Waiting
Login processing...

Trial ends in Request Full Access Tell Your Colleague About Jove
Click here for the English version

Medicine

Torasik ve Abdominal aort anevrizması boyutlarını belirlemek farelerde ultrason görüntüleme

Published: March 8, 2019 doi: 10.3791/59013

Summary

Ultrason görüntüleme torasik ve abdominal Aort Anevrizmalarının farelerde luminal boyutlarını belirlemek için ortak bir yöntem haline gelmiştir. Bu iletişim kuralı güvenilir ve tekrarlanabilir iki boyutlu ultrason görüntüleri farelerde artan ve abdominal aort ile ilgili yordamı açıklamaktadır.

Abstract

Çağdaş yüksek çözünürlüklü ultrason aletleri fare aortas ölçümü kolaylaştırmak için yeterli çözünürlüğe sahip. Bu aletlerin yaygın olarak Aort Anevrizmalarının fare modellerinde aort boyutları ölçmek için kullanılmaktadır. Aort Anevrizmalarının en sık olarak artan ve karın bölgelerinde ortaya çıkan aort, kalıcı dilations olarak tanımlanır. Aort boyutları ultrason ile sıralı ölçümleri gelişme ve ilerleme Aort Anevrizmalarının içinde vivo değerlendirmek için temel yaklaşım vardır. Her ne kadar birçok bildirilen çalışma aort çapları birincil bir bitiş noktası olarak ölçmek için Imaging ultrason kullanılır, sonda konum ve veri toplama, analiz ve yorumunu doğruluğunu etkileyen kalp döngüsü gibi karıştırıcı faktörler vardır. Bu iletişim kuralının amacı aort çapı güvenilir ve tekrarlanabilir bir şekilde ölçmek için ultrason kullanımı pratik bir rehber sağlamaktır. Bu protokol tanıttı fareler ve aletleri hazırlanması, uygun ultrason ve veri analizi edinimi.

Introduction

Aort Anevrizmalarının torasik ve/veya abdominal aort1,2,3,4bir kalıcı luminal dilatasyon tarafından karakterize yaygın damar hastalıkları vardır. Hiçbir farmakolojik terapiler dilatasyon ve patojenik mekanizmaların anlayışlar ihtiyacını vurgulayan yırtık Aort Anevrizmalarının önlemek için kurulmuştur. Aort Anevrizmalarının mekanizmaları aydınlatmak için genetik veya kimyasal işlemler tarafından üretilen fare modelleri yaygın olarak kullanılan4,5,6,7,8, olmuştur 9 , 10 , 11 , 12. aort çapı farelerde doğru miktar aort anevrizması araştırma temelidir.

Yüksek frekanslı ultrason gelişimi aort boyutları13,14,15dakika sonra küçük farklılıkları algılamak için kayma ve zamansal çözünürlük görüntülerin artmıştır. Bu farelerde aort çapları sıralı ölçümü sağlamıştır ve böylece, Aort Anevrizmalarının fare çalışmalarda aort çapları ölçme için tercih edilen yöntem haline gelmiştir. Ultrason görüntüleme basit bir teknik olmasına rağmen aort anatomi ve Fizyoloji bilgisi doğru ölçümler, veri analizi ve yorumu için uygun görüntüler elde etmek için gereklidir. Aort ile proksimal göğüs bölgesi16değişken eğrilikleri zonklayan silindirik bir organdır. Bu potansiyel yaygın olarak alınan iki boyutlu (2D) görüntülerde aort boyutları hatalı bir tespiti için katkıda bulunur. Aort ölçümleri doğruluğunu tehlikeye aort tortuosity aneurysmal devlet17tarafından daha fazla. Aort dilations güvenilir ve tekrarlanabilir ölçümler elde etmek için bu iletişim kuralı proksimal torasik ve abdominal aort çapları farelerde ölçmek için bir yüksek çözünürlüklü ultrason sistem kullanımı için pratik bir kılavuz sağlar.

Protocol

Ultrason görüntüleme farelerde University of Kentucky kurumsal hayvan bakım ve kullanım kurulu onayı ile yapılır (IACUC protokol numarası: 2018-2967). Görüntüleme sırasında fareler isoflurane % 1-%3 vol/vol kullanarak ve yordam stresi azaltmak ve hipotermi önlemek için Isıtma platformda yer anestezi. Göz yağ anestezi sırasında yanıp sönme refleks kaybı nedeniyle kornea hasarı önlemek için uygulanır.

1. ekipman kurulumu

  1. Platform, Isıtma ultrason makinede açmak ve jel ısıtıcı (şekil 1).
  2. Ultrason programını açın. Çalışma adı ve fare bilgileri gibi çalışma bilgileri girin.
  3. İsoflurane Buharlaştırıcı ve O2 tank kontrol edin. İçeriği düşüktür, isoflurane Buharlaştırıcı doldurun ve/veya yeni bir O2 tank değişimi.
  4. Anestezi indüksiyon odası ve burun konisi için filtreler ve atma bağlayın.
  5. Dal indüksiyon odası için açın.
  6. O2 tankındaki açın.
  7. O2 ve isoflurane topuzlar anestezi Buharlaştırıcı 1 L/dak ve %0 vol/vol, sırasıyla, odası O2ile doldurmak için açın.

