Waiting
Login processing...

Trial ends in Request Full Access Tell Your Colleague About Jove
JoVE Journal Chemistry
Click here for the English version

Chemistry

Synthese en karakterisering van amphiphilic goud nanodeeltjes

Published: July 2, 2019 doi: 10.3791/58872
Automatic Translation
*1, *1, 1, 1, 1, 1,2, 1,3
1Institute of Materials, École Polytechnique Fédérale de Lausanne, 2School of Materials, University of Manchester, 3Interfaculty Institute of Bioengineering, École Polytechnique Fédérale de Lausanne
* These authors contributed equally

Summary

Amphiphilic goud nanodeeltjes kunnen worden gebruikt in vele biologische toepassingen. Een protocol voor het synthetiseren van goud nanodeeltjes bedekt met een binair mengsel van liganden en een gedetailleerde karakterisering van deze deeltjes wordt gepresenteerd.

Abstract

Goud nanodeeltjes bedekt met een mengsel van 1-Octanethiol (OT) en 11-mercapto-1-Undecane sulfonic zuur (MUS) zijn uitvoerig bestudeerd vanwege hun interacties met celmembranen, lipide bilayers, en virussen. De hydrofiele liganden maken deze deeltjes colloïdaal stabiel in waterige oplossingen en de combinatie met hydrofobe liganden creëert een amphiphilic deeltje dat kan worden geladen met hydrofobe drugs, fuseren met de lipide membranen, en weerstaan niet-specifieke eiwit adsorptie. Veel van deze eigenschappen zijn afhankelijk van de deeltjesgrootte en de samenstelling van de ligand schelp. Het is dan ook van cruciaal belang om een reproduceerbare synthetische methode te hebben en de betrouwbaarheid van karakterisering technieken die de bepaling van nanodeeltjes eigenschappen en de ligand shell samenstelling mogelijk te maken. Hier wordt een chemische reductie van één fase, gevolgd door een grondige reiniging om deze nanodeeltjes met een diameter van minder dan 5 nm te synthetiseren, gepresenteerd. De verhouding tussen de twee liganden op het oppervlak van de nanodeeltjes kan worden afgestemd door hun stoichiometrische ratio gebruikt tijdens de synthese. We laten zien hoe verschillende routine technieken, zoals transmissie elektronenmicroscopie (TEM), nucleaire magnetische resonantie (NMR), thermogravimetric analyse (TGA), en ultraviolet-zichtbare (UV-VIS) spectrometrie, worden gecombineerd tot ruim de fysisch-chemische parameters van de nanodeeltjes te karakteriseren.

Introduction

De ligand schelp van goud nanodeeltjes kan worden ontworpen om verschillende eigenschappen die kunnen worden toegepast op de uitdagingen in de biogeneeskunde1,2,3,4vertonen. Deze veelzijdigheid zorgt voor de controle van de intermoleculaire interacties tussen nanodeeltjes en biomoleculen5,6,7. Hydrophobicity en charge spelen een doorslaggevende rol, evenals andere oppervlakte parameters die invloed hebben op hoe nanodeeltjes interageren met biomoleculen5,8,9. Om de oppervlakte-eigenschappen van de nanodeeltjes af te stemmen, biedt de keuze van natriumthiolaat moleculen die het ligand-reservoir uitmaken, een groot aantal mogelijkheden, volgens de gezochte eigenschappen. Bijvoorbeeld, wordt een mengsel van ligand molecules met hydrofobe en hydrofiele (b.v., geladen) eindgroepen vaak gebruikt om amphiphilic nanodeeltjes10,11te produceren.

Een prominent voorbeeld van dit type van nanodeeltjes wordt beschermd door een mengsel van OT en mus (hierna te noemen Mus: OT nanodeeltjes) dat is aangetoond dat veel relevante eigenschappen12,13,14bezitten. Eerste, met een ligand shell samenstelling van 66% MUS (hierna 66:34 MUS: OT), de colloïdale stabiliteit van de nanodeeltjes is hoog, het bereiken van tot 33% in gewicht in deioniseerde water, evenals in fosfaat-gebufferde zoutoplossing (1x, 4 mM fosfaat, 150 mM NaCl)15. Bovendien storten deze deeltjes niet bij relatief lage pH-waarden: bijvoorbeeld bij pH 2,3 en met zoutconcentraties van 1 M NaCl15, blijven deze nanodeeltjes gedurende maanden colloïdaal stabiel. De stoichiometrische verhouding tussen de twee moleculen op de ligand shell is belangrijk omdat het de colloïdale stabiliteit in oplossingen met een hoge Ionische sterkte16dicteert.

Deze deeltjes zijn getoond om het celmembraan te doorkruisen zonder het te porating, via een energie-onafhankelijke weg1,12. De spontane fusie tussen deze deeltjes en lipide bilayers ligt ten grondslag aan hun vluchtigheid door celmembranen17. Het mechanisme achter deze interactie is de minimalisering van contact tussen een hydrofobe oplosbaar-toegankelijke oppervlakte en water molecules op fusie met lipide bilayers18. Vergeleken met alle-MUS nanodeeltjes (nanodeeltjes met alleen de MUS ligand op hun schelp), de hogere hydrophobicity op gemengde MUS: OT nanodeeltjes (bijvoorbeeld, op een 66:34 MUS: OT samenstelling) verhoogt de spanwijdte van de kerndiameter die kan fuseren met lipide bilayers18. Verschillende zelf-assemblage organisaties van de ligand shell correleren met verschillende bindende modi van 66:34 MUS: OT nanodeeltjes met verschillende eiwitten, zoals albumine en ubiquitin, in vergelijking met alle-MUS deeltjes19. Onlangs is gemeld dat 66:34 MUS: OT nanodeeltjes kunnen worden gebruikt als een breed-spectrum antivirale middel dat onherroepelijk vernietigt de virussen als gevolg van multivalente elektrostatische bindingen van MUS liganden en niet-lokale koppelingen van OT liganden om capside proteïnen14. In al deze gevallen is gebleken dat de hydrofobe inhoud, evenals de kern grootte van de nanodeeltjes, bepaalt hoe deze bio-nano interacties plaatsvinden. Deze diverse eigenschappen van MUS: OT nanodeeltjes hebben gevraagd veel computersimulatie studies die gericht zijn op de mechanismen ter ondersteuning van de interacties tussen MUS: OT deeltjes en diverse biologische structuren zoals lipide bilayers20te verduidelijken.

