Summary
I detta protokoll beskriver vi hela processen med experimentella myopi uppmuntran i möss med nydesignade glasögon och technic behövs för att uppnå stabila och reproducerbara resultat i okulär parametern mätningar.
Abstract
Murina modell av närsynthet kan vara ett kraftfullt verktyg för närsynthet forskning på grund av de jämförelsevis lätt genetisk manipulationen. Ett sätt att framkalla närsynthet hos djur är att sätta tydliga minus linser framför ögonen i veckor (lins-inducerad myopi, LIM). Bevarade protokoll för uppmuntran och utvärdering varierar dock från laboratorium till laboratorium. Vi beskrivit här, en mycket praktisk och reproducerbar metod för att framkalla LIM i möss med nydesignade glasögon. Metoden korrigeringar linsen stabilt framför musen ögat samtidigt tillåter linsen tas bort för rengöring eller utvärtes drug administration. Fenotypen är robusta och effektiva, och variansen är liten. Den metod som beskrivs här kan tillämpas på möss direkt efter avvänjning som sträcker sig hela möjligt för experiment. Vi gav också teknisk rådgivare för att uppnå reproducerbara resultat i refraktion och axiell längd mätningar. Vi hoppas det stegvisa protokollet som beskrivs här och detaljerade artikeln kan hjälpa forskare utföra myopi experiment med närsynthet smidigare och göra uppgifterna jämförbara över laboratorier.
Introduction
Förekomsten av myopi har ökat dramatiskt nyligen, medan mekanismen av dess debut och progression är fortfarande till stor del okänd1. Den mest karakteristiska fenotypen av närsynthet är förlängningen av axiell längd (AL), vilket ökar risken för retinal komplikationer eller blindhet2. Att bättre förstå patogenesen av myopi och utveckla effektiva behandlingar, är robust närsynta djurmodeller och stabil fenotyp utvärdering nödvändig.
Kort, finns två metoder för att inducera närsynta stater i djur: form-deprivation myopi (FDM) och objektiv-inducerad myopi (LIM)3. De tidigare förlägger diffusorer framför ögat eller sutures ögonlocket för att skymma bilden, som påverkar den normala utvecklingen av ögongloben, vilket resulterar i en myopi fenotyp. De sistnämnda platserna minus linser framför ögat att flytta tyngdpunkten bakom näthinnan. Näthinnan upptäcker en förskjutning av fokus och förlänger ögongloben för att justera näthinnan och samlingspunkt. FDM, efter ögonlocket är stängd eller spridaren har fixats framför ögat, behövs nästan inget ytterligare underhåll. För LIM behöver linsen tas bort för rengöring för att hålla det öppet. Således, FDM är relativt lätt att induceras tekniskt. Dock mekanismer FDM och LIM är olika, och vilken metod härmar myopi i mänskliga bättre är fortfarande under debatt3. En av styrkorna med LIM är starkare fenotypen jämfört med FDM, åtminstone när det gäller möss4.
Djur som har använts för att inducera myopi inkluderar kycklingar5, apor6, tree näbbmöss7, marsvin8och möss4. Med tanke på möjligheten att genmanipulation, rikligt tillgängliga antikroppar och låg kostnad för avel, kunde möss ha varit förstahandsvalet som djur modell av närsynthet. Jämfört med andra större djur, är fastställande linser eller diffusorer framför musen ögat dock relativt svårt särskilt för unga möss såsom rätt efter avvänjning. För experiment som behöver aktuell drug administration eller flera mellanliggande ögat mätningar, är det också nödvändigt för ramen för att vara flyttbar. En annan utmaning är den små morfologiska förändringen av mus ögonglob, som måste sofistikerade technics och enheter att utvärdera. Hittills har gör olika inducerande och mäta protokoll som används i olika forskargrupper det svårt att jämföra och upprepa resultaten i laboratorier. Ett standardprotokoll med detaljer som behövs.
Tidigare verk beskrivs flera metoder för att fixa linser eller diffusorer framför musen ögat, såsom limning9, sy10 och huvud-monterad goggle ram11,12. Vi kombinerade finns huvud-monterad goggle technics11,12,13 med vår nydesignade ram att utveckla ett ameliorated protokoll för att inducera robusta och effektiva experimentella närsynthet hos möss. Protokollet kan tillämpas på unga möss snart efter avvänjning postnatal dag 21 (p21). Vi har också optimerat processerna för stabil och exakt utvärdering av fenotyper inklusive refraktion och AL. Vi hoppas detta standardiserade protokoll kan bidra till att göra närsynta möss en mer lättillgänglig modell för närsynthet forskning.