2. fare hazırlanması

  1. İçinde O2fareyi getirin-anestezi nedeniyle istenmeyen kardiyovasküler değişiklikleri en aza indirmek için indüksiyon odası dolu.
  2. İsoflurane Buharlaştırıcı (% 1.5-%2.5 vol/vol) açın.
  3. Arka bacak çekilmesi refleks yokluğu onaylayın.
  4. Fare odasından çıkarın ve steril oftalmik kayganlaßtırıcı bir damla her gözlerinin içine yerleştirin.
  5. Anestezi burun konisi için yeniden yönlendirmek ve akış indüksiyon odasına kapatın.
  6. Fare dorsally anestezi burun konisi onun burnuna Isıtma platformda yatırın.
  7. Depilatory krem göğüs ve karın, bir pamuklu çubukla kullanarak geçerli. Tahriş önlemek için depilatory krem kullanım miktarı en aza indirmek.
  8. 1 dakika bekleyin ve sonra hafifçe tüm kremi ve saç silin.
  9. Bölgeyi ılık su ile sulama ve krem tamamen kaldırmak için kuru silin.
  10. Nokta jel her dört bakır bir platform üzerinde yol açar.
  11. Elektrokardiyogram (EKG) okuma adayları (avuç içi) aşağı her pençe yastık teyp. Bu EKG ve solunum fizyolojisi anestezi iken fare sağlayacaktır.
  12. Kalp hızı 450-550 atım/dk arasında olduğundan emin olun. Anestezi aort çapı değiştirebilirsiniz, kardiyak fonksiyon etkiler bu yana kalp hızı uygun bir dizi anestezi teslim edilme oranını ayarlamak.
  13. Prewarmed ultrasonik jel hazırlanmış siteye uygulanır.
  14. Sonda sahibine iliştirin.
  15. En iyi tarama için platform döndürmek ve ultrasonik jel ile temas kadar sonda daha düşük.

3. torasik aortada görüntüleme

  1. Fare sol tarafındaki platforma aşağı eğ.
  2. Sonda fare göğüs kemiği (Şekil 2A) sağ kenarına koy. Sonda üzerinde başvuru işaretçisi caudally yönlendirmek.
    Not: Sonda üzerinde başvuru işareti sonda yönü belirten ve ultrason sistemi (Şekil 2A-D) monitörde maker ile tutarlıdır. İşaretçiyi şeklin her iki Ultrason sistemine göre değişir.
  3. Renkli Doppler torasik aortada kan akışını onaylamak için kullanın.
  4. Aort damarı açıkça göstermek için sahne ve prob açısı ayarlamak (şekil 3A, B).
    Not: Aort kapak ve innominate ve pulmoner arter doğru parasternal uzun eksen görünümü için anatomik yerler için kullanılabilir. Bu nedenle, aort bu görünümden aort kapak ve innominate ve pulmoner arter bir çerçevede (şekil 3A) içerebilir. Aort dilatasyon ve tortuosity, gibi aort patolojileri nedeniyle bir tarama tüm artan aort yakalamak zor geldiğinde görüntüleri ayrı olarak yakalanması. Bu yana ayrı görüntüleri bir küçümseme aort ölçümlerin neden potansiyeline sahip, sahne ve yoklama iyi konumlandırma gereklidir. Doğru parasternal uzun eksen görünümü tüm artan aort (şekil 3C) görüntüleme için en iyi yöntemdir. Ancak, bu görünümde aneurysmal aortas özellikle aort sinüs yakalamak genellikle zordur. Bu görünüm bir çerçevede (şekil 3C) aort yakalamak değildir, ancak sol parasternal uzun eksen görünümü alternatif bir yaklaşım, aortik kökü bir yakalama proksimal artan aortaya sağlar. Sol parasternal uzun eksen görünümü için sonda göğüs kemiği (Şekil 2B) sol kenarına koy. Düz veya hafif fare sağa eğik aşamasıdır. Doğru parasternal uzun eksen görünümü aynı şekilde yordamı diğer adımları da gerçekleştirin. Avantajları ve dezavantajları Bu sonda pozisyonların Tablo 2' de açıklanmıştır. Aort görüntüleri sürekli olarak ya da sağ veya sol parasternal uzun eksen görünümünde yakalanması gerekir.
  5. Görüntü derinlik ve genişlik için düğmeleri kullanarak kare hızı artırmak için ultrason Görüntüyü kırpmak.
  6. Odak derinliği artan aort topuzu için odak derinliği kullanarak, dorsal tarafta değiştirin.
  7. Ultrason parametreleri doğrulayın. Bu iletişim kuralı için ultrason ayarlar Tablo 1' de açıklanmıştır.
  8. Sonda yavaşça, en büyük olası çapı boyuna aort görüntü yakalamak için X ve Y ekseni sahne topuzu, kullanarak taşımak.
  9. Bir cine döngü saklamak.

4. karın aortu görüntüleme

  1. Sonda kemiği, sadece göğüs kemiği ve xiphoid işlemi (Şekil 2C) yerleştirin. Referans işaretleyici sonda üzerinde fare sağ tarafta bakmalıdır. Abdominal aort inferior vena kava ve/veya portal ven (şekil 3D) yanında yer almalıdır.
  2. Renkli Doppler pulsatil akışını onaylamak için karın aortu görselleştirin.
    Not: Doppler açı kan akışını dik ise, Renkli Doppler sinyali aort görünmez. Renkli Doppler görüntüleme ek olarak, abdominal aort portal ven ve vena cava biraz sonda basarak ayrılır. Aort onun açıklık korur sırada portal ven ve vena cava sıkıştırılabilir,.
  3. Kare hızı artırmak için ultrason Görüntüyü kırpmak.
  4. Odak derinliği abdominal aort arka duvara değiştirin.
  5. Caudally şube noktaları çölyak ve superior Mezenterik arter görselleştirmek için sonda taşımak.
  6. Sağ renal arter bulun ve bir dönüm noktası kullanabilirsiniz.
    Not: Abdominal aort anevrizması aort tortuosity için neden olabilir beri abdominal aort dik görüntüye prob açısı ayarlayın. Bir iç kontrol için bir görüntü Sağ renal şube noktasının yakalanması.
  7. Bir cine döngü abdominal aort (şekil 3D, E) maksimum genişleme gösteren ilgi bölgesinin yakalamak.
    Not: Aort Anevrizmalarının yerelleştirme her hayvan modelinde değişir. CaCl2 veya elastase aort anevrizması farelerde aort infrarenal indükler sırasında aortik dilatasyon Anjiyotensin II kaynaklı farelerde ağırlıklı olarak suprarenal aorta oluşur.

