Biz hiperlipidemi ve diyabet ile tavşanlar periferik iskemi ikna etmek için kullanılan bir cerrahi prosedür açıklanmaktadır. Bu cerrahi hastalarda periferik arter hastalığında deneyimli koşullar için preklinik bir model olarak davranır. Anjiyografi, tanıtılan iskemi ve perfüzyon iyileşmesi kapsamını ölçmek için bir araç olarak da tanımlanır.
Periferik vasküler hastalık dünya çapında milyonlarca hastayı etkileyen yaygın bir klinik sorundur. Periferik vasküler hastalığın önemli bir sonucu iskemi gelişmedir. Şiddetli vakalarda, hastalar sürekli ağrı ve ekstremite amputasyonu riskini artan kritik ekstremite iskemi geliştirebilir. Periferik iskemi için mevcut tedaviler, kan akışını geri yüklemek için stent veya aterektomi ile anjiyoplasti gibi bypass cerrahisi veya perkütan müdahaleler içerir. Ancak, bu tedaviler genellikle vasküler hastalık veya restenozis devam eden ilerlemesi için başarısız veya hastanın genel kötü sağlık nedeniyle kontrendikedir. Periferik iskemi tedavi etmek için umut verici bir potansiyel yaklaşım hastanın teminat damar geliştirmek için izin terapötik neovaskülarizasyon indüksiyonu içerir. Bu yeni kurulan ağ, etkilenen bölgeye perfüzyon geri tarafından periferik iskemi hafifletir. Periferik iskemi için en sık kullanılan preklinik model femoral arter ligasyon yoluyla sağlıklı tavşan arka ekstremite iskemi oluşturulması kullanır. Geçmişte, ancak, preklinik çalışmaların başarısı ve periferik iskemi için tedaviler ile ilgili klinik çalışmalarda başarısızlık arasında güçlü bir kesme olmuştur. Sağlıklı hayvanların genellikle cerrahi indüklenen iskemi yanıt olarak sağlam vasküler rejenerasyon var, azaltılmış vaskülarite ve kronik periferik iskemi olan hastalarda rejenerasyon aksine. Burada, hiperlipidemi ve diyabet içeren tavşanların periferik iskemi için optimize edilmiş bir hayvan modelini tarif ediyoruz. Bu model daha yüksek bir kolesterol diyet ile karşılaştırıldığında teminat oluşumu ve kan basıncı kurtarma azalır. Böylece, model periferal vasküler hastalığa eşlik eden ortak hastalıklardan anjiogenezi olan insan hastalarıyla daha iyi korelasyon sağlayabilir.
Periferik arteriyel hastalık (PAD), aterosklerotik plak oluşumunun ilerlemesini vücudun ekstremitelerinde kan damarlarının daralması yol açan ortak bir dolaşım bozukluğudur. Ateroskleroz için risk faktörlerinde son artış, diyabet dahil olmak üzere, obezite, ve aktivite, vasküler hastalığın prevalansı artan yol açmıştır1. Şu anda, bu tahmin edilmektedir 12% – 20% genel nüfusun üzerinde 60 yıllık periferik arter hastalığı vardır2. Periferik arter hastalığının önemli bir sonucu periferik iskemi gelişmedir, en sık alt ekstremitelerde bulunur. Ciddi durumlarda, hastalar kritik ekstremite iskemi, kan akımı eksikliği nedeniyle sürekli ağrı olan bir devlet gelişebilir. Kritik ekstremite iskemi olan hastalarda% 50 ‘ lik bir tanıda bir yıl içinde bir ekstremite amputasyon olasılığı vardır. Ayrıca, diyabetli hastalarda revaskülarizasyon için müdahalelerin ardından periferik arter hastalığı ve daha yoksul sonuçlar daha yüksek bir insidansı var3,4. Periferik iskemi için mevcut tedaviler Atherectomy ve stent veya cerrahi bypass gibi perkütan müdahaleler içerir. Ancak, birçok hastada bu tedaviler sadece kısa vadeli faydalar sağlar ve birçok büyük cerrahi prosedürler için yeterince sağlıklı değildir. Bu çalışma, biz diyabetik hastalık durumu bağlamında cerrahi ligasyon yoluyla tavşanların periferik iskemi nesil birleştirir periferik vasküler hastalık hedefleyen yeni tedaviler test için bir preklinik hayvan modeli tarif.