De voorbereiding van MUS: OT-beschermde au nanodeeltjes vormt een paar uitdagingen. Ten eerste, de geladen ligand (MUS) en de hydrofobe ligand (OT) zijn onmengbare. Zo moet de oplosbaarheid van de nanodeeltjes en van de liganden rekening worden gehouden in de gehele synthese, evenals tijdens de karakterisering. Bovendien, de zuiverheid van de MUS ligand moleculen-in het bijzonder, de inhoud van anorganische zouten in het uitgangsmateriaal-invloeden van de kwaliteit, reproduceerbaarheid, evenals de korte en lange termijn colloïdale stabiliteit van de nanodeeltjes.

Hier, een gedetailleerde synthese en karakterisering van deze klasse van amphiphilic goud nanodeeltjes beschermd door een mengsel van MUS en OT worden geschetst. Een protocol voor de synthese van het negatief geladen MUS ligand wordt gerapporteerd om de zuiverheid en, vandaar, de reproduceerbaarheid van verschillende nanodeeltjes synthesen te verzekeren. Vervolgens wordt de procedure voor het genereren van deze nanodeeltjes, gebaseerd op een gemeenschappelijke synthese in één fase, gevolgd door een grondige reiniging, uitvoerig gerapporteerd. Diverse noodzakelijke karakterisering technieken21, zoals tem, UV-VIS, TGA, en NMR, zijn gecombineerd om alle noodzakelijke parameters voor verdere biologische experimenten te verkrijgen.

Subscription Required. Please recommend JoVE to your librarian.

Protocol

1. synthese van 11-mercapto-1-undecanesulfonate (MUS)

Opmerking: dit protocol kan op elke gewenste schaal worden gebruikt. Hier wordt een 10 g schaal-van-product beschreven.