5. postscanning fare bakım ve Temizleme

  1. Ultrasonik jel silin, göğüs veya karın sıcak su ile sulama ve yavaşça fare kuru silin.
  2. Fareyi bir Isıtma yastığı üzerinde yerleştirilir onun kafes dönün.
  3. İsoflurane Buharlaştırıcı ve O2 tank kapatın. İsoflurane düzeyi düşükse Buharlaştırıcı tekrar doldur.
  4. Ultrason makinesi, sonda ve yumuşak bir bez ve izopropil alkol veya oxazolidin mendil ile platform temiz.
  5. Tarama sırasında toplanan tüm dosyaları indirmek.
  6. Ultrason makineyi kapatmak açmak.
  7. Anesteziden iyileşti sonra farelerin hayvan muhafaza odalarına dönün.

6. analiz

  1. Torasik aort görüntü analizi
    1. Analiz yazılımı başlatmak ve ultrason veri açın. Bir örnek görüntü analiz yazılımı (Vevo LAB 3.0.0) tamamlayıcı şekil 1' de gösterilen.
    2. Bir aort ultrason görüntüsü ölçümler için cine döngü (şekil 4A, C, E, G ve tamamlayıcı şekil 1) seçin.
      Not: Bu iletişim kuralı genellikle bir cine döngüde altı-yedi sinyal algılar. Aort çapı Sistol ve diastole (şekil 4A-G) arasında farklı olduğundan, ölçüleri tutarlı bir kalp döngüsü aşamasında incelenmesine gerek vardır. Sistol R dalgası T dalgasının sonuna kadar tanımlanır. Genel olarak, T dalgaları fare ECG tanımlamak zordur. Bu nedenle, görsel denetim tarafından (şekil 4ben) tanımlanmış fizyolojik Sistol, Sistol aort çapı ölçülmelidir. Ne zaman aort sonuna kadar genişletilir kardiyak faz midsystole olmalıdır. Son diastole EKG (şekil 4ben) R dalga kolayca tanımlanır. Son diastole aort ölçümlerde daha fazla kalp döngüsü ayırt etme açısından midsystole olan basittir.
    3. Aort Lümen ortasında bir çizgi çizin. Bu merkezi hattı ölçü çizgileri (şekil 4B, D ve tamamlayıcı şekil 1) aorta için dik olmasını sağlamak için kullanılır.
    4. Aort sinüs ve maksimal aort düzeyleri (şekil 4B, D ve tamamlayıcı şekil 1) artan iç kenarı için luminal iç kenarından merkezi hattı üzerinden dik çizgiler çizin.
    5. En az üç ayrı sinyal aort çapı ölçmek ve ölçümler ortalamasını hesaplamak.
      Not: Vevo2100 sistem aort boyut ölçülerini Vevo Laboratuvar analiz yazılımı kullanır. Her düğme için kısa açıklamalar aşağıda verilmektedir. Ölçüm modu (tamamlayıcı şekil 1A): Bu mod aort ölçülerini seçilmesi gerekir. Kaydırıcıyı cine döngüsü (tamamlayıcı şekil 1B): ultrason çerçeve bu ayar düğmesini kullanarak seçilir. Takip mesafesi (tamamlayıcı şekil 1 c): Bu fonksiyon ile Merkezi çizgi çizilir. Doğrusal mesafe (tamamlayıcı şekil 1 d): Aortik boyut bu işlev kullanılarak ölçülür.
  2. Abdominal aortik görüntü analizi
    1. Analiz yazılımı başlatmak ve ultrason veri açın.
    2. Aort görüntüyü analiz için cine döngü (şekil 4E, G) seçin.
      Not: Benzer şekilde Torasik aort ölçümleri, kalp döngüsü abdominal aort çapı ve alan etkileyebilir. Ölçümler tutarlı bir kalp döngüsü aşamasında tespit edilmelidir.
    3. Gemi Lümen (şekil 4F, H) iç kenarına iç kenarından en büyük luminal çapı arasında bir çizgi çizin.
    4. Aort Lümen iç kenarı luminal alanının (şekil 4F, H) izlemeye.
    5. Üç ayrı sinyal en azından aort ölçümler elde etmek ve verilerinin ortalaması hesaplamak.

Representative Results

Nonaneurysmal proksimal torasik ve abdominal aort temsilcisi ultrason şekil 3A ve şekil 3C, sırasıyla gösterilir. Artan aorta pulmoner arter yanında yer almaktadır ve kavisli bir tüp kemer bölgesinde üç şube ile formlar: innominate arter, sol ortak Karotid arter ve sol subklavyan arter (şekil 3A). Abdominal aort dorsally inferior vena kava (şekil 3D) tespit edilmiştir. Şekil 3A ve şekil 3D, normal çapları ile karşılaştırıldığında derin dilations ile torasik ve abdominal Aort Anevrizmalarının temsilcisi görüntüleri şekil 3B ve şekil 3 gösterilir H, anılan sıraya göre. Tüm ultrason görüntüleri son-diastole ele geçirildi.

