Waiting
Login processing...

Trial ends in Request Full Access Tell Your Colleague About Jove
Click here for the English version

Behavior

Средней мозговой артерии окклюзии техника для стимулирования после инсульта депрессия у крыс

Published: May 22, 2019 doi: 10.3791/58875
* These authors contributed equally

ERRATUM NOTICE

Summary

Здесь мы представляем протокол, чтобы вызвать депрессию после инсульта у крыс путем окзакудинг средней мозговой артерии через внутреннюю сонную артерию. Мы используем Porsolt вынуждены плавать тест и тест сахарозы предпочтение для подтверждения и оценки индуцированных депрессивных настроений.

Abstract

Послеинсультные депрессии (СДЧС) является наиболее повторяющимся из всех психиатрических осложнений в результате ишемического инсульта. Большее большинство (около 60%) всех ишемического инсульта пациенты страдают от ОСЧС, расстройство считается ишемический инсульт связанных прекурсоров для увеличения смертности и деградации здоровья. Патофизиология ОСЧС по-прежнему неясна. Для дальнейшего изучения механизма развития и возникновения ОСЧС, а также для того, чтобы выяснить терапию, мы попытались разработать новый протокол, который требует закуцания средней мозговой артерии (МСА) через внутреннюю сонную артерию (ICA) у крыс. Этот протокол описывает модель ОСЧС индуцированных крыс через середину церебральной артерии окклюзии (MЦАО). Также используется в эксперименте Porsolt принудительного плавать тест и тест сахарозы предпочтение, чтобы подтвердить и оценить депрессивное настроение крыс под следствием. Вместо вставки катетера через внешнюю сонную артерию (ЭКА), как это предусмотрено в первоначальной процедуре, эта методика MЦАО имеет мононити, проходящую непосредственно через ICA. Эта методика MЦАО была разработана несколько лет назад и приводит к снижению смертности и изменчивости. Общепризнано, что используемые критерии предпочтительны при отборе биологических моделей. Данные, полученные с помощью этого протокола, показывают, что эта модель МКАО может быть способом индуцирования ОСЧС у крыс и потенциально может привести к пониманию патофизиологии и будущему развитию новых лекарственных средств и других нейропротекторной агентов.

Introduction

Инсульт занимает четвертое место в списке смертельных заболеваний в Соединенных Штатах1,2,3, в то время как он вызывает большинство инвалидности у взрослых в развитых странах4; Это делает инсульт ведущим претендентом среди наиболее значимых проблем в области здравоохранения в мире. Нормальная в инсульта-выживших пациентов редко, около 15%-40% от выживания жертв страданий постоянной инвалидности, 20% требующих институционального ухода 3 месяца после инсульта5, и около трети 6-месячного пережитком нуждающихся в других, чтобы помочь им жить через каждый день6. Инсульт, по сообщениям, также учитывает растущие национальные расходы на здравоохранение7. Оценки от Американской ассоциации сердца имеет связанные с инсультом расходы в Соединенных Штатах на более чем $50 000 000 000 в 20108.

Мало того, что инсульт причиной долгосрочных повреждений лиц, но некоторые выжившие, как правило, страдают эмоциональные и поведенческие расстройства, такие как деменция, усталость, тревога, депрессия, бред, и агрессия9,10,11 ,12,13,14. Наиболее повторяющимся психологическим продолжением после инсульта является постинсультный период депрессии (ОСЧС), диагностированный примерно в 40%-50% от пережитших15,16,17. Вызванная инсультом депрессия приводит к повышению заболеваемости и смертности18,19,20,21,22. Патофизиологии ОСЧС не известно полностью, но это, видимо, вызвано многочисленными факторами и связана с инвалидностью, когнитивные нарушения, и повреждение сайта23.

Крыса-модель фокусного мозга, созданная mcao, является наиболее распространенной животной моделью инсульта24,25,26,27. Демонстрируя индукцию ОСЧС у крыс путем окки МСА через ICA, методы, которые сводят к минимуму смертность и изменчивость модели МКАО, заняты28.

Основная цель этого протокола состоит в том, чтобы наметить шаги для индуцирования ОСЧС у крыс путем окобинга МСА через ICA, модифицированную модель МКАО, которая уменьшает смертность и результат изменчивости28. Конкретные цели включают проведение неврологических и гистологических обследований (Определение неврологического балла тяжести [СНБ], объема зоны инфаркта и отека головного мозга) для проверки эффективности MЦАО и использования поведенческих тестов для изучения влияние этой процедуры МЦАО на развитие эмоциональных расстройств, в основном ОСЧС.

Subscription Required. Please recommend JoVE to your librarian.

Protocol

Комитет по уходу за животными университета Бен-Гуриона в Негеве, Израиль одобрил все процедуры лечения и тестирования, используемые в этом протоколе.

1. Подготовка крыс для экспериментальной процедуры

Примечание: Выбрать взрослого самца Спрэг-даули крыс весом 300-350 г.