  1. Natrium undec-10-enesulfonate
    1. Toevoegen 11-Bromo-1-undecene (25 mL, 111,975 mmol), natriumsulfiet (28,75 g, 227,92 mmol), en benzyltriethylammonium bromide (10 mg) tot een mengsel van 200 mL methanol (MeOH) en 450 mL van deioniseerde (DI) water (4:9 v/v MeOH: H2O-ratio) in een 1 L ronde-onderste kolf .
    2. Reflux het reactiemengsel bij 102 °C voor 48 h. cap het systeem met een drukhulp mechanisme-bijvoorbeeld, een ballon met een naald, of gewoon een naald. Deze reactie is niet gevoelig voor atmosferische gassen.
      Opmerking: de oplossing wordt kleurloos wanneer de reactie is voltooid.
    3. Verbind het reactiemengsel met een roterende verdamper om MeOH te verdampen en verlaag het volume tot ongeveer 300 mL.
    4. Overzetten van de resterende oplossing naar een 1 L toevoeging trechter.
    5. Haal de resterende waterige oplossing 5x met diethyl ether, met behulp van de toevoeging trechter. Ongereageerd 11-Bromo-1-undecene blijft in de diethyl ether fase en het gesulfoneerde product in H2O.
      Let op: laat elke drukopbouw vaak tijdens de extractie, en Raadpleeg het juiste gebruik van de toevoeging trechters.
    6. Verzamel de uiteindelijke geëxtraheerde water oplossing in een 1 L single-hals ronde-onderste kolf.
    7. Sluit de reactiekolf aan op een roterende verdamper door een beetje vet (of teflon ring stroken of een andere Kit) tussen de kolf en de val te zetten.
    8. Verminder het vacuüm langzaam om de waterige fase in een roterende verdamper te verdampen. Omdat het product een oppervlakteactieve stof is, zal schuimvorming optreden tijdens de verdamping. Om dit probleem te omzeilen, volg de instructies in de volgende stap.
      1. Voeg ethanol toe aan het mengsel om de verdamping van H2O te versnellen en schuimvorming te voorkomen. Wanneer het schuimen opnieuw wordt opgestart vanwege de afname van het ethanol gehalte, stop dan de verdamping, verwijder de kolf uit de roterende verdamper, voeg meer ethanol toe (ongeveer een derde van het totale volume) en sluit de kolf opnieuw aan op de roterende verdamper. Herhaal dit proces totdat de oplossing mengsel aanzienlijk afneemt en vormt geen bubbels.
    9. Droog het witte poeder direct door de kolf aan te sluiten op een hoog vacuüm. De drogere het poeder, zal de minder anorganische zouten kruipen in de daaropvolgende stappen.
      Opmerking: warmte kan worden gebruikt om het product te drogen, bijvoorbeeld door de kolf onder vacuüm te houden in een bad van 60 °C en 's nachts te verlaten.
    10. Suspendeer het witte poeder in 400 mL methanol in een kolf. Bewerk om de maximale hoeveelheid van het product te ontbinden.
      Opmerking: het doel van deze stap is om het product te ontbinden, maar niet de anorganische bijproducten, zoals overtollige natriumsulfiet en natriumbromide, die een beperkte oplosbaarheid in methanol hebben. Gebruik methanol met het laagste watergehalte mogelijk, omdat het water in de methanol zal de oplosbaarheid van de anorganische bijproducten in het oplosmiddel te verhogen.
    11. Om de oplosbaarheid van het product te verhogen, kan de methanol dicht bij zijn kookpunt (~ 64 °C) zacht worden verwarmd.
      Let op: Zorg ervoor dat u tijdens het verwarmen van de kolf onder een rook kap werkt. De rook van de verdampte methanol is gevaarlijk.
    12. Filter de oplossing om de methanol onoplosbare anorganische bijproducten te verwijderen. Gebruik een filter kolf aangesloten op een vacuümpomp en een filter trechter met kwantitatief filterpapier, of een borosilicaatglas filter. Zowel het product als de anorganische zouten zijn wit poeder wanneer het droog is: het product is oplosbaar in methanol, terwijl de zouten niet zijn.
    13. Breng de gefilterde oplossing van de filter kolf over naar een kolf van 1 L.
    14. Verbind de kolf met een roterende verdamper en verdamp de methanol oplossing bij 45 °C, los het witte poeder in methanol en filtreer de oplossing (protocol stappen 1.1.7, 1.1.8 en 1.1.9). Herhaal dit proces ten minste 2x, om de hoeveelheid anorganische zout te verminderen.
    15. Verzamel de witte, methanol oplosbare poeder (ongeveer 30 g, op deze schaal).
    16. Los ongeveer 10 mg product op in 500 µ L van D2O en breng de oplossing over naar een NMR-buis.
    17. Voer 1H NMR-spectrometrie uit op het product in D2O bij 400 MHz met 32 scans.
      Opmerking: de piek opdrachten voor 1H NMR (D2O) zijn 5,97 (m, 1h), 5,09 (m, 2H), 2,95 (t, 2H), 2,10 (m, 2H), 1,77 (q, 2H), 1,44 (BR s, 12u).
  2. Natrium 11-acetylthio-undecanesulfonate
    1. Los de geschatte 30 g natrium undec-10-enesulfonate (het reactieproduct van punt 1,1) op in 500 mL methanol in een kolf van 1 L rond de bodem. Voeg een 2,6 x overmaat van thioacetic zuur aan de oplossing en roer het in de voorkant van een UV-lamp (250 W) 's nachts (~ 12 h). In het geval dat een UV-lamp niet beschikbaar is, kan de reactie worden uitgevoerd door het terugvloeien met behulp van een radicale initiator, zoals azobisisobutyronitrile (AIBN); echter, het gebruik van een UV-lamp wordt sterk aanbevolen.
      Let op: Zorg ervoor dat u te allen tijde onder de rook kap werkt. Als de kolf moet worden vervoerd naar een andere ruimte waar de UV-lamp is gelegen, sluit de kolf om te voorkomen dat het verspreiden van de sterke geur van thioacetic zuur. De zorg van de oefening wanneer het werken van een UV lamp: volledig Blokkeer de ruimte waar de lamp wordt gevestigd en Raadpleeg de de veiligheidsrichtlijnen van de instelling op hoe te om een UV lamp in werking te stellen.
    2. Bewaken van de reactie door het nemen van ~ 2 mL hoeveelheid van de reactie, verdampen oplosmiddel, en voeg deuterated water om te controleren met 1H NMR. Zodra de pieken die overeenkomen met de dubbele binding verdwijnen, stop de reactie.
      Let op: meestal, na 12 uur voor de UV-lamp, de reactie is voltooid. Als de reactiemengsel wordt troebel, voeg meer MeOH en blijven de blootstelling aan het UV-licht voor zes extra uren.
    3. Verdampt alle MeOH in een roterende verdamper tot het vaste residu oranje-rood wordt. Indien lang genoeg, wordt het product bruin tot zwart.
      Let op: werk bewust vanwege de sterke geuren van de thioacetic zuur. De sterke geuren van een natriumthiolaat morsen kan worden geneutraliseerd met behulp van een waterige oplossing van bleekmiddel (natrium hypochloriet).
    4. Met behulp van een filtreerkolf, was het product met diethyl ether om overtollige thioacetic zuur te verwijderen, totdat er geen meer gekleurde (oranje-gele) stoffen verschijnen in de diethyl ether bovendrijvende. Droog de vaste stof onder hoog vacuüm en, dan, los het op in methanol, waardoor een geel tot oranje oplossing.
      Opmerking: Voeg genoeg methanol om het product te ontbinden.
      Opmerking: de kleur kan variëren bij deze stap.
    5. Voeg 3 g Carbon zwart aan de oplossing, meng krachtig, en filtreer het mengsel door middel van filtratie medium (Zie tabel van materialen) die tweederde van een gegroefde filtreerpapier.
      Opmerking: de poreuze structuur van Carbon Black vangt de gekleurde kant-product materiaal (en een deel van het product). De gefilterde oplossing moet duidelijk zijn. Als de gefilterde oplossing nog steeds is gekleurd (geel), herhaalt u dit proces.
    6. Verdamp het oplosmiddel volledig in een roterende verdamper en verzamel ongeveer 35 g wit poeder.
    7. Los ~ 10 mg van het product op in ~ 500 µ L van D2O en breng de oplossing over naar NMR-buizen.
    8. Voer 1H NMR uit op het product in D2O bij 400 MHz met 32 scans.
      Opmerking: de piek opdrachten voor de H NMR (D2O) zijn 2,93 (t, 4h), 2,40 (s, 3H), 1,77 (m, 2H), 1,62 (m, 2H), 1,45 (BR s, 14u).
  3. 11-mercapto-1-undecanesulfonate (mus)
    1. Reflux natrium 11-acetylthio-undecanesulfonate bij 102 °C in 400 mL van 1 M HCl voor 12 h te splitsen de thioacetate groep en het verkrijgen van een thiol.
    2. Breng het product over naar een 1,5 L of 2 L ronde-bodem kolf. Voeg 200 mL van 1 M NaOH toe aan de uiteindelijke oplossing en top met 400 mL DI water om een eindvolume van 1 L te hebben. Dit zorgt ervoor dat de oplossing zuur en voorkomen dat de kristallisatie van anorganische zouten als bijproduct.
      Nota: een volledige neutralisatie van de oplossing aan pH 7 zal in de kristallisatie van een product onoplosbaar in methanol resulteren.
    3. Houd de duidelijke oplossing bij 4 °C en het zal 's nachts kristalliseren. Het product kristalliseren als fijne kristallen die kleverig zijn als het nat is.
      Nota: om de kristallisatie te versnellen, voeg voorgesynthetiseerde MUS aan de oplossing toe, indien beschikbaar.
    4. Decanteer de Clear bovendrijvende en Centrifugeer het viskeuze witte product in 50 mL centrifuge tubes gedurende 5 min bij 4.000 x g.
    5. Decanteer de bovendrijvende in een andere kolf en droog de witte pellets onder hoog vacuüm-afhankelijk van de beschikbare centrifuge, dit kan worden 2-16 buizen of meer.
      Opmerking: het filteren wordt niet geadviseerd vanwege het oppervlakteactieve karakter van het product; overmatige schuimvorming zal optreden en het grootste deel van het product zal verloren gaan.
    6. Verzamel ongeveer 12 g (ongeveer 30% opbrengst) van methanol-oplosbare MUS van deze reinigingsstap.
      Opmerking: Wees ervan bewust dat het poeder is prima en elektrostatische-het heeft de neiging vast te houden aan spatels en de oppervlakken van containers. Ook kan meer materiaal worden geëxtraheerd uit de bovendrijvende van de centrifugeren stap door het verminderen van het volume (tot ongeveer een derde van de oorspronkelijke waarde) en het houden van het op 4 ° c. Daling van het volume nog meer (met 75%) om de opbrengst bij deze stap te verhogen.
    7. Los ~ 10 mg van het product op in ~ 500 µ L van D2O en breng de oplossing over naar NMR-buizen.
    8. Voer 1H NMR uit op het product in D2O bij 400 MHz met 32 scans.
      Opmerking: de piek opdrachten van H NMR (D2O) zijn 2,93 (t, 4h), 2,59 (t, 3H), 1,78 (m, 2H), 1,65 (m, 2H), 1,44 (BR s, 14u). De berekende Kies massa (met inbegrip van de natrium teller) van het product is 290,42 g/mol.