Temsilcisi torasik ve abdominal aort ultrason resimleri midsystole ve sonunda-diastole (şekil 4A, C, E, G) ele geçirildi. Temsili resim ölçümleri gösterilen şekil 4B, D, F, Hsunulmaktadır. Artan aort merkezinde yeşil hat aort sinüs standartlaştırılması ve aort çapı (şekil 4B, D) artan için kullanıldı. Satırları dik Lümen aort Sinüs (Sarı Hat) adlı iki iç kenarları ve maksimal artan aort çapı (kırmızı çizgi) arasında yeşil çizgi çizildi. Göğüs ve karın aortas luminal çapları Sistol ve diastole (şekil 4A-H) arasında farklı. Karın aortu, maksimal aort çapı (kırmızı) için ve luminal alan (yeşil) idi (şekil 4F, H) ölçülür. Monitör Elektrokardiyogram temsilcisi bir görüntüsünü şekil 4beniçinde gösterilir. Kalp döngüsü için doğru ölçümler dikkate alınması gerekiyor. Son diastole ve Sistol beyaz noktalı ve pembe çizgiler tarafından sırasıyla belirtilmiştir.

Hassasiyet ve tekrarlanabilirlik bu protokol doğrulamak için bir pilot çalışma yapılır. Temsilcisi Torasik aort ultrason ve ex vivo görüntüleri şekil 5içindeAgösterilir. Artan aort çapı için bu görüntüler arasında ölçülen çaplarda büyük bir fark yoktu (ultrason: ex vivo 1,67 mm vs: 1.65 mm). Aort sinüs içinde eski görmek zor olduğu için vivo görüntü, aort sinüs çapı değil ex vivo ölçülen. Bu protokol Inter - ve intraobserver tekrarlanabilirlik şekil 5B, Cgösterilir. Potansiyel variabilities belirlemek için ultrason görüntüleme iki gözlemci ile bağımsız olarak, yani deneyimli bir kardiyolog ve nonexperienced bir lisans öğrencisi bu tekniği kullanarak aynı fare (iki farklı günlerde öğrenme tarafından gerçekleştirildi n = 5). Bütün noktalar arasında ortalama ± 1,96 SD büyük Inter gösteren şekil 5B, C, yer-ya da bu iletişim kuralı için intraobserver variabilities.

Figure 1
Resim 1 : İş istasyonu kurulumu. İş istasyonu indüksiyon odası anestezi, anestezik atma filtreler, ısıtmalı platformu, ultrason jeli ve sıcak jel içerir. Bu rakam daha büyük bir versiyonunu görüntülemek için buraya tıklayınız. 

Figure 2
Resim 2 : Sonda yerleşim proksimal torasik ve abdominal aort görüntüleme için örnekleri. (A) hakkı için yerleşim ve (B) araştırma aortik kökü, artan ve kemer bölgeler ve (C) kısa eksen görünümü abdominal aort sol parasternal uzun ekseni görünümünü. (D) A temsilcisi monitör görüntü ultrason sistemi. Siyah oklar sonda üzerinde başvuru işareti gösterir. Sarı ok başvuru işaretçisi tarafında gösterir. Bu rakam daha büyük bir versiyonunu görüntülemek için buraya tıklayınız. 

Figure 3
Şekil 3 : Temsilcisi ultrason resimleri torasik ve abdominal aort. (A)Nonaneurysmal ve (B) aneurysmal artan aort, doğru parasternal uzun eksen görünümü. Aort, sol parasternal uzun eksen görünümünden artan (C) Nonaneurysmal. (D) Nonaneurysmal ve (E) aneurysmal abdominal aort. ASC Ao artan aort, IA = innominate arter, LCA = sol ortak Karotid arter, LSA = sol subklavyan arter, PA = pulmoner arter, sinüs = aort sinüs, IVC = = inferior vena kava ve Abd Ao abdominal aort =. Sarı üçgenler Aort Anevrizma belirtir. Bu rakam daha büyük bir versiyonunu görüntülemek için buraya tıklayınız. 

Figure 4
Şekil 4 : Ölçümler aort görüntülerin. Yakalanan(Atorasik aortada görüntülerini) midsystole ve (C) son diastole. Aort çapları ölçümleri proksimal Torasik aort bölgede (Bsırasında) midsystole gösterilen resimler ve (D) diastole. Yeşil hat artan aort ortasına gösterir. Sarı ve kırmızı çizgiler aort sinüs ve artan aort çapları sırasıyla gösterir. Basamak sarı ve kırmızı renklerde aort sinüs ve artan aort, gerçek çapları sırasıyla gösterir. Abdominal aort görüntülerini (E) midsystole ve (G) son diastole ele geçirdi. Suprarenal aorta ölçümleri (Fsırasında) midsystole gösterilen resimler ve (H) sonu-diastole. Kırmızı ve yeşil çizgiler çapı ve abdominal aort luminal alan sırasıyla gösterir. Kırmızı ve yeşil renklerde basamak gerçek çapı belirtmek ve abdominal aorta sırasıyla vardır. Elektrokardiyogram (EKG) (ben) monitör görüntü alımları sırasında kaydedildi. Yeşil ve sarı çizgiler EKG ve solunum döngüsü, sırasıyla gösterir. Beyaz noktalı çizgi sonu-diastole ve Sistol mor çizgi gösterir. P = P dalgası ve R R dalga =. Bu rakam daha büyük bir versiyonunu görüntülemek için buraya tıklayınız. 

