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Behavior

Una batteria di Test comportamentali per la valutazione ripetuta di abilità motorie, l'umore e cognizione in topi

Published: March 2, 2019 doi: 10.3791/58973
Automatic Translation
1,2,3, 3, 3
1Nanjing Key Laboratory of Pediatrics, Children's Hospital of Nanjing Medical University, 2Nanjing Key Laboratory of Pediatrics, Nanjing Medical University, 3Laboratory of Neurodegenerative Disease, Li Ka Shing Faculty of Medicine, University of Hong Kong, Pokfulam, Hong Kong Special Administrative Region (HK SAR)

Summary

Una batteria di test del comportamento globale delle capacità motorie, umore — tra cui l'interazione sociale, depressione e ansia — e cognizione è progettato per la valutazione ripetuta di cambiamenti comportamentistici neurodegeneration in topi.

Abstract

Studi farmacologici e tossicologici in neurodegeneration richiedono analisi completa del comportamento in topi perché motore disfunzioni e disfunzioni nell'umore e cognizione sono comuni e spesso condiviso i sintomi nelle malattie neurodegenerative. Qui è illustrata una batteria di test comportamentali per motore, umore e cognizione, che può essere ripetutamente testato in uno studio longitudinale. Questa batteria valuta il fenotipo nel complesso comportamentale in topi esaminando ogni dominio di comportamento con almeno due test indipendenti ben accettato (cioè, test di campo aperto e rotarod test per funzione motoria, test di interazione sociale, elevato più prova del labirinto, e prova forzata di nuotata per funzione emotiva e prova del labirinto dell'acqua di Morris e test di riconoscimento di nuovi oggetti per la funzione conoscitiva). Pertanto, questa batteria di test sensibili e completo è un potente strumento per lo studio dell'alternanza del comportamento nella neurodegenerazione.

Introduction

Malattie neurodegenerative caratterizzato devastanti sintomi comportamentali, tra cui danno conoscitivo, disfunzioni di umore quali ansia e depressione o disfunzione del motore1. La patogenesi di vari tipi di malattie neurodegenerative è poco chiaro2. Accumulativi studi indicano che i fattori genetici e ambientali potrebbero entrambi contribuiscono alla patogenesi di malattie neurodegenerative. Identificare il fattore di rischio della neurodegenerazione richiede analisi comportamentale. Anche se ogni tipo di malattia neurodegenerative ha suo sintomo comportamentale di firma (ad es., morbo di Alzheimer [annuncio] è descritto con danno conoscitivo e morbo di Parkinson [PD] con disfunzione del motore). Con la progressione della malattia, i pazienti manifestano comorbidità di anomalie comportamentali differenti3. Ad esempio, pazienti dell'annuncio mostrano sintomi di disfunzione di umore in fase avanzata4,5. I pazienti PD possono progredire in demenza senile su PD e sviluppare il danno conoscitivo6. Basato su queste caratteristiche, l'analisi comportamentale in modelli di neurodegenerazione è solitamente completo e ripetuti.

Per raggiungere questo obiettivo, una batteria che contiene prove comportamentistiche classiche e ampiamente utilizzati con validità eccellente è stata progettata per l'analisi del comportamento in motore, umore e cognizione. La funzione del motore possa essere verificata il campo aperto prova7,8 e accelerazione rotarod test. Disfunzione di umore, compreso disfunzione sociale, depressione e ansia, sono più comunemente osservati in neurodegenerative malattie5. Quindi, questa batteria include un test di interazione sociale per socialità9, l'elevato più prova del labirinto per ansia10e la prova forzata di nuotata per depressione11. Il danno conoscitivo è uno dei sintomi più caratteristici nelle malattie neurodegenerative quale l'annuncio e di demenza lobare frontotemporale12. Dominii conoscitivi, compreso la memoria a breve termine e memoria episodica, sono suscettibili di neurodegenerazione13,14,15. Di conseguenza, la prova del labirinto dell'acqua di Morris per apprendimento spaziale e memoria16 e il test di riconoscimento di oggetto romanzo per a breve termine memoria17 sono inclusi nella batteria. Questi test sono compatibili con a vicenda. L'ordine dei test è stato progettato per massimizzare l'assuefazione e per minimizzare le interferenze, per aumentare ulteriormente la compatibilità all'interno della batteria. Dal momento che ogni funzione è testato da almeno due prove indipendenti che sono diversi in linea di principio e di metodo, i risultati di ogni test possono essere ulteriormente convalidati. Inoltre, i protocolli di alcuni test sono evidenziati per le prove ripetute, facilitando lo studio longitudinale dello sviluppo delle malattie neurodegenerative. Pertanto, questa batteria di test di comportamento studi diversi sottodomini di cambiamenti comportamentali visti nelle varie fasi della neurodegenerazione mentre costano un numero minimo di animali. Questa batteria è stata utilizzata in uno studio longitudinale che ha valutato i cambiamenti comportamentali in giovane adulto (3 mesi) maschio C57BL/6N topi dopo l'esposizione respiratoria di nanoparticelle di silice, un rischio professionale che è un fattore di rischio potenziale di neurodegenerazione18. Tuttavia, altri ceppi o modelli, ad esempio topi invecchiati e manipolato geneticamente topi, potrebbero comportarsi in modo diverso rispetto ai giovani topi C57BL/6N. Pertanto, cautela può essere necessaria quando si utilizza questa batteria in questi topi.

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Protocol

Tutti i metodi descritti qui sono stati approvati dal Comitato per l'uso degli animali vivono nell'insegnamento e nella ricerca (CULATR), l'Università di Hong Kong.

1. protocollo generale

Nota: Questa sezione è basata su Deacon19.

