Waiting
Login processing...

Trial ends in Request Full Access Tell Your Colleague About Jove
JoVE Journal Medicine
Click here for the English version

Medicine

To-fartøy okklusjon musemodell av Cerebral iskemi-reperfusion

Published: March 1, 2019 doi: 10.3791/59078
Automatic Translation
*1,2,3,4,5, *6,7, 5
1Research Center of Translational Imaging, College of Medicine, Taipei Medical University, 2Radiogenomic Research Center, Taipei Medical University Hospital, Taipei Medical University, 3Department of Radiology, School of Medicine, College of Medicine, Taipei Medical University, 4Department of Medical Imaging, Taipei Medical University Hospital, Taipei Medical University, 5Department of Medical Research, Taipei Medical University Hospital, Taipei Medical University, 6Department of Surgery, School of Medicine, College of Medicine, Taipei Medical University, 7Division of General Surgery, Department of Surgery, Taipei Medical University Hospital
* These authors contributed equally

Summary

En musemodell av cerebral iskemi-reperfusion er etablert for å undersøke i Patofysiologien ved slag. Vi distally ligate av høyre arteria cerebri og høyre arteria carotis communis og gjenopprette blodsirkulasjonen etter 10 eller 40 min av ischemia.

Abstract

I denne studien er en arteria cerebri (MCA) okklusjon musemodell ansatt å studere cerebral iskemi-reperfusion. En reproduserbar og pålitelig musemodell er nyttig for undersøke i Patofysiologien ved cerebral iskemi-reperfusion og bestemme potensielle strategier for pasienter med hjerneslag. Variasjoner i anatomi av sirkelen av Willis av C57BL/6 mus påvirker betennelsessykdommer volumet etter cerebral iskemi-forårsaket skader. Studier har indikert at distale MCA okklusjon (MCAO) kan løse dette problemet og resultere i en stabil betennelsessykdommer størrelse. I denne studien etablere vi en to-fartøy okklusjon musemodell av cerebral iskemi-reperfusion gjennom avbrudd i blodtilførselen til høyre MCA. Vi distally ligate høyre MCA og høyre arteria carotis communis (CCA) og gjenopprette blodsirkulasjonen etter en viss ischemia. Denne ischemia-reperfusion skaden induserer en betennelsessykdommer stabil størrelse og atferdsmessige underskudd. Eksterne immunceller infiltrere iskemiske hjernen innen 24 timer infiltrasjon perioden. Dessuten er neuronal tap i kortikale området mindre for en lengre reperfusion varighet. Denne to-fartøy okklusjon-modellen er derfor egnet for undersøke immunrespons og neuronal utvinning i reperfusion perioden etter cerebral iskemi.

Introduction

Cerebral iskemi-reperfusion musen modellen er en av de mest brukte eksperimentelle tilnærmingene for å undersøke i Patofysiologien ved ischemia-indusert hjernen skade1. Fordi cerebral iskemi-reperfusion aktiverer eksterne immunsystemet, perifere immunceller infiltrere iskemiske hjernen og forårsake neuronal skade2. Dermed kreves en pålitelig og reproduserbar musemodell som etterligner cerebral iskemi-reperfusion å forstå i Patofysiologien ved slag.

C57BL/6J (B6) mus er mest brukte belastningen slag eksperimenter fordi de kan lett bli genetisk manipulert. Det finnes to vanlige modeller av MCAO/reperfusion som etterligner tilstand cerebral iskemi-reperfusion. Først er intraluminal filament modell av proksimale MCAO, der en silisium-belagt filament er ansatt for å intravascularly occlude blodstrømmen i MCA; den occluding filament fjernes senere for å gjenopprette blodet flyt3. En kort okklusjon varighet resulterer i en leksjonen av subkortikal regionen, mens en lengre okklusjon varighet forårsaker infarkter i kortikale og subkortikal. Den andre modellen er den ligatur distale MCAO, som innebærer ekstravaskulær overvåking av ligation av MCA og CCA å redusere blodstrømmen gjennom MCA, som blodstrøm gjenopprettes gjennom fjerning av Sutur og aneurisme klipp4. I denne modellen en betennelsessykdommer skyldes i kortikale områder og dødelighet er lav. Ligation av MCAO/reperfusion modellen krever craniectomy å avsløre stedet av distale MCA, nettstedet lett kan bekreftes og undersøke om blodstrømmen i distale MCA avbrytes under prosedyren er enkel.

