Co., Inc. Princeton, NJ | ||
| ELOXIJECT (meloxicam) Injection | HENRY SCHEIN Animal Health | SKU 049755 | 5 mg/mL, 10 mL |
| Cefazolin Sodium | HENRY SCHEIN Animal Health | SKU 054846 | 1 g, 10 mL bottle |
| Buprenorphine-SR | ZooPharm, Windsor, CO | - | - |
| 0.9% Sodium Chloride Injection USP | BRAUN, Irvine, CA | S8004-5384 | |
| 10% Neutral Buffered Formalin | VWR, Radnor, PA | 16004-130 | |
| BALB/C Male Mouse | Charles River Lab., Wilmington, MA | 28 | |
| Sterile Cotton Tipped Applicator | Puritan, Guilford, ME | SKU#: 25-806 | |
| Michel Suture Clips | Fine Science Tools (USA) Inc., Foster City, CA | 12040-01 | |
| Surgical Suture, U.S.P. | Henry Schein Animal Health | 101-2636 |
References
- Rappl, L. M. Physiological changes in tissues denervated by spinal cord injury tissues and possible effects on wound healing. International Wound Journal. 5 (3), 435-444 (2008).
- Salcido, R., Popescu, A., Ahn, C. Animal models in pressure ulcer research. The Journal of Spinal Cord Medicine. 30 (2), 107-116 (2007).
- Mak, A. F., Zhang, M., Tam, E. W. Biomechanics of pressure ulcer in body tissues interacting with external forces during locomotion. Annual Review of Biomedical Engineering. 12, 29-53 (2010).
- National Pressure Ulcer Advisory Panel. Prevention and Treatment of Pressure Ulcers: Clinical Practice Guideline. , Cambridge Media. Osborne Park, Western Australia. (2014).
- Marin, J., Nixon, J., Gorecki, C. A systematic review of risk factors for the development and recurrence of pressure ulcers in people with spinal cord injuries. Spinal Cord. 51 (7), 522-527 (2013).
- Krause, J. S. Skin sores after spinal cord injury: relationship to life adjustment. Spinal Cord. 36 (1), 51-56 (1998).
- Redelings, M. D., Lee, N. E., Sorvillo, F. Pressure ulcers: more lethal than we thought? Advances in Skin & Wound. 18 (7), 367-372 (2005).
- Kruger, E. A., Pires, M., Ngann, Y., Sterling, M., Rubayi, S. Comprehensive management of pressure ulcers in spinal cord injury: current concept and future trends. The Journal of Spinal Cord Medicine. 36 (6), 572-585 (2013).
- Lala, D., Dumont, F. S., Leblond, J., Houghton, P. E., Noreau, L. Impact of pressure ulcers on individuals living with a spinal cord injury. Archives of Physical Medicine and Rehabilitation. 95 (15), 2312-2319 (2014).
- Li, C., DiPiro, N. D., Krause, J. A latent structural equation model of risk behaviors and pressure ulcer outcomes among people with spinal cord injury. Spinal Cord. 55 (6), 553-558 (2017).
- Kumar, S., Yarmush, M. L., Berthiaume, F. Impact of complete spinal cord injury on neovascularization and tissue granulation in mouse model of skin pressure ulcers. Journal of Neurotrauma. 34 (13), A72-A73 (2017).
- Kumar, S., Yarmush, M. L., Dash, B. C., Hsia, H. C., Berthiaume, F. Impact of complete spinal cord injury on healing of skin ulcers in mouse models. Journal of Neurotrauma. 35 (6), 815-824 (2018).
- Basso, D. M., Fisher, L. C., Anderson, A. J., Jakeman, L. B., McTigue, D. M., Popovich, P. G. Basso Mouse Scale for locomotion detects differences in recovery after spinal cord injury in five common mouse strains. Journal of Neurotrauma. 23 (5), 635-659 (2006).
- Leary, S., et al. AVMA Guidelines for the Euthanasia of Animals. , American Veterinary Medical Association. Schaumburg, Illinois, USA. (2013).
- Stadler, I., Zhang, R. Y., Oskoui, P., Whittaker, M. S., Lanzafame, R. J. Development of a simple, noninvasive, clinically relevant model of pressure ulcers in the mouse. Journal of Investigative Surgery. 17 (4), 221-227 (2004).
- Peirce, S. M., Skalak, T. C., Rodeheaver, G. T. Ischemia-reperfusion injury in chronic pressure ulcer formation: a skin model in the rat. Wound Repair and Regeneration. 8 (1), 68-76 (2000).
- Wong, V. W., Sorkin, M., Glotzbach, J. P., Longaker, M. T., Gurtner, G. C. Surgical approaches to create murine models of human wound healing. Journal of Biomedicine and Biotechnology. 2011, 969618-969625 (2011).