  1. Configurazione del comportamento room
    1. Sbarazzarsi di stimolazione indipendenti/distrazione, con luce diretta brillante sull'apparato sperimentale, odore, rumore e altri animali irrilevante, in camera comportamentale (che dovrebbe essere circa 10 m2 con regolabile illuminazione e, preferibilmente, avere un anticamera).
      Nota: Dato che il mouse è un animale notturno, illuminazione inferiore 15 lux nel test di campo aperto, romanzo oggetto riconoscimento test e test di interazione sociale potrebbe ridurre al minimo lo stress/interferenza dalla luce e aiutare il topo a concentrarsi sul test.
    2. Impostare la fotocamera per la registrazione di almeno 1,5 m dal pavimento, assicurandosi che sia fuori dalla vista del mouse test video.
  2. Alloggiamento e assuefazione
    1. Casa del gruppo i topi in un'unità animale sotto osservazione (ad es., stabulazione in gruppo il non più di quattro topi adulti).
      Nota: Qui, sono stati utilizzati topi C57BL/6N del 3-mese-vecchio maschio e alloggiati in una gabbia di 1144B. Escludere i topi malati, feriti o gravemente stressati. Esperienze di fame, sete o bullismo possono influire sulle prestazioni del mouse.
    2. Organizzare per lo stesso animale gestore di effettuare tutti i test comportamentali, per diminuire la variabilità. Eseguire il trasporto, manipolazione e sperimentare durante il ciclo di luce da 7:00 a 19:00 Se possibile, organizzare tutte le altre manipolazioni, ad esempio la somministrazione di qualsiasi droga/tossina (ad es., intranasale instillazione di nanoparticelle di silice) o gabbia-pulizia, dopo il test.
    3. Rietichettare le gabbie con numeri casuali per accecare lo sperimentatore prima di ogni esperimento. Habituate i topi all'ambiente sperimentale in camera comportamentale per 15-30 min nelle loro gabbie di casa. Tenere le gabbie di casa in camera comportamento durante l'intero esperimento.
    4. Prima di iniziare l'esperimento, è possibile mettere un mouse C57BL/6N non sperimentali nell'apparato in modo che la condizione sperimentale per il primo mouse è lo stesso come il resto. Quindi, pulire l'apparecchio come segue: rimuovere l'urina e le feci con una salvietta di carta pulita, pulire il dispositivo sperimentale con acqua di rubinetto e poi, coprire l'odore lasciato dal mouse strofinando l'apparato con un tovagliolo di carta leggermente spruzzato con etanolo al 70%.
    5. Per ridurre al minimo la distrazione causata dallo sperimentatore, chiedere lo sperimentatore per lasciare la stanza del comportamento durante la registrazione video, o rimanere dietro le quinte durante la prova del labirinto dell'acqua di Morris.
  3. Disposizione di test comportamentali
    1. Organizzare il test comportamento nell'ordine come mostrato in Figura 1A. Prevede di eseguire i test intervallati da 24 h, tranne che per l'elevato più prova del labirinto.
      Nota: Poiché l'intera procedura richiede fino a 2 settimane, è possibile semplificare la batteria scegliendo tra simili prove prima applicazione in uno studio acuto o a breve termine.
      Attenzione: Il test di campo aperto di giorno 2 assicura corretta assuefazione per il test di riconoscimento di oggetto romanzo. Prova il test di nuoto forzato ultimo come può causare stress nei topi C57BL/6N.