B6 mus viser betydelige variasjoner i anatomi av vennekretsen Willis; Dette kan påvirke betennelsessykdommer volumet etter cerebral iskemi-reperfusion5,6,7. Foreløpig kan dette problemet løses gjennom ligation av den distale MCA8. I denne studien etablere vi en metode for å skjule den MCA blodstrømmen og aktivere reperfusion etter en forhåndsbestemt periode ischemia. To-fartøy okklusjon av cerebral iskemi-reperfusion modellen induserer forbigående ischemia av MCA territoriet gjennom ligation av rett distale MCA og høyre CCA, med blodstrøm gjenopprettes etter en viss ischemia. Denne MCAO/reperfusion modellen induserer en betennelsessykdommer stabil størrelse, hoveddelen av hjernen-infiltrere immunceller i den iskemiske hjernen og atferdsmessige underskudd etter cerebral iskemi-reperfusion4.

Subscription Required. Please recommend JoVE to your librarian.

Protocol

Institusjonelle dyr omsorg og bruk komiteer i Academia Sinica og Taipei medisinske universitet godkjent denne protokollen for bruk av forsøksdyr.

1. MCAO/reperfusion modell

  1. Gi musene vann og chow til operasjonen.
  2. Autoclave den kirurgiske verktøy og rense kirurgi tabellen og utstyr med 70% etanol. Bruk en kirurgiske maske og sterile hansken. Bruk en tørr perle sterilisere for å resterilize kirurgiske verktøy hvis flere musen operasjoner vil bli utført i et eksperiment.
  3. Bedøve en 8 - 12 uke-gamle mus (masse: 25-30 g) ved hjelp av 0,8% chloral hydrat, via en intraperitoneal injeksjon. Kontroller at bedøvet musen ikke har en pedal refleks (som testet med fast tå knipe) etter anesthetization.
  4. Bruk vet salve for å hindre øye tørrhet musen mens det er under narkose.
  5. Bruk en noninvasive blodtrykk system for å dataskjerm musen er blodtrykk.
  6. Bruke et fysiologisk overvåkingssystem for å overvåke sine endetarms temperatur og arteriell blod gasser. Opprettholde kroppstemperatur på 36,5 ± 0,5 ° C.
  7. Subcutaneously injisere musen med en forebyggende antibiotika (25 mg/kg cefazolin)8.
  8. Plass musen i supine posisjon på oppvarming pad.
  9. Bruk elektrisk avklipt for å utsette huden ved barbering musen er pels på ventral nakken regionen, samt i regionen mellom det høyre øyet og høyre øre.
  10. Bruke epileringen krem fjerne fur fra musen er kroppen og rense det kirurgiske området alternerende scrbus med povidione-jod og 70% etanol.
  11. Bruk iris saks til å klippe en 1 cm lang midtlinjen snitt i halsen.
  12. Bruk iris tang å nøye analysere CCA gratis av nervus nerve uten å forårsake fysisk skade.
  13. Bruk 5-0 silke suturer isolere CCA.
  14. Foreta en 0,3 cm snitt i hodebunnen på midtpunktet mellom det høyre øyet og høyre øre.
  15. Bruk microscissors å klippe temporalis muskelen å avsløre beinet zygomatic og tinningbeinet.
  16. Under en stereo dissecting mikroskop, bruk en microdrill å opprette 2 mm-diameter hull direkte over høyre distale MCA.
  17. Ligate stammen av høyre distale MCA bruker en 10-0 Sutur.
  18. Occlude høyre CCA bruker ett nontraumatic aneurisme.
  19. Etter 10 eller 40 min av iskemi, fjerne aneurisme klipp og Sutur å gjenopprette blodsirkulasjonen til MCA og CCA.
  20. Bruk ett Sutur for å forsegle den hud snittet på hodet.
  21. Forsegle cervical huden snitt ved hjelp av en enkelt Sutur fulgt av avsluttende halsen huden med Sutur eller stifte9.
  22. Subcutaneously injisere buprenorfin (0,1 mg/kg) for smerte lindring9.
  23. Opprettholde musen er kroppstemperatur på 36,5 ± 0,5 ° C på varmeputen før det er helt gjenopprettet av bedøvelsen. Ikke Returner dyr som har gjennomgått kirurgi til selskapet av annet dyrene før det er helt gjenopprettet. Ikke la dyret uovervåket før det gjenvinner tilstrekkelig bevissthet.
  24. Plass musen i autoklaveres buret slik at den kan fritt tilgang vann og chow når det er fullstendig gjenopprettet.

