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Medicine

मानव Gingiva में भ्रष्टाचार Neovascularization की निगरानी के लिए एक उपंयास दृष्टिकोण

Published: January 12, 2019 doi: 10.3791/58535
Automatic Translation
1, 1, 1, 1, 1
1Department of Conservative Dentistry, Faculty of Dentistry, Semmelweis University

Summary

इस अध्ययन लेजर बिंदु कंट्रास्ट इमेजिंग द्वारा मानव मौखिक म्यूकोसा में microcirculation को मापने के लिए एक प्रोटोकॉल का परिचय । एक xenogenic कोलेजन भ्रष्टाचार के साथ संयुक्त vestibuloplasty के बाद घाव भरने की निगरानी एक नैदानिक मामले पर प्रस्तुत किया जाता है ।

Abstract

लेजर बिंदु कंट्रास्ट इमेजिंग (LSCI) बड़े क्षेत्रों में सतही रक्त छिड़काव को मापने के लिए एक उपंयास विधि है । चूंकि यह गैर इनवेसिव है और मापा क्षेत्र के साथ सीधे संपर्क से बचा जाता है, यह मानव रोगियों में घाव भरने के दौरान रक्त के प्रवाह में परिवर्तन की निगरानी के लिए उपयुक्त है । Vestibuloplasty मौखिक बरोठा के लिए periodontal सर्जरी है, keratinized gingiva के एक साथ वृद्धि के साथ vestibular गहराई बहाल करने के लिए लक्ष्य । इस विशेष नैदानिक मामले में, एक विभाजन मोटाई प्रालंब पहले ऊपरी premolar पर ऊंचा और एक xenogenic कोलेजन मैट्रिक्स परिणामी प्राप्तकर्ता बिस्तर के लिए अनुकूलित किया गया था । LSCI की निगरानी के लिए इस्तेमाल किया गया था और भ्रष्टाचार के neovascularization और एक साल के लिए आसपास के म्यूकोसा । एक प्रोटोकॉल मौखिक म्यूकोसा में microcirculation माप का सही समायोजन के लिए पेश किया है, कठिनाइयों और संभावित विफलताओं पर प्रकाश डाला.

नैदानिक मामले का अध्ययन प्रस्तुत किया है कि-उपयुक्त प्रोटोकॉल के बाद-LSCI एक उपयुक्त और विश्वसनीय विधि मानव मौखिक म्यूकोसा में एक चिकित्सा घाव में microcirculation का पालन करने के लिए और भ्रष्टाचार एकीकरण पर उपयोगी जानकारी देता है ।

Introduction

एक नैदानिक स्थिति में मानव मसूड़ों microcirculation की लंबी अवधि के परिवर्तन की निगरानी मौखिक और periodontal सर्जरी में एक गर्म विषय है । हालांकि, छिड़काव के विश्वसनीय आकलन मुश्किल हो सकता है । वहां केवल कुछ तरीके है कि आक्रामक मानव म्यूकोसा के रक्त परिसंचरण में परिवर्तन उपाय नहीं कर रहे हैं । इनमें से दो एक लेजर बीम1,2,3,4, लेकिन एक अलग तरीके से काम करते हैं । लेज़र डॉपलर flowmetry (एलडीएफ) एक लेजर बीम5,6में डॉप्लर शिफ्ट का उपयोग करता है, जबकि लेजर बिंदु कंट्रास्ट इमेजिंग (LSCI) विधि लाल रक्त के वेग को मापने के लिए backscattered लेजर प्रकाश के बिंदु पैटर्न पर निर्भर करती है कोशिकाओं7.

केवल एक ही बिंदु में एलडीएफ उपायों, और ' सेंसर की स्थिति का reproducible मानकीकरण एक वांछनीय अभी तक मुश्किल काम है । एक और समस्या यह है कि एलडीएफ की जांच व्यास (1 मिमी2) में छोटा है । सर्जरी से पहले पूर्व निर्धारित अंक पर मापने भी विशिष्ट है, और पश्चात संचार परिवर्तन करने के लिए अंधा हो सकता है, जबकि शोफ, ऊतक हटाने, ऊतक आंदोलन या प्रत्यारोपित भ्रष्टाचार के पश्चात ज्यामिति में महत्वपूर्ण परिवर्तन के कारण प्रभावित कोमल ऊतक । एलडीएफ के मापने दूरी से कम है 1 मिमी जो ऊतक के volumetric परिवर्तन के मामले में जांच के लिए एक पूर्व निर्धारित छेद के साथ एक दंत पट्टी के उपयोग पर प्रतिबंध लगाता है । LSCI स्थानीयकरण के लिए किसी विशेष उपकरण की आवश्यकता नहीं है और कई सेमी2के क्षेत्रों में माप सकते हैं । नतीजतन, घाव भरने शल्य साइट भर में पीछा किया जा सकता है । इसके अलावा, LSCI एक दूसरे के एक अंश पर रंग कोडित छवियों में रक्त छिड़काव प्रदर्शित कर सकते हैं, 20 माइक्रोन तक के एक संकल्प के साथ.