Figure 5
Şekil 5 : Hassasiyet ve tekrarlanabilirlik ultrason görüntüleme. (A)temsilcisi görüntüleri Torasik aort ultrason ve ex vivo görüntüleri C57BL/6J erkek farelerde (10-12 hafta yaşlı). Bland Altman araziler Haritayı (B) Inter- ve (C) intraobserver variabilities bu protokol. ASC Ao artan aort, IA = innominate arter, LCA = sol ortak Karotid arter, LSA = sol subklavyan arter, PA = = pulmoner arter ve sinüs aort sinüs =. Yeşil hat artan aort ortasına gösterir. Sarı ve kırmızı çizgiler aort sinüs ve artan aort çapları sırasıyla gösterir. Basamak kırmızı renklerde ultrason ve ex vivo görüntüler ölçülen artan aort gerçek çapları göstermek. Siyah noktalı çizgiler gösterir 1,96 ortalama ve ortalama ± SD Bu rakam daha büyük bir versiyonunu görüntülemek için buraya tıklayınız. 

Supplemental Figure 1
Tamamlayıcı şekil 1: örnek görüntü ultrason analiz yazılımı. Ultrason veri analizi(a)ölçüm modunda gerçekleştirilmelidir. Bir aort ultrason görüntü analizi (B) kaydırıcıyı cine döngüsü kullanarak cine döngüden için seçilir. Merkezi hattı (C) izlenen mesafe işlevini kullanarak çizilir. Aort Boyut (D) doğrusal mesafe işlevi tarafından ölçülür. Bu rakam daha büyük bir versiyonunu görüntülemek için buraya tıklayınız.

Discussion

Bu iletişim kuralı bir yüksek frekans ultrason sistemi kullanan farelerde torasik ve abdominal aort görüntü edinimi için teknik bir kılavuz sağlar. Ultrason aort görüntüleme aort ölçümleri doğruluğunu tehlikeye atabilir, sonda konumu ve kalp döngüsü gibi potansiyel confounders özellikle proksimal Torasik aort var. Bu iletişim kuralı doğru aort boyutları ölçmek için ayrıntılı talimatlar ve görüntü edinme, ölçüm ve veri analizi için stratejileri açıklar.

Proksimal Torasik aort görüntüleme için yerleşim soruşturma için birkaç yaklaşım vardır. Şekil 2içindeA doğru parasternal uzun eksen görünümünün bu protokol için Imaging ultrason için kullanıldı. Bu görünümde aort sinüs yüksek kaliteli görüntüleri aort bölümüne edinimi kolaylaştırır. Ultrasonik dalgalar girişim nedeniyle azalan aort için en uygun değil. Ağırlıklı olarak artan aortaya aortik kök içinde luminal dilatasyon sergilemek çünkü bu iletişim kuralı Torasik Aort Anevrizmalarının çoğu fare modelleri için geçerlidir. Bu fareler18,19,20,21,22,23artan Aort Anevrizma oluşumuna neden olan kronik Anjiyotensin II infüzyon içerir. Fare modelleri Marfan sendromu (fibrillin 1C1041G / + ve fibrillin 1mgR/mgR fareler) aortik kök ve aort dilatasyon23,24,25artan görüntülemek. Loeys-Dietz Sendromu fare modelleri (TGF-β reseptör 1 veya 2 düz kas hücrelerindeki postnatal silme) da anevrizma aortik kökü ve aort18,26,27,28 artan geliştirmek . Bu nedenle, doğru parasternal uzun eksen görünümü bu fare modelleri Torasik Aort Anevrizmalarının aort görüntüleme için uygundur. Öte yandan, doğru parasternal kısa eksen görünümü anevrizmalar genellikle hangi bir tahmindi çapları neden olabilir aort tortuosity tarafından karışık çünkü aortik çapraz olarak çekim potansiyeline sahiptir. Torasik aortada kısa eksen görünümü bu protokolü abdominal aort görüntüleme için kullanıldı. Aort kavisi ve tortuosity torasik aortada karşılaştırıldığında abdominal aort mütevazı olduğundan, kısa eksen görünümü Albümdeki edinimi underestimations aort çapı matlaşmış. O farklı sonda Not pozisyonları farklı görüş açıları sağlamak ve aort çapı her görüntü açısı farklı olabilir önemlidir. Bu nedenle, güvenilir aort çapı ölçümleri bir çalışma içinde tüm görüntüleri aynı prob pozisyonunun uygulayarak geliştirilmiştir. İlginçtir, üç boyutlu (3D) ultrason görüntüleri kalp ve aort edilmiştir geçtiğimiz29,30,31,32bildirdi. Buna ek olarak, mevcut ultrason sistemleri dört boyutlu görüntüleri33olarak zaman içinde 3D görüntü elde edebilirsiniz. Böylece, bu 3D görüntüleme teknolojileri sonda konumlandırma sorunu çözebilir daha doğrusu, aort yapısını göstermek için potansiyel var.