2. flekk med 2,3,5-triphenyltetrazolium chloride

  1. Bedøve musen med 0,8% chloral hydrat via en intraperitoneal injeksjon.
  2. Bruk kirurgisk saks for å halshugge dyret.
  3. Utsett skallen med iris saks for å lage et snitt i huden av hodet.
  4. Bruk kirurgisk saks til å klippe det fremre av frontale ben.
  5. Bruk iris saks til å klippe skallen langs den sagittal Sutur.
  6. Bruk en bein-rongeur til å skyve til side frontal og parietal bein og utsette hjernen.
  7. Bruk iris tang for å dissekere hjernen.
  8. Bruk en mus hjernen matrise og barberblad for å få 2 mm koronale skiver.
  9. Stain hjernen sektorene for 10 min på 37 ° C med 2% 2,3,5-triphenyltetrazolium chloride (TTC) i 1 x fosfat-bufret saltvann.
  10. Skyll hjernen 2 x med 10% formalin.
  11. Fastsette hjernen i 10% formalin ved romtemperatur for 24 timer.

3. måling av betennelsessykdommer størrelse

  1. Ordne delene på en ren plast slide og orientere delene fra rostral til caudal.
  2. Skanne lysbilde ved hjelp av en skanner. Plasser en metrisk linjal og kontroller at den er synlig i det skannede bildet. Snu lysbildet og skanne baksiden.
  3. Beregn hjerteinfarkt arealet av hver del med ImageJ programvare.
    1. Åpne bildefilen og definere skalaen for bildet.
    2. Bruk Frihånd valget merker betennelsessykdommer.
    3. Bruk områdene av interesse (ROI) manager for å måle området av interesse.
  4. Summere hjerteinfarkt områdene for hver del og multiplisere resultatet med snittykkelsen beregne totale hjerteinfarkt volumet.

4. statistisk analyse

  1. Bruk GraphPad prisme 6 til å bestemme den statistiske betydningen med Student t-test.
    Merk: Feilfeltene på bar grafer representerer standardfeil for gjennomsnittet (SEM).
  2. Bruk G * strøm 3.1 å beregne riktig utvalgsstørrelsen og utføre en makt analyse10.

Subscription Required. Please recommend JoVE to your librarian.

