Summary
Bu çalışmada insan ağız mukozasında mikro lazer benek Karşıtlık görüntüleme tarafından ölçmek için bir protokol tanıttı. İzlenmesi sonra xenogenic kollajen greft ile kombine vestibuloplasty klinik bir vaka üzerinde sunulan yaranın normal iyileşmesi.
Abstract
Lazer benek kontrast (LSCI) görüntüleme geniş alanlara yüzeysel kan perfüzyon ölçmek için yeni bir yöntemdir. Non-invaziv ve ölçülen alanın ile doğrudan temas önler beri insan hastalarda yara iyileşmesi sırasında kan akımı değişiklikleri izlemek için uygundur. Vestibuloplasty vestibüler derinliği keratinli jinjiva eşzamanlı genişleme ile geri amaçlayan periodontal cerrahi oral antre için var. Bu özel klinik durumda bir split kalınlığı kapak ilk üst azıdişinde yüksek de xenogenic kollajen matris elde edilen alıcı yatağa adapte oldu. LSCI bir yıl için re - ve greft ve çevresindeki mukoza neovaskülarizasyon izlemek için kullanıldı. Mikro ölçüm zorluklar ve olası hataları vurgulayarak ağız mukozasında doğru düzeltilmesi için bir protokol tanıttı.
Klinik vaka çalışması sunulan bu gösterdi — uygun protokol sonrası — LSCI bir insan oral mukoza yara iyileşmesi mikro takip için uygun ve güvenilir bir yöntem ve greft tümleştirilmesi hakkında yararlı bilgi verir.
Introduction
Klinik bir durumda insan dişeti mikrosirkulasyon uzun vadeli değişiklikleri izleme oral ve periodontal cerrahi sıcak bir konudur. Ancak, güvenilir perfüzyon değerlendirilmesi zor olabilir. İnvaziv insan mukoza kan dolaşımını değişimler ölçüyor musunuz sadece birkaç yöntem vardır. İki bu istihdam bir lazer ışını1,2,3,4, ama farklı bir şekilde. Lazer doppler flowmetry (LDF) yapar Doppler kullanmak bir lazer vardiyada ışınla5,6, lazer benek kontrast (LSCI) yöntemi Imaging backscattered lazer ışık kırmızı kan hızını ölçmek için benek desen dayanır hücreleri7.
Sadece tek bir noktadan LDF ölçer ve tekrarlanabilir sensörleri pozisyon standardizasyon arzu henüz zor bir görevdir. Başka bir sorun LDF probe çapı (1 mm2) küçük olmasıdır. Ameliyattan önce önceden belirlenen noktalarda ölçüm çok farklı olabilir ve etkilenen ameliyat sonrası geometrisi içinde önemli değişiklikler ödem, doku kaldırma, doku hareketi veya implante greft neden iken postoperatif dolaşım değişiklikleri, kör olabilir yumuşak doku. Ölçüm LDF az 1 mm dokusunun hacimsel değişim halinde soruşturma için önceden belirlenmiş bir delik ile diş alçıya kullanımını yasaklayan mesafedir. LSCI herhangi bir özel alet does değil istemek yerelleştirme için ve birkaç cm2alanlarında ölçebilirsiniz. Sonuç olarak, yara iyileşmesi cerrahi site çapında izlenebilir. Buna ek olarak, LSCI kan perfüzyon bir saniyeden daha kısa sürede, 20 mikron kadar çözünürlüğe sahip renk kodlu görüntüleri görüntüleyebilirsiniz.
Bu raporda sunulan LSCI aygıtı nerede yüksek çözünürlükte küçük ölçüm alanlar isteniyorsa çoğunlukla hayvan araştırma uygulamaları için kullanılır. Yapısı ve insan oral mukoza Histoloji bölümüne (ekli jinjiva, marjinal jinjiva, vestibüler mukoza) alanından farklı olduğundan, ancak, kan dolaşımını da türdeş olmayan8' dir. Bu nedenle, yüksek çözünürlüklü LSCI genellikle insan sınamada kullanılan normal çözünürlüklü LSCI üzerinde büyük bir avantaj vardır.
LSCI enstrüman bir görünmez lazer (dalga boyu 785 nm) kullanır. Işın benek model oluşturma ölçüm alanı aydınlatmak için ayrılmaktadır. Işıklı alan benek desende bir CCD kamera görüntüleri. Bu sistemde kullanılan CCD kamera 1386 x 1034 piksellerden oluşan etkin bir görüntüleme alanı ve çözünürlüğü arasında 20-60 µm/piksel boyutuna ölçüm çevrenin ve yazılım (düşük, orta, yüksek) ayarına bağlı olarak. Görüntü boyutu azalır eğer ikinci veya daha fazla 100 kare / saniye, en fazla 16 kare hızında görüntüleri alabilir. Kan perfüzyon yerleşik yazılım tarafından hesaplanır. Bu benek desen değişimler analiz eder ve kontrast quantifies. Elde edilen akı bir perfüzyon görüntü üretmek için renk kodlarına var. Bizim önceki sonuçlarına göre LSCI iyi tekrarlanabilirlik ve tekrarlanabilirlik9jinjiva kan perfüzyon değerlendiriyor. Bu kısa süreli deneyler sadece, aynı zamanda hastalık ilerleme izlemek veya şifa10yara için uzun vadeli çalışmalar sırasında oral mukoza mikro değişimler izlenmesi için güvenilir bir araç olduğunu belirtir.