  1. Дом крыс, четыре за клетку, в вивария при температуре 22 °C и 40% влажности, с обратным 12 ч света/темный цикл (горит в 8:00 утра) и неограниченный доступ к пище и воде.
  2. Случайным образом назначить крыс на две группы, а именно группа MCAO (n = 24) и Шам группы (n = 19).

2. Подготовка крыс для хирургии

  1. Для подготовки крыс для модифицированной процедуры MЦАО, обезболивать каждую крысу в течение 30 минут со смесью изофлуран (4% для индукции, 2% для хирургии, и 1,3% для обслуживания) в 24% кислорода (2 L/мин) в индукционной камере и дать ему возможность дышать спонтанно29 ,30.
    Примечание: Стимулировать рефлекс снятия педали, зажимая кожу между пальцами и/или ног колодки с помощью тупой щипцы. Рассмотрим глубину анестезии адекватной, когда рефлекс исчезает.
  2. Поддержание температуры основного тела при температуре 37 ° с с нагревательных пластин.
  3. Измерьте температуру тела всех крыс через зонд, помещенный в прямую кишку крысы перед началом хирургической процедуры.
  4. Держите температуру тела постоянной (37 ° c) для всех крыс, чтобы свести к минимуму любое гипотермическое воздействие на неврологический исход и любые неврологические травмы.
  5. Применить искусственные слезы мазь на оба глаза каждого животного, пока они лежат на подготовительную таблицу.
  6. Бритье шеи каждой крысы и дезинфицировать кожу с 70% спирта хлоргексидин (70% спирта и 0,5% хлоргексидин глюконет). Повторите процедуру дезинфекции еще два раза.
  7. Обложка крыс стерилизованные хирургические шторы.

3. хирургия (техника МЦАО)

Примечание: Выполните операции, описанные Бойко et al.28 и использовать инструменты, предоставляемые Мак-Гарри et al.29 и uluç et al.30.

  1. Выполните разрез брюшной срединной линии и рассекать поверхностную фасцию.
  2. Аккуратно выполните резкое и тупое рассечение в пределах трех треугольных мышц (стероидный, дигастральный, и sternomastоидных мышц), чтобы определить сонные артерии (ЭКА, ICA, и общей сонной артерии [ОСО]).
  3. Тщательно рассекать и разоблачить право ОСО и ICA.
  4. Отделить право ОСО и ICA от блуждающего нерва.
    Примечание: По определению сонных артерий, как это предусмотрено в шаге 3,2, ICA будет признана как половина ветвей КЦА наряду с ЭКА.
  5. Вставить катетер (тепло-притупляются или силиконовые покрытием 4-0 нейлона) мононити непосредственно через ICA, ~ 18.5-19 мм от точки бифуркации правой ОСО в круг Уиллис до достижения мягкого сопротивления, чтобы закутывать де МСА.
    Примечание: Тепло-притупляемая нить и силиконовый 4-0 нейлон играют ту же роль и являются наиболее предпочтительными мононитями в последнее время, учитывая, что они обеспечивают лучшую окклюзию, чем обычная Нейлоновая нить28,30.
  6. Галстук 4-0 Шелковый шов вокруг ICA чуть выше правой ОСО (пиопипалатин артерии) бифуркации, чтобы блокировать ICA проксимально к точке вставки нити постоянно и дистальнее к нему временно.
  7. Свяжите ICA вокруг интравыпускного потока, чтобы закрепить Шелковый шов, чтобы предотвратить кровотечение.
  8. Тема фиктивных эксплуатируемых крыс той же хирургической процедуры, как крысы MЦАО, но вставить нейлоновой нитью вместо28.
    Примечание: Нейлоновые нити, как и кремний с покрытием нейлона, перекрывает ICA, но это не так эффективны, как последний.
  9. Закройте рану на шею крысы после закусания МСА, выключите анестезию и поставьте крысу в инкубатор под наблюдением, пока он не проснется.
    Примечание: Потребность в проксимальной перевязки, чтобы оклиде ICA, и что из дополнительных дистальной перевязки, чтобы уменьшить кровотечение вокруг нити и закрепите его на месте. Кроме того, крысы должны проснуться через несколько минут после его рана была закрыта.

4. послеоперационное восстановление

  1. Администрирование 5 мл 0,9% физиологического раствора для каждой крысы интраперитально, сразу после операции, чтобы предотвратить обезвоживание.
  2. Администрирование обезболивания безоговорочно на первый день после операции; Использование мелоксикама 1 мг/кг кв Q24 h. Дайте разбавленный дипирон (0,5 г растворенного в 400 мл питьевой воды) для крыс показаны симптомы боли в течение первых 3 дней.
  3. Жертвоприношение крыс с припадками (судороги вызваны увеличением внутричерепного давления от отека головного мозга или кровоизлияние в мозг28).