2. BehavioralTest protocollo

  1. Test di campo aperto8,18,19,20
    1. Eseguire il test di campo aperto in un 60 cm (lunghezza [L]) x 60 cm (larghezza [W]) x arena plastica bianco non trasparente di 40 cm (altezza [H]).
      Nota: Utilizzando più arene può aumentare la velocità effettiva del test.
    2. Avviare la registrazione di fotocamera e delicatamente mettere il mouse accanto al centro di un muro dell'arena, di fronte a quel muro stesso. Registrare il comportamento del mouse per 10 min prima di tornare alla gabbia a casa. Pulire l'apparecchio come descritto al punto 1.2.4.
      Nota: Il punto di inizio nel campo aperto test può anche essere al centro dell'arena. Essere coerenti tra i topi.
    3. Ripetere fino a quando tutti i topi finire il protocollo. Controbilanciare l'ordine di prova tra i gruppi.
    4. Eseguire l'analisi dei dati come segue.
      1. Dividere l'arena in quattro quadrati di quattro quadrati (griglia immaginaria) sullo schermo del computer. Per valutare la funzione dell'apparato locomotore, contare il numero di linee incrociate con il mouse nell' arena19.
        Nota: La definizione di "attraversando una linea" è quando entrambi gli arti posteriori attraversarlo. Questa definizione vale anche per l'elevato più prova del labirinto.
      2. Misurare il tempo trascorso nella zona centrale come un indicatore di ansia. La zona centrale è le quattro piazze nel centro dell'arena.
        Nota: Parametri aggiuntivi, ad esempio di allevamento (entrambi zampe anteriori da terra, con zampe anteriori contro una parete o in piedi), latenza al primo posteriore e governare e congelamento indicano l'emotività del mouse.
      3. In alternativa, utilizzare un software di monitoraggio, come descritto in dettaglio da Seibenhener e Wooten8, per misurare la distanza percorsa, la velocità e il tempo trascorso in zona centro.
  2. Accelerando il rotarod test18
    1. Eseguire il giorno 3 formazione dell'accelerazione rotarod test prima di qualsiasi trattamento di farmaci o tossina/modellazione/inizio della malattia e la funzione del motore di prova per 1 giorno, come previsto nella Figura 1A.
      Nota: Il mouse riceve tre prove al giorno durante l'allenamento e test. Ogni prova inizia con la rotazione dell'asta e termina con il trascinamento del mouse.
    2. Posizionare l'apparato rotarod sul banco nella sala del comportamento. Evitare l'illuminazione diretta all'apparecchiatura. Programmare l'apparecchiatura come a partire da 4 giri e accelerando a 40 giri al minuto entro 5 min.
    3. In ogni prova, mettere il mouse sull'asta statico, rivolto verso la parete della macchina. Avviare il dispositivo quando il mouse è depositato. Interrompere il dispositivo una volta che il mouse scende e registrare il tempo trascorso il mouse sull'asta. Ripetere immediatamente per un altro due prove prima di tornare indietro il mouse dalla gabbia.
    4. Ripetere la procedura su altri topi.
    5. Misurare il tempo medio speso sull'asta di tre prove durante i test per valutare la funzione motoria.
      Nota: Il tempo medio sull'asta durante la terza giornata di formazione è la linea di base della funzione motoria.
  3. Interazione sociale prova18
    1. Per la prova di interazione sociale, utilizzare un'arena di campo aperto con due alloggiamenti trasparente identici (8 cm [L] x 6 cm [W] x 12 cm [H]) con fori sulla superficie — e un mouse romanzo (helper) che è un conspecifico giovanile dello stesso sesso che non ha avuto alcun contatto precedente con la mouse di soggetto. Figura 1B Mostra lo schema della procedura. Pulire l'arena e gli alloggiamenti come descritto al punto 1.2.4.
      Nota: Il romanzo mouse non può essere un compagno littermate o gabbia del mouse oggetto. È sano e stabulati in gruppo. Habituate il mouse romanzo alla camera comportamentale per 15-30 minuti come descritto al punto 1.2.3.
    2. Posizionare separatamente le due camere al centro di due pareti opposte dell'arena. Introdurre il mouse soggetto nell'arena come descritto al punto 2.1.2 ed è mostrata nella Figura 1B, per un'esplorazione di 3 min. Tornare il mouse oggetto dalla gabbia e rimuovere qualsiasi urina o feci nell'arena.
    3. Mettere l'helper in uno degli alloggiamenti. Reintrodurre il mouse soggetto all'arena e registrare per 3 minuti dopo, ritorno entrambi i topi a ciascuna la propria casa. Ripetere le procedure con altri topi di soggetto come descritto sopra.
      Nota: Controbilanciare il lato dell'helper o lo si assegna in modo casuale all'interno del gruppo.
    4. Dal video, stimare il parametro che descrive l'attività di interazione sociale dei topi come thelper/tvuoto, ovvero il rapporto tra tempo interagendo con la camera di helper (thelper) e il vuoto uno (tvuoto), o utilizzare il riconoscimento Indice thelper/ (thelper + tvuota).
      Nota: Un'interazione tra il mouse di soggetto e la camera è definita come quando il naso del mouse è all'interno di 2 cm di camera di scoppio e puntando verso di essa.
  4. Elevato più la prova del labirinto 10
    1. Condurre l'elevato più test il giorno stesso dopo che tutti i topi sono testati nel campo aperto test del labirinto. Pulire l'apparecchio come descritto al punto 1.2.4.
      Nota: La configurazione di elevato e il labirinto è un "+"-forma. Ha due braccia aperte (30 x 5 cm x 0,5 cm) di fronte l'altro e perpendicolare a due braccia chiuse (30 x 5 x 16 cm), con una piattaforma del centro (5cm x 5cm x 0,5 cm). Il labirinto è elevato a 40 cm dal suolo.
    2. Posizionare il mouse all'incrocio dei bracci aperti e chiusi, rivolto verso il braccio aperto che è opposta allo sperimentatore (Figura 1). Registrare il comportamento per 5 min prima di tornare il mouse dalla gabbia. Ripetere fino a quando tutti i topi sono testati.
      Nota: Entra il labirinto con il suo viso a braccia aperte potrebbe aumentare l'esplorazione del mouse delle braccia aperte.
    3. Misurare il tempo trascorso il mouse a braccia aperte (taprire) e tra le braccia chiuse (tchiudere) basate sul video: taprire/tchiudere indica il livello di ansia.
  5. 11 di prova forzata di nuotata
    1. L'apparato della prova forzata di nuotata è un serbatoio cilindrico che è alto 30 cm e 20 cm di diametro. Riempire il serbatoio fino a 15 cm di altezza con acqua di rubinetto a temperatura ambiente (23-25 ° C).
      Nota: Utilizzare acqua fresca per ogni mouse.
    2. Avviare la registrazione video e delicatamente mettere il mouse in acqua, al centro dell'apparato. Registrare il video per 6 min prima di mettere il mouse indietro nella sua gabbia a casa sotto la luce a infrarossi.
      Nota: Non disturbare il mouse da annegamento o torcendo la coda.
    3. Misurare il tempo dell'immobilità negli ultimi 5 minuti del video registrato. Mobilità significa qualsiasi movimenti diversi da quelli richiesti per bilanciare il corpo e tenere la testa sopra l'acqua.
  6. Riconoscimento di oggetti nuovi test17,18
    1. Impostare il test di riconoscimento di oggetto romanzo per includere 2 giorni di assuefazione, 1 giorno di familiarizzazione e 1 giorno di test (Figura 1); ogni sessione è 10 min per topo, e l'intervallo di intersessione è 24 h.
      Nota: L'assuefazione usando la prova di campo aperto viene eseguita come descritto nella sezione 2.1. Il mouse interagisce con due oggetti identici (vecchi oggetti) nella familiarizzazione. Nel test, il mouse interagisce con uno dei vecchi oggetti e un nuovo oggetto, entrambi collocati nella stessa posizione degli oggetti nella familiarizzazione. L'apparato del test di riconoscimento di oggetto romanzo comprende un'arena di campo aperto e due set di oggetti. Ogni set contiene due oggetti identici (oggetti A e A e gli oggetti B e B). Gli oggetti A e B sono di dimensioni simili ma diverse texture (vetro/plastica/carta), forma (rotonda/cubico) e colore (chiaro/scuro). Gli oggetti devono essere inodore e abbastanza grande per il mouse esplorare entro 10 min. Le dimensioni appropriate per topi C57BL/6N adulti sono di 8 cm di altezza e diametro di 5 cm wide/a.