Bu yazıda, biz LSCI yüksek uzaysal çözünürlük xenogenic kollajen greft neovaskülarizasyon desenini ortaya çıkarmak mümkün kılan göstermek için klinik olgu sunumu Mevcut. Ayrıca, bu dava LSCI, onun yüksek güvenilirlik sayesinde hassas bireysel varyasyon algılayabilir gösterir. Bu önemli yerel anatomik varyasyon önemlidir ve farklı bir sistemik arka plan çalışmaları arasında klinik çalışmalarda periodontal Cerrahi cerrahi müdahaleye standartlaştırmak amacıyla zorlaştırıyor.
Subscription Required. Please recommend JoVE to your librarian.
Protocol
Bildirilen yöntemi Macar komitesinden sağlık kaydı ve eğitim merkezi etik onay verildi bir klinik istihdam edildi (onay numarası: 034310/2014/OTIG).
1. LSCI Kur
- Bilgisayar ve herhangi bir çevre birimleri üzerinde geçiş yapar.
- Arka panel üzerinde anahtarı ile kullanılmak üzere LSCI cihazda geçin.
- En az 5 dk kadar sıcak bir araç sağlar. Araç ölçüm için hazır olduğunda her iki LED arka panelindeki yanıp sönen durduruldu.
- Yazılım masaüstünde veya Başlat menüsü aracılığıyla yazılım simgesine çift tıklatarak başlatın.
- Sarı ve yeşil LED arka panelindeki yanıp sönen, hangi lazer sıcak olduğunu gösterir durduruldu ve başlatma tamamlandıktan bekleyin.
Not: sistemi başlatma sırasında bir ara sıra doğrulama yordamı yapmak belgili tanımlık sistem için istenir.
2. sistem doğrulama
- Sağlanan kalibrasyon kutusunu kullanın. Kapağı kalibrasyon kutusundan kaldırmak ve sedimantasyon kolloidal süspansiyon önlemek için salla.
- Kapağını kapalı tutun için 30 s kabarcıklar önlemek için.
- Kapağı geri kalibrasyon siz miydiniz.
- Gelişmiş ı tıklayın | Doğrulama | Enstrüman doğrulamak.
- Rutin doğrulama seçin | Sonraki.
- Baş 90 ° açmak, entegre mıknatıs kullanarak kalibrasyon kutusunu tutturmak ve İleri' yi tıklatın.
- Oda sıcaklığında metin kutusuna girin, ° C seçin ve Başlat' ı tıklatın.
- Sihirbaz doğrulama yordamı tamamlanırken bekleyin.
- Başarılı doğrulama yordamı sonra bitirmektıklatarak Sihirbazı kapatın.
3. katılımcı hazırlık
- Ölçüm ısı kontrollü bir oda (26 ° C) gerçekleştirilir emin olun.
- Hasta bir diş sandalyede rahat sırtüstü pozisyonda yerleştirin ve başını (Şekil 1) vakum yastık yerleştirin.
- Herhangi bir ölçüm kapılmadan önce hasta rahatsız 15 dakika bekletin.
4. mikro görüntü ölçüm
- Araçlar menüsünden seçin ve üzerinde Proje Düzenleyicisi' ni tıklatın. Sık kullanılan ayarları kaydedilebilmesi için yeni bir pencere açar.
- Projeler kutusu, yeni bir proje oluşturmak için Yeni ' ı tıklatın. "Vestibulum" girin ve Tamam'ı tıklatın.
- Siteler kutusu, yeni bir site oluşturmak için Yeni ' ı tıklatın. "Diş 14" girin ve Tamam'ı tıklatın.
- Diş 14 içeriği panelinin altında "10 cm" gerekli mesafe Mesafe çalışma için ekleyin ve 3 cm lik bir genişliği ve yüksekliği 2 cm ölçüm kutularına girin.
- Normal ve kare hızı 16 fotoğraf/s için nokta yoğunluğu çözünürlüğünü ayarlayın ve saat kayıt süresi 0 olarak ayarlamak için süre aþaðý açýlan menüsünden seçin: 30.
- "Kayıt yok ortalama ile" seçin ve renk fotoğraf yakalama oranı 1/saniye için ayarlayın.
- Sonra "Uygula" ve "Tamam" proje parametreleri kaydetmek için tıklatın.
- Dosya menüsünden seçin ve Yeni kayıt' ı tıklatın. Yeni bir görüntü penceresi açılır ve kurulum paneli görüntülenir.
- Kayıt kurulumaltında Proje ve "14 4,9 için diş" için "Vestibulum" seçin. Site.
- Konu aþaðý açýlan menüsünü açın, konu seçin iletişim kutusunda Yeni'yi tıklatın ve hasta adını girin.
- Tamam'ı tıklatın ve bir ad kaydı için Rec adı alanına girin: örn., 1. gün (gün geçen ameliyattan sonra) ve işleç işleç alanında adını.
- Mikro görüntü ölçüm, ölçü hastanın kan basıncı ve nabız başlamadan önce.
- Hava alanına soruşturma altında uygun bir pozisyonda hastanın başına düzeltmek için vakum yastık gelen tahliye edin.
- Hastanın ağzını açmak için sormak.
- Dudaklar hafifçe iki diş aynalar (Şekil 1) tarafından geri çek.
- Cihazın baş jinjiva ölçülen alanın paralel ayarlayın. Yerleşik bir görünür (650 nm) göstergesi lazer kolaylaştırır Imager hastanın ağız göreli konumlandırma.
- Çalışma mesafesi 10 cm ile ilgili olarak doku enstrüman taşıyarak ayarlayın. Mesafe LSCI aygıt tarafından sürekli olarak ölçülür ve Görüntü ayarlarıaltında çalışma mesafe/ölçülen değer olarak yazılım tarafından görüntülenir.
- Konu hala ölçüm süresince kalır için talimat.
