Waiting
Login processing...

Trial ends in Request Full Access Tell Your Colleague About Jove
Click here for the English version

Medicine

Implantation av hiPSC-derived hjärtmuskulatur fläckar efter Myokardskada i marsvin modell

Published: March 18, 2019 doi: 10.3791/58810
* These authors contributed equally

Summary

Här presenterar vi ett protokoll för induktion av vänster ventrikulära cryoinjury följt av implantation av en hjärtmuskulatur patch, härrör från mänsklig iPS-cell hjärtmuskelcellerna i ett marsvin modell.

Abstract

På grund av den begränsade förnyelsekapacitet av hjärtat hos vuxna däggdjur, hjärtinfarkt resulterar i en oåterkallelig förlust av hjärtmuskelceller. Denna förlust av relevanta mängder av hjärtmuskeln massan kan leda till hjärtsvikt. Förutom hjärttransplantation finns det ingen kurativ behandlingsalternativ för slutstadiet hjärtsvikt. I tider av givare organbrist behövs orgel oberoende behandlingsformer. Vänster kammare assist enheter är en lovande behandling alternativ, dock särskilt som destination terapi, begränsas av dess biverkningar som stroke, infektioner och blödningar. Under de senaste åren har flera hjärt reparation strategier inklusive stamceller injektion, hjärt föräldraparets eller hjärtinfarkt vävnadsteknik undersökts. Senaste förbättringar i cellbiologi möjliggör differentiering av stora mängder hjärtmuskelceller som härrör från mänskliga inducerade pluripotenta stamceller (iPSC). En av de kardiella reparation strategierna för närvarande under utvärdering är att transplantera konstgjort hjärta vävnad. Bakåtkompilerade hjärta vävnad (EHT) är en tredimensionell in vitro-skapade hjärtmuskelcellen nätverk med funktionella egenskaper av infödda hjärta vävnad. Vi har skapat EHT-patchar från hiPSC härrör hjärtmuskelcellerna. Här presenterar vi ett protokoll för induktion av vänster ventrikulära hjärtinfarkt cryoinjury i ett marsvin, följt av implantation av hiPSC härrör EHT på vänster ventrikulära väggen.

Introduction

Antalet patienter med hjärtsvikt ökar i vår åldrande befolkning. För slutstadiet hjärtsvikt är ortotop hjärttransplantation alternativet endast botande behandling. Men, särskilt i Europa finns det en ökande givare organbrist. Därför behövs alternativa behandlingsmetoder. Senaste prestationer i mekanisk cirkulatorisk support är lovande, men särskilt på lång sikt kör, begränsas av dess biverkningar som blödning, pump trombos och infektiösa komplikationer1.

Den endogena förnyelsekapacitet vuxen människohjärtats är ytterst begränsad. Hjärtats förnyelse terapier kan därför bli ett alternativ behandlingsalternativ för slutstadiet hjärtsvikt patienter2,3. Olika tekniker inklusive stamceller-baserade cell injektionen eller tissue engineering tillvägagångssätt har varit beskrivs3,4,5.

Mänskliga inducerade pluripotenta stamceller (hiPSC), liksom mänskliga embryonala stamceller (hESC) kan effektivt differentieras till spontant slog mänskliga hjärtmuskelceller6, som har varit en stor bedrift i fältet av hjärt regenerativ terapier.

Att ersätta myokardiet efter en hjärtinfarkt och för att förbättra funktionen av en sviktande hjärtat, är överlevnad av ett lämpligt antal hjärtmuskelceller och deras mekaniska och elektriska koppling med infödda hjärtat viktigt. För att undersöka potentialen hos hjärt regenerativ terapier med mänskliga iPS cellen härlett hjärtmuskelceller, behövs en lämplig forskning modell. Den idealiska modellen bör vara kostnadseffektiva och har en människoliknande fysiologi och elektrofysiologi. Stora djurmodeller som svin skulle vara perfekt från denna synpunkt, men dessa experiment är mycket dyra och stora mängder hjärtmuskelcellerna skulle vara nödvändigt att ersätta ett relevant antal hjärtmuskelceller för att se effekter på vänsterkammardysfunktion funktion i en gris infarkt modell.