Subscription Required. Please recommend JoVE to your librarian.
Protocol
Alla förfaranden godkändes av den etiska kommittén på djur forskning av Keio University School of Medicine följs ARVO uttalande om användning av djur i oftalmologiska och Vision Research, institutionella riktlinjerna på djur experiment på Keio Universitet och den forskning som djur: rapportering av i Vivo experiment (ankomst) riktlinjer för användning av djur i forskningen.
1. montering glasögon för möss
- Förbereda delar som behövs för montering av glasögon (figur 1a). För varje mus, förbereda alla följande: en huvud-monterad nylon stick, en högre och en lägre titan ram, två linser med rätt befogenheter enligt syftet med experimentet, en M1.4 storlek skruv med längden på 10 mm, en mutter för M1.4 storlek skruv, en vanlig bricka för M1.4 storlek skruv med 0,3 mm tjocklek och två konstgjorda nageln tips (Tabell för material).
Obs: Två sorters ramar finns med olika höjder. För en mus används en högre RAM och en nedre ram som en uppsättning. Högre ramar bör sättas ovanför de lägre vibrationerna för att göra fälten vision symmetrisk. Bågar och linser är speciellt konstruerade och tillverkade av författarnas forskargrupp. Dessa är tillgängliga genom att kontakta motsvarande författarna till denna artikel. Andra delar kan hittas i butiker för verktyg. - Montera ramen för höger och vänster öga separat.
- Ordna Nagel tipset att möta utanför riktning för att uppnå bästa skyddande effekt. Justera vinkel mellan nageln och ramen för att vara ca 130° att undvika maskering fältet mus vision (figur 1b). Följa den konstgjorda Nagel tipsen till ramen med cyanoakrylatlim.
Obs: Nagel tips kan hjälpa för att skydda linsen från att repas av musen. Riktning mot Nagel tips måste vara motsatta eftersom högre ramen och den nedre ramen används för höger och vänster öga, respektive. - Vänta minst 12 h att låta limmet torka helt, sedan använda en nagelklippare för att justera formen på nageln tips vara ca 1 cm × 1 cm genom att klippa och trimma.
- Fästa linsen till ramen med cyanoakrylatlim. Sätt linsen på ramen för hand och håll ramen vågrätt. Injicera cyanoakrylatlim från kanten av linsen och låt självhäftande spridningen av ytspänning.
Obs: Limmet kommer att urholka linsen och påverka dess öppenhet, så se till att limmet endast berör den perifera delen av linsen. Använd 0 diopter (D) plano lins som kontroll och minus lins för att inducera myopi. Effekten av olika befogenheter minus linser (–10 D till –50 D) har varit beskrivs på annan plats4. För att maximera den myopi förmånserbjudanden, rekommenderas – 30 D objektiv för att inducera myopi. FDM kan också induceras med samma enhet helt enkelt genom att ändra linsen till locket på 1,5 mL mikrorör som diffusor.
- Ordna Nagel tipset att möta utanför riktning för att uppnå bästa skyddande effekt. Justera vinkel mellan nageln och ramen för att vara ca 130° att undvika maskering fältet mus vision (figur 1b). Följa den konstgjorda Nagel tipsen till ramen med cyanoakrylatlim.
- Dra åt skruven i nylon pinnen tillsammans med brickan från den platta sidan av stickan. Förbereda glasögon och pinnar innan experimentet respektive och lager för ytterligare användning (figur 1 c).
Obs: Protokollet kan pausas här.
2. mätningar av refraktion och AL baslinjen.
- Applicera en droppe av mydriatiska agent som innehåller 5 mg/mL Tropikamid och 5 mg/mL fenylefrin hydroklorid på varje sida av ögongloben för att vidga pupillen. Vänta minst 5 minuter före narkos.