Representative Results

Dette MCAO/reperfusion produsert en kortikale betennelsessykdommer i høyre MCA og forårsaket atferdsmessige underskudd. Forskjellige grader av ischemia-indusert betennelsessykdommer volum (figur 1AB) og neuronal tap (figur 1 cD) ble opprettet i hjernebarken i høyre MCA området gjennom en økning i ligation varighet. Denne MCAO/reperfusion skaden redusert dyrets locomotor aktivitet på 48 timer etter MCAO/reperfusion (figur 2). Hoveddelen av eksterne immunceller (CD45høy celler) infiltrerte også iskemiske hjernen (ipsilateral halvkule) etter cerebral iskemi-reperfusion (Figur 3). I tillegg vi sammenlignet dette to-fartøy okklusjon modell med MCAO modell og fant at betennelsessykdommer volumene av disse to modellene ikke var signifikant forskjellig (Figur 4). Dødelighet var lav (< 5%) i to-fartøy okklusjon musemodell av cerebral iskemi-reperfusion. Vi utelatt mus fra videre analyser om overdreven blødning hadde skjedd under operasjonen. Når de kirurgiske prosedyrene ble riktig fulgt, var frekvensen av dyr utelukkelse på grunn av overdreven blødning fra craniectomy eller MCA mindre enn 15%. Okklusjon av høyre MCA eller CCA alene forårsake ikke hjerteinfarkt.

Figure 1
Figur 1: betennelsessykdommer volum og neuronal tap er positivt korrelert med lengden på fartøyet okklusjon. (A) representant TTC flekker av hjernen skiver fra mus, 24 timer etter MCAO/reperfusion. Varigheten av MCAO var 10 eller 40 min. dataene er tre uavhengige eksperimenter. (B) kvantifisering betennelsessykdommer volum. Feilfeltene representerer søkemotormarkedsførere; n = 8; p < 0,05. (C) MAP2 uttrykket i B6 hjerner på 24 h etter MCAO/reperfusion var bestemmes ved hjelp av immunohistochemistry. MAP2-negative områder er omsluttet av en stiplet linje i representant bildet av MAP2 flekker i delen hjernen. (D) kvantifisering av området MAP2 negativ. MAP2-negativ området (%) = ipsilateral MAP2-negativ området / kontralateral halvkule x 100, n = 3; * p < 0,05.

Figure 2
Figur 2: Locomotor aktivitet redusert etter cerebral iskemi-reperfusion. (A) Locomotor aktivitet ble analysert 48 timer etter MCAO/reperfusion. Varigheten av MCAO var 40 min. Dataene ble registrert for 60 min i åpne-feltet analysen. Muss sporing avstander ble analysert ved hjelp av CleverSys TopScan 1.0. Humbug kontrollgruppen var omfattet av musene som hadde gjennomgått kirurgi uten okklusjon av MCA eller CCA. (B) kvantifisering av avstanden flyttet av humbug og MCAO/reperfusion mus. Dataene presenteres som betyr ± SEM; n = 7; p < 0,05. Klikk her for å se en større versjon av dette tallet.

Figure 3
Figur 3: eksterne immunceller infiltrere den iskemiske halvkulen etter cerebral iskemi-reperfusion. (A) hjernen-infiltrating immunceller (CD45høy celler) i den ipsilateral og kontralateral halvkulen, på 24 h etter MCAO/reperfusion, ble analysert av flow cytometri. Isolasjon av hjernen-infiltrere immunceller har blitt beskrevet i en tidligere studie4. Varigheten av MCAO var 40 min. (B) kvantifisering av hjernen-infiltrere immunceller i den ipsilateral og kontralateral halvkulen, på 24 h etter MCAO/reperfusion. Dataene presenteres som betyr ± SEM; n = 4; p < 0,05.

Figure 4
Figur 4: betennelsessykdommer volumet er ikke forskjellig mellom MCAO- og MCAO/reperfusion-indusert skader. (A) representant TTC flekker av hjernen skiver fra mus, 24 timer etter MCAO. I gruppen MCAO eksperimentelle ble høyre MCA permanent avkortet med et fartøy cauterizer, mens den høyre CCA var transiently samskrevet for 40 min. I gruppen MCAO/reperfusion (MCAO/Rep) eksperimentelle var prosedyren som beskrevet i Seksjon 1 av protokollen. Varigheten av MCAO var 40 min. (B) kvantifisering av betennelsessykdommer volum. Dataene presenteres som betyr ± SEM; n = 7.