2. nanodeeltjes synthese: voorbereiding van de reagentia

  1. Reinig alle glaswerk (1 250 mL en 1 500 mL single-hals ronde-onderste kolf, een 100 mL toevoeging trechter, en een kleine trechter) met verse Aqua Regia (drie delen zoutzuur aan een deel salpeterzuur). Spoel het glaswerk met een overtollige hoeveelheid water in een rook kap en verwijder alle dampen. Dan, spoel het glaswerk met ethanol en droog het in een laboratorium glaswerk oven (40-60 °C wordt aanbevolen).
  2. Weeg 177,2 mg (0,45 mmol) van goud (III) chloride Trihydraat (HAuCl4∙ 3H2O) in een kleine glazen flacon (10 of 20 ml schone glazen flacons, of op weeg papier).
  3. Weeg 87 mg (0,3 mmol) MUS in een glazen flacon van 20 mL.
  4. Voeg 10 mL methanol toe om de MUS. Bewerk het in een ultrasoon bad te ontbinden tot er geen vast materiaal zichtbaar is, om volledige ontbinding te garanderen.
    Opmerking: als alternatief, met behulp van een warmte pistool of een warm bad (~ 60 ° c), Verwarm de oplossing zachtjes. Wanneer verwarmd, lopen koud water door de buitenkant van de kolf om het terug te brengen naar kamertemperatuur.
  5. Voeg 26 µ L (0,15 mmol) van OT aan de methanol oplossing toe en schud het om de liganden te mengen.
  6. Weeg 500 mg (13 mmol) natriumboorhydride (Nicky4) en voeg deze toe aan 100 ml ethanol in de kolf van de 250 ml ronde bodem. Roer krachtig met behulp van magnetische roeren (600-800 rpm). (De Nicky4 duurt 10 tot 20 min, afhankelijk van de rang, om een duidelijke oplossing in ethanol te vormen.)

3. synthese van goud nanodeeltjes

  1. Los goud zout op in 100 mL ethanol in de kolf van 500 mL rond de bodem en begin met het roeren bij 800 rpm met een magneet balk op een roer plaat. Zorg ervoor dat het goud zout oplost volledig.
  2. Plaats een 100 mL toevoeging trechter boven de rond-onderste kolf. Zet een trechter op de top van de toevoeging trechter met een kwantitatieve papieren filter binnen. Wanneer de Nicky4 is opgelost in ethanol, start het filteren van de oplossing in de toevoeging trechter door het filterpapier in de trechter.
  3. Voeg de ligand oplossing toe aan het reactiemengsel. Wacht 15 min voor de vorming van goud-natriumthiolaat complex. De kleurverandering van het reactiemengsel van doorschijnend geel aan troebel geel wijst op de vorming van gouden-natriumthiolaat complex.
  4. Start het toevoegen van de gefilterde Nicky4 -oplossing uit de toevoeging trechter dropwise. Pas de intervaltijd van de druppels, zodat de toevoeging van Nicky4 duurt ongeveer 1 uur.
  5. Na de volledige toevoeging van Nicky4, verwijder de trechter. Blijf roeren de reactie voor een ander uur. Verwijder aan het einde van de reactie de magneet roerstaaf met behulp van een magneet aan de buitenkant van de kolf.
  6. Gebruik een septum om de kolf te sluiten en een naald doorboren in het septum om de H2 gas dat zal evolueren na de reactie vrij te geven.
  7. Houd het reactiemengsel in een laboratorium koelkast (4 °C) om de nanodeeltjes 's nachts neer te storten.

4. Workup van de synthese

  1. Decanteer de bovendrijvende ethanol om het volume te verminderen.
  2. Breng de resterende precipitant over naar 50 mL centrifuge tubes en Centrifugeer gedurende 3 min bij 4.000 x g.
  3. Decanteer de bovendrijvende, verspreiden de nanodeeltjes opnieuw met ethanol door vortexen, en centrifugeer ze weer. Herhaal dit wassen proces 4x.
  4. Droog de nanodeeltjes onder vacuüm om de resterende ethanol te verwijderen.
  5. Voor het reinigen van de nanodeeltjes uit vrije hydrofiele liganden/moleculen, Los de precipitaten in 15 mL DI water en breng ze naar de centrifuge buizen met een filtratie membraan van 30 kDa cutoff molecuulgewicht. Dialyse is ook vatbaar voor deze procedure.
  6. Centrifugeer deze buizen voor 5 min bij 4.000 x g om de nano partikel oplossing te concentreren.
  7. Voeg 15 mL DI water toe aan deze oplossing en centrifugeer om zich opnieuw te concentreren. Herhaal dit reinigingsproces ten minste 10x.
    Nota: één aanwijzing dat de in water oplosbare onzuiverheden zijn verwijderd is de afwezigheid van het schuimen wanneer het ageren van het waterige afval; immers, de meeste van de onzuiverheden zijn disulfides van MUS met zichzelf of met OT (dit kan worden bepaald door het verzamelen van het materiaal en het uitvoeren van 1H NMR).
  8. Breng na de centrifuge de geconcentreerde nanodeeltjes over naar een centrifugebuis van 15 mL. Om de nanodeeltjes om te zetten in een beheersbaar poeder, ofwel neerstorten in een oplosmiddel zoals aceton of Freeze-droog de resterende waterige oplossing. Bij Freeze-gedroogd, de nanodeeltjes de neiging om een losse poeder dat kleeft aan oppervlakken en kan moeilijk te manipuleren vormen.