5. неврологические серьезность Оценка31

Примечание: Эта процедура выполняется двумя наблюдателями, которые не участвуют в хирургическом разбирательстве; они тестируются неврологические дефициты и степени дефицита двигателя на совокупный балл 0-432. Оценка этого показателя может выполняться в разные промежутки времени; в этом расследовании, было выполнено 50 мин, 24 ч, 7, 15 и 30 дней после операции. Ниже приведены меры по оценке НСС. Хотя это и не является необходимостью в этой ситуации, эта оценка необходима для определения инсульта у грызунов для того, чтобы управлять лечением.

  1. Поместите крысу на керамический пол и дайте ему свободно передвигаться в течение 1 мин.
  2. Осторожно потяните крысы назад за хвост и оценка следующим образом.
    1. Оценка крысы с счетом 0 не неврологического дефицита.
    2. Оценка крысы с оценкой 1 для передних конечностей сгибания.
    3. Оценка крысы со счетом 2 для контралатеральной слабой хватки передних конечностей.
    4. Оценка крысы с счетом 3 для кружения к парной стороне, когда вытащил на хвост.
    5. Оценка крысы со счетом 4 для спонтанного кружить32.
      Примечание: Если более чем одна из реакций наблюдается, предпочтение отдается действию с более высоким счетом.

6. Определение тома инфаркта (Хгистологический экзамен)

  1. Измерение объема инфаркта
    Примечание: Выполните эту процедуру, как описано ранее33,34. Измерение мозга тома инфаркта с использованием 2, 3, 5-трифенилтетазолиум хлорид (Пт) окрашивание 24 ч после синтеза.
    1. Усыпляйте пять крыс из каждой группы, 24 ч после последней НСС, подвергая их передозировки изофлуран в индукционной камере.
    2. Обезглавить крыс и быстро изолировать их мозги с помощью небольших ножниц и щипцов.
    3. Вымойте изолированные мозги в 0,9% физиологического раствора.
    4. Изучите кровотечения точек на мозги, чтобы исключить мышей, которые подверглись субарахноидальное кровоизлияние в кругу Уиллис.
    5. Поместите каждый мозг на чистую стеклянную горку на-20 °C лед, а затем поместить их в-20 °C холодильник на 5 минут, чтобы сделать мозг легче нарезать.
    6. Возьмите стеклянную горку с мозгом на нем из-20 °C Холодильник, положить его обратно на-20 °C лед, и вскрыть лобной полюс и мозжечок с лезвием и щипцы.
    7. Ломтик мозга разделы горизонтально в 2 мм толщиной с лезвием производить шесть кусков.
    8. Подготовьте 0,05% ТТК решение, добавив 1,25 g порошка ТТК до 500 мл нормального физиологического раствора до жертвы, передача раствора на 24-хорошо пластины (1 мл в колодец) покрыты фольгой, и хранить его на 4 ° c.
      Примечание: ТТК и ткани с пятнами ТТК являются легкими чувствительными.
    9. Использование щипцов, передавать кусочки мозга на 24-хорошо пластины, содержащие решения ТТК (один ломтик на колодец) и растянуть ломтики в растворе.
    10. Инкубировать содержание пластины при температуре 37 ° c в мелкой водяной бане в течение 30 мин.
    11. Аспоте раствор ТТК от пластины с пипеткой, промойте их с промывания мозгов жидкость, и инкубировать при комнатной температуре в течение 30 мин.
    12. Поместите ломтики в порядке, в котором они были сокращены на лабораторном стекле и изучить сегменты с помощью сканера.
    13. Проанализируйте размер инфаркта в процентах от всего фрагмента мозга, используя программное обеспечение для анализа изображений, основанное на визуальной идентификации.
  2. Анализ объема инфаркта35
    1. Количественное определение объема инфаркта с помощью стандартного программного обеспечения для анализа изображений (Иимадж) и анализа объема мозга миокарда в процентах от всего размера мозга33.
    2. Поместите кусочки мозга на слайды из стеклянного микроскопа и сканируйте их с помощью оптического сканера с высоким разрешением (1 600 x 1 600 ДОИ) для адекватного анализа.
    3. Обрезать изображения и стандартизировать шкалу для всех изображений, используя метрическую линейку, включрованную в отсканированный снимок.
    4. Мера области отмечены бледность в шесть последовательных 2 мм корональных разделов с помощью палочки (трассировка) инструмент и от руки отбора на 1.37 v программного обеспечения36.
    5. Рассчитать косвенный объем инфаркта с использованием следующей формулы37.

7. Измерение отека мозга38

Примечание: Отек головного мозга измеряется 24 ч после последнего MЦАО.  Эвтаназия животных с тяжелым неврологическим дефицитом, вмешиваясь в еде и/или питье, по крайней мере три дня, более 20% потеря веса, гемиплегия или судороги.