Ultrason 2D parlaklık modu (B-mod) veya tek boyutlu hareket modu (M-modu) yakalanabilir. Her ne kadar bazı makaleler M-modu aort çapı ölçüm için kullanılan, B-tercih15,34,35,36modudur. M-modu zamansal ve mekansal çözünürlüğünü artırmak için iki boyutlu olarak görüntüye kapasitelidir. Ancak, bu modu aort dik ultrasonik dalgaların yansıması eşmerkezli silindir varsayımına dayanır. Bu varsayım aneurysmal bir durumda doğru tutamayabilir ve artan aort kavisi bu zor, hatta nonaneurysmal Birleşik Devletleri yapar. Buna ek olarak, aort kalp döngüsü37boyunca sabit bir pozisyonda kalmaz. Bu nedenle, M-modu over - ve underestimations de dahil olmak üzere ölçüm hatalarına neden olabilir.

Aort ile luminal çap kalp döngüsü etkileyen unutmamak önemlidir. Beklendiği gibi Sistol aort çapı aort duvar elastikiyet ve zorlanma ile ilişkili olduğu diastole (şekil 4A-H), büyüktür. Aort duvar esneklik ve zorlanma aort çapları Sistol ve diastole arasındaki fark üzerinden hesaplanır. Esneklik ve soy aneurysmal aortas normal aortas31,34,35,38,39,40' a göre azalmıştır. Aortik sertlik doğrudan ultrason ile ölçülemez. Nabız dalga hızı ölçüm (PWV) onun sertlik aneurysmal aortas31,35,41,42yılında artış bildirilmiştir bir proxy olarak değerlendirebilir. PWV nabız dalga Doppler görüntüleri ve karşılık gelen uzak kullanarak iki Arteryel siteler arasında geçiş süresi hesaplanır. Klinik muayene, aksine aort çapları karşılaştırmak için farelerde aort ölçümler için kardiyak faz açısından sıkı yok standardizasyon yoktur. Bu nedenle, hangi kalp aşamasıdır aort ölçülerini uygun hala belli değil. Ancak, güvenilir ve tekrarlanabilir karşılaştırmalar emin olmak için aort çapları tanımlanmış bir kalp döngüsü aşamasında ölçülmelidir.

Bu iletişim kuralı aort boyutları doğru ölçmek amacıyla aort görüntüleme ve veri analizi için ayrıntılı yönergeler sağlar. Bu iletişim kuralını kullanan aort ölçüm gerçek ex vivo aort çapı (şekil 5A) ile tutarlı. Biz de bakımınıza Inter doğruladı- ve intraobserver tekrarlanabilirlik (şekil 5B, C). Bu iletişim kuralı, özellikle sonda konumu ve kardiyak döngüsü, tüm adımları doğru ölçümler için gereklidir. Ancak, uygun prosedürler kullanırken bile eserler ultrason görüntüleme sırasında kaçınılmaz. Kaburga ve akciğer, hem de solunum ve kardiyak nabız, konumunu torasik aortada görüntü kalitesini etkileyebilir. Bağırsak gazı da karın görüntüleme eserler neden olabilir. Böylece, biz ne zaman zavallı aort görüntüleri durumunda bu protokol sonrası dışlama ölçütü tanımlayarak öneririz.

Yüksek çözünürlüklü ultrason sistemleri çıkışıyla, fareler aort yapısını nefis ayrıntılı olarak seri olarak hem de geleneksel, böylece önemli ölçüde katkıda Aort Anevrizmalarının anlamak için incelenebilir. Ultrason görüntüleme, yukarıda açıklandığı gibi protokol ile Aort Anevrizmalarının farelerde miktarının için bir güvenilir ve tekrarlanabilir invaziv olmayan bir yaklaşımdır.

Disclosures

Yazarlar açığa çıkmasına gerek yok.

Acknowledgments

Yazarın araştırma çalışmaları Ulusal kalp, akciğer, tarafından desteklenen ve kan Enstitüsü Ulusal Sağlık Enstitüleri Ödülü altında numaraları R01HL133723 ve R01HL139748 ve Amerikan Kalp Derneği SFRN damar hastalığı (18SFRN33960001). HS bir AHA doktora sonrası bursu (18POST33990468) tarafından desteklenmektedir. J.C. NCATS UL1TR001998 tarafından desteklenir. Bu yazının içeriğinde sadece yazarlar sorumludur ve mutlaka Ulusal Sağlık Enstitüleri resmi görüşlerini temsil etmiyor.

Materials

Name Company Catalog Number Comments
Name of Reagent
Isothesia (Isoflurane) Henry Schin NDC11695-6776-2 Anesthetic Agent
Omnicon F/Air Anesthesia Gas Filter Canister A.M. Bickford Inc. 80120 Scavenging System for Anesthesia
Puralube Vet Ointment Dechra NDC17033-211-38 Lubricating Eye Drops
Aquasonic  Parker Laboratories 01-08 Ultrasound Gel
Nair Nair Depilliating Cream
Transeptic Transducer Cleaning Solution Parker Laboratories 341-09-25 Cleaning spray for probes
Name of Equipment
Vevo 2100 VisualSonics Vevo 2100 Ultrasound Machine
Vevo LAB 3.0.0 VisualSonics Vevo LAB 3.0.0 Ultrasound Analysis Software
MS-550D VisualSonics MS-550D Ultrasound Probe
EX3 Vaporizer Patterson Veterinary EX 3 Analogue Anestheic Vaporizer
Heating Pad Sunbeam E12107 Heating Pad

