Waiting
Login processing...

Trial ends in Request Full Access Tell Your Colleague About Jove
Click here for the English version

Behavior

استخدام مقرقعة التدريب والمراقبة الاجتماعية لتعليم الفئران لتغيير أقفاص طوعا

Published: October 25, 2018 doi: 10.3791/58511

Summary

ويدخل هذا البروتوكول طريقة تغيير القفص للفئران عن طريق الفرس التدريب. الفئران تعلم السلوك المطلوب ليس فقط بالتدريب المباشر ولكن أيضا عن طريق التعلم القائمة على الملاحظة. قد تساعد تنفيذ هذا البروتوكول بسرعة وسهولة لتحسين رفاه والنظافة في مرافق القوارض.

Abstract

قفص التنظيف هو إجراء تربية المنجز بشكل روتيني وهو معروف للحث على الإجهاد في الفئران المختبرية. الإجهاد يمكن أن يكون لها أثر سلبي على الرفاه، ويمكن أن تؤثر على القابلية للمقارنة وإمكانية تكرار نتائج نتائج البحوث، ينبغي التقليل من مقدار الضغوط التي تتعرض لها الحيوانات المختبرية وتجنبها عندما يكون ذلك ممكناً. علاوة على ذلك، الاتصال المباشر بين الفئران والحيوانات المؤقتة أثناء تغيير القفص يتحمل مخاطر الصحة العامة وذلك ربما يؤثر سلبا على رفاه الفئران ونوعية البحوث.

لدينا بروتوكول يهدف إلى تحسين القفص بشكل روتيني أجرى تغيير الإجراء. ولهذا السبب، فإننا نقدم بروتوكول ممكنة التي تمكن من الفئران للتعلم عن طريق الفرس التدريب والمراقبة لتغيير طوعا إلى قفص نظيف. هذا التدريب يساعد على تقليل الإجهاد الناجم عن الاضطرابات البدنية والتغييرات المناولة المقترنة بالقفص ويتيح في الوقت نفسه تخفيض الاتصال المباشر بين الحيوانية والحيوانية المؤقتة بعد الانتهاء من مرحلة التدريب.

تنفيذ الفرس تدريب الفئران سريعة وسهلة. عموما اهتماما في التدريب الفئران وكفاءة تعلم السلوك المطلوب، مما يستتبع أقفاص المتغيرة عن طريق أنبوب. حتى بدون تدريب، تعلم الفئران لأداء السلوك المطلوب من المراقبة، كما أن 80% مجموعة التعلم القائمة على الملاحظة بنجاح تغيير الأقفاص عند اختباره. يساعد التدريب كذلك إقامة علاقة ثقة بين المدرب والحيوان. كما النظافة ورفاه كلاهما مهم جداً في التجارب على الحيوانات، هذا البروتوكول قد تساعد أيضا في تحسين بحوث عالية الجودة.

Introduction

إجراءات روتينية يمكن أن يسبب الإجهاد في مختبر الحيوانات1،2،،من34. فقد ثبت أن تغيير القفص زيادة معلمات القلب والأوعية الدموية والنشاط العام في الفئران4،،من56. هذه الاستجابات الإجهاد يمكن على الأقل جزئيا بسبب الاضطرابات البدنية والمناولة المرتبطة بقفص تغيير الإجراءات بدلاً من بيئة غير مألوفة الجديد2،4. أهمية خاصة هو التأثير السلبي للإجهاد على رفاه الحيوان يعتبر7. علاوة على ذلك، يدفع الإجهاد التغييرات في السلوك وفي معلمات الهيئة الأخرى، بما في ذلك النظام العصبي اللاإرادي والجهاز الهرموني العصبي والمناعي. ولذلك، كثيرا ما يشار إلى كمصدر محتمل لانحرافات غير متوقعة عبر التجارب على الحيوانات الإجهاد ويجب تجنبها قدر الإمكان في أبحاث الحيوانات عالية الجودة7،8. أحد السبل للحد من التوتر في الحيوانات المختبرية بالتدريب. تدريب الحيوانات عموما يمكن أن تكون أداة مفيدة للغاية لإدارة الحيوانات المختبرية، وهو، في الواقع، وطالب بتوجيه الاتحاد الأوروبي 2010/63/الاتحاد الأوروبي9. التدريب يمكن أن تستخدم كنموذج لتخصيب اليورانيوم، ويساعد على إعداد الحيوانات للتجارب؛ وهكذا، التدريب يسهم في إدامة وتعزيز الرفاه في مختبر إعدادات10،،من1112. هو أسلوب تدريب ممكن التدريب التعزيز الإيجابي (إعادة الإعمار). فريق إعادة الإعمار الإقليمي شكل من تكييف هواء فعال حيث مكافأة (مثلاً، مكافأة غذاء)، يرتبط ب سلوك المطلوب13. هذا النوع من التدريب هو شائعة الاستعمال بالفعل في إعدادات المختبر للرئيسات نونومان من أجل الحد من التوتر وتعزيز رفاه واكتسب شعبية في مختلف سائر الأنواع الحيوانية10،13، 14،،من1516. التدريب للحركة التطوعية أيضا كثيرا ما يستخدم لتحسين الثروة الحيوانية إدارة17،،من1819. فريق إعادة الإعمار الإقليمي ليس فقط أداة مفيدة للتعاون عند العمل مع الحيوانات؛ كما أنها مفيدة عموما الرفاه الحيوانات، بغض النظر عما إذا كان السلوك المدربين هو استخدامها مباشرة20. وصف بروتوكول التدريب التعزيز الإيجابي هنا يهدف إلى تجنب أي شكل من أشكال الإجهاد خلال التغييرات القفص يقوم بشكل روتيني بإعطاء الفئران فرصة المشاركة طوعا في الإجراء.