इस पत्र में प्रस्तुत LSCI डिवाइस ज्यादातर छोटे माप क्षेत्रों में उच्च संकल्प वांछित है, जहां पशु अनुसंधान अनुप्रयोगों के लिए प्रयोग किया जाता है । हालांकि, के बाद से संरचना और मानव मौखिक म्यूकोसा के प्रोटोकॉल क्षेत्र (संलग्न gingiva, सीमांत gingiva, vestibular म्यूकोसा) से अलग हैं, रक्त परिसंचरण भी विषम8है । इसलिए, उच्च संकल्प LSCI सामांय संकल्प LSCI जो आम तौर पर मानव परीक्षण में प्रयोग किया जाता है पर एक महान लाभ है ।

LSCI साधन एक अदृश्य लेजर (तरंग दैर्ध्य ७८५ एनएम) कार्यरत हैं । बीम माप क्षेत्र को रोशन करने के लिए, एक बिंदु पैटर्न बनाने के लिए भिंन है । एक सीसीडी कैमरा छवियों प्रबुद्ध क्षेत्र में बिंदु पैटर्न । इस प्रणाली में प्रयुक्त सीसीडी कैमरा १३८६ x १०३४ पिक्सेल का एक सक्रिय इमेजिंग क्षेत्र है और इसका रिज़ॉल्यूशन मापन क्षेत्र के आकार के आधार पर 20 – 60 µm/पिक्सेल के बीच है और सॉफ़्टवेयर की सेटिंग (ंयून, मध्यम, उच्च) पर है । यह प्रति सेकंड 16 फ्रेम की एक गति से छवियों को ले जा सकते हैं, या और भी अधिक, प्रति सेकंड १०० फ्रेम करने के लिए, यदि छवि आकार कम हो गया है । रक्त छिड़काव अंतर्निहित सॉफ्टवेयर द्वारा गणना की है । यह बिंदु पैटर्न में भिन्नता का विश्लेषण करती है और इसके विपरीत quantifies है । जिसके परिणामस्वरूप प्रवाह एक छिड़काव छवि का उत्पादन करने के लिए कोडित रंग है । हमारे पिछले परिणामों के अनुसार, LSCI अच्छी दोहराने और reproducibility9के साथ gingiva के रक्त छिड़काव का आकलन है । इसका मतलब यह है कि यह न केवल अल्पकालिक प्रयोगों में मौखिक म्यूकोसा के microcirculation में परिवर्तन की निगरानी के लिए एक विश्वसनीय उपकरण है, लेकिन यह भी लंबी अवधि के अध्ययन के दौरान रोग प्रगति या घाव भरने10चिकित्सा ट्रैक ।

इस पत्र में, हम एक नैदानिक मामले की रिपोर्ट प्रस्तुत करने के लिए प्रदर्शित करता है कि LSCI के उच्च स्थानिक संकल्प यह एक xenogenic कोलेजन भ्रष्टाचार के neovascularization पैटर्न प्रकट करने के लिए संभव बनाता है । इसके अलावा, इस मामले को इंगित करता है कि LSCI, अपनी उच्च विश्वसनीयता के कारण, संवेदनशील व्यक्तिगत भिंनता का पता लगा सकता है । यह महत्वपूर्ण स्थानीय संरचनात्मक भिन्नता के रूप में और मामलों के बीच एक अलग प्रणालीगत पृष्ठभूमि यह मुश्किल periodontal सर्जरी के नैदानिक परीक्षणों में शल्य चिकित्सा हस्तक्षेप का मानकीकरण करने के लिए बनाता है ।

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Protocol

रिपोर्ट विधि स्वास्थ्य पंजीकरण और प्रशिक्षण केंद्र (अनुमोदन संख्या: 034310/2014/OTIG) की हंगेरियन समिति से नैतिक अनुमोदन प्रदान किया गया था, जो एक नैदानिक परीक्षण में कार्यरत था.

1. LSCI सेटअप

  1. कंप्यूटर और किसी भी बाह्य उपकरणों पर स्विच करें ।
  2. LSCI उपकरण पर स्विच रियर पैनल पर स्विच के साथ प्रयोग किया जा करने के लिए ।
  3. साधन की अनुमति दें करने के लिए गर्म से कम 5 मिनट के लिए । उपकरण माप के लिए तैयार है जब रियर पैनल पर दोनों एल ई डी चमकती बंद कर दिया है ।
  4. डेस्कटॉप पर या प्रारंभ मेनू के माध्यम से सॉफ़्टवेयर चिह्न पर डबल-क्लिक करके सॉफ़्टवेयर प्रारंभ करें ।
  5. रुको जब तक दोनों पीले और रियर पैनल पर हरी एल ई डी चमकती बंद कर दिया है, जो इंगित करता है कि लेजर गर्म है और आरंभ समाप्त हो गया है ।
    नोट: सिस्टम को प्रारंभ करते समय, एक-कभी सिस्टम के लिए सत्यापन प्रक्रिया करने के लिए संकेत दिया जाएगा ।

2. प्रणाली सत्यापन

  1. प्रदान किए गए अंशांकन बॉक्स का उपयोग करें । अंशांकन बॉक्स से ढक्कन निकालें और कोलाइडयन निलंबन में अवसादन से बचने के लिए इसे हिला ।
  2. 30 एस के लिए बंद ढक्कन छोड़ बुलबुले से बचने के लिए ।
  3. ढक्कन वापस अंशांकन बॉक्स पर रखो ।
  4. उंनत क्लिक करें । पडताळणी | साधन सत्यापित करें।
  5. चुनें नियमित सत्यापन । अगला।
  6. बारी सिर ९० °, अंशांकन एकीकृत मैग्नेट का उपयोग कर बॉक्स और अगलाक्लिक करें जकड़ना ।
  7. पाठ बॉक्स में कमरे का तापमान दर्ज करें, ° c चुनें और प्रारंभक्लिक करें ।
  8. विज़ार्ड सत्यापन प्रक्रिया पूर्ण होने तक प्रतीक्षा करें ।
  9. एक सफल सत्यापन प्रक्रिया के बाद समाप्तक्लिक करके विज़ार्ड बंद करें ।

3. भागीदार तैयारी

  1. सुनिश्चित करें कि माप तापमान नियंत्रित कमरे (26 डिग्री सेल्सियस) में किया जाता है ।
  2. एक दंत कुर्सी में एक आरामदायक लापरवाह स्थिति में रोगी प्लेस और उसके सिर के नीचे एक वैक्यूम तकिया जगह (चित्रा 1) ।
  3. किसी भी माप लिया जाता है पहले 15 मिनट के लिए परेशान रोगी छोड़ दें ।