Table 1
Tabell 1: sammenligning av betennelsessykdommer volum og variasjon fra forskjellige eksperimenter. Betennelsessykdommer volumet var fast bestemt på 24 h, etter MCAO/reperfusion fra tre uavhengige eksperimenter. Varigheten av MCAO var 40 min. SD = standardavvik; n = antall mus brukes per eksperiment.

Subscription Required. Please recommend JoVE to your librarian.

Discussion

MCAO/reperfusion musemodell er en dyremodell vanligvis brukes til å etterligne forbigående iskemi i mennesker. Denne dyremodell kan brukes på transgene og knockout mus stammer å undersøke i Patofysiologien ved slag. Flere trinn i protokollen er spesielt viktig. (1) microdrill må brukes forsiktig når du oppretter et hull i skallen, upassende handling forårsaker lett blødning fra MCA. (2) MCA bør ikke bli skadet, og blødning må unngås før og etter ligatur prosedyren. Skade på MCA påvirker nivået av reperfusion i iskemiske hjerne7. MCA reperfusion status må kontrolleres etter MCAO. Den okklusjon og restaurering av blodstrøm til MCA kan analyseres ved hjelp av en laser Doppler. (3) CCA bør ikke blø under CCA isolasjon. (4) nervus vagus må ikke bli skadet under CCA isolasjonen fordi dette kan øke betennelsessykdommer størrelse og sannsynligheten for dødelighet. (5) kroppstemperaturen av musen bør opprettholdes på 36,5 ± 0,5 ° C. Hypertermi øker betennelsessykdommer størrelse og sannsynligheten for dødelighet11. Nedkjøling reduserer betennelsessykdommer volumet etter cerebral iskemi12.

Betydningen av denne MCAO/reperfusion modellen er at det kan opprette svært reproduserbar kortikale infarkter og atferdsmessige underskudd4. Sammenlignet med ulike MCAO modeller, for eksempel den hypoxic iskemiske (H / jeg) slag modell som beskrevet i et tidligere studere8, denne to-fartøy okklusjon modellen induserer en relativt liten variasjon i betennelsessykdommer volum (variasjonskoeffisienten varierte fra 0,11-0,17) (tabell 1). Alternative slag modeller, for eksempel intraluminal filament modellen, kan resultere i en uforutsigbar betennelsessykdommer volum på grunn av okklusjon og reperfusion tilstanden usikker status etter kirurgi13. Sammenlignet med de tre-fartøy MCAO modell (ligation av høyre MCA og høyre og venstre CCAs)14, innebærer den foreslåtte modellen ligation av bare to fartøy (høyre MCA og høyre CCA) å oppnå cerebral iskemi. Derfor er kortere kirurgi tid nødvendig enn i tre-fartøy MCAO modellen. Den viktigste begrensningen av denne MCAO/reperfusion modellen er at det krever craniectomy utføre MCA hemorroider. En studie viste at craniotomy fører til transcriptional endringer i hjernen15. Derfor er en humbug kontroll nødvendig for å fastslå effekten av MCAO/reperfusion på genuttrykk.

Neuronal tap i kortikale området er mindre når en lengre reperfusion varighet er ansatt. Studier har vist at MAP2-negativ området er mindre etter 7 dager etter reperfusion, sammenlignet med 2 dager reperfusion4,16. Denne utvinning effekten er imidlertid lite sannsynlig i hjernen med ischemia indusert av en intraluminal monofilament modell MCAO17,18. I tillegg kan intraluminal monofilament modell av MCAO opprettholde betennelsessykdommer størrelsen i minst 7 dager.