För att besvara grundläggande biologiska frågor mot mänsklig cell-baserad hjärt regenerering, t.ex. är cellöverlevnad och vaskularisering elektrisk koppling, små djurmodeller lämpligare. Från de tillgängliga små djurmodeller är marsvin den mest användbara arten, jämfört med råttor och möss, som deras elektrofysiologi mer liknar situationen i människor7. I denna marsvin modell inducerade vi en transmural cryoinjury i vänster kammare. En vecka efter induktion av hjärtinfarkt implantation av en tredimensionell, utfördes spontant slog höfter-cellen härlett hjärtmuskelcellen patch. Hjärtmuskelcellen cellöverlevnad utvärderades 28 dagar efter implantation av histologisk undersökning.

Subscription Required. Please recommend JoVE to your librarian.

Protocol

Djuren fick Human vård i enlighet med guiden för principer av laboratoriedjur, beredd av institutet av laboratorium djur resurser och utgiven av National Institutes of Health. Alla djur protokoll godkändes av den ansvariga lokala myndigheten ('' Amt für Gesundheit und Verbraucherschutz, Hansestadt Hamburg'' / djur protokoll nr 109/16).

1. skaffa djur

  1. Kommersiellt få kvinnliga marsvin väger 500 – 600 g.
  2. Hus dem under vanliga förhållanden i djurburar. Foder standard råtta chow och autoklaveras vatten ad libidum.

2. transtorakal ekokardiografi

  1. Placera marsvin i en induktion kammare och söva djuret med isofluran (2 – 3%). Kontrollera djup anestesi genom bristen på svar till tå-nypa.
  2. Placera den sövda marsvinet på en värmande plattform (40 – 42 ° C) i ryggläge. Fortsätt anestesi via en Kona (isofluran 1,5-2%)
  3. Raka och depilate guinea pig´s bröstkorgen med hjälp av en elektrisk djurhår rakapparaten.
  4. Applicera förvärmd (~ 25 ° C) ultraljud givaren gel. Använda en ekokardiografi system som är utrustad med en omformare frekvens högre än 15 MHz.
  5. Förvärva tvådimensionella parasternal långa axeln visningar genom att placera givaren på guinea´s gris bröstkorgen inför från rätt halsen mot vänster ben och spela in långa axeln B-mode bilder på planet av aortaklaffen med en samtidig visualisering av LV apexen. Undersöka funktionen preoperativ vänster kammare.
  6. Slå givaren genom 90° grader för att få en kort axel B-läge vy på mitten av-papillär nivå.
    Obs: Djuret är sedan omedelbart överföras till tabellen OR. Djuret är kontinuerligt bedövas med 3% isofluran. 0,05 mg/kg atropin (i.m.) injiceras för att undvika ökad bronkiell sekretion under mekanisk ventilation.