4. Microcirculation छवि माप

  1. उपकरण मेनू में, का चयन करें और प्रोजेक्ट संपादकपर क्लिक करें । एक नई विंडो खुलती है जिसमें सामांयतः उपयोग की जाने वाली सेटिंग्स सहेजी जा सकती हैं ।
  2. कोई नया प्रोजेक्ट बनाने के लिए प्रोजेक्ट बॉक्समें, नया क्लिक करें । "Vestibulum" डालें और ठीक पर क्लिक करें.
  3. साइट्स बॉक्समें, नई साइट बनाने के लिए नया क्लिक करें । "टूथ 14" दर्ज करें और ठीक क्लिक करे ।
  4. दांत की सामग्री के तहत 14 पैनल काम दूरी के लिए आवश्यक दूरी के रूप में "10 सेमी" जोड़ें और माप बक्से में 3 सेमी और 2 सेमी की ऊंचाई की एक चौड़ाई दर्ज करें ।
  5. बिंदु घनत्व समाधान सेट करने के लिए सामांय और फ़्रेम दर 16 छवियां करने के लिए/s और अवधि ड्रॉप-डाउन मेनू से समय का चयन करने के लिए 0:30 रिकॉर्डिंग अवधि सेट ।
  6. चुनें "कोई औसत के साथ रिकॉर्ड" और 1 के लिए रंग फोटो कैप्चर दर सेट/
  7. उसके बाद प्रोजेक्ट पैरामीटर्स को सहेजने के लिए "लागू करें" और "ठीक" क्लिक करे ।
  8. फ़ाइल मेनू में, नई रिकॉर्डिंगचुनें और क्लिक करें । एक नई छवि विंडो खुलेगी और सेटअप पैनल प्रदर्शित हो जाएगा ।
  9. रिकॉर्डिंग सेटअपके अंतर्गत, "Vestibulum" प्रोजेक्ट के लिए और ४.९ के लिए "दांत 14" का चयन करें । साइटहै ।
  10. विषय ड्रॉप-डाउन मेनू खोलें, विषय का चयन करें संवाद बॉक्स में नया क्लिक करें, और रोगी का नाम डालें ।
  11. ' ठीक ' क्लिक करें और रिकॉर्ड करने के लिए आरईसी नाम फ़ील्ड में कोई नाम लिखें: उदा., दिन 1 (कार्रवाई के बाद बीता दिन) और ऑपरेटर फ़ील्ड में ऑपरेटर का नाम ।
  12. microcirculation छवि माप शुरू करने से पहले, रोगी के रक्तचाप और नाड़ी को मापने ।
  13. जांच के तहत क्षेत्र के लिए उपयुक्त स्थिति में रोगी के सिर को ठीक करने के लिए वैक्यूम तकिया से हवा को खाली करें ।
  14. मरीज से उसका मुंह खोलने के लिए कहें ।
  15. दो दंत दर्पण द्वारा धीरे होंठ मुकर (चित्रा 1) ।
  16. gingiva के मापा क्षेत्र के लिए समानांतर उपकरण के सिर को समायोजित करें । एक निर्मित दृश्यमान (६५० एनएम) संकेतक लेजर रोगी के मुंह के सापेक्ष imager की स्थिति की सुविधा ।
  17. ऊतक के संबंध में साधन ले जाकर 10 सेमी करने के लिए काम की दूरी समायोजित करें । दूरी LSCI डिवाइस द्वारा लगातार मापा जाता है और यह छवि सेटअपके तहत काम कर दूरी/मापा मूल्य के रूप में सॉफ्टवेयर द्वारा प्रदर्शित किया जाता है ।
  18. विषय को माप की अवधि के लिए अभी भी रहने का निर्देश दें ।
  19. रिकॉर्डिंग शुरू करने के लिए रिकॉर्ड बटन पर क्लिक करें । छवि विंडो का रंग अब लाल करने के लिए बदलता है, यह दर्शाता है कि रिकॉर्डिंग प्रगति पर है । सेटअप पैनल रिकॉर्डिंग पैनल द्वारा प्रतिस्थापित किया जाता है । 30 एस के बाद स्वचालित रूप से रिकॉर्डिंग रोकता है । जब रिकॉर्डिंग समाप्त हो गया है, छवि खिड़की के रंग में परिवर्तन नीले और रिकॉर्डिंग पैनल की समीक्षा पैनल द्वारा बदल दिया है ।
  20. दंत दर्पण निकालें और रोगी को अपने मुंह बंद करने और निगलने की अनुमति ।
  21. फिर से शुरू रिकॉर्डिंग बटन दबाकर लाइव छवि के लिए वापस स्विच.
  22. चरण ४.१४ से ४.२१ करने के लिए दो बार दोहराएँ ।
  23. फ़ाइल को बंद करें । डेटा स्वचालित रूप से सहेजे जाते हैं ।
  24. LSCI माप के बाद रक्तचाप और नाड़ी को मापने ।