بالإضافة إلى الضغوط الممكنة للحيوانات، العامل في مرافق الحيوانات دائماً توفر عمليات مطبات للحفاظ على الحالة الصحية، خاصة وأن الاتصال المباشر بين الحيوانات المختبرية وأولياء الأمر الحيوان يتحمل مخاطر الصحة العامة التلوث. في الحيوان مرافق متخصصة في القوارض، يوفر نقل الحيوانات من القذرة في أقفاص نظيفة من عبء عمل العادية وعالية. هذا الإجراء عادة ما يتضمن الاتصال المباشر بين الحيوانات والبشر، ومما يمثل عامل مخاطرة صحية نظراً لإمكانية نقل مسببات الأمراض استقر على جلد الإنسان21. وبصرف النظر عن نقل من ناقلات الأمراض الحيوانية الأخرى، تتدخل الكائنات المسببة للأمراض و nonpathogenic مرافق الحيوان الأكثر شيوعاً عن طريق البشر22،23. كما يرتبط انخفاض الصحة مع تجنب انخفاض رفاهية، حتى تحت اﻻكلينيكي العدوى يمكن أن يكون سببا للنتائج التجريبية نونريبرودوسيبلي، وهذا ينبغي أن يكون من الواضح24،25. في هذا الحساب، تدريب الحيوانات في أقفاص التغيير الطوعي كذلك يتيح التوصيل بتغيير القفص بعد انتهاء التدريب مع أي اتصال مباشر بين المؤقتة الحيوان والحيوان، مما يقلل من مخاطر صحية محتملة أثناء أداء الإجراءات التجريبية.

لدينا بروتوكول لتدريب الفئران لتغيير أقفاص طوعا يمكن أن تكون أداة مفيدة للإدارة الفئران المختبرية، كما أنه يربط التدريب باعتباره شكلاً من أشكال الإثراء المعرفي مع أداء العمل الروتيني. بناء على ذلك، لدينا البروتوكول هو إجراء صديقة للحيوان الذي يساعد على زيادة رفاهية الفئران في مرافق المختبرات الحيوانية. كتغيير القفص بعد مرحلة التدريب يمكن أن يجري بدون أي اتصال مباشر بين المؤقتة الحيوانية والحيوانية، قد بالإضافة إلى ذلك يساعد على الحفاظ على النظافة العامة على مستوى عال وذلك زيادة تحسين الأبحاث الحيوانية.

Subscription Required. Please recommend JoVE to your librarian.

Protocol

التعامل مع الفئران والإجراءات التجريبية التي أجريت وفقا للمبادئ التوجيهية الأوروبية والوطنية والمؤسسية لرعاية الحيوان.

1-التأقلم والتعود

ملاحظة: إذا لم يكن تم نقلها الفئران، يمكن تخفيض الوقت التأقلم والتعود. لتحديد موسع، لون الذيل مع علامة الصديقة للجلد.

  1. الأسبوع 1: تأقلم
    ملاحظة: دورتين ينبغي إجراء خلال الأسبوع الأول وواحد في اليوم من الوصول وثانية واحدة بعد وصول 2 يوما.
    1. في يوم وصول الفئران:
      1. نقل الفئران في أزواج من سنتين وبها القفص الصفحة الرئيسية الجديدة. نقل بعض من تداخل القديم والفراش، المواد، فضلا عن بعض من الكريات الغذاء على دراية بها تيسيرا للتعود على البيئة الجديدة.
      2. تجنب رفع الفأر من ذيله. إذا كان ذلك ممكناً، وضع تحت البطن أو حول الصدر من جهة والجهة الأخرى دعم الخلفيتين من الفئران رفعها (الشكل 1)26.
    2. بعد يومين من يوم الوصول:
    3. فتح القفص منزل للفئران ووضع يد في القفص. واسمحوا الفئران شم واستكشاف اليد. إذا الفئران تحاول الخروج من القفص، تعوقها عن طريق الضغط عليها بلطف مرة أخرى في القفص. متابعة هذا الإجراء للدقائق الأربع التالية.
    4. إذا يخافون على الفئران وعدم البدء في استكشاف بيئتهم، كرر الإجراء مرة واحدة يوميا حتى تبدأ الفئران لاستكشاف. وفي هذه الحالة، قد يكون من الضروري تعود على الفرس.
      ملاحظة: الفئران استكشاف أشياء جديدة مع جميع حواسهم، حتى بعد مرور بعض الوقت، أنها سوف تعترف المجرب نفسه كمألوفه. قد يحدث أن الفئران لا الاستكشافات الشفوي الأيدي، ولكن لا ينبغي بطريقة الغازية. في حال حدوث هذا الموقف، يجب أن تؤخذ اليد ببطء بعيداً لضمان أن لا يتم إتلاف القفازات.
    5. إضافة قطع صغيرة من المكافأة الغذاء المقصود إلى القفص المنزل.
      ملاحظة: يجب أن تكون المكافأة الغذاء وفقا للاحتياجات اللازمة لتغذية الحيوانات المختبرية. في هذا البروتوكول، يستخدم الشوكولاته البيضاء (الذي عقد في نهاية حقنه)، ولكن غيرها من المواد الغذائية، مثل الفواكه الجافة والفواكه الطازجة والحبوب ومن الممكن. إذا كان الطلب متطلبات النظافة الصحية الحيوانية مرفق الشروط الخاصة، هناك مختلف الموردين ليعامل للحيوانات المختبرية. الخيار الأصح الأفضل، ولكن قد تعطي مزيجاً من نسبة عالية من السكر والدهون وارتفاع الحيوانات حافز أكبر للمشاركة.
  2. الأسبوع 2: عملية تعود إلى العلماء ومكافأة الغذاء
    1. تواصل مع السكن لليد ومكافأة الغذاء بدأت في الأسبوع السابق. حد الوقت التفاعل لمدة دقيقتين في اليوم الواحد.
    2. في الحالات التي يكون فيها الفئران حريصة جداً، قد يكون من الضروري التعود على الفرس.
      1. لتقييم هذا السلوك، انقر فوق مرة واحدة كل خمس ثوان بعد الدورة في اليوم الأول. إذا كان الفأر يتفاعل مع سلوك المتصلة بالخوف، يجب أن اعتادوا الفرس.
      2. للتعود على الفرس، انقر فوق خمس مرات في حين يستهلك الفئران المكافأة التي يتم وضعها في القفص بعد انتهاء الدورة. يتم إكمال التعود على الفرس أقرب الفئران لم يعد يظهر أي السلوك المتصلة بالخوف.
  3. الأسبوع 3: التعود على معالجة مكثفة
    1. في يوم واحد إلى ثلاثة، تبدأ برفع أو الجرة الفئران لعدة ثوان وتمديد الوقت (بحد أقصى مدة دقيقتين كل فأر) ببطء. وقف إذا أظهرت الفئران أي علامات البرود مثل تجميد أو التهرب أو إخفاء.
    2. في أيام أربع وخمس سنوات، تنتهي المعالجة في دغدغة، كما هو موضح في كلوتير et al. (2012). 27
      ملاحظة: مؤشرات لتعود نجاح هي، على سبيل المثال، الفئران أخذ مكافأة الغذاء إذا عرضت باليد أو الفئران الاقتراب الناحية، استكشاف، أو لمسها.