B6 mus har omfattende collateralization mellom den fremre arterien cerebri og MCA19. Når vi permanent avkuttet MCA i iskemiske hjernen, fant vi at betennelsessykdommer volumet ikke var signifikant forskjellig fra mus med en reperfused MCA på 24 h etter MCAO (Figur 4). Derfor foreslår vi at blodet flyte fra de fremre arteria cerebri collaterals kan kompensere for iskemi av MCA territoriet når distale MCA er permanent okkludert.

I denne studien, to-fartøy MCAO/reperfusion modellen opprettet ischemia-reperfusion skade og forårsaket perifere immunceller infiltrere iskemiske hjernen. Denne modellen kan brukes til å undersøke samspillet mellom hjernen og immunsystemet. I tillegg kan det brukes til å teste potensielle neuroprotectants eller stoffer som modulerer immunrespons etter cerebral iskemi-reperfusion.

Subscription Required. Please recommend JoVE to your librarian.

Disclosures

Forfatterne ikke avsløre.

Acknowledgments

Dette arbeidet ble støttet av departementet for vitenskap og teknologi, Taiwan (mest 106-2320-B-038-024, de fleste 105-2221-E-038-007-MY3 og mest 104-2320-B-424-001) og Taipei Medical University Hospital (107TMUH-SP-01). Dette manuskriptet ble redigert av Wallace akademiske redigering.

Materials

Name Company Catalog Number Comments
Bone rongeur Diener Friedman
Buprenorphine Sigma B-044
Cefazolin Sigma 1097603
Chloral hydrate Sigma C8383
Dissection microscope Nikon SMZ-745
Electric clippers Petpro
10% formalin Sigma F5304
Germinator dry bead sterilizer Braintree Scientific
Iris Forceps Karl Klappenecker 10 cm
Iris Scissors Diener 9 cm
Iris Scissors STR Karl Klappenecker 11 cm
Microdrill Stoelting FOREEDOM K.1070
Micro-scissors-Vannas HEISS H-4240 blade 7mm, 8 cm
Mouse brain matrix World Precision Instruments
Non-invasive blood pressure system Muromachi MK-2000ST
Operating Scissors STR Karl Klappenecker 14 cm
Physiological Monitoring System Harvard Apparatus
Razor blades Ever-Ready
Stoelting Rodent Warmers Stoelting 53810 Heating pad
Suture clip Stoelting
Tweezers IDEALTEK No.3
Vetbond 3M 15672 Surgical glue
10-0 suture UNIK NT0410
2,3,5-Triphenyltetrazolium chloride Sigma T8877