5. karakterisering van de nanodeeltjes

  1. Zuiverheid
    1. Om te controleren of de nanodeeltjes vrij zijn van ongebonden liganden, los 5 mg droge nanodeeltjes op in 600 µ L van D2O en voer een 1H NMR-meting van de deeltjes uit. Als er geen scherpe pieken van de liganden, betekent dit dat de nanodeeltjes vrij zijn van kleine organische moleculen.
  2. Ligand verhouding
    1. Bereid een 20 mg/mL methanol-d4 oplossing van jodium. Voeg 600 µ L van deze oplossing toe aan de ~ 5 mg nanodeeltjes in een glazen flacon, om de nanodeeltjes te etsen.
    2. Wikkel de dop van de flacon met paraffine folie en bewerk het in een ultrasoon bad voor 20 min. Breng de oplossing over naar een NMR-buis en Verwerf een 1H nmr (400 MHz) spectrum met 32 scans.
  3. Ligand dichtheid
    1. Breng 2 tot 8 mg nanodeeltjes over naar een TGA-Kroes. Kies een temperatuurbereik van 30 °C tot 900 °C en een snelheid van 5 °C per minuut onder N2 gas.
  4. Groottedistributie
    1. Tem
      1. Bereid 0,1 mg/mL nano partikel oplossing in DI water. Zet 5 µ L van de voor bereide oplossing op het 400-mesh Carbon-supported Copper grid. Wacht tot het droogt.
      2. Breng het rooster in een TEM houder en plaats deze in de Microscoop. Verwerven 5-10 beelden met een vergroting van ten minste 64 x, geëxploiteerd op 200 kV.
        Opmerking: om het contrast te verhogen, kan een objectief diafragma van 20 nm worden ingevoegd.
    2. UV-VIS spectra
      1. Bereid een 0,2 mg/mL nano partikel oplossing in DI water.
      2. Zet de benodigde hoeveelheid van deze oplossing in de Quartz cuvette en scan van 200 nm tot 700 nm.

Subscription Required. Please recommend JoVE to your librarian.

Representative Results

De reactiestappen om MUS te synthetiseren zijn weergegeven in Figuur 1. De 1H NMR spectra van het product van elke stap zijn vertegenwoordigd in Figuur 2. De synthese workflow van de binaire MUS: OT amphiphilic goud nanodeeltjes is beschreven in Figuur 3. Na de synthese bestond de Workup van de nanodeeltjes uit het wassen van de deeltjes meerdere malen met ethanol en DI water. Voorafgaand aan een karakterisering van nanodeeltjes, werd de reinheid van de nanodeeltjes van ongebonden vrije liganden gecontroleerd door 1H NMR in D2O, zoals weergegeven in Figuur 4. De grootte verdeling van de nanodeeltjes werd gekenmerkt door TEM (figuur 5a, b). Gelokaliseerde oppervlakte Plasmon resonantie absorptie werd gemeten door het verwerven van UV-VIS spectra (figuur 5c).

De verhouding van de twee liganden werd bepaald door het etsen van de gouden kern met jodium, het verwerven van de 1H NMR, en het berekenen van de relatieve hoeveelheden van elk ligand met behulp van de geïntegreerde waarden. Figuur 6 toont de representatieve Spectra en de procedure van NMR Peak opdrachten. Om de ligand verhouding tussen MUS en OT te vinden, berekenden wij de integralen van de pieken tussen 0,8-1 (I1), 1,12-1,55 (i2), 1,6-1,9 (i3), en 2,6-3 (i4) ppm. De I1 Peak bevat het signaal van drie OT waterstof, de i2 piek van een combinatie van 14 Mus waterstof en 10 OT waterstof, en de i3 en i4 pieken van vier Mus waterstof en twee OT waterstof (voor elke piek). Daarom, om het OT percentage te vinden, is het noodzakelijk om I1 tot 3 te normaliseren en de volgende uitdrukkingen toe te passen.

Voor I2,
Equation 1

Voor I3 en i4,
Equation 2

Deze berekeningen geven de verhouding van OT aan MUS, ervan uitgaande dat er een willekeurige eenheid van OT in het systeem. Voor Figuur 6b, gaven de drie integralen gelijkaardige waarden voor OT percentage (d.w.z., 15,3, 15,9, en 15,9 van i2, i3, en i4, respectievelijk).

De oppervlakte-dekking van de nanodeeltjes wordt door TGA onderzocht, zoals weergegeven in Figuur 7. TGA, NMR, en TEM gegevens (Figuur 3) worden gecombineerd om de ligand dichtheid, dat is het aantal liganden op een eenheid van oppervlakte, de aanpassing van de deeltjes tot een bol te berekenen. (Deze berekening gaat ervan uit dat na kookt als NaHSO3.) TEM gegevens blijkt dat de gemiddelde diameter van de nanodeeltjes is 2,4 nm, wijzend naar ongeveer 18,08 nm2 (eenpar= 4PR2) van de oppervlakte (eenpar) en 7,23 nm3 (Vpar= 4PR 3/3) van het volume per deeltje (Vpar). De dichtheid van goud is 19,9 g/cm3 en de massa van een deeltje is 1,3969 x 10-16 mg (massadeeltje = Vpar x de dichtheid van goud = 7,23 nm3 x 19,9 g/cm3 x 10-18 mm3/nm3). De resterende massa rond 800 °c beantwoordt aan de gouden kern, en er zijn ongeveer 3,7 x 1016 deeltjes (npari) die worden geschat gebruikend npari = (massagoud/massa deeltje) = 5,17 mg/1,3969 x 10-16 mg. De totale oppervlakte (atot) van de deeltjes is 6,69 x 1017 nm2 (a tot = Nparx Apar= 3,69 x 1016 x 18,08 nm2). De NMR van jodium-geëtste nanodeeltjes toonde aan dat de MUS: OT ratio is 85:15 en de hoeveelheid organische inhoud in TGA is 0,00146 g. Daarom zijn er 3,26 x 1018 liganden (nligand) naar aanleiding van de formule van nligand= [massabiologisch /((rOT x MwOT) + (rMus x MwMus))/(rMus + rOT)] x NAvogadro= [0,00146 g/((15 x 146 g/mol) + (85 x 267,42 g/mol))/(85 + 15] x (6,02 x 1023) = 3,26 x 1018 . Ten slotte is de ligand dichtheid is 4,8 liganden/nm2, berekend door het delen van de N-ligand door atot (4,8 = 3,26 x 1018/6,69 x 1017 nm2). De stoichiometrische ratio's versus de NMR verhoudingen van de OT, als gevolg van verschillende syntheses, worden vergeleken in Figuur 8.

Figure 1
Figuur 1: schematische van de mus synthese. MUS synthese is het belangrijkste punt voor de reproduceerbaarheid van amphiphilic nanodeeltjes synthese. Als MUS een hoog zoutgehalte heeft, kan de stoichiometrische verhouding van de liganden afwijken. X = 9. Klik hier om een grotere versie van dit cijfer te bekijken.