3. kirurgi

  1. Induktion av hjärtinfarkt
    1. Injicera 4 – 5 mg/kg karprofen och för analgesi buprenorfin på 0,05 mg/kg subkutant med en 21 G nål och en 10 mL-spruta. 0,5 mg/kg atropin injiceras subkutant med en 21 G nål och en 10 mL-spruta.
    2. Placera marsvin på ryggen och håll anestesi med en ansiktsmask som täcker munnen och näsan. Kolla djupet av anestesi genom att nypa bakfötter (avsaknad av pedal reflex).
    3. Sprida guinea grisarnas ben och fixa ställning med tejp.
    4. Raka bröstet och luftrör regionen av sövda djur med en rakapparat. Desinficera området allmänt använda jod-baserade scrub, följt av 80% etanol. Upprepa detta desinfektion steg två gånger.
    5. Utföra en 1,5 cm vertikala snitt i området luftrör och rakt på sak dissekera musklerna som täcker luftstrupen tills du ser luftstrupen. Punktering luftstrupen med 18 G i.v. kanyl och infoga den flexibla delen av kanylen som en trakeal röret.
    6. Anslut trakeal röret till en djur respirator kontinuerligt ventilera marsvin under förfarandet.
      Obs: Nu anestesi upprätthålls med isofluran 3% via trakeal röret (inspiration assisterad ventilation med maximal inspiration tryck, respiration klassar: 100 – 120/min, peak inspiration tryck: 18-22 cm Hg använder PEEP-ventilation medan bröstet är öppen ).
    7. Identifiera den 5: e interkostalrummet genom att räkna de rib utrymmen med början den första interkostalrummet. Utföra en 2 cm horisontella snitt på den 5: e interkostalrummet på vänster sida av marsvin använda sax och en pincett. Infoga ett litet djur upprullningsdon. Dissekera musklerna med en diatermi tills muskulaturen är nått, som kan ses efter flyttande den subkutana vävnaden, nås.
    8. Dissekera försiktigt av intercostalmusklerna med pincett tills det pleural utrymmet nås och man kan se den vänstra lungan framme. Infoga upprullningsdonet mellan revbenen och öppna det försiktigt tills en bra bild av hjärtat erhålls.
    9. Öppna den hjärtsäck ungefär 1 cm i regionen i den främre vänstra ventrikulära väggen med sax. Placera en kompress på den vänstra lungan att skydda den från skador när förmå cryoinjury av vänster kammare.
    10. Placera spetsen på en eroderad metallstämpel (aluminium) med tvärsnittsdata 0,5 cm i diameter i flytande kväve för 3 min.
    11. Tryck på kvävet kyls sonden på vänster främre väggen av hjärtat för 30 s. Sedan separera det från hjärtat med en elektrisk lödkolv (250 ° C) som är placerad inuti stämpeln att värma upp. Upprepa detta 3 gånger för att erhålla en transmural myokardskada. Observera den blanchering hjärtmuskeln.
    12. Blåsa upp lungorna med maximalt tryck (av fastspänning utflöde röret av respiratorn för 2 s), för att undvika atelektas i lungan. Ta bort upprullningsdonet från interkostalrummet.
    13. Nära revbenen med två 3-0 suturer. Nära musklerna över revbenen med en 4-0 kör sutur. Använd 5-0 sutur enda stygn för stängning av huden.
    14. Minska isofluran till 1%. När djuret andas spontant, ta bort trakeal röret och fortsätta anestesi med en ansiktsmask (isofluran 2 – 3%).
    15. Försäkra avsaknad av reflexer genom att nypa på bakbenen för att övervaka tillräckligt djup av anestesi. Använd sedan en enda 8-0 sutur att stänga webbplatsen punktering på luftstrupen. Nära såret med tre enda stich 4-0 suturer.
    16. Använda buprenorfin (0,05 mg/kg per 12 h) och karprofen (5 mg/kg per 24 h) för smärtstillande medicin för de följande fem dagarna.
  2. Implantation av EHT (7 dagar efter cryoinjury)
    1. Placera marsvin i en induktion kammare och söva djuret med isofluran kontrollera djup anestesi av bristen på svar på tå-nypa.
    2. Injicera 4 – 5 mg/kg karprofen och buprenorfin 0,05 mg/kg subkutant med en 21 G nål och en 10 mL spruta efter induktion av anestesi. Placera marsvin på ryggen och håll anestesi med en ansiktsmask som täcker munnen och näsan.
      Obs: Självförsörjning av anestesi bör kontrolleras genom att nypa bakfötter.
    3. Sprida marsvins ben och fixa ställning med tejp.
    4. Utför de före kirurgiska preparat som beskrivs i steg 3.1.4–3.1.6. Utföra en 2 cm vågräta huden snitt i området ärr i vänster laterala sida med sax och pincett.
    5. Försiktigt dissekera de extrapleural sammanväxningar använder en diatermi. Öppna försiktigt pleural utrymme med sax. Infoga en rib spridare för att exponera hjärtat.
    6. Visuellt identifiera regionen i infarkt genom dess blek färg jämfört med den friska omgivande hjärtmuskeln. Placera bakåtkompilerade hjärta vävnad plåstret över regionen infarkt.
    7. Fäst det med två 8-0 suturer på båda sidor. Se till att säkra plåstret i området icke-infarcted i hjärtat (figur 1). Blåsa upp lungorna med tryck, för att undvika atelektas i lungan. Ta bort upprullningsdonet från interkostalrummet.
    8. Nära revbenen med två 3-0 suturer. Nära musklerna över revbenen med en 4-0 kör sutur. Använd 5-0 sutur enda stygn för stängning av huden.
    9. Minska isofluran till 1%. När djuret andas spontant, ta bort trakeal röret och fortsätta anestesi med en ansiktsmask (isofluran 2 – 3%).
    10. Försäkra avsaknad av reflexer genom att nypa på bakbenen för att övervaka tillräckligt djup av anestesi. Använd sedan en enda 8-0 sutur att stänga webbplatsen punktering på luftstrupen. Nära såret med tre enda sy 4-0 suturer.
    11. Använda buprenorfin (0,05 mg/kg per 12 h) och karprofen (5 mg/kg per 24 h) för smärtstillande medicin för de följande fem dagarna.
    12. Fyra veckor efter EHT implantation utför en transtorakal ekokardiografi (som beskrivs i steg 2) för att övervaka LV funktion över tid.
      Obs: LV funktion övervakas innan EHT implantation och 4 veckor efter implantationen att övervaka för förbättring av hjärtfunktionen av EHT implantationen
    13. Avliva djuret vilket IACUC godkända protokoll och kirurgiskt explant hjärtat för vidare analys.