2-الفرس التدريب

ملاحظة: دورة تدريبية تستغرق أربع دقائق ويتكون من فترات من 30 ثانية للتدريب يتبعها 15 ثانية لكسر. قم بإزالة أي من المواد المضافة أثناء الإيقاف المؤقت. الفأر المراقب حر في أن يفعل ما يريد، وأنه مسموح للمشاركة وتستهلك المكافأة، ولكن يتم التركيز فقط على الفئران الأخرى. كانت مدغدغ جميع الفئران في يوم واحد ويوم الخمس. لنجاح التدريب، من الأهمية بمكان أن المجرب تولي اهتماما لسلوك الحيوانات، ويتصرف بطريقة هادئة. التدريب تعتمد اعتماداً كبيرا على قدرات المجرب توقيت وقوة للمراقبة. يحدث لا ردود الفعل اللفظية في التدريب، والتواصل اللفظي مع الحيوانات قد تحدث فقط خارج الدورات. مؤشرا لتعلم السلوك المطلوب هو تكرار السلوك.

  1. إعداد
    1. إعداد المواد اللازمة، مثل المكافأة وتركيبة عصا الفرس/الهدف وجهاز توقيت، قفص نظيف، أنبوب معدني وأي مواد تدريبية محددة أخرى.
    2. نقل القفص المنزل إلى مكان هادئ.
    3. إزالة كافة العناصر من القفص. الفئران اثنين فقط (المدربين والمراقبين) وينبغي أن تظل المواد الفراش في القفص.
  2. تدريب اليوم 1: إقامة اتصال بين نحوّله الابتدائي والثانوي
    1. وضع نفق قصيرة في قفص المنزل، ويفضل أن يكون أحد الفئران على دراية.
    2. الانتظار حتى الفئران يجلس في النفق وثم تغذية الفئران بالمكافأة.
      ملاحظة: إذا لم يتم تغذية الفئران تحت ظروف حالة التدريب، مرحلة التعود يجب تمديدها أو تعديلها.
    3. حالما يظهر الاهتمام بالمكافأة الفئران وهو على وشك البدء في القضم في المكافأة، انقر فوق وثم ترك الفئران تتغذى على المكافأة. لضمان أن الاقتران من البلدين ويعزز هو ناجحة، كرر النقر فوق ومن ثم مكافأة لمدة 15 ثانية. القيام بذلك مرتين على الأقل أثناء هذه الدورة التدريبية الأولى.
    4. إذا تشارك الفئران، التحقق من وجود علامات لإقامة اتصال بين المرحلة الابتدائية ونحوله الثانوية. المعيار الرئيسي لهذا التصنيف هو تقدير مكافأة الغذاء، الذي يتضح من الفئران باستنشاق، تبحث حولها، وفي يده أن يقدم مكافأة الغذاء أو رفع لأطرافه هند لها بغية البحث عن المكافأة (الشكل 2). في حالة حدوث ذلك، المضي قدما في الجزء القادم؛ خلاف ذلك، كرر "يوم التدريب 1"
  3. التدريب 2 إلى 5 أيام: تمر عبر نفق قصيرة
    ملاحظة: دورة تدريبية تتألف من مراحل متناوبة من 30 ثانية للتدريب و 15 ثانية لاستراحة لمدة أربع دقائق.
    1. وضع نفق قصيرة من نفس مادة من أول نفق يستخدم الأصلي الذي سيربط أقفاص اثنين في قفص المنزل.
    2. بدء تشغيل جهاز ضبط الوقت والبدء فورا بأول 30 ثانية من التدريب.
      1. في المرة الأولى الفئران يدخل النفق، تقديم المكافأة في نهاية النفق. حالما يدخل الفئران النفق، انقر فوق واسمحوا الفئران تآكل المكافأة.
      2. يسلب مكافأة الغذاء والانتظار حتى الفئران يظهر اهتماما للنفق مرة أخرى. انقر فوق أقرب الفئران يدخل النفق وتقديم المكافأة في نهاية النفق (الشكل 3).
      3. وبعد 30 ثانية تدريب، إضافة فاصل ثانية 15 (إزالة النفق).
    3. تكرار كسر 30 ثانية من التدريب مع ثانية 15 لاحقة لأربع دقائق.
    4. إذا أظهرت الفئران السلوك المطلوب أكثر من أربع مرات لمدة دقيقة، والنقر فوق إيقاف ومكافأة عادلة مع نحوّله الأولية.
    5. توقف بعد أربع دقائق.
  4. تدريب الأسبوع 2: لمس عصا هدف
    1. بدء تشغيل جهاز ضبط الوقت والبدء فورا بأول 30 ثانية من التدريب. إضافة فاصل كل 15 ثانية، ثم يذهب التدريب.
    2. ضع العالم عصا الهدف القرب من الفئران.
    3. بمجرد أن الفئران يظهر الاهتمام في أنحاء العالم، انقر فوق ومكافأة الفئران. كرر هذا عدة مرات.
    4. إذا كان الفأر يظهر الاهتمام في أنحاء العالم أكثر من أربع مرات لمدة دقيقة، السلوك المقبل لتعزيز "لمس العالم مع الآنف."
    5. إذا كانت الفئران يكرر هذا السلوك لأكثر من أربع مرات لمدة دقيقة، وقف مكافأة النقر وعادل مع نحوّله الأولية.