Figure 2
Figuur 2: NMR spectra van de moleculen na elke stap in de mus synthese (400 MHz). (A) dit paneel toont het 1h NMR-spectrum van natrium undec-10-enesulfonate in d2o. (B) dit paneel toont het 1h NMR-spectrum van natrium 11-acetylthio-undecanesulfonate in d2o. (C) dit paneel toont het 1H NMR-spectrum van 11-mercapto-1-Undecanesulfonate in D2O. In alle spectra, * geeft de oplosmiddel pieken. Klik hier om een grotere versie van dit cijfer te bekijken.

Figure 3
Figuur 3: schematische van de amphiphilic nanodeeltjes synthese. (A) dit panel toont de voorbereiding van de One-Phase chemische reductie reactie met ethanol als oplosmiddel. (B) Gold-natriumthiolaat complex is toegestaan om te vormen voor de toevoeging van een verminderende agent. In dit stadium, de oplossing van goud zout werd troebel. (C) tijdens de dropwise toevoeging van de reductiemiddel worden goud nanodeeltjes gevormd. Klik hier om een grotere versie van dit cijfer te bekijken.

Figure 4
Figuur 4: reinheid van de nanodeeltjes van ongereageerde vrije liganden. (A) dit paneel toont het 1H NMR-spectrum van de nanodeeltjes direct na de synthese en het vacuüm drogen. D2O wordt gebruikt als oplosmiddel voor de 1H NMR-analyse. De scherpe pieken die door rode pijlen worden getoond wijzen op het bestaan van vrije ongebonden ligands. (B) dit paneel toont het 1H NMR-spectrum van de nanodeeltjes na een grondige reiniging (d.w.z., wast en centrifugeren met ethanol en di water). De rode pijl wijst aan het vergrote deel van het spectrum, waarin de pieken breed zijn, niet scherp zoals alvorens de afwezigheid van vrije ligands aan te wijzen. In beide spectra, * geeft de oplosmiddel pieken. Klik hier om een grotere versie van dit cijfer te bekijken.

Figure 5
Figuur 5: grootte verdeling van nanodeeltjes. (A) dit paneel toont een representatief tem beeld van mus: OT nanodeeltjes. De schaalbalk is 20 Nm. (B) dit paneel toont een histogram van de kern grootte van nanodeeltjes op basis van verschillende tem-beelden. (C) UV-VIS spectra van de nanodeeltjes toonde het karakteristieke oppervlak Plasmon resonantie piek van de nanodeeltjes op ongeveer 520 nm. Klik hier om een grotere versie van dit cijfer te bekijken.

Figure 6
Figuur 6: ligand ratio berekening. (A) dit paneel toont representatieve NMR spectra van combinaties van disulfides (als referenties voor liganden na core ETS) en piek opdrachten voor verschillende protonen in MeOD-D4. (B) dit paneel toont 1H NMR spectra van geëtste nanodeeltjes in MeOD-D4. In alle spectra, * geeft de oplosmiddel pieken. Klik hier om een grotere versie van dit cijfer te bekijken.

Figure 7
Figuur 7: analyse van de ligand dichtheid. Een TGA meting van de nanodeeltjes werd gedaan om de verhouding en de dichtheid van organisch materiaal (liganden) te bepalen. De grafiek van de metingen wordt uitgezet als het gewichtspercentage versus de temperatuur. OT desorbs eerst, tussen 176 °C aan 233 °C (verticale lijnen). MUS degradeert naar kleinere moleculen en is volledig verbrand op ongeveer 800 ° c. Het resterende gewichtspercentage komt overeen met de goud kern van de nanodeeltjes. Klik hier om een grotere versie van dit cijfer te bekijken.

Figure 8
Figuur 8: vergelijking van stoichiometrische en NMR verhoudingen van OT op de deeltjes. Het is mogelijk om de amphiphilicity van de nanodeeltjes af te stemmen door de begin stoichiometrische verhouding tussen MUS en OT in de reactie te veranderen. De foutbalken tonen de bovenste en onderste limiet van de OT-inhoud verworven met behulp van de aangegeven stoichiometrische ratio's. Stoichiometrische ratio's van 10%, 20%, enz., tot 90% OT, werden gesynthetiseerd om de grenzen van OT inhoud te observeren op de nanodeeltjes oppervlakken. Klik hier om een grotere versie van dit cijfer te bekijken.

Subscription Required. Please recommend JoVE to your librarian.

Discussion

Dit protocol beschrijft eerst de synthese van MUS ligand en vervolgens de synthese en karakterisering van amphiphilic MUS: OT goud nanodeeltjes. Synthetiseren van MUS met minimale zoutgehalte maakt een betere betrouwbaarheid van de stoichiometrische verhouding tussen de liganden tijdens de nanodeeltjes synthese, dat is een belangrijke factor voor de reproduceerbare synthese van MUS: OT nanodeeltjes met een doel hydrofobe inhoud (Figuur 8). Het gebruik van methanol als een gemeenschappelijk oplosmiddel voor MUS en OT, samen met de synthese van de deeltjes in ethanol, zorgt voor een betrouwbare synthese van MUS: OT goud nanodeeltjes. De methoden van karakterisering hier gepresenteerd vormen een minimale lijst van experimenten die nodig zijn om voldoende informatie over de nanodeeltjes te verwerven om de uitkomst van hun synthese te verifiëren.

Er zijn vier kritieke stappen in dit Protocol: (i) de synthese van MUS met een laag zoutgehalte samen met het verwijderen van gekleurde onzuiverheden in de tweede stap en een kristallisatie van zuivere MUS in het einde; (II) het afstemmen en bepalen van de stoichiometrische verhouding tussen MUS en OT; III de Workup van de nanodeeltjes; en (IV) de karakterisering van de nanodeeltjes.