- Kaydetmeye başlamak için Kaydet düğmesini tıklatın. Görüntü penceresinin rengini kırmızıya, kayıt devam ediyor gösteren şimdi değiştirir. Kurulum paneli kayıt paneli tarafından değiştirilir. Kayıt durur otomatik olarak 30'dan sonra s. Kaydetme tamamlandığında, rengine kayıt masası ve mavi için görüntü penceresini değişiklikleri inceleme paneli tarafından değiştirilir.
- Diş aynalar kaldırmak ve hastanın ağzını kapatıp yutmak izin verir.
- Canlı görüntüyü kayda devam etmek düğmesine basarak geçin.
- 4.21 4.14 üzerinden adımları iki kez tekrarlayın.
- Dosyayı kapatın. Verileri otomatik olarak kaydedilir.
- LSCI ölçümleri sonra nabız ve kan basıncı ölçmek.
5. çevrimdışı analiz
- Belgili tanımlık yapılı-içinde bilgisayar yazılımı kullanarak LSCI görüntüleri analiz. Görüntü veya bölme görünümüne (Şekil 2) gidin.
- Faiz (ROI) bölgelerinde tanımlayın. Not: piksel bir yatırım getirisi içinde perfüzyon değerleri ortalama ve lazer benek perfüzyon birimi (LSPU) denilen rasgele bir değer olarak ifade edilen ROI, kan akışı değeri olarak tanımlanır.
- Yatırım getirisi Araçlar paleti sağ içinde istenen ROI şekli seçin.
- Yatırım getirisi operasyonlar kayıt tüm görüntüler için geçerlidir ROI Araçlar paleti Uygula seçeneğini belirleyin.
- ROI tıklatarak çekmek ve tutmak belgili tanımlık fare düğme yoğunluğu görüntüde, istenen boyuta ROI sürükleyerek ve fareyi bırakmadan düğmesi ('ı tıklatın ve serbest biçimli ROIs için çift tıklatın). ROI konumunu ayarlamak, yeniden boyutlandırabilir veya, gerekirse döndürün.
- 5.3 adımları yineleyin. ROIs (resim 3) istenilen sayının kadar çok 5.5 için.
- Faiz (TOI), zaman dönemleri tanımlayın. Bu bir kesin süre (Şekil 2) bir yatırım getirisi içinde perfüzyon ortalama için sağlar.
- Grafik veya bölünmüş görünüme git. TOI Ekle Aracı düğmesini seçin.
- Tıklatın ve başlaması ve imleç istenen son konuma sürükleyin TOI istediğiniz yere konumlandırmak, grafik üzerinde tutun. Sonra fare düğmesini serbest bırakın.
- Diğer işlemler ortalama değer tablosundan veri verin.
- İstatistiksel analiz için kullanılan uygun bir yazılım tarafından kan akışı eğriler oluşturmak.
Subscription Required. Please recommend JoVE to your librarian.
Representative Results
Vestibuloplasty vestibüler derinliği, keratinli jinjiva ve gelişmiş estetik ve fonksiyon için yumuşak doku kalınlığı artırmak için amaçlayan periodontal cerrahi oral antre için var. Kollajen matris ile kombine apically konumlandırılmış split kalınlığı flep bir sık kullanılan vestibuloplasty yordamdır. Xenogenic kollajen matris keratinli jinjiva11,12,13miktarını artırmak için otojen dişeti greft için geçerli bir alternatiftir; Bununla birlikte, veri greft revaskülarizasyon yönünü ve çevre dokular mikro etkilemesi kullanılabilir. Bu mekanizmalar anlama uygun flep ve periodontal cerrahi kesi tasarımında kolaylaştırabilir.
Bir 17 yaşındaki erkek hasta, üst çene ilk azıdişinde keratinli jinjiva yetersiz bir uzunluğuna sahip bir kollajen matris ile kombine bir apically konumlandırılmış split kalınlığı flep kullanarak vestibuloplasty tarafından tedavi edildi. İntraoral fotoğraf (fotoğraf makinesi tarafından alınan) ve kan akışı (BF) ölçümleri LSCI tarafından alınmıştır vestibuloplasty (temel) önce 1, 2, 3, 4, 5, 7, 9, 11, 14, 21, 27 yanı sıra gün ve 2, 3, 4, 5, 6 ve 12 ay postoperatively. Kan basıncı ve nabız önce ve sonra her ölçüm değerlendirildi.
Çevrimdışı analiz sırasında artar mukoza alanında birden fazla ROIs belirlenmiştir; Bazı greft bölgesi ve çevresindeki mukoza 'peri' bölgeleri olarak tanımlanan, diğerlerinde. Şekil 3, 'peri' ve greft gösterildiği gibi bölgelerde daha fazla bölge F resmi olarak işaretlenmiş implante greft ortasına mesafelerine bağlı olarak bölgelere ayrılmış. Bölgeleri A ve B 'peri' bölgesi ve bölgeleri C, D ve E greft bölgenin tanımlanmış. Bu bölgelerin her biri (mesial, distal, apikal ve koronal) greft sınırlandırılmış ayrı ayrı hiç dört tarafı oldu. Her 30 saniyelik çekim TOI (Şekil 2) tespit edilmiştir. Her yatırım getirisi ve TOI veri bir elektronik tablo programına verildi. Kan akışı eğrileri istatistiksel analiz için kullanılan uygun bir yazılım tarafından inşa edildi.