5. ऑफलाइन विश्लेषण

  1. निर्मित सॉफ्टवेयर का उपयोग कर LSCI छवियों का विश्लेषण । छवि या विभाजन दृश्य (चित्रा 2) पर जाएं ।
  2. ब्याज (ROI) के क्षेत्र निर्धारित करें. नोट: एक रॉय के भीतर पिक्सल के छिड़काव मूल्यों औसत और रॉय के रक्त प्रवाह मूल्य के रूप में परिभाषित कर रहे हैं, एक मनमाना मूल्य में व्यक्त लेजर बिंदु छिड़काव इकाई (LSPU) कहा जाता है ।
  3. सही पर रॉय उपकरण पैलेट के भीतर वांछित roi आकार का चयन करें ।
  4. roi टूल पैलेट में लागू करें विकल्प चुनें, जो रिकॉर्डिंग की सभी छवियों पर roi कार्रवाइयाँ लागू करता है.
  5. क्लिक करके रॉय आकर्षित और तीव्रता छवि में माउस बटन पकड़, रॉय बाहर इच्छित आकार के लिए खींच, और माउस बटन को रिहा (क्लिक करें और मुक्त रूप ROIs के लिए डबल क्लिक करें) । रॉय की स्थिति को समायोजित करें, आकार बदलें या इसे घुमाएं, यदि आवश्यक हो ।
  6. ५.३ से चरणों को दोहराएँ । ५.५ के रूप में कई बार ROIs की वांछित संख्या के रूप में (चित्रा 3) ।
  7. ब्याज की समय अवधि (TOI) को परिभाषित करें । यह समय की एक निश्चित अवधि (चित्रा 2) पर एक रॉय में छिड़काव औसत के लिए अनुमति देता है ।
  8. ग्राफ़ या विभाजन दृश्य पर जाएं । TOI उपकरण जोड़ें बटन का चयन करें ।
  9. क्लिक करें और जहां आप चाहते है TOI शुरू करने के लिए और वांछित अंत स्थिति के लिए कर्सर खींचें स्थिति पर ग्राफ पर पकड़ो । फिर माउस बटन छोड़ें ।
  10. आगे की प्रक्रिया के लिए माध्य मान तालिका से डेटा निर्यात करें ।
  11. एक उपयुक्त सांख्यिकीय विश्लेषण के लिए इस्तेमाल किया सॉफ्टवेयर द्वारा रक्त प्रवाह curves का निर्माण ।

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Representative Results

Vestibuloplasty मौखिक बरोठा के लिए periodontal सर्जरी है, vestibular गहराई बढ़ाने के लिए लक्ष्य, बढ़ाया सौंदर्यशास्त्र और समारोह के लिए keratinized gingiva और नरम ऊतक मोटाई के क्षेत्र । apically की स्थिति विभाजित मोटाई एक कोलेजन मैट्रिक्स के साथ संयुक्त प्रालंब एक बार इस्तेमाल किया vestibuloplasty प्रक्रिया है । Xenogenic कोलेजन मैट्रिक्स keratinized gingiva11,12,13की राशि बढ़ाने के लिए autogenous मसूड़ों भ्रष्टाचार के लिए एक व्यवहार्य विकल्प है; हालांकि, भ्रष्टाचार revascularization की दिशा पर कोई डेटा उपलब्ध नहीं है और यह आसपास के ऊतकों के microcirculation को कैसे प्रभावित करता है । इन तंत्र को समझना उचित प्रालंब और periodontal सर्जरी में चीरा डिजाइन की सुविधा हो सकती है ।

एक 17 वर्षीय जबडा में पहली premolar में keratinized gingiva के एक अपर्याप्त चौड़ाई के साथ पुरुष रोगी vestibuloplasty द्वारा इलाज किया गया था, एक apically की स्थिति विभाजित मोटाई एक कोलेजन मैट्रिक्स के साथ संयुक्त प्रालंब का उपयोग कर । Intraoral तस्वीरें (एक तस्वीर कैमरे द्वारा लिया) और रक्त प्रवाह (BF) माप LSCI द्वारा vestibuloplasty (आधारभूत) के रूप में के रूप में अच्छी तरह से 1 से पहले ले जाया गया, 2, 3, 4, 5, 7, 9, 11, 14, 21, 27 दिन और 2, 3, 4, 5, 6 और 12 महीने पश्चात् । प्रत्येक माप से पहले और बाद में ब्लड प्रेशर और पल्स का मूल्यांकन किया गया ।

ऑफ़लाइन विश्लेषण के दौरान, कई ROIs संवर्धित म्यूकोसा के क्षेत्र में निर्धारित किए गए थे; भ्रष्टाचार क्षेत्र में कुछ और आसपास के म्यूकोसा में दूसरों, ' पेरि ' क्षेत्रों के रूप में परिभाषित किया । के रूप में चित्रा 3में दिखाया गया है, ' पेरि ' और भ्रष्टाचार क्षेत्रों आगे प्रत्यारोपित भ्रष्टाचार के केंद्र से दूरी के आधार पर क्षेत्र में विभाजित थे, चित्र में जोन एफ के रूप में चिह्नित । भ्रष्टाचार क्षेत्र में ' पेरि ' क्षेत्र और जोन सी, डी और ई में जोन ए और बी निर्धारित किए गए थे । इन क्षेत्रों में से प्रत्येक को भ्रष्टाचार के सभी चार पक्षों में अलग से सीमांकित किया गया था (mesial, बाहर, शिखर और राज्याभिषेक) । प्रत्येक 30 सेकंड शॉट एक TOI (चित्रा 2) के रूप में पहचान की थी । प्रत्येक रॉय और TOI पर डेटा को स्प्रेडशीट प्रोग्राम में निर्यात किया गया था । रक्त प्रवाह curves एक उपयुक्त सांख्यिकीय विश्लेषण के लिए इस्तेमाल किया सॉफ्टवेयर द्वारा निर्माण किया गया ।

वहां एक साल के प्रयोग के दौरान मतलब धमनी का दबाव (नक्शा) में कोई महत्वपूर्ण परिवर्तन, या तो नक्शे में पहले या बाद में सत्र प्रति रक्त प्रवाह माप था । चित्रा 4 एक रंग फोटो, एक तीव्रता छवि और हमारे अध्ययन के प्रतिनिधि दिन पर संचालित gingiva की एक छिड़काव छवि से पता चलता है. पहले पश्चात सप्ताह के दौरान पूरा प्रालंब बंद, फाइब्रिन की एक मोटी परत पर भ्रष्टाचारी क्षेत्र, और हल्के पर्विल और आसपास के gingiva में सूजन दिखाई दे रहे थे । रक्त छिड़काव छवियों को संचालित क्षेत्र में ischemia दिखाया और ' पेरि ' क्षेत्रों में hyperemia । 14 दिन से, भ्रष्टाचारी क्षेत्र नैदानिक एरीथेमेटस गंभीर hyperemia रक्त छिड़काव छवियों पर मनाया के साथ समानांतर में था । भ्रष्टाचार शामिल करने के बाद तीसरे महीने तक, घाव चंगा, और मसूड़ों छिड़काव ऑपरेटिव परिसंचरण के स्तर के करीब था ।