Tijdens de vorming van nanodeeltjes, MUS bij voorkeur bindt aan de nanodeeltjes oppervlakken, die kunnen worden gerelateerd aan de oplosbaarheid van de resulterende nanodeeltjes. Bijvoorbeeld, een 2:1 stoichiometrische feed ratio tussen MUS en OT resulteert in 15% van de OT op het oppervlak wanneer berekend met behulp van de gegevens van de 1H NMR van geëtste goud nanodeeltjes. Daarom moet een hoger gehalte aan OT worden gebruikt tijdens de synthese van de deeltjes (Figuur 8) om een nano partikel te verkrijgen met een lagere Mus naar OT ratio; met andere woorden, een meer hydrofobe deeltje. Om de stoichiometrische verhouding tussen de liganden op het oppervlak van de nanodeeltjes te kunnen beoordelen, is het noodzakelijk ervoor te zorgen dat er geen ongebonden liganden in de oplossing zijn. De aanwezigheid van ongebonden liganden beïnvloedt de bepaling van de ligand verhouding op de nanodeeltjes en de dichtheid, samen met daaropvolgende tests en experimenten die kunnen leiden tot onjuiste interpretaties. Repetitieve reinigingscycli met verschillende oplosmiddelen (zoals ethanol en DI water) zijn nodig om alle niet-afhankelijke liganden en andere onzuiverheden (bijproducten van natriumboorhydride, goud ionen, enz.) te elimineren. 1 H NMR is belangrijk om de zuiverheid van de nanodeeltjes te bevestigen. De lijn-verbreding effect van liganden als gevolg van de complexe chemische omgeving op de nanodeeltjes verbreden de pieken die overeenkomt met de liganden, terwijl een scherp signaal komt uit niet-afhankelijke moleculen22. Bovendien kunnen, wegens beperkte mobiliteit, de NMR-pieken die overeenkomen met de methyleen grenzend aan de thiol groepen niet worden opgespoord, wat een andere handtekening is van de nanodeeltjes bij inspectie met 1H NMR. Zodra de nanodeeltjes schoon zijn, dan is de metalen kern is geëtst met jodium. Jodium etsen is een gerenommeerde methode om de ligand verhouding op nanodeeltjes te kwantificeren. Bijvoorbeeld, twee decennia geleden, Murray et al. gemeld de bepaling van monolayer samenstelling op goud nanodeeltjes na jodium etsen, waarin de jodium ontleedt de gouden kern en releases de natriumthiolaat liganden als disulfides23. De betrouwbaarheid van de jodium ETS methode is vastgesteld met behulp van andere methoden; bijvoorbeeld, Harkity et al. gemeld dat de ligand ratio verkregen uit NMR is binnen 1% afwijking van de massaspectroscopie metingen24.

TGA is een eenvoudige methode om de organische inhoud op de nanodeeltjes te berekenen. De schatting van de oppervlakte ligand dichtheid veronderstelt dat alle natriumthiolaat liganden aan oppervlakte gouden atomen binden en alle vrije ligands tijdens reiniging zijn verwijderd. Om de ligand dichtheid te bepalen, worden verscheidene veronderstellingen gemaakt, hoofdzakelijk dat de deeltjes sferisch zijn, die wordt gebruikt om de oppervlakte, evenals de verpakkingsdichtheid, van de gouden kern te berekenen. TEM biedt een grootte verdeling van de nanodeeltjes goud kernen die kunnen worden gebruikt om de geschatte oppervlakte van een nano partikel te berekenen. De nanodeeltjes synthese hier beschreven produceert een polydispersie populatie van deeltjes met een gemiddelde diameter van 2-3 nm en een grootte afwijking van maximaal 30%. Ook de gemiddelde straal, gebruikt om het gemiddelde volume van een deeltje (de onderlinge aanpassing van de deeltjes aan bollen) te berekenen, in combinatie met de dichtheid van goud, maakt de berekening van de massa van een nano partikel. Dan, de massa gemeten door TGA meer dan 800 °C maakt de berekening van het aantal deeltjes in eerste instantie aanwezig. Door deze waarde en de gemiddelde kern grootte te gebruiken, kan de totale oppervlakte van de gouden nanodeeltjes worden geschat. De ligand ratio berekend op basis van de gegevens verkregen met 1H NMR spectroscopie zorgt voor de berekening van het aantal mollen van de liganden op het oppervlak van de nanodeeltjes. De molaren verhouding tussen de liganden over de oppervlakte van goud nanodeeltjes biedt de ligand dichtheid (Figuur 7). Schone nanodeeltjes hebben ongeveer 4 liganden per nm2. TGA-gegevens kunnen ook gebruikt worden om de ligand ratio te schatten, als het temperatuurinterval waarin ze desorb van het goud oppervlak voor elk ligand bekend is, en desorptie voorkomt bij afzonderlijke temperatuur marges.

Samengevat, dit protocol biedt een eenvoudige manier om de MUS ligand synthetiseren met een laag zoutgehalte en MUS: OT amphiphilic goud nanodeeltjes. Een van de belangrijkste factoren van de reproduceerbaarheid van deze nanodeeltjes is de lage anorganische zoutgehalte in de MUS gebruikt. Deze nanodeeltjes zijn stabiel zowel als poeder als in oplossing (b.v.,H2O en fysiologisch-relevante degenen), die als voorwaarde voor vele toepassingen zouden moeten worden benadrukt. Grondige karakterisering van de grootte en de oppervlakte-eigenschappen van amphiphilic nanodeeltjes is essentieel voor toekomstige toepassingen waarin de mate van amphiphilicity kan een belangrijke rol spelen.

Subscription Required. Please recommend JoVE to your librarian.

Disclosures

De auteurs hebben niets te onthullen.

Acknowledgments

Z.P.G. en F.S. danken de Zwitserse National Science Foundation en, in het bijzonder, NCCR ' Molecular Systems Engineering '. Z.L. en F.S. danken de steun van de Zwitserse National Science Foundation Division II Grant. Alle auteurs danken Quy ong voorvrucht bare discussies en voor het nalezen van het manuscript.

Materials

Name Company Catalog Number Comments
11-bromo-1-undecene Sigma Aldrich 467642-25 ml
Sodium Sulfite Sigma Aldrich S0505-250 g
Benzyltriethyl-ammonium bromide Sigma Aldrich 147125-25 g
Methanol VWR BDH1135-2.5 LP
DI water Millipore ZRXQ003WW Deionized water
1 L round bottom flask DURAN 24 170 56
Diethyl ether Sigma Aldrich 1.00930 EMD Millipore
Stirring bar Sigma Aldrich Z329207,
Dow Corning High Vacuum Grease Sigma Aldrich Z273554 ALDRICH
Filtering flask DURAN 20 201 63
Filtering Buchner Funnel FisherSci 11707335
Ethanol >99.8%, ACS, Reagent VWR 2081.321DP
Deuterium dioxide Sigma Aldrich 151882 ALDRICH
Thioacetic acid 96% Sigma Aldrich T30805 ALDRICH
Carbon black Sigma Aldrich 05105-1KG
Celite Sigma Aldrich D3877 SIGMA-ALDRICH Filtration medium
Condenser Sigma Aldrich Z531154
Hydrochloric acid, ACS reagent 37% Sigma Aldrich 320331 SIGMA-ALDRICH
Sodium Hydroxide, BioXtra, pellets (anhydrous) Sigma Aldrich S8045 SIGMA-ALDRICH
Centrifuge tubes VWR 525-0155P
250 mL round bottom flask DURAN 24 170 37
500 mL round bottom flask DURAN 24 170 46
Nitric acid, fACS reagent 70% Sigma Aldrich 438073 SIGMA-ALDRICH
Gold(III) chloride trihydrate >99.9% trace metal basis Sigma Aldrich 520918 ALDRICH
1-octanethiol >98.5% Sigma Aldrich 471836 ALDRICH
Sodium Borohydride purum p.a.>96% Sigma Aldrich 71320 ALDRICH
addition funnel SIgma Aldrich Z330655 SIGMA
Funnel DURAN 21 351 46
2V folded filtering papers Whatman 1202-150
Amicon filters Merck UFC903024
Iodine, ACS reagent, >99.8%, solid Sigma Aldrich 207772 SIGMA-ALDRICH
5 mm NMR-Tubes, Type 5HP (high precision) Armar 32210.503 Length 178 mm
Methanol-d4 99.8 atom%D Armar 16400.2035
TGA crucible Thepro 9095-9270.45
400 mesh carbon supported copper grid Electron Microscopy Science CF400-Cu
quartz cuvette Hellma Analytics 100-1-40