  1. Оцените величину отека правого полушария с помощью суммирования участков, нарезанных в косо, для расчета объемов правого и левого полушарий в произвольных единицах (пикселях).
    Примечание: Используйте программное обеспечение 1.37 v для этого расчета, после оптического сканирования (разрешение: 1 600 x 1 600 ДОИ). Выберите область интереса и используйте функцию измерения из меню анализа . Макросы использовались в нашем расследовании.
  2. Выразить отек мозга области в процентах от стандартных областей в не влияет контралатерально полушария.
  3. Рассчитать степень отечности с помощью уравнения, разработанного ранее39.

8. поведенческие парадигмы

  1. Выполняйте поведенческие тесты между 30 и 33 днями после операции в закрытой, тихой и контролируемой светом комнате.
  2. Назначьте следователей ослепленные на все экспериментальные процедуры видеозапись всех поведенческих тестов с коммерчески доступной программой.
  3. Тест на предпочтение сахарозы40,41
    1. Поместите крыс в отдельные клетки в той же комнате, где они размещаются во время темного цикла.
    2. В течение следующих 24 ч, поместите одну бутылку 100 мл 1% (w/v) раствора сахарозы в каждой клетке с крысой, чтобы быть проверены и позволяют адаптации крысы.
    3. После 24 ч, лишить крыс пищи и воды для 12 ч, удалив бутылки.
    4. Затем после 12 ч, поместите две бутылки в каждой клетке для 4 ч, один из которых содержит 100 мл водопроводной воды и другой, содержащий 100 мл раствора сахарозы (1% [w/v]).
    5. Запишите количество раствора сахарозы и воды, потребляемой крыс в миллилитрах. Вычислить близость к предпочтению сахарозы следующим образом.
  4. Porsolt вынуждены плавать тест42
    Примечание: Испытание на купание в Porsolt проводилось как описано в предыдущем протоколе, опубликованном Зельдетзом et al.40 и Бойко и др.42. Принцип этого испытания гласит, что, когда крысы вынуждены плавать в запретной зоне, откуда, они не могут убежать, они в конечном итоге становятся неподвижными, прекратив любые попытки избежать воды43,44. Этот тест был проведен в другом помещении во время темного цикла.
    1. Поместите каждую крысу в вертикальный цилиндр из оргстекла (высота: 100 см; диаметр: 40 см), содержащий 80 см воды при температуре 25 °C в течение 15 минут для привыкания.
    2. Возьмите крыс и дайте ему высохнуть в течение 15 минут в отапливаемом корпусе (32 ° c).
    3. Верните крысу к ее домашней (оригинальной) клетке.
    4. Повторите шаг 8.4.1 24 ч позже, на этот раз для расследования, в течение 5 минут.
    5. Видеозапись 5 мин тест и рассчитать общую продолжительность неподвижности в течение этого периода.

Subscription Required. Please recommend JoVE to your librarian.

Representative Results

Гистологические находки (Таблица 1) выявили статистически значимый объем инфаркта в процентах от общего мозга (p < 0,0001) после mцао по сравнению с животными в группе управления фиктивным. Также сообщалось, был статистически значимый отек головного мозга, когда оценка от экспериментальной группы (p < 0,0003) был поставлен бок о бок с, что из фиктивного контроля группы.

Баллы СНБ, полученные в таблице 2, показывают более низкие неврологические показатели в экспериментальной группе (mцао) по сравнению с более высокими показателями для группы по контролю за фиктивным контролем после тестов Манн-Уитни: p < 0,001 после 50 мин, p < 0,05 после 24 ч, и p < 0,05 после 7 дней.

Результаты оценок предпочтений сахарозы показали, что крысы MЦАО также потребляли значительно меньшее количество сахарозы (p < 0,0001, рис. 2a) и имели более длительный период неподвижности (p < 0,0001, Рисунок 2a) по сравнению с фиктивным крыс.

Figure 1
Рисунок 1: графическая демонстрация временной шкалы протокола. Различные тесты, запускающиеся на крысах в разное время, показаны по схеме: MЦАО = среднее окклюзия мозговой артерии в начале эксперимента; СНБ = Оценка неврологической тяжести, 50 мин, 24 ч, 7 и 30 дней после MЦАО; и поведенческих тестов (предпочтение сахарозы и Porsolt вынуждены плавать испытаний) от дней 30 до 33 пост-MЦАО. Эта цифра была изменена с Ифергане et al.45. Пожалуйста, нажмите здесь, чтобы посмотреть увеличенном варианте этой фигуры.

Figure 2
Рисунок 2: тест на предпочтение сахарозы, выполняемое со дней 30 до 33 с поста-MЦАО (n = 16) и мнимой-контрольных крыс (n = 14). Процентная доля (%) предпочтения сахарозы. Крысы MЦАО потребляли меньше сахарозы (p < 0,0001), чем мнимого контроля крыс, с существенной разницей в потреблении сахарозы между двумя группами показано на рисунке. MЦАО = среднее окклюзия мозговой артерии. Все данные представляют группу среднее ± МДж. Эта цифра была изменена с Ифергане et al.45. Пожалуйста, нажмите здесь, чтобы посмотреть увеличенном варианте этой фигуры.