Obs: Vidgas pupillen under allmän anestesi kommer att orsaka reversibel katarakt som påverkar mätningen efteråt. Alltid vidgas pupillen innan narkos och vänta minst 5 minuter. En droppe (ca 0,05 mL) av mydriatiska agent är tillräckligt för vidgar pupillen i ögat mus, medan mer agent kommer att göra någon skada till följande steg. - Placera musen under narkos. Tag tillbaka huden på musen för mjukt för att hålla musen från att krocka dess ögat tills det är helt nedsövd. Bedöma djupet av narkos att räcka om musen inte flytta när det sätts på bordet fritt.
Obs: En kombination av midazolam (40 μg/100 μL), Medetomidin (7,5 μg/100 μL) och butorfanol tartrat (50 μg/100 μL) används här för narkos för möss med en volym av 0,01 mL/g intraperitoneal injektion. I allmänhet behövs mindre än 5 minuter för möss att somna. Lång tid av narkos orsakar låg kroppstemperatur och långsamma hjärtslag. För att undvika potentiella påverkan av generell anestesi till mätningen, efterbehandling alla mätningar inom 10 min efter injektion av bedövningsmedel rekommenderas. Den butorfanol i narkos cocktail ge cirka 4 timmar av analgesi. Rätt recept för narkos kan olika institutioner. - Mäta refraktionen av mus ögat med en infraröd photorefractor4,9,14. Justera riktningen av en mus ögon att hålla den första Purkinje-bilden i mitten av eleven och mäta refraktionen längs den optiska axeln. Efter mätning, Mät motsatt ögat med samma förfaranden (figur 2a).
Obs: Det värde som uppmätts för refraktionen är starkt influerad av position mus ögat längs den optiska axeln. Säkerställa den första Purkinje-bilden justeras inom ±3 grader från centrum av eleven. Arbetsbänken spektrala domänen optisk koherens tomografi (SD-OCT) systemet kan användas för finjustering av riktningen av elev i refraktion mätningar4. - Mäta AL på möss med en SD-okt system4,15,16. Definiera AL som avståndet från hornhinnan vertex till ljusaste gränsen nära den optiska nerven (figur 2b).
Obs: Liknande med mätningen av refraktionen, AL är starkt influerad av riktningen av möss. Hornhinnans vertex kan bekräftas av point-liknande reflektion på ytan av hornhinnan. Gränsen av näthinnan sida kommer att vara mycket disig vid optisk nerv. Justera riktningen lite för att låta gränsen vara tillräckligt tydlig för att mäta men inte alltför långt från den optiska nerven.
3. fixering av ramen på mus kraniet.
- Applicera en droppe av 0,1% renat sodium hyaluronate ögondroppar att förhindra torrhet på varje öga.
Obs: Ögondroppar på ögats yta kommer att påverka värdena refraktion och axiell längd mätningar. Använd inte ögondroppar efter anestesi, tills alla mätningar görs. - Sätta hakan av sövda musen på en slänt av lera eller något kan användas som en kudde att göra upfront planet av kraniet vara horisontell.
- Sterilisera håret och hårbotten mellan öron och ögon med bomullspinne med 70% etanol.
- Skära huden mellan öron och ögon att exponera skallen för om 0,8 cm2 använda kirurgiska sax och pincett. Använda dental etsning vätska och bomull svabb ta bort periostet. Sterilisera den kirurgiska sax och pincett med 70% etanol innan operationen av varje mus.
Obs: Klippning håret och sterila handskar kan krävas. Kontrollera bestämmelserna i relevanta djurvård kommittén före den här proceduren. I de flesta fall, kan dental etsning vätskan hittas som en av de bifogade filerna i den själv bota dental limsystem. Om dental etsning vätskan inte är tillgänglig, ska du istället använda 70% etanol. - Montera en uppsättning med ramar utan lins för att fixa pinnen på rätt position. Sätta i ramar på mus huvudet. Noggrant justera positionen för ramarna så att båda ögonen är mitt i den tomma ramen.
- Använd en själv bota dental limsystem för att fästa pinnen på mus huvudet. Var noga med att inte låta vätskan Följ system flöde in i musen ögat.
Obs: Metoden själv bota dental självhäftande systemet skiljer mellan produkter. Se anvisningen noggrant.
Varning: Vissa av reagenserna i dental självhäftande systemet kan vara giftiga. - Vänta ca 5 min och ta bort ramen och muttern noggrant utan att ändra placeringen av pinnen (figur 3a).