Bir yıllık deneme, ikisinden biri içinde harita önce veya sonra kan akışı ölçümler her oturum sırasında ortalama arter basıncı (Harita) önemli bir değişiklik yapıldı. Şekil 4 renkli bir fotoğraf, bir yoğunluk görüntü ve işletilen jinjiva perfüzyon görüntüsünü çalışmamız temsilcisi günlerde gösterir. İlk ameliyat sonrası hafta tam flap kapatma sırasında fibrin aşılı alan ve hafif eritem ve çevresindeki jinjiva ödemi kalın bir tabaka görünür. Ameliyat bölgesi ve hiperemi 'peri' bölgelerde iskemi kan perfüzyon görüntüleri gösterdi. 14 günden aşılı alan klinik olarak eritematöz, şiddetli hiperemi kan perfüzyon görüntülerde gözlenen paralel olarak. Üçüncü ay greft birleşme sonra yara iyileşti ve dişeti perfüzyon ameliyat öncesi dolaşım açıdan yakın değildi.
Şekil 5 bir bulanık yoğunluk görüntüsü ve görüntünün tamamının perfüzyon grafiğini gösterir. Grafikteki ani pik hareketi hasta tarafından belirtir. Ölçümün hemen, hasta rahat bir konumda olduğundan emin olduktan sonra tekrar edilmiş. BF greft içinde farklı bölgelerde ve 'peri' bölgelerde değişimler Şekil 6' da gösterilmiştir. Tüm eğrileri dördüncü ayından daha fazla soruşturma sonuna kadar kan akımı değişmedi yaygındır. Bu dönem için Ortalama kan akımı için yeni doku bir dinlenme kan akışı değeri olarak kullanılabilir ve rastgele değişim zaman nokta arasındaki farkı zamana bağlı bileşen her yatırım getirisi için sırasıyla, doğrusal karma bir modeli kullanarak hesaplamak izin verdi. Minimum algılanabilir fark o zaman gerçek bir değişim (% 95 güven ile) (önce dördüncü ay) iyileşme dönemi sırasında zaman puan arasında hiperemik ve iskemik faz belirlemek için tanımlamak için hesaplanan. Hiperemik bir aşaması gelir bir iskemik faz ile başlayan tüm ROIs greft içinde eğrileri temel özellikleri benzerdi. Ancak, bu iki aşamadan uzunluğunu farklı (Tablo 1) oldu. İskemi en uzun (7-9 gün) Merkez ve tüm koronal bölgeler, geç hiperemi ve 11 27 gün arasında başlayan ile oldu. Greft diğer bölgelerde, iskemi süren tek 4-7 gün ve hiperemi daha önce 7-21 gün arasında başlamış.
Greft farklı kenarlarında bölgeleri BF eğrileri benzersiz özellikleri (Şekil 6) vardı. Apikal tarafında, tüm dört bölgesinden benzer kan akışı eğrileri vardı. Koronal tarafında, perfüzyon dış bölgede yeniden kazanmış mesial ve distal yan aksine iç bölgelerde daha sonra. Yanal her iki BF ilk bölge C sonra bölge D arttı, bölge E BF artış izledi ve sonunda F. orta bölge Çevredeki mukoza (bölge A ve B) bölgelerinde önemli iskemi yok gözlendi. Bunun yerine, hiperemi farklı büyüklük ve ölçüde farklı kenarlarında gözlendi.
BF değer BF eğrisi genel özellikleri ile taksitli değil iki saat nokta vardı. Gün 9, çoğu bölgede ve apikal ve distal yan 'peri' bölgeleri başta olmak üzere, ani bir düşüş oldu. Hiçbir ölçümleri önceki ve sonraki gün alınmış gibi bunun bir ölçüm hatası olduğunu kesin olarak ifade edemem. Ancak, ölçüm raporunda bir kayda göre yanak kısmında çok fazla baskı ile BF bir düşüş sonuçlanan operatör tarafından çekildi. Bu esas olarak distal ve apikal taraf dolaşımını yanak çekerek etkilenmiş olduğunu düşünürsek mantıklı. Gün 182 (6 ay sonra), ölçüm kez arasında daha uzun aralıklarla nedeniyle, hasta ölçüm daha önce üzerinde anlaşılan kısıtlamaları tutmak unuttu. Marjinal jinjiva renkli fotoğraf (Şekil 6) üzerinde kanama önce ölçüm sert diş fırçalama gösterir. Bu arada, hastanın ortodontik tedavi, çok uygulandı ve intermaxillary lastikleri kullandı. Ölçüm daha dikkatle kontrollü koşullar altında daha sonraki bir zamanda tekrar edilmiş bu yüzden iki faktör BF14,15, büyük ölçüde arttırabilir.
Şekil 1: deneysel LSCI kan akışı ölçüm işletilen alanda kurulum ve hasta hazırlığı. Dudakları diş aynalar tarafından çekildi. Bu rakam daha büyük bir versiyonunu görüntülemek için buraya tıklayınız.
Şekil 2: bölünmüş görünüm (resimler görünümü ve grafik görünümü birleşimi) dişeti kan akımı tedavi alanında tipik bir kaydın. Perfüzyon görüntü (üst sağ alt görünümü) kan perfüzyon jinjiva içinde renk kodlu bir gösterimidir. Düşük perfüzyon alanlarında mavi iken yüksek perfüzyon alanlarında kırmızıyla gösterilir. Perfüzyon görüntülerin renk aralığı 0-450 için karşılık gelen LSPU; yumuşatma 10'a ayarlandı. Bir yoğunluk görüntüsü (alt sağ alt görünümü) Toplam backscattered lazer ışık tarafından oluşturulur. Bu tam olarak perfüzyon görüntüsüyle karşılık gelen ve Oryantasyon ve perfüzyon görüntüdeki ayrıntıları tanımlamak için yararlıdır. Faiz (ROI) bölgelerinde her zaman yoğunluk görüntünün içinde tanımlanır. Grafik (üst sol kapı) her yatırım getirisi kayıt için gerçek zamanlı kan perfüzyon lekesi gösterir. Onay kutularını soldaki göstermek için hangi izlemeler seçmek için kullanılabilir. Üç ardışık ölçümleri grafikte gösterilir. Her 30 s atış TOI tespit. Her yatırım getirisi ve TOI ortalama perfüzyon değerleri gösteren bir ortalama değer tablo de bölünmüş görünüm (alt sol panelde) görüntülenir. Bu rakam daha büyük bir versiyonunu görüntülemek için buraya tıklayınız.