चित्रा 5 एक धुंधला तीव्रता छवि और पूरी छवि के छिड़काव ग्राफ से पता चलता है । ग्राफ पर अचानक पीक रोगी द्वारा आंदोलन इंगित करता है । माप तुरंत दोहराया गया था, यह सुनिश्चित करने के बाद कि रोगी आरामदायक स्थिति में है । और ' पेरि ' क्षेत्रों में भ्रष्टाचार के भीतर विभिंन क्षेत्रों में BF में परिवर्तन चित्रा 6में दिखाया गया है । यह सब घटता में आम है कि चौथे महीने से, रक्त प्रवाह जांच के अंत तक किसी भी आगे नहीं बदला । इस अवधि के लिए औसत रक्त प्रवाह नए ऊतक के लिए एक आराम रक्त प्रवाह मूल्य के रूप में इस्तेमाल किया जा सकता है और समय अंक के बीच यादृच्छिक भिन्नता हमें क्रमशः प्रत्येक रॉय के लिए समय-आधारित प्रसरण घटक की गणना करने के लिए अनुमति दी, एक रैखिक मिश्रित मॉडल का उपयोग. न्यूनतम पता लगाने के अंतर की गणना की जा सकती है तो वास्तविक परिवर्तन की पहचान करने के लिए (९५% विश्वास के साथ) चिकित्सा अवधि के दौरान समय बिंदुओं के बीच (चौथे महीने से पहले) क्रम में hyperemic और कोरोनरी चरण का निर्धारण करने के लिए. curves की बुनियादी विशेषताओं भ्रष्टाचार के भीतर सभी ROIs में समान थे, एक कोरोनरी एक hyperemic चरण के बाद चरण के साथ शुरू । हालांकि, इन दो चरणों की लंबाई अलग (तालिका 1) थी । Ischemia सबसे लंबे समय तक था (7-9 दिन) केंद्रीय और सभी कोरोनरी क्षेत्रों में, देर hyperemia के साथ 11 और 27 दिन के बीच शुरू । भ्रष्टाचार के अंय क्षेत्रों में, ischemia केवल 4-7 दिन तक चली और hyperemia पहले शुरू किया, 7 और 21 दिन के बीच ।

भ्रष्टाचार के विभिंन पक्षों में क्षेत्र के BF curves अद्वितीय विशेषताओं था (6 चित्रा) । शिखर पक्ष में, सभी चार क्षेत्रों में इसी तरह रक्त प्रवाह घटता था । कोरोनरी ओर, छिड़काव बाहरी क्षेत्र में बाद में भीतरी क्षेत्रों की तुलना में फिर से प्राप्त किया गया था, mesial और बाहर की ओर के विपरीत । दोनों पार्श्व पक्षों में, bf जोन सी में पहले वृद्धि हुई है, तो जोन डी में, क्षेत्र ई में bf वृद्धि के बाद और अंत में मध्य क्षेत्र एफ । आसपास के क्षेत्र में म्यूकोसा (जोन ए और बी) कोई महत्वपूर्ण ischemia मनाया गया । इसके बजाय, एक अलग परिमाण और सीमा के hyperemia अलग पक्षों में मनाया गया ।

वहां दो समय अंक थे जब bf मूल्य bf वक्र के समग्र विशेषताओं के साथ मिलान नहीं किया । 9 दिन पर, वहां ज्यादातर क्षेत्रों में एक अचानक छोड़ दिया गया था और मुख्य रूप से शिखर और बाहर की ओर के ' पेरि ' क्षेत्रों में । यह निश्चित है कि यह एक माप त्रुटि थी के साथ नहीं कहा जा सकता है, के रूप में कोई माप पिछले पर और अगले दिन पर ले जाया गया । हालांकि, माप की रिपोर्ट में एक नोट के अनुसार, buccal गुना ऑपरेटर द्वारा बहुत अधिक दबाव के साथ मुकर गया था, BF में एक बूंद में जिसके परिणामस्वरूप । इस पर विचार है कि मुख्य रूप से बाहर और शिखर पक्षों के संचलन गाल खींच द्वारा प्रभावित हो सकता है समझ में आता है । १८२ दिन (6 महीने बाद), माप समय के बीच लंबे अंतराल के कारण, रोगी माप से पहले सहमत प्रतिबंधों को रखना भूल गया है । रंग की तस्वीर पर सीमांत gingiva के खून बह रहा है (चित्रा 6) कठोर दांत माप से पहले brushing इंगित करता है । इस बीच, रोगी orthodontic उपचार भी आया था, और वह intermaxillary इलास्टिक का इस्तेमाल किया । दोनों कारकों बहुत BF14,15वृद्धि हो सकती है, तो माप और अधिक ध्यान से नियंत्रित परिस्थितियों के तहत एक बाद में समय पर दोहराया गया था ।

Figure 1
चित्रा 1: प्रायोगिक LSCI सेटअप और ऑपरेशन क्षेत्र में रक्त प्रवाह माप के लिए रोगी तैयारी । होंठ दंत दर्पण से मुकर रहे हैं । कृपया यहां क्लिक करें इस आंकड़े का एक बड़ा संस्करण को देखने के लिए ।