DOWNLOAD MATERIALS LIST

References

  1. Hiratzka, L. F., et al. 2010 ACCF/AHA/AATS/ACR/ASA/SCA/SCAI/SIR/STS/SVM guidelines for the diagnosis and management of patients with Thoracic Aortic Disease: a report of the American College of Cardiology Foundation/American Heart Association Task Force on Practice Guidelines, American Association for Thoracic Surgery, American College of Radiology, American Stroke Association, Society of Cardiovascular Anesthesiologists, Society for Cardiovascular Angiography and Interventions, Society of Interventional Radiology, Society of Thoracic Surgeons, and Society for Vascular Medicine. Circulation. 121 (13), 266-369 (2010).
  2. Robinet, P., et al. Consideration of Sex Differences in Design and Reporting of Experimental Arterial Pathology Studies-Statement From ATVB Council. Arteriosclerosis, Thrombosis, and Vascular Biology. 38 (2), 292-303 (2018).
  3. Wanhainen, A., Mani, K., Golledge, J. Surrogate Markers of Abdominal Aortic Aneurysm Progression. Arteriosclerosis, Thrombosis, and Vascular Biology. 36 (2), 236-244 (2016).
  4. Lu, H., Daugherty, A. Aortic Aneurysms. Arteriosclerosis, Thrombosis, and Vascular Biology. 37 (6), 59-65 (2017).
  5. Angelov, S. N., Zhu, J., Dichek, D. A. New Mouse Model of Abdominal Aortic Aneurysm: Put Out to Expand. Arteriosclerosis, Thrombosis, and Vascular Biology. 37 (11), 1990-1993 (2017).
  6. Daugherty, A., Manning, M. W., Cassis, L. A. Angiotensin II promotes atherosclerotic lesions and aneurysms in apolipoprotein E-deficient mice. The Journal of Clinical Investigation. 105 (11), 1605-1612 (2000).
  7. Kanematsu, Y., et al. Pharmacologically induced thoracic and abdominal aortic aneurysms in mice. Hypertension. 55 (5), 1267-1274 (2010).
  8. Longo, G. M., et al. Matrix metalloproteinases 2 and 9 work in concert to produce aortic aneurysms. The Journal of Clinical Investigation. 110 (5), 625-632 (2002).
  9. Pyo, R., et al. Targeted gene disruption of matrix metalloproteinase-9 (gelatinase B) suppresses development of experimental abdominal aortic aneurysms. The Journal of Clinical Investigation. 105 (11), 1641-1649 (2000).
  10. Raffort, J., et al. Monocytes and macrophages in abdominal aortic aneurysm. Nature Reviews Cardiology. 14 (8), 457-471 (2017).
  11. Senemaud, J., et al. Translational Relevance and Recent Advances of Animal Models of Abdominal Aortic Aneurysm. Arteriosclerosis, Thrombosis, and Vascular Biology. 37 (3), 401-410 (2017).
  12. Wilson, N. K., Gould, R. A., Gallo MacFarlane, E., Consortium, M. L. Pathophysiology of aortic aneurysm: insights from human genetics and mouse models. Pharmacogenomics. 17 (18), 2071-2080 (2016).
  13. Adam, M., et al. Systemic Upregulation of IL-10 (Interleukin-10) Using a Nonimmunogenic Vector Reduces Growth and Rate of Dissecting Abdominal Aortic Aneurysm. Arteriosclerosis, Thrombosis, and Vascular Biology. 38 (8), 1796-1805 (2018).
  14. Barisione, C., et al. Rapid dilation of the abdominal aorta during infusion of angiotensin II detected by noninvasive high-frequency ultrasonography. Journal of Vascular Surgery. 44 (2), 372-376 (2006).
  15. Trachet, B., et al. Ascending Aortic Aneurysm in Angiotensin II-Infused Mice: Formation, Progression, and the Role of Focal Dissections. Arteriosclerosis, Thrombosis, and Vascular Biology. 36 (4), 673-681 (2016).
  16. Sawada, H., et al. Heterogeneity of aortic smooth muscle cells: A determinant for regional characteristics of thoracic aortic aneurysms. Journal of Translational Internal Medicine. 6 (3), 93-96 (2018).
  17. Davis, F. M., et al. Smooth muscle cell deletion of low-density lipoprotein receptor-related protein 1 augments angiotensin II-induced superior mesenteric arterial and ascending aortic aneurysms. Arteriosclerosis, Thrombosis, and Vascular Biology. 35 (1), 155-162 (2015).
  18. Angelov, S. N., et al. TGF-beta (Transforming Growth Factor-beta) Signaling Protects the Thoracic and Abdominal Aorta From Angiotensin II-Induced Pathology by Distinct Mechanisms. Arteriosclerosis, Thrombosis, and Vascular Biology. 37 (11), 2102-2113 (2017).
  19. Daugherty, A., et al. Angiotensin II infusion promotes ascending aortic aneurysms: attenuation by CCR2 deficiency in apoE-/- mice. Clinical Science. 118 (11), 681-689 (2010).
  20. Fava, M., et al. Role of ADAMTS-5 in Aortic Dilatation and Extracellular Matrix Remodeling. Arteriosclerosis, Thrombosis, and Vascular Biology. 38 (7), 1537-1548 (2018).
  21. Rateri, D. L., et al. Angiotensin II induces region-specific medial disruption during evolution of ascending aortic aneurysms. The American Journal of Pathology. 184 (9), 2586-2595 (2014).
  22. Huang, X., et al. MicroRNA-21 Knockout Exacerbates Angiotensin II-Induced Thoracic Aortic Aneurysm and Dissection in Mice With Abnormal Transforming Growth Factor-beta-SMAD3 Signaling. Arteriosclerosis, Thrombosis, and Vascular Biology. 38 (5), 1086-1101 (2018).