Figure 3
Рисунок 3: Porsolt вынужденном плавать тест выполняется от дней 30 до 33 пост-MЦАО (n = 16) и пост-обман процедуры (n = 14). Длительность неподвижности (в секундах). Время неподвижности в принудительной плавать тест был значительно длиннее в группе MЦАО, чем в фиктивные группы (р < 0,0002). MЦАО = среднее окклюзия мозговой артерии. Все данные представляют группу среднее ± МДж. Эта цифра была изменена с Ифергане et al.45. Пожалуйста, нажмите здесь, чтобы посмотреть увеличенном варианте этой фигуры.

Гистологические находки Группа окклюзии средней мозговой артерии Шама-эксплуатируемые группы
Общий мозг (объем инфаркта) 8,8% ± 6,5 0,3% ± 0,1
Отек мозга 10,2% ± 4,6 2,6% ± 1,2
Все данные представляют группу среднее ± S. E. M

Таблица 1: гистологические находки для объема инфаркта и отека мозга. MЦАО = прикус средней мозговой артерии (n = 5); обман (n = 5).

Неврологические серьезность Оценка Группа окклюзии средней мозговой артерии Шама-эксплуатируемые группы
50 мин после операции 2,75 ± 0,14 0,0 ± 0,0
24 ч после операции 3,2 ± 0,15 0,0 ± 0,0
7 дней после операции 0,91 ± 0,2 0,0 ± 0,0
Все данные представляют группу среднее ± S. E. M

Таблица 2: неврологические оценки тяжести (СНБ) для MЦАО и фиктивных эксплуатируемых крыс. MЦАО = прикус средней мозговой артерии (n = 16); обман (n = 14). Эта таблица взята из Ифергане et al.45.

Subscription Required. Please recommend JoVE to your librarian.

Discussion

Один из способов, с помощью которого представленная здесь методика МКАО может считаться более безопасным, чем первоначальная модель МЦАО, иллюстрируется тем фактом, что ЭКА и ее филиалы, включая затылочную артерию, терминал на языках и верхнечелюстной артерии, не находятся под угрозой При перекрыте МСА через ICA. Оригинальная модель MЦАО смещения ЭКА (и ее филиалов), дистально рассекает и свертывание их46, вызывает нарушение mastication, из-за компромисса с сосудистой питания к mastication мышц47. Разрушение мышц в конечном итоге может привести к высвобождением дополнительной динамики вычислительных жидкостей. Вопреки оригинальной методике МЦАО, в которой доступ к МСА происходит через ЭКА, описанная здесь методика модифицирована для инсульта, без прерывания кровотока в ЭКА и ее притоках.

Наиболее важные аргументы для предпочитая Роман MЦАО модель оригинального mцао отдых в его способности уменьшить изменчивость в отек головного мозга, объем инфаркта, и изменения веса, значительно, а также снижение MCAO связанных смертности. Смертность в процедурах МКАО является важным фактором48; коэффициент смертности 20% считается разумным49,50. Смертность (20% для первоначального MЦАО, 12,5% для романа MЦАО, и 0% для контроля) в текущем расследовании были в пределах диапазона приемлемого курса, но Роман мцао техника повезло лучше, чем оригинал MЦАО.

Крысы переживает Роман MЦАО процедуры потеряли меньше веса сразу после операции и получил больший вес к концу расследования, чем крысы, подвергнутого оригинальной методике МЦАО28. Больше потеря веса и меньшее увеличение веса в крысах, котор подвергли к первоначально mцао смогл привести к от самолигирующейся ЭКА во время хирургии, который причиняет дистальной гипоперфузии в лицевых, лингвальные, и верхнечелюстной артерии, также, как a поддержки mastication. Если жевания нарушается, пероральное потребление уменьшается, которые, в сочетании с катаболизма, может привести к потере веса, и в долгосрочной перспективе, для бедных неврологических последствий, заболеваемости и смерти43. Доступ к МСА через ICA не требует вмешательства в ЭКА и ее филиалы. Таким образом, никаких нарушений не срабатывает во время романа MЦАО процедуры, и не вес, заболеваемость, или смертность проблемы сталкиваются крысы, проходящие процедуру.

Тесты, используемые для оценки основных депрессивных факторов, таких как депрессивное поведение, ангедония, неподвижность, и обучение и ухудшение памяти, являются стандартными процедурами, применятельными в моделях животных депрессии51,52. Поведенческий тест, как Porsolt принудительного плавать тест, обычно страдают от необычных двигательных способностей после MЦАО. Здесь, этот тест был применен от дней 30 до 33 после хирургической процедуры, чтобы удостовериться, что индукция ОСЧС в модифицированной крыс MЦАО не слишком влияют на их двигательные способности. По результатам, крысы из экспериментальной группы показали сравнимое общее поведение побега, что и мнимой-контроль крыс. У крыс MЦАО было значительно больше неудач побега, значительно поднята длительность неподвижности и уменьшенное предпочтение сахарозы по сравнению с притворным животным. Это позволит предположить, что эта методика MCAO является способной альтернативой оригинальному методу МЦАО.