Tavşanların arka ekstremite iskemi modeli, obstrüktif vasküler hastalıklar için fizyolojik bir model olarak, insan çalışmalarına ise yarım yüzyıl5,6‘ dan fazla klinik öncesi öncüsü olarak kullanılmıştır. Tavşanlar genellikle ayak bileği ve buzağı kas gelişmiş kas nedeniyle periferik iskemi üzerinde çalışmalar için tercih edilen bir türüdür, toynaklı olan ortak büyük hayvan modellerinin aksine (Toynaklı hayvanlar). Birkaç son değerlendirmeleri insanlarda bu model ve diğerlerinin kullanımı ele alınmıştır periferal vasküler hastalık insanlar7,8. Tavşan içinde arka ekstremite iskemi kullanarak benzer modeller büyüme faktörleri preklinik çalışmalarda kullanılmıştır9,10,11,12,13,14, 15,16,17,18,19,20, gen terapisi21,22,23, 24,25,26,27,28,29,30,31,32, 33,34,35,36,37,38,39,40,41, 42,43,44ve kök hücreler45,46,47,48,49,50 ,51ekstremitelerde terapötik neovaskülarizasyon için. Ne yazık ki, bu başarılı hayvan çalışmalarını izleyen klinik çalışmalarda52hastalar için önemli avantajlar göstermiyor.
Bu translasyonel başarısızlık nedeni bir önerilen açıklama insan hastalarında periferik iskemi durumu anjiyojenik sinyallere direnç içeren biridir53,54,55, 56 , 57 , 58 , 59. çeşitli çalışmalar diyabet ve hiperglisemi anjiyojenik sinyalizasyon yolları kusurları göstermiştir. Diyabet ve hiperlipidemi heparan sülfat proteoglikanlar kaybı ve heparan sülfat kesilmiş enzimlerin bir artış yol, büyüme faktörleri ile terapötik anjiyojenesis/arteriogenesis direnci için potansiyel bir mekanizma sunan60 , 61. böylece, periferik iskemi için bir modelin önemli bir özelliği terapötik direnç bir yönü içermelidir, böylece tedaviler insan hastalarında mevcut hastalık durumu bağlamında değerlendirilebilir.
Bu çalışma, biz femoral arterlerin cerrahi ligasyon yoluyla periferik iskemi bir tavşan modeli açıklanmaktadır. Diyabet ve hiperlipidemi indüksiyon ile bir kurşun dönemi modele dahil edilir. Biz diyabet olmadan daha yüksek yağ diyet içeren başka bir modele bu modeli karşılaştırıldığında ve diyabet ve hiperlipidemi alt düzeyi ile model kan damarının büyümesini azaltarak daha etkili olduğunu bulundu. Modelimiz, periferik vasküler hastalık araştırmalarında tutarlı sonuçlar elde etmek için pratik ve standartlaştırılmış bir yöntem sağlama amacı ile ayrı gruplar tarafından kullanılan gelişmeleri birleştirir.
Diyabet ve hiperlipidemi ile tavşanların arka ekstremite iskemi inducing için bir preklinik model sundu. Birçok çalışmada, tavşan arka ekstremite iskemi oluşturmak için kullanılan tekniği belirsizlik vardır. Fareler içinde, arka ekstremite iskemi şiddeti ve kurtarma son derece yer ligasyon ve teknik iskemi ikna etmek için kullanılan bağlıdır. Bu çalışmanın sunulan tekniğin önemi, diyabetik hayvanlarda 8 hafta sonra tam olarak kurtarmaz iskemi tutarlı indüksiyon için izin olmasıdır. Özellik…
The authors have nothing to disclose.
Yazarlar minnetle Savunma Bakanlığı Kongre yönettiği araştırma programı (DOD CDMRP aracılığıyla fon kabul; W81XWH-16-1-0582) ABB ve RS için. Yazarlar ayrıca Amerikan Kalp Derneği (17IRG33410888), DOD CDMRP (W81XWH-16-1-0580) ve Sağlık Ulusal Enstitüleri (1R21EB023551-01; 1R21EB024147-01A1; 1R01HL141761-01) ABB için fon kabul eder.