Figure 2
चित्रा 2: विभाजित दृश्य (छवियों को देखने के संयोजन और ग्राफ देखें) इलाज क्षेत्र में मसूड़ों रक्त प्रवाह की एक विशिष्ट रिकॉर्डिंग की । छिड़काव छवि (ऊपरी दाएँ उप दृश्य) gingiva में रक्त छिड़काव का एक रंग कोडित प्रतिनिधित्व है. उच्च छिड़काव के क्षेत्र लाल रंग में दिखाए जाते हैं जबकि कम छिड़काव के क्षेत्र नीले होते हैं. छिड़काव छवियों की रंग रेंज 0-450 LSPU से मेल खाती है; स्मूथिंग 10 को सेट किया गया था । एक तीव्रता छवि (कम सही उप दृश्य) कुल backscattered लेजर प्रकाश के द्वारा बनाई गई है । यह बिल्कुल छिड़काव छवि के साथ मेल खाती है और अभिविंयास के लिए और छिड़काव छवि में विवरण की पहचान करने के लिए उपयोगी है । ब्याज के क्षेत्र (ROI) हमेशा तीव्रता छवि में परिभाषित कर रहे हैं. ग्राफ (ऊपरी बाएँ पैनल) रिकॉर्डिंग में प्रत्येक रॉय के लिए वास्तविक समय रक्त छिड़काव निशान से पता चलता है. बाईं ओर के चेक बक्से का चयन करने के लिए जो निशान दिखाने के लिए इस्तेमाल किया जा सकता है । ग्राफ पर लगातार तीन माप दिखाए जाते हैं । प्रत्येक 30 एस शॉट एक TOI के रूप में पहचान की थी । माध्य मान तालिका प्रत्येक ROI और TOI में अर्थ छिड़काव मान दिखा रहा है भी विभाजित दृश्य (निचला बाएँ फलक) में प्रदर्शित किया जाता है । कृपया यहां क्लिक करें इस आंकड़े का एक बड़ा संस्करण को देखने के लिए ।

Figure 3
चित्रा 3: ब्याज के क्षेत्रों (रॉय) गहनता छवि में जांच मसूड़ों क्षेत्र के भीतर परिभाषित । जोन ए और बी ' पेरि ' क्षेत्र में हैं, जबकि जोन सी, डी और ई भ्रष्टाचार के केंद्र से दूरी कम करने में भ्रष्टाचार में हैं, जोन एफ क्षेत्र के रूप में चिह्नित एक होंठ के vestibular सतह पर स्थित है । कृपया यहां क्लिक करें इस आंकड़े का एक बड़ा संस्करण को देखने के लिए ।

Figure 4
चित्रा 4: प्रतिनिधि फोटोग्राफ (ऊपरी रेखा), LSCI तीव्रता छवि (मध्य रेखा) और LSCI छिड़काव छवि (निचली रेखा) संचालित gingiva की । छवियों को ऑपरेटिव राज्य और छिड़काव, और घाव भरने और छिड़काव 1, 4, 7, 14, 21, 27 और ९८ दिन पश्चात का प्रतिनिधित्व करते हैं । कृपया यहां क्लिक करें इस आंकड़े का एक बड़ा संस्करण को देखने के लिए ।

Figure 5
चित्र 5: उप-इष्टतम रिकॉर्डिंग का विभाजित दृश्य । धुंधला तीव्रता छवि और गलत सेटिंग का एक परिणाम के रूप में ग्राफ पर चोटियों । कृपया यहां क्लिक करें इस आंकड़े का एक बड़ा संस्करण को देखने के लिए ।

Figure 6
चित्रा 6: समय के साथ BF के तितर बितर भूखंड पर राज्याभिषेक (क), mesial (ख), बाहर (ग) और शिखर (डी) भ्रष्टाचार की ओर । भ्रष्टाचार के केंद्रीय भाग (जोन एफ) सभी रेखांकन में चित्रित किया गया था और अधिक बाहरी क्षेत्रों के लिए एक संदर्भ के रूप में सेवा । कृपया यहां क्लिक करें इस आंकड़े का एक बड़ा संस्करण को देखने के लिए ।

पक्ष क्षेत्र Ischemia अंत Hyperemia प्रारंभ Hyperemia अंत
कोरोनल सी 9 27 27
कोरोनल डी 9 21 27
कोरोनल ई 7 11 ९८
केंद्रीय एफ 9 11 ९८
mesial सी 5 21 27
mesial डी 5 11 ६१
mesial ई 7 11 ६१
डिजटल सी 5 11 27
डिजटल डी 4 7 ९८
डिजटल ई 4 11 ९८
शिखर सी 4 11 27
शिखर डी 5 11 ६१
शिखर ई 5 11 ६१

तालिका 1: भ्रष्टाचार में विभिन्न क्षेत्रों में कोरोनरी और hyperemic चरण की समय सीमा, दिनों में

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Discussion

इस अध्ययन का उद्देश्य मानव gingiva में एक भ्रष्टाचार के neovascularization की निगरानी के लिए एक उपंयास तकनीक का परिचय देना था । हमारे पिछले परिणामों के अनुसार, LSCI एक महत्वपूर्ण आवश्यकता के रूप में नियोजित प्रोटोकॉल के प्रत्येक चरण के सख्त कार्यान्वयन से मुलाकात की है जब अच्छी दोहराने और reproducibility9, के साथ gingiva के रक्त छिड़काव का आकलन । LSCI एक अर्द्ध मात्रात्मक तकनीक के रूप में माना जाता है कि अंशांकन की आवश्यकता है समय पर सटीकता और स्थिरता सुनिश्चित करने के लिए । सत्यापन के दौरान, कमरे के तापमान सही रूप में संभव के रूप में मापा जाना चाहिए, क्योंकि यह मान सत्यापन एल्गोरिथ्म द्वारा छिड़काव की गणना करने के लिए उपयोग किया जाता है ।