Şekil 3: yoğunluk resimdeki muayene dişeti alanı içinde tanımlanan faiz (ROI) bölgelerinde. Bölge A ve B olan 'peri' bölgede bölge C, D ve E mesafeler F. bölge A dudaklar vestibüler yüzeyinde yer alan bölge olarak işaretlenmiş greft, ortasından azalan, greft bulunmaktadır. Bu rakam daha büyük bir versiyonunu görüntülemek için buraya tıklayınız.
Şekil 4: temsilcisi fotoğrafları (üst çizgi), LSCI yoğunluk görüntü (orta hat) ve LSCI perfüzyon görüntü (alt çizgi) işletilen jinjiva. Görüntüleri ameliyat öncesi devlet ve perfüzyon temsil ve şifa ve perfüzyon 1, 4, 7, 14, 21, 27 ve 98 gün yara postoperatively. Bu rakam daha büyük bir versiyonunu görüntülemek için buraya tıklayınız.
Şekil 5: bölünmüş görünüm alt-optimal kaydı. Bulanık yoğunluğu görüntü ve yanlış ayar bir sonucu olarak grafikte dış tepeler. Bu rakam daha büyük bir versiyonunu görüntülemek için buraya tıklayınız.
Şekil 6: BF dağılım çizim koronal (a), mesial (b), (c) ve apikal distal (d) yan greft, zaman içinde. Greft (bölge F)'ın daha fazla dış bölgeler için bir referans olarak hizmet etmek için tüm grafikler tasvir. Bu rakam daha büyük bir versiyonunu görüntülemek için buraya tıklayınız.
| Yan | Bölge | İskemi bitiş | Hiperemi Başlat | Hiperemi bitiş |
| koronal | c | 9 | 27 | 27 |
| koronal | d | 9 | 21 | 27 |
| koronal | e | 7 | 11 | 98 |
| Merkez | f | 9 | 11 | 98 |
| Mesial | c | 5 | 21 | 27 |
| Mesial | d | 5 | 11 | 61 |
| Mesial | e | 7 | 11 | 61 |
| distal | c | 5 | 11 | 27 |
| distal | d | 4 | 7 | 98 |
| distal | e | 4 | 11 | 98 |
| apikal | c | 4 | 11 | 27 |
| apikal | d | 5 | 11 | 61 |
| apikal | e | 5 | 11 | 61 |
Tablo 1: zaman diliminde greft, gün içinde çeşitli bölgelerinde iskemik ve hiperemik faz
Subscription Required. Please recommend JoVE to your librarian.
Discussion
Bu çalışmanın amacı insan jinjiva bir greft neovaskülarizasyon izlemek için yeni bir teknik tanıtmak oldu. Katı her adım kritik bir gereği olarak planlanan protokolünün uygulanması tanıştığımda bizim önceki sonuçlarına göre LSCI iyi tekrarlanabilirlik ve tekrarlanabilirlik9, jinjiva kan perfüzyon değerlendiriyor. LSCI düzenli olarak doğruluğu ve istikrar sağlamak için ayar gerektirir yarı nicel bir teknik olarak kabul edilir. Çünkü bu değer perfüzyon hesaplamak için doğrulama algoritması tarafından kullanılan doğrulama sırasında oda sıcaklığında, mümkün olduğunca doğru bir biçimde ölçülen gerekir.
LSCI, çalışma mesafesi ayarı ve hareket eserler de son derece duyarlı bir yöntemdir. Bu çalışmada, çalışma mesafesi 10 cm tespit edildi. Ölçü alan 2.7 cm x 2 cm yaklaşık üç dişi geniş dişeti alanına karşılık gelen, oldu. Arteriyel nabız pulsatil dişeti mikro9yazmak--dan ortalama zorunda, değişimler indükler gibi etkili kare hızı 16 fotoğraf/s ve 0,06 s/görüntü oldu. Hızlı görüntüleme hareketi eserler, riski de azalır. Ancak, yanlış ayarlar veya hasta hareketleri, kayıt olmalı durdu ve optimum koşullarda tekrarlanan.
İki işleç her ölçüm aldı: bir LSCI kafa ayarlanabilir ve diğer hasta dudakları geri çektiği iken bilgisayar kontrol. Bu çalışmada, üç ölçümleri gerçekleştirilen tekrarlanan her oturumda her 30 alarak s. Ölçümler, her zaman hangi jinjiva mikro rahatsız ediyor, dudak ve yanak, tahriş kaçınılmaz geri çekilmesi nedeniyle yumuşak doku için bir çeşit içeren bu yana artış rasgele hata oluşur. Böyle arası gün değişim, ancak, yani tüm ölçüm işlemi yineleyerek minimize edilebilir, yumuşak doku tekrar, geri çeker ağız, yeniden açarak fotoğraf makinesinin konumunu yeniden ayarlamak ve ROIs yazılım9' yeniden seçerek.