    6. توقف بعد أربع دقائق.
  5. تدريب الأسبوع 3 (خمسة أيام) وأسبوع 4 (ثلاثة أيام): تغيير القفص من خلال نفق.
    ملاحظة: هنا، فقط يمر عبر النفق نحو القفص نظيفة ويتعزز. التدريب في الأسبوع 4 قد تم تقصير مدة ثلاثة أيام التدريب. هذه المرة بالفعل كافية لنجاح التدريب، ويعطي الفرصة ليوم إضافي واحد للتقييم أو بيانات تسجيل لإجراء مزيد من التجارب.
    1. إقامة اتصال بين القفص المنزل وقفص نظيفة جديدة بنفق بإدراج نسخة أطول نفق مألوفة للفئران.
    2. في يوم واحد، إجراء أي تدريب، والسماح فقط على الفئران فحص النفق. وهناك فرصة جيدة أن أنهم سوف حتى نقل إليها بمفردها.
    3. في اليوم الثاني، إعطاء الفئران دقيقتين لنقل من خلال النفق بمفردها من القذرة إلى الجانب نظيفة. إذا كان الفأر نقل بحرية من خلال النفق، تخطي إلى الخطوة 2.5.8.
    4. خلاف ذلك، تبدأ الأولى الثانية 30 تدريب الدورة (مناوبة بين 30 ثانية تدريب وكسر ثانية 15) لأربع دقائق.
    5. انقر فوق، ومكافأة الفئران حالما يظهر الاهتمام في النفق.
    6. انتقل إلى فوق ومكافأة المدخل داخل النفق.
    7. انتقل إلى فوق ومكافأة إذا الفئران أعمق في النفق.
    8. تواصل بطريقة مماثلة حتى الفئران يعمل من خلال النفق كله. حالما الفئران يبدأ الطفولية في نهاية النفق في قفص نظيف، يقدم العالم عصا الهدف، انقر فوق، ومكافأة للمس الكرة الأرضية.
    9. في الماضي، دليل الفئران لمغادرة النفق. لهذه العملية، استخدم العالم العصا المستهدفة. يقدم العالم أمام النفق وانقر فوق ومكافأة الفئران بمجرد أنها خطوات في القفص الجديد وهو لمس الكرة الأرضية.
    10. نقل الفئران مرة أخرى إلى القفص المنزل "القذرة". وضع اليد تحت البطن أو حول الصدر وناحية أخرى دعم الخلفيتين من الفئران رفعها (الشكل 1). يقدم العالم عصا الهدف في وسط القفص نظيفة. انقر فوق ومكافأة كالفئران يمر عبر النفق وهو ملامسة العصا المستهدفة (الشكل 4).
    11. إذا كان الفأر تكرار السلوك لأكثر من أربع مرات لمدة دقيقة، وقف مكافأة النقر وعادل مع نحوّله الأولية.
    12. توقف بعد أربع دقائق.

Subscription Required. Please recommend JoVE to your librarian.

Representative Results

وجرى التدريب على مجموعة من عشرة إناث الفئران مقنعين ليستر (دينار). عشرة غير مدربين ولكن التعامل معها بلطف الإناث LD الفئران كمجموعة مراقبة. يعني معالجة لطيف أن الفئران رفع فقط من الجسم ولا ترفع عند قاعدة الذيل. وأضاف نحن لتقييم التعلم بالملاحظة، مجموعة أخرى من الإناث 10 دينار الفئران التي كانوا غير مدربين ولكن زملائه في قفص الجرذان المدربة وكانت قادرة على مراقبة التدريب. إكمال جميع الفئران بالتأقلم والتعود على التعامل. ويتألف التدريب الانتقال إلى قفص جديد من خلال أنبوب معدني (الشكل 4). كوفئ مظاهر السلوك المطلوب (الشكل 4). تم تقييم كل دورة تدريبية، وقد تم تحليل نجاح التدريب في ثلاث فئات هي: المشاركة وليس المشاركة والسلوك الاستكشافية. على الفئران المدربة عموما المهتمين بالتدريب وإنما يظهر أيضا حافز عالية لاستكشاف البيئة الجديدة. خاصة خلال الأيام الأولى من التدريب، كان سلوك الاستكشافية بارزة جداً (الشكل 5). بعد ثلاثة أيام فقط من التدريب، أغلبية من الفئران عرض السلوك المطلوب وتغيير القفص عبر الأنابيب المعدنية (الشكل 5). بعد الانتهاء من التدريب لمدة خمسة أيام، أظهرت جميع الفئران المدربة السلوك (الشكل 5). وقد استمر التدريب لمدة أربعة أسابيع، مع خمسة أيام لتدريب كل. وبعد أربعة أسابيع من يراقب "مركز التدريب" من مجموعة التدريب الرصدية، قيمت هذه الفئران. لهذا التقييم، احصينا عدد المرات التي ركض الفئران من خلال النفق إلى القفص نظيفة خلال دورة تدريبية واحدة. إجمالاً، 80% الفئران علم السلوك المطلوب بمشاهدة (الشكل 6).