0.9% Sodium Chloride | Henry Schein Medical | 1537468 / 1531434 | 250 mL bag / 1000 mL irrigation btl |
1 mL Syringe | VWR | BD309628 | |
10 mL Syringe | VWR | BD309695 | |
10% Formalin | Fisher-Scientific | 23-245684 | |
18G Needle | VWR | 89219-294 | |
20G Needle | VWR | 89219-340 | |
25G Needle | VWR | 89219-290 | |
27G Needle | VWR | 89219-288 | |
5 mL Syringe | VWR | BD309646 | |
5% Dextrose | Patterson Veterinary | 07-800-9689 | |
Acepromazine | Patterson Veterinary | VEDC207 | |
Alfaxalone | Patterson Veterinary | 07-891-6051 | |
Alginate | Sigma-Aldrich | PHR1471-1G | |
Alloxan Monohydrate | Sigma-Aldrich | A7413 | |
Angiography Equipment | Toshiba | Infinix-i | |
Angiography Injector | Medrad | ||
Anti-Mouse Ab Alexa 594 | Thermo Fisher Scientific | A-11032 | Secondary Antibody for IHC |
Anti-Rabbit Ab Alexa 488 | Thermo Fisher Scientific | A-11008 | Secondary Antibody for IHC |
a-SMA Antibody | Abcam | ab5694 | Primary Antibody for IHC |
Baytril | Bayer Animal Health | 724089904201 | Enrofloxacin |
Blood Chemistry Panel | IDEXX | 2616 | Rabbit Panel |
Blood Pressure Cuff | WelchAllyn | Flexiport Disposable BP Cuff-infant size 7 | |
Blood Pressure Monitor | Vmed Technology | Vmed Vet-Dop2 | |
Bupivacaine | Henry Schein Medical | 6023287 | |
Buprenorphine | Patterson Veterinary | 42023017905 | |
Buprenorphine SR | ZooPharm | ||
Calcium Sulfate | CB Minerals | Food and Pharmaceutical Grade USP and FCC | |
Chlorhexidine Scrub | Patterson Veterinary | 07-888-4598 | |
Chloroform | Fisher-Scientific | C298-4 | |
Cholesterol | Sigma-Aldrich | C8503 | |
DAPI | Thermo Fisher Scientific | 62248 | |
Ear Vein Catheter | Patterson Veterinary | SR-OX165 | Surflo IV catheters |
Endotracheal tube | Patterson Veterinary | Sheridan Brand, Depends on Rabbit Size | |
Glucometer | Amazon | B001A67WH2 | Accu-Chek Aviva |
Glucometer Test Strips | McKesson Medical-Surgical | 788222 | Accu-Chek Aviva Plus |
Guidewire | Boston Scientific | 39122-01 | |
Hair Clippers | Amazon | B000CQZI3Q | Oster #40 blade |
Heating Pad | Cincinnati Subzero | 273 | |
Heating Pad Pump | Gaymar | Gaymar T/Pump | |
Hemostat | Fine Science Tools | 13009-12 | Curved Mosquito Hemostat |
Heparin | Patterson Veterinary | ||
Insertion Tool | Merit Medical Systems | MAP550 | metal wire insertion tool |
Insulin | HPB Pharmacy | Novalin R & Novalin N | |
Insulin Syringes | McKesson Medical-Surgical | 942674 | |
Introducer | Cook Medical | G28954 | 3F Check Flo Performer Introducer |
Isoflurane | Henry Schein Medical | 1100734 | |
Ketamine | Patterson Veterinary | 856440301 | |
Lactated Ringers | McKesson Medical-Surgical | 186662 | |
Lidocaine | McKesson Medical-Surgical | 239936 | |
Lidocaine/Prilocaine cream | McKesson Medical-Surgical | 761240 | |
Ligaloop | V. Mueller | CH117 / CH116 | White Mini / Yellow Mini |
Mazola Corn Oil | Amazon | B0049IIVCI | |
Medrad Syringe | McKesson Medical-Surgical | 346920 | 150 mL |
Meloxicam | Patterson Veterinary | ||
Metal ball sutures | Ethicon-Johnson & Johnson | K891H | 4-0 silk C-1 30" |
Metzenbaum Scissors | Fine Science Tools | 14019-13 | |
Midazolam | Henry Schein Medical | 1215470 | |
Nitroglycerin | McKesson Medical-Surgical | 927528 | |
PECAM Antibody | Novus Biologicals | NB600-562 | Primary Antibody for IHC |
Perfusion Pump | Masterflex | ||
Pigtail Catheter | Merit Medical Systems | 1310-21-0053 | 3F pigtail |
Polydioxanone (PDS II) suture | McKesson Medical-Surgical | 129271 | 4-0 taper RB-1 (needle comes on suture) |
Polydioxanone (PDS II) suture | McKesson Medical-Surgical | 129031 | 4-0 reverse cutting FS-2 |
Polyglactin 910 (Vicryl) suture | Butler | 7233-41 | 3-0 taper RB-1 |
Polyglactin 910 (Vicryl) suture | McKesson | 104373 | 4-0 reverse cutting FS-2 |
Rabbit Chow (Alfalfa) | LabDiet | 5321 | |
Rabbit Restrainer | VWR | 10718-000 | |
Rib Cutters | V. Mueller | ||
Scalpel | Fine Science Tools | 10003-12 | |
Scalpel Blade | Fine Science Tools | 10015-00 | #15 blade |
Silk Sutures | Ethicon-Johnson & Johnson | A183H | 4-0 silk ties 18" |
Stainless Steel Ball | McMaster-Carr | 1598K23 | 3-mm diameter |
Surgical Drapes | Gepco | 8204S | |
Syringe Pump | DRE Veterinary | Versaflow VF-300 | |
Visipaque contrast media | McKesson Medical-Surgical | 509055 | |
Weitlaner Retractor | Fine Science Tools | 17012-13 |