Dişeti mikro yüksek bölgesel varyasyon8gösterdi. Bu nedenle, geniş bir alana kan akımını ölçen LSCI gibi bir yöntem tek nokta ölçüm teknikleri LDF gibi büyük bir avantajı vardır. Bu çalışmada, Bütün cerrahi alan ölçüm alanı kapalı. Geniş ölçüm alan re - veya çalışma yaralı alanı içinde çeşitli bölgelerde neovaskülarizasyon karşılaştırmak izin verdi. LDF nerede soruşturma durumunda LSCI yöntemi, ameliyattan önce fabrikasyon stent tarafından sabit, aksine önceden incelenmesine bölgesi tanımlamak için gerek yoktur. Yara veya kapağı çevresinde her yerde beklenmedik desen tanımasını Kişiselleştirilmiş tıp yara iyileşmesi izleme birincil amacı içindir. Buna ek olarak, doku geometri ve yumuşak veya sert doku büyütme tarafından neden ödemi ameliyat sonrası değişiklikler ön fabrikasyon restenoz işe yaramaz ameliyattan sonra yapar. Görsel değerlendirme, yardımcı olmak için Düzgünleştirme açık kayıt sırasında ve düzgünleştirme değeri 10'a ayarlandı. Bu o perfüzyon perfüzyon görüntünün ve arka plan gürültüsünü azaltmak için daha düzgün bir görünüm için on görüntüleri üzerinden ortalama anlamına gelir. Ancak, yumuşatma yalnızca bir görsel efekt ve gerçek kaydedilen perfüzyon değerlerini etkilemez.
Dişeti kan akımı bir yüksek zamansal değişim de vardır. Bu günlük yaşam, dişeti iltihabı16,17,18, sirkadiyen ritim19, kan basıncı20, sıcaklık16 gibi eşlik birçok fizyolojik faktörler bağlı olabilir , 21, mekanik basınç8,22,23,24, diş fırçalama14,17,25 ya da ortodontik kuvvet15 . Bu nedenle, standardizasyon ve bu faktörlerin sabitleme başarılı takip ölçümleri için zorunlu.
Daha önce greft vaskülarizasyon soruşturma için kullanılan yöntemleri son derece invaziv anlamına geliyordu ölçüm önemli bir kısıtlama zaman puan şifa sırasında özellikle insan çalışmaları26,27,28', 29,30,31,32. Aynı zamanda bölgesel farklılıklar kantitatif ölçüm açısından sınırlamalar var. Bizim önceki çalışmalar9,10 LSCI yüksek güvenilirlik klinik çalışmalarda zaten kanıtladık ve yumuşak doku bir birey optimize etmek için diş çekimi sonra iyileşme zamanı belirlemek yararlı bulundu yerleşim33implant. 11inci postoperatif günde greft tüm bölgeleri en fazla kan akışı düzeyi elde bu çalışmada, mükemmel neovaskülarizasyon, xenogenic kollajen greft tarafından yara bölgeyi gösterdi. Ancak, bu kollajen greft derisinin ı soyulmuş ya da gün 11 tarafından resorbed ve aslında alıcı yatak revaskülarizasyon şiddetindeydi tertibatın. Onun non-invaziv özelliği ek olarak, LSCI başka bir özel öznitelik bireysel düzeyde birleşme sırasında bir greft çeşitli bölgelerinde, reperfüzyon eğrileri tanımlamak için bir yetenektir. Merkezcil greft neovaskülarizasyon önceki Histoloji gözlemleri30' a benzer özellikleridir. Bu o greft revaskülarizasyon değil, sadece periosteal vasküler pleksus aynı zamanda yara kenar boşluğundan ortaya göstermektedir.
Her adımı kesinlikle uyguladıysanız bir greft revaskülarizasyon olabilir gösterir sunulan deney açıkça izledi. Ancak, gün 182, uyumlu olmayan hastanın hazırlanması ve öğretim BF önemli bir artış sonuçlandı.
LSCI geniş ölçüde tam damar yapısını görüntüleme ve retina34,35, cilt7,36 ve beyin37,38 gibi diğer dokulara kan akışını ilişkili alan için kullanılır . LSCI en çok umut veren klinik uygulamaları yara değerlendirme39,40, flep41 değerlendirilmesi yakmak ve intraoperatif serebral kan akımı izleme42vardır. Görünüşe göre insan denekler LSCI tarafından yaygın dişeti ölçümler ciddi sınırlamalar vardır. Bu araç çok sağlam ve ağır gelir. Ana zorluklar düşük çözünürlüğe sahip ve ölçüm kamera uzak birkaç santimetre bulunur belgelerine fotoğraf makinesi ile bağlantılı olarak ortaya çıkmaktadır. Bu özellikler doğrudan renkli fotoğraflar faiz bölgelerinde tespit etmek zordur olun. LSCI makine kafa boyutunu oral kavite içinde çekim engeller. Bu nedenle, doğrudan görünür olmayan alanlarda ölçülen değil. Biz daha önce dolaylı bir yaklaşım ile fotoğrafik bir ayna kullanarak bir alternatif yöntem9olarak hizmet verebilir gösterdi. Ancak, bir ayna kullanarak daha fazla hareket eserler içerir LSCI için hassas olan bir dikey görüntü yakalamak daha zor hale getirir ve odak mesafesini azaltır. Ölçülen alanın dik yakalanamayan kaldırdığınızda, kan akışı değer doğru9,39olabilir ancak bölge kimlik görüntü üzerinde 3D burulma nedeniyle karmaşık kalır.
Subscription Required. Please recommend JoVE to your librarian.
Disclosures
Yazarlar ifşa gerek yok.