كذلك قمنا بفحص ما إذا كان التدريب كان له أثر إيجابي على الفئران المدربة. ولذلك، يمكننا تقييم السلوكيات المتصلة بالخوف من الفئران أثناء ضبط النفس بعد أربعة أسابيع تدريب. سجلت التبول والتغوط وحناجرهم، وحسبت على درجة من البرود (لا السلوك المتصلة بالخوف = 0، واحد من السلوك المتصلة بالخوف = 1، هما السلوكيات المتصلة بالخوف = 2، ثلاثة السلوكيات المتصلة بالخوف = 3). مجموعة غير مدربين وأظهرت زيادة ملحوظة في درجات السلوك المتصلة بالخوف (الشكل 7).

Figure 1
الشكل 1 : لطيف رفع الفئران. يدا واحدة ويوضع تحت البطن أو حول الصدر، وناحية أخرى تدعم الخلفيتين من الفئران. الرجاء انقر هنا لمشاهدة نسخة أكبر من هذا الرقم-

Figure 2
الشكل 2 : الشم وتربية- الفئران يظهر اهتماما في مكافأة الغذاء باستنشاق أو تبحث رفع بأطرافهم هند. الرجاء انقر هنا لمشاهدة نسخة أكبر من هذا الرقم-

Figure 3
الشكل 3 : النفق القصير. مكافأة الفئران بعد مرورها عبر نفق قصيرة. الفأر المراقب يظهر اهتماما في الإجراء. الرجاء انقر هنا لمشاهدة نسخة أكبر من هذا الرقم-

Figure 4
الشكل 4 : مكافأة بعد تغيير القفص. فأر يكافأ بعد الانتقال إلى قفص نظيفة من خلال أنبوب معدني. الرجاء انقر هنا لمشاهدة نسخة أكبر من هذا الرقم-

Figure 5
الشكل 5 : الأيام حتى التعلم. باستخدام مقرقعة التدريب تدريب مجموعة من عشرة إناث الفئران يستر مقنعين لتغيير القفص عبر أنبوب معدني. وتم تقييم التدريب في ثلاث فئات: المشاركة وليس المشاركة والسلوك الاستكشافية (nd: لم يتم الكشف عن: لم يظهر أي من الفئران في سلوك كل منهما). جميع الفئران اكتسبت السلوك المدربين بعد خمسة أيام تدريب. الرجاء انقر هنا لمشاهدة نسخة أكبر من هذا الرقم-

Figure 6
الرقم 6 : تعلم الرصدية. مجموعة من عشرة ليستر الإناث مقنعين الفئران التي كانت الأصحاب قفص الفئران مدربين لم تطرأ تدريب أنفسهم ولكن سمح بمراقبة التدريب. بعد أربعة أسابيع مراقبة، قيمت الفئران للتبرعات قفص تغيير السلوك. عموما، تغيير 80% مجموعة التعلم القائمة على الملاحظة أقفاص عبر الأنابيب المعدنية. الرجاء انقر هنا لمشاهدة نسخة أكبر من هذا الرقم-

Figure 7
الشكل 7: المتصلة بالخوف درجة السلوك. بعد أربعة أسابيع تدريب، جميع الفئران عبر المجموعات 3 (التعلم المدربين، والرصد، ومجموعة المراقبة غير مدربين) ضبط النفس، وسجلت الألفاظ والتغوط والتبول وبعد ذلك تستخدم لحساب درجة سلوك المتصلة بالخوف لكل الفئران (لا السلوك المتصلة بالخوف = 0، واحد من السلوك المتصلة بالخوف = 1، هما السلوكيات المتصلة بالخوف = 2، ثلاثة السلوكيات المتصلة بالخوف = 3). يصور السلوكيات المتصلة بالخوف ك ± يعني sem. للتحليل الإحصائي، أنجز ANOVA أحادي اتجاه مع اختبار المقارنات المتعددة اللاحقة توكي. وأظهر الفريق غير مدربين مقارنة درجة زيادة السلوك المتصلة بالخوف لأن المدربين والمراقبة تعلم المجموعات. الرجاء انقر هنا لمشاهدة نسخة أكبر من هذا الرقم-

Subscription Required. Please recommend JoVE to your librarian.