LSCI विधि के रूप में अच्छी तरह से काम कर दूरी की स्थापना और आंदोलन कलाकृतियों के लिए अत्यधिक संवेदनशील है । इस अध्ययन में काम की दूरी 10 सेमी तय की गई थी । माप क्षेत्र २.७ सेमी x 2 सेमी, जो एक लगभग तीन दांत चौड़ा मसूड़ों क्षेत्र के लिए संगत था । प्रभावी फ्रेम दर था 16 छवियां/s और ०.०६ s/छवि के रूप में धमनी पल्स मसूड़ों microcirculation9में गुणवाला परिवर्तन लाती है, जो रिकॉर्डिंग से बाहर औसत हो गया है । रैपिड इमेजिंग आंदोलन कलाकृतियों के जोखिम को कम भी । हालांकि, गलत सेटिंग्स या रोगी आंदोलनों के मामले में, रिकॉर्डिंग बंद कर दिया जाना चाहिए और इष्टतम स्थितियों के तहत दोहराया ।

दो ऑपरेटरों हर माप में भाग लिया: एक LSCI सिर समायोजित और कंप्यूटर नियंत्रित करते हुए दूसरे रोगी के होंठ मुकर । इस अध्ययन में, तीन दोहराया माप प्रत्येक सत्र में प्रदर्शन किया गया, प्रत्येक ले 30 एस । के बाद से माप हमेशा नरम होंठ और गाल, जो gingiva के microcirculation परेशान करता है, यादृच्छिक त्रुटि में वृद्धि होती है की अपरिहार्य पुनर्कर्षण के कारण ऊतकों को जलन किसी तरह का शामिल है । इस तरह के अंतर दिन भिन्नता, तथापि, पूरी माप प्रक्रिया को दोहराने से कम किया जा सकता है, यानी, फिर से मुंह खोलने के द्वारा, मुलायम ऊतक फिर से मुकर, फिर से कैमरे की स्थिति की स्थापना और सॉफ्टवेयर9में ROIs चयन फिर से.

मसूड़ों microcirculation ने उच्च क्षेत्रीय रूपांतर8को दिखाया । इसलिए, ऐसे LSCI के रूप में एक विधि है जो एक व्यापक क्षेत्र में रक्त के प्रवाह के उपाय एलडीएफ जैसे एकल बिंदु माप तकनीकों पर एक महान लाभ है । इस अध्ययन में माप क्षेत्र ने पूरे शल्य-क्षेत्र को कवर किया । व्यापक माप क्षेत्र हमारे अध्ययन में घायल क्षेत्र के भीतर विभिन्न क्षेत्रों में पुन: या neovascularization की तुलना करने के लिए हमें अनुमति दी । इसके विपरीत एलडीएफ को, जहां जांच सर्जरी से पहले गढ़े stents द्वारा तय की जाती है, LSCI विधि के मामले में, इस क्षेत्र को परिभाषित करने की कोई जरूरत नहीं है अग्रिम में जांच की जाएगी । व्यक्तिगत चिकित्सा में घाव भरने की निगरानी के प्राथमिक उद्देश्य के लिए कहीं भी घाव या प्रालंब के आसपास अप्रत्याशित पैटर्न पहचान है । इसके अलावा, ऊतक ज्यामिति में पश्चात परिवर्तन और नरम या कठिन ऊतक वृद्धि की वजह से सूजन पूर्व गढ़े stents सर्जरी के बाद बेकार कर देगा । दृश्य मूल्यांकन में मदद करने के लिए, रिकॉर्डिंग के दौरान स्मूथिंग चालू किया गया था और स्मूथिंग मान को 10 पर सेट किया गया था. इसका मतलब यह है कि छिड़काव छिड़काव छवि का एक चिकनी उपस्थिति के लिए दस से अधिक छवियों औसत था और क्रम में पृष्ठभूमि शोर को कम करने के लिए । हालांकि, चिकनी केवल एक दृश्य प्रभाव है और वास्तविक रिकॉर्ड छिड़काव मूल्यों को प्रभावित नहीं करता है ।

मसूड़ों रक्त प्रवाह के रूप में अच्छी तरह से एक उच्च लौकिक भिन्नता है. इस तरह के मसूड़ों सूजन16,17,18, circadian ताल19, रक्तचाप20, तापमान16 के रूप में रोजमर्रा की जिंदगी, साथ कई शारीरिक कारकों से संबंधित हो सकता है , 21, यांत्रिक दाब8,22,23,24, टूथ ब्रशिंग14,17,25 या orthodontic बल15 . इसलिए, इन कारकों का मानकीकरण और स्थिरीकरण सफल अनुवर्ती माप के लिए अनिवार्य है ।

भ्रष्टाचार vascularization की जांच के लिए पहले इस्तेमाल किया तरीकों अत्यधिक इनवेसिव हैं, जो उपचार के दौरान माप समय बिंदुओं पर एक प्रमुख प्रतिबंध का मतलब है, विशेष रूप से मानव अध्ययन में26,27,28, 29,30,31,३२. उनके पास क्षेत्रीय मतभेदों को मापने की दृष्टि से भी सीमाएं हैं । हमारे पिछले अध्ययन9,10 पहले से ही नैदानिक परीक्षणों में LSCI की उच्च विश्वसनीयता साबित कर दी है और यह दांत निष्कर्षण के बाद एक व्यक्ति के कोमल ऊतक चिकित्सा के समय निर्धारित करने के लिए उपयोगी हो पाया गया था ताकि अनुकूलन करने के लिए प्रत्यारोपण प्लेसमेंट३३। इस अध्ययन में, घाव एक xenogenic कोलेजन भ्रष्टाचार द्वारा कवर क्षेत्र उत्कृष्ट neovascularization दिखाया, के रूप में 11वें पश्चात दिन भ्रष्टाचार के भीतर सभी क्षेत्रों में अधिकतम रक्त प्रवाह स्तर हासिल की । हालांकि, यह माना हो सकता है कि कोलेजन भ्रष्टाचार बंद sloughed या 11 दिन से resorbed था और हम वास्तव में प्राप्तकर्ता बिस्तर के revascularization मापा । अपनी गैर इनवेसिव सुविधा के अलावा, LSCI की एक और विशेष विशेषता के लिए एक भ्रष्टाचार के विभिंन क्षेत्रों में व्यक्तिगत स्तर पर शामिल करने के दौरान reperfusion curves विशेषता की क्षमता है । भ्रष्टाचारी neovascularization की गड़बडिय़ों विशेषताएँ पिछली प्रोटोकॉल टिप्पणियों के समान हैं३०. यह पता चलता है कि भ्रष्टाचार revascularization न केवल periosteal संवहनी जाल से होता है, लेकिन यह भी घाव मार्जिन से ।