    2. Segnare le posizioni dei due oggetti in familiarizzazione e test, che sono di 5 cm dal lato e 7 cm dalla parte superiore dell'arena.
      Nota: Segnare la posizione della sera prima la familiarizzazione per evitare l'odore del marcatore.
    3. Nella familiarizzazione, il mouse interagisce con una serie di oggetti identici. Pulire l'arena e gli oggetti come descritto al punto 1.2.4 prima di posizionare il mouse nell'arena, al centro della parete di fronte, come mostrato in Figura 1. Record per 10 min prima di tornare il mouse dalla gabbia. Ripetere fino a quando tutti i topi sono rifiniti e restituiscono tutte le gabbie all'unità degli animali.
      Nota: Controbilanciare gli oggetti utilizzati nella familiarizzazione all'interno del gruppo per diminuire la distorsione (per esempio, topi n. 1 e 2 Esplora oggetti A e A e topi n ° 3 e 4 esplorare gli oggetti B e B; in questo modo, l'oggetto romanzo è oggetto B per topi n. 1 e 2 e un oggetto per i topi No. 3 e 4).
    4. Eseguire il test 24 h dopo la familiarizzazione. Utilizzare la stessa procedura per quanto riguarda la familiarizzazione, tranne sostituire uno degli oggetti con uno da un altro set (Figura 1). Ripetere fino a quando tutti i topi hanno eseguito il test e, successivamente, restituiscono tutte le gabbie all'unità animale.
      Nota: Controbilanciare il lato del nuovo oggetto all'interno del gruppo per diminuire la distorsione (ad esempio, introdurre topi n. 1 e 3 agli oggetti A e B e topi n ° 2 e 4 agli oggetti B e A). In questo modo, l'oggetto romanzo illustrato sul lato destro per topi n. 1 e 4 e a sinistra per topi n. 2 e 3. Qui, il lato sinistro è il lato sinistro dello sperimentatore, quando di fronte all'arena.
    5. Misurare il tempo che ogni mouse interagisce con il nuovo oggetto (tnuovo) e l'oggetto precedente (tvecchio) separatamente, da riprese video in fase di test. Un'interazione tra l'animale e l'oggetto è descritto nella nota seguente passaggio 2.3.4. Calcolare la memoria del mouse come la preferenza all'oggetto romanzo = tnuovo/tvecchio; o tnuovo/ (tnuovo + tvecchio).
      Nota: tnuovo/tvecchio è uguale a 1 o tnuovo/ (tnuovo + tvecchio) è uguale a 0,5 significa che il mouse ha alcuna preferenza per l'oggetto romanzo (cioè, compromissione della memoria). Il tempo di interagire con oggetti nella familiarizzazione può servire come un controllo dell'esperimento. Il tempo totale indica l'attività di esplorazione del mouse, e tsinistra/tdestra suggerisce polarizzazione spaziale.
  7. Labirinto di Morris acqua prova16
    1. Impostare l'apparecchio come segue.
      1. Mettere il labirinto di acqua, una piscina circolare (di 120 cm di diametro e 60 cm di profondità), al centro di una stanza del comportamento e segnare la posizione del labirinto per garantire che la posizione rimane la stessa durante l'intero esperimento.
      2. Dividere il labirinto in quattro quadranti uguali immaginarie. Appendere gli indicatori visivi (ad esempio, cerchio, quadrato, triangolo e Pentagono) al centro di ogni quadrante, 130 cm sopra il pavimento e 53 cm dalla parete del labirinto.
        Nota: Il labirinto e la stecca deve stare nella stessa posizione durante l'intera prova, quindi il mouse può formare accurata memoria spaziale.
      3. Posizionare una piattaforma 25 cm dalla parete, al centro del quarto quadrante e segnare la posizione. La piattaforma per il mouse è di 10 cm di diametro.
        Nota: La posizione e il diametro della piattaforma determina la difficoltà del compito. Il più vicino è alla parete del labirinto, o la più grande piattaforma, più facile il compito.
      4. Riempire il labirinto di acqua con acqua (con una temperatura di 23 a 25 ° C, colorati nel bianco e opacizzato da cibo e latte in polvere sbiancante in polvere) fino a quando il livello dell'acqua è 1 cm più alto rispetto alla piattaforma. Portare i topi in camera comportamentale per 15-30 min di assuefazione, come indicato al punto 1.2.3 e accendere la luce a infrarossi sopra le gabbie, che verrà utilizzato per asciugare i topi.
        Nota: Coprire la parte superiore della piattaforma con panno bianco e la rete in modo che il mouse può facilmente salire su di esso. Assicurarsi che non vi sia alcuna illuminazione diretto sopra l'acqua.
    2. Eseguire la fase di addestramento come segue.
      1. La fase di formazione dura 5 giorni, quattro prove al giorno. Semicasuale organizzare i punti di partenza ogni giorno, come dimostrato in letteratura16. Questo sforzo impedisce che il mouse che istituisce memoria associativa, che è il modo più comune per "barare" nel test.
      2. All'inizio di ogni prova, avviare la registrazione video e delicatamente mettere il mouse in un labirinto.
        Nota: Non rilasciare il mouse nel serbatoio o torcere la coda, che può causare disorientamento e ulteriore stress.
      3. Chiedere lo sperimentatore a rimanere fuori dalla vista del mouse e tornare a prendere il mouse torna alla sua gabbia a casa quando uno qualsiasi dei seguenti accade: (i) il mouse non posso individuare la piattaforma entro 60 s; (ii) il mouse rileva la piattaforma all'interno di 60 s e rimane su di esso per 10 s. Nella circostanza (i), chiedere lo sperimentatore a posizionare il mouse sulla piattaforma e lasciate stare lì per 10 s.
        Nota: Punto (ii) significa che il mouse si trova con successo la piattaforma.
      4. Interrompere il video e mettere il mouse indietro nella gabbia casa sotto la luce a infrarossi.
        Nota: Mantenere la temperatura corporea dei topi è fondamentale per le loro prestazioni ipotermia sottolinea topi e può interessare i seguenti test.
      5. Ripetere la procedura con un altro mouse.
      6. Basato sul video, record della latenza di fuga, che è la durata del periodo che il mouse lo spende nel labirinto, il labirinto fino al momento di entrare con successo individua la piattaforma. Se il mouse non riesce a trovare la piattaforma o rimane lì per meno di 10 s a 60 s, la latenza di fuga conta come trama s. 60 la curva di apprendimento contro le giornate di formazione con la latenza media di fuga al giorno.
        Nota: La latenza di fuga non include i 10 s trascorrere sulla piattaforma.
    3. Eseguire la fase di sonda come segue.
      1. Il sesto giorno di prova del labirinto dell'acqua di Morris, impostare l'apparecchio come descritto al punto 2.7.1., scattare una foto del labirinto per registrare la posizione della piattaforma e quindi rimuovere la piattaforma dal serbatoio.
      2. Avviare la registrazione video e delicatamente mettere il mouse in un labirinto nel quadrante diagonalmente opposto del quadrante di destinazione.
      3. Chiedi lo sperimentatore a rimanere fuori dalla vista del mouse durante la registrazione video di 1 min. In seguito, hanno lo sperimentatore prendere il mouse fuori dal labirinto e rimetterlo in gabbia a casa.
      4. Utilizzare l'immagine scattata a passo 2.7.3.1. come riferimento per misurare la durata di qualsiasi passaggio di piattaforma. Il tempo di durata che il mouse rimane nel quadrante destinazione (tdestinazione), secondo il video. Il tempo totale è ttotale. Misurare la preferenza nel quadrante di destinazione come t destinazione/ttotale.