Acknowledgments
Bu eser kısmen destekten insan kapasiteleri, yüksek öğretim mükemmellik programı Semmelweis Üniversitesi, terapi araştırma modülü ve tarafından Macar Bakanlığı tarafından Grant numarası K112364 altında Macar bilimsel araştırma fonu tarafından yapılmıştır Ulusal Araştırma, geliştirme ve yenilik Office KFI_16-1-2017-0409.
Materials
| Name | Company | Catalog Number | Comments |
| PeriCam PSI-HR | Perimed AB, Stockholm, Sweden | The PeriCam PSI System is an imaging system based on LASCA technology (LAser Speckle Contrast Analysis). The system measures superficial blood perfusion over large areas at fast capture rates. This makes it ideal for investigations of both the spatial and temporal dynamics of microcirculation in almost any tissue. | |
| PIMSoft | Perimed AB, Stockholm, Sweden | PIMSoft is a data acquisition and analysis software, intended for use together with the PeriCam PSI System and the PeriScan PIM 3 System, for measurement and imaging of superficial blood perfusion. | |
| Geistlich Mucograft | Geistlich, Switzerland | It's a unique 3D collagne matrix designed specifically for soft tissue regeneration. It's indicated for the gain of keratinized tissue and recession coverage. | |
| Omron M4 | Omron Healthcare Inc., Kyoto, Japan | Blood pressure monitor, which gives accurate readings. | |
| Nikon D5200 | Nikon Corportation, Tokyo, Japan | Taking intra oral photos | |
| MS Excel | Microsoft Corporation, Redmond, Washington, USA | The software used for data management | |
| IBM SPSS Statistics 25 | IBM Corp., Armonk, NY, USA | The software used for statistical analysis |
References
- Nakamoto, T., et al. Two-Dimensional Real-Time Blood Flow and Temperature of Soft Tissue Around Maxillary Anterior Implants. Implant Dentistry. 21 (6), 522-527 (2012).
- Kajiwara, N., et al. Soft tissue biological response to zirconia and metal implant abutments compared with natural tooth: microcirculation monitoring as a novel bioindicator. Implant Dentistry. 24 (1), 37-41 (2015).
- Kemppainen, P., Forster, C., Handwerker, H. O. The importance of stimulus site and intensity in differences of pain-induced vascular reflexes in human orofacial regions. Pain. 91 (3), 331-338 (2001).
- Kemppainen, P., Avellan, N. L., Handwerker, H. O., Forster, C. Differences between tooth stimulation and capsaicin-induced neurogenic vasodilatation in human gingiva. Journal of Dental Research. 82 (4), 303-307 (2003).
- Riva, C., Ross, B., Benedek, G. B. Laser Doppler measurements of blood flow in capillary tubes and retinal arteries. Investigative ophthalmology. 11 (11), 936-944 (1972).
- Humeau, A., Steenbergen, W., Nilsson, H., Stromberg, T. Laser Doppler perfusion monitoring and imaging: novel approaches. Medical & Biological Engineering & Computing. 45 (5), 421-435 (2007).
- Briers, J. D., Webster, S. Laser speckle contrast analysis (LASCA): a nonscanning, full-field technique for monitoring capillary blood flow. Journal of Biomedical Optics. 1 (2), 174-179 (1996).
- Fazekas, R., et al. Functional characterization of collaterals in the human gingiva by laser speckle contrast imaging. Microcirculation. 25 (3), 12446 (2018).
- Molnar, E., Fazekas, R., Lohinai, Z., Toth, Z., Vag, J. Assessment of the test-retest reliability of human gingival blood flow measurements by Laser Speckle Contrast Imaging in a healthy cohort. Microcirculation. 25 (2), (2018).
- Molnar, E., et al. Evaluation of Laser Speckle Contrast Imaging for the Assessment of Oral Mucosal Blood Flow following Periodontal Plastic Surgery: An Exploratory Study. BioMed Research International. 2017, 4042902 (2017).
- Sanz, M., Lorenzo, R., Aranda, J. J., Martin, C., Orsini, M. Clinical evaluation of a new collagen matrix (Mucograft prototype) to enhance the width of keratinized tissue in patients with fixed prosthetic restorations: a randomized prospective clinical trial. Journal of Clinical Periodontology. 36 (10), 868-876 (2009).
- Nevins, M., Nevins, M. L., Kim, S. W., Schupbach, P., Kim, D. M. The use of mucograft collagen matrix to augment the zone of keratinized tissue around teeth: a pilot study. The International Journal of Periodontics and Restorative Dentistry. 31 (4), 367-373 (2011).
- Lorenzo, R., Garcia, V., Orsini, M., Martin, C., Sanz, M. Clinical efficacy of a xenogeneic collagen matrix in augmenting keratinized mucosa around implants: a randomized controlled prospective clinical trial. Clinical Oral Implants Research. 23 (3), 316-324 (2012).
- Perry, D. A., McDowell, J., Goodis, H. E. Gingival microcirculation response to tooth brushing measured by laser Doppler flowmetry. Journal of Periodontology. 68 (10), 990-995 (1997).
- Yamaguchi, K., Nanda, R. S., Kawata, T. Effect of orthodontic forces on blood flow in human gingiva. Angle Orthodontist. 61 (3), 193-203 (1991).
- Molnár, E., et al. Assessment of heat provocation tests on the human gingiva: the effect of periodontal disease and smoking. Acta Physiologica Hungarica. 102 (2), 176-188 (2015).
- Gleissner, C., Kempski, O., Peylo, S., Glatzel, J. H., Willershausen, B. Local gingival blood flow at healthy and inflamed sites measured by laser Doppler flowmetry. Journal of Periodontology. 77 (10), 1762-1771 (2006).