प्रयोग से पता चलता है कि एक भ्रष्टाचार के revascularization स्पष्ट रूप से पीछा किया जा सकता है अगर हर कदम सख्ती से पीछा कर रहे हैं । हालांकि, दिन पर १८२, गैर अनुरूप रोगी तैयारी और अनुदेश BF में एक महत्वपूर्ण वृद्धि हुई ।

LSCI बड़े पैमाने पर संवहनी संरचना के पूर्ण क्षेत्र इमेजिंग और अन्य ऊतकों में जुड़े रक्त प्रवाह के लिए प्रयोग किया जाता है, जैसे रेटिना में३४,३५, त्वचा7,३६ और मस्तिष्क३७,३८ . LSCI के नैदानिक अनुप्रयोगों के सबसे होनहार घाव आकलन३९,४०, फ्लैप४१ और intraoperative मस्तिष्क रक्त प्रवाह४२निगरानी का मूल्यांकन जला रहे हैं । जाहिर है, वहां मानव विषयों में LSCI द्वारा व्यापक मसूड़ों माप के लिए गंभीर सीमाएं हैं । यह उपकरण बहुत मजबूत और भारी है । मुख्य कठिनाइयों प्रलेखन कैमरा है, जो कम संकल्प है और माप कैमरे से कुछ सेंटीमीटर दूर स्थित है के संबंध में उठता है । इन सुविधाओं यह मुश्किल रंग तस्वीरों पर सीधे ब्याज के क्षेत्रों की पहचान करने के लिए बनाते हैं । LSCI मशीन सिर के आकार मौखिक गुहा के अंदर शूटिंग रोकता है । इसलिए, जो सीधे नहीं दिख रहे क्षेत्रों मापा नहीं जा सकता है । हम पहले दिखा दिया है कि एक फोटो दर्पण के साथ एक अप्रत्यक्ष दृष्टिकोण का उपयोग कर एक वैकल्पिक विधि9के रूप में सेवा कर सकते हैं । हालांकि, एक दर्पण का उपयोग अधिक आंदोलन कलाकृतियों जो LSCI के प्रति संवेदनशील है शामिल है, यह अधिक कठिन एक सीधा छवि पर कब्जा करने के लिए और फोकल दूरी कम हो जाती है । जब मापा क्षेत्र सीधा कब्जा नहीं किया जा सकता है, रक्त प्रवाह मूल्य सही हो सकता है9,३९, लेकिन छवि पर क्षेत्र की पहचान 3 डी मरोड़ की वजह से जटिल रहता है.

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Disclosures

लेखकों का खुलासा करने के लिए कुछ नहीं है ।

Acknowledgments

यह काम सहायता से भाग में हंगरी के वैज्ञानिक अनुसंधान कोष द्वारा अनुदान संख्या K112364 के तहत किया गया था, मानव क्षमता के हंगरी के मंत्रालय द्वारा, Semmelweis विश्वविद्यालय के लिए उच्च शिक्षा उत्कृष्टता कार्यक्रम, चिकित्सा अनुसंधान मॉड्यूल और द्वारा राष्ट्रीय अनुसंधान, विकास और नवाचार कार्यालय KFI_16-1-2017-0409 ।

Materials

Name Company Catalog Number Comments
PeriCam PSI-HR Perimed AB, Stockholm, Sweden The PeriCam PSI System is an imaging system based on LASCA technology (LAser Speckle Contrast Analysis). The system measures superficial blood perfusion over large areas at fast capture rates. This makes it ideal for investigations of both the spatial and temporal dynamics of microcirculation in almost any tissue.
PIMSoft Perimed AB, Stockholm, Sweden PIMSoft is a data acquisition and analysis software, intended for use together with the PeriCam PSI System and the PeriScan PIM 3 System, for measurement and imaging of superficial blood perfusion.
Geistlich Mucograft Geistlich, Switzerland It's a unique 3D collagne matrix designed specifically for soft tissue regeneration. It's indicated for the gain of keratinized tissue and recession coverage.
Omron M4 Omron Healthcare Inc., Kyoto, Japan Blood pressure monitor, which gives accurate readings.
Nikon D5200 Nikon Corportation, Tokyo, Japan Taking intra oral photos
MS Excel Microsoft Corporation, Redmond, Washington, USA The software used for data management
IBM SPSS Statistics 25 IBM Corp., Armonk, NY, USA The software used for statistical analysis

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मानव Gingiva में भ्रष्टाचार Neovascularization की निगरानी के लिए एक उपंयास दृष्टिकोण
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Fazekas, R., Molnár, E.,… More

Fazekas, R., Molnár, E., Mikecs, B., Lohinai, Z., Vág, J. A Novel Approach to Monitoring Graft Neovascularization in the Human Gingiva. J. Vis. Exp. (143), e58535, doi:10.3791/58535 (2019).

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