- Injicera 0,75 mg/kg atipamezol hydroklorid intraperitonealt för att återhämtning från anestesi musen snabbare. Placera musen i en enskild bur tills återhämtat sig helt. Lämna inte musen utan uppsikt tills den har återfått tillräcklig medvetande för att upprätthålla sternala koordinationsrubbning. Protokollet kan pausas här.
4. inledande av myopi induktion och underhåll efteråt
- Vänta i minst 24 timmar efter operationen att låta musen helt återställda från anestesi. Greppa pinnen och sätta på ramarna med linser. Incitament börjar vid denna tidpunkt (figur 3b).
Obs: För att minimera obehag under återhämtning från anestesi och ge tillräckligt med tid för den tandvård limsystem koagulerar, det rekommenderas starkt att sätta på ramen efter mössen återhämtat sig helt från anestesi. Resincement av självhäftande systemet kommer att fullt ut täcka snittet i hårbotten. Därför behövs ingen specifik postoperativ behandling för att förhindra infektion och ameliorating postoperativa smärta. Direkt efter den första tiden av att sätta på ramen, möss blir över medvetna förekomsten av linsen och skrapa en lott. Brutto beteendet kommer tillbaka till det normala efter några timmar. Möss med linser kan hållas med samma densitet till normala möss. - Ta bort ramen och rengör linser och Nagel tips med bomullspinnar minst två gånger i veckan för att behålla genomskinligheten på linsen.
Obs: Det är inte nödvändigt att sätta musen under narkos för att ta bort och sätta på ramen. Ge ett stöd för mössen att sitta på, snarare än att låta dem hänga medan arbetar med dem skulle kunna minska lidande.- Om en tillfällig mätning är nödvändigt, sätta musen under narkos och mäta musen som tidigare beskrivits. Incitament kan fortsättas efter musen för att återhämta sig från anestesi.
- Städa buren minst två gånger i veckan.
Obs: Detta bidra till att upprätthålla lins klarhet. Att sätta ett nät mellan musen och bur botten till filtratet matresterna kan också vara till hjälp. - Övervaka kroppsvikt och brutto beteende. Jämför dem med samma ålder orörd möss under hela experimentell process.
Obs: Med undantag för vissa avlysningen beteenden finns ingen betydande förändring inklusive kroppsvikten mellan experiment möss med obehandlade möss.
Subscription Required. Please recommend JoVE to your librarian.
Representative Results
At först kontrollera om alla nödvändiga delar är beredda (figur 1a). Ett exempel på en bit av monterade glasögon visas i figur 1b. Med undantag för huvuddelen av ramarna och muttern är alla andra delar disponibla för varje mus. En uppsättning färdiga glasögon visas i figur 1 c. Ändra vinkeln mellan de två ramarna som passar musen med olika åldrar.
Ett exempel av refraktion mätningen visas i figur 2a. Detta är en mus öga induceras av en-30 D objektiv för 3 veckor start från p21. Observera att blicken skall vara kontrollerade nära 0 graders i både x- och y-axeln vilket innebär att musen ser rakt framför kamera9. Figur 2b visar ett exempel på en helheten synar bilden från ett SD-okt system trimmad för möss och definitionen av varje del av ögat. Allmänt, SD-okt system gåva faktiska uppmätta värdet direkt.
En bild av pinnen följs musen huvud visas i figur 3a. Gränsa av snittet bör vara minst 3 mm från ögat för att undvika att påverka funktionen av ögonlocket. Pinnen tänd mus huvudet fram till slutet av incitament och ger grunden för att fixa glasögon. Vidhäftningshållfasthet av dental självhäftande systemet är tänkt för att räcka för fixering av glasögon under hela experimentet ca 3 till 4 veckor. Montera glasögon som visas i figur 3b. Två bitar av glasögon bör vara ganska symmetrisk.
Ombudet resultaten visas i figur 4. I detta experiment, 0 D plano linser var fast framför vänster ögon som interna kontroller och -30 D linser var fast framför höger öga att inducera myopi (C57B6/J möss, förmånserbjudanden som startade från p21, n = 4). Brytningar och ALs mättes en gång i veckan efter början av incitament för tre veckor. -30 D jämfört med 0 D plano linser, och inducerade en stark närsynt förskjutning i både refraktion och AL. Ändringen av refraktion nått till toppen under den första veckan och bott platta för de följande två veckorna. Skillnaden mellan förändringen av närsynta ögon och kontroll ögon i AL var betydande från första veckan och blev större och större under de följande två veckorna.