Subscription Required. Please recommend JoVE to your librarian.

Representative Results

Denna marsvin modell är en lämplig modell för att undersöka hjärtats förnyelse efter implantation av hiPSC härstammar EHT-patchar. Reproducibly leder det till stor transmural hjärtinfarkt skador. Ärr storlek utvärderas av histologi fyra veckor efter cryoinjury. Mason trikrom färgning avslöjar stor transmural ärr (figur 2). Ärr storlek var liknande över ett stort antal skadade djur återspeglar en hög grad av reproducerbarhet8. I genomsnitt ersattes 25% av den vänstra ventrikulära hjärtmuskeln av ärrvävnad. Dystrofin färgning visade stor hjärtinfarkt ympkvistar som delvis remuscularized ärr (figur 3a). Färgning för mänskliga Ku80 visat det mänskligt ursprunget av denna nybildade hjärtmuskeln (figur 3b). Högre förstoring visade att dessa transplantat bestod av tätt packade myocyter. Vänsterkammarfunktionen övervakades med hjälp av transtorakal ekokardiografi. En lyckad EHT-implantation kännetecknas av en förbättring av LVEF, fraktionerad området förkortning, och en minskning i vänster ventrikulära slutet-diastoliskt diameter (figur 4).

Figure 1
Figur 1: hEHT-fläckar efter implantationen. (A) Patch omedelbart efter implantationen. (B) Patch fyra veckor efter implantationen. Klicka här för att se en större version av denna siffra.

Figure 2
Figur 2: bestämning av infarkt på Masson s trikrom målat paraffin avsnitt 28 dagar efter cryoinjury. Infarkt bestäms av den blå färgen i Massons trikrom färgning, som representerar fibrotisk vävnad. Skalstapeln = 2 mm. vänligen klicka här för att visa en större version av denna siffra.

Figure 3
Figur 3: färgning med dystrofin och mänskliga Ku80. (A) dystrofin färgning visar stor muskel öar (brun) i området ärr (B) Ku-färgning av paraffin sektioneras hjärtat. Ku-80 är en mänskliga-specifika antikroppar. Det är därför positivt färgade celler (brun färg) från mänskligt ursprung. Klicka här för att se en större version av denna siffra.

Figure 4
Figur 4: M-läge mätning av vänster kammare med transtorakal ekokardiografi. (A) vid studiestart och (B) en vecka efter cryoinjury. (IVS: Intraventrikulär septum, LV: vänster kammare, PW: bakre vägg). Mätningar utförs 3 gånger. Vid baslinjen, 1 vecka efter cryoinfarction och 4 veckor efter EHT implantation vänligen klicka här för att visa en större version av denna siffra.

Subscription Required. Please recommend JoVE to your librarian.

Discussion

Det finns en mängd små djurmodeller studera effekten som stamcellstransplantation utövar skadade hjärtan9,10,11. Vi valde ett marsvin modell på grund av alla små djur modeller dess (electro) fysiologi påminner närmast om människor. Fördelarna med små djurmodeller är enkla bostäder, hanterbara kostnader och några arbetsstyrkor. Jämfört med möss och råttor är guinea pigs´ hjärt (electro) fysiologi mer lik människan. I synnerhet hjärtafrekvens är lägre (~250/min), ventrikulär åtgärd potentiella visar en plateau fas och kalium nuvarande jagkr är viktigt för repolarisering7. Dessutom underlättar den större storleken av djuren operationer, vilket är särskilt viktigt eftersom en re-torakotomi är krävs en vecka efter induktion av skada. Marsvin är dock känsliga för narkos som kräver viss erfarenhet.