Discussion

البروتوكول المذكورة أعلاه مفيد تمديد تطبيق لدينا بروتوكول التدريب الفرس هو موضح سابقا ل الفئران المختبرية10. ويتطلب التنفيذ دقائق فقط في اليوم الواحد على ما مجموعة سبعة أسابيع، بما في ذلك التأقلم والتعود والتدريب الفرس. لجدوى، اقتصر هذا البروتوكول على أيام الأسبوع مع دورات لمدة عشر دقائق تقريبا كل زوج من الفئران. البروتوكول يمكن أن تبدو وكأنها تستغرق وقتاً طويلاً لإنشاء مستعمرات الفئران الكبيرة، ولكن إذا عينت الحيوانات للتجارب الطويلة الأجل أو كمربي، يمكن أن يساعد على تحسين عملية قفص المتغيرة في الأجل الطويل. وباﻹضافة إلى ذلك، اضطراب انخفاض أثناء إجراء التجارب يمكن تحسين نوعية النتائج. كذلك، كل الوقت يمتد ولاحظت في هذا البروتوكول هي توصيات ويمكن تعديلها لتناسب الاحتياجات المحددة أي مختبر. ويمكن تقصير فترات زمنية إذا الحيوانات تعلم المهام بسرعة أو إذا كان الفعل قد اعتادوا على الفئران. عموما، الفئران مهتما التدريب ويتطلب فقط بعض التكرار للحصول على السلوك المطلوب "تغيير القفص عن طريق أنبوب". حتى بدون تدريب، التطوع الفئران المستفادة لأداء السلوك المطلوب من المراقبة، كما أن 80% مجموعة المراقبة التعلم تشارك بنجاح في قفص المتغيرة عند اختباره. نقدم هنا، طريقة للمدربين قفص المتغيرة لأنها إجراء روتيني كثيرا ما يقومون به في تربية الحيوان ومن المعروف أن يسبب الإجهاد في الحيوانات. ويرجع جزئيا على الأقل على الاضطرابات البدنية أثناء تغيير القفص2،4هذا الإجهاد. ويعطي التدريب على الفئران خيار التعاون طواعية في تنفيذ هذا الإجراء تربية. بعد اختيار المشاركة في مهمة يقترح أن تكون لها آثار مفيدة على الحيوانات وذلك قد يساعد على تقليل الإجهاد28. التدريب مفيد أيضا في حالات أخرى الطرق، كما أنه بمثابة شكل من أشكال الإثراء المعرفي. تأثير إيجابي على الفئران أصبحت واضحة للعيان بتخفيض في السلوك المتصلة بالخوف عليها ويجري ضبط النفس. التدريب المباشر تظهر أن تكون مفيدة للمعالجة في وقت لاحق من هذه الفئران، بل التعلم القائمة على الملاحظة خفض درجة السلوك ذات الصلة الخوف كذلك. وأبقى لنا الفئران في بيئات قياسي، المخصب مع PVC-النفق والمناديل الورقية. بالإضافة إلى التدريب، تعرضوا جميع الفئران عبر المجموعات الثلاث مقايسة دغدغة. وبناء على ذلك، نحن لم يكشف عن أي عجز في الرفاه في أي من الفئات، كما لم تكن هناك فروق في تفضيل السكروز أو تختبئ السلوك بين المجموعات الثلاث (البيانات لا تظهر). ومع ذلك، يبدو التدريب تكون مفيدة بالنسبة الفئران، كما أنها أظهرت انخفاض السلوك المتصلة بالخوف بينما يجري ضبط النفس.

من ناحية، التدريب على الفئران قد يؤدي إلى تفاعل نونستريسفول بين البشر والحيوانات، والتي تستفيد منها الحيوانات وضوح. من ناحية أخرى، ومع ذلك، الاتصال بين البشر والحيوانات تحمل دائماً خطر التلوث بالنظافة. على وجه الخصوص، الاتصال بين الحيوانات والجلد كشفت نتائج المواضيع المؤقتة المجرب أو الحيوان في ارتفاع معدل عدوى في الفئران24. ولذلك، تبعاً لمستوى النظافة، وينبغي تدريب الحيوانات بعناية، ويجب أن تلبس ملابس واقية من المدربين مع التعديلات اللازمة للبروتوكول تبعاً لمتطلبات المرفق. على سبيل المثال، يمكن إهماله الأنابيب المعدنية إذا تنظيف الأنابيب بما فيه الكفاية ليس أمرا ممكناً أو تستغرق وقتاً طويلاً جداً للعمل اليومي. قمنا باستخدام الأنابيب لأنه يسمح سهولة قياس نجاح التدريب وأيضا يحول تلقائياً بالتناوب بين أقفاص الجرذان. ومع ذلك، من الممكن أيضا لتدريب الفئران لتغيير الأقفاص بتحريك جدران القفص القديم إلى القفص الجديد. هذه العملية قد حتى تسريع الإجراء إذا كان القفص تغيير يحدث بشكل متكرر لأن الفئران غريبة جداً والاستكشافية. في اختيار الأنابيب ومكافأة فيما يتعلق بالنظافة، ضمان أن كلاهما سهلة لتنظيف وتطهير، أو اﻷوتوكﻻف. ويمكن تعديل البروتوكول لمجموعة من إعدادات البحث. على سبيل المثال، يمكن استخدام الجسور، التي تسمح للفئران لتغيير أقفاص دون المخاطر الجسدية أو اضطراب متأثراً بجراحه بعد التدخلات الجراحية. على المدى الطويل، هذا البروتوكول يسمح بالاتصال المباشر أقل بين الحيوانات المدربة وحارس الحيوان. وهكذا، تتعرض الحيوانات لحمولة جرثومية أقل. علاوة على ذلك، سيتطلب الفئران ليست كلها بسبب تعلم الرصد ناجحة على الفئران، التدريب. قد يكون هذا التعلم القائمة على الملاحظة مفيدة بشكل خاص في تربية أقفاص، الذرية قد تكون قادرة على تعلم السلوك مباشرة من الأم. يمكن أن يساعد إنقاص الاتصال المباشر ولكن عموما لا بين الجرذان والحيوانات أولياء الأمر للحد من خطر التلوث بينما في نفس الوقت إقامة علاقة ثقة من خلال التدريب. مستوى النظافة لها أهمية كبيرة نظراً لأن إينتيركورينت الإصابات التي تحدث أثناء مراحل تربية والتجريبية يمكن أن تحد بشكل كبير الأهمية العلمية للتجارب على الحيوانات؛ وهكذا، قد يساعد هذا البروتوكول على مواصلة تحسين الرفاه والعلم29.