Figur 1: utformningen av skalle-monterad glasögon. (en) alla delar som behövs för montering mus glasen. (b) ett exempel på ramen och spik tips för höger sida av ögat. (c) ett exempel på en uppsättning sammansatta glasögon. Justera den gemensamma delen för att ändra vinkeln på ramarna som passar för möss i olika åldrar. Denna siffra har ändrats från Jiang, X. et al4, tillgänglig under en Creative Commons Erkännande 4.0 internationell licens. http://creativecommons.org/licenses/by/4.0/. Klicka här för att se en större version av denna siffra.
Figur 2: exempel på bilder av mätningen av refraktion och AL. (en) en bild av refraktion mätningen för ett närsynt öga med en infraröd photorefractor. (b) en exempelbild av en AL mätning på möss med ett SD-okt system och definitionen av varje del av ögat bollen. Denna siffra har ändrats från Jiang, X. et al4, tillgänglig under en Creative Commons Erkännande 4.0 internationell licens. http://creativecommons.org/licenses/by/4.0/. Klicka här för att se en större version av denna siffra.
Figur 3: en bild av en mus efter operationen. (en) ett exempel på en mus efter operationen för att följa pinnen. (b) en mus med glasögon i båda sidor. Denna siffra har ändrats från Jiang, X. et al4, tillgänglig under en Creative Commons Erkännande 4.0 internationell licens. http://creativecommons.org/licenses/by/4.0/. Klicka här för att se en större version av denna siffra.
Figur 4: ombudet resultaten av en tre veckors uppföljning av myopi uppmuntran i fyra möss med-30 D linser och 0 D linser som internkontroll. (en) förändringar av brytningar i tre veckor. En plötslig förändring kan observeras en vecka efter incitament. (b) däremot förändringar i AL var relativt milda. Asterisk markerar visade de statistiska signifikans mellan ögonen bära 0 D och -30 D objektiv i varje vecka, respektive. p < 0,05, **p < 0,01. Student t-test. Klicka här för att se en större version av denna siffra.
Figur 5: rekommenderat flödesschema för att inducera närsynthet i möss. Flödesschemat visade här representerar ett möjligt mönster för att inducera närsynthet hos möss. Klicka här för att se en större version av denna siffra.
Subscription Required. Please recommend JoVE to your librarian.
Discussion
Kontrollera att glasögon ska fästas stabilt på mus huvudet genom behöver flera steg i detta protokoll ägnas stor uppmärksamhet. Periostet måste tas bort helt innan du använder den dentala limsystem. Blod på skallen behöver också städas upp med omsorg. Medan en liten finjustering är acceptabel direkt efter tillämpningen av limmet, flytta inte pinnen ofta innan självhäftande systemet torka upp. Följ anvisningen av självhäftande systemet noggrant, särskilt förhållandet mellan varje komponent i den slutliga blandningen. När greppa musen under upprätthållande av glasögon eller de uppföljande mätningarna efter operationen, inte greppa pinnen med kroppen av musen tillsammans. Den relativa rörelsen mellan skallen och stick är den vanligaste orsaken till att släppa ner av pinnen. Med ordentlig kirurgi och gripa skicklighet, skulle antalet individer som tappar ner pinnen vara mindre än en i en 3-veckors experiment inklusive 20 individer.
Hårstrån och matrester kan glida in intervallet mellan ögat och linsen. Detta kommer inte bara påverka insynen i linsen, men också potentiellt skada hornhinnan ytan fysiskt. För att hålla insyn i lins, minst två gånger rengöring är nödvändiga för varje vecka. Detta kommer också att ge mössen chansen att brudgummen ansiktet för att minska förekomsten av komplikationer till hornhinnan. Lämna ett utrymme för ca 1 mm mellan ramen och huden att låta musen för att blinka. Ramen kan göra det svårt för möss att nå maten utanför buren genom rutnätet ovan. Därför är det rekommenderat att sätta mat på golvet i buren direkt. Förändring buren in ren en för om två gånger i veckan hjälper också till att hålla linserna rena. Smutsiga linser blivit diffusorer inducerande närsynthet genom form-deprivation mekanism. Detta kan förvränga data och göra resultatet vara svåra att tolka eftersom bevisen visade att FDM och LIM är olika modellsystem i etiologi3.