Shiba et al., beskrivs användning av 50 mg/kg Ketamin och 2 mg/kg xylazin (i.p.) att söva försökskaniner för hjärt cryoinjury4. Vi har också utvärderat detta anestesi regemente. En av nackdelarna är att det är omöjligt att upphäva den narkotiska effekten av xylazin och Ketamin på grund av saknade potent motgift. Med tanke på att marsvin är hög risk för hypoglykemi under kirurgiska ingrepp, beslutade vi att använda en narkotisk gas vars effekt är lätt att kontroll och därför leder till en mycket kort narkos återhämtningsfas. En trakeotomi används för att säkerställa en säker ventilation under hela förfarandet. En oro-trakeal intubation är tekniskt mycket krävande i marsvin, som visualisering av öppnandet av luftstrupen är ofta svårt och en säker intubation kan inte garanteras.

Även om cryo-skada inducerar en svår myokardskada det inte just spegla en kranskärlssjukdom / hjärtinfarkt hos människor. I detta avseende recapitulates ligering av POJKEN eller ens en ischemi-reperfusion skada modell mer nära mänskliga patofysiologin. Koronar anatomi i marsvin kännetecknas dock av en omfattande collateralization. En ligatur av vänster främre fallande kranskärl leder därför inte reproducibly i stor hjärtinfarkt skador i marsvin12,13. LAD-ligatur hos mus och råtta leder till en omfattande ombyggnad och så småningom gallring av den främre väggen, en egenskap som inte ses hos människa i denna utsträckning. Marsvin cryo-skada modellen inducerar remodeling processer och gallring av ventrikulära väggen, men i en utsträckning, som mer liknar en hjärtinfarkt skada ses hos människa. Därför, en cryoinjury modell vilket resulterar i en mer tillförlitlig myokardskada valdes13. Periprocedural dödlighet är ett stort problem med denna modell. Inledningsvis, ca 30% av djuren dog under första operationen eller inom 7 dagar efter hjärt skada. Ytterligare 30% dog under EHT implantation redovisning för en total mortalitet på 60%. Flera ändringar leda till en avsevärd minskning i dödlighet. Isofluran framkallar kraftig salivering och bronkialsekretion. Atropin minskar bronkialsekretion och var en viktig faktor att minska dödligheten. Den andra faktor som kraftigt minskade dödligheten är användningen av en lödkolv att släppa kall metall stämpeln från hjärtat. Varmt vatten användes inledningsvis att lossa stämpeln från hjärtmuskeln. Det var dock svårt att ta bort vattnet från brösthålan. Kvarvarande vatten negativt påverkad respiration och leda till utveckling av vidhäftning som försämrat animal´s prognosen. En annan ändring som positivt påverkat förfarandet var att skydda den vänstra lungan från kall metall stämpeln med en kompress. Efter dessa ändringar var genomförda dödligheten sjunkit till ~ 20% för hjärt skada operation (inklusive den första postoperativa veckan) och ytterligare 25% för EHT transplantation. Induktion av cryo skada representerar den tekniskt enklare driften och konsekventa resultat kan uppnås efter 5-10 djur har drivits under övervakning. EHT-transplantation är mer krävande och ca 20 operationer under övervakning rekommenderas tills reproducerbara resultat kan erhållas.

I början brukade vi varm saltlösning skölj hjärtat och, därför, lossa frysta sonden från vänster ventrikulära väggen. Detta förfarande är lättare att hantera men några milliliter koksaltlösning kvar i bröstkorgen ökar risken för andningssvikt.

Avslutningsvis skildras marsvin modellen är reproducerbara, billig och leder till konsekvent resultat. Transtorakal ekokardiografi erbjuder ett genomförbart och icke-invasiva verktyg för att utvärdera förekomsten av hjärt skada innan omoperation och transplantat-implantation utförs.

Subscription Required. Please recommend JoVE to your librarian.

Disclosures

Ingen av författarna har konkurrerande ekonomiska intressen eller andra intressekonflikter för att förklara.