للحصول على التطبيق الناجح لهذا البروتوكول، ينبغي مراعاة عدة نقاط. يجب أن تكون فترة تأقلم للفئران المحافظة إذا تم نقل أنهم قبل التدريب. طول فترة تأقلم ينبغي تكييف لقضية البحث العلمي. وقد أثبتت الدراسات السابقة أن وقت مدى ثلاثة أيام قد تكون كافية لبعض تجارب30،31، حين دراسة أخرى أظهرت أن البلازما يظل الكورتيزون زيادة الأسبوعين الماضيين ما يزيد على32. في هذه الدراسة، نختار فترة تأقلم لمدة 14 يوما بعد النقل من مربي التجارية إلى مرفق الحيوان. ويجب رصد كل الفئران لأي دلائل على عدم الراحة قبل التدريب. إذا لم تكن المجرب دراية بالفئران، يمكن استخدام أدوات مثل مقياس كشر الفئران لمرجع33. دون هذه الاعتبارات، فقد خفض معدل النجاح في التدريب. الفئران يمكن أن تكون طبيعتها حريصة جداً، وقد تتطلب مراحل التعود إضافية. محاولة لتدريب الحيوانات خوفاً من سيحقق نجاحا محدودا. أكد الأقل وخوفا من الحيوانات في بداية التجربة، أسرع التدريب سيتم الانتهاء.

نهاية مرحلة التعود هو نقطة الوقت الأمثل لبيانات خط الأساس سجل لتجارب أخرى. إذا كانت أساليب الغازية ضرورية للتجربة، البروتوكول ينبغي أن يكون مؤقتاً. يشير إلى أي أسلوب التي تساوي أسلوب الغازية أو أعلاه شدة خفيفة المبينة في المرفق الثامن "تصنيف الخطورة من إجراءات" التوجيه 2010/63/الاتحاد الأوروبي9.

للدورة التدريبية، خطة لتدريب يمكن أن تكون أداة مفيدة للتأكد من أن البروتوكول سوف تجري دائماً على النحو المرغوب فيه. هذا التخطيط هو المجربون أهمية خاصة عند مختلف أو معالجات المعنية.

مجتمعة، هذا من السهل جداً، والموجهة نحو تطبيق البروتوكول قد ليس فقط الحد من التوتر خلال إجراءات تربية وإعدادات البحث ولكن أيضا ربما تكون لها آثار مفيدة على الصحة الحيوانية. ولذلك، يمكن تسهيل التغيير قفص التدريب في الفئران البحوث العالية الجودة ورفاه الحيوانات للبحث.

Subscription Required. Please recommend JoVE to your librarian.

Disclosures

الكتاب ليس لها علاقة بالكشف عن.

Acknowledgments

الكتاب ممتنون يكر توماس لدعمه التقني. كذلك نشكر الدكتور إيكر روث لها الدعم الرقيقة.

Materials

Name Company Catalog Number Comments
Target Stick with Clicker Trixie 2282
Metal Pipe (Alu Flexrohr nw 100) Rotheigner available in construction marktes
White Chocolate/ white chocolate cream Company doesn't matter, preferable organic quality
Prism Version 6.0 for Mac GraphPad Software