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Representative Results

Questa batteria di test comportamentali è stata progettata per l'analisi completa e valida del comportamento del motore, l'umore e cognizione, che sono comunemente colpiti in neurodegeneration5. Abbiamo applicato questa batteria per studiare i cambiamenti comportamentali in giovani topi C57BL/6N adulti dopo l'esposizione respiratoria di nanoparticelle di silice per 1 mese e 2 mesi18. I risultati hanno rivelato che topi C57BL/6N esposti alle nanoparticelle di silice ha mostrato vari cambiamenti comportamentali dopo18i tempi di esposizione differente. Brevemente, i risultati nei test di campo aperto (Figura 2A) e l'accelerazione rotarod test (Figura 2B) hanno dimostrato che l'esposizione di nanoparticelle di silice non ha colpito la funzione dell'apparato locomotore o motore in topi, che indica una piena capacità di realizzare le altre prove. Attività di interazione sociale è stata colpita dopo un'esposizione di 1 mese di nanoparticelle di silice (Figura 2). Considerando l'ansia o la depressione diminuirebbe anche socialità, abbiamo analizzato i dati del test campo aperto, elevati e una prova del labirinto (Figura 2DE) e la prova forzata di nuotata (Figura 2F), che non indicano alcuna comorbidità di ansia o depressione al punto di tempo 1 mese. Un mese 2 l'esposizione alle nanoparticelle di silice ha provocato ansia secondo il risultati in elevato più la prova del labirinto (Figura 2E). Una simile tendenza è stata indicata la durata di zona centrale del campo aperto test (Figura 2D). Danno conoscitivo inoltre è stato rilevato nella prova del labirinto dell'acqua di Morris e test di riconoscimento di oggetto romanzo dopo un'esposizione di 2 mese (Figura 3). Si deve osservare che il protocollo era leggermente diverso nelle due prove della prova del labirinto dell'acqua di Morris. Una lampada supplementare è stato aggiunto nella seconda prova, così tutti i topi sempre alloggiato sotto la lampada per tenere in caldo. Quindi, nessun nonperformer è stato indicato nella seconda prova, mentre due degli otto topi è diventato nonperformers nel test sonda nella prima prova.

Abbiamo regolato il protocollo di modo che la maggior parte delle prove della batteria può essere testata ripetutamente. La chiave è mantenere la motivazione dei test. Test come test di interazione sociale, test di riconoscimento di oggetto romanzo ed elevato più prova del labirinto è motivato da novità (cioè, un romanzo giovanile helper, nuovi oggetti e un ambiente novello, rispettivamente). Mantenendo la novità nel protocollo, i giovani topi C57BL/6N adulti ha mostrato una performance coerenza quando testato nuovamente dopo 1 mese. Secondo i nostri dati, quando presentare a due aiutanti differenti nei due studi, topi ha mostrato costantemente una preferenza maggiore di dieci volte all'helper rispetto alla camera di vuoto nell'interazione sociale test (Figura 4A). Nel test di riconoscimento di oggetto romanzo, i topi normali preferiscono costantemente l'oggetto romanzo l'oggetto precedente (Figura 4B). Tuttavia, nell'elevato più prova del labirinto, quando testato di nuovo nello stesso ambiente dopo 1 mese, l'esplorazione è sceso da metà (Figura 4)10. Teoricamente, giovani topi C57BL/6 adulti possono essere testati ripetutamente in questi test finché la condizione sperimentale, tra cui la novità e lo stato dei topi, rimane lo stesso. Abbiamo ripetuto questi test ogni mese per fino a tre volte nel nostro laboratorio. Degno di nota, la prova del labirinto dell'acqua di Morris non può essere testata più volte nello stesso gruppo di giovani topi C57BL/6N adulti come l'esperienza significativamente interferisce con le prestazioni quando ripetutamente testato. Secondo i nostri dati, i topi ricordavano ancora la piattaforma anche dopo 1 mese, mostrando la memoria spaziale corretta e a lungo termine. Quando si cambia la posizione della piattaforma, i topi con esperienza imparato più velocemente rispetto ai topi di ingenuo, come avevano imparato le regole e la strategia di ricerca dall'addestramento preliminare (Figura 4).

Figure 1
Figura 1: schemi. (A) disposizione del comportamento di test della batteria e le trame schematiche di (B) la prova di interazione sociale, (C), l'elevato plus labirinto test e (D) il test di riconoscimento di oggetto romanzo. Abbreviazioni: R = accelerazione rotarod test; DI = test di campo aperto; EPM = elevated plus maze prova; NOR = test di riconoscimento di oggetto romanzo; SI = test di interazione sociale; MWM = prova del labirinto di Morris acqua; FST = prova di nuoto forzato. Il punto di partenza del mouse nel test è mostrato dal mouse nello schema. Clicca qui per visualizzare una versione più grande di questa figura.

Figure 2
Figura 2: cambiamenti nel motore e l'umore in topi esposti alle nanoparticelle di silice per 1 mese o 2 mesi, rilevato dalla batteria di test comportamentali. Topi sono stati testati in (A e D) il test campo aperto, (B) il rotarod test, (C) la prova di interazione sociale, (E), l'elevato e una prova del labirinto e prova di nuoto (F) la forzata compresa nella batteria. N = 8, 12 o 20, che significa che ogni gruppo ha avuto 8, 12 o 20 topi, rispettivamente, come dimostrato in ogni figura. N = 17-20 significa ogni gruppo ha avuto 20 topi, ad eccezione di un gruppo di controllo a 1 mese, che ha consistito di 17 topi. Nei pannelli A, Ded E, dati in primo luogo sono stati normalizzati al controllo in ogni momento e, quindi, sono stati analizzati con due code di Student t-test. I dati nel pannello B sono stati analizzati da misure ripetute ANOVA a due vie. I dati in pannelli C e F sono stati analizzati con due code di Student t-test. Tutti i dati vengono visualizzati come dire ±S.E.M. * e * * * dire p < 0,05 e 0,0001, rispettivamente. Questi dati sono stati pubblicati in precedenza da voi et al.18. Clicca qui per visualizzare una versione più grande di questa figura.

Figure 3
Figura 3: cambiamenti nella cognizione dopo essere stati esposti alle nanoparticelle di silice per 1 mese o 2 mesi. Cambiamenti nella cognizione di topi dopo essere stato esposto a nanoparticelle di silice per (A) 1 mese o (E) 2 mesi, rilevato dal riconoscimento romanzo oggetto test. Cambia nella cognizione di topi dopo essere stati esposti alle nanoparticelle di silice per (B - D) 1 mese o (F - H) 2 mesi, rilevato da prova del labirinto dell'acqua di Morris. Topi sono stati ripetutamente testati nel test di riconoscimento di oggetto romanzo. Un batch diverso dei topi è stato testato a prova di labirinto dell'acqua Morris in diversi momenti. N = 6, 8, 12 o 20, che significa che ogni gruppo ha avuto 6, 8, 12 o 20 topi, rispettivamente, come dimostrato in ogni figura. Nei pannelli A, C, D, E, Ge H, i dati sono stati analizzati con due code di Student t-test. I dati nei pannelli B e F sono stati analizzati da misure ripetute ANOVA a due vie. Tutti i dati sono mostrati come dire ±S.E.M. * significa p < 0.05. Questi dati sono stati pubblicati in precedenza da voi et al.18. Clicca qui per visualizzare una versione più grande di questa figura.