DOWNLOAD MATERIALS LIST

References

  1. Woodruff, T. M., et al. Pathophysiology, treatment, and animal and cellular models of human ischemic stroke. Molecular Neurodegeneration. 6 (1), 11 (2011).
  2. Chamorro, A., et al. The immunology of acute stroke. Nature Reviews. Neurology. 8 (7), 401-410 (2012).
  3. Engel, O., Kolodziej, S., Dirnagl, U., Prinz, V. Modeling stroke in mice - Middle cerebral artery occlusion with the filament model. Journal of Visualized Experiments. (47), e2423 (2011).
  4. Lee, G. A., et al. Interleukin 15 blockade protects the brain from cerebral ischemia-reperfusion injury. Brain, Behavior, and Immunity. 73, 562-570 (2018).
  5. Barone, F. C., Knudsen, D. J., Nelson, A. H., Feuerstein, G. Z., Willette, R. N. Mouse strain differences in susceptibility to cerebral ischemia are related to cerebral vascular anatomy. Journal of Cerebral Blood Flow and Metabolism: Official Journal of the International Society of Cerebral Blood Flow and Metabolism. 13 (4), 683-692 (1993).
  6. Kitagawa, K., et al. Cerebral ischemia after bilateral carotid artery occlusion and intraluminal suture occlusion in mice: evaluation of the patency of the posterior communicating artery. Journal of Cerebral Blood Flow and Metabolism: Official Journal of the International Society of Cerebral Blood Flow and Metabolism. 18 (5), 570-579 (1998).
  7. Wellons, J. C. 3rd, et al. A comparison of strain-related susceptibility in two murine recovery models of global cerebral ischemia. Brain Research. 868 (1), 14-21 (2000).
  8. Doyle, K. P., Fathali, N., Siddiqui, M. R., Buckwalter, M. S. Distal hypoxic stroke: a new mouse model of stroke with high throughput, low variability and a quantifiable functional deficit. Journal of Neuroscience Methods. 207 (1), 31-40 (2012).
  9. Doyle, K. P., Buckwalter, M. S. A mouse model of permanent focal ischemia: Distal middle cerebral artery occlusion. Methods in Molecular Biology. , 103-110 (2014).
  10. Wayman, C., et al. Performing Permanent Distal Middle Cerebral with Common Carotid Artery Occlusion in Aged Rats to Study Cortical Ischemia with Sustained Disability. Journal Of Visualized Experiments. (108), e53106 (2016).
  11. Noor, R., Wang, C. X., Shuaib, A. Effects of hyperthermia on infarct volume in focal embolic model of cerebral ischemia in rats. Neuroscience Letters. 349 (2), 130-132 (2003).
  12. Florian, B., et al. Long-term hypothermia reduces infarct volume in aged rats after focal ischemia. Neuroscience Letters. 438 (2), 180-185 (2008).
  13. Carmichael, S. T. Rodent models of focal stroke: size, mechanism, and purpose. NeuroRx: The Journal of the American Society for Experimental NeuroTherapeutics. 2 (3), 396-409 (2005).
  14. Lin, T. N., Te, J., Huang, H. C., Chi, S. I., Hsu, C. Y. Prolongation and enhancement of postischemic c-fos expression after fasting. Stroke. 28 (2), 412-418 (1997).
  15. Glazier, S. S., O'Rourke, D. M., Graham, D. I., Welsh, F. A. Induction of ischemic tolerance following brief focal ischemia in rat brain. Journal of Cerebral Blood Flow and Metabolism: Official Journal of the International Society of Cerebral Blood Flow and Metabolism. 14 (4), 545-553 (1994).
  16. Tachibana, M., et al. Early Reperfusion After Brain Ischemia Has Beneficial Effects Beyond Rescuing Neurons. Stroke. 48 (8), 2222-2230 (2017).
  17. Gan, Y., et al. Ischemic neurons recruit natural killer cells that accelerate brain infarction. Proceedings of the National Academy of Sciences of the United States of America. 111 (7), 2704-2709 (2014).
  18. Li, M., et al. Astrocyte-derived interleukin-15 exacerbates ischemic brain injury via propagation of cellular immunity. Proceedings of the National Academy of Sciences of the United States of America. 114 (3), E396-E405 (2017).
  19. Wang, S., Zhang, H., Dai, X., Sealock, R., Faber, J. E. Genetic architecture underlying variation in extent and remodeling of the collateral circulation. Circulation Research. 107 (4), (2010).

Tags

Medisin problemet 145 cerebral iskemi-reperfusion arteria cerebri okklusjon 2,3,5-triphenyltetrazolium chloride analysen åpen-feltet analysen betennelsessykdommer volum ImageJ
To-fartøy okklusjon musemodell av Cerebral iskemi-reperfusion
Play Video
PDF DOI DOWNLOAD MATERIALS LIST

Cite this Article

Chen, C. Y., Chen, R. J., Lee, G. A. … More

Chen, C. Y., Chen, R. J., Lee, G. A. Two-vessel Occlusion Mouse Model of Cerebral Ischemia-reperfusion. J. Vis. Exp. (145), e59078, doi:10.3791/59078 (2019).

Less
Copy Citation Download Citation Reprints and Permissions
View Video

Get cutting-edge science videos from JoVE sent straight to your inbox every month.

Waiting X
Simple Hit Counter