Разница между включением и исключением крыс в процедуре МКАО для более широкой экспериментальной оценки во многом зависит от исхода операции. С помощью связанной с МКАО модели ОСЧС некоторые нежелательные побочные эффекты мцао могут быть сокращены, оставляя место для включения мелких и, возможно, хрупких крыс в процедуру мцао. Представленная здесь животная модель MЦАО предоставляет сценарий для уменьшения нежелательных исходов после индуцированной ОСЧС MCAO, поскольку она имеет потенциал для снижения изменчивости веса, отека мозга и объема инфаркта, а также смертей, связанных с МКАО. Этот метод потенциально может служить инструментом для оценки будущей терапии ОСЧС и предоставления доклинических данных об эффективности терапевтических веществ, а также мониторинга других факторов, изменяющих условия клинических исходов инсульта и ОСЧС.

Subscription Required. Please recommend JoVE to your librarian.

Disclosures

Авторам нечего раскрывать.

Acknowledgments

Мы благодарим профессора Елену Свелновскую, факультет физиологии, биологии и медицины, Олесь Гончар Днепр, "Днепр", Украина за поддержку и полезный вклад в наши дискуссии. Полученные данные являются частью докторской диссертации Р.К..

Materials

Name Company Catalog Number Comments
Absorbent pad - - -
Black lusterless perspex box - - (120 cm × 60 cm × 60 cm), divided into a 25% central zone and the surrounding border zone
Bottles Techniplast ACBT0262SU 150 mL bottles filled with 100 mL of water and 100 mL 1%(w/v) sucrose solution
Electric Shock Heat System Ultasonic Inc. - -
Horizon-XL Mennen Medical Ltd
Imaging System Kodak - For imaging and quantification
Monofilament - - -
Paper towels Pharmacy - Dry towels used for keeping rats dry after immersing them in water
Pexiglass cylinder - - a 100 cm tall and 40 cm in diameter cylinder used for carrying out the forced swim test
Purina Chow Purina 5001 Rodent laboratory chow given to rats, mice and hamster is a life-cycle nutrition that has been used in biomedical researc for over 5 decades. Provided to rats ad libitum in this experiment
Rat Cages Techniplast 2000P Conventional housing for rodents. Was used for housing rats throughout the experiment
Scanner  Canon CanoScan 4200F -
Video Camera ETHO-VISION (Noldus) - Digital video camera for high definition recording of rat behavior under open field test