- Hinrichs, J. E., Jarzembinski, C., Hardie, N., Aeppli, D. Intrasulcular laser Doppler readings before and after root planing. Journal of Clinical Periodontology. 22 (11), 817-823 (1995).
- Svalestad, J., Hellem, S., Vaagbo, G., Irgens, A., Thorsen, E. Reproducibility of transcutaneous oximetry and laser Doppler flowmetry in facial skin and gingival tissue. Microvascular Research. 79 (1), 29-33 (2010).
- Sasano, T., Kuriwada, S., Sanjo, D. Arterial blood pressure regulation of pulpal blood flow as determined by laser Doppler. Journal of Dental Research. 68 (5), 791-795 (1989).
- Ikawa, M., Ikawa, K., Horiuchi, H. The effects of thermal and mechanical stimulation on blood flow in healthy and inflamed gingiva in man. Archives of Oral Biology. 43 (2), 127-132 (1998).
- Baab, D. A., Oberg, P. A., Holloway, G. A. Gingival blood flow measured with a laser Doppler flowmeter. Journal of Periodontal Research. 21 (1), 73-85 (1986).
- Fazekas, A., Csempesz, F., Csabai, Z., Vág, J. Effects of pre-soaked retraction cords on the microcirculation of the human gingival margin. Operative Dentistry. 27 (4), 343-348 (2002).
- Csillag, M., Nyiri, G., Vag, J., Fazekas, A. Dose-related effects of epinephrine on human gingival blood flow and crevicular fluid production used as a soaking solution for chemo-mechanical tissue retraction. Journal of Prosthetic Dentistry. 97 (1), 6-11 (2007).
- Tanaka, M., Hanioka, T., Kishimoto, M., Shizukuishi, S. Effect of mechanical toothbrush stimulation on gingival microcirculatory functions in inflamed gingiva of dogs. Journal of Clinical Periodontology. 25 (7), 561-565 (1998).
- Rothamel, D., et al. Biodegradation pattern and tissue integration of native and cross-linked porcine collagen soft tissue augmentation matrices - an experimental study in the rat. Head & Face Medicine. 10, 10 (2014).
- Schwarz, F., Rothamel, D., Herten, M., Sager, M., Becker, J. Angiogenesis pattern of native and cross-linked collagen membranes: an immunohistochemical study in the rat. Clinical Oral Implants Research. 17 (4), 403-409 (2006).
- Vergara, J. A., Quinones, C. R., Nasjleti, C. E., Caffesse, R. G. Vascular response to guided tissue regeneration procedures using nonresorbable and bioabsorbable membranes in dogs. Journal of Periodontology. 68 (3), 217-224 (1997).
- Oliver, R. C., Loe, H., Karring, T. Microscopic evaluation of the healing and revascularization of free gingival grafts. Journal of Periodontal Research. 3 (2), 84-95 (1968).
- Janson, W. A., Ruben, M. P., Kramer, G. M., Bloom, A. A., Turner, H. Development of the blood supply to split-thickness free ginival autografts. Journal of Periodontology. 40 (12), 707-716 (1969).
- Mormann, W., Bernimoulin, J. P., Schmid, M. O. Fluorescein angiography of free gingival autografts. Journal of Clinical Periodontology. 2 (4), 177-189 (1975).
- Busschop, J., de Boever, J., Schautteet, H. Revascularization of gingival autografts placed on different receptor beds. A fluoroangiographic study. Journal of Clinical Periodontology. 10 (3), 327-332 (1983).
- Fazekas, R., et al. A proposed method for assessing the appropriate timing of early implant placements: a case report. Journal of Oral Implantology. , (2018).
- Briers, J. D., Fercher, A. F. Retinal blood-flow visualization by means of laser speckle photography. Investigative Ophthalmology & Visual Science. 22 (2), 255-259 (1982).
- Srienc, A. I., Kurth-Nelson, Z. L., Newman, E. A. Imaging retinal blood flow with laser speckle flowmetry. Front Neuroenergetics. 2, (2010).
- Choi, B., Kang, N. M., Nelson, J. S. Laser speckle imaging for monitoring blood flow dynamics in the in vivo rodent dorsal skin fold model. Microvascular Research. 68 (2), 143-146 (2004).
- Ayata, C., et al. Laser speckle flowmetry for the study of cerebrovascular physiology in normal and ischemic mouse cortex. Journal of Cerebral Blood Flow & Metabolism. 24 (7), 744-755 (2004).
- Armitage, G. A., Todd, K. G., Shuaib, A., Winship, I. R. Laser speckle contrast imaging of collateral blood flow during acute ischemic stroke. Journal of Cerebral Blood Flow & Metabolism. 30 (8), 1432-1436 (2010).
- Lindahl, F., Tesselaar, E., Sjoberg, F. Assessing paediatric scald injuries using Laser Speckle Contrast Imaging. Burns. 39 (4), 662-666 (2013).
- Mirdell, R., Iredahl, F., Sjoberg, F., Farnebo, S., Tesselaar, E. Microvascular blood flow in scalds in children and its relation to duration of wound healing: A study using laser speckle contrast imaging. Burns. , (2016).
- Zotterman, J., Bergkvist, M., Iredahl, F., Tesselaar, E., Farnebo, S. Monitoring of partial and full venous outflow obstruction in a porcine flap model using laser speckle contrast imaging. Journal of Plastic, Reconstructive & Aesthetic Surgery. 69 (7), 936-943 (2016).
- Hecht, N., Woitzik, J., Dreier, J. P., Vajkoczy, P. Intraoperative monitoring of cerebral blood flow by laser speckle contrast analysis. Neurosurgical Focus. 27 (4), E11 (2009).