Figure 4
Figura 4: dati rappresentativi in test. Dati rappresentativi nei test, tra cui test (A), l'interazione sociale, (B) il riconoscimento di oggetti nuovi test e (C), l'elevato più prova del labirinto, provata nei topi ingenuo (prova 1) e ripetutamente testato nello stesso batch di topi (prova 2) . (D) dati rappresentativi del labirinto dell'acqua di Morris test quando ripetutamente testato. Questa figura è stata modificata da voi et al.18. Tutti i dati sono mostrati come dire ±S.E.M. e analizzati con spaiata dello studente t-test. P < 0,001, rispetto alla prova 1. Clicca qui per visualizzare una versione più grande di questa figura.

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Discussion

Analisi del comportamento dei topi sono fondamentale per la ricerca di neurodegenerazione. Mentre la funzione conoscitiva è spesso il dominio più suscettibile di comportamento influenzato nelle malattie neurodegenerative, disfunzione di umore, come depressione ed ansia, spesso è comorbidità. Inoltre, la funzione di motore spesso influisce sull'interpretazione dei risultati in alcuni test, come il test di riconoscimento di oggetto romanzo, l'elevato plus prova del labirinto e la prova di interazione sociale. Basato su questi pensieri, una batteria di test comportamentali globale è necessaria per una valutazione complessiva e precisa dei comportamenti.

Il primo passo è scegliere il test corretto. Abbiamo incluso test ben accettato e classica, cioè la prova di campo aperto e il rotarod test per funzione motoria, l'elevato plus prova del labirinto per l'ansia, la prova forzata di nuotata per la depressione, la prova di interazione sociale per la socialità e labirinto dell'acqua di Morris test e il riconoscimento di oggetti nuovi test per cognizione. Ci sono tre prove classiche per l'ansia, vale a dire la prova di campo aperto, l'elevato plus test e il buio/luce box test. Questi test sono tutti sfruttare il conflitto tra l'innata curiosità sull'ambiente di romanzo e l'avversione al campo aperto, elevato o brillantemente illuminato. Quindi, i topi non sono condizionati dal stimoli nocivi, come scosse elettriche, odore di predator e così via. Tuttavia, abbondanti studi hanno rivelato che questi test hanno scarsa affidabilità intertest, anche all'interno di un singolo laboratorio21. Abbiamo usato il test di campo aperto ed elevato più l'analisi del labirinto per analizzare l'ansia nei topi nel più breve tempo possibile. La prova di campo aperto esamina il comportamento di ansia-come oltre alla funzione dell'apparato locomotore ed è anche l'assuefazione per il romanzo oggetto riconoscimento test e test di interazione sociale. Abbiamo scelto il più elevato del labirinto prova perché è un paradigma ben consolidato. Esso ha validità volto eccellente (fenomenologico somiglianza tra il comportamento in topi ed i sintomi in pazienti), costruire la validità (il grado in cui il test riflette l'ipotesi teoriche) e validità predittiva (la precisione di il test risultati quando traducendoli agli esseri umani)10. Se l'ansia era la priorità, i ricercatori potrebbero considerare compreso la scatola di buio/luce testare e analizzare completamente il comportamento in questi test con più parametri, come allevamento frequenza, tratto di frequentare comportamento e defecazione21. In secondo luogo, i risultati di questi test possono essere facilmente interpretati perché le motivazioni delle prove sono chiare, che sono la curiosità innata di novità o acqua, per eseguire un compito semplice in una condizione controllabile. A differenza di inedia e di allenamento, che può causare diversi livelli di motivazione nei topi, questi tipi di motivazione sono abbastanza forti per la maggior parte del mouse C57 a svolgere il compito. In terzo luogo, questi test hanno una buona compatibilità con a vicenda, perché la motivazione non è troppo stressante a causa di stress a lungo termine o addirittura permanente, come può causare scosse elettriche o privazione di cibo/acqua. Test di disperazione, tra cui la prova forzata di nuotata e il test di sospensione di coda, utilizzano il principio che il mouse si arrende lottando quando intrappolato in un ambiente di disperati. Misurando il "tempo di disperazione", le prove dire come depresso è il mouse. Topi C57BL/6N di solito mostrano 180 s di immobilità su 300 s in queste prove11,22. Abbiamo scelto il nuoto forzato prova sopra il test di sospensione coda perché è comparativamente meno stressante quando il mouse ha esperienza in acqua addestramento del labirinto. In questo modo, essi sono adattati all'acqua e sapere come prevenire l'ipotermia dopo bagnarsi. Al contrario, abbiamo osservato circa 2 g di perdita di peso del corpo durante la notte dopo la prova di sospensione di coda, che indica di grande stress. Tuttavia, ripetuti test della prova forzata di nuotata deve essere eseguita con cautela, e i topi bisogno di recuperare per un tempo più lungo di 24 h prima di ulteriori esperimenti/sacrifici. In alternativa, gli scienziati possono considerare compreso un test di preferenza di saccarosio, un paradigma utilizzato estesamente nella indotta da stress depressione-come anedonia, nella batteria. Tuttavia, il protocollo di questo test richiede giorni di assuefazione a alloggi individuali23, che può essere uno stimolo che influenza il risultato di altri test. Infine, i test qui avere ragionevole velocità effettiva. Tutti i test possono terminare entro 10 min/mouse. Quando si aumenta la quantità di attrezzature, quali l'arena di campo aperto, i canali nel rotarod test, i carri armati nel test di nuoto forzato e le corsie per il test di sospensione della coda, la velocità effettiva può essere aumentata. Anche se la prova del labirinto di Morris acqua rende difficile testare più mouse allo stesso tempo, ogni processo richiede solo ~ 60-75 s.