Acknowledgments

Ingen finansiering togs emot för denna studie

Materials

Name Company Catalog Number Comments
Ventilator (VetFlo Dual Mode) Kent Scientific
Forene abbvie 1000009819
Carprofen Zoetis 256692
Atropin Braun PZN 00648037
Buprenorphin Sigma
Metal stamp
Electric soldering iron Claytools
3-0 prolene suture Ethicon
4-0 prolene suture Ethicon 662SLH
5-0 prolene suture Ethicon 8710H
8-0 prolene suture Ethicon 8841H
Tungsten Carbide Scissor  FST No. 14568-12
Stainless sterilization Container FST No. 20890-51
Graefe Forceps FST No.11652-10
Extra fine Graefe Forceps FST No.11150-10
Forceps FST No. 11022-15
Halsted- Mosquito FST No. 13009-12
Forceps FST No.13003-10
Baby Mixter FST No. 13013-14
Needle holder (Castroviejo with Tungsten Casbide Jaws)  FST No. 12565-14
Needle Holder (Halsey) FST No. 12501-13
Alm Retractor with Blumt Teeth FST No. 17008-07
Spring Scissor FST No. 15000-00
Compress 5x5 Fink + Walter PZN 08821417
Venflon Pro Safety Becton Dickinson PZN11123964
Cautery High Temp 2" Bovie Medical Corporation 0100607151011055

DOWNLOAD MATERIALS LIST

References

  1. Kirklin, J. K., et al. Seventh INTERMACS annual report: 15,000 patients and counting. The Journal of heart and lung transplantation: the official publication of the International Society for Heart Transplantation. 34, 1495-1504 (2015).
  2. Soonpaa, M. H., Field, L. J. Survey of studies examining mammalian cardiomyocyte DNA synthesis. Circulation research. 83, 15-26 (1998).
  3. Shiba, Y., Hauch, K. D., Laflamme, M. A. Cardiac applications for human pluripotent stem cells. Current pharmaceutical design. 15, 2791-2806 (2009).
  4. Shiba, Y., et al. Human ES-cell-derived cardiomyocytes electrically couple and suppress arrhythmias in injured hearts. Nature. 489, 322-325 (2012).
  5. Chong, J. J., et al. Human embryonic-stem-cell-derived cardiomyocytes regenerate non-human primate hearts. Nature. 510, 273-277 (2014).
  6. Kattman, S. J., et al. Stage-specific optimization of activin/nodal and BMP signaling promotes cardiac differentiation of mouse and human pluripotent stem cell lines. Cell stem cell. 8, 228-240 (2011).
  7. Watanabe, T., Rautaharju, P. M., McDonald, T. F. Ventricular action potentials, ventricular extracellular potentials, and the ECG of guinea pig. Circulation research. 57, 362-373 (1985).
  8. Weinberger, F., et al. Cardiac repair in guinea pigs with human engineered heart tissue from induced pluripotent stem cells. Science translational medicine. 8, 363ra148 (2016).
  9. Shiba, Y., et al. Electrical Integration of Human Embryonic Stem Cell-Derived Cardiomyocytes in a Guinea Pig Chronic Infarct Model. Journal of Cardiovascular Pharmacology and Therapy. 19, 368-381 (2014).
  10. van Laake, L. W., et al. Human embryonic stem cell-derived cardiomyocytes survive and mature in the mouse heart and transiently improve function after myocardial infarction. Stem cell research. 1, 9-24 (2007).
  11. Zimmermann, W. H., et al. Engineered heart tissue grafts improve systolic and diastolic function in infarcted rat hearts. Nature medicine. 12, 452-458 (2006).
  12. Johns, T. N., Olson, B. J. Experimental myocardial infarction. I. A method of coronary occlusion in small animals. Annals of surgery. 140, 675-682 (1954).
  13. van den Bos, E. J., Mees, B. M., de Waard, M. C., de Crom, R., Duncker, D. J. A novel model of cryoinjury-induced myocardial infarction in the mouse: a comparison with coronary artery ligation. Heart and circulatory physiology. , H1291-H1300 (2005).

Tags

Medicin fråga 145 ingenjören hjärta vävnad hjärtmuskelceller cryoinjury marsvin hjärtmuskulatur patch iPS-celler
Implantation av hiPSC-derived hjärtmuskulatur fläckar efter Myokardskada i marsvin modell
Play Video
PDF DOI DOWNLOAD MATERIALS LIST

Cite this Article

Castro, L., Geertz, B., Reinsch, M., More

Castro, L., Geertz, B., Reinsch, M., Aksehirlioglu, B., Hansen, A., Eschenhagen, T., Reichenspurner, H., Weinberger, F., Pecha, S. Implantation of hiPSC-derived Cardiac-muscle Patches after Myocardial Injury in a Guinea Pig Model. J. Vis. Exp. (145), e58810, doi:10.3791/58810 (2019).

Less
Copy Citation Download Citation Reprints and Permissions
View Video

Get cutting-edge science videos from JoVE sent straight to your inbox every month.

Waiting X
Simple Hit Counter