DOWNLOAD MATERIALS LIST

References

  1. Balcombe, J. P., Barnard, N. D., Sandusky, C. Laboratory routines cause animal stress. Contemporary Topics in Laboratory Animal Science. 43 (6), 42-51 (2004).
  2. Sharp, J., Zammit, T., Azar, T., Lawson, D. Stress-like responses to common procedures in individually and group-housed female rats. Contemporary Topics in Laboratory Animal Science. 42 (1), 9-18 (2003).
  3. Sharp, J. L., Zammit, T. G., Lawson, D. M. Stress-like responses to common procedures in rats: effect of the estrous cycle. Contemporary Topics in Laboratory Animal Science. 41 (4), 15-22 (2002).
  4. Duke, J. L., Zammit, T. G., Lawson, D. M. The effects of routine cage-changing on cardiovascular and behavioral parameters in male Sprague-Dawley rats. Contemporary Topics in Laboratory Animal Science. 40 (1), 17-20 (2001).
  5. Saibaba, P., Sales, G. D., Stodulski, G., Hau, J. Behaviour of rats in their home cages: Daytime variations and effects of routine husbandry procedures analysed by time sampling techniques. Laboratory Animals. 30 (1), 13-21 (1996).
  6. Sharp, J. L., Zammit, T. G., Azar, T. A., Lawson, D. M. Stress-like responses to common procedures in male rats housed alone or with other rats. Contemporary Topics in Laboratory Animal Science. 41 (4), 8-14 (2002).
  7. Pekow, C. Defining, measuring, and interpreting stress in laboratory animals. Contemporary Topics in Laboratory Animal Science. 44 (2), 41-45 (2005).
  8. Wilson, L. M., Baldwin, A. L. Effects of environmental stress on the architecture and permeability of the rat mesenteric microvasculature. Microcirculation. 5 (4), 299-308 (1998).
  9. The European Union European Parliament and the Council of the European Union. Directive 2010/63/EU of the European Parliament and of the Council of 22. Official Journal of the European Union. , The European Union European Parliament and the Council of the European Union Directive 2010/63/EU of the European Parliament and of the Council of 22 33-79 (2010).
  10. Leidinger, C., Herrmann, F., Thöne-Reineke, C., Baumgart, N., Baumgart, J. Introducing Clicker Training as a Cognitive Enrichment for Laboratory Mice. Journal of Visualized Experiments. 2017 (121), 1-12 (2017).
  11. Westlund, K. Training is enrichment-And beyond. Applied Animal Behaviour Science. 152, 1-6 (2014).
  12. Laule, G., Desmond, T. Positive reinforcement training as an enrichment strategy. Second Nature: Environmental Enrichment for Captive Animals. , 302-313 (1998).
  13. Laule, G. E., Bloomsmith, M. A., Schapiro, S. J. The Use of Positive Reinforcement Training Techniques to Enhance the Care, Management, and Welfare of Primates in the Laboratory. Journal of Applied Animal Welfare Science. 6 (3), 163-173 (2003).
  14. Kogan, L., Kolus, C., Schoenfeld-Tacher, R. Assessment of clicker training for shelter cats. Animals. 7 (10), 1-11 (2017).
  15. Miller, R., King, C. E. Husbandry training, using positive reinforcement techniques, for Marabou stork Leptoptilos crumeniferus at Edinburgh Zoo. International Zoo Yearbook. 47 (1), 171-180 (2013).
  16. Vertein, R., Reinhardt, V. Training female rhesus monkeys to cooperate during in-homecage venipuncture. Laboratory Primate Newsletter. 28, 1-3 (1989).
  17. Bloomsmith, M. A., et al. Positive reinforcement training to elicit voluntary movement of two giant pandas throughout their enclosure. Zoo Biology. 22 (4), 323-334 (2003).
  18. Bloomsmith, M. A., Stone, A. M., Laule, G. E. Positive reinforcement training to enhance the voluntary movement of group-housed chimpanzees within their enclosures. Zoo Biology. 17 (4), 333-341 (1998).
  19. Veeder, C. L., Bloomsmith, M. A., McMillan, J. L., Perlman, J. E., Martin, A. L. Positive reinforcement training to enhance the voluntary movement of group-housed sooty mangabeys (Cercocebus atys atys). Journal of the American Association for Laboratory Animal Science. 48 (2), 192-195 (2009).
  20. Coleman, K., Maier, A. The use of positive reinforcement training to reduce stereotypic behavior in rhesus macaques. Applied Animal Behaviour Science. 124 (3-4), 142-148 (2010).
  21. Newcomer, C. E., Fox, J. G. Zoonoses and other human health hazards. The Mouse in Biomedical Research, Vol. II, Diseases. , 719-745 (2007).
  22. Boot, R., Koopman, J. P., Kunstýl, I. Microbiological standardization. Principles of Laboratory Animal Science. , 143-165 (1993).
  23. Nicklas, W. Possible routes of contamination of laboratory rodents kept in research facilities. Scandinavian Journal of Laboratory Animal Science. 20, 53 (1993).
  24. FELASA working group on revision of guidelines for health monitoring of rodents and rabbits et al. FELASA recommendations for the health monitoring of mouse, rat, hamster, guinea pig and rabbit colonies in breeding and experimental units. Laboratory Animals. 48 (3), 178-192 (2014).
  25. Nicklas, W., et al. Implications of infectious agents on results of animal experiments. Laboratory Animals. 33, 39-87 (1999).
  26. Tierärztliche Vereinigung für Tierschutz e.V. Merkblatt Nr. 160. Heimtiere: Ratten. , (2014).
  27. Cloutier, S., Panksepp, J., Newberry, R. C. Playful handling by caretakers reduces fear of humans in the laboratory rat. Applied Animal Behaviour Science. 140 (3-4), 161-171 (2012).
  28. Bassett, L., Buchanan-Smith, H. M., McKinley, J., Smith, T. E. Effects of Training on Stress-Related Behavior of the Common Marmoset (Callithrix jacchus) in Relation to Coping With Routine Husbandry Procedures. Journal of Applied Animal Welfare Science. 6 (3), 221-233 (2003).
  29. Baker, D. G. Natural pathogens of laboratory mice, rats, and rabbits and their effects on research. Clinical Microbiology Reviews. 11 (2), 231-266 (1998).
  30. van Ruiven, R., Meijer, G. W., Wiersma, A., Baumans, V., Van Zutphen, L. F. M., Ritskes-Hoitinga, J. The influence of transportation stress on selected nutritional parameters to establish the necessary minimum period for adaptation in rat feeding studies. Laboratory Animals. 32 (4), 446-456 (1998).
  31. Capdevila, S., Giral, M., Ruiz de la Torre, J. L., Russell, R. J., Kramer, K. Acclimatization of rats after ground transportation to a new animal facility. Laboratory Animals. 41 (2), 255-261 (2007).
  32. Arts, J. W. M., Kramer, K., Arndt, S. S., Ohl, F. The impact of transportation on physiological and behavioral parameters in Wistar rats: implications for acclimatization periods. ILAR journal / National Research Council, Institute of Laboratory Animal Resources. 53 (1), 82-98 (2012).
  33. Sotocina, S. G., et al. The Rat Grimace Scale: A Partially Automated Method for Quantifying Pain in the Laboratory Rat via Facial Expressions. Molecular Pain. 7, (2011).

Tags

تغيير السلوك، العدد 140، القفص، الفرس التعزيز الإيجابي، والتدريب التدريب والصقل، والنظافة، ورفاهية
استخدام مقرقعة التدريب والمراقبة الاجتماعية لتعليم الفئران لتغيير أقفاص طوعا
Play Video
PDF DOI DOWNLOAD MATERIALS LIST

Cite this Article

Leidinger, C. S., Kaiser, N.,More

Leidinger, C. S., Kaiser, N., Baumgart, N., Baumgart, J. Using Clicker Training and Social Observation to Teach Rats to Voluntarily Change Cages. J. Vis. Exp. (140), e58511, doi:10.3791/58511 (2018).

Less
Copy Citation Download Citation Reprints and Permissions
View Video

Get cutting-edge science videos from JoVE sent straight to your inbox every month.

Waiting X
Simple Hit Counter