DOWNLOAD MATERIALS LIST

References

  1. Miniño, A. M., Murphy, S. L., Xu, J., Kochanek, K. D. Deaths: final data for 2008. National Vital Statistics Reports. 59 (10), 1-126 (2011).
  2. Roger, V. L., et al. Executive summary: Heart disease and stroke statistics-2012 update: a report from the American Heart Association. Circulation. 125 (1), 188-197 (2012).
  3. Towfighi, A., Saver, J. L. Stroke declines from third to fourth leading cause of death in the United States: Historical perspective and challenges ahead. Stroke. 42 (8), 2351-2355 (2011).
  4. Guo, J. M., Liu, A. J., Su, D. F. Genetics of stroke. Acta Pharmacologica Sinica. 31 (9), 1055-1064 (2010).
  5. Lloyd-Jones, D., et al. Heart disease and stroke statistics - 2010 update: A report from the American Heart Association. Circulation. 121 (7), e46-e215 (2010).
  6. Warlow, C. P. Epidemiology of stroke. Lancet. 352 (Suppl 3), SIII1-SIII4 (1998).
  7. Demaerschalk, B. M., Hwang, H. M., Leung, G. US cost burden of ischemic stroke: A systematic literature review. The American Journal of Managed Care. 16 (7), 525-533 (2010).
  8. Heidenreich, P. A., et al. Forecasting the future of cardiovascular disease in the United States: A policy statement from the American Heart Association. Circulation. 123 (8), 933-944 (2011).
  9. de Groot, M. H., Phillips, S. J., Eskes, G. A. Fatigue associated with stroke and other neurologic conditions: Implications for stroke rehabilitation. Archives of Physical Medicine and Rehabilitation. 84 (11), 1714-1720 (2003).
  10. Kim, J., Choi, S., Kwon, S. U., Seo, Y. S. Inability to control anger or aggression after stroke. Neurology. 58 (7), 1106-1108 (2002).
  11. Leys, D., Hénon, H., Mackowiak-Cordollani, M. S., Pasquier, F. Poststroke dementia. Lancet Neurology. 4 (11), 752-759 (2005).
  12. McManus, J., Pathansali, R., Stewart, R., Macdonald, A., Jackson, S. Delirium post-stroke. Age and Ageing. 36 (6), 613-618 (2007).
  13. Robinson, R. G. Poststroke depression: Prevalence, diagnosis, treatment, and disease progression. Biological Psychiatry. 54 (3), 376-387 (2003).
  14. Tang, W., et al. Emotional incontinence and executive function in ischemic stroke: A case-controlled study. Journal of the International Neuropsychological Society. 15 (1), 62-68 (2010).
  15. Astrom, M., Adolfsson, R., Asplund, K. Major depression in stroke patients: A 3-year longitudinal study. Stroke. 24 (7), 976-982 (1993).
  16. Eastwood, M. R., Rifat, S. L., Nobbs, H., Ruderman, J. Mood disorder following cerebrovascular accident. The British Journal of Psychiatry. 154, 195-200 (1989).
  17. Robinson, R. G., Bolduc, P. L., Price, T. R. Two-year longitudinal study of poststroke mood disorders: Diagnosis and outcome at one and two years. Stroke. 18 (5), 837-843 (1987).
  18. Kauhanen, M., et al. Poststroke depression correlates with cognitive impairment and neurological deficits. Stroke. 30 (9), 1875-1880 (1999).
  19. Morris, P. L., Robinson, R. G., Andrzejewski, P., Samuels, J., Price, T. R. Association of depression with 10-year poststroke mortality. The American Journal of Psychiatry. 150 (1), 124-129 (1993).
  20. Paolucci, S., et al. Post-stroke depression, antidepressant treatment and rehabilitation results. A case-control study. Cerebrovascular Diseases. 12 (3), 264-271 (2001).
  21. Schwartz, J. A., et al. Depression in stroke rehabilitation. Biological Psychiatry. 33 (10), 694-699 (1993).
  22. Williams, L. S., Ghose, S. S., Swindle, R. W. Depression and other mental health diagnoses increase mortality risk after ischemic stroke. The American Journal of Psychiatry. 161 (6), 1090-1095 (2004).
  23. Whyte, E., Mulsant, B. Post-stroke depression: Epidemiology, pathophysiology, and biological treatment. Biological Psychiatry. 52, 253-264 (2002).
  24. Belayev, L., Alonso, O. F., Busto, R., Zhao, W., Ginsberg, M. D. Middle cerebral artery occlusion in the rat by intraluminal suture. Neurological and pathological evaluation of an improved model. Stroke. 27 (9), 1616-1623 (1996).
  25. Longa, E. Z., Weinstein, P. R., Carlson, S., Cummins, R. Reversible middle cerebral artery occlusion without craniectomy in rats. Stroke. 20 (1), 84-91 (1989).
  26. Spratt, N. J., et al. Modification of the method of thread manufacture improves stroke induction rate and reduces mortality after thread-occlusion of the middle cerebral artery in young or aged rats. Journal of Neuroscience Methods. 155 (2), 285-290 (2006).
  27. Yu, F., Sugawara, T., Chan, P. H. Treatment with dihydroethidium reduces infarct size after transient focal cerebral ischemia in mice. Brain Research. 978 (1-2), 223-227 (2003).
  28. Boyko, M., et al. An experimental model of focal ischemia using an internal carotid artery approach. Journal of Neuroscience Methods. 193 (2), 246-253 (2010).
  29. McGarry, B. L., Jokivarsi, K. T., Knight, M. J., Grohn, O. H. J., Kauppinen, R. A. A Magnetic Resonance Imaging Protocol for Stroke Onset Time Estimation in Permanent Cerebral Ischemia. Journal of Visualized Experiments. (127), e55277 (2017).
  30. Uluç, K., Miranpuri, A., Kujoth, G. C., Aktüre, E., Başkaya, M. K. Focal Cerebral Ischemia Model by Endovascular Suture Occlusion of the Middle Cerebral Artery in the Rat. Journal of Visualized Experiments. (48), e1978 (2011).
  31. Boyko, M., et al. Morphological and neurobehavioral parallels in the rat model of stroke. Behavioural Brain Research. 223 (1), 17-23 (2011).
  32. Menzies, S. A., Hoff, J. T., Betz, A. L. Middle cerebral artery occlusion in rats: a neurological and pathological evaluation of a reproducible model. Neurosurgery. 31 (1), 100-107 (1992).
  33. Boyko, M., et al. Cell-free DNA - A marker to predict ischemic brain damage in a rat stroke experimental model. Journal of Neurosurgical Anesthesiology. 23 (2), 222-228 (2011).
  34. Zheng, Y., et al. Experimental Models to Study the Neuroprotection of Acidic Postconditioning Against Cerebral Ischemia. Journal of Visualized Experiments. 125 (125), e55931 (2017).
  35. Poinsatte, K., et al. Quantification of neurovascular protection following repetitive hypoxic preconditioning and transient middle cerebral artery occlusion in mice. Journal of Visualized Experiments. (99), e52675 (2015).
  36. ImageJ. , Available from: https://imagej.nih.gov/ij/ (2018).
  37. Liu, S., Zhen, G., Meloni, B. P., Campbell, K., Winn, H. R. Rodent stroke model guidelines for preclinical stroke trials. Journal of Experimental Stroke & Translational Medicine. 2 (2), 227 (2009).
  38. Boyko, M., et al. Pyruvate's blood glutamate scavenging activity contributes to the spectrum of its neuroprotective mechanisms in a rat model of stroke. European Journal of Neuroscience. 34 (9), 1432-1441 (2011).
  39. Kaplan, B., et al. Temporal thresholds for neocortical infarction in rats subjected to reversible focal cerebral ischemia. Stroke. 22 (8), 1032-1039 (1991).
  40. Zeldetz, V., et al. A New Method for Inducing a Depression-Like Behavior in Rats. Journal of Visualized Experiments. (132), e57137 (2018).
  41. American Psychiatric Association. Diagnostic and Statistical Manual of Mental Disorders, Fourth Edition. , American Psychiatric Association. Washington, DC. (2000).
  42. Boyko, M., et al. Establishment of an animal model of depression contagion. Behavioural Brain Research. 281, 358-363 (2015).
  43. Porsolt, R. D., Anton, G., Blavet, N., Jalfre, M. Behavioral despair in rats: a new model sensitive to antidepressant treatments. European Journal of Pharmacology. 47 (4), 379-391 (1978).
  44. Boyko, M., et al. The neuro-behavioral profile in rats after subarachnoid hemorrhage. Brain Research. 1491, 109-116 (2013).
  45. Ifergane, G., et al. Biological and Behavioral Patterns of Post-Stroke Depression in Rats. Canadian Journal of Neurological Sciences. 45 (4), 451-461 (2018).
  46. Longa, E. Z., Weinstein, P. R., Carlson, S., Cummins, R. Reversible middle cerebral artery occlusion without craniectomy in rats. Stroke. 20 (1), 84-91 (1989).
  47. Dittmar, M., Spruss, T., Schuierer, G., Horn, M. External carotid artery territory ischemia impairs outcome in the endovascular filament model of middle cerebral artery occlusion in rats. Stroke. 34 (9), 2252-2257 (2003).
  48. Ryan, C. L., et al. An improved post-operative care protocol allows detection of long-term functional deficits following MCAo surgery in rats. Journal of Neuroscience Methods. 154 (1-2), 30-37 (2006).
  49. Aspey, B. S., Cohen, S., Patel, Y., Terruli, M., Harrison, M. J. Middle cerebral artery occlusion in the rat: consistent protocol for a model of stroke. Neuropathology and Applied Neurobiology. 24 (6), 487-497 (1998).
  50. Spratt, N. J., et al. Modification of the method of thread manufacture improves stroke induction rate and reduces mortality after thread-occlusion of the middle cerebral artery in young or aged rats. Journal of Neuroscience Methods. 155 (2), 285-290 (2006).
  51. Cryan, J. F., Markou, A., Lucki, I. Assessing antidepressant activity in rodents: recent developments and future needs. Trends in Pharmacological Sciences. 23 (5), 238-245 (2002).
  52. Nestler, E. J., et al. Preclinical models: status of basic research in depression. Biological Psychiatry. 52 (6), 503-528 (2002).