På grund av den lilla storleken på möss tenderar de uppmätta öga parametrarna att vara instabil. Vi rekommenderar den infraröda photorefractor som utvecklats av Dr Schaeffel för det refraktion mätning9 och ett SDOCT system för AL4 (se Tabell för material). Båda systemen presentera tillräckligt med information för att bedöma tillförlitligheten hos det uppmätta värdet att säkerställa repeterbarheten av mätningen. För refraktion, som hävdade i tidigare rapporter, är det mycket viktigt att bibehålla den mätning på-axel4,14. Att hålla blicken kontroll inom ±3 grader kunde få stabila resultat. För att uppnå detta exakt mätning, kan röret av SDOCT systemet vara till hjälp när tweaking riktning på möss. För AL mätning, det reflekterade ljuset på hornhinnan vertex och ljusaste gränsen nära den optiska nerven är två pålitliga anatomiska märken som säkerställer repeterbarheten av denna mätning.
Protokollet beskrivs här inducerad betydande närsynta stater i möss inom en vecka. Även om mekanismen är fortfarande okänd, förändringen i refraktion och AL är inte nödvändigtvis parallella. Eftersom AL höll växer närsynta efter en vecka, vi rekommenderar mätning göras tre gånger totalt: före, en vecka och tre veckor efter incitament. En av de exempel flödesscheman för närsynthet induktion är visade i diagram 5. Baserat på föregående rapport4, starta från p21 och använda - 30 D linser rekommenderas för LIM. experiment senast för mer än 4 veckor kan ha hög förekomst av svår hornhinnan komplikationer som påverkar det uppmätta värdet och påskynda konsumtion av linser . Den vanligaste komplikationen är hornhinnan ärrbildning. Möss kan inte rengöra sina ansikten och ögonlocken bär ramen, vilket kan vara anledningen till komplikation.
Den enhet som beskrivs i detta protokoll kan tillämpas på möss direkt efter avvänjning (p21). Detta kan delvis bidra till den starka fenotypen observerade4. Ramen är flyttbara utan narkos. Detta tillåter inte bara forskaren att städa upp linserna enkelt, men också se den aktuella drog leverans möjligt4. En annan styrka är att linserna kan enkelt ändras till diffusorer eller linser med olika dioptrier (t.ex., plus linser), som utökar möjligheterna för denna metod. En begränsning med denna metod är att operationen behöver lite övning innan ramar kan följas stabilt för hela experimentet. Mätningarna måste också tålamod att samla in tillförlitliga uppgifter.
Möss är oersättliga djurmodell med dess möjlighet till genetisk manipulation och den låga kostnaden för avel. Vi hoppas att protokollet beskrivs här kunde göra den experimentella myopi hos möss en mer praktisk modell för närsynthet forskning.
Subscription Required. Please recommend JoVE to your librarian.
Disclosures
Utformningen av mus glasögon har tillämpats för ett patent (ansökan nr 201741349).
Acknowledgments
Vi tackar MT Pardue för råd om SDOCT, F. Schaeffel för råd om mätningar av refraktion och hornhinnans krökning, Mr Sanshouo för att återskapa den tredimensionella ramdata, M. Miyauchi; K. Tsubota; Y. Tanaka; S. Kondo; C. Shoda; M. Ibuki; Y. Miwa; Y. Hagiwara; A. Ishida; Y. Tomita; Y. Katada; E. Yotsukura; K. Takahashi; och Y. Wang för kritiska diskussioner. Detta arbete stöds av bidrag inAid för vetenskaplig forskning (KAKENHI, nummer 15K 10881) från ministeriet för utbildning, kultur, sport, vetenskap och teknik (MEXT) till TK. Detta arbete stöds också av bidraget för närsynthet forskning från Tsubota Laboratory, Inc. (Tokyo Japan).