La preoccupazione più critica durante l'applicazione la batteria di test comportamentali è l'interferenza tra i test e lo stress da frequente manipolazione. Gli effetti negativi di questi problemi possono essere minimizzati ottimizzando ulteriormente l'ordine e l'intervallo di test. Mentre è il buonsenso che l'ordine dei test comportamentali dovrebbe essere da meno il più stressante per il mouse, alcune prove in questa batteria può essere utilizzato come acclimatazione per i seguenti test e migliorare la stabilità delle prestazioni. Ad esempio, esegue l'elevato più prova del labirinto dopo il test di campo aperto aumenta l'esplorazione del braccio aperto10. Inoltre, quando i topi vengono testati nell'ordine aperto campo test, test di riconoscimento di oggetto romanzo e test di interazione sociale, essi gradualmente habituate per l'ambiente e l'attività, tra cui la sala comportamentale, campo aperto e gli oggetti. Quindi i topi sono improbabili di manifestare la neofobia7,24,25, che significa mostrando un'insolitamente bassa interazione con l'oggetto/individuo romanzo e sono tutte adeguatamente focalizzata sul compito. Questa disposizione diminuisce la fluttuazione nei dati di test che sono motivati dalla curiosità innata. La prova del labirinto dell'acqua di Morris e la prova forzata di nuotata hanno una motivazione più forte. Quindi, i topi rischiano di essere colpiti dall'esperienza delle prove. Frequente trasporto e movimentazione durante l'intera procedura è un'altra fonte di stress, richiedendo così la corretta manipolazione degli animali e sufficiente assuefazione. Si raccomanda che l'intervallo di test della batteria dovrebbe essere almeno 24 h, così i topi possono recuperare dallo stress di questi fattori di stress26,27,28. Tuttavia, ci sono altri studi che testato topi nelle prove multiple al giorno29.

Un'altra preoccupazione circa la prova ripetuta dei comportamenti è l'influenza della precedente esperienza. Il test di campo aperto e l'accelerazione rotarod test può essere usati ripetutamente nell'analisi della funzione motoria. Novità-motivati test, tra cui l'elevato plus prova del labirinto, il test di riconoscimento di oggetto romanzo e il test di interazione sociale, può essere utilizzata ripetutamente quando la motivazione è romanzo in ogni prova, il che significa un nuovo ambiente sperimentale, coppie di oggetti , o helper, rispettivamente. Come indicato nei dati rappresentativi, topi C57BL/6N non possono essere addestrati ripetutamente nel protocollo classico della prova del labirinto dell'acqua di Morris come si ricordava la strategia di ricerca dall'esperienza.

Questa batteria valuta più domini di comportamento. In questo modo, i risultati in alcuni test possono essere un riferimento per l'interpretazione dei dati degli altri. Nei dati rappresentativi nella Figura 1, quando i topi esposti a nanoparticelle di silice per 1 mese ha mostrato una riduzione dell'attività di interazione sociale, potrebbe essere il fenotipo di depressione o di ansia o la conseguenza di un deficit della funzione motoria. Tuttavia, i risultati dei test di funzione e ansia motore hanno indicato che la diminuzione nell'interazione sociale era primaria, non successivi. Inoltre, questa batteria contiene prove differenti per lo stesso dominio di comportamenti, con l'utilizzo e sensibilità diverse. Tendenza/risultati coerenti in questi test aumentare l'affidabilità della batteria. Tuttavia, questa disposizione richiede tempi più lunghi per l'intera procedura. L'esperimento a breve termine che prende meno di 1 mese dovrebbe utilizzare una versione semplificata di questa batteria.

Questa batteria di test comportamentali è progettata per lo screening del fenotipo comportamentale mostrato nelle fasi differenti dopo l'esposizione al fattore di rischio genetico o ambientale della neurodegenerazione. Pertanto, il presente protocollo elenca solo le letture essenziali di ogni test. È interessante nota che ogni test comportamentali in grado di fornire un sacco di informazioni; quindi, l'utente può espandere il protocollo per ulteriori indagini. Ad esempio, attività spontanea come governare, allevamento, defecazione e tigmotassia in campo aperto rivela emotività8. Queste caratteristiche di comportamento in elevato più la prova del labirinto può essere anche indicatori di ansia10,21. Il motore di studi di rotarod test di apprendimento i topi sono addestrati dopo inizio di modellazione/malattia/esposizione a fattori di rischio ambientali30. Il test di interazione sociale può anche studiare la memoria sociale introducendo un secondo romanzo helper dopo la socialità prova9. Di conseguenza, espansione della batteria può essere personalizzato per adattarsi diverse priorità di studio. Tuttavia, questa batteria è stata testata solo in giovani topi C57BL/6N adulti a causa delle limitazioni di tempo. Le prestazioni di base di altri ceppi o invecchiati topi C57BL/6 potrebbero essere diversa. Inoltre, modelli di topi transgenici neurodegenerative possono presentare deficit comportamentali quali IPO - o iperattività. Quindi, possono non essere adatti per le prove con una scarsa motivazione, ad esempio il test di riconoscimento di oggetto romanzo. Di conseguenza, ulteriore ottimizzazione dovrebbe essere richiesto per la valutazione del comportamento di questi topi.

In conclusione, questa batteria consente una convincente ed esauriente analisi comportamentale della neurodegenerazione nel ceppo C57 del mouse. È più adatto per studi longitudinali relativi neurodegenerazione della tossicità dei potenziale fattori di rischio/neurotossina o lo sviluppo di farmaci, che spesso presenta la somministrazione a lungo termine e la prova ripetuta.

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Disclosures

Gli autori non hanno nulla a rivelare.

Acknowledgments

Gli autori ringraziano il Dr. Cora SW Lai dalla scuola di scienze biomediche, Università di Hong Kong, per l'elevato plus prova del labirinto e il dipartimento di anestesiologia da Università di Hong Kong per l'apparecchiatura di prova di rotarod di prestito di prestito.