Tags

Поведение выпуск 147 ишемический инсульт постинсультный депрессия модель крысы прикус средней мозговой артерии объем инфаркта отек головного мозга испытание принудительного плавания Porsolt тест на предпочтение сахарозы

Erratum

Formal Correction: Erratum: A Middle Cerebral Artery Occlusion Technique for Inducing Post-stroke Depression in Rats
Posted by JoVE Editors on 02/07/2022. Citeable Link.

An erratum was issued for: A Middle Cerebral Artery Occlusion Technique for Inducing Post-stroke Depression in Rats. The Authors section was updated.

One of the author names was updated from:

Dmitri Frank

to

Dmitry Frank

Средней мозговой артерии окклюзии техника для стимулирования после инсульта депрессия у крыс
Play Video
PDF DOI DOWNLOAD MATERIALS LIST

Cite this Article

Kuts, R., Melamed, I., Shiyntum, H.More

Kuts, R., Melamed, I., Shiyntum, H. N., Frank, D., Grinshpun, J., Zlotnik, A., Brotfain, E., Dubilet, M., Natanel, D., Boyko, M. A Middle Cerebral Artery Occlusion Technique for Inducing Post-stroke Depression in Rats. J. Vis. Exp. (147), e58875, doi:10.3791/58875 (2019).

Less
Copy Citation Download Citation Reprints and Permissions
View Video

Get cutting-edge science videos from JoVE sent straight to your inbox every month.

Waiting X
Simple Hit Counter