Materials
| Name | Company | Catalog Number | Comments |
| screw | NBK | SNZS-M1.4-10 | |
| washer | MonotaRO | 42166397 | |
| nut | MonotaRO | 42214243 | |
| stick | DMM Make | none | designed by authers and output by the 3D printer rented from DMM Make. |
| frame | DMM Make | none | designed by authers and output by the 3D printer rented from DMM Make. |
| lenses | RAINBOW CONTACT LENS | none | customized for mice use by the company |
| cyanoacrylate glue | OK MODEL | MP 20g | |
| dental adhesive resin cement | SUN MEDICAL | super bond | contains the etching liquid used for removing the periosteum of the mouse skull |
| infrared photorefractor | Steinbeis Transfer Center | none | designed and offered by Dr. Frank Schaeffel from university of Tübingen |
| Spectral domain OCT | Leica | R4310 | |
| Tropicamide, Penylephrine Hydrochloride solution | Santen | Mydrin-P | |
| midazolam | Sandoz K.K. | SANDOZ | components for the anesthetic |
| medetomidine | Orion Corporation | Domitor | components for the anesthetic |
| butorphanol tartrate | Meiji Seika Pharma | Vetorphale | components for the anesthetic |
| 0.1 % purified sodium hyaluronate | Santen | Hyalein | |
| atipamezole hydrochloride | Zenoaq | antisedan |
References
- Dolgin, E. The myopia boom. Nature. 519 (7543), 276-278 (2015).
- Ohno-Matsui, K. Pathologic Myopia. Asia-Pacific Journal of Ophthalmology (Philadelphia, Pa). 5 (6), 415-423 (2016).
- Morgan, I. G., Ashby, R. S., Nickla, D. L. Form deprivation and lens-induced myopia: are they different. Ophthalmic & Physiological Optics. 33 (3), 355-361 (2013).
- Jiang, X., et al. A highly efficient murine model of experimental myopia. Scientific Reports. 8 (1), 2026 (2018).
- Torii, H., et al. Violet Light Exposure Can Be a Preventive Strategy Against Myopia Progression. EBioMedicine. 15, 210-219 (2017).
- Smith, E. L. 3rd, et al. Effects of Long-Wavelength Lighting on Refractive Development in Infant Rhesus Monkeys. Investigative Ophthalmology & Visual Science. 56 (11), 6490-6500 (2015).
- Gawne, T. J., Siegwart, J. T., Ward, A. H., Norton, T. T. The wavelength composition and temporal modulation of ambient lighting strongly affect refractive development in young tree shrews. Experimental Eye Research. 155, 75-84 (2017).
- Wu, Y., et al. Early quantitative profiling of differential retinal protein expression in lens-induced myopia in guinea pig using fluorescence difference two-dimensional gel electrophoresis. Molecular Medicine Reports. , (2018).
- Schaeffel, F., Burkhardt, E., Howland, H. C., Williams, R. W. Measurement of refractive state and deprivation myopia in two strains of mice. Optometry and Vision Science. 81 (2), 99-110 (2004).
- Tkatchenko, T. V., Shen, Y., Tkatchenko, A. V. Mouse experimental myopia has features of primate myopia. Investigative Ophthalmology & Visual Science. 51 (3), 1297-1303 (2010).
- Faulkner, A. E., Kim, M. K., Iuvone, P. M., Pardue, M. T. Head-mounted goggles for murine form deprivation myopia. Journal of Neuroscience Methods. 161 (1), 96-100 (2007).
- Gu, Y., et al. A Head-Mounted Spectacle Frame for the Study of Mouse Lens-Induced Myopia. Journal of Ophthalmology. 2016, 8497278 (2016).
- Siegwart, J. T. Jr, Norton, T. T. Goggles for controlling the visual environment of small animals. Laboratory Animal Science. 44 (3), 292-294 (1994).
- Tkatchenko, T. V., Tkatchenko, A. V. Ketamine-xylazine anesthesia causes hyperopic refractive shift in mice. Journal of Neuroscience Methods. 193 (1), 67-71 (2010).
- Chou, T. H., et al. Postnatal elongation of eye size in DBA/2J mice compared with C57BL/6J mice: in vivo analysis with whole-eye OCT. Investigative Ophthalmology & Visual Science. 52 (6), 3604-3612 (2011).
- Park, H., et al. Assessment of axial length measurements in mouse eyes. Optometry and Vision Science. 89 (3), 296-303 (2012).