  23. Galatioto, J., et al. Cell Type-Specific Contributions of the Angiotensin II Type 1a Receptor to Aorta Homeostasis and Aneurysmal Disease-Brief Report. Arteriosclerosis, Thrombosis, and Vascular Biology. 38 (3), 588-591 (2018).
  24. Habashi, J. P., et al. Losartan, an AT1 antagonist, prevents aortic aneurysm in a mouse model of Marfan syndrome. Science. 312 (5770), 117-121 (2006).
  25. Hibender, S., et al. Resveratrol Inhibits Aortic Root Dilatation in the Fbn1C1039G/+ Marfan Mouse Model. Arteriosclerosis, Thrombosis, and Vascular Biology. 36 (8), 1618-1626 (2016).
  26. Hu, J. H., et al. Postnatal Deletion of the Type II Transforming Growth Factor-beta Receptor in Smooth Muscle Cells Causes Severe Aortopathy in Mice. Arteriosclerosis, Thrombosis, and Vascular Biology. 35 (12), 2647-2656 (2015).
  27. Li, W., et al. Tgfbr2 disruption in postnatal smooth muscle impairs aortic wall homeostasis. The Journal of Clinical Investigation. 124 (2), 755-767 (2014).
  28. Yang, P., et al. Smooth muscle cell-specific Tgfbr1 deficiency promotes aortic aneurysm formation by stimulating multiple signaling events. Scientific Reports. 6, 35444 (2016).
  29. Dawson, D., et al. Quantitative 3-dimensional echocardiography for accurate and rapid cardiac phenotype characterization in mice. Circulation. 110 (12), 1632-1637 (2004).
  30. Grune, J., et al. Evaluation of a commercial multi-dimensional echocardiography technique for ventricular volumetry in small animals. Cardiovascular Ultrasound. 16 (1), 10 (2018).
  31. Phillips, E. H., Di Achille, P., Bersi, M. R., Humphrey, J. D., Goergen, C. J. Multi-Modality Imaging Enables Detailed Hemodynamic Simulations in Dissecting Aneurysms in Mice. IEEE Transactions on Medical Imaging. 36 (6), 1297-1305 (2017).
  32. Soepriatna, A. H., Damen, F. W., Vlachos, P. P., Goergen, C. J. Cardiac and respiratory-gated volumetric murine ultrasound. The International Journal of Cardiovascular Imaging. 34 (5), 713-724 (2018).
  33. Vevo3100 - the ultimate preclinical imaging experience. FUJIFILM VisualSonic Inc. , Available from: https://www.visualsonics.com/product/imaging-systems/vevo-3100 (2018).
  34. Shen, M., et al. Divergent roles of matrix metalloproteinase 2 in pathogenesis of thoracic aortic aneurysm. Arteriosclerosis, Thrombosis, and Vascular Biology. 35 (4), 888-898 (2015).
  35. Trachet, B., et al. Performance comparison of ultrasound-based methods to assess aortic diameter and stiffness in normal and aneurysmal mice. PLoS One. 10 (5), 0129007 (2015).
  36. Wang, Y., et al. TGF-beta activity protects against inflammatory aortic aneurysm progression and complications in angiotensin II-infused mice. The Journal of Clinical Investigation. 120 (2), 422-432 (2010).
  37. Goergen, C. J., et al. In vivo quantification of murine aortic cyclic strain, motion, and curvature: implications for abdominal aortic aneurysm growth. Journal of Magnetic Resonance Imaging. 32 (4), 847-858 (2010).
  38. Ben-Zvi, D., et al. Local Application of Leptin Antagonist Attenuates Angiotensin II-Induced Ascending Aortic Aneurysm and Cardiac Remodeling. Journal of the American Heart Association. 5 (5), (2016).
  39. Goergen, C. J., et al. Influences of aortic motion and curvature on vessel expansion in murine experimental aneurysms. Arteriosclerosis, Thrombosis, and Vascular Biology. 31 (2), 270-279 (2011).
  40. Phillips, E. H., et al. Morphological and Biomechanical Differences in the Elastase and AngII apoE(-/-) Rodent Models of Abdominal Aortic Aneurysms. BioMed Research International. 2015, 413189 (2015).
  41. Di Lascio, N., Kusmic, C., Stea, F., Faita, F. Ultrasound-based Pulse Wave Velocity Evaluation in Mice. Journal of Visualized Experiments. (120), e54362 (2017).
  42. Lee, L., et al. Aortic and Cardiac Structure and Function Using High-Resolution Echocardiography and Optical Coherence Tomography in a Mouse Model of Marfan Syndrome. PLoS One. 11 (11), 0164778 (2016).

Tags

Geri çekilmesi sayı: 145 ultrason görüntüleme aort boyutları aort aort sinüs artan aort abdominal aort aort anevrizması
Torasik ve Abdominal aort anevrizması boyutlarını belirlemek farelerde ultrason görüntüleme
Play Video
PDF DOI DOWNLOAD MATERIALS LIST

Cite this Article

Sawada, H., Chen, J. Z., Wright, B.More

Sawada, H., Chen, J. Z., Wright, B. C., Moorleghen, J. J., Lu, H. S., Daugherty, A. Ultrasound Imaging of the Thoracic and Abdominal Aorta in Mice to Determine Aneurysm Dimensions. J. Vis. Exp. (145), e59013, doi:10.3791/59013 (2019).

Less
Copy Citation Download Citation Reprints and Permissions
View Video

Get cutting-edge science videos from JoVE sent straight to your inbox every month.

Waiting X
Simple Hit Counter