DOWNLOAD MATERIALS LIST

References

  1. Verma, A., et al. Effect of surface properties on nanoparticle-cell interactions. Small. 6 (1), 12-21 (2010).
  2. Yeh, Y. -C., et al. Gold nanoparticles: preparation, properties, and applications in bionanotechnology. Nanoscale. 4 (6), 1871-1880 (2012).
  3. Mirza, A. Z. A novel drug delivery system of gold nanorods with doxorubicin and study of drug release by single molecule spectroscopy. Journal of Drug Targeting. 23 (1), 52-58 (2015).
  4. Mirza, A. Z., et al. Fabrication and characterization of doxorubicin functionalized PSS coated gold nanorod. Arabian Journal of Chemistry. , In Press (2014).
  5. Nel, A. E., et al. Understanding biophysicochemical interactions at the nano-bio interface. Nature Materials. 8 (7), 543-557 (2009).
  6. Yeo, E. L. L., et al. Protein Corona around Gold Nanorods as a Drug Carrier for Multimodal Cancer Therapy. ACS Biomaterials Science and Engineering. 3 (6), 1039-1050 (2017).
  7. Lin, J., et al. Cell membranes open "doors" for cationic nanoparticles/ biomolecules: Insights into uptake kinetics. ACS Nano. 7 (12), 10799-10808 (2013).
  8. Saha, K., et al. Regulation of Macrophage Recognition through the Interplay of Nanoparticle Surface Functionality and Protein Corona. ACS Nano. 10 (4), 4421-4430 (2016).
  9. Moyano, D. F., et al. Fabrication of corona-free nanoparticles with tunable hydrophobicity. ACS Nano. 8 (7), 6748-6755 (2014).
  10. Pengo, P., et al. Gold nanoparticles with patterned surface monolayers for nanomedicine: current perspectives. European Biophysics Journal. 46 (8), 749-771 (2017).
  11. Kuna, J. J., et al. The effect of nanometre-scale structure on interfacial energy. Nature Materials. 8 (10), 837-842 (2009).
  12. Verma, A., et al. Surface-structure-regulated cell-membrane penetration by monolayer-protected nanoparticles. Nature Materials. 7 (7), 588-595 (2008).
  13. Van Lehn, R. C., et al. Lipid tail protrusions mediate the insertion of nanoparticles into model cell membranes. Nature Communications. 5, 4482-4493 (2014).
  14. Cagno, V., et al. Broad-spectrum non-toxic antiviral nanoparticles with a virucidal inhibition mechanism. Nature Materials. 17 (2), 195-203 (2018).
  15. Uzun, O., et al. Water-soluble amphiphilic gold nanoparticles with structured ligand shells. Chemical Communications. 2 (2), 196-198 (2008).
  16. Huang, R., et al. Colloidal stability of self-assembled monolayer-coated gold nanoparticles: The effects of surface compositional and structural heterogeneity. Langmuir. 29 (37), 11560-11566 (2013).
  17. Carney, R. P., et al. Electrical method to quantify nanoparticle interaction with lipid bilayers. ACS Nano. 7 (2), 932-942 (2013).
  18. Van Lehn, R. C., et al. Effect of particle diameter and surface composition on the spontaneous fusion of monolayer-protected gold nanoparticles with lipid bilayers. Nano Letters. 13 (9), 4060-4067 (2013).
  19. Huang, R., et al. Effects of surface compositional and structural heterogeneity on nanoparticle-protein interactions: Different protein configurations. ACS Nano. 8 (6), 5402-5412 (2014).
  20. Van Lehn, R. C., et al. Free energy change for insertion of charged, monolayer-protected nanoparticles into lipid bilayers. Soft Matter. 10 (4), 648-658 (2014).
  21. Ong, Q., et al. Characterization of Ligand Shell for Mixed-Ligand Coated Gold Nanoparticles. Accounts of Chemical Research. 50 (8), 1911-1919 (2017).
  22. Marbella, L. E., et al. NMR techniques for noble metal nanoparticles. Chemistry of Materials. 27 (8), 2721-2739 (2015).
  23. Templeton, A. C., et al. Reactivity of Monolayer-Protected Gold Cluster Molecules Steric Effects. Journal of American Chemical Society. 120 (8), 1906-1911 (1998).
  24. Harkness, K. M., et al. A structural mass spectrometry strategy for the relative quantitation of ligands on mixed monolayer-protected gold nanoparticles. Analytical Chemistry. 82 (22), 9268-9274 (2010).

Tags

Chemie amphiphilic goud nanodeeltjes gesulfoneerde liganden synthese karakterisering binaire ligand coating zelf-geassembleerd monolayer
Synthese en karakterisering van amphiphilic goud nanodeeltjes
Play Video
PDF DOI DOWNLOAD MATERIALS LIST

Cite this Article

Guven, Z. P., Silva, P. H. J., Luo,… More

Guven, Z. P., Silva, P. H. J., Luo, Z., Cendrowska, U. B., Gasbarri, M., Jones, S. T., Stellacci, F. Synthesis and Characterization of Amphiphilic Gold Nanoparticles. J. Vis. Exp. (149), e58872, doi:10.3791/58872 (2019).

Less
Copy Citation Download Citation Reprints and Permissions
View Video

Get cutting-edge science videos from JoVE sent straight to your inbox every month.

Waiting X
Simple Hit Counter