Materials

Name Company Catalog Number Comments
chambers in social interaction test home made (8 cm (L) x 6 cm (W) x 12 cm (H)), transparant with holes, plastic
cylindrical tanks used in forced swimming test home made 30 cm height, 20 cm diameters, glass
elevated plus maze home made open arms (30 cm x 5 cm x 0.5 cm) ,closed arms (30 cm x 5 cm x 16 cm), center platform (5 cm x 5 cm x 0.5 cm), 40 cm tall. Plastic, nontransparant
IITC Roto-Rod Apparatus IITC life science Inc. 755, series 8
open field arena home made 60 cm (L) x 60 cm (W) x 40 cm (H), plastic, nontransparant
water maze home made 120 cm in diameter, 60 cm deep, steel

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References

  1. Baquero, M., Martin, N. Depressive symptoms in neurodegenerative diseases. World Journal of Clinical Cases. 3 (8), 682-693 (2015).
  2. Brown, R. C., Lockwood, A. H., Sonawane, B. R. Neurodegenerative Diseases: An Overview of Environmental Risk Factors. Environmental Health Perspectives. 113 (9), 1250-1256 (2005).
  3. Bossy-Wetzel, E., Schwarzenbacher, R., Lipton, S. A. Molecular pathways to neurodegeneration. Nature Medicine. 10, S2-S9 (2004).
  4. Cummings, J. L., Diaz, C., Levy, M., Binetti, G., Litvan, I. I. Neuropsychiatric Syndromes in Neurodegenerative Disease: Frequency and Signficance. Seminars in Clinical Neuropsychiatry. 1 (4), 241-247 (1996).
  5. Levenson, R. W., Sturm, V. E., Haase, C. M. Emotional and behavioral symptoms in neurodegenerative disease: a model for studying the neural bases of psychopathology. Annual Review of Clinical Psychology. 10, 581-606 (2014).
  6. Kehagia, A. A., Barker, R. A., Robbins, T. W. Neuropsychological and clinical heterogeneity of cognitive impairment and dementia in patients with Parkinson's disease. Lancet Neurology. 9 (12), 1200-1213 (2010).
  7. Gould, T. D., Dao, D. T., Kovacsics, C. E. The Open Field Test. Mood and Anxiety Related Phenotypes in Mice. Gould, T. D. , Humana Press. Totowa, NJ. 1-20 (2009).
  8. Seibenhener, M. L., Wooten, M. C. Use of the Open Field Maze to measure locomotor and anxiety-like behavior in mice. Journal of Visualized Experiments. (96), e52434 (2015).
  9. Kaidanovich-Beilin, O., Lipina, T., Vukobradovic, I., Roder, J., Woodgett, J. R. Assessment of social interaction behaviors. Journal of Visualized Experiments. (48), e2473 (2011).
  10. Walf, A. A., Frye, C. A. The use of the elevated plus maze as an assay of anxiety-related behavior in rodents. Nature Protocols. 2 (2), 322-328 (2007).
  11. Can, A., et al. The mouse forced swim test. Journal of Visualized Experiments. (59), e3638 (2012).
  12. Veerappan, C. S., Sleiman, S., Coppola, G. Epigenetics of Alzheimer's disease and frontotemporal dementia. Neurotherapeutics. 10 (4), 709-721 (2013).
  13. Kirova, A. M., Bays, R. B., Lagalwar, S. Working memory and executive function decline across normal aging, mild cognitive impairment, and Alzheimer's disease. Biomed Research International. 2015, 748212 (2015).
  14. Draganski, B., Lutti, A., Kherif, F. Impact of brain aging and neurodegeneration on cognition: evidence from MRI. Current Opinion in Neurology. 26 (6), 640-645 (2013).
  15. Schliebs, R., Arendt, T. The cholinergic system in aging and neuronal degeneration. Behavioural Brain Research. 221 (2), 555-563 (2011).
  16. Vorhees, C. V., Williams, M. T. Morris water maze: procedures for assessing spatial and related forms of learning and memory. Nature Protocols. 1 (2), 848-858 (2006).
  17. Leger, M., et al. Object recognition test in mice. Nature Protocols. 8 (12), 2531-2537 (2013).
  18. You, R., et al. Silica nanoparticles induce neurodegeneration-like changes in behavior, neuropathology, and affect synapse through MAPK activation. Particle and Fibre Toxicology. 15 (1), 28 (2018).
  19. Housing Deacon, R. M. husbandry and handling of rodents for behavioral experiments. Nature Protocols. 1 (2), 936-946 (2006).
  20. Poon, D. C., et al. PKR deficiency alters E. coli-induced sickness behaviors but does not exacerbate neuroimmune responses or bacterial load. Journal of Neuroinflammation. 12, 212 (2015).
  21. O'Leary, T. P., Gunn, R. K., Brown, R. E. What are we measuring when we test strain differences in anxiety in mice? Behavior Genetics. 43 (1), 34-50 (2013).
  22. Can, A., et al. The tail suspension test. Journal of Visualized Experiments. (59), e3769 (2012).
  23. Angoa-Perez, M., et al. Mice genetically depleted of brain serotonin do not display a depression-like behavioral phenotype. ACS Chemical Neuroscience. 5 (10), 908-919 (2014).
  24. Blazquez, G., Canete, T., Tobena, A., Gimenez-Llort, L., Fernandez-Teruel, A. Cognitive and emotional profiles of aged Alzheimer's disease (3xTgAD) mice: effects of environmental enrichment and sexual dimorphism. Behavioural Brain Research. 268, 185-201 (2014).
  25. Gimenez-Llort, L., et al. Modeling behavioral and neuronal symptoms of Alzheimer's disease in mice: a role for intraneuronal amyloid. Neuroscience & Biobehavioral Reviews. 31 (1), 125-147 (2007).
  26. Lad, H. V., et al. Behavioural battery testing: evaluation and behavioural outcomes in 8 inbred mouse strains. Physiology & Behavior. 99 (3), 301-316 (2010).
  27. Powell, T. R., Fernandes, C., Schalkwyk, L. C. Depression-Related Behavioral Tests. Current Protocols in Mouse Biology. 2 (2), 119-127 (2012).
  28. Paylor, R., Spencer, C. M., Yuva-Paylor, L. A., Pieke-Dahl, S. The use of behavioral test batteries, II: effect of test interval. Physiology & Behavior. 87 (1), 95-102 (2006).
  29. Lee, K. M., Coehlo, M., McGregor, H. A., Waltermire, R. S., Szumlinski, K. K. Binge alcohol drinking elicits persistent negative affect in mice. Behavioural Brain Research. 291, 385-398 (2015).
  30. Shiotsuki, H., et al. A rotarod test for evaluation of motor skill learning. Journal of Neuroscience Methods. 189 (2), 180-185 (2010).

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You, R., Liu, Y., Chang, R. C. C. A Behavioral Test Battery for the Repeated Assessment of Motor Skills, Mood, and Cognition in Mice. J. Vis. Exp. (145), e58973, doi:10.3791/58